Establece la asociación entre la actividad homocisteina tiolactonasa de la enzima PON1 y el Síndrome metabólico. Para ello, se analizó la actividad homocisteina tiolactonasa de la PON1 en individuos con Síndrome metabólico y un grupo control. El grupo en estudio estuvo conformado por 61 individuos diagnosticados con Síndrome metabólico según la definición de la NCEP ATP III (Revisión 2005) y el grupo control está constituido por 50 individuos sin Síndrome metabólico. El análisis de la actividad homocisteina tiolactonasa de la PON1 se realizó en el suero obtenido de las muestras de sangre recolectadas de los participantes, mediante un análisis espectrofotométrico usando el sustrato γ-tiobutirolactona. En los resultados se encontró diferencias estadísticas entre los valores de actividad homocisteina tiolactonasa de la PON1 de los grupos, mostrándose mayor la actividad en el grupo con Síndrome metabólico (P <0.01). Asimismo, se halló diferencia estadística significativa entre los niveles de glucosa, triglicéridos, HDL, presión arterial sistólica y presión arterial diastólica de ambos grupos según género (P<0.05); lo contrario ocurrió en relación a la edad, peso, talla, índice de masa corporal (IMC), circunferencia de cintura, niveles de colesterol total y LDL. Además, no se encontró una asociación entre la actividad de la PON1 y los componentes del Síndrome metabólico agrupados según número. Por otra parte, no se evidenció una correlación significativa entre las características clínicas, características bioquímicas en estudio y la actividad homocisteina tiolactonasa de la PON1. De lo cual se concluye que la actividad homocisteina tiolactonasa de la PON1 se encuentra asociada con el Síndrome metabólico. Sin embargo, no se encontró asociación entre la actividad de la enzima y los componentes del Síndrome metabólico agrupados según número ni se evidenció una correlación significativa entre la actividad de la enzima con las características clínicas (edad, peso, índice de masa corporal, circunferencia de cintura, presión arterial sistólica y presión arterial diastólica) y las características bioquímicas (niveles de glucosa, colesterol, HDL-c, LDL-c y triglicéridos) en estudio. / Tesis

La infecció pel VIH ha esdevingut una malaltia crònica gràcies a la introducció del tractament antiretroviral. Tot i la disminució de la mortalitat, la incidència de complicacions metabòliques relacionades amb el tractament i la infecció adquireixen cada cop més rellevància clínica. La infecció pel VIH promou un estat pro-oxidatiu que afavoreix la mateixa replicació viral i l'aparició d'alteracions metabòliques com l'aterosclerosi o la lipodistròfia. L'aterosclerosi és reconeguda com una malaltia inflamatoria crònica. La paraoxonasa-1 (PON1) és un enzim associat a les lipoproteïnes d'alta densitat (HDL) que li confereix gran capacitat antioxidant. Tot i que el seu sustrat fisiològic encara no es coneix, s'ha estudiat el seu rol protector en diverses malaties cròniques. Per aquesta raó creiem interessant investigar la possible funció d'aquest enzim antioxidant en la evolució immunològica i virològica de la infecció pel VIH i així també en l'aparició de complicacions metabòliques com l'aterosclerosi. / HIV infection has become a chronic disease since introduction of antiretroviral treatments. Despite the decline in mortality, the incidence of metabolic complications related to treatment and the infection itself are becoming more relevant. HIV infection promotes a pro-oxidative status that favors viral replication and the emergence of the metabolic disorders such as atherosclerosis and lipodystrophy. Atherosclerosis is recognized as a chronic inflammatory disease. The paraoxonase-1 (PON1) is an enzyme bound to high-density lipoprotein (HDL), which confers high antioxidant properties. Although its physiological sustrat is not yet known, it has been studied its protective role in several chronic diseases with an increase in oxidative stress and atherosclerosis. For this reason we believe is of interest to investigate the possible role of this antioxidant enzyme in the immunological and the virological evolution of HIV infection and in the apparition of metabolic complications such as atherosclerosis.

En el presente estudio, se determinó el perfil de distribución de los genotipos y fenotipos de Paraoxonasa-1 (PON1) en 89 estudiantes de Farmacia y Bioquímica de la Universidad Nacional Mayor de San Marcos, mediante técnicas de biología molecular y bioquímicas, respectivamente. Se encontró que la actividad de PON1 tuvo una distribución unimodal y su media fue 167.01 ± 60.84 U/L. La media de la actividad arilesterasa (ArE) fue 63.44 ± 21.59 KU/L. Las frecuencias genotípicas para el polimorfismo PON1 192 (QQ, QR, RR) fueron 0.236, 0.607 y 0.157 respectivamente, mientras que para el polimorfismo PON1 –108C/T (CC, CT, TT) fueron 0.315, 0.596 y 0.09 respectivamente. En la población estudiada existe predominio de los heterocigotos QR y CT sobre los homocigotos. / In the present study, it was investigated the distribution profiles of Paraoxonase-1 (PON1) genotypes and phenotypes in 89 students of Pharmacy and Biochemistry of San Marcos University, using molecular and biochemistry techniques, respectively. It has found that the PON1 activity follows a unimodal distribution and its mean was 167.01 ± 60.84 U/L. The mean of arylesterase activity (ArE) was 63.44 ± 21.59 KU/L. The genotype frequencies to PON1 192 (QQ, QR, RR) polymorphism were 0.236, 0.607 and 0.157 respectively, while the frequencies to PON1 –108C/T (CC, CT, TT) polymorphism were 0.315, 0.596 and 0.09 respectively. In the studied population exists a predominance of the heterozygous QR and CT on the homozygous.

Publicación a texto completo no autorizada por el autor / Estima la asociación de la actividad de PON1 en sujetos que presentan enfermedades cardiometabólicas. La actividad de la enzima se determinó a través de dos sustratos; paraoxón (actividad de la paraoxonasa, según método de Eckerson) y fenilacetato (actividad de arilesterasa, según método de Zeller modificado por Kittchen). La población quedó constituida por 107 pacientes de los hospitales San José y Daniel Alcides Carrión del Callao, los cuales fueron distribuidos en 3 grupos (diabetes mellitus, hipertensión arterial y antecedentes de enfermedades cardiovasculares), y 28 individuos de Lima Metropolitana seleccionados para el grupo control. Los resultados muestran que la actividad enzimática de la PON1 fue baja en los pacientes diagnosticados con diabetes mellitus (261,97 ± 127,54 U/L) y aquellos con antecedentes de enfermedades cardiovasculares (292,08 ± 112,85 U/L) en comparación con el grupo control (312,48 ± 176,15 U/L). Por otro lado, la actividad de arilesterasa presenta correlación positiva con la actividad de la paraoxonasa en los grupos control y grupo de hipertensión arterial. Teniendo en cuenta lo anterior, los resultados de este estudio reportan que la baja actividad de paraoxonasa está relacionada con las enfermedades cardiometabólicas, tales como la diabetes mellitus y los antecedentes de enfermedades cardiovasculares (accidente cerebrovascular e infarto agudo de miocardio). / Tesis

La família de les paraoxonases (PON) comprèn 3 enzims: PON1, PON2 y PON3. En humans, PON1, el membre més estudiat, s'expressa bàsicament en el fetge i circula associada a les HDL. PON1 es un enzim polimòrfic que pot degradar des d'organofosforats fins a diferents tipus d'ésters, lactones i xenobiòtics, però la seva funció fisiològica és la d'hidrolitzar peròxids lipídics. També té una acció anti-inflamatòria, ja que pot atenuar la secreció de MCP-1, una quimioquina pro-inflamatòria. L'estrés oxidatiu i la inflamació juguen un paper fonamental en el desenvolupament de malalties hepàtiques. Tenint en compte l'efecte protector de PON1 contra l'estrés oxidatiu, seria molt probable trobar una associació entre PON1 i les hepatopaties cròniques. Objectius de la Tesi: a) investigar la presència d'alteracions en l'activitat i expressió de PON1 en hepatopaties cròniques humanes i experimentals, i estudiar els mecanismes moleculars relacionats; b) avaluar un nou assaig enzimàtic utilitzant un substrat no tòxic que mesura l'activitat lactonasa de PON1; c) estudiar l'eficàcia diagnòstica de la determinació de l'activitat PON1 en l'avaluació clínica de la malaltia hepàtica.Conclusions: 1) PON1 podria regular l'estrés oxidatiu mitjançant la degradació de lipoperòxids; la inflamació, actuant com una barrera contra la inflamació induïda per MCP-1; i l'apoptosi cel·lular, correlacionant-se amb un augment en la forma soluble del receptor FAS (sFAS) 2) L'activitat PON1 en sèrum de pacients hepatòpates podria disminuir a causa d'alteracions en la mida i composició de les HDL, i/o d'un augment en l'estrés oxidatiu 3) L'expressió hepàtica i sèrica de PON1 augmentarien a causa d'una disminució en la síntesi d'HDL, i d'una disminució de la proteòlisi cel·lular 4) La determinació de l'activitat lactonasa de PON1 en sèrum, utilitzant el substrat TBBL, és un mètode fiable, no tòxic i semi-automàtic, i està menys influenciada pels polimorfismes genètics que l'activitat esterasa utilitzant paraoxó 5) La determinació de l'actividad PON1 sèrica té una elevada eficàcia diagnòstica i pot ser un útil complement a les proves de valoració de la funció hepàtica que s'utilitzen en la pràctica clínica. / The family of serum paraoxonases (PON) consist of three enzymes: PON1 (the most investigated member), PON2 and PON3. In humans, PON1 expression is mainly found in the liver, and circulates tightly bound to HDL. PON1 is a polymorphic enzyme that is able to degradate organophosphates and different type of esters, lactones and xenobiotics, but its physiological function is to hydrolise lipid peroxides. It has also an antiinflamatoy role since it can attenuate MCP-1 (a proinflamatory chemokine) secretion. Oxidative stress and inflammation play key roles in the development of liver diseases. Since PON1 has a protective effect against oxidative stress, it could be plausible to find an association between PON1 and chronic hepatic diseases.Aims of the Thesis: a) to investigate the presence of alterations in PON1 activity and expression in human and experimental chronic hepatic diseases, and to study the molecular mechanisms involved; b) to evaluate a new enzymatic assay using a non toxic substrate that measures PON1 lactonase activity; c) to assess the diagnostic accuracy of the measurement of serum PON1 activity in the clinic evaluation of liver diseases.Conclusions: 1) PON1 could regulate oxidative stress by lipid peroxides degradation; inflammation, by acting as a barrier against MCP-1 induced inflammation; and cell apoptosis, by its relationship with the increase of sFAS, the soluble form of FAS receptor 2) Serum PON1 activity in patients with chronic liver disease could decreased as a consequence of alterations in the size and composition of HDL, and/or an increase of oxidative stress 3) Serum and hepatic PON1 expression would increase because of the decrease in HDL synthesis, and the decrease of cellular proteolysis 4) Serum PON1 lactonase activity measurement, using TBBL as a susbtrate, is a reliable, non-toxic, semi-automated assay, and is less influenced by genetic polymorphisms than PON1 esterase activity using paraoxon 5) Serum PON1 activity measurement has a high diagnostic accuracy and may contribute significantly to the evaluation of liver function in the clinical setting.

En el presente estudio, se determinó el perfil de distribución de los genotipos y fenotipos de Paraoxonasa-1 (PON1) en 89 estudiantes de Farmacia y Bioquímica de la Universidad Nacional Mayor de San Marcos, mediante técnicas de biología molecular y bioquímicas, respectivamente. Se encontró que la actividad de PON1 tuvo una distribución unimodal y su media fue 167.01 ± 60.84 U/L. La media de la actividad arilesterasa (ArE) fue 63.44 ± 21.59 KU/L. Las frecuencias genotípicas para el polimorfismo PON1 192 (QQ, QR, RR) fueron 0.236, 0.607 y 0.157 respectivamente, mientras que para el polimorfismo PON1 –108C/T (CC, CT, TT) fueron 0.315, 0.596 y 0.09 respectivamente. En la población estudiada existe predominio de los heterocigotos QR y CT sobre los homocigotos. / In the present study, it was investigated the distribution profiles of Paraoxonase-1 (PON1) genotypes and phenotypes in 89 students of Pharmacy and Biochemistry of San Marcos University, using molecular and biochemistry techniques, respectively. It has found that the PON1 activity follows a unimodal distribution and its mean was 167.01 ± 60.84 U/L. The mean of arylesterase activity (ArE) was 63.44 ± 21.59 KU/L. The genotype frequencies to PON1 192 (QQ, QR, RR) polymorphism were 0.236, 0.607 and 0.157 respectively, while the frequencies to PON1 –108C/T (CC, CT, TT) polymorphism were 0.315, 0.596 and 0.09 respectively. In the studied population exists a predominance of the heterozygous QR and CT on the homozygous.

Publicación a texto completo no autorizada por el autor / Determina la distribución de los polimorfismos PON1 Q192 R en una en una población de Junín a 4105 m de altitud. Así también señala la distribución de los fenotipos y la actividad de la enzima. La distribución de los genotipos para PON 1192 es de QQ 13,9%; QR 45,6% y RR 40,5 y el alelo más frecuente es de 192R 63%. La distribución de los fenotipos para PON 1 Q192R es, AA 20,5%; AB 49,1% y BB 30,4 %. Las actividades paraoxonasa basal y estimulada son significativamente diferentes entre los fenotipos y genotipos, pero no hay diferencia en la actividad esterasa entre estos grupos. La alta prevalencia del alelo PON1 192R encontrado, indica un papel importante en el desarrollo de enfermedades cardiometabólicos en estas poblaciones, por lo que se requiere más estudios en diferentes poblaciones, de las interacciones gen-medio ambiente que pueda modular la expresión de la enzima. / Tesis

Background: Oxidative stress is supposed to be implicated in the pathogenesis of several diseases which are connected with increased formation of reactive oxygen and nitrogen species (RONS). Oxidative stress could play an important role in the pathogenesis of inflammation and sepsis, acute and chronic pancreatitis or in the development of cancer. Organisms are protected against RONS from antioxidant system that is composed of antioxidant enzymes and non-enzymatic antioxidants. To the most important antioxidant enzymes belong superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT), glutathione peroxidase, glutathione reductase and paraoxonase (PON). The aim of this Doctoral Thesis was to investigate the behaviour of three of these antioxidant enzymes - CuZnSOD, CAT and PON1 in different pathophysiological states. Materials and methods: The activities of CuZnSOD, CAT and PON1 were measured in six different pathophysiological states. Forty patients with metabolic syndrome (MetS), 35 women with depressive disorder (DD), 30 septic patients (SP), 50 patients with pancreatic cancer (PC), 50 patients with chronic pancreatitis (CP) and 13 patients with acute pancreatitis (AP) were included in different studies together with sex- and age-matched healthy controls (CON). Patients with AP and SP were observed in the course...