Orientador: Paulo Cesar Giraldo / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-07-21T05:00:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 RibeiroFilho_AyrtonDaniel_M.pdf: 2327637 bytes, checksum: c7688983b0dab88c16e81cc5e8768623 (MD5) Previous issue date: 1996 / Resumo: O recente aumento mundial da infecção feminina pelo HIV suscitou a necessidade de novas linhas de estudo da transmissão do vírus onde vários fatores parecem interferir com a infectividade do agente. Particularmente na transmissão heterossexual, acredita-se que modificações do ecossistema, e conseqüentemente da flora vaginal, poderiam exercer papel preponderante. Para analisar as características clínicas e microbiológicas do conteúdo vaginal destas mulheres, desenvolveu-se, no CAISM, um estudo clínico analítico controlado com 75 mulheres soronegativas para o HIV, sob risco de tal infecção, e 77 mulheres HIV soropositivas. Avaliando-se o tipo de flora microbiana vaginal, a intensidade do processo inflamatório e a freqüência de infecções genitais, encontrou-se que mulheres com AIDS, apresentaram um maior percentual global de corrimento vaginal, de flora vaginal alterada, de processo inflamatório acentuado e de tricomoníase vaginal. Estudou-se também o grau de acerto do diagnóstico clínico do corrimento vaginal evidenciando-se um maior índice de acerto clínico dos corrimentos causados por Candida sp quanto pior o estádio clínico imunológico da paciente. Com estas observações, concluiu-se que o ecossistema vaginal de mulheres HIV soropositivas sem AIDS é muito semelhante ao observado em mulheres HIV soronegativas sob risco. Por outro lado, ambos apresentaram diferenças significativas do ecossistema vaginal quando comparadas às mulheres com AIDS. Isso leva a crer que as modificações da flora microbiana vaginal de mulheres imunossuprimidas, usuárias de antimicrobianos, poderiam facilitar a transmissibilidade heterossexual do HIV uma vez que o processo inflamatório carreia para esta região um maior aporte de células alvo da infecção pelo HIV e conseqüentemente maior quantidade de partículas virais. Além disso, o baixo índice de acerto no diagnóstico clínico sugere também que não se façam tratamentos antimicrobianos indiscriminados de vulvovaginites diagnosticadas apenas clinicamente, pois o mesmo poderia agravar tal situação / Abstract: The recent worldwide increase of HIV infection among women has given rise to the necessity of new researches into the transmission of the virus where various factors seem to interfere with the infectiousness of the agent. Especially in heterosexual transmission, it is believed that modifications in the ecosystem and, consequently, in vaginal flora could exercise a preponderant role to be able to analyse the clinical and microbiological characteristics of vaginal content among these women, a clinically controlled analytical study of 75 righ risk HIV seronegative women and 77 HIV seropositive women was carried out at the CAISM. By evaluating the type of vaginal flora, the intensity of the inflammatory process and the frequency of genital infections women with AIDS where observed to present a greater overall percentage of vaginal discharge, altered vaginal flora, acute inflammation and vaginal trichomoniasis. Also, the level of correction in the clinical diagnosis of vaginal discharge was studied and a greater degree of clinically correct diagnosis of candidiasis was observed as the patient's clinical immunological state worsened. These observations led to the conclusion that the vaginal ecosystem of HIV seropositive women without AIDS is very similar to that observed in high risk HIV seronegative women On the other hand both presented significant differences in the vaginal ecosystem when compared to women with AIDS. This leads to the belief that modifications of vaginal microbian flora in immune-suppressed women, who use antimicrobials, could facilitate the heterosexual transmission of HIV, as the inflammatory process carries a great amount of target cells for HIV infection therefore a greater number of virus particals. Apart from this, the difficulties of correct clinical diagnosis suggest that indiscriminate antimicrobial treatments of vulvovaginitis, only clinically diagnosed, should also not be applied, since this could aggravate such a situation / Mestrado / Tocoginecologia / Mestre em Ciências Médicas

Orientador: Jose Francisco Hofling / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-14T03:08:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Assis_LedaRodriguesde_M.pdf: 1696956 bytes, checksum: 22d1fd75567a352157baa92029be0c72 (MD5) Previous issue date: 1982 / Resumo: Com o objetivo de contribuir para a identificação de estreptococos da cavidade oral, particularmente relacionados com a cárie dentária, antissoros obtidos para S. sanguis, S. mutans, S. salivarius, S. mitis e S. faecalis, foram utilizados nas reações serológicas em reação com antígenos de suspensões bacterianas desses microorganismos. Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Straisn of cariogenic Streptococci were used to obtain antisera against these species in order to be useful for the identification of oral microorganisms. These antisera gave different patters in double diffusion serological tests. Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Mestrado / Microbiologia e Imunologia / Mestre em Biologia e Patologia Buco-Dental

Submitted by Pedro Barros (pedro.silvabarros@ufpe.br) on 2018-09-03T21:06:32Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Heloiza Maria da Silva Oliveira.pdf: 1343350 bytes, checksum: bede1d8395fba6bf1d4dda9b86a7e0b1 (MD5) / Approved for entry into archive by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-09-26T20:46:11Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Heloiza Maria da Silva Oliveira.pdf: 1343350 bytes, checksum: bede1d8395fba6bf1d4dda9b86a7e0b1 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-09-26T20:46:11Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Heloiza Maria da Silva Oliveira.pdf: 1343350 bytes, checksum: bede1d8395fba6bf1d4dda9b86a7e0b1 (MD5) Previous issue date: 2011-02-24 / FACEPE / Infecções fúngicas em imunossuprimidos aumentaram significativamente nas últimas décadas, sendo uma das principais causas de morbidade e mortalidade. Fatores de virulência, como produção de enzimas pelos agentes infecciosos, contribui no dano causado aos pacientes. Neste contexto, os objetivos deste trabalho foram detectar, isolar e identificar fungos em amostras clínicas, principalmente das vias respiratórias, de pacientes com pneumopatias crônicas, internos no Setor de Pneumologia do Hospital Geral Otávio de Freitas – PE e caracterizar os agentes quanto à patogenicidade. Foram realizadas coletas em 137 pacientes, sendo obtidas 327 (92,2%) amostras de escarro, 20 (5,6%) de lavado bronco-alveolar, quatro (1,1%) de secreção da cavidade oral e quatro (1,1%) de fragmentos de tecido pulmonar. Em 10 pacientes (7,29%), foi diagnosticada aspergilose pulmonar, em quatro, (2,9%) colonização causada por espécies de Candida e Geotrichum clavatum, em três (2,1%), colonização por leveduras associada à candidíase oral, em um, (0,7%) feohifomicose pulmonar e em um (0,7%), candidíase oral. Foram obtidos 21 isolados, sendo oito (38,09%) de Aspergillus fumigatus, um (4,76%) de A. flavus, oito (38,09%) de C. albicans, dois (9,54%) de C. tropicalis, um (4,76%) de G. clavatum e um fungo filamentoso demáceo, Cladophialophora devriesii (4,76%). As culturas apresentaram diferentes perfis em relação a capacidade elastinolítica, proteolítica e fosfolipásica, não permitindo estabelecer relação entre os danos ao hospedeiro e a detecção enzimática. O diagnóstico diferencial precoce e preciso é imprescindível para terapêutica adequada e bom prognóstico do paciente. / Opportunistic fungal infections have increased significantly in recent decades, and it is a major cause of morbidity and mortality. Virulence factors, such as enzyme production, contributes to the damage caused to patients. In this context, the objectives were to detect, isolate and identify the fungi occurring in clinical samples, mainly respiratory tract of patients with chronic respiratory disorders, inmates in Pneumology sector of the Hospital Geral Otávio de Freitas - PE and to characterize them in respect to pathogenicity. From the 137 patients collected, 327 (92.2%) were obtained by sputum samples, 20 (5.6%) from bronchoalveolar lavage, four (1.1%) from secretion of the oral cavity and four (1, 1%) from of fragments of lung tissue. In 10 patients (7.29%), it was diagnosed pulmonary aspergillosis, in four patients (2.9%) presented a yeast colonization caused by Candida species and Geotrichum clavatum, three patients (2.1%) presented colonization by yeasts associated with oral candidiasis, one (0.7%) had pulmonary phaeohyphomycosis and one (0.7%), oral candidiasis. From 21 isolates obtained, eight (38.09%) were identified as Aspergillus fumigatus, one (4.76%) isolate as A. flavus, eight (38.09%) as C. albicans, two (9.54%) as C. tropicalis, one (4.76%) G. clavatum and a dematiaceous filamentous fungus, Cladophialophora devriesii (4.76%). The cultures presented different profiles in relation to their capacities to produce elastinolytic, proteolytic and phospholipolytic enzymes, which did not albw to establish a correlation between the host damage and enzymatic detection. The early and accurate differential diagnosis is imperative for appropriate therapy and prognosis for the patients.

Orientador : Octavio Henrique de Oliveira Pavan / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-18T21:50:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Araujo_EdsonFreitasde_M.pdf: 2895382 bytes, checksum: 92e5f3324d91725a4c06a085b86a1d48 (MD5) Previous issue date: 1993 / Mestrado / Genetica / Mestre em Ciências Biológicas

Orientador: Eduardo Bagagli / Resumo: O reino fungi é constituído por amplos grupos de organismos com reconhecida importância ecológica, industrial ou médica. O solo é um importante reservatório para microrganismos, especialmente fungos, que atuam na decomposição e reciclagem de nutrientes ou se associam com animais e plantas em relações simbióticas ou causando patogenias. Ainda são poucos os estudos relacionados a estrutura do micobioma, sendo rasa a compreensão da diversidade e ecologia de fungos. A compreensão dos padrões de distribuição da diversidade fúngica é essencial para mensurar as mudanças naturais e antrópicas relacionadas a estas comunidades, tal como entender a ecologia e epidemiologia dos fungos considerados patogênicos. Neste trabalho caracterizamos a diversidade fúngica das amostras de solo em diferentes ambientes no município de Botucatu (Brasil), descrevendo a estrutura da comunidade fúngica e mensurando a prevalência dos fungos patogênicos, mediante a técnica de Sequenciamento de Nova Geração (NGS). No sequenciamento mediante plataforma Illumina, analisamos 44 amostras provenientes de 8 ambientes diferentes, em dois períodos (outono e primavera), incluindo tocas de tatus, corujas e outros ambientes relacionados. A riqueza e diversidade variaram entre os ambientes, sendo favorecido nas amostras ambientais da floresta sazonal semidecidual e das tocas de tatus, os quais possuem uma maior cobertura vegetal. Ainda, ambientes mais antropizados, com menores efeitos de cobertura vegetal, como edifício... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Mestre

Em 2015, de acordo com a Organização Mundial da Saúde, o total de mortes na população humana foi de 52,5 milhões de pessoas, em que as doenças infecciosas mais especificamente, infecções respiratórias - aparecem em terceiro lugar no ranking de causas de morte. No total foram 3,5 milhões de mortes ou 6,7% do total, demonstrando um aumento significativo quando comparado com a pesquisa anterior, realizada em 2011, na qual as doenças infecciosas foram responsáveis por 3,2 milhões ou 5,9% do total. Das doenças infecciosas, podemos destacar a Malária, HIV/AIDS, Hepatite, Tuberculose - que aparece em 8º lugar neste mesmo ranking, e a Hanseníase - que é uma importante preocupação no Brasil. A tuberculose, causada pelo Mycobacterium tuberculosis sendo uma das principais causas de morte por doenças infecciosas na população humana, já apresenta cepas resistentes ao tratamento denominadas Cepas multirresistentes (MDR) e Cepas extremamente resistentes (XDR). Enquanto que a hanseníase, causada pelo Mycobacterium leprae, apesar de não ser letal, causa a invalidez dos portadores e o Brasil possui o segundo maior número de casos desta doença. Outro patógeno de importância médica é a Pseudomonas aeruginosa que causa sérias doenças em pacientes com baixa imunidade, principalmente aqueles em hospitais em especial, pacientes com queimaduras. A via do Folato tem despertado a atenção das indústrias farmacêuticas para o desenvolvimento de novos fármacos, uma vez que está via oferece seletividade para estes novos inibidores. Isso se deve ao fato de que o tetrahidrofolato é um componente essencial para os organismos procariotos, e apenas eles, precisam realizar a produção de novo desta substância, enquanto que os eucariotos, o adquirem através da alimentação. Entretanto, o surgimento de cepas resistentes não só reforça a necessidade do desenvolvimento de novos fármacos, mas também a compreensão dos mecanismos de resistências destas cepas. O presente trabalho tem como objetivo obter informações biofísicas e estruturais de três enzimas da via do folato, a 7,8 dihidroneopterina aldolase, dihidropteroato sintase e dihidrofolato redutase. Além disso, esse trabalho teve como objetivo a compreensão do mecanismo de resistência através da indução de mutações nos códons 53 e 55 na enzima dihidropteroato sintase (DHPS), caracterização estrutural preliminar da enzima DHNA e estudos estruturais da enzima DHFR em complexo com cicloguanil. Assim, neste trabalho foi realizado a clonagem gênica da região codificando do gene para a enzima DHNA e expressão da proteína recombinante, purificada e utilizada em ensaios biofísicos. Além disso a mutagênese sítio dirigida foi feita com o intuito de se produzir DHPSs mutantes (T70S e P72R), na qual foram utilizadas nos ensaios de ITC, fluorescência, e cristalização, o que possibilitou demonstrar que a resistência de M. leprae às sulfas pode ser devido a troca de uma prolina por uma arginina na posição 72. Por fim, para DHFR, foi possível obter sua estrutura em complexo com cicloguanil que possibilitou avaliar as diferenças estruturais entre a forma aberta e fechada desta enzima. Além disso, confirmamos que o grupo nicotidamida tem essencial importância para a interação com os ligantes. / In 2015, according to the World Health Organization, the total number of deaths in the human population was 52.5 million people, in which infectious diseases - specifically, respiratory infections - appear third in the ranking of causes of death. In total, 3.5 million deaths or 6.7% of the total occurred, showing a significant increase when compared to the previous survey conducted in 2011, in which infectious diseases accounted for 3.2 million or 5.9% of the total total. Of the infectious diseases, we can highlight Malaria, HIV / AIDS, Hepatitis, Tuberculosis - which appears in 8th place in this same ranking, and Leprosy - which is an important concern in Brazil. Tuberculosis, caused by Mycobacterium tuberculosis is one of the main causes of death due to infectious diseases in the human population, and already presents resistant strains to the treatment - denominated multiresistant strains (MDR) and extremely resistant strains (XDR). While leprosy, caused by Mycobacterium leprae, despite not lethal, causes the invalidity of patients and Brazil has the second largest number of cases for this disease. Another pathogen of medical importance is Pseudomonas aeruginosa, which causes serious illness in patients with low immunity, especially those in hospitals - especially patients with burns. The Folate pathway has brought the attention of the pharmaceutical industries to the development of new drugs, since this pathway offers selectivity for these new inhibitors. This is since Tetrahydrofolate is an essential component for prokaryote organisms, and only they, need to perform the new production of this cofactor, while Eukaryotes acquire it through food. However, the emergence of resistant strains, not only reinforces the need for the development of new drugs, but also the understanding of the mechanisms of resistance of these strains. The aim of the present work was to obtain biophysical and structural information of three folate pathway enzymes, 7,8 dihydroneopterin aldolase, Dihydropteroate synthase and Dihydrofolate reductase. In addition, this work aimed to understand the mechanism of resistance through the induction of mutations at the codons 53 and 55 in the enzyme dihydropteroate synthase (DHPS), preliminary structurally characterize the DHNA enzyme and structurally study the enzyme DHFR in complex with cycloguanil. Thus, the cloning of the coding region of the gene for DHNA and the expression of the recombinant protein, purification and biophysical characterization were performed in this work. In addition, site-directed mutagenesis was performed aiming of producing mutant DHPSs (T70S and P72R), which were used in ITC, fluorescence, and crystallization tests to demonstrate that M. lepreae resistance to sulfas may be due to the exchange of a proline to an arginine at position 72. Finally, for DHFR, it was possible to obtain its structure in complex with cycloguanil which made it possible to evaluate the structural differences between the open and closed conformation of this enzyme. In addition, we have confirmed that the nicotidamide group has a crucial importance for interaction with the ligands.

Submitted by FERNANDA DA SILVA VON PORSTER (fdsvporster@univates.br) on 2016-07-28T19:15:39Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) 2016AndreaWolfDiemer.pdf: 7026928 bytes, checksum: 2b39a82b98f08b5661a740f008264243 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Paula Lisboa Monteiro (monteiro@univates.br) on 2016-08-30T12:00:31Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) 2016AndreaWolfDiemer.pdf: 7026928 bytes, checksum: 2b39a82b98f08b5661a740f008264243 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-30T12:00:31Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) 2016AndreaWolfDiemer.pdf: 7026928 bytes, checksum: 2b39a82b98f08b5661a740f008264243 (MD5) Previous issue date: 2016-07 / A indústria de produtos cárneos, necessita produtos que possuem uma demanda alta de vendas, porém, o consumidor, em busca de uma vida mais saudável está exigindo produtos com praticidade, qualidade, segurança e que estes sejam nutritivos. Um dos ingredientes utilizados para a fabricação de produtos a base de carne é o nitrito. Este melhora a coloração, realça o sabor, impede a oxidação lipídica e é um importante agente bactericida na indústria de alimentos. Porém, o nitrito, em concentrações elevadas pode ser carcinogênico. Levando isto em consideração o objetivo deste trabalho é avaliar a ação antimicrobiana de extrato aquoso e óleo essencial de alecrim (Rosmarinus officinalis) e gengibre (Zingiber officinale) frente a Escherichia coli e Staphylococcus aureus em carne mecanicamente separada de frango (CMS).Realizou-­se as análise da CIM e CBM sendo que para E. coli utilizando o extrato aquoso de alecrim verificou-­se, uma CIM de 5,0 mg/mL e CBM >20 mg/mL, enquanto o extrato aquoso de gengibre uma CIM de 20 mg/mL e CBM >20 mg/mL. Para o óleo essencial de alecrim constatou-­se uma CIM de 1,25 mg/mL e CBM de 2,5 mg/mL, enquanto o óleo de gengibre uma CIM de 1,25 mg/mL e CBM de 5,0 mg/mL. Para S. aureus utilizando o extrato aquoso de alecrim, obteve-­se uma CIM e CBM de 5,0 mg/mL, enquanto o extrato aquoso de gengibre uma CIM e CBM de 20 mg/mL. Para o óleo essencial de alecrim constatou-­ se uma CIM de 0,625 mg/mL e CBM de 1,25 mg/mL, enquanto o óleo de gengibre uma CIM de 1,25 mg/mL e CBM de 2,5 mg/mL. A partir destes resultados pode-­se dizer que os mesmos demonstram-­se promissores em relação a ação bactericida e bacteriostática. Em posse dos resultados da CIM e CBM, descartou-­se o uso dos extratos aquosos, em função da baixa atividade detectada na CIM e CBM, então seguiu-­se os experimentos somente com os óleos essenciais, em seguida, realizou-­ se as análises de contagem de colônias (UFC) das amostras. Para estas análises verificou-­se que o óleo de alecrim e gengibre frente as bactérias Escherichia coli (ATCC 25922) e Staphylococcus aureus (ATCC 6538P), não apresentaram efeito bacteriostático e nem bactericida. Diante de todos os resultados constatou-­se que a CIM e CBM não podem ser utilizados como parâmetro microbiológico para matrizes cárneas, pois o comportamento bactericida e bacteriostáticos não se equivaleram, isso para as condições dos experimentos realizados nesta pesquisa. / The industry of meat products, you need products that have a high demand for sales, however, consumers in search of a healthier life is demanding products with convenience, quality, safety and they are nutritious. One of the ingredients used for the manufacture of meat products is nitrite. This improves the color, enhance flavor, prevent lipid oxidation and is an important bactericidal agent in the food industry. However, the nitrite in high concentrations may be carcinogenic. Taking this into account the objective of this study is to evaluate the antimicrobial activity of aqueous extract and essential oil of rosemary (Rosmarinus officinalis) and ginger (Zingiber officinale) against Escherichia coli and Staphylococcus aureus in mechanically deboned chicken meat (CMS). It was performed the analysis of MIC and MBC where in E. coli using the aqueous extract of rosemary was found a MIC of 5.0 mg/mL and MBC> 20 mg/mL, while the aqueous extract of ginger a 20 MIC mg/mL and MBC> 20 mg/mL. For rosemary essential oil found to be a MIC of 1.25 mg/mL and MBC of 2.5 mg/mL, where as the MIC one ginger oil 1.25 mg/mL and CBM 5.0 mg/mL. For S. aureus using the aqueous extract of rosemary, obtained an MIC and MBC of 5.0 mg/mL while the aqueous extract of ginger one MIC and MBC 20 mg/mL. For rosemary essential oil found to be a MIC of 0.625 mg/mL and MBC of 1.25 mg/mL, where as the MIC one ginger oil 1.25 mg/mL and MBC of 2.5 mg/mL. From these results it can be said that they show promise in relation to bactericidal and bacteriostatic action. In possession of the results of MIC and MBC, was discarded the use of aqueous extracts, due to the low activity detected in MIC and MBC, then the experiments followed only with essential oils, then was held the analyzes of colony counts (CFU) of the samples. For this analysis it was found that rosemary oil and ginger front bacteria Escherichia coli (ATCC 25922) and Staphylococcus aureus (ATCC 6538P), and showed no bacteriostatic or bactericidal effect. Before all the results it was found that the MIC and MBC can not be used as microbiological parameter to cárneas arrays, because the bactericidal and bacteriostatic behavior is not equaled, that for the conditions of the experiments in this study.

Fungos filamentosos com capacidade de produzir micotoxinas podem estar presentes em alimentos, desde o cultivo até o produto após industrialização. Devido a isso, estratégias para controlar o crescimento fúngico devem ser investigadas, a fim de evitar o desenvolvimento desses microrganismos, bem como a produção de suas toxinas nos alimentos. Neste trabalho, duas abordagens para o controle de fungos toxigênicos foram avaliadas. A primeira estratégia foi a utilização de bactérias provenientes de diferentes ambientes aquáticos, sendo que 10 linhagens de Bacillus spp. e a linhagem Pseudomonas sp. 4B foram testadas quanto à influência sobre os parâmetros de crescimento (taxas de crescimento micelial, esporulação e germinação de esporos) de fungos toxigênicos (Aspergillus e Penicillium) e formação de micotoxinas. Todas as bactérias foram capazes de inibir o crescimento dos fungos em meio de cultura, apresentando halos de inibição variando de 1,0 até 15,7 mm. Bacillus sp. P11 apresentou resultados mais expressivos em relação às demais linhagens do gênero Bacillus com maiores valores de redução na maioria dos parâmetros de crescimento. Além disso, Bacillus sp. P11 e Pseudomonas sp. 4B apresentaram efeito sobre as taxas de crescimento micelial, esporulação e germinação de esporos, com níveis de redução acima de 43,3, 32,1 e 84,1% respectivamente. Mesmo assim, as demais linhagens também apresentaram resultados satisfatórios sobre esses parâmetros. Estas bactérias também reduziram a síntese de aflatoxina B1 e ocratoxina A em mais de 94 e 63%, respectivamente, quando cultivadas simultaneamente com os fungos produtores de cada micotoxina. Adicionalmente, a capacidade de Bacillus sp. P11 em produzir os lipopeptídeos iturina A (167,9 mg/mL de extrato butanólico) e surfactina (361,9 mg/mL de extrato butanólico) foi confirmada. Estes compostos podem ter contribuído para a atividade antifúngica desta bactéria. A segunda estratégia investigada neste estudo para controlar o desenvolvimento de fungos toxigênicos foi o emprego de nanofibras de poli-ɛ-caprolactona (PCL) incorporadas com cetoconazol e natamicina como material antimicrobiano. Nesta abordagem, as nanofibras foram produzidas pela técnica de eletrofiação e posteriormente caracterizadas e avaliadas quanto ao seu potencial antifúngico. Nanofibras funcionalizadas com cetoconazol ou natamicina apresentaram atividade antifúngica contra os isolados toxigênicos uma vez que zonas de inibição variando de 6 a 44 mm foram observadas. Além disso, as análises de microscopia eletrônica e espectroscopia demonstraram que a incorporação dos antifúngicos não altera de forma expressiva as principais características das nanofibras. Também foi possível verificar a capacidade de liberação controlada dos antifúngicos durante 72 h de contato das nanofibras com diferentes soluções simulantes. Valores próximos a 80 e 45 μg/mL de cetoconazol e natamicina, respectivamente, foram observados em solução de Tween 20 (5%). Portanto, o processo de eletrofiação foi capaz de agregar propriedades antifúngicas às nanofibras de PCL. Os resultados demonstraram que as bactérias e os nanomateriais investigados neste estudo são promissores para o controle de fungos toxigênicos e produção de micotoxinas. / Filamentous fungi that have the potential to produce mycotoxins may be present in food, from cultivation to after industrialization. Therefore, several strategies to control fungal growth must be investigated in order to avoid the development of these microorganisms and the production of their toxins in food. In this work, two approaches to toxigenic fungi control were evaluated. The first one was the use of bacteria from different aquatic environments as biocontrol agents in which 10 Bacillus spp. strains and the Pseudomonas sp. 4B strain were tested in relation to the effect on growth parameters (mycelial growth, sporulation and spore germination rates) of toxigenic fungi (Aspergillus and Penicillium) and mycotoxin formation. All bacteria were able to inhibit the fungal growth in culture medium with inhibition zones ranging from 1.0 to 15.7 mm. It was also observed that Bacillus sp. P11 had better results compared to other Bacillus strains with larger reduction values in most of growth parameters. Furthermore, Bacillus sp. P11 and Pseudomonas sp. 4B exhibited effect on mycelial growth, sporulation and spore germination rates with reduction values above of 43.3, 32.1 and 84.1%, respectively. Even so, the other strains also showed satisfactory results on these parameters. Finally, these bacteria reduced the synthesis of aflatoxin B1 and ochratoxin A at levels above 94 and 63%, respectively, when co-cultivated with each mycotoxin producing fungi. Additionally, the ability of Bacillus sp. P11 to produce lipopeptides such as iturin A (167.9 mg/ml of butanolic extract) and surfactin (361.9 mg/ml of butanolic extract) was confirmed. These compounds may have contributed to antifungal activity of this bacterium. The second investigation of this work in order to control the growth of toxigenic fungi was the use of poly-ε-caprolactone nanofibers incorporated with ketoconazole and natamycin as antimicrobial material. In this approach, nanofibers were produced by the electrospinning technique and subsequently characterized and evaluated for their antifungal potential. Both nanofibers functionalized with ketoconazole and natamycin showed antifungal activity against toxigenic isolates since inhibitory zones ranging from 6 to 44 mm were observed. In addition, scanning electron microscopy and infrared spectroscopy analysis showed that the antifungals incorporation does not change the characteristics of nanofibers. It was also possible to verify the ability of controlled drug release during 72 h of nanofibers contact with different simulants solutions. Values near 80 and 45 μg/ml of ketoconazole and natamycin, respectively, were observed in the solution containing 5% Tween 20. Therefore, the electrospinning process was able to provide antifungal properties to the nanofibers. The results showed that bacteria and nanomaterials investigated in this study are promising for developing control strategies of toxigenic fungi and mycotoxin production.

Submitted by Márcio Ropke (ropke13marcio@gmail.com) on 2017-06-19T11:47:46Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Avaliação do Efeito Antifúngico de Fixadores de Dentaduras Modificados pelo.pdf: 1806073 bytes, checksum: 0b5aa896a1b70dd68b4d7fd54819230d (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-19T11:47:46Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Avaliação do Efeito Antifúngico de Fixadores de Dentaduras Modificados pelo.pdf: 1806073 bytes, checksum: 0b5aa896a1b70dd68b4d7fd54819230d (MD5) Previous issue date: 2015-04-22 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / O uso de próteses totais convencionais configura-se como um importante método de reabilitação bucal devido principalmente a vantagem econômica, sendo a principal queixa quanto ao seu uso a falta de retenção e estabilidade. A fim de melhorar essas características existem no mercado produtos com propriedades adesivas chamados de fixadores de dentadura. O principio de ação desse material resume-se na absorção de líquidos do meio, aumento da viscosidade e aumento da adesividade a mucosa. O presente trabalho foi dividido em três artigos. O artigo 1 objetivou avaliar o estado da técnica e o estado da arte através de revisão sistematizada em banco de patentes e de artigos referentes a fixadores de dentaduras. Para o monitoramento do estado da técnica e da arte, foi realizada uma pesquisa bibliográfica de estudos publicados entre 1960 e 2014, em sete bases de dados MEDLINE ( PubMed), Web of Science , Lilacs , IBECS , Biblioteca Cochrane , Scielo e Scopus . Além disso, os seguintes bancos de dados de patentes foram rastreados: USPTO , EPO , JPO , INPI , Derwent Innovations Index, Patentscope e Questel Orbit . Os dados foram tabulados e analisados pelo Microsoft Office Excel 2013 software e Questel Orbit. Um total de 54 artigos e patentes 78 foram incluídos na análise referente ao monitoramento bibliográfico e tecnológico. Os estudos mais predominantes foram realizados in vivo (n=30), e os tipos de adesivos mais estudados foram em creme ou pó (n=14). Os avanços recentes de tais materiais têm sido mais relacionados com a apresentação comercial do que com os efeitos adicionais de adesivos para próteses dentárias. O artigo 2 objetivou avaliar uma nova metodologia confiável para o teste de adesividade dos fixadores de dentadura frente às variáveis como: meio (saliva artificial, saliva natural e água destilada) e método (imersão e molhamento). Para a validação da metodologia confiável de adesividade dos fixadores este foi definido usando um planejamento experimental com fatores fixos e variáveis. Foi utilizado para tal proposito uma maquina de ensaios universais operando com célula de carga de 100 N e velocidade de 1 mm/min. O método de ensaio estabelecido mostrou que o meio em que o teste é realizado, saliva artificial, água e saliva natural e o método utilizado, imersão ou molhamento, foram determinantes para o resultado de adesividade dos fixadores de dentadura. O artigo 3 objetivou caracterizar e avaliar o efeito do acréscimo de um antifúngico alternativo, derivado de pirazois, em fixadores de dentadura comerciais em três diferentes apresentações (pó, pasta e creme). Os fixadores de dentadura comerciais foram modificados com a inclusão de antifúngicos (Nistatina e Pirazol) em três concentrações por porcentagem em massa diferentes (30%; 3% e 0.3%). A ação antifúngica foi determinada através dos testes de disco difusão e contato direto. O teste de contato direto foi mensurado em 1, 4, 8 e 12 horas. A atividade citotóxica foi avaliada em fibroblastos de camundongos (NIH/3T3) pelo ensaio colorimétrico de redução do MTT. Os resultados obtidos demonstraram que as inclusões dos antifúngicos não afetam a adesividade dos fixadores de dentadura (p>0,05). O teste de disco difusão e de contato direto demonstraram que a inclusão de Nistatina e de Pirazol nos fixadores de dentadura comercial promoveram nestes ação antifúngica frente a Candida albicans. Os fixadores formulados com pirazol se mostraram atividade antifúngica similar aqueles formulados com nistatina. Em relação a citotoxicidade, a concentração mais alta (30%) foi significativamente a mais citotóxica (p<0,05), sendo que as concentrações subsequentes se mostraram com baixa citotoxicidade. Os fixadores com pirazol de comportaram semelhantes a nistatina em relação a citotoxidade nas concentrações 2(3%) e 3(0,3%). Considerando-se as limitações do presente estudo, conclui-se que há possibilidade do uso de fixadores de dentadura como sistema de entrega de antifúngicos comerciais (Nistatina) ou não (pirazol) sendo a segunda concentração (3%) a mais eficiente, que independe da apresentação comercial é menos citotóxica. / The use of conventional dentures still appears as the main oral rehabilitation method of total edentulous patients mainly because the economic advantage of this kind of treatment. Despite these prostheses were made for several years, the main complaint about their use remains the lack of retention and stability. In order to improve these characteristics exists in the market products with adhesive properties called denture adhesives. These denture adhesives have a variety of formulations and commercial presentation, but the principle of action summarized in the absorption of the liquid medium, increased viscosity and increased adhesion to the mucosa. There are controversies in the literature about the effect of these denture adhesives in the oral microbiota and the possibility that these promote accumulation of biofilm which in turn cause chronic infections, such as chronic atrophic candidiasis. This work was divided into three articles. Article 1 aimed to evaluate the state of the art and state of the art through systematic review on bank of patents and articles related to denture adhesives. For monitoring the technique and art state, was performed a literature search of studies published between 1960 and 2014 in seven MEDLINE (PubMed), Web of Science, Lilacs, IBECS, Cochrane Library, SciELO and Scopus. In addition, the following patent databases were screened: USPTO, EPO, JPO, PTO, Derwent Innovations Index, Questel Orbit and Patentscope. Data were tabulated and analyzed using Microsoft Office Excel 2013 software and Questel Orbit. A total of 54 papers and patents 78 were included in the analysis related to bibliographic and technological monitoring. The results showed that the highest number of patents (n = 19) was deposited by Procter & Gamble Company (Cincinnati, Ohio). A total of 54 papers and patents 78 were included in the analysis related to bibliographic and technological monitoring. Furthermore, the most prevalent in vivo studies were performed (n = 30), and the types of adhesives have been most studied cream or powder (n = 14). Recent advances of such materials have been related more to the presentation than for the additional effects of denture adhesives. Article 2 aimed to evaluate a new methodology for the reliable adhesive test of front denture adhesives the variables as a (artificial saliva, natural saliva and distilled water) and method (immersion and wetting). The commercial denture adhesives were modified with the inclusion of antifungals (Pyrazol and nystatin) in three different concentrations in percentages by weight (30%, 3% and 0.3%). To validate the adhesiveness reliable methodology for fixing this was defined using an experimental design with fixed and variable factors. Was used for this purpose universal testing a machine operating with a 100 N load cell and speed of 1 mm / min. The established test method showed that the environment in which the test is performed, artificial saliva, water and natural saliva and the method used, dipping or wetting, was decisive for the outcome of the denture adhesives. It is essential that researchers analyze their methodologies before predicting and say which product is more or less efficient, avoiding misconceptions about them. Article 3 aimed to characterize and evaluate the effect of the addition of an alternative antifungal derived from pyrazoles, in commercial denture adhesives in three different presentations (powder, tape and cream). The antifungal activity was determined by the disk diffusion testing and direct contact. Direct contact test was measured at 1, 4, 8 and 12 hours. The cytotoxic activity was evaluated on mouse fibroblasts (NIH /3T3) using the colorimetric MTT reduction assay. The results showed that the inclusion of antifungals did not affect the adhesion of the denture adhesives (p> 0.05). The disk diffusion test results and demonstrated that direct contact include nystatin and pyrazole in commercial denture adhesives promoted to these antifungal activity against Candida albicans. Adhesives dentures formulated with pyrazol proved similar antifungal those formulated with nystatin. With respect to cytotoxicity, the highest concentration was significantly more cytotoxic (p <0.05), and subsequent concentrations showed low cytotoxicity. The dentures adhesives with pyrazole behaved like nystatin relative cytotoxicity at concentrations of 3% and 0.3%. Considering the limitations of this study, it is concluded that there is possibility of using denture adhesives as delivery system of trade antifungal (Nystatin) or not (pyrazole) and the second concentration (3%) to more efficient, which is independent commercial and less cytotoxic presentation.

Orientador: Cleslei Fernando Zanelli / Coorientadora: Tatiana Maria de Souza Moreira / Banca: Alexandra Ivo de Mendeiros / Banca: Geisiany Maria de Queiroz-Fernandes / Resumo: O fator de tradução de eucariotos eIF5A é descrito como a única proteína que apresenta o aminoácido hipusina, o qual é gerado por uma modificação pós-traducional essencial para a proliferação celular em todos os eucariotos estudados até o momento, sendo que a enzima desoxi-hipusina sintase (DHPS) é responsável pela primeira etapa da formação desse aminoácido em eIF5A. Portanto, a inibição de DHPS também impede a modificação de eIF5A, tornando esta proteína não funcional, o que pode ter aplicação no tratamento dos tipos de câncer em que o fator está envolvido. Embora N1-guanil-1,7-diamino-heptano (GC7) seja potente inibidor da enzima DHPS, foram observados outros efeitos na célula devido à atuação do composto em alvos não específicos. Desta forma, o presente trabalho tem como objetivo a busca por novos inibidores de DHPS, com baixa citotoxicidade e que reduzam a proliferação celular ou que inibam o crescimento de micro-organismos eucarióticos patogênicos, como algumas espécies de fungos. Primeiramente, foi avaliada a citotoxicidade de diferentes compostos com núcleo guanidínico frente a macrófagos murinos. Entre os compostos testados, aqueles que apresentaram menor citotoxicidade foram o composto GC7 e os compostos de núcleo guanidínico com um grupo fenil substituído em para por uma metila e outro por um flúor. A partir deste resultado, os compostos foram submetidos à avaliação de sua atividade antiproliferativa frente às mesmas células. GC7 promoveu inibição da proliferação c... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Eukaryotic translation factor eIF5A is described as the only protein that presents the amino acid hypusine that is generated by a post-translational modification, which is essential for cell proliferation in all the eukaryotes studied to date. The enzyme deoxyhypusine synthase (DHPS) is responsible for the first stage of formation of this amino acid in eIF5A. Therefore, the inhibition of DHPS also prevents the modification of the eIF5A, making this protein non-functional, which may have application in the treatment of cancer kinds in which this factor is involved. Although N1-guanyl-1,7-diaminoheptane (GC7) is a strong inhibitor of the DHPS enzyme, other effects on the cell were observed due to the acting of the compound on non-specific targets. Thus, the present work aims to search for new DHPS inhibitors, with low cytotoxicity and able to reduce cell proliferation or inhibit the growth of pathogenic eukaryotic microorganisms such as some fungal species. Firstly, the cytotoxicity of different compounds with guanidinic nucleus against murine macrophages was evaluated. Among the compounds tested, those that showed the lowest cytotoxicity were the GC7 compound and the guanidine core compounds with a phenyl group substituted in para for one methyl and another with fluorine. From these data, the antiproliferative activity of the compounds towards the same cells was evaluated. GC7 promoted inhibition of proliferation as already described in the literature, but the compounds tested... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre