Made available in DSpace on 2014-06-11T19:28:24Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-06-18Bitstream added on 2014-06-13T19:16:15Z : No. of bitstreams: 1 souza_ea_me_botfmvz.pdf: 156323 bytes, checksum: 453f97e0671cc40c17a1a1824898f56f (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / Os objetivos do presente trabalho foram avaliar a influência da sazonalidade e o método de produção da própolis (controle, tela plástica, coletor inteligente de própolis – CIP, abertura lateral da melgueira – ALM e calço) no teor dos minerais magnésio (Mg), zinco (Zn), ferro (Fe), sódio (Na), cálcio (Ca), cobre (Cu) e potássio (K) presentes na própolis produzida por abelhas Apis mellifera africanizadas. O experimento foi realizado na área de Apicultura da Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, localizado na Fazenda Edgárdia, UNESP, campus de Botucatu. As análises dos minerais foram realizadas por espectrofotometria de absorção atômica e os resultados avaliados por meio da Análise de Variância (ANOVA), seguido pelo teste de Tukey-Kramer para comparação das médias (P<0,05). Houve diferenças significativas para os minerais Mg, Zn, Fe, Na, Ca, Cu entre os métodos de produção e sazonalidade. Pode-se concluir que o método de colheita influenciou no teor de quatro minerais (Ca, Mg, Zn e Fe) e a sazonalidade influenciou no teor de cinco minerais ( Ca, Mg, Na, Cu e Fe) presentes na própolis produzida por abelhas Apis mellifera L. africanizadas / The aim of this study were to evaluate the influence of sazonality and methods of propolis production(control, plastic screen, intelligent propolis collector - CIP, opening side supper – ALM, and conventional scraping) in the mineral content of magnesium (Mg), Zinc (Zn), iron (Fe), sodium (Na), calcium (Ca), copper (Cu) and potassium (K) presents in the propolis produced by africanizated Apis mellifera L. The experiment was conducted in apiary of the Beekeeping area of Veterinary Medicine and Animal Science School, Edgárdia Farm, UNESP, Botucatu campus. Analyses of minerals were carried out by atomic absorption spectrophotometry and the results evaluated by analysis of variance (ANOVA) followed by Tukey-Kramer test for comparison of means (P<0,05). There were significantly differences for Mg, Zn, Fe, Na, Ca, Cu minerals between the methods of production and sazonality. From the results was possible to conclude that the method of production influence in four minerals ( Ca, Mg, Zn e Fe) contents and the sazonality influence in five minerals ( Ca, Mg, Na, Cu e Fe) contents presents in the propolis produced by africanizated Apis Melliferra L.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:28:24Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-09-09Bitstream added on 2014-06-13T18:34:32Z : No. of bitstreams: 1 ferraz_mc_me_botfmvz.pdf: 399542 bytes, checksum: dbf5e0181962afd1eb21aa3cc887f0ef (MD5) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / Os objetivos do presente trabalho foram avaliar o efeito da própolis sobre o peso e parâmetros comportamentais de saguis Callithrix sp mantidos em cativeiro e submetidos ao estresse. Foram utilizados 26 animais da espécie Callithrix jacchus (sagüi-de-tufo-branco) e Callithrix penicillata (sagüi-de-tufo-preto), com idade entre 8 e 18 meses, de ambos os sexos, os quais foram divididos em três tratamentos: T1- dieta de rotina; T2- dieta de rotina acrescida de 2% de própolis bruta e T3- dieta de rotina acrescida de 5% de própolis bruta da alimentação em relação ao consumo diário estimado por indivíduo. Os animais foram alimentados durante sete dias com ou sem o acréscimo de própolis (momento 1). Após este período, os animais continuaram recebendo o mesmo esquema alimentar e foram submetidos ao estresse intruso x residente, durante sete dias (momento 2), totalizando 14 dias. Em ambos os momentos foram avaliados os parâmetros comportamentais (brincadeiras social e lúdica, vocalização, catação e deslocamento) e a manutenção do peso dos animais. De acordo com os resultados obtidos pode-se concluir que a adição da própolis na dieta de sagüis mantidos em cativeiro promoveu maior ganho de peso nos animais, embora não tenha apresentado efeito na redução do estresse, avaliado através de parâmetros comportamentais. Sugere-se, no entanto, a necessidade de novas pesquisas no sentido de estudar outras concentrações de própolis e maiores tempos de observação dos animais. / The aim of the present work was to evaluate the effects of propolis on the weight and behavioral parameters of Callithrix sp marmosets kept in captivity and subjected to stress. Twenty-six Callithrix jacchus (white-tuffed-ear marmoset) and Callithrix penicillata (black-tuffed ear marmoset), aged between 8 and 18 months, males and females, were divided into three treatment groups: T1- routine diet; T2- routine diet added of 2% crude propolis and T3- routine diet added of 5% crude propolis from daily diet, in relation to estimated daily consumption per individual. Animals were fed during seven days with or without the addition of propolis (moment 1). After this period, they continued receiving the same diet scheme and were subjected to intrusive x resident stress for seven days (moment 2), in 14 days of experiment. In both moments, behavioral parameters (social and playful activities, vocalization, catching and moving) and weight were evaluated. According to the obtained results, the addition of propolis to the diet of marmosets kept in captivity leads to greater weight gain in the animals although it had no effect on stress reduction, which was evaluated through behavioral parameters. Thus, there is the need for additional studies using other propolis concentrations and longer observation times.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:04Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-03-20Bitstream added on 2014-06-13T20:29:44Z : No. of bitstreams: 1 pagliarone_ac_me_botib.pdf: 396538 bytes, checksum: 70c1ba1ab2097248edf4d300ec8ca0ae (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O estresse pode exercer atividades imunossupressoras, acarretando o desenvolvimento de doenças como câncer, inflamações crônicas, neurodegeneração, autoimunidade, além de maior susceptibilidade a infecções por microrganismos. Os recém-descobertos receptores Toll-like (TLRs) têm sido extensamente investigados recentemente por reconhecer microrganismos patogênicos, ativando, consequentemente, a resposta imune. Devido ao pouco conhecimento quanto ao papel da própolis no sistema imune desafiado pela ação do estresse, o objetivo deste trabalho foi verificar o possível efeito deste apiterápico sobre a produção de citocinas pró-inflamatórias (IL-1β e IL-6) e de padrão Th1 (IFN-γ e IL-2) e Th2 (IL-4 e IL-10), e sobre a expressão do receptor TLR-4 por células esplênicas de camundongos submetidos a estresse. Camundongos BALB/c foram divididos em 3 grupos: G1 (controle), G2 (estresse) e G3 (própolis + estresse). G2 foi submetido a estresse por imobilização por 3 dias consecutivos, e G3 foi tratado com própolis e submetido a estresse. Após o sacrifício, o sangue foi coletado para a dosagem de corticosterona, como indicador de estresse. O baço de cada animal foi extraído e culturas celulares foram estimuladas com LPS por 24h ou com Con A por 48 h para determinação da produção de citocinas. Parte do baço foi utilizada para a realização de PCR quantitativo em tempo real a fim de verificar a expressão gênica de TLR-4 pelas células esplênicas. Os grupos submetidos a estresse, tratados ou não com própolis, apresentaram aumento na concentração de corticosterona. Houve inibição na produção de IL-1β e IL-6 nestes mesmos grupos, em comparação ao controle. Não houve alterações na produção de IL-2 em nenhum dos grupos, enquanto que a de IFN-γ esteve inibida nos grupos submetidos a estresse, tratados ou não com própolis. Já a produção de IL-4... / Stress can exert immunossupressive activities, which lead to the development of diseases such as cancer, chronic inflammation, neurodegenerative dysfunctions, autoimmunity and a higher susceptibility to infectious microorganisms. Recently, Tolllike receptors (TLRs) have been widely investigated for recognizing pathogenic microorganisms and, as a consequence, activating the immune response. Since little is known about propolis effects on the immune system challenged by stress, the aim of this work was to verify the possible effect of this bee product on pro-inflammatory (IL- 1β and IL-6), Th1 (IFN-γ and IL-2) and Th2 (IL-4 and IL-10) cytokines and on TLR-4 expression by spleen cells from stressed mice. BALB/c mice were divided into 3 groups: G1 (control), G2 (stress) and G3 (propolis + stress). G2 was submitted to restraint stress for 3 consecutive days and G3 was treated with propolis and immediately submitted to stress. After sacrifice, blood was collected for corticosterone determination as a stress indicator. Spleens of all groups were removed and cell cultures were stimulated with LPS for 24h or with Con A for 48 h to further cytokines determination. A portion of the spleens was used for quantitative PCR real time assay in order to verify TLR-4 gene expression. An increased corticosterone concentration was seen in stressed groups, treated or not with propolis. IL-1β and IL-6 production was inhibited in these same groups, comparing to control. No alterations were found in IL-2 production in the experimental groups, while IFN-γ was inhibited on stressed group even when treated with propolis. IL-4 production was inhibited on stressed mice, but propolis treatment was able to antagonize this inhibition. There were no alterations in IL-10 production between the experimental groups. TLR-4 expression was inhibited in stressed mice, but propolis treatment exerted... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:40Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006-12-01Bitstream added on 2014-06-13T19:50:40Z : No. of bitstreams: 1 gulinelli_jl_me_araca.pdf: 1896250 bytes, checksum: a6ca7f08b2f54484e847f5458f7e5512 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O reimplante dentário é a melhor opção para o tratamento da avulsão. Todavia, período extrabucal prolongado ocasiona danos ao ligamento periodontal, que desencadeiam processos de reabsorção radicular externa. O objetivo desse estudo foi avaliar histomorfometricamente, a viabilidade da solução de própole e a de flúor no controle da reabsorção radicular externa no processo de reparo do reimplante tardio. Trinta ratos (Rattus norvegicus albinus, variedade Wistar) tiveram seu incisivo superior direito extraído. Os dentes foram mantidos em meio seco por 60 minutos. Após esse período a papila dentária, o órgão do esmalte e o ligamento periodontal removidos com lâmina de bisturi e a polpa foi extirpada. Os dentes foram divididos em três grupos experimentais: grupo I - dentes imersos em 20 ml de solução de soro fisiológico; grupo II - dentes imersos em 20 ml de solução de fluoreto de sódio fosfato acidulado a 2%; grupo III - imersão dos dentes em 20 ml de solução de própole a 15%. Após 10 minutos de imersão nas soluções, os canais radiculares foram secos e preenchidos com pasta de hidróxido de cálcio e os dentes reimplantados. A eutanásia dos animais ocorreu 60 dias após o ato operatório. Os resultados mostraram presença de reabsorção inflamatória, por substituição e anquilose nos três grupos experimentais, não apresentando diferença significativa quando submetidos à análise comparativa, o que levou a conclusão de que o tratamento da superfície radicular com própole se mostrou semelhante ao do flúor com relação à reabsorção radicular externa. Apesar de não apresentarem diferença estatisticamente significante, houve maior quantidade de reabsorção inflamatória do soro fisiológico quando comparado ao flúor e à própole. / Tooth replantation is the best option for treatment of an avulsed tooth. Nevertheless, an extended extraoral period damages the periodontal ligament, and results in external root resorption. The purpose of this study was to assess by histologic and histometric analysis, the influence of propolis and the fluoride solution used as root surface treatment on the healing process after delayed tooth replantation. Thirty Wistar (Rattus norvegicus albinus) were submitted to extraction of their upper right incisor. The teeth were maintained in a dry environment for 60 minutes. After this time the pulp was extirpated and the papilla, enamel organ and periodontal ligament were removed with scalpel. The teeth were divided in to three experimental groups: group I - teeth immersed in 20 ml of physiologic saline; group II - teeth immersed in 20 ml of 2% acidulated phosphate sodium fluoride; group III - teeth immersed in 20 ml of 15% propolis. After 10 minutes of immersion in the solutions, the root canals were dried and filled with calcium hydroxide paste and the teeth were replanted. The animals were euthanized 60 days after replantation. The results showed the similar external root resorption was seen in the propolis and fluoride groups. Teeth treated with physiologic saline tended to have more inflammatory root resorption compared to those treated with fluoride or propolis. However, the comparative analysis did not reveal any statistically signifant differences between the treatment modalities when used for delayed tooth replantation.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:45Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-05-08Bitstream added on 2014-06-13T18:19:56Z : No. of bitstreams: 1 nunes_dc_me_araca.pdf: 1128704 bytes, checksum: 69f712a6527072cbd6de0f54db258003 (MD5) / O reimplante imediato ou a conservação do dente avulsionado em meio adequado para a manutenção da viabilidade celular são fundamentais para que haja o reparo do ligamento periodontal e a ausência da reabsorção radicular e da anquilose dentária após o reimplante dentário. De acordo com pesquisas anteriores, a própolis é uma substância capaz de preservar a viabilidade celular por até 24 horas. Assim, este trabalho tem como objetivo analisar a própolis como meio de conservação para dentes avulsionados, além de determinar o tempo ideal para a manutenção do dente na mesma. Para isso, 60 incisivos centrais superiores direitos de ratos foram extraídos e divididos em cinco grupos. Nos grupos I e II, os dentes permaneceram na própolis por 60 minutos e 6 horas, respectivamente; no grupo III, os dentes foram mantidos em leite integral por 6 horas; no grupo IV, os dentes permaneceram a seco por 60 minutos e no grupo V, foram reimplantados imediatamente. Antes do reimplante, todos os dentes tiveram os canais radiculares instrumentados e preenchidos com pasta de hidróxido de cálcio. Decorrido o tempo proposto para cada grupo, os dentes foram reimplantados em seus respectivos alvéolos. Passados 15 e 60 dias do reimplante, os animais foram mortos e as peças obtidas, processadas em laboratório para análise microscópica e morfométrica. Os resultados mostraram que a ocorrência da reabsorção radicular inflamatória, da anquilose dentária e da formação de tecido conjuntivo disposto paralelamente à superfície radicular foram semelhantes entre os grupos deste trabalho. No entanto, os grupos mostraram-se diferentes (p<0,05) em relação à ocorrência de reabsorção por substituição, à presença de cemento sobre a raiz e à formação de tecido conjuntivo disposto perpendicularmente à superfície radicular. Assim, no grupo IV (reimplante tardio) a reabsorção... / Immediate reimplantation or maintenance of the avulsed tooth in storage media compatible for survival of cells is fundamental for the periodontal ligament repair and for the absence of root resorption and dental ankylosi. According to previous researches, propolis is a substance capable of preserving the cellular viability until 24 hours. Thus, the purpose of this study was to test a propolis as a storage media for avulsed teeth, besides determining the ideal time period for the maintenance of the teeth in immersion. Sexthy rat maxillary right central incisors were extracted and divided in five groups. In groups I and II, the teeth immersed in the propolis for 60 minutes and 6 hours, respectively; in group III, the teeth were maintained in milk for 6 hours; in group IV, the teeth were kept dry for 60 minutes and, in group V, the teeth were repositioned in the socket immediately. Before replantation, the teeth were instrumented and filled with calcium hydroxide paste. Teeth were then reimplanted in their respective sockets. Fifteen and sixty days after the replantation, the animals were euthanized and the pieces were obtained and processed in laboratory for microscopic and morphometric analysis. The results demonstrated that the occurrence of inflammatory resorption, dental ankylosis and formation of connective tissue parallel to the root surface were similar among all groups of this study. However, the groups were different (p<0,05) regarding the occurrence of replacement resorption, presence of cementum covering of the root and formation of connective tissue perpendicular to the root surface. In group IV (delayed reimplantation), the replacement resorption was more significant. In groups I (propolis, 60 minutes) and IV (delayed reimplantation), the periodontal ligament-like was considerably smaller than in the other groups. Concerning the amount of cementum on the root... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:24:37Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-06-07Bitstream added on 2014-06-13T18:20:50Z : No. of bitstreams: 1 xavier_acc_me_sjc.pdf: 1016350 bytes, checksum: a962a7e714de7e776f6fedbac277efc6 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Este estudo avaliou in vivo a ação do extrato glicólico de própolis 12%, como substância química auxiliar em tratamentos endodônticos de dentes com necrose pulpar e lesão periapical. A avaliação foi realizada através da cultura e detecção de microrganismos por Reação em Cadeia Polimerase (PCR) e da quantificação de endotoxinas. Além disso, foi avaliada a correlação entre o tamanho da lesão periapical e a quantidade de endotoxinas presente. Foram selecionados 30 dentes, os quais foram divididos em 3 grupos (n=10), de acordo com a substância química auxiliar utilizada para a instrumentação: NaOCl) Hipoclorito de sódio 1%; CLX) Clorexidina gel 2%, intercalada com solução salina; PRO) Extrato glicólico de própolis 12%, intercalado com solução salina. As radiografias iniciais foram digitalizadas e as lesões periapicais foram medidas através de software específico. Foram realizadas 3 coletas do conteúdo do canal radicular: após a abertura coronária, após instrumentação e após 14 dias da medicação intracanal. A medicação intracanal utilizada foi o hidróxido de cálcio com propilenoglicol. Em todas as coletas realizou-se: detecção de microrganismos por PCR; avaliação do crescimento microbiológico em diferentes meios de cultura e quantificação de endotoxinas através do teste cinético cromogênico (LAL). Os resultados foram analisados através dos testes de Kruskal Wallis, Dunn (nível de significância 5%) e correlação linear de Pearson. A quantidade de microrganismos e endotoxinas, nas 2ª e 3ª coletas, diminuiu em relação à 1ª coleta, em todas as soluções avaliadas (p<0,05). Os canais apresentaram diversidade microbiana, com predominância de Parvimonas micra, Tanerella forsythia e Prevotella nigrescens. Concluiu-se que o extrato glicólico de própolis 12% apresentou atividade antimicrobiana e antiendotóxica semelhante aos demais... / The aim of this study was in vivo evaluated of 12% propolis glycolic extract action in root canal treatments, through the culture of microorganisms, quantification of endotoxins and detection of microorganisms by molecular method of polymerase chainreaction (PCR). A total of 30 human teeth were divided into 3 groups (n=10) according to the auxiliary chemical solution used for biomechanical preparation: NaOCl) sodium hypoclorite 1%; CLX) 2% chlorhexidine gel; PRO) 12% propolis glycolic extract. Collections were performed immediately after coronary open, after instrumentation and after 14 days with intracanal medication. For all collections were performed the following tests: microorganisms detection by PCR; assessment of microbiological growth and analyzing the amount of endotoxi (Limulus amoebocyte lysate). The results showed a decrease in the amount of microorganisms and endotoxins in the 2nd and 3rd collections of all irrigation solutions. The canals showed microbial diversityy, but Parvimonas micra was predominantly. It was concluded thar all solutions are evaluated antimicrobial and anti-endotoxic similar. The most common microorganism present in root canals with pulp necrosis and periapical lesion was Parvimonas microns. There is a evidence that the higher amount of endotoxins is in the biggest lesions

Made available in DSpace on 2016-09-27T13:39:55Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-08-28. Added 1 bitstream(s) on 2016-09-27T13:45:03Z : No. of bitstreams: 1 000869156.pdf: 1761304 bytes, checksum: 503fb29625e54aaf5743540f6223d20b (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Células dendríticas (DCs) são essenciais para o reconhecimento de patógenos e apresentação de seus antígenos aos linfócitos T, desempenhando papel fundamental no elo entre as respostas imunes inata e adaptativa. A própolis é um produto resinoso, elaborado pelas abelhas a partir de diversas partes das plantas, e tem despertado a atenção dos pesquisadores em virtude de suas inúmeras propriedades biológicas, destacando sua ação imunomoduladora. Assim, o presente projeto de pesquisa teve como objetivo investigar o efeito da própolis sobre a maturação e função de DCs humanas. Foi analisado o efeito da própolis na ativação do NF-кB, expressão de micro-RNAs e marcadores de superfície celular (TLR-4, MHC-II, CD80, CD86 e CD40), produção de citocinas (TNF-, IL-6, IL-10 e IL-12), e atividade bactericida das DCs humanas contra Streptococcus mutans. Tomados em conjunto, os dados sugerem o perfil ativador da própolis em DCs, visto que este produto apícola manteve a ação induzida por LPS tanto na ativação do fator de transcrição NF-кB como na produção de TNF-α, IL-6 e IL-10. Ademais, a inibição na expressão de hsa-miR-148a e hsa-miR-148b aboliu o efeito inibitório dos mesmos sobre a expressão de HLA-DR e também pode ter favorecido a produção de citocinas pró-inflamatórias. O aumento na expressão de hsa-miR-155 pode estar correlacionado ao aumento na expressão de TLR-4 e CD86, além de manter a ativação induzida pelo LPS de HLA-DR e CD40. Estes parâmetros podem estar envolvidos com o aumento na atividade bactericida de DCs contra Streptococcus mutans. Estes dados sugerem que a própolis pode modular positivamente a maturação e função de DCs / Dendritic cells (DCs) represent a heterogeneous population of professional antigen presenting cells (APCs) and are essential for recognition and presentation of pathogens to T cells. Propolis, a resinous material produced by bees from various plant sources, exhibits numerous biological properties, highlighting its immunomodulatory action. Here, we assayed the effects of propolis on the maturation and fuction of human DCs, assessing the activation of the transcription factor NF-kB, micro-RNAs and cell markers expression (TLR-4, HLA-DR, CD80, CD86, CD40), cytokines production (TNF-α, IL-6, IL-10, IL-12), and the bactericidal activity against Streptococcus mutans. DCs were generated from monocytes treated with IL-4 and GM-CSF and incubated with propolis and LPS. NF-κB in nuclear extract and cytokines were determined by ELISA. microRNAs expression was analysed by RT-qPCR and cell markers by flow cytometry. Colony-forming units were counted to assess the bactericidal activity of propolis-treated DCs. Propolis activated human DCs, inducing the NF-kB signaling pathway and TNF-, IL-6 and IL-10 production. The inhibition of hsa-miR-148a and hsa-miR-148b abolished the inhibitory effects on HLA-DR and pro-inflammatory cytokines. The increased expression of hsa-miR-155 may be correlated to the increase in TLR-4 e CD86 expression, maintaining LPS-induced expression of HLA-DR and CD40. Such parameters may be involved in the increased bactericidal activity of DCs against Streptococcus mutans. These studies are particularly important to develop DC-based modulation strategies for the identification of promising sources for drug discovery / FAPESP: 2012/14176-0

A própolis vermelha brasileira tem atraído interesses científicos e econômicos devido às suas variadas atividades biológicas. Este produto natural possui composição química variada de acordo com a região na qual é encontrado, sendo necessária uma completa caracterização química para cada tipo de própolis, a fim de se elucidar os compostos presentes e responsáveis pela atividade biológica observada. Neste trabalho, buscou-se caracterizar quimicamente os extratos da própolis vermelha brasileira, avaliar sua atividade antitumoral, bem como alguns mecanismos de morte celular, além de investigar o padrão proteico de células tumorais de laringe (Hep-2) e não tumorais de rim (Hek-293) tratadas e não tratadas com extratos da própolis vermelha através da análise proteômica comparativa. A caracterização química mostrou que a própolis apresenta moléculas complexas, principalmente isoflavonoides, que possuem importantes atividades biológicas, dentre elas a atividade antitumoral. A atividade citotóxica de duas frações e do extrato hidroalcoólico da própolis foi avaliada na linhagem tumoral Hep-2, a qual se revelou mais citotóxica nos tratamentos com as frações investigadas. Os ensaios de citometria mostraram que as células que receberam tratamento apresentaram menor potencial de membrana mitocondrial, maior quantidade de células em apoptose tardia (TUNEL e Anexina-V/PI), menor geração de espécies reativas do oxigênio e o aumento de fragmentação do DNA. Além disto, as colorações revelaram a presença de corpos apoptóticos e condensação de cromatina. A análise proteômica permitiu a comparação dos mapas proteicos da linhagem Hep-2, na ausência ou presença de extratos da própolis vermelha, com a linhagem não tumoral Hek-293. Estas proteínas foram classificadas de acordo com os processos biológicos as quais estão envolvidas. Além disto, doze proteínas identificadas na linhagem Hep-2 apresentaram expressão reduzida comparada ao grupo controle, dentre as quais muitas estão presentes em grande quantidade em outros tumores e são consideradas biomarcadores tumorais. Os resultados, de forma geral, mostram que a própolis interfere em um conjunto de eventos intracelulares e, assim, passa a ser uma candidata promissora para inibir o crescimento celular e contribuir para os diferentes passos relacionados com o processo de carcinogênese. Embora os mecanismos moleculares pelos quais a própolis vermelha interaja com o metabolismo das células permaneçam ainda desconhecidos, estudos adicionais servirão para melhor elucidar a atividade antitumoral da própolis vermelha brasileira e de suas frações. / Submitted by Ana Guimarães Pereira (agpereir@ucs.br) on 2017-04-18T16:59:16Z No. of bitstreams: 1 Tese Caroline Olivieri da Silva Frozza.pdf: 11179534 bytes, checksum: b2ae6a4dfa6013728ea3f7c81bc40380 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-18T16:59:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese Caroline Olivieri da Silva Frozza.pdf: 11179534 bytes, checksum: b2ae6a4dfa6013728ea3f7c81bc40380 (MD5) Previous issue date: 2017-04-18 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior, CAPES. / The Brazilian red propolis has attracted scientific and economic interests due to its varied biological activities. This natural product has diversify chemical composition according to the region in which it is found, then it is necessary a complete chemical characterization for each type of propolis, in order to elucidate the present compounds and responsible for the biological activity observed. In this work, we attempted to chemically characterize the extracts of Brazilian propolis, evaluate their antitumor activity as well as some cell death mechanisms, and to investigate the protein profile of larynx tumor cells treated and not treated with propolis extracts through comparative proteomic analysis. The chemical characterization showed that propolis has complex molecules, particularly isoflavones, which present significant biological activities, such as antitumor activity. The cytotoxic activity of two fractions and of the hydroalcoholic extract of propolis was assessed in Hep-2 tumor cell line, which proved to be more cytotoxic treatments in the investigated fractions. Flow cytometric assays showed that treated cells had lower mitochondrial membrane potential, increased amount of cells in late apoptosis (TUNEL and Annexin-V / PI), less generation of reactive oxygen species and increase in DNA fragmentation. Furthermore, the staining revealed the presence of apoptotic bodies and chromatin condensation. The proteomic analysis has allowed comparison of the maps of the protein Hep-2 cell line, in the absence or presence of propolis extracts, with non-tumor cell line Hek-293. These proteins were classified according to the biological processes which they are related. Besides, twelve identified proteins in Hep-2 showed reduced expression from the control group. Between them, many are presented in large quantities in other tumors and are considered tumor biomarkers. The results in general show that propolis interferes with a series of intracellular events and hence becomes a promising candidate to inhibit cell growth and contribute to the different steps relating to the process of carcinogenesis. Although the molecular mechanisms by which propolis interact with the metabolism of the cells remain unknown, further study will serve to better elucidate the antitumor activity of Brazilian propolis and its fractions.

A própolis vermelha é uma resina natural produzida por abelhas do gênero Apis a partir de exsudados vegetais e tem atraído a atenção dos pesquisadores de todo o mundo devido à sua potente atividade em diversos modelos biológicos. Essa resina natural é rica em polifenóis e compostos voláteis, sendo que mais 300 compostos químicos já foram identificados em amostras de diferentes regiões. Técnicas de identificação química de alta precisão são imprescindíveis para a correta elucidação dos compostos químicos presentes nas amostras e para o entendimento dos efeitos biológicos. Neste estudo, buscou-se utilizar técnicas de fracionamento como uma metodologia capaz de ser explorada em estudos envolvendo amostras de própolis vermelha, buscando-se a identificação e caracterização de frações ativas, bem como o uso de modelos celulares de câncer de cólon para o screening de moléculas bioativas. As frações ativas foram identificadas por meio HPLC-MS e ESI-MS/MS, evidenciando uma composição química complexa baseada em compostos fenólicos e flavonoides. Entre os resultados obtidos, destacam-se as frações 05 e 06, as quais foram capazes de produzir inibição significativa sobre as linhagens tumorais HT-29 e HCT-116, respectivamente, com menores efeitos sobre as células não-tumorais. As frações obtidas no estudo apresentaram menor diversidade química do que a encontrada no extrato total da própolis, favorecendo a sua bioatividade in vitro, e, como resultado, esta técnica pode favorecer a descoberta e o desenvolvimento de novos fármacos utilizando a própolis como fonte de potencial de moléculas contra o câncer. / Submitted by Ana Guimarães Pereira (agpereir@ucs.br) on 2017-04-26T12:12:54Z No. of bitstreams: 1 Dissertacao Denis Amlton dos Santos.pdf: 1867020 bytes, checksum: 9a2b6e047762ce4edebdc69379893739 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-26T12:12:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Denis Amlton dos Santos.pdf: 1867020 bytes, checksum: 9a2b6e047762ce4edebdc69379893739 (MD5) Previous issue date: 2017-04-26 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior, CAPES. / Red propolis is a natural resin produced by bees of the genus Apis from plant exudates and has attracted the attention of researchers worldwide due to its potent activity in several biological models. This natural resin is rich in polyphenols and volatile compounds and more than 300 chemical compounds have been identified in samples from different regions. High precision chemical identification techniques are essential for the correct elucidation of the chemical compounds present in the samples and for the understanding of the biological effects. In this study, we sought to use fractionation techniques as a methodology able to be explored in studies involving samples of red propolis, seeking the identification and characterization of active fractions, as well as the use of cellular models of colon cancer for screening of bioactive molecules. The active fractions were identified by techniques of HPLC-MS and ESI-MS/MS, evidencing a complex chemical composition based on phenolic compounds an flavonoids. Among the obtained results, we highlight the fractions 05 and 06, which are able to produce significant inhibition on the HT-29 and HCT-116 tumor lines.The fractions obtained in this study showed lower chemical diversity than that found in the total extract of propolis, favoring its bioactivity, and as a result, this technique may favor the discovery and development of new drugs using propolis as a potential source of molecules against cancer.

Orientador: Daisy Maria Fávero Salvadori / Banca: Jose Mauricio Sforcin / Banca: Edson L. Maistro / Banca: Mario A. Spano / Banca: Lusânia M. G. Antunes / Resumo: Propolis é uma mistura complexa composta de resina, extratos vegetais, cera, óleos essências (10%), pólen (5%) e outras substâncias (5%). Alguns estudos têm mostrado, no entanto, que a composição da própolis pode variar de acordo com a flora e região onde é coletada e permitido a identificação de sua origem vegetal por análise comparativa química e taxonômica testes. Esses compostos foram identificados no exsudado das folhas da Baccharis dracunculifolia e são específicos da própolis brasileira, sendo encontrado em concentrações semelhantes, demonstrando que a Baccharis ssp é a principal fonte para composição da própolis. Assim, por possuir uma complexa e altamente variável composição química (cerca de 300 compostos já foram identificados), a qual está intimamente relacionada com a ecologia da flora de cada região visitada pelas abelhas, a própolis tem sido utilizada como medicamento natural desde os tempos antigos. Estudos têm comprovado sua ação benéfica à saúde devido a sua atividade antiinflamatória, hepatoprotetora, antimicrobiana, além de propriedades antioxidantes. Além disso, o própolis é utilizada em cosméticos bem como na alimentação. Assim, o efeito terapêutico da própolis sobre algumas doenças, devido ao seu uso popular como medicamento, tem suscitado o interesse na compreensão das propriedades biológicas desta substância relacionadando-as com sua composição química. Em vista desse potencial terapêutico proeminente da própolis e o pequeno número de estudos sobre os seus mecanismos de ação, o objetivo do presente estudo foi avaliar o possível potencial antigenotóxico e antimutagênico das frações de própolis em células de ovário de hamster chinês (CHO) e células de hepatobastoma humano (HepG2) pelo ensaio cometa e teste do micronúcleo com boqueio da citocinese (CBMN). Tratamentos com a própolis... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Propolis is a complex mixture of plant resins, bee wax, essential oils and pollen. The specific chemical compounds of Brazilian propolis have allowed the identification of its plant source by comparative chemical analysis (infrared measurements) and taxonomic tests. These compounds have been identified in the exudate of Baccharis dracunculifolia leaves and are specific of Brazilian propolis, being even found at similar concentrations, demonstrating that Baccharis is the main plant source of propolis. Thus, by possessing highly complex and variable chemical composition of propolis (more than 300 components have been identified), which is intimately related to the ecology of the flora of each region visited by the bees, propolis is a natural remedy that has been used since ancient times. It is widely recommended by phytotherapists due to its anti-inflammatory, hepatoprotective, antimicrobial, and antioxidant properties. Also, propolis is used in cosmetic products and as a food constituent. Thus, the therapeutic effect of propolis on some human diseases claimed by folk medicine has raised the interest in the understanding of the biological properties of this substance related to its chemical composition. In view of the prominent therapeutic potential of propolis and the small number of studies regarding its mechanisms of action, the aim of the present investigation was to evaluate the possible antigenotoxic and antimutagenic effects of a propolis fractions on Chinese hamster ovary (CHO) cells and células de hapatobastoma humano (HepG2) by comet assay and cytokinesis-block micronucleus assay (CBMN). Treatments with propolis, at concentrations 25, 50, and 100 μg/ml, were done prior to, simultaneously and post-treatment with mutagens (direct- and indirect-acting) with different mode of action. Under these conditions, by comet assay our data clearly showed the capability of propolis compounds... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor