O objetivo do presente estudo foi avaliar a produção in vitro de embriões (PIVE) em novilhas da raça Holandesa. Um total de 179 novilhas de três categorias [novilhas pré púberes (PP), n = 60; novilhas púberes (PU), n = 60 e novilhas prenhes (PR), n = 59)] foram submetidas à aspiração folicular (OPU) sem sincronização prévia da onda de crescimento folicular. Realizaram-se seis sessões de OPU com dez animais de cada categoria por réplica. O total de estruturas recuperadas e a quantidade e qualidade de oócitos foram registrados. Os oócitos viáveis foram submetidos à PIVE e foi avaliado o desenvolvimento embrionário (taxa de clivagem e de blastocisto). Foi utilizado sêmen de um único touro e de mesma partida para fertilização dos oócitos. As variáveis foram analisadas pelo procedimento GLIMMIX do SAS®. Novilhas PU apresentaram maior população folicular quando comparadas às novilhas PP e PR (PP = 13,7b± 1,43; PU = 20,2 ± 1,64a; PR = 14,0 ± 1,74b; P = 0,0002). Não foi verificada diferença na taxa de recuperação de oócitos entre os grupos experimentais (PP = 66,6%; PU = 75,4%; PR = 62,9%; P = 0,26). No entanto, houve maior número de oócitos recuperados em novilhas PU quando comparado às demais categorias (PP = 9,75 ± 1,29b; PU = 15,6 ± 1,42a; PR = 9,85 ± 1,60b; P = 0,002). Não houve diferença na taxa de oócitos viáveis (PP = 48,5%; PU = 58,9% e PR = 58,3%; P = 0,41), entretanto, a taxa de clivagem foi inferior em novilhas PP (PP = 28,2%c; PU = 55,2%b; PR = 67,8%a; P < 0,0001). Além disso, a taxa de blastocisto (PP = 2,3%c; PU = 11,9%b; PR = 20,3%a; P < 0,0001) e o número de embriões produzidos por OPU (PP = 0,13 ± 0,05c; PU = 0,90 ± 0,17b; PR = 1,76 ± 0.32a; P < 0,0001) foi inferior em novilhas PP. Os dados do presente estudo são indicativos de que novilhas PR apresentam maior eficiência na PIVE quando comparadas às novilhas PP e PU. Ainda, observa-se que os resultados da PIVE em novilhas PP são significativamente inferiores às novilhas PU. / O objetivo do presente estudo foi avaliar a produção in vitro de embriões (PIVE) em novilhas da raça Holandesa. Um total de 179 novilhas de três categorias [novilhas pré púberes (PP), n = 60; novilhas púberes (PU), n = 60 e novilhas prenhes (PR), n = 59)] foram submetidas à aspiração folicular (OPU) sem sincronização prévia da onda de crescimento folicular. Realizaram-se seis sessões de OPU com dez animais de cada categoria por réplica. O total de estruturas recuperadas e a quantidade e qualidade de oócitos foram registrados. Os oócitos viáveis foram submetidos à PIVE e foi avaliado o desenvolvimento embrionário (taxa de clivagem e de blastocisto). Foi utilizado sêmen de um único touro e de mesma partida para fertilização dos oócitos. As variáveis foram analisadas pelo procedimento GLIMMIX do SAS®. Novilhas PU apresentaram maior população folicular quando comparadas às novilhas PP e PR (PP = 13,7b± 1,43; PU = 20,2 ± 1,64a; PR = 14,0 ± 1,74b; P = 0,0002). Não foi verificada diferença na taxa de recuperação de oócitos entre os grupos experimentais (PP = 66,6%; PU = 75,4%; PR = 62,9%; P = 0,26). No entanto, houve maior número de oócitos recuperados em novilhas PU quando comparado às demais categorias (PP = 9,75 ± 1,29b; PU = 15,6 ± 1,42a; PR = 9,85 ± 1,60b; P = 0,002). Não houve diferença na taxa de oócitos viáveis (PP = 48,5%; PU = 58,9% e PR = 58,3%; P = 0,41), entretanto, a taxa de clivagem foi inferior em novilhas PP (PP = 28,2%c; PU = 55,2%b; PR = 67,8%a; P < 0,0001). Além disso, a taxa de blastocisto (PP = 2,3%c; PU = 11,9%b; PR = 20,3%a; P < 0,0001) e o número de embriões produzidos por OPU (PP = 0,13 ± 0,05c; PU = 0,90 ± 0,17b; PR = 1,76 ± 0.32a; P < 0,0001) foi inferior em novilhas PP. Os dados do presente estudo são indicativos de que novilhas PR apresentam maior eficiência na PIVE quando comparadas às novilhas PP e PU. Ainda, observa-se que os resultados da PIVE em novilhas PP são significativamente inferiores às novilhas PU. The objective of the present study was to evaluate the in vitro embryo production in Holstein heifers. A total of 179 heifers of three categories [prepubertal heifers (PP), n = 60; pubertal heifers (PU), n = 60 and; pregnant heifers (PR), n = 59)] were submitted to Ovum Pick-Up (OPU) without previous synchronization of follicular wave. Six OPU sessions were conducted with ten animals of each category per session. The total number of retrieved structures and the quantity and quality of the oocytes were registered. The viable oocytes were submitted to in vitro embryo production and the embryonic development (cleavage and blastocyst rates) was assessed. Semen from a single sire was used for oocytes fertilization. The variables were analyzed using the GLIMMIX procedure of SAS®. PU heifers presented greater follicular population when compared to the PP and PR heifers (PP = 13.7b ± 1.43; PU = 20.2 ± 1.64a; PR = 14.0± 1.74b; P = 0.0002). No difference was observed among the experimental groups regarding the oocyte recovery rate (PP = 66.6%; PU = 75.4%; PR = 62.9%; P = 0.26). However, PU heifers had more recovered oocytes when compared to the other categories (PP = 9.75 ± 1.29b; PU = 15.6 ± 1.42a; PR = 9.85 ± 1.60b; P = 0.002). There was no significant differences on the viable oocytes rate (PP = 48.5%; PU = 58.9% and PR = 58.3%; P = 0.41). Moreover, the cleavage rate was lower in PP heifers (PP = 28.2%c; PU = 55.2%b; PR = 67.8%a; P < 0.0001). The blastocyst rate (PP = 2.3%c; PU = 11.9%b; PR = 20.3%a; P < 0.0001) and the number of produced embryos per OPU (PP = 0.13 ± 0.05c; PU = 0.90 ± 0.17b; PR = 1.76 ± 0.32a; P < 0.0001) was lower for PP heifers. The data of the present study indicate that PR heifers present higher efficacy on the in vitro embryo production when compared to PP and PU heifers. Furthermore, it is observed that the IVEP results in PP heifers is significantly inferior to PU heifers.

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Rio de Janeiro / O objetivo deste trabalho foi analisar as alterações estruturais e bioquímicas na parede da bexiga resultante do tratamento crônico de ratos pré-púberes com altas doses de corticosterona. Foram estudados 26 ratos Wistar divididos em quatro grupos: T30 foi tratado com corticosterona até 29 dias de idade e morto no dia 30. T65 recebeu o mesmo tratamento, mas foi morto com 65 dias. Cada grupo tinha seu próprio controle (C30 e C65). Os animais foram tratados com injeções intraperitoneais diárias de corticosterona (2 mg/100g peso corporal) entre o 7 e 29 dias de vida. A bexigas foram removidas e processadas para inclusão em parafina. Foram estudados os seguintes elementos da parede vesical: Colágeno, músculo liso, fibras do sistema elástico, densidade vascular e do epitélio. Estes parâmetros foram analisados por métodos morfométricos, imunofluorescência e bioquímica. A densidade vascular na lâmina foi reduzida em 40% (p <0,05) no grupo T65. A organização do colágeno foi alterada em T30 e T65, apesar da concentração de colágeno total não ser alterada. O grupo T65 teve um aumento de fibras do sistema elástico. Não houve diferença na altura e na densidade de células epiteliais entre os grupos. Quanto à densidade de fibras musculares lisas, observamos um aumento de 19% (p <0,05) no grupo T65. A administração de corticosterona na fase pré-púbere provoca modificações estruturais na bexiga de ratos afetando de modo significativo o substrato morfológico sob qual repousa a fisiologia vesical. Foi observado também que estas modificações normalmente aparecem num tempo mais longo após o término do tratamento / The aim of this work was to analyze the structural and biochemical changes on the bladder wall resulting from the chronic treatment of prepubertal rats with high doses of corticosterone. This study included 26 male Wistar rats assigned to four groups: T30 was treated with corticosterone until 29 days of age and killed at day 30, while T65 group received the same treatment but was killed at day 65. Each group had its own control group (C30 and C65). For treated animals, daily intraperitoneal injections of corticosterone (2 mg/100g body weight) were administered between 7th and 29th day of life. Bladders were removed and collagen, smooth muscle, elastic fibers system, vascular density and epithelium were analyzed by morphometrical methods, immunofluorescence, and biochemistry.Vascular density in lamina propria was reduced by 40% (p<0.05) in group T65. Collagen organization was altered in T30 and T65, although total collagen concentration was unchanged. The T65 group had an increase in elastic system fibers. There was no difference in epithelial height and cell density between the groups. Concerning the smooth muscle fibers density we observed a 19% increase (p<0.05) in the T65 group. Our results show that prepubertal administration of corticosterone induces structural modifications in the bladder of rats

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Rio de Janeiro / O objetivo deste trabalho foi analisar as alterações estruturais e bioquímicas na parede da bexiga resultante do tratamento crônico de ratos pré-púberes com altas doses de corticosterona. Foram estudados 26 ratos Wistar divididos em quatro grupos: T30 foi tratado com corticosterona até 29 dias de idade e morto no dia 30. T65 recebeu o mesmo tratamento, mas foi morto com 65 dias. Cada grupo tinha seu próprio controle (C30 e C65). Os animais foram tratados com injeções intraperitoneais diárias de corticosterona (2 mg/100g peso corporal) entre o 7 e 29 dias de vida. A bexigas foram removidas e processadas para inclusão em parafina. Foram estudados os seguintes elementos da parede vesical: Colágeno, músculo liso, fibras do sistema elástico, densidade vascular e do epitélio. Estes parâmetros foram analisados por métodos morfométricos, imunofluorescência e bioquímica. A densidade vascular na lâmina foi reduzida em 40% (p <0,05) no grupo T65. A organização do colágeno foi alterada em T30 e T65, apesar da concentração de colágeno total não ser alterada. O grupo T65 teve um aumento de fibras do sistema elástico. Não houve diferença na altura e na densidade de células epiteliais entre os grupos. Quanto à densidade de fibras musculares lisas, observamos um aumento de 19% (p <0,05) no grupo T65. A administração de corticosterona na fase pré-púbere provoca modificações estruturais na bexiga de ratos afetando de modo significativo o substrato morfológico sob qual repousa a fisiologia vesical. Foi observado também que estas modificações normalmente aparecem num tempo mais longo após o término do tratamento / The aim of this work was to analyze the structural and biochemical changes on the bladder wall resulting from the chronic treatment of prepubertal rats with high doses of corticosterone. This study included 26 male Wistar rats assigned to four groups: T30 was treated with corticosterone until 29 days of age and killed at day 30, while T65 group received the same treatment but was killed at day 65. Each group had its own control group (C30 and C65). For treated animals, daily intraperitoneal injections of corticosterone (2 mg/100g body weight) were administered between 7th and 29th day of life. Bladders were removed and collagen, smooth muscle, elastic fibers system, vascular density and epithelium were analyzed by morphometrical methods, immunofluorescence, and biochemistry.Vascular density in lamina propria was reduced by 40% (p<0.05) in group T65. Collagen organization was altered in T30 and T65, although total collagen concentration was unchanged. The T65 group had an increase in elastic system fibers. There was no difference in epithelial height and cell density between the groups. Concerning the smooth muscle fibers density we observed a 19% increase (p<0.05) in the T65 group. Our results show that prepubertal administration of corticosterone induces structural modifications in the bladder of rats

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:18Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-02-07Bitstream added on 2014-06-13T18:31:17Z : No. of bitstreams: 1 batista_eos_me_araca.pdf: 385042 bytes, checksum: a09da05bf31ae74120f8fbc231868087 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Foi avaliada a variação na concentração de GH em resposta a agonistas ou antagonistas de neurotransmissores durante o período pré-púbere em 10 novilhas da raça Nelore. A administração de um antagonista gabaérgico (picrotoxina, 0,18 mg/kg, I.V., amostras a cada 15 min por 10 h) aumentou a concentração de GH aos 10 meses de idade, mas não aos 14 e 17 meses. Tanto no grupo Picrotoxina, como no Controle a concentração média de GH foi maior aos 10 meses do que aos 17 meses de idade. O grupo picrotoxina apresentou aos 17 meses maior área de concentração de GH que o controle. O grupo picrotoxina apresentou aos 14 meses maior área total de picos que o controle. Aos 10 e 14 meses no grupo Picrotoxina houve maior amplitude de picos do que aos 17 meses. Bloqueando o receptor (D2) dopaminérgico (sulpiride, 0,59 mg/kg, SC, amostras a cada 15 min por 10 h) houve aumentou na concentração de GH aos 8 e 12 meses, mas não aos 16 meses de idade, comparado ao grupo controle. No grupo Sulpiride a concentração média de GH foi maior aos 8 e 12, comparado com os 16 meses de idade. Em relação à área total de secreção, área total de picos, e amplitude máxima de picos de secreção de GH não houve diferença entre os grupos. Aos 8 meses o grupo Sulpiride apresentou menor tempo, porém aos 12 meses o tempo foi maior para o primeiro pico em relação ao controle. O tempo para o primeiro pico foi menor aos 8 e 16 meses que aos 12 meses no grupo Sulpiride. No grupo controle aos 12 meses o tempo para o primeiro pico foi menor que aos 8 e 16 meses. Aos 16 meses o grupo Sulpiride apresentou maior freqüência de picos que o Controle. A aplicação de um estimulador alfa-adrenérgico (clonidina, 10 µg/kg, I.V., amostras a cada 15 min por 4 h) aumentou a concentração média de GH aos 8 e 15 meses em relação ao grupo Controle e em alguns intervalos aos 12 meses... / This study evaluated the GH concentration after neurotransmitter agonist or antagonists injection in prepubertal Nelore heifers at different ages. A gabaergic antagonist (picrotoxin, 0.18 mg/kg,I.V., samples every 15 min for 10h) promoted an increase on GH concentration at 10 months of age but not at 14 and 17 mo. In both Picrotoxin and Control groups GH average concentration was higher at 10 mo than at 17 month of age. At 17 mo the picrotoxin group had a larger GH concentration area than control. There was no difference among the groups on the time for the first GH surge, but at 14 mo the Picrotoxin group had a higher total peak area than control. At 10 and 14 mo the Picrotoxin group had an higher peak amplitude than at 17 months. Blocking the D2-dopaminergic receptor (Sulpiride 0.59 mg/kg, SC, samples every 15 min for 10 h) there was an increase on GH secretion at 8 and 12 months, but not at 16 mo of age, compared to control group. Inside Sulpiride group the average GH concentration was higher at 8 and 12 mo than at 16 month of age. For both total area, peaks total area, time for first peak, and peak maximal amplitude there was no difference among groups. The time for the first GH peak was lower for Sulpiride compared to Control group at 8 mo, but at 12 mo the time was higher than in Control. Inside Sulpiride group time was lower at 8 and 16 month compared to 12. In the control group time for the first peak was lower at 12 than 8 and 16 months. At 16 month the Sulpiride group had higher peak frequency than Control. An alpha adrenergic stimulation (Clonidine, 10 µg/kg, IV, samples every 15 min for 4 h) increased mean GH concentration at 8 and 15 months compared to Control group and at some intervals at 12 months. At 8 months Clonidine group had higher total secretion area, total peak area, maximum peak amplitude and lowe time for the first GH secretion peak, compared... (Complete abstract click electronic access below)

Orientador: Guilherme de Paula Nogueira / Banca: Cláudia Maria Bertan Membrive / Banca: Ciro Moraes Barros / Resumo: Foi avaliada a variação na concentração de GH em resposta a agonistas ou antagonistas de neurotransmissores durante o período pré-púbere em 10 novilhas da raça Nelore. A administração de um antagonista gabaérgico (picrotoxina, 0,18 mg/kg, I.V., amostras a cada 15 min por 10 h) aumentou a concentração de GH aos 10 meses de idade, mas não aos 14 e 17 meses. Tanto no grupo Picrotoxina, como no Controle a concentração média de GH foi maior aos 10 meses do que aos 17 meses de idade. O grupo picrotoxina apresentou aos 17 meses maior área de concentração de GH que o controle. O grupo picrotoxina apresentou aos 14 meses maior área total de picos que o controle. Aos 10 e 14 meses no grupo Picrotoxina houve maior amplitude de picos do que aos 17 meses. Bloqueando o receptor (D2) dopaminérgico (sulpiride, 0,59 mg/kg, SC, amostras a cada 15 min por 10 h) houve aumentou na concentração de GH aos 8 e 12 meses, mas não aos 16 meses de idade, comparado ao grupo controle. No grupo Sulpiride a concentração média de GH foi maior aos 8 e 12, comparado com os 16 meses de idade. Em relação à área total de secreção, área total de picos, e amplitude máxima de picos de secreção de GH não houve diferença entre os grupos. Aos 8 meses o grupo Sulpiride apresentou menor tempo, porém aos 12 meses o tempo foi maior para o primeiro pico em relação ao controle. O tempo para o primeiro pico foi menor aos 8 e 16 meses que aos 12 meses no grupo Sulpiride. No grupo controle aos 12 meses o tempo para o primeiro pico foi menor que aos 8 e 16 meses. Aos 16 meses o grupo Sulpiride apresentou maior freqüência de picos que o Controle. A aplicação de um estimulador alfa-adrenérgico (clonidina, 10 µg/kg, I.V., amostras a cada 15 min por 4 h) aumentou a concentração média de GH aos 8 e 15 meses em relação ao grupo Controle e em alguns intervalos aos 12 meses... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: This study evaluated the GH concentration after neurotransmitter agonist or antagonists injection in prepubertal Nelore heifers at different ages. A gabaergic antagonist (picrotoxin, 0.18 mg/kg,I.V., samples every 15 min for 10h) promoted an increase on GH concentration at 10 months of age but not at 14 and 17 mo. In both Picrotoxin and Control groups GH average concentration was higher at 10 mo than at 17 month of age. At 17 mo the picrotoxin group had a larger GH concentration area than control. There was no difference among the groups on the time for the first GH surge, but at 14 mo the Picrotoxin group had a higher total peak area than control. At 10 and 14 mo the Picrotoxin group had an higher peak amplitude than at 17 months. Blocking the D2-dopaminergic receptor (Sulpiride 0.59 mg/kg, SC, samples every 15 min for 10 h) there was an increase on GH secretion at 8 and 12 months, but not at 16 mo of age, compared to control group. Inside Sulpiride group the average GH concentration was higher at 8 and 12 mo than at 16 month of age. For both total area, peaks total area, time for first peak, and peak maximal amplitude there was no difference among groups. The time for the first GH peak was lower for Sulpiride compared to Control group at 8 mo, but at 12 mo the time was higher than in Control. Inside Sulpiride group time was lower at 8 and 16 month compared to 12. In the control group time for the first peak was lower at 12 than 8 and 16 months. At 16 month the Sulpiride group had higher peak frequency than Control. An alpha adrenergic stimulation (Clonidine, 10 µg/kg, IV, samples every 15 min for 4 h) increased mean GH concentration at 8 and 15 months compared to Control group and at some intervals at 12 months. At 8 months Clonidine group had higher total secretion area, total peak area, maximum peak amplitude and lowe time for the first GH secretion peak, compared... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Dans les dernières années, plusieurs débats autour de la transition sociale à l’enfance ont émergé tant des sphères publiques, cliniques et scientifiques. Or, peu d’écrits mettent en lumière les expériences de transition de jeunes enfants, et plus particulièrement de leur point de vue. Ainsi, ce projet de mémoire vise à explorer les expériences de transition d’enfants trans prépubères ayant accès à des cliniques transaffirmatives au Canada selon leurs perspectives ainsi que celles de leurs parents. À partir de données extraites d’une recherche plus large menée par Annie Pullen Sansfaçon et plusieurs autres co-chercheur·e·s au Canada, nous avons analysé huit (N=8) entretiens qualitatifs semi-dirigés menés auprès de quatre enfants trans prépubères et de leurs parents en contexte clinique transaffirmatif. L’analyse des entretiens s’est appuyée sur la théorie de la reconnaissance d’Axel Honneth et l’analyse thématique (AT). Ainsi, cinq thèmes qui décrivent les expériences de transition des enfants trans prépubères de notre échantillon ont été identifiés : (1) se dévoiler à ses parents en étant simplement soi-même; (2) le processus de transition en dehors de la maison : un processus de négociation et d’accompagnement; (3) l’école comme principal lieu de tensions; (4) s’affirmer à travers le processus de transition : répercussions des obstacles et retombées positives; et (5) se projeter dans l’avenir : la transition médicale. La compréhension de ces expériences de transition permet de mieux cadrer les interventions des professionnel·le·s dans un contexte d’affirmation des identités et des expressions de genre, d’accompagnement des familles et de défense des droits des enfants dans différentes institutions. / In recent years, several debates around social transitions in early childhood have emerged from public, clinical and scientific spheres. However, little has been published about the children’s transition experiences, particularly from their perspectives. Thus, this research project aims to explore the transition experiences of trans prepubertal children who have access to gender- affirming clinics in Canada from their and their parents’ perspectives. Using data extracted from a larger study conducted by Annie Pullen Sansfaçon and several other co-investigators in Canada, we analysed eight (N=8) semi-structured qualitative interviews conducted with four trans prepubertal children and their parents in a gender-affirming clinical setting. Data analysis was based on Axel Honneth’s recognition theory as well as on thematic analysis (TA). We identified five themes that describe the transition experiences of the trans prepubertal children in our sample: (1) revealing oneself to their parents by simply being themselves; (2) the transition process outside of the home: a process of negotiation and accompaniment; (3) school as the main site of tensions; (4) asserting oneself through the transition process: repercussions of obstacles and positive outcomes; and (5) looking ahead into the future: the medical transition. Understanding these transition experiences allows us to better frame the interventions of professionals in a context of affirming gender identities and expressions, accompanying families and defending children’s rights in different institutions.

Com o objetivo de semi-quantificar a expressão gênica para receptores de gonadotrofinas nas células de folículos dominantes em animais pré-púberes (bezerras) das raças Nelore e Marchigiana e novilhas púberes da raça Nelore, buscando diferenças que possibilitem a procura de respostas para a deficiência da competência de desenvolvimento dos oócitos de animais pré-púberes que permitam a utilização destes em programas de melhoramento genético animal, foram utilizados 8 animais, sendo três bezerras Nelore, três bezerras Marchigiana, com 7 meses de idade, e duas novilhas Nelore, com 25 meses de idade. Foi realizado acompanhamento da onda folicular através de ultra-sonografia por dois meses, e os animais foram abatidos no momento que o folículo dominante apresentava diâmetro máximo (8, 10 e 14 mm, respectivamente). Folículos dominantes foram dissecados e isolados, e foi feita extração de RNA total. Foram feitas quatro reações de síntese de cDNA a partir de cada amostra. Para análise da expressão gênica semi-quantitativa, foram realizadas reações de Duplex-PCR, utilizando-se dois oligonucleotídeos iniciadores em cada reação, um para gene controle, o gapdh, e outro para o gene alvo, receptor do hormônio folículo estimulante ou receptor do hormônio luteinizante. Estas reações foram realizadas em triplicata a partir de cada fonte de cDNA de cada amostra, e os produtos foram aplicados em gel de poliacrilamida, e fotografados. Os resultados foram obtidos a partir da razão entre a intensidade da banda do gene alvo e a intensidade da banda do gene controle, e os valores médios foram analisados estatisticamente. Foi encontrada menor expressão relativa do gene do receptor de LH em bezerras da raça Nelore quando comparadas com as novilhas da raça Nelore e as bezerras da raça Marchigiana. Foi detectada a presença de um splicing alternativo para o gene do LHr, que apresentou comportamento semelhante ao gene padrão. Não foi encontrada diferença significativa na expressão do gene do FSHr entre os grupos estudados. Os resultados sugerem uma maior importância do LH nos estágios finais de desenvolvimento folicular, demonstrado aqui pela menor expressão relativa de lhr nos folículos dominantes de bezerras Nelore em relação às novilhas púberes, que pode ser um dos motivos para o baixo potencial de desenvolvimento dos oócitos destes animais após a fertilização in vitro / With the objective to semiquantify the gene expression for gonadotrophins receptors in dominant follicles in Nelore and Marchigiana prepubertal heifers and Nelore adult cows, being searched differences that make possible the search of answers for the low developmental potential of oocytes from prepubertal heifers that allow the use of these in programs of animal genetic improvement, had been used 8 animals, being three Nelore heifers, three Marchigiana heifers, with 7 months of age, and two Nelore heifers, with 25 months of age. Accompaniment of the follicular wave was carried through daily ultrasonografic exams for two months, and the animals had been slaughtered at the moment that dominant follicle presented maximum diameter (8, 10 and 14 mm, respectively). Dominant follicles had been dissected and isolated, and extraction of total RNA was performed. Four reactions of synthesis of cDNA from each sample had been made. For analysis of the semi-quantitative gene expression, reactions of Duplex-PCR had been carried through, using themselves two initiating oligonucleotídeos in each reaction, one for housekeeping gene, gapdh, and another one for the target gene, fshr and lhr. These reactions had been carried through in third copy from each source of cDNA of each sample, and the products had been applied in poliacrilamida gel electrophoresis, and photographed. The results had been gotten from the reason enter the intensity of the band of the target gene and the intensity of the band of the housekeeping gene, and the average values had been analyzed in a statistical software. Lower relative expression of lhr in Nelore heifers was found when compared with the Nelore adult cows and the Marchigiana heifers. An alternative splicing for lhr was detected, that presented similar behavior to the gene standard. Significant difference in the expression of the gene of the FSHr between the studied groups was not found. The results suggest a importance of the LH in the final periods of follicular development, demonstrated for the lower relative expression of lhr in the dominant follicles of Nelore heifers in relation to the adult cows in this study, that can after be the one of the reasons for the low developmental capacity of oocytes of these animals after in vitro fertilization

Submitted by (lucia.rodrigues@ufrpe.br) on 2016-06-09T11:30:06Z No. of bitstreams: 1 Laise de Souza Elias.pdf: 816284 bytes, checksum: 5cfeb66cf7be781496cd7de48b41b8e1 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-09T11:30:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Laise de Souza Elias.pdf: 816284 bytes, checksum: 5cfeb66cf7be781496cd7de48b41b8e1 (MD5) Previous issue date: 2013-02-08 / The indiscriminate use of anabolic androgenic steroids (AAS) has becoming part of young and practitioners of physical activities’ daily life, especially at gyms and other places where people practice some exercise. First, It had only male users. It also has reached a female audience. Some unwanted collateral effects in adult women are result from the AAS using, however, the physiological effects caused by the indiscriminate use of AAS by female adolescents in the puberty beginning are still unknown, and there’s no study about the permanency of possible effects on the reproductive life. Thus, this study analyzed the stanozolol effect in prepubertal female rats on fertility using the following parameters: estrous cyclicity, vaginal opening, sex hormones and their receptors, implantation sites number, ovarian and placental histology, besides the weight and angiogenesis and these organs. 20 female albino rats were used, and they were submitted to the following treatments: Control group - prepubertal female rats sesame oil treated and Stanozolol group - prepubertal female rats stanozolol treated, the stanozolol was used in an only subcutaneous injection 5mg/Kg with sesame oil 1mL/kg as vehicle, in the twenty-first day after birth. Results showed that even used in low quantities and only once stanozolol promoted an earlier vaginal opening, significant increase in the proestrus and estrus frequency and decline in the metestrous and diestrus, an estrogenic levels increase and reduction of progestagen levels, expression decrease from estrogen alpha receptor in the ovaries, reduction of implantation sites, ovarian and placental weight increase, besides the ovarian and placental VEGF higher expression. Therefore, the study concluded that the prepubertal stanozolol using acts as an endocrine disruptor on rats reproduction. / O uso indiscriminado de esteróides anabolizantes androgênicos (EAA) vem fazendo parte da rotina de jovens e praticantes de atividade física, principalmente em academias ou centro de práticas esportivas. O que antes era restrito apenas para o público masculino, tem alcançado também o público feminino. Esse uso tem resultado em uma série de efeitos colaterais indesejáveis em mulheres adultas, no entanto, os efeitos fisiológicos do abuso destes por adolescentes do sexo feminino no início da puberdade são ainda desconhecidos, e não há estudo de que os possíveis efeitos possam ser permanentes afetando sua vida reprodutiva. Assim, a presente pesquisa analisou o efeito do estanozolol administrado em ratas prépúberes sobre a fertilidade através dos seguintes parâmetros: ciclicidade estral, abertura vaginal, hormônios sexuais, receptores de estrógenos, número de sítios de implantação, histologia ovariana e placentária, além do peso e angiogênese nesses órgãos. Foram utilizadas 20 ratas albinas, as quais foram submetidas aos seguintes tratamentos: ratas pré-púberes tratadas com óleo de gergelim (GI) e ratas prépúberes tratadas com estanozolol (GII), administrado em uma única injeção s.c. de 5mg/Kg em óleo de gergelim (1mL/kg) como veículo, no vigésimo primeiro dia após nascimento. Os resultados mostraram que o estanozolol mesmo administrado em dose muito baixa e numa única vez promoveu abertura vaginal precocemente, aumento significativo na frequência das fases de proestro e estro e declínio das fases de metaestro e diestro, elevação dos níveis estrogênicos e redução dos níveis progestagênicos, redução da expressão do receptor-α estrogênico nos ovários, redução do número de sítios de implantação, aumento do peso ovariano e placentário, além da maior expressão do VEGF placentário e ovariano. Assim, conclui-se que o estanozolol administrado antes da puberdade atua como um desregulador endócrino da reprodução em ratas.

Esta investigação tem a finalidade estudar experimentalmente os efeitos do ultra-som pulsado de baixa intensidade sobre a espermatogênese de ratos pré-púberes e adultos. Foram utilizados 40 ratos machos da raça Wistar, sendo 20 pré-púberes e 20 adultos, os quais tiveram os testículos estimulados por 15 minutos durante 10 dias consecutivos. Cada grupo experimental constou de 10 animais pré-púberes ou adultos, estimulados com o ultra-som pulsado de baixa intensidade ou não estimulados. Administrou-se Colchicina, 6 horas antes do sacrifício dos animais com a finalidade de bloquear a divisão das células em metáfase para facilitar a avaliação do ciclo espermatogenético. Mediante morfometria estimou-se as áreas dos túbulos seminíferos e fez-se a avaliação dos estadios do ciclo espermatogenético quando foi constatado um aumento significativo das áreas dos túbulos seminíferos dos animais estimulados. O ciclo espermatogenético de ratos pré-púberes e adultos foi avaliado mediante contagens de associações celulares do ciclo nos estadios VII e VIII e XIV, correspondentes ao fim e início de cada ciclo. Houve aumento temporal do ciclo espermatogenético por apresentar maior número de associações com características dos estadios VIII significando acentuada maturidade de espermatozóides nos ratos pré-púberes estimulados. Os testículos dos animais adultos estimulados apresentaram aumento de peso em relação aos dos controles, exibindo uma diferença significativa. Nossos resultados são compatíveis com a hipótese de que o ultra-som pulsado de baixa intensidade estimula o aumento do peso dos testículos dos ratos adultos e das áreas dos túbulos seminíferos, bem como acelerando o ciclo espermatogenético em ratos pré-púberes. / This is an experimental study of the effects of low intensity pulsed ultrasound on the spermatogenesis of prepubertal and adult male rats. Forty male Wistar rats - twenty prepubertal and twenty adults -, whose testicles were stimulated for fifteen minutes for ten consecutive days were studied. Each experimental group was composed of ten prepubertal or adult animals, stimulated with low intensity pulsed ultrasound or not. Six hours before killing, the rats were given Colchicine to block the division of metaphasic cells, in order to facilitate the assessment of the spermatogenetic cycle. The area of the seminiferous tubule was done estimated by morphometry and the stages of spermatogenetic cycle were assessed, showing a significant increase of the areas of the seminiferous tubules of the stimulated animals. The spermiogenesis of prepubertal and adult rats was assessed through counts of cell associations in the stages VII and VIII and XIV, corresponding to the end and beginning of each cycle. There was a temporal increase in the spermatogenetic cycle due to a higher number of the associations with stage VIII characteristics, which means accentuated sperm cell maturity of the stimulated prepubertal rats. The testicles of the stimulated animals were weight increase regarding the of the control animals, showing a significant difference. Our results are compatible with the hypothesis that the low intensity pulsed ultrasound stimulates the increase of the testicle weight, the rats adults, and the area of the seminiferous tubules as well as accelerating the spermatogenetic cycle in rats prepubertal.

Com o objetivo de semi-quantificar a expressão gênica para receptores de gonadotrofinas nas células de folículos dominantes em animais pré-púberes (bezerras) das raças Nelore e Marchigiana e novilhas púberes da raça Nelore, buscando diferenças que possibilitem a procura de respostas para a deficiência da competência de desenvolvimento dos oócitos de animais pré-púberes que permitam a utilização destes em programas de melhoramento genético animal, foram utilizados 8 animais, sendo três bezerras Nelore, três bezerras Marchigiana, com 7 meses de idade, e duas novilhas Nelore, com 25 meses de idade. Foi realizado acompanhamento da onda folicular através de ultra-sonografia por dois meses, e os animais foram abatidos no momento que o folículo dominante apresentava diâmetro máximo (8, 10 e 14 mm, respectivamente). Folículos dominantes foram dissecados e isolados, e foi feita extração de RNA total. Foram feitas quatro reações de síntese de cDNA a partir de cada amostra. Para análise da expressão gênica semi-quantitativa, foram realizadas reações de Duplex-PCR, utilizando-se dois oligonucleotídeos iniciadores em cada reação, um para gene controle, o gapdh, e outro para o gene alvo, receptor do hormônio folículo estimulante ou receptor do hormônio luteinizante. Estas reações foram realizadas em triplicata a partir de cada fonte de cDNA de cada amostra, e os produtos foram aplicados em gel de poliacrilamida, e fotografados. Os resultados foram obtidos a partir da razão entre a intensidade da banda do gene alvo e a intensidade da banda do gene controle, e os valores médios foram analisados estatisticamente. Foi encontrada menor expressão relativa do gene do receptor de LH em bezerras da raça Nelore quando comparadas com as novilhas da raça Nelore e as bezerras da raça Marchigiana. Foi detectada a presença de um splicing alternativo para o gene do LHr, que apresentou comportamento semelhante ao gene padrão. Não foi encontrada diferença significativa na expressão do gene do FSHr entre os grupos estudados. Os resultados sugerem uma maior importância do LH nos estágios finais de desenvolvimento folicular, demonstrado aqui pela menor expressão relativa de lhr nos folículos dominantes de bezerras Nelore em relação às novilhas púberes, que pode ser um dos motivos para o baixo potencial de desenvolvimento dos oócitos destes animais após a fertilização in vitro / With the objective to semiquantify the gene expression for gonadotrophins receptors in dominant follicles in Nelore and Marchigiana prepubertal heifers and Nelore adult cows, being searched differences that make possible the search of answers for the low developmental potential of oocytes from prepubertal heifers that allow the use of these in programs of animal genetic improvement, had been used 8 animals, being three Nelore heifers, three Marchigiana heifers, with 7 months of age, and two Nelore heifers, with 25 months of age. Accompaniment of the follicular wave was carried through daily ultrasonografic exams for two months, and the animals had been slaughtered at the moment that dominant follicle presented maximum diameter (8, 10 and 14 mm, respectively). Dominant follicles had been dissected and isolated, and extraction of total RNA was performed. Four reactions of synthesis of cDNA from each sample had been made. For analysis of the semi-quantitative gene expression, reactions of Duplex-PCR had been carried through, using themselves two initiating oligonucleotídeos in each reaction, one for housekeeping gene, gapdh, and another one for the target gene, fshr and lhr. These reactions had been carried through in third copy from each source of cDNA of each sample, and the products had been applied in poliacrilamida gel electrophoresis, and photographed. The results had been gotten from the reason enter the intensity of the band of the target gene and the intensity of the band of the housekeeping gene, and the average values had been analyzed in a statistical software. Lower relative expression of lhr in Nelore heifers was found when compared with the Nelore adult cows and the Marchigiana heifers. An alternative splicing for lhr was detected, that presented similar behavior to the gene standard. Significant difference in the expression of the gene of the FSHr between the studied groups was not found. The results suggest a importance of the LH in the final periods of follicular development, demonstrated for the lower relative expression of lhr in the dominant follicles of Nelore heifers in relation to the adult cows in this study, that can after be the one of the reasons for the low developmental capacity of oocytes of these animals after in vitro fertilization