Made available in DSpace on 2014-06-11T19:24:22Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-11-19Bitstream added on 2014-06-13T19:51:58Z : No. of bitstreams: 1 silva_lb_me_arafcl.pdf: 658224 bytes, checksum: 0ac1ea3193ef9187360aa1f91511ca4b (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O objetivo central foi investigar o Estado do conhecimento referente à avaliação formativa, com foco especial nos mecanismos de Recuperação e Reforço Escolar, no período entre 1999 e 2009. Para análise da produção científica na área realizou-se um levantamento bibliográfico das teses e dissertações defendidas nos Programas de Pós- Graduação da USP, UNESP, UNICAMP e PUC/SP. O objetivo específico foi analisar as contribuições desta produção para esclarecer os avanços e os problemas decorrentes da implantação das novas políticas de avaliação na melhoria da qualidade do ensino e no desenvolvimento dos alunos, em função das novas práticas avaliativas que têm sido instaladas no interior da escola. Na identificação das teses e dissertações do período foram utilizadas as seguintes palavras-chaves: Progressão Continuada, Avaliação Formativa, Reforço Escolar e Recuperações de Aprendizagem. O levantamento nos bancos de dados da CAPES (Coordenação de Aperfeiçoamento do Ensino Superior), ANPED (Associação Nacional de Pós- Graduação e Pesquisa em Educação) e BTDB (Biblioteca Digital Brasileira de Teses e Dissertações), e também nas bibliotecas depositárias como UNICAMP, UNESP, PUC/SP e FEUSP levou à seleção de 30 dissertações de mestrado e 7 teses de doutorado. Após inspeção dos resumos procedeuse à leitura e análise integral dos trabalhos e à re-elaboração dos resumos com foco nos objetivos, metodologia, dados coletados e conclusões. Do exame exaustivo dos trabalhos emergiram três categorias de análise: Dimensão político-social da Avaliação, A prática da avaliação no Regime de Progressão Continuada e Representações sobre a avaliação no Regime de Progressão Continuada. As pesquisas produzidas permitem desvelar como vêm se desenvolvendo os processos e mecanismos de avaliação instituídos oficialmente... / The main objective was to investigate the state of knowledge regarding the formative evaluation, with particular focus on mechanisms for Recovery and Enhancement School, between 1999 and 2009. For analysis of scientific production in the area held a bibliography of theses and dissertations in the Graduate Program at USP, UNESP, UNICAMP and PUC / SP. The specific objective was to examine the contributions of this production to clarify the progress and problems arising from the implementation of new assessment policies in improving the quality of teaching and student development, as new assessment practices that have been installed inside the school. The identification of theses and dissertations of the period we used the following keywords: Continued Progression, Formative Evaluation Reinforcement Learning School and Recoveries. The survey in the database of CAPES (Coordination for the Improvement of Higher Education), ANPED (National Association of Graduate Studies and Research in Education) and BTDB (Brazilian Digital Library of Theses and Dissertations), and depository libraries as well as in Campinas, UNESP, PUC / SP FEUSP and led to the selection of 30 master's dissertations and doctoral theses 7. After inspection of the abstracts proceeded to read and comprehensive analysis of the work and re-written abstracts focusing on the objectives, methodology, data collected and conclusions. Exhaustive examination of the work revealed three categories of analysis: politicalsocial dimension of assessment, the assessment in the regime of continued progression and Representation on the evaluation scheme in the continued progression. The research produced allow unveiling is unfolding processes and evaluation mechanisms established officially as founding elements of the regime of continued progression within the school, identify the factors that shape developments and / or critical... (Complete abstract click electronic access below)

Submitted by JANAÍNA DE SOUZA SILVA null (jana_naina04@yahoo.com.br) on 2018-01-26T20:39:33Z No. of bitstreams: 1 Versão On Line revisada.pdf: 3602467 bytes, checksum: fe9103dd8e2d71223ba15f258ca06f87 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Paula Santulo Custódio de Medeiros null (asantulo@rc.unesp.br) on 2018-01-29T18:09:29Z (GMT) No. of bitstreams: 1 silva_js_me_rcla.pdf: 2588702 bytes, checksum: 64087c97d33b3b27453dfc4e05e0e6f8 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-01-29T18:09:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 silva_js_me_rcla.pdf: 2588702 bytes, checksum: 64087c97d33b3b27453dfc4e05e0e6f8 (MD5) Previous issue date: 2016-10-07 / Esta dissertação focaliza o trabalho pedagógico realizado no 2º ano do ciclo alfabetização. A seleção deste momento do ensino fundamental como objeto de estudo deve-se ao enfoque e a continuidade do ensino para a progressão da alfabetização. Em pesquisa de campo, buscou-se focalizar a inserção da progressividade nas práticas pedagógicas e nos discursos dos professores. À luz do referencial teórico sobre a problemática do ensino em ciclos, a pesquisa foi realizada com 9 professoras, de 9 escolas municipais que lecionam no 2º ano do ensino fundamental em Limeira – SP. A escolha das escolas para a realização da pesquisa ocorreu com base nos resultados do ANA/2014, divulgados pelo INEP em 2015. Destas escolas, três apresentaram os maiores escores, três apresentaram os menores escores e três apresentaram os escores correspondentes ao desempenho mediano na ANA/2014. A seleção das professoras, foi feita por sorteio utilizando a tabela de Fisher e Yates (1957). A coleta de dados deu-se mediante observações de aulas e entrevistas com as professoras, (gravadas em áudio e transcritas). As observações foram registradas (em áudio e/ou diário de campo). Nos resultados obtidos destacam-se as diferenças quanto à abordagem dada à continuidade da aprendizagem e progressão no processo de alfabetização; práticas essas, que dariam concretude ao ensino em ciclo, preconizado pelo PNAIC. Nestes, destaca-se a ênfase dada pelo ensino às atividades correspondentes ao eixo curricular “análise linguística: aprendizagem do sistema de escrita” em detrimento dos eixos como leitura, e produção textual escrita. / This dissertation focuses on the pedagogical work conducted in the 2nd year of literacy education. The selection of this moment of elementary school, as study subject, is due to its focus and continuousness of the teaching for progressive literacy. Through a field research, we sought to focus on the inclusion of progressivity in the pedagogical practices and in the teachers’ lectures. Based on the theoretical framework on the issue of literacy education and education in cycles, the survey was conducted with nine female teachers who teach in the 2nd year of elementary school in the city of Limeira – SP, Brazil. The selection of the schools where the research took place, was based on the results of the National Literacy Assessment (ANA)/2014 released by the National Institute of Studies and Research (INEP) in 2015. Thus, a total of nine schools were selected, three presented the highest scores, three had the lowest scores and three had the scores corresponding to the average performance in the ANA/2014. For the teachers’ selection, we used the statistical table of Fisher and Yates (1957). Data collection was carried out through classroom observations (five consecutive academic days) and interviews with teachers (audio-recorded and transcribed). The results were audio-recorded or registered in a field diary. The obtained results reveal the differences regarding the approach towards continuous learning and progression in the literacy process; the application of such methods would give more concreteness to the teaching in stages, according to the current official curriculum guidelines (PNAIC). In these guidelines emphasis is given to teaching activities corresponding to the axis “linguistic analysis: learning of the writing system" rather than themes as reading and written production.

Esta pesquisa teve por objetivo verificar como é que o aluno consegue por si próprio manipular os recursos, tais como gráficos disponibilizados pelo software GeoGebra, para auxiliar nas práticas diárias de sala de aula, mais especificamente no que tange a construir a conexão entre as progressões aritméticas e as funções afins, bem como entre as progressões geométricas e as funções exponenciais. Este software possibilita fazer análises a partir de diferentes registros tais como: gráficos, tabelas e registros algébricos, seguindo a teoria dos registros semióticos de Duval. Como metodologia, desenvolvemos roteiros de atividades com duas turmas do 2º ano do Ensino Médio do Colégio Estadual Visconde de Bom Retiro. Os alunos foram convidados a construir, verificar e interpretar seus próprios resultados, refletindo e analisando estratégias para responder à questão: Quais relações os alunos conseguem evidenciar, através da comparação entre gráficos (obtidos com o GeoGebra) de funções afins e exponenciais, com progressões aritméticas e geométricas, respectivamente? Ao final da pesquisa, os registros coletados possibilitaram a validação qualitativa da proposta, mostrando que os alunos avançaram na compreensão dos conteúdos abordados. / The aim of this research was to verify how the student can himself manipulate the resources, such as plots made available by the GeoGebra software, to aid in the daily classroom practices, specifically in the construction of the connection between arithmetic progressions and linear functions, as well as between geometric progressions and exponential functions. This software makes possible to analyze from different registers such as: plots, tables and algebraic records, following the theory of semiotic records of Duval. Our methodology consisted in developing activity scripts with students of two classes of the 2nd year of the High School of Visconde de Bom Retiro State College. More specifically, they were asked to build, verify and interpret their own results, speculating and analyzing strategies to answer the question: What relations are the students able to highlight through comparing plots (obtained with GeoGebra) of linear and exponential functions, with arithmetic progressions and geometric, respectively? At the end of the research, the collected records made possible the qualitative validation of the proposal, showing that the students improved their understanding of the focused contents.

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / Lectinas sÃo proteÃnas que apresentam afinidade por carboidratos especÃficos. E-xiste um considerÃvel interesse pelos carboidratos de superfÃcie celular posto que estÃo relacionados com fenÃmenos de diferenciaÃÃo e maturaÃÃo. Durante a transformaÃÃo neoplÃsica ocorrem alteraÃÃes da membrana celular, principalmente na composiÃÃo de carboidratos, que determinam caracterÃsticas especiais Ãs cÃlulas. Lectinas tÃm sido utili-zadas como ferramentas em muitas Ãreas de investigaÃÃo diagnÃstica, especialmente no estudo dos glicoconjugados celulares. No presente estudo investigou-se a expressÃo de glicoconjugados especÃficos para Artocarpus incisa (frutalina) em vÃrios estÃgios histolÃ-gicos de progressÃo tumoral na mama. Foram incluÃdas amostras de epitÃlio normal, metaplasia apÃcrina, hipreplasia ductal tÃpica e atÃpica, carcinoma ductal in situ, carci-noma ductal invasivo e metÃstase ganglionar. As amostras foram marcadas utilizando o mÃtodo da EstreptoâAvidinaâBiotinaâPeroxidase com duas tÃcnicas diferentes: a frutali-na, como sonda primÃria e o anticorpo anti-frutalina como ponte (TÃcnica I); anticorpo anti-frutalina como sonda primÃria (TÃcnica II). Em ambas as tÃcnicas ocorreu coloraÃÃo mais forte no epitÃlio alterado do que no normal, sendo o predomÃnio da coloraÃÃo membranar. Muitos dos carcinomas ductais in situ tambÃm coraram tanto a membrana quanto a citoplasma, pela TÃcnica I; com a tÃcnica II, o predomÃnio foi de citoplasma. Todos os carcinomas ductais invasivos coraram fortemente, com ligeira predominÃncia do citoplasma, quando foi utilizada a TÃcnica I. Um nÃmero menor de casos corou com a TÃcnica II. Com esta tÃcnica nenhuma das hiperplasias atÃpicas corou a membrana, aliÃs, a partir das hiperplasias atÃpicas houve um decrÃscimo na marcaÃÃo das membranas e um ganho na marcaÃÃo do citoplasma. Este trabalho mostrou que a frutalina à um mar-cador de cÃlulas epiteliais. Revela que durante a progressÃo tumoral houve modificaÃÃo de glicoconjugados da superfÃcie celular expondo resÃduos de galactose. O anticorpo anti-frutalina marcou cÃlulas epiteliais, aparentemente de forma especÃfica, porÃm sem-pre em menor nÃmero de casos. / Lectins are proteins which bind specifically to carbohydrates. Recently consider-able interest has been devoted to cell surface carbohydrates, since they are related to differentiation and maturation phenomena. Neoplastic transformation in cells is associ-ated to altered cell surface membranes, particularly with an abnormal composition. This may determine of neoplastics cell characteristics. Lectins have been used as tools in many areas of diagnostic investigation especially related to changes in the expressions of membrane and cytoplasmatic carbohydrates. In this study it has been examined the ex-pression of glycoconjugates especific to Artocarpus incisa lectin (frutalina) in various his-tological stages of tumor progression in the breast tissues. These included normal epithe-lium, apocrine metaplasia, ductal hyperplasia, without and with atypia, ductal carcino-ma in situ, invasive ductal carcinoma and nodal metastasis. This tissue was stained to bind to the lectin using two different histochemical techniques: frutalina reacting direct-ly (Technique I) and antibody anti-frulalina as a bridge; antibody anti-frutalina reacting directly (Technique II). In both techniques the staining was more frequent in malignant than in benign breast epithelium. Most of the ductal carcinomas in situ stained the mem-brane as well as the citoplasm. All invasive ductal carcinomas were stained by frutalina. During the tumor progression there occurred modifications on the glycoconjugate cellu-lar surfaces showing galactose residues. The most interesting aspect of this study was that the antibody anti-frutalina did not stained any of the cases of atypical hyperplasia.

Orientador: Luis Enrique Aguilar / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Educação / Made available in DSpace on 2018-08-05T01:25:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Bertier_VaniaLuciaLopes_D.pdf: 41614323 bytes, checksum: 2ee2a0406edeab0a9e766443143c14f8 (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: Este trabalho é o resultado de uma pesquisa levada a efeito em quarenta e cinco escolas de uma Delegacia de Ensino na cidade de São Paulo. Trata-se de um estudo sobre o processo de implementação de políticas educacionais através das representações de professores e alunos - um dos fatores intervenientes na apropriação dos conceitos necessários à consecução das ações destinadas ao alcance de seus objetivos. A progressão continuada, intervenção realizada pela Secretaria da Educação do Estado de São Paulo, a partir de 1998, como estratégia para viabilizar a universalização da educação básica e eliminar o fracasso escolar, forneceu o pano de fundo para a análise de algumas categorias de representações presentes no universo escolar. As representações de implementadores e destinatários foram colhidas em dois momentos diferentes: o primeiro, antes da implementação da política, através do levantamento de suas expectativas; o segundo, quatro anos depois, para aprofundar as impressões iniciais, com um grupo menor de participantes. A interpretação dos dados foi realizada com o apoio da Teoria das Representações e da Sociologia do Cotidiano de Henri Lefebvre. Pretendeu-se, por um lado, apreender o novo, a mudança, a ruptura e também a resistência dos participantes; de outro, o potencial de transformação da própria política / Abstract: This paper is the result of a survey made in forty-five schools related to one of the Oflices of Education in the City of São Paulo. It is a study of the implementation of educational policies through the representation of teachers and students - one of the intervening factors to acquire the concepts required to carry out the action intended to attain the objectives. The so-called " progressão continuada" [unstopped progression], an action that has been implemented by the Department of Education of the State of São Paulo since 1998, as a strategy to enable basic education for alI and to do away with student failure, was the background for the evaluation of some representation categories present in the school universe. Representations of policy introducers and target population were collected at two different moments: first, before the implementation, as an expectation survey, and second, four years later, to get a better grasp of a smaller group of participants. Data interpretation was supported by Renri Lefebvre's Theory of Representations and Daily Life Sociology. The intended result was to capture what was new, what changed, the rupture and the resistance on the part of participants, on the one hand, and, on the other hand, the policy's potential for change / Doutorado / Politicas de Educação e Sistemas Educativos / Doutor em Educação

Orientador: Sergio Antonio da Silva Leite / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Educação / Made available in DSpace on 2018-08-15T03:51:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Sirino_MarisadeFatima_D.pdf: 1563751 bytes, checksum: 2a1997995ce90a5fd0a3bd938d5b1ab4 (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: A presente pesquisa, realizada em uma escola pública estadual de Ensino Fundamental do Ciclo I, tem como objetivo identificar, descrever e analisar os atuais processos de exclusão intraescolar, possibilitando: ampliar o conhecimento sobre o assunto; compreender e apreender como as práticas, ações, representações e fazeres cotidianos têm reforçado e legitimado mecanismos de exclusão; desvelar as novas/velhas formas que o fracasso escolar está assumindo em nossas escolas. As políticas públicas implantadas nos últimos anos no Estado de São Paulo, com a finalidade de combater a exclusão e o fracasso escolar, tiveram um forte impacto no cotidiano escolar, principalmente porque reorganizaram o ensino em ciclos de progressão continuada, suprimindo a reprovação ao longo do ciclo e colocando a avaliação como central para a garantia do seu sucesso. Com isso, a evasão e repetência, até então alarmantes, diminuíram significativamente, mas a permanência do aluno na escola colocou em evidência um problema até então invisível: um grande contingente de alunos permanece na escola, mas não tem o aprendizado garantido. Este contingente de alunos passou a ser denominado de alunos que passam sem saber, tornando imprescindível o questionamento dos mecanismos intra-escolares produtores e mantenedores do fracasso e da exclusão escolar. Para a investigação do cotidiano escolar, optou-se pela pesquisa do tipo etnográfico que permite uma apreensão mais densa desse cotidiano. Desta forma, acompanhamos o cotidiano da escola pelo período de 1 ano letivo, realizando observações nas salas de aulas, aulas de reforços, reuniões de Conselho de Classe e, em outros espaços e eventos da escola, realizamos também entrevistas com professores e alunos. A análise dos dados permitiu a construção de 3 núcleos de análise - Práticas Pedagógicas, Reforço Escolar e Conselho de Classe - revelando a persistência de mecanismos excludentes no interior da escola. Em relação às Práticas Pedagógicas, observou-se que as concepções de ensino aprendizagem e avaliação não sofreram modificações ao longo da vigência da Progressão Continuada, prevalecendo o caráter seletivo e excludente dessas práticas. Em relação ao Reforço Escolar e ao Conselho de Classe - mecanismos criados, teoricamente, para incluir - notou-se que têm se constituído em elementos de dupla exclusão, pois funcionam para reforçar as idéias e preconceitos em relação aos alunos que apresentam problemas escolares. Desta forma, conclui-se que, apesar de a escola ter democratizado o acesso e a permanência, as condições necessárias para que essa democratização ocorra também em termos de aprendizagem e acesso ao conhecimento, ainda não foram conquistadas. / Abstract: This research, carried out in a primary public school, aims to identify, describe and analyze the current processes of intra-school exclusion, enabling: to increase knowledge about the subject; to understand and apprehend how the practices, actions, representations and daily activities have been reinforcing and legitimizing mechanisms of exclusion; to uncover the new/old shapes that the school failure has been taking in our schools. The public politics recently implemented in the state of São Paulo, with the aim of contending the exclusion and the school failure, have had a strong impact in the school routine, mainly because they reorganized the teaching process in cycles of continuous progression, extinguished failure through the cycle and placed evaluation as a central issue in order to guarantee its success. Then, the so far alarming evasion and failure significantly decreased, but the student's permanence at school evidenced an invisible problem until that moment: a great amount of students remains at school, but they do not have any guarantee of learning. This number of students has been identified as the students who are approved without knowing anything, what made necessary to put into question the intraschool mechanisms which produce and maintain the school failure and exclusion. In order to investigate the school routine, we decided to apply an ethnographic research which allows a deeper apprehension of this routine. Therefore, we followed the school routine for 1 year, observing regular lessons, reinforcement lessons, meetings of the Classroom Council and, in other school spaces and events, we carried out interviews with teachers and students. The data analysis allowed us to build 3 different parts of analysis - Pedagogical Practices, School Reinforcement and Classroom Council - revealing the persistence of exclusion mechanisms inside the school. Concerning the Pedagogical Practices, we observed that the conceptions related to the teaching-learning process and evaluation have not been modified through the period of validity of the continuous progression, prevailing the selective and excluding feature of those practices. Concerning the School Reinforcement and the Classroom Council - mechanisms theoretically build to include students - we noticed that they have been taking as double exclusion elements, as they work to reinforce the ideas and prejudices against the students who present school problems. Consequently, we conclude that, although the school has opened access and permanence, the conditions needed to put this democratization into practice, also in terms of learning and knowledge access, have not been acquired yet. / Doutorado / Educação, Conhecimento, Linguagem e Arte / Doutor em Educação

This work is concerned with school evaluation and specifically the organization of education in cycles, implanted by the State Secretariat for Basic Education of Cearà in 1998, as a mechanism to revert the problem of academic failure, school abandonment and distortion of age/grades, in an effort to solve the old and serious phenomenon of school failure. This form of reorganizing the education al system demands a distinct concept of evaluation from that of simple measure and its restricted use of decisions to fail or approve the student. It demands a proper logic of the system in grades. Thus, we tried to analyze the results, in the practical evaluation by the teacher, of the changes introduced in the system of learning evaluation developed in the first and second Formation Cycles in the State of CearÃ. The theoretical foundation was based on studies carried out by authors dealing with school evaluation from a sociological vision. A methodological procedure of a qualitative nature was adopted through a case study at a selected school in Fortaleza. For the collection of data, a documentary analysis was used, as well as a direct observation and interviews with the principal, the pedagogical coordinator, the supervisor, four teachers of the observed groups and two coordinators from the State Secretariat of Education of Cearà - SEDUC. The results show that the conditions offered to the schools and to the teachers caused almost no alteration in the practical evaluation by the teachers. The preoccupation with grades demonstrates that the changes proposed by the official agency, are not occurring. Thus, the present evaluation is not correct, but selecting and rejecting the students. / O presente trabalho tem como foco a avaliaÃÃo escolar na organizaÃÃo do ensino em ciclos, implantado pela Secretaria da EducaÃÃo BÃsica do Estado do Cearà (1998), como mecanismo para reverter a problemÃtica da repetÃncia, abandono escolar e distorÃÃo idade/sÃrie, na tentativa de resolver o antigo e grave fenÃmeno do fracasso escolar. Essa forma de reorganizar o ensino supÃe um conceito de avaliaÃÃo distinto da simples medida e de sua utilizaÃÃo restrita a decisÃes de aprovaÃÃo ou reprovaÃÃo do aluno, lÃgica prÃpria do sistema seriado. Dessa forma, busca-se analisar a repercussÃo, na prÃtica avaliativa do professor, das mudanÃas introduzidas na sistemÃtica de avaliaÃÃo da aprendizagem desenvolvida no primeiro e segundo Ciclos de FormaÃÃo na rede estadual de ensino. A abordagem teÃrica pautou-se nos estudos realizados por autores que tratam da avaliaÃÃo escolar na perspectiva sociolÃgica. Adotou-se um procedimento metodolÃgico de natureza qualitativa, por meio do estudo de caso em uma escola da rede pÃblica estadual localizada em Fortaleza. Para a coleta de dados utilizou-se anÃlise documental, a observaÃÃo direta e entrevistas semi-estruturadas realizadas com a diretora, a coordenadora pedagÃgica, a supervisora, quatro professoras das turmas observadas e com duas coordenadoras da SEDUC. Os resultados mostram que, dadas as condiÃÃes oferecidas Ãs escolas e aos professores, a prÃtica avaliativa exercida pelas professoras pouco sofreu alteraÃÃo em relaÃÃo à mudanÃa na funÃÃo que a avaliaÃÃo historicamente exerceu na escola. A permanÃncia da centralidade na nota demonstra que as mudanÃas propostas pelo ÃrgÃo oficial, quanto à concepÃÃo de avaliaÃÃo, nÃo estÃo ocorrendo. Dessa forma, a avaliaÃÃo praticada, nÃo està cumprindo o papel de formadora e de nÃo seletiva e excludente.

A terapia fotodinâmica (TFD) é uma modalidade de tratamento que utiliza um fotossensibilizador, luz e oxigênio para gerar espécies reativas de oxigênio capazes de induzir a morte de células indesejadas, como tumores e micro-organismos infecciosos. Nosso foco está na morte induzida por 1,9-dimetil azul de metileno fotoativado (TFD-DMMB). Este fotossensibilizador foi previamente estudado por nosso grupo. Foi mostrado que o DMMB se acumula em lisossomos e mitocôndrias, e danifica essas organelas após fotoativado. O DMMB em concentração nanomolar promove uma morte celular eficiente, que parece ser resultante do bloqueio da conclusão do processo autofágico, enquanto outros fotossensibilizadores geralmente são empregados na faixa de micromolar. Nosso objetivo neste trabalho foi investigar o mecanismo molecular da TFD-DMMB através do estudo do papel da proteína p53 nas respostas celulares à TFD-DMMB. Sendo uma proteína supressora tumoral, p53 participa de vários processos celulares em resposta a diferentes estresses. Para atingir nosso objetivo, utilizamos linhagens celulares HEK293T que expressam diferentes quantidades de p53, sendo uma linhagem knockdown para p53 (HEK293T-p53KD) e outra com expressão normal de p53 (HEK293T-SC, scramble). Após o tratamento com DMMB fotoativado, avaliamos a fototoxicidade, apoptose, dano no DNA, ciclo celular e autofagia. Nossos resultados mostram que, apesar de não observarmos a estabilização de p53, a TFDDMMB parece induzir a localização citoplasmática de p53, sugerindo que p53 citoplasmática participa da resposta celular à TFD-DMMB. A linhagem HEK293T-p53KD mostrou-se menos sensível à TFD-DMMB. Essa diferença foi explicada pelo acúmulo de células em sub- G1, indicativo de morte por apoptose, apenas na linhagem HEK293T-SC, que foi mais sensível ao tratamento. É possível que a atividade citoplasmática de p53 esteja relacionada com a indução de apoptose no nosso modelo. Em contraste aos efeitos de p53 na morte celular, encontramos respostas à TFD-DMMB independentes de p53 na parada do ciclo celular e autofagia. Observamos acúmulo de células na fase S do ciclo celular associado à fosforilação de CHK1 e H2AX, indicativo da ocorrência de estresse replicativo. A relação com a autofagia foi confirmada pelo acúmulo de vesículas ácidas e aumento dos níveis proteicos de LC3-II. Esses resultados indicam a indução ou o bloqueio da autofagia, entretanto não observamos um aumento simultâneo nos níveis de BECLIN-1, proteína importante para a iniciação da autofagia. Além disso, DMMB fotoativado resultou em dano seletivo no DNA mitocondrial (mtDNA), que não foi reparado em 24 horas. Desse modo, e baseado nos resultados preliminares do nosso grupo, propomos que a morte celular induzida por DMMB fotoativado é decorrente principalmente do bloqueio da resolução da via autofágica, comprometendo a eliminação de mitocôndrias danificadas e levando a alterações na dinâmica do ciclo celular. Nossos resultados sugerem que há respostas celulares à TFDDMMB dependentes e independentes de p53. Resultados similares foram obtidos para a linhagem HEK293, que é a linhagem parental de HEK293T. Do nosso conhecimento, a relocalização de p53 para o citoplasma, a habilidade em induzir dano seletivo no mtDNA e o bloqueio da progressão do ciclo celular na fase S são resultados inéditos decorrentes da TFDDMMB. O dano seletivo ao mtDNA torna o DMMB um modelo útil para estudos de mecanismos de resposta a dano no DNA específicos para a mitocôndria. / Photodynamic Therapy (PDT) is a treatment modality that uses a photosensitizer, light and oxygen to generate reactive oxygen species capable of inducing death of unwanted cells, such as cancer cells and infectious microorganisms. In this work, we are interested in studying death induced by 1,9-dimethylmethylene blue as a photosensitizer by PDT (DMMB-PDT). This photosensitizer has been previously studied by our group. It has been shown that DMMB accumulates within lysosomes and mitochondria, and damages these organelles after photoactivation. In this case, cell death is believed to be a result from the impairment of autophagy. DMMB at nanomolar concentration promotes efficient cell death, while other photosensitizers are usually employed in the micromolar range. The aim of this work is to investigate the molecular mechanism of DMMB-PDT action through the study of p53 protein role over the cell response to DMMB-PDT. Being a tumor suppressor protein, p53 participates in several cellular processes in response to different stresses. To achieve our goal, we used HEK293T cell lines that express different amounts of p53: a p53 knockout cell line (HEK293T-p53KD) and a normal cell line (HEK293T-SC, scramble). After treatment with photoactivated DMMB, we evaluated phototoxicity, apoptosis, DNA damage, cell cycle, and autophagy. Our results showed that, although we did not observe p53 stabilization, DMMBPDT seems to induce the cytoplasmic localization of p53, suggesting that cytoplasmic p53 participates in the cell response to DMMB-PDT. The HEK293T-p53KD cell line was less sensitive to DMMB-PDT. This difference could be explained by the level of sub-G1 accumulation suggestive of apoptosis that was only observed for HEK293T-SC cell line, which was more sensitive to the treatment. It is possible that the cytoplasmic activity of p53 was related to apoptosis induction according our model. In contrast to p53 effects on cell death, we found that there are p53-independent responses to DMMB-PDT on cell cycle arrest and autophagy. We observed a significant increase in the fraction of cells in the S phase of the cell cycle associated with phosphorylation of the CHK1 and H2AX proteins, indicating induction of replicative stress. The relationship of DMMB-PDT and autophagy was confirmed by the accumulation of acidic vesicles and the increased LC3 conversion (LC3-I to LC3-II). These results indicated that DMMB-PDT induces and/or impairs autophagy. However, we did not observe a simultaneous increase in BECLIN-1 levels, which is an important protein to autophagy initiation. Photoactivated DMMB resulted in selective damage in mitochondrial DNA (mtDNA) that was not repaired in 24 hours. According to these results, we propose that cell death induced by photoactivated DMMB is mainly related to blockade of a late stage of the autophagy pathway. It could compromise the elimination of damaged mitochondria and might lead to cell cycle dynamics alterations. Our results suggested that there are p53-dependent and p53-independent cell responses to DMMB-PDT. Similar results were obtained from HEK293 cell line, which is the parental cell line of HEK293T. To the best of our knowledge, the p53 relocalization to the cytoplasm, the ability to induce selective mtDNA damage, and the S arrest represent new insights in the DMMB-PDT field. The selective mtDNA damage makes DMMB a useful model for studies on mechanisms of DNA damage responses in mitochondria.

Orientador: Anthony César de Souza Castilho / Resumo: A fim de mimetizar melhores condições do sistema in vivo, um meio de cultura mais proximo à composição do fluido do oviduto foi criado, denominado fluido ovidutal sintético (SOF), este foi formulado com base na análise bioquímica do oviduto das ovelhas. In vivo os momentos finais de maturação oocitária ocorrem em contato com o FO, já in vitro a maturação oocitária é realizada com protocolos de maturação 24h sem nenhuma alteração no meio de maturação. Portanto, o presente estudo investigou o impacto do meio de cultivo SOF durante as últimas quatro horas da maturação in vitro (MIV) e seus efeitos sobre a progressão meiótica e taxa de produção embrionária. Para tanto, os CCOs foram recuperados de ovário de vacas abatidas e maturados in vitro, nos seguintes grupos: SFB/ SFB; SFB/ SFB+SOF; BSA/BSA; BSA/BSA+SOF, todos submetidos há uma troca total de meio nas últimas quatro horas de maturação, adicionando o meio SOF de acordo com os grupos citados anteriormante. Os CCOs maturados foram fertilizados e cultivados em atmosfera e umidade controlada até o estágio de blastocisto (7 e 8 dias após a fertilização). A análise estatística foi realizada transformando os dados em arcoseno e as médias foram comparadas pelo teste T usando JMP (software JMP, SAS Institute Cary, NC). Diferenças significativas foram consideradas quando p≤ 0,05. O resultado obtido mostrou que o tratamento com SOF não tem efeito na progressão da meiose (p= 0,5944). Entretanto, quando analisamos as taxas embrionárias e... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The oviduct and its secretion, the ovidutal fluid (OF), promote an adequate environment for the final maturation of the oocyte, sperm training, fertilization, transport and initial development of the embryo. In this context, in order to mimic better conditions of in vivo mechanisms, a culture medium similar to the composition of the oviduct fluid, called synthetic ovidutal fluid (SOF), was formulated based on biochemical analysis of the oviduct of sheep. Specifically, regarding the importance of OF for the final maturation of the oocyte in cattle, only the last four hours of oocyte maturation occur in the oviduct, which therefore pemits a new strategy of oocyte maturation in vitro (MIV) in the bovine species. Therefore, the present study aimed to investigate the impact of SOF culture medium during the last four hours of IVM and its effects on the meiotic progression and embryonic production rate. Therefore, the COCs were recovered from ovaries of slaughtered and matured cows in vitro, in base medium (composed of 199 MCT with Earles salts supplemented with pyruvate, amicacin, BSA, follicle stimulating hormone and luteinizing hormone, and another group in 199 MCT medium with Earles salts supplemented with 10% fetal bovine serum (FBS), pyruvate, both in moist atmosphere at 5% CO2 for 20 hours (4 replicates with 20 COCs/group). In the last four hours of maturation, the medium was completely changed by adding the SOF medium. Matured COCs were fertilized and cultivated in a control... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Esta pesquisa investiga os saberes mobilizados e construídos pelo professor no trabalho pedagógico para atuar diante dos desafios desencadeados a partir da implantação dos ciclos com progressão continuada. Para atingir tal objetivo, realizou-se revisão bibliográfica sobre os temas ciclos, progressão continuada e saberes docentes e pesquisa de campo, de caráter qualitativo, em uma Escola Municipal de Ensino Fundamental (EMEF), na cidade de São Paulo. Os procedimentos metodológicos incluíram entrevistas, análise de documentos e observações participantes em salas de aula, nos horários de trabalho coletivo e em eventos escolares. Os dados foram analisados à luz do conceito de saber docente fundamentado nos trabalhos de Maurice Tardif (2002), Ruth Mercado Maldonado (1991, 2002) e Marli Lúcia Tonatto Zibetti (2005); da idéia de atividade criadora de Vigotsky (2003) e das concepções de estratégia e tática de Michel de Certeau (1994). Partiu-se do pressuposto de que a implantação dos ciclos com progressão continuada trouxe novos desafios e novas demandas ao trabalho docente. Nesse contexto, o professor não se faz passivo ao se deparar com dificuldades na prática pedagógica. Como ser histórico, consciente do processo permanente de busca e vontade de ser mais (FREIRE, 2006), ele busca novos conhecimentos e produz saberes para lidar com situações diversas e conduzir sua prática no cotidiano escolar. Desenvolve também estratégias e táticas que expressam seus saberes, modificando e recriando o que lhe é imposto. Ao final da pesquisa, verificou-se que, nesse contexto de miscigenação de séries e ciclos, os professores estão buscando, modificando e elaborando constantemente ações pedagógicas, com o objetivo de atender a heterogeneidade em uma classe e assegurar a apropriação dos conhecimentos pelos alunos. Em função das possibilidades do cotidiano escolar para o desenvolvimento do trabalho pedagógico, os professores reelaboram as experiências e os conhecimentos apropriados dentro de uma lógica seriada e criam novas formas de intervenção para atender às demandas trazidas à prática com a implantação dos ciclos com progressão continuada. A organização do trabalho coletivo na escola e o saber docente em sua dimensão criadora têm possibilitado o desenvolvimento de uma educação voltada à formação de sujeitos humano-históricos. / This research investigates the knowledges constructed and mobilized by the teacher in his/her pedagogical work to face the challenges brought about by the implementation of school cycles with continued progression. To this purpose, a bibliographical review of the issues related to cycles, continued progression and teacher knowledges was carried out, as well as a qualitative fieldwork at a Municipal School of Fundamental Education (EMEF) in the city of São Paulo. The methodological procedures include interviews, documental analysis and participant observation in classrooms, during periods of collective work, and school events. Data were analyzed in the light of the concept of teacher knowledge founded on the works of Maurice Tardif (2002), Ruth Mercado Maldonado (1991, 2002) and Marli Lúcia Tonatto Zibetti (2005); on Vigotsky´s idea of creative activity, and om the conceptions of strategy and tactics by Michel de Certeau (1994). The work starts from the assumption that the implementation of cycles with continued progression brought new challenges and new demands to the teaching work. In this context, teachers are no longer passive before the difficulties of pedagogical practice. As historical beings, aware of the permanent process of searching and willing to be more (Freire, 2006), they seek and produce new knowledges to deal with the changing situations and to conduct their practice in school daily life. They also develop strategies and tactics to express their knowledges, modifying and recreating what is imposed upon them. By the end of the study, it was possible to see that in this context of miscegenation of series and cycles, teachers are constantly seeking, modifying and elaborating pedagogical actions with the objective of dealing with the heterogeneity of a class and to ensure the incorporation of knowledges by the students. Depending on the possibilities of school daily life for the development of the pedagogical work, teachers re-elaborate the appropriate experiences and the knowledges within a serial logic, and create new forms of intervention to deal with the demands placed upon the practice by the implementation of cycles with continued progression. The organization of the collective work at school and the teacher knowledge in its creative dimension have made it possible to develop an education aimed at the formation of human-historical subjects.