Made available in DSpace on 2014-06-12T18:02:12Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo3639_1.pdf: 1283864 bytes, checksum: c19ef1285163584deb577abe247a01c6 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2009 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Os tripanosomatídeos, agentes causadores de enfermidades de impacto mundial, se destacam dos demais eucariotos por apresentarem um conjunto de processos moleculares únicos, inclusive a ausência de controle da sua transcrição. Dessa forma, o controle de sua expressão gênica deve ocorrer após a transcrição. Assim, um ponto importante de controle é a iniciação da tradução, um processo ainda pouco conhecido nos tripanosomatídeos. Em eucariotos, de forma geral, esta começa com a ligação ao mRNA do complexo eIF4F, formado pelos polipeptídeos: eIF4E, eIF4A e eIF4G. A subunidade eIF4G atua como proteína estruturadora do complexo se ligando às demais subunidades e a outros fatores de tradução. Em Trypanosoma brucei foram identificados cinco homólogos do eIF4G, conservados em Leishmania major, denominados de TbEIF4G1-5. Este trabalho buscou contribuir com a caracterização dos homólogos TbEIF4G1 e TbEIF4G2 a partir da amplficação e clonagem dos seus genes, completos e/ou fragmentos contendo seu domínio HEAT central, em vetor de expressão bacteriano. A análise das sequências clonadas apresentou divergências genéticas em relação às descritas na literatura, mas, a princípio, de baixo significado biológico. Em seguida, realizou-se a expressão das respectivas proteínas recombinantes e obtenção de soro policlonal em coelhos. Estes soros foram utilizados em ensaios de western-blot e imunocitoquímica para analisar a expressão das proteínas nativas e sua localização subcelular. Os mesmos genes foram também clonados em vetor plasmidial para superexpressão da proteína recombinante fusionada à EYFP em T. brucei. Observou-se que o TbEIF4G1 é expresso na fase procíclica, mas é raro ou ausente na sanguínea. Já o TbEIF4G2 é expresso raramente ou ausente em ambas as fases. Ambas as proteínas se mostraram exclusivamente citoplasmáticas, o que reforça um papel na tradução que merece ser melhor estudado com as ferramentas, proteínas e anticorpos, produzidos neste estudo

Made available in DSpace on 2014-06-12T18:06:16Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo6288_1.pdf: 2921977 bytes, checksum: 99e4e2f0b07d7e3f569432b1a3b747af (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2006 / Em eucariotos, a etapa crítica de iniciação da síntese protéica é aquela mais sujeita a mecanismos de de regulação. Esta etapa requer a participação de um conjunto de fatores de iniciação de tradução (eIFs), além de subunidades ribossomais. Entre os eIFs se destaca o complexo eIF4F, composto pelas subunidades eIF4FA, eIF4FE e eIF4FG. Em Leishmania, o controle da síntese das proteínas é essencial para a regulação da expressão gênica, mas tem sido pouco estudada. Neste patógeno, múltiplos homólogos para a subunidade do complexo eIF4FEforam identificados e tiveram sua expressão quantificada na forma promastigota (pm) do seu ciclo de vida. Neste trabalho, iniciou-se o estudo em Leishmania de um homólogo da proteína ribossomal P0, componente da subunidade 60S. A partir da clonagem de seu gene, expressão em Escherichia coli e produção de soro policlonal específico partiu-se para a quantificação de seus níveis intracelulares na forma pm, que se mostraram elevados (6,6x10e5 moléculas/células) e superiores para os observados para os homólogos de eIF4F. Em seguida, visando a analisar sua expressão durante o ciclo de vida do parasita, otimizou-se as condições de crescimentode espécies representativas de Leishmania nas suas formas promastigos metacíclica (pm-mt) e amastigota (am). Buscou-se então a detecção de proteínas de expressão estágio-específicas (A2 - am; META1 - pm-mt) para validar as curvas de crescimento, mas apenas a expressão de META1 foi confirmada, embora a forma Am tenha sido confirmada por microscopia. A expressão da proteína P0 mostrou-se constante nessas várias formas celulares. Em comparação, a expressão de um homólogo da proteína eIF4G, LmeIF4G3, também se mostrou contante, enquanto que um segundo homólogo, LmeIF4G1, só foi detectado nas formas am e pmdo parasita. Ensaios com outors homólogos de eIF4F estão sendo realizados, esperando-se caracterizar melhor os processos que envolvem a iniciação da tradução em Leishmania e o controle de sua diferenciação celular

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:56Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-07-08Bitstream added on 2014-06-13T19:19:46Z : No. of bitstreams: 1 cabeco_lc_dr_botib.pdf: 3413131 bytes, checksum: 235f28b6b47318c9d3eae77eee4e421c (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A restrição protéica materna pode afetar vários parâmetros morfofuncionais da prole com conseqüências na vida adulta. Esse fenômeno, conhecido como programação fetal, pode causar mudanças na musculatura esquelética a longo prazo. Neste trabalho foram analisadas a morfologia e histoquímica dos tipos de fibras musculares, a expressão gênica e protéica dos fatores reguladores miogênicos MyoD e Miogenina, a morfologia das junções neuromusculares (JNMs) e a expressão gênica das subunidades ( , e ) que compõe os receptores nicotínicos de acetilcolina, nos músculos Soleus (SOL) e Extensor longo dos dedos (EDL) de ratos machos (30 dias e 16 semanas de idade), provenientes de mães alimentadas com dieta de baixa proteína (6%, LP, n=8) durante a gestação e alimentadas com dieta normoprotéica (17%, NP=8) após o nascimento dos filhotes. Nos períodos analisados, os músculos SOL e EDL foram submetidos à reação histoquímica mATPase para a análise da freqüência (%) e área (CSA) das fibras; a morfologia das JNMs foi analisada por microscopia eletrônica de transmissão; a expressão gênica e protéica foram determinadas pelo RT-qPCR e Western Blot, respectivamente. Nossos resultados mostraram que ao nascimento e com 30 dias de idade, o peso corporal dos filhotes do grupo LP foi estatisticamente menor comparado aos filhotes do grupo NP e com 16 semanas de idade, nenhuma diferença foi observada no peso corporal. Aos 30 dias de idade, o peso do músculo SOL foi menor no grupo LP comparado ao NP (P<0,05) e nenhuma diferença estatística foi observada no peso do músculo EDL. Com 16 semanas de idade, a razão peso muscular/peso corpóreo foi menor no músculo SOL e nenhuma diferença estatística foi observada no músculo EDL. Aumento na freqüência das fibras tipo IIB e diminuição das fibras tipo... / The maternal protein restriction can affect various morphophysiological parameters in offspring with consequences in adulthood. This phenomenon, known as fetal programming, can cause changes in skeletal muscle phenotype in long term. We investigated muscle fiber type changes, MyoD and Myogenin expression, neuromuscular junction (NMJs) morphology and , and nAChRs subunits expression in SOL and EDL muscles in offspring rats, with 30 and 16-weeks-old, from dams fed with low protein diet (6% protein, LP, n=8) and normoproteic diet (17% protein, NP, n=8). Muscles collected were submitted to myofibrillar adenosine triphosphatase (mATPase) histochemistry reaction for muscle fiber types frequency and the cross sectional areas (CSA) analysis. The neuromuscular junction (NMJs) morphology was analyzed using transmission electron microscope. The gene and protein expression were determined by RT-qPCR and Western Blot, respectively. Our results showed that at birth and with 30-days-old, the body weight of pups was statistically lower in LP compared to NP group; at 16-week-old, no significant difference were observed. At 30-days, the SOL muscle weight (g) was lower in LP compared to NP group (P<0.05) and no statistical difference was observed in the EDL muscle weight. At 16-week-old, SOL muscle weight/body weight ratio was lower in LP group compared to NP group, P<0.05. Increasing in IIB and decreased in I and IIA+IID fiber frequency in EDL muscle and no difference in fiber frequency in SOL muscle were observed in LP group, with 30-days-age. At 16-weeks-age, there were no differences in muscle fiber types frequency for both muscles. In LP group, muscle fiber I CSA decreased only in SOL muscle in all periods studied. MyoD and Myogenin expression no changes in response to maternal... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2015-12-06T23:02:49Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2003 / O objetivo deste trabalho foi o de estudar a relacao entre estado nutricional de maes comparado-o com o condicao nutricional de seus filhos(as), portadores de desnutricao. 0 estado nutricional considerado foi aquele apresentado, tanto pelas maes, quanto pelas criancas, no momento da internacao destas ultimas. Para analise das condicoes nutricionais foi utilizada a classificacao de z escore de p na avaliacao das criancas, com ponto de corte igual ou abaixo de -2 desvios-padrao a partir da mediana, sem exclusao de casos z escore de p nivel -1, e indice de Massa Corporea (IMC- peso/altura ao quadrado) para avaliacao do estado nutricional materno. Todas as criancas apresentaram algum grau de desnutricao. A presenca macica de diagnostico de desnutricao na amostra ocorreu devido fato do local de estudo ser referencia para tratamento de desnutricao nao apenas para cidade de São Paulo. As internacoes selecionadas foram aquelas que ocorreram na enfermaria do Nucleo de Nutricao, Alimentacao e Desenvolvimento Infantil (NUNADI) do Centro de Referencia da Saúde da Mulher, Alimentacao e Desenvolvimento Infantil (CRSMNADI) entre os anos de 1996 e 1999, e totalizaram um montante de 697 prontuarios de criancas menores de 60 meses de idade. 0 estudo baseou-se em levantamento retrospectivo de dados registrados nos prontuarios. Na analise das variaveis das criancas foi encontrada prevalencia de 57,1 º/a de criancas do sexo masculino, 62,1 por cento de criancas X12 meses de idade ou 87,4 por cento para menores de 24 meses, 60,4 por cento no escore z -3 para peso/idade, 75,8 por cento de criancas nasceram a termo, 38,9 por cento nasceram com inferior a 2.500 gramas. Nas variaveis maternas 49,3 por cento das maes apresentaram idade entre 20 e 30 anos, e 61,5 por cento eram eutroficas. 0 estudo estatistico utilizado para comparacao entre duas amostras foi o teste do qui quadrado, que apresentou como resultado significante nas...(au) / The objective of this study was to assess the relationship between the nutritional status of mothers and that of their malnourished children. The nutritional status considered was that presented both by the mothers and their children at the moment of admission of the latter into hospital. The P Z-score classification was used to analyze the nutritional conditions of the children, with a cutoff point < –2 standard deviations form the median, without the exclusion of the cases of Z scores of –1 p level, and the Body Mass Index (BMI - weight/height2) for the evaluation of the maternal nutritional status. The cases studied here were selected from among the children admitted to the in-patient unit of the Children’s Nutrition and Development Division (NUNADI) of the Women’s Health and Children’s Development Reference Center (CRSMNADI) of the São Paulo State Health Department, from 1996 to 1999, taken form the clinical records of 697 children under 60 months of age. The study was based on the retrospective assessment of the data registered in the clinical records. All children included presented some degree of malnutrition. The overwhelming presence of diagnoses of malnutrition was the result of the sample being taken from a regional reference center for the study of malnutrition among children, not only from the city of São Paulo. The analysis of the children’s variables showed a prevalence of 57.1% of males; 62.1% of children < 12 months of age or 87.4% of patients under 24 months, 60.4% at the –3 Z score for weigth/age. 75.8% of the children were term newborns, 38.9% were born with weights under 2,500 grams..(au) / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Etapas do desenvolvimento ontogenético cerebral, incluindo proliferação e migração, etapas de crescimento cerebral e mielinização, astrocitogênese e morte celular programada são alteradas pela desnutrição protéica. O SNC (Sistema Nervoso Central) é particularmente suscetível aos insultos oxidativos. As defesas antioxidantes são dependentes do conteúdo de glutationa e as vias metabólicas envolvidas nesta manutenção contam com o suporte dos astrócitos (principalmente a captação de glutamato e a síntese de glutamina), especialmente durante o desenvolvimento. O presente trabalho avaliou marcadores gliais, por meio do imunoconteúdo da GFAP (proteína glial fibrilar acídica) e S100B em córtex cerebral, hipocampo, cerebelo e líquor, bem como o conteúdo de glutationa, atividade da glutamina sintetase e captação de glutamato de ratos expostos à desnutrição protéica pré e pós-natal (grupo controle: 25% caseína e grupo desnutrido: 7% de caseína) aos 2, 15 e 60 dias pós-natal. Foram avaliados também alguns parâmetros de estresse oxidativo. Em ratos desnutridos foi encontrado aumento do imunoconteúdo da GFAP todas as regiões estudadas aos 2 dias, mas houve significativa redução de GFAP em hipocampo e cerebelo aos 15 dias. O aumento de S100B foi também observado em todas as regiões aos 2 dias pós-natal. Não foram encontradas mudanças no conteúdo de GFAP e S100B em ratos desnutridos aos 60 dias. Entretanto, no líquor, os níveis de S100B, permaneceram elevados aos 60 dias. Os resultados deste trabalho indicam precoce astrogliogênese ao nascimento e um atraso da astrogliogênse pós-natal induzida pela restrição protéica. Alterações astrocíticas específicas em hipocampo e cerebelo enfatizam a vulnerabilidade das regiões do SNC ao insulto nutricional. Estas alterações foram transitórias, mas o elevado nível extracelular de S100B em animais adultos sugerem a suscetibilidade ao dano. Embora o perfil ontogenético de glutationa do grupo desnutrido tenha sido similar ao grupo controle, os desnutridos apresentaram níveis significativamente mais baixos aos 2 e 15 dias. Além disso, a atividade da glutationa peroxidase e reatividade antioxidante total foram reduzidas em ratos desnutridos aos 2 dias. O aumento da atividade da glutamina sintetase e a redução na captação de glutamato foram também encontrados nos ratos desnutridos. Estas alterações indicam mudanças no metabolismo dos astrócitos, sugerindo aumento da vulnerabilidade a excitotoxicidade e/ou dano oxidativo. Em animais de 60 dias, a desnutrição alterou alguns parâmetros de estresse oxidativo, como o aumento da lipoperoxidação em cerebelo e córtex cerebral e uma redução dos conteúdos tirosina e triptofano em todas as estruturas estudadas, indicando dano em macromoléculas. Assim, a recuperação de alterações nos parâmetros metabólicos, observadas na vida adulta, apesar da continuidade do insulto nutricional, não exclui o aumento do dano oxidativo em lipídios e proteínas.

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2016-10-27T17:35:25Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 398591 bytes, checksum: 633c07753a8659fe2307b277bb7755ef (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-27T17:35:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 398591 bytes, checksum: 633c07753a8659fe2307b277bb7755ef (MD5) Previous issue date: 2002-05-02 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Estudos sobre a qualidade protéica e a biodisponibilidade de minerais têm a sua importância na manipulação dietética, visando a redução da prevalência de desnutrição energético-protéica e de carências nutricionais específicas, uma vez que componentes da dieta podem promover melhor utilização dos nutrientes. Nesse sentido, o presente trabalho visou avaliar os efeitos da adição de Lactobacillus acidophilus, uma bactéria probiótica, na qualidade protéica de uma bebida láctea à base de soro de queijo. Avaliou-se, ainda, o efeito dessa bactéria sobre a biodisponibilidade de cálcio e de zinco. No ensaio para avaliar a qualidade protéica foram utilizados 24 ratos machos recém-desmamados, separados em quatro grupos (n=6): um grupo controle com dieta à base de caseína, um segundo grupo com dieta aprotéica e dois grupos experimentais, sendo um à base da fórmula infantil e o outro à base da bebida láctea probiótica. Foram utilizados os métodos PER (coeficiente de eficiência protéica), NPR (razão protéica líquida), NPU (utilização protéica líquida) e digestibilidade. No estudo com cálcio foram utilizadas 60 ratas fêmeas adultas, sendo 30 intactas e 30 ovariectomizadas, divididas em 6 grupos (n=10), e cada grupo subdividido em três. Dentre as ratas intactas, um grupo recebeu probiótico, outro grupo recebeu leite sem probiótico e um terceiro grupo dose intraperitonial de 45 Ca. Da mesma forma ocorreu com as ratas ovariectomizadas. O cálcio foi avaliado utilizando-se a técnica do traçador bioquímico (45Ca), medindo-se sua absorção fracional no fêmur dos animais. Foi ainda avaliado o efeito do probiótico no íleo das ratas, medindo-se a superfície de absorção intestinal. A biodisponibilidade do zinco foi avaliada em 32 ratos machos recém-desmamados, divididos em quatro grupos: dieta padrão com 15 e 30 μg de zinco/g de dieta e dieta padrão com probiótico, também com 15 e 30 μg de zinco/g de dieta. Foi feita a determinação do teor do mineral no fêmur, nos rins, no fígado, no sangue e no cérebro, por espectrofotometria de absorção atômica. O ganho de peso foi monitorado e determinada a atividade da enzima fosfatase alcalina, indicativa de crescimento ósseo. A bebida láctea elaborada apresentou uma alta qualidade protéica, semelhante a da proteína padrão (caseína), o que pode ser atribuído ao elevado valor biológico das proteínas do soro de queijo, associado à presença de bactérias probióticas e outras culturas lácteas, que ajudam a promover uma melhor utilização da proteína. No experimento com zinco não foi observada diferença nos fêmures dos animais, porém, a presença de Lactobacillus acidophilus proporcionou maior ganho de peso, podendo estar relacionado com a melhor biodisponibilidade desse e de outros nutrientes promotores do crescimento, o que indica efeito benéfico da presença da bactéria. Quanto à retenção de cálcio nos fêmures, os resultados mostraram ser maior nos animais que receberam probiótico e naqueles não submetidos à ovariectomia. Através da análise estatística dos valores observados para os parâmetros ‘espessura’ e ‘superfície de absorção’ dos cortes de íleo, obtidos histologicamente, observou-se que os animais intactos (com ovário) que receberam probiótico apresentaram os valores mais elevados, resultado semelhante ocorrido na retenção no fêmur, sugerindo a interferência do hormônio estrogênio nessas funções. Dessa forma, pode-se concluir que microrganismos probióticos são fatores de promoção da saúde, interferindo positivamente na biodisponibilidade de minerais como o cálcio e o zinco. A elevada qualidade protéica da bebida com probiótico e soro de leite demonstra não só benefícios dos probióticos, como também da utilização do soro de leite na elaboração de produtos lácteos. / Studies on protein quality and mineral bioavailability are important on diet manipulation to reduce occurrence of protein-energy malnutrition and specific nutritional deficiencies, since diet components may improve nutrient utilization. The present work aimed at to evaluate the effects of Lactobacillus acidophilus, a probiotic bacteria, on protein quality of a whey-based milky beverage. The effect of this bacteria on calcium and zinc bioavailability was also evaluated. For protein quality assay, twenty-four weaning male rats were divided into four groups (n=6): control group fed a casein-based diet, protein-free group and two experimental groups, one of them fed a commercial probiotic infant formula, and the other fed the probiotic milky beverage. The following methods were utilized: protein efficiency ratio (PER), net protein ratio (NPR), net protein utilization (NPU) and digestibility. Sixty adult females rats, thirty intact and thirty ovariectomized, were utilized in the study on calcium bioavailability. They were divided into six groups (n=10). Among the intact female rats, one group was fed the probiotic, a second one received milk without probiotic, and a third one was fed an intraperitoneal dosis of 45 Ca. The ovariectomized rats were treated in the same manner. The calcium was evaluated by means of the method of biochemical tracer (45Ca), by measuring its fractional absorption in the animal femurs. The effect of the probiotic bacteria on the ileum of the animals was also evaluated, by measuring the intestinal absorption surface. The zinc bioavailability was evaluated in thirty-two weaning male rats divided into four groups, fed a standard diet with 15 or 30 μg zinc/g diet, or a standard diet plus probiotic with 15 or 30 μg zinc/g diet. The zinc content was determined by atomic absorption spectrophotometry in femur, kidneys, liver, blood and brain. The weight gain was monitored and the activity of alkaline fosfatase, used as a bone growth marker, was determined. The formulated milky beverage presented a high protein quality, similar to the standard protein (casein). This may be attributed to the high biological value of the whey proteins combined with the presence of probiotic bacteria and other dairy cultures that help to improve protein utilization. In the experiment with zinc, there was no difference among animal femurs, but the presence of Lactobacillus acidophilus provided an enhanced weight gain, which may be related to the better bioavailability of zinc and other growth-promoting nutrients, indicating a benefic effect of this bacteria. Calcium retention in the femurs was higher in the intact animals fed the probiotic. The statistical analysis of the values reported for the parameters ‘thickness’ and ‘absorption surface’ of the ileum cuts indicated that the intact animals fed the probiotic presented the highest values, similarly to what occurred with calcium retention in the femur, suggesting the influence of estrogen hormone on these functions. It may be concluded that probiotic microorganisms are health-promoting factors, improving calcium and zinc bioavailability. The high protein quality of the beverage indicates the benefits of both probiotics and whey addition to dairy products.

Etapas do desenvolvimento ontogenético cerebral, incluindo proliferação e migração, etapas de crescimento cerebral e mielinização, astrocitogênese e morte celular programada são alteradas pela desnutrição protéica. O SNC (Sistema Nervoso Central) é particularmente suscetível aos insultos oxidativos. As defesas antioxidantes são dependentes do conteúdo de glutationa e as vias metabólicas envolvidas nesta manutenção contam com o suporte dos astrócitos (principalmente a captação de glutamato e a síntese de glutamina), especialmente durante o desenvolvimento. O presente trabalho avaliou marcadores gliais, por meio do imunoconteúdo da GFAP (proteína glial fibrilar acídica) e S100B em córtex cerebral, hipocampo, cerebelo e líquor, bem como o conteúdo de glutationa, atividade da glutamina sintetase e captação de glutamato de ratos expostos à desnutrição protéica pré e pós-natal (grupo controle: 25% caseína e grupo desnutrido: 7% de caseína) aos 2, 15 e 60 dias pós-natal. Foram avaliados também alguns parâmetros de estresse oxidativo. Em ratos desnutridos foi encontrado aumento do imunoconteúdo da GFAP todas as regiões estudadas aos 2 dias, mas houve significativa redução de GFAP em hipocampo e cerebelo aos 15 dias. O aumento de S100B foi também observado em todas as regiões aos 2 dias pós-natal. Não foram encontradas mudanças no conteúdo de GFAP e S100B em ratos desnutridos aos 60 dias. Entretanto, no líquor, os níveis de S100B, permaneceram elevados aos 60 dias. Os resultados deste trabalho indicam precoce astrogliogênese ao nascimento e um atraso da astrogliogênse pós-natal induzida pela restrição protéica. Alterações astrocíticas específicas em hipocampo e cerebelo enfatizam a vulnerabilidade das regiões do SNC ao insulto nutricional. Estas alterações foram transitórias, mas o elevado nível extracelular de S100B em animais adultos sugerem a suscetibilidade ao dano. Embora o perfil ontogenético de glutationa do grupo desnutrido tenha sido similar ao grupo controle, os desnutridos apresentaram níveis significativamente mais baixos aos 2 e 15 dias. Além disso, a atividade da glutationa peroxidase e reatividade antioxidante total foram reduzidas em ratos desnutridos aos 2 dias. O aumento da atividade da glutamina sintetase e a redução na captação de glutamato foram também encontrados nos ratos desnutridos. Estas alterações indicam mudanças no metabolismo dos astrócitos, sugerindo aumento da vulnerabilidade a excitotoxicidade e/ou dano oxidativo. Em animais de 60 dias, a desnutrição alterou alguns parâmetros de estresse oxidativo, como o aumento da lipoperoxidação em cerebelo e córtex cerebral e uma redução dos conteúdos tirosina e triptofano em todas as estruturas estudadas, indicando dano em macromoléculas. Assim, a recuperação de alterações nos parâmetros metabólicos, observadas na vida adulta, apesar da continuidade do insulto nutricional, não exclui o aumento do dano oxidativo em lipídios e proteínas.

Orientador: Maeli Dal Pai Silva / Coorientador: Selma Michelin Matheus / Banca: José Antonio Rocha Gontijo / Banca: Maria de Lourdes Mendes Vicentini Paulino / Banca: Márcia Galaci / Banca: Débora Cristina Damasceno / Resumo: A restrição protéica materna pode afetar vários parâmetros morfofuncionais da prole com conseqüências na vida adulta. Esse fenômeno, conhecido como programação fetal, pode causar mudanças na musculatura esquelética a longo prazo. Neste trabalho foram analisadas a morfologia e histoquímica dos tipos de fibras musculares, a expressão gênica e protéica dos fatores reguladores miogênicos MyoD e Miogenina, a morfologia das junções neuromusculares (JNMs) e a expressão gênica das subunidades ( , e ) que compõe os receptores nicotínicos de acetilcolina, nos músculos Soleus (SOL) e Extensor longo dos dedos (EDL) de ratos machos (30 dias e 16 semanas de idade), provenientes de mães alimentadas com dieta de baixa proteína (6%, LP, n=8) durante a gestação e alimentadas com dieta normoprotéica (17%, NP=8) após o nascimento dos filhotes. Nos períodos analisados, os músculos SOL e EDL foram submetidos à reação histoquímica mATPase para a análise da freqüência (%) e área (CSA) das fibras; a morfologia das JNMs foi analisada por microscopia eletrônica de transmissão; a expressão gênica e protéica foram determinadas pelo RT-qPCR e Western Blot, respectivamente. Nossos resultados mostraram que ao nascimento e com 30 dias de idade, o peso corporal dos filhotes do grupo LP foi estatisticamente menor comparado aos filhotes do grupo NP e com 16 semanas de idade, nenhuma diferença foi observada no peso corporal. Aos 30 dias de idade, o peso do músculo SOL foi menor no grupo LP comparado ao NP (P<0,05) e nenhuma diferença estatística foi observada no peso do músculo EDL. Com 16 semanas de idade, a razão peso muscular/peso corpóreo foi menor no músculo SOL e nenhuma diferença estatística foi observada no músculo EDL. Aumento na freqüência das fibras tipo IIB e diminuição das fibras tipo... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The maternal protein restriction can affect various morphophysiological parameters in offspring with consequences in adulthood. This phenomenon, known as fetal programming, can cause changes in skeletal muscle phenotype in long term. We investigated muscle fiber type changes, MyoD and Myogenin expression, neuromuscular junction (NMJs) morphology and , and nAChRs subunits expression in SOL and EDL muscles in offspring rats, with 30 and 16-weeks-old, from dams fed with low protein diet (6% protein, LP, n=8) and normoproteic diet (17% protein, NP, n=8). Muscles collected were submitted to myofibrillar adenosine triphosphatase (mATPase) histochemistry reaction for muscle fiber types frequency and the cross sectional areas (CSA) analysis. The neuromuscular junction (NMJs) morphology was analyzed using transmission electron microscope. The gene and protein expression were determined by RT-qPCR and Western Blot, respectively. Our results showed that at birth and with 30-days-old, the body weight of pups was statistically lower in LP compared to NP group; at 16-week-old, no significant difference were observed. At 30-days, the SOL muscle weight (g) was lower in LP compared to NP group (P<0.05) and no statistical difference was observed in the EDL muscle weight. At 16-week-old, SOL muscle weight/body weight ratio was lower in LP group compared to NP group, P<0.05. Increasing in IIB and decreased in I and IIA+IID fiber frequency in EDL muscle and no difference in fiber frequency in SOL muscle were observed in LP group, with 30-days-age. At 16-weeks-age, there were no differences in muscle fiber types frequency for both muscles. In LP group, muscle fiber I CSA decreased only in SOL muscle in all periods studied. MyoD and Myogenin expression no changes in response to maternal... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Dissertação (mestrado)-Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Botânica, 2006. / Submitted by Érika Rayanne Carvalho (carvalho.erika@ymail.com) on 2009-10-01T03:53:25Z No. of bitstreams: 1 2006_Camila Alves Jeronimo.pdf: 2399074 bytes, checksum: 881a2b79bbfb37e21e1ff96ee5a15672 (MD5) / Approved for entry into archive by Gomes Neide(nagomes2005@gmail.com) on 2010-10-27T14:26:36Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2006_Camila Alves Jeronimo.pdf: 2399074 bytes, checksum: 881a2b79bbfb37e21e1ff96ee5a15672 (MD5) / Made available in DSpace on 2010-10-27T14:26:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2006_Camila Alves Jeronimo.pdf: 2399074 bytes, checksum: 881a2b79bbfb37e21e1ff96ee5a15672 (MD5) Previous issue date: 2006-03 / Solanum lycocarpum St. Hil., conhecida popularmente como lobeira, é uma espécie arbustiva do bioma Cerrado cujo potencial alelopático já foi identificado em suas folhas e frutos. Extratos aquosos de suas folhas a 1% (p/v) inibem o crescimento e a diferenciação radicular em plântulas de gergelim (Sesamum indicum L.). Sabendo-se que alterações morfológicas decorrem de interferências no metabolismo celular, os objetivos desse trabalho foram verificar: (1) a ação alelopática de extratos aquosos de folhas de lobeira no desenvolvimento inicial, na morfologia e na incorporação de matéria seca em plântulas de gergelim; (2) se o efeito alelopático causado pelo extrato aquoso de folhas de lobeira é reversível morfologicamente nas plântulas de gergelim; (3) as alterações no padrão de síntese protéica de plântulas de gergelim que estão sobre o efeito dos aleloquímicos dos extratos aquosos de folhas de lobeira. O extrato aquoso das folhas de lobeira causou inibição do crescimento das plântulas de gergelim, principalmente nas radículas e na maior concentração do extrato, onde provocaram alterações como necroses, inibição do aparecimento de raízes laterais e de pêlos absorventes. A interferência no conteúdo de água das plântulas por parte dos aleloquímicos foi pequena ou insignificante em todos os tratamentos e nas diferentes partes da plântula, entretanto houve menor incorporação de massa seca nas radículas tratadas. Os efeitos causados pelos aleloquímicos das folhas de lobeira no desenvolvimento e na morfologia das plântulas de gergelim são reversíveis, tendo em vista que as mesmas retomaram seu crescimento e suas características morfológicas normais. A incorporação isotópica de 35S- metionina foi maior nas plântulas tratadas com os aleloquímicos das folhas de lobeira e o perfil protéico das radículas apresentou mais diferenças na expressão do que o perfil dos hipocótilos. No geral, houve um aumento da síntese protéica nas plântulas tratadas. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / Wolf Apple St. Hil., Popularly known as lobeira, is a shrubby species of the Cerrado whose allelopathic potential has been identified in their leaves and fruit. Aqueous extracts of leaves to 1% (w / v) inhibit the growth and differentiation in seedling roots of sesame (Sesamum indicum L.). Given that morphological changes resulting from interference with cell metabolism, the objectives of this study were that: (1) the allelopathic action of aqueous extracts of leaves lobeira the initial development, morphology and incorporation of dry matter in seedlings of sesame; (2) whether the allelopathic effects caused by the aqueous extract of leaves of lobeira is morphologically reversible in sesame seedlings, (3) changes in the pattern of protein synthesis in seedlings of sesame that are under the effect of allelochemicals of aqueous extracts of leaves lobeira. The aqueous extract of leaves of lobeira caused inhibition of seedling growth of sesame, particularly in the rootlet and the highest concentration of the extract, which led to changes such as necrosis, inhibition of emergence of lateral roots and hair roots. Interfering in the water content of the seedlings by the allelochemicals was small or negligible in all treatments and in different parts of seedlings, however there was less incorporation of dry rootlets treated. The effects caused by allelochemicals from leaves of lobeira development and morphology of seedlings of sesame are reversible, given that they have resumed its growth and normal morphology. The incorporation of isotopes 35S-methionine was higher in seedlings treated with allelochemicals from leaves of lobeira and protein profile of rootlets showed more differences in the expression profile of the hypocotyls. Overall, there was an increase in protein synthesis in the seedlings treated.

Etapas do desenvolvimento ontogenético cerebral, incluindo proliferação e migração, etapas de crescimento cerebral e mielinização, astrocitogênese e morte celular programada são alteradas pela desnutrição protéica. O SNC (Sistema Nervoso Central) é particularmente suscetível aos insultos oxidativos. As defesas antioxidantes são dependentes do conteúdo de glutationa e as vias metabólicas envolvidas nesta manutenção contam com o suporte dos astrócitos (principalmente a captação de glutamato e a síntese de glutamina), especialmente durante o desenvolvimento. O presente trabalho avaliou marcadores gliais, por meio do imunoconteúdo da GFAP (proteína glial fibrilar acídica) e S100B em córtex cerebral, hipocampo, cerebelo e líquor, bem como o conteúdo de glutationa, atividade da glutamina sintetase e captação de glutamato de ratos expostos à desnutrição protéica pré e pós-natal (grupo controle: 25% caseína e grupo desnutrido: 7% de caseína) aos 2, 15 e 60 dias pós-natal. Foram avaliados também alguns parâmetros de estresse oxidativo. Em ratos desnutridos foi encontrado aumento do imunoconteúdo da GFAP todas as regiões estudadas aos 2 dias, mas houve significativa redução de GFAP em hipocampo e cerebelo aos 15 dias. O aumento de S100B foi também observado em todas as regiões aos 2 dias pós-natal. Não foram encontradas mudanças no conteúdo de GFAP e S100B em ratos desnutridos aos 60 dias. Entretanto, no líquor, os níveis de S100B, permaneceram elevados aos 60 dias. Os resultados deste trabalho indicam precoce astrogliogênese ao nascimento e um atraso da astrogliogênse pós-natal induzida pela restrição protéica. Alterações astrocíticas específicas em hipocampo e cerebelo enfatizam a vulnerabilidade das regiões do SNC ao insulto nutricional. Estas alterações foram transitórias, mas o elevado nível extracelular de S100B em animais adultos sugerem a suscetibilidade ao dano. Embora o perfil ontogenético de glutationa do grupo desnutrido tenha sido similar ao grupo controle, os desnutridos apresentaram níveis significativamente mais baixos aos 2 e 15 dias. Além disso, a atividade da glutationa peroxidase e reatividade antioxidante total foram reduzidas em ratos desnutridos aos 2 dias. O aumento da atividade da glutamina sintetase e a redução na captação de glutamato foram também encontrados nos ratos desnutridos. Estas alterações indicam mudanças no metabolismo dos astrócitos, sugerindo aumento da vulnerabilidade a excitotoxicidade e/ou dano oxidativo. Em animais de 60 dias, a desnutrição alterou alguns parâmetros de estresse oxidativo, como o aumento da lipoperoxidação em cerebelo e córtex cerebral e uma redução dos conteúdos tirosina e triptofano em todas as estruturas estudadas, indicando dano em macromoléculas. Assim, a recuperação de alterações nos parâmetros metabólicos, observadas na vida adulta, apesar da continuidade do insulto nutricional, não exclui o aumento do dano oxidativo em lipídios e proteínas.