Submitted by Edileide Reis (leyde-landy@hotmail.com) on 2014-09-15T13:02:45Z No. of bitstreams: 1 Everson Coutinho da Silva.pdf: 1074589 bytes, checksum: b16dace894aa301ad1a44c7d26fba132 (MD5) / Approved for entry into archive by Rodrigo Meirelles (rodrigomei@ufba.br) on 2015-10-09T18:43:39Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Everson Coutinho da Silva.pdf: 1074589 bytes, checksum: b16dace894aa301ad1a44c7d26fba132 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-10-09T18:43:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Everson Coutinho da Silva.pdf: 1074589 bytes, checksum: b16dace894aa301ad1a44c7d26fba132 (MD5) / Pode-se dizer que a formação de professores ganhou visibilidade entre os pesquisadores da área de ensino desde a década de 90 do século passado. A questão do ensino, pautado no desenvolvimento do cidadão atuante em sua comunidade, passou por uma apreciável reformulação, tendo como um dos resultados a elaboração da Lei de Diretrizes e Bases da Educação Nacional (LDB) em 1996 e dos Parâmetros Curriculares Nacional (PCN) em 1997. A partir delas cabe direcionar o olhar para os saberes que os professores carregam para sala de aula. Tais saberes, influenciados de maneira direta pelas novas necessidades sociais, tornou-se parte das justificativas para mudanças curriculares no Ensino Médio (EM). Além disso, pesquisas apontam para o descompasso entre a escola atual e o público que a frequenta. Como resultado, o estudante sente dificuldades para perceber a relação entre o que é aprendido na escola com o seu cotidiano, restringindo, em alguns casos, o conhecimento escolar a resolução de problemas propostos nos vestibulares. Com o desenvolvimento de armas nucleares, usinas termonucleares, inspeção de peças, esterilização de alimentos e com a expansão dos métodos de diagnóstico e tratamento médico, o uso de fontes emissoras de radiação ionizante passou a ocupar um papel importante na sociedade. Além disso, seus riscos servem de alerta para sua manipulação responsável. No caso do ensino de Física é discutido as possibilidades de inserção de tópicos da Física Moderna e Contemporânea (FMC). Alguns pesquisadores defendem que tal inserção pode aproximar os estudantes dos fenômenos apresentados e/ou discutidos no seu cotidiano. Dessa forma, neste trabalho discutimos qualitativamente a importância do ensino de Radiações Ionizantes nos cursos de formação de professores e em que medida os artigos publicados nas principais revistas em ensino de ciências tratam este tema. Para desenvolver esse trabalho pesquisamos buscamos apoio nas pesquisas que discutem as relações entre ciência tecnologia e sociedade, formação de professores e trabalhos que discutem a inserção de tópicos de FMC. Em seguida selecionamos algumas revistas especializadas em ensino de ciências com a finalidade de fazer um levantamento dos artigos que tratam do tema radiações ionizantes e sua correlação com a formação de professores e abordagem CTS. Observamos que existe uma escassez de trabalhos sobre RI e formação de professores. A situação é mais crítica no que diz respeito a trabalhos que correlacionam RI, formação de professores e CTS. Através dessa pesquisa percebemos a necessidade de maios estudos sobre RI como tema para ser inserido no EM e nos cursos de formação de professores.

As radiações ionizantes (RI) são amplamente utilizadas na área médica, principalmente para diagnóstico e terapia. Uma vez que a exposição às radiações implica em sérias complicações para a saúde humana e para o meio ambiente, torna-se relevante a compreensão dos mecanismos moleculares que coordenam as respostas em diferentes tipos celulares, especialmente em células normais. A taxa de dose (TD) é um importante fator a ser considerado em radiobiologia, com base em alguns estudos sobre a sua influência nas respostas celulares. Nesse contexto, duas TD distintas (0,5 e 2,0Gy/min) foram testadas para verificar a influência da TD na expressão gênica e protéica em fibroblastos e linfócitos humanos. Fibroblastos primários em estado de confluência foram irradiados com 4Gy e linfócitos com 2 Gy, sob as TDs de 0,5 e 2,0 Gy/min. Em fibroblastos, o RNA foi coletado 6 h após a irradiação, tempo em que foram analisados os níveis de expressão gênica pelo método de microarranjos de cDNA e, para alguns genes de reparo do DNA e algumas proteínas (H2AX, PCNA e FEN1) a expressão foi analisada por qPCR e Western blot, respectivamente, em ambos os tipos celulares, 2 e 6 h após a irradiação. A análise de expressão gênica por microarranjos de cDNA efetuada pelo programa SAM revelou 94 genes (FDR < 0.05) induzidos sob a TD de 0,5 Gy/min. Os principais processos biológicos associados aos genes modulados foram metabolismo, reparo do DNA, apoptose e resposta ao estresse. Por outro lado, 34 genes foram modulados nas células irradiadas sob a taxa de dose de 2,0 Gy/min. Nesta TD, os processos biológicos de maior importância foram: metabolismo, reparo do DNA, replicação, resposta ao estresse e apoptose. Na análise por qPCR, alguns genes de reparo (ERCC1, ERCC3 (ou XPB), XPF, XPA, FEN1) e ATM (sensor de dano) apresentaram uma ampla diferença na modulação gênica detectada em resposta à variação na TD, principalmente nos fibroblastos analisados 2 h após a irradiação. Entretanto, essa diferença foi menor nos linfócitos. Em linfócitos houve um maior número de genes do NER reprimidos relativamente aos fibroblastos, principalmente quando se consideram as células analisadas 2 h após a irradiação, sugerindo que em linfócitos irradiados sob a menor TD, outras vias alternativas de reparo do DNA podem ter ocorrido, possivelmente para lesões do tipo quebra dupla, que são eficientemente induzidas por 2 Gy. A análise protéica de expressão da proteína PCNA indicou que esta se mostrou reprimida nos fibroblastos irradiados com a maior TD, enquanto que a expressão de H2AX nos linfócitos diminuiu 6 h após a irradiação. A proteína PCNA apresentou potencial como um bom indicador dos efeitos de diferentes TDs em fibroblastos irradiados. Em conjunto, os resultados do presente trabalho mostraram uma ampla variedade de processos biológicos envolvidos na resposta ao estresse gerado pela irradiação sob duas diferentes TDs em células humanas (linfócitos e fibroblastos) demonstrando que a TD realmente é capaz de influenciar as respostas celulares em nível transcricional e protéico, o que ainda não foi descrito na literatura. Assim, os resultados constituem informações relevantes que podem contribuir para o esclarecimento das respostas moleculares e vias de sinalização em células normais irradiadas. / Ionizing radiation (IR) has been widely applied in medicine, mainly in diagnosis and therapy purposes. Considering that the exposure to radiation lead to serious complications to human health and environment, it has been relevant to study molecular mechanisms underlying cell responses to gamma-rays in different cell types, especially in normal cells. In radiobiology, dose rate (DR) is an important factor to be taken in account, on the basis of previous results in the literature. In this context, two distinct DR (0.5 and 2.0Gy/min.) were tested aiming to verify the influence of DR on profiles of gene and protein expression displayed by human fibroblasts and lymphocytes. Confluent primary fibroblasts were irradiated with 4Gy and lymphocytes with 2 Gy of -rays, doses delivered at 0.5 and 2.0 Gy/min. RNA was extracted at 6 h post-irradiation for the expression analysis by the cDNA array method in fibroblasts. Few DNA repair genes and proteins (H2AX, PCNA and FEN1) were analyzed by qPCR and Western blot, respectively, in both cell types, at two time-points (2 and 6 h post-irradiation). Results on gene expression were analyzed by the SAM method, which indicated 94 up-regulated genes (False discovery rate < 0.05) at 0.5 Gy/min. The most significant biological processes associated with modulated genes were metabolism, DNA repair, apoptosis signaling and stress response. On the other hand, 34 genes were modulated in cells irradiated at 2.0 Gy/min. (4 up-regulated and 30 down-regulated genes). For such DR, the major biological processes were metabolism, DNA repair, replication, stress response and apoptosis. By using qPCR method, some DNA repair genes (ERCC1, ERCC3 (or XPB), XPF, XPA, FEN1) and ATM (damage sensor) were studied. A wide difference in gene modulation was detected in response to different DR, mainly for fibroblasts analyzed at 2 h post-irradiation. However, this difference was slight in lymphocytes, suggesting that other alternative repair pathways could occurr in irradiated lymphocytes under low TD, possibly in consequence of DNA lesions such as double strand breaks, which are efficiently induced by 2 Gy. Interestingly, the expression of PCNA was down-regulated in fibroblasts irradiated at 2.0 Gy/min, while the expression of H2AX in lymphocytes decreased at both DR 6 h post-irradiation, These findings indicated several biological processes involved in stress responses generated by irradiation at two different DR in human cells. Actually, DR influenced cellular responses at transcriptional and protein levels. These data obtained at molecular level provide relevant information towards clarifying the mechanisms underlying cellular responses displayed by irradiated- normal cells.

Nenhuma / A radiação e suas tecnologias geram reações de medo e ansiedade em diferentes comunidades, pois é comum que esses temas estejam relacionados aos seus efeitos negativos como os acidentes, as bombas atômicas e o câncer. Apesar disso, os avanços tecnológicos e as discussões envolvendo a utilização das radiações têm se tornado cada vez mais importantes a despeito da percepção pública permanecer suportada pelo senso comum. As ideias sobre radiação estão inseridas na discussão de riscos, como um problema de preocupação pública, pois como não é compreendida, gera somatização dos medos, preconceitos e insegurança na população. Os tópicos mais recorrentes na literatura envolvem a saúde dos seres humanos: radiação solar, acidentes radiológicos, energia nuclear e campos eletromagnéticos da tecnologia de telefonia móvel. A OMS (Organização Mundial de Saúde) demonstra preocupações em estudar e esclarecer à população quanto a esse último tema, pois ele tem se firmado como ponto de discussão de saúde pública internacional. Partindo dessas discussões, é interessante que a abordagem sobre os temas seja dialógica, isto é, as ideias informais do leitor inseridas na comunicação. Assim, é preciso conhecer o pensamento da população, no caso deste trabalho, dos estudantes de ensino médio, sobre o tema e como se relacionam com as situações abordadas. A partir do questionário elaborado foram levantadas as ideias apresentadas e a forma como elas influenciam suas decisões nas situações propostas. Esse trabalho, então, investigou como se pensa o conceito de radiação, a forma que se lida com tecnologias e situações relacionadas e, também, organizou e analisou essas ideias para formar as bases para uma abordagem dialógica sobre radiação e assuntos relacionados. A partir dos resultados, foi possível perceber que os estudantes associam a ideia de radiação à ondas eletromagnéticas e raios como os do sol. Contudo, essa visão não foi utilizada por eles na avaliação das situações-problema propostas, ou seja, eles não recorreram a esses conceitos para julgar as situações. Nas afirmações dos alunos é possível perceber que a apresentação de informações sobre os assuntos foi positivamente aceita, pois eles se embasaram nelas para responder ou contestar as questões.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / As radiações ionizantes têm sido cada vez mais usadas na medicina contemporânea, inserida em contextos diagnósticos e terapêuticos. O objeto deste estudo foi, portanto, a exposição à radiação ionizante relacionada ao processo de trabalho dos profissionais de saúde em hemodinâmica e seus objetivos foram conhecer o perfil dos trabalhadores de saúde que atuam no setor de hemodinâmica, levantar os problemas de saúde provocados ou agravados pelo trabalho a partir da ótica do profissional, conhecer as doses ocupacionais dos trabalhadores, correlacionando os dados encontrados à luz da legislação específica vigente. Tratou-se de um estudo exploratório e descritivo com abordagem quanti-qualitativa que teve como instrumentos de coleta de dados: a observação sistemática do local de estudo, lê-se, o setor de hemodinâmica de um hospital universitário localizado na cidade do Rio de Janeiro; a aplicação de um questionário com 35 perguntas abertas e fechadas aos sujeitos do estudo, lê-se, os profissionais de saúde médicos, enfermeiros, técnicos de enfermagem e técnicos de radiologia que atuavam no setor de hemodinâmica; e a busca documental pelas doses ocupacionais retrospectivas dos trabalhadores. Como resultados, identificou-se uma população com média de 39 anos, com experiência profissional média, em saúde e hemodinâmica, de 10 anos, que trabalham em mais de uma instituição de saúde expostos à radiação ionizante. Foram discutidas questões relativas à saúde, segurança, formação e prática profissional dos sujeitos à luz das legislações que versam sobre o uso de radiações ionizantes. Concluiu-se a necessidade de adaptações e mudanças em diversas esferas / setores objetivando a otimização da radioproteção, da saúde dos trabalhadores e da prática em hemodinâmica. / Ionizing radiations have been used in the contemporary medicine, inserted in disgnostic and therapeutical contexts. Therefore, the object of this study was the relation among ionizing radiation exposition and the work process of the health professionals at hemodynamic; the objectives were: know the profile of the professionals working at hemodynamic unit, identify health problems caused or aggravated by work on the workers agreement, know the occupational dosis of this professionals and correlate data with the specific current law. This is a descriptive study, quanti-qualitative that had like data collection instruments: a systematic observation of an hemodynamic unit located in an university hospital in Rio de Janeiro; application of a questionnaire with 35 open and closed questions to population healths professionals: physicians, nurses, radiology technicians and nursing technicians - that works at hemodynamics, and a documentary search about their last occupational dosis. The results of this study shows a population with average age of 39 years, with a lot of professional experience, in health and hemodynamic (10 years in average), that work at more than one health institution exposed to ionizing radiation. Questions about health, security, graduation and professional practice had been analyzed and argued based in the specific legislation. The conclusions are a necessity of adaptations and changes in diverse sectors objectifying the optimization of radioprotection, workers health and the practice at hemodynamics units.

Submitted by Rafael Gombrade (rafaelgombrade@gmail.com) on 2018-09-21T19:28:01Z No. of bitstreams: 1 Gombrade - final 5.pdf: 8450076 bytes, checksum: 574b2a83bc9016c53ac6ee3e5e5886ce (MD5) / Approved for entry into archive by Elza Mitiko Sato null (elzasato@ibilce.unesp.br) on 2018-09-21T20:12:58Z (GMT) No. of bitstreams: 1 gombrade_r_me_sjrp.pdf: 8450076 bytes, checksum: 574b2a83bc9016c53ac6ee3e5e5886ce (MD5) / Made available in DSpace on 2018-09-21T20:12:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 gombrade_r_me_sjrp.pdf: 8450076 bytes, checksum: 574b2a83bc9016c53ac6ee3e5e5886ce (MD5) Previous issue date: 2018-08-03 / A Física das Radiações é um conteúdo previsto nos currículos escolares. Nota-se, no entanto, que ela não tem sido um item prioritário na prática pedagógica da maioria dos professores da escola básica. A partir da constatação de que o ensino da Física das Radiações constitui um desafio para professores, objetivamos investigar o funcionamento da leitura e da interpretação da Física das Radiações Ionizantes por alunos do ensino médio quando da leitura de textos de divulgação científica. Procuramos encontrar resposta para o seguinte problema: Como acontece e que aspectos marcam o funcionamento da leitura e a interpretação da Física das Radiações Ionizantes por alunos do ensino médio quando da leitura de textos de divulgação científica? Optamos por um modelo de pesquisa de abordagem qualitativa, na qual identificamos livros e textos de divulgação científica que abordam a “Física das Radiações Ionizantes” para a elaboração e implementação de um episódio de ensino. O episódio foi implementado em turmas de 3° ano do Ensino Médio. Como instrumentos de coleta de informações, damos ênfase ao uso de produções textuais e vídeo-gravação. Para a análise dos dados, levamos em consideração os aportes teóricos da Análise de Discurso de linha Francesa, a partir das produções de Michel Pechêux e das obras de Eni Orlandi. As análises indicaram que: a) a leitura de textos de divulgação científica e a utilização de questionários formulados com questões abertas podem favorecer o surgimento de discussões não restritas apenas aos conteúdos da física e aos assuntos abordados no texto; b) houve predomínio de repetições formais (o “dizer com suas palavras”) sucintas e/ou superficiais nas respostas aos primeiros questionários, mas que com o passar das aulas, ainda que houvesse um predomínio de repetições formais, surgiram repetições históricas presentes nos discursos dos alunos; c) os estudantes, em geral, apontaram a unidade de ensino como relevante, uma vez que auxiliou no aprendizado de conceitos que não costumam ser explorados ou mesmo mencionados durante o ciclo básico. / Radiation Physics is intended content in school curriculum. On the other hand, it is noteworthy that it has not been a priority item in pedagogical practice of most of the Primary School teachers. Based at basic observation that the teaching of Radiation Physics is a challenge for teachers, we aim to investigate the reading and interpretation of Radiation Physics by high school students when reading scientific texts. According to the proposed objective, we formulated the problem that structures this research and we present it as follows: How and what aspects mark the functioning of the reading and the interpretation of the Physics of Ionizing Radiation by high school students when reading texts of scientific dissemination? We chose a research model with a qualitative approach, in which we identified books and texts of scientific divulgation that approach the "Ionizing Radiation Physics", so that they could be developed with the students. As instruments of information gathering, we emphasize the use of textual productions and video-recording. For the analysis data, we take into account the theoretical contributions of French Discourse Analysis, based on the production by Michel Pechêux, and Eni Orlandi’s oeuvre. The reading of texts of scientific dissemination and the use of questionnaires formulated with open questions can favor the emergence of discussions. This being not restricted only to the contents of Physics addressed to in the text. Though there was a predominance of formal repetitions (the "saying with his words"), there were historical repetitions present in the students' discourses more and more as the course continued; and the students, in general, pointed to the teaching unit as relevant, since it assisted on learning concepts that are not usually explored or even mentioned during High School.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / As radiações ionizantes têm sido cada vez mais usadas na medicina contemporânea, inserida em contextos diagnósticos e terapêuticos. O objeto deste estudo foi, portanto, a exposição à radiação ionizante relacionada ao processo de trabalho dos profissionais de saúde em hemodinâmica e seus objetivos foram conhecer o perfil dos trabalhadores de saúde que atuam no setor de hemodinâmica, levantar os problemas de saúde provocados ou agravados pelo trabalho a partir da ótica do profissional, conhecer as doses ocupacionais dos trabalhadores, correlacionando os dados encontrados à luz da legislação específica vigente. Tratou-se de um estudo exploratório e descritivo com abordagem quanti-qualitativa que teve como instrumentos de coleta de dados: a observação sistemática do local de estudo, lê-se, o setor de hemodinâmica de um hospital universitário localizado na cidade do Rio de Janeiro; a aplicação de um questionário com 35 perguntas abertas e fechadas aos sujeitos do estudo, lê-se, os profissionais de saúde médicos, enfermeiros, técnicos de enfermagem e técnicos de radiologia que atuavam no setor de hemodinâmica; e a busca documental pelas doses ocupacionais retrospectivas dos trabalhadores. Como resultados, identificou-se uma população com média de 39 anos, com experiência profissional média, em saúde e hemodinâmica, de 10 anos, que trabalham em mais de uma instituição de saúde expostos à radiação ionizante. Foram discutidas questões relativas à saúde, segurança, formação e prática profissional dos sujeitos à luz das legislações que versam sobre o uso de radiações ionizantes. Concluiu-se a necessidade de adaptações e mudanças em diversas esferas / setores objetivando a otimização da radioproteção, da saúde dos trabalhadores e da prática em hemodinâmica. / Ionizing radiations have been used in the contemporary medicine, inserted in disgnostic and therapeutical contexts. Therefore, the object of this study was the relation among ionizing radiation exposition and the work process of the health professionals at hemodynamic; the objectives were: know the profile of the professionals working at hemodynamic unit, identify health problems caused or aggravated by work on the workers agreement, know the occupational dosis of this professionals and correlate data with the specific current law. This is a descriptive study, quanti-qualitative that had like data collection instruments: a systematic observation of an hemodynamic unit located in an university hospital in Rio de Janeiro; application of a questionnaire with 35 open and closed questions to population healths professionals: physicians, nurses, radiology technicians and nursing technicians - that works at hemodynamics, and a documentary search about their last occupational dosis. The results of this study shows a population with average age of 39 years, with a lot of professional experience, in health and hemodynamic (10 years in average), that work at more than one health institution exposed to ionizing radiation. Questions about health, security, graduation and professional practice had been analyzed and argued based in the specific legislation. The conclusions are a necessity of adaptations and changes in diverse sectors objectifying the optimization of radioprotection, workers health and the practice at hemodynamics units.

Submitted by Eduarda Figueiredo (eduarda.ffigueiredo@ufpe.br) on 2015-03-13T14:31:24Z No. of bitstreams: 2 Tese pós-defesa - versão final (Marcela Pinto).pdf: 5856446 bytes, checksum: 270d2302a7f4659970cac40a7525b178 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-13T14:31:24Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Tese pós-defesa - versão final (Marcela Pinto).pdf: 5856446 bytes, checksum: 270d2302a7f4659970cac40a7525b178 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2012-03-29 / CAPES e FACEPE / Desde o início da década de 60, a dosimetria citogenética – padrão ouro em biodosimetria – tem sido utilizada na avaliação da dose absorvida de profissionais ocupacionalmente expostos, bem como em investigações de exposições acidentais às radiações ionizantes (RIs). Embora essa técnica dosimétrica seja considerada bem estabelecida, a influência de alguns parâmetros metodológicos nos ensaios biodosimétricos permanece controversa, em especial aqueles relacionados à escolha do método matemático para construção de curvas dose-efeito, ao momento ideal para adição de Colcemid e à temperatura adequada para o armazenamento prolongado de amostras de sangue periférico. Neste contexto, o objetivo geral deste trabalho foi avaliar a otimização dos parâmetros, relativos à adição de Colcemid, à construção de curvas dose-efeito e à temperatura de armazenamento de sangue periférico. Uma vez avaliados, estes parâmetros foram aplicados em investigações de casos envolvendo suspeita de exposição acidental e/ou ocupacional às radiações ionizantes. Na execução das etapas de cada ensaio, amostras de sangue periférico de doadores sadios foram irradiadas com uso de aceleradores lineares com taxas de dose de 0,54 Gy/min e 2 Gy/min. Para construção de curvas de calibração dose-efeito, foram utilizados os softwares Dose estimate (HPA-UK) e CABAS que empregam o Método dos Mínimos Quadrados (MMQ) e de Máxima Verossimilhança (MV), respectivamente. Nesta pesquisa, o MV do programa CABAS foi escolhido como método de referência por produzir um menor erro associado ao ajuste de baixas doses e por este ser um software de livre acesso. Em seguida, foi determinado o melhor intervalo de tempo para adição de Colcemid nas culturas celulares, bem como a melhor temperatura de estocagem das amostras de sangue. Os resultados obtidos indicaram que ambos os métodos matemáticos (MMQ e MV) promovem um bom ajuste dos coeficientes da curva de calibração. Utilizando amostras de sangue não irradiadas (controle) e irradiadas com 2 Gy, verificou-se que a adição de uma baixa concentração de Colcemid no início do cultivo celular (0,05 μg/ml – 0 h) gera índices mitóticos mais elevados, sem comprometer a qualidade das preparações cromossômicas. Além disso, o acondicionamento das amostras irradiadas com 2 Gy a 25 °C gerou uma maior aproximação entre a dose estimada e a dose de radiação utilizada na irradiação in vitro, indicando que essa temperatura de estocagem é a mais adequada para o armazenamento prolongado do sangue periférico. Após a otimização desses parâmetros metodológicos – a saber, o tempo de adição do Colcemid e programa para cálculo da dose absorvida (CABAS – MV) - a dosimetria citogenética foi aplicada com sucesso na investigação da dose absorvida por profissionais ocupacionalmente expostos às radiações ionizantes.

As radiações ionizantes (RI) são amplamente utilizadas na área médica, principalmente para diagnóstico e terapia. Uma vez que a exposição às radiações implica em sérias complicações para a saúde humana e para o meio ambiente, torna-se relevante a compreensão dos mecanismos moleculares que coordenam as respostas em diferentes tipos celulares, especialmente em células normais. A taxa de dose (TD) é um importante fator a ser considerado em radiobiologia, com base em alguns estudos sobre a sua influência nas respostas celulares. Nesse contexto, duas TD distintas (0,5 e 2,0Gy/min) foram testadas para verificar a influência da TD na expressão gênica e protéica em fibroblastos e linfócitos humanos. Fibroblastos primários em estado de confluência foram irradiados com 4Gy e linfócitos com 2 Gy, sob as TDs de 0,5 e 2,0 Gy/min. Em fibroblastos, o RNA foi coletado 6 h após a irradiação, tempo em que foram analisados os níveis de expressão gênica pelo método de microarranjos de cDNA e, para alguns genes de reparo do DNA e algumas proteínas (H2AX, PCNA e FEN1) a expressão foi analisada por qPCR e Western blot, respectivamente, em ambos os tipos celulares, 2 e 6 h após a irradiação. A análise de expressão gênica por microarranjos de cDNA efetuada pelo programa SAM revelou 94 genes (FDR < 0.05) induzidos sob a TD de 0,5 Gy/min. Os principais processos biológicos associados aos genes modulados foram metabolismo, reparo do DNA, apoptose e resposta ao estresse. Por outro lado, 34 genes foram modulados nas células irradiadas sob a taxa de dose de 2,0 Gy/min. Nesta TD, os processos biológicos de maior importância foram: metabolismo, reparo do DNA, replicação, resposta ao estresse e apoptose. Na análise por qPCR, alguns genes de reparo (ERCC1, ERCC3 (ou XPB), XPF, XPA, FEN1) e ATM (sensor de dano) apresentaram uma ampla diferença na modulação gênica detectada em resposta à variação na TD, principalmente nos fibroblastos analisados 2 h após a irradiação. Entretanto, essa diferença foi menor nos linfócitos. Em linfócitos houve um maior número de genes do NER reprimidos relativamente aos fibroblastos, principalmente quando se consideram as células analisadas 2 h após a irradiação, sugerindo que em linfócitos irradiados sob a menor TD, outras vias alternativas de reparo do DNA podem ter ocorrido, possivelmente para lesões do tipo quebra dupla, que são eficientemente induzidas por 2 Gy. A análise protéica de expressão da proteína PCNA indicou que esta se mostrou reprimida nos fibroblastos irradiados com a maior TD, enquanto que a expressão de H2AX nos linfócitos diminuiu 6 h após a irradiação. A proteína PCNA apresentou potencial como um bom indicador dos efeitos de diferentes TDs em fibroblastos irradiados. Em conjunto, os resultados do presente trabalho mostraram uma ampla variedade de processos biológicos envolvidos na resposta ao estresse gerado pela irradiação sob duas diferentes TDs em células humanas (linfócitos e fibroblastos) demonstrando que a TD realmente é capaz de influenciar as respostas celulares em nível transcricional e protéico, o que ainda não foi descrito na literatura. Assim, os resultados constituem informações relevantes que podem contribuir para o esclarecimento das respostas moleculares e vias de sinalização em células normais irradiadas. / Ionizing radiation (IR) has been widely applied in medicine, mainly in diagnosis and therapy purposes. Considering that the exposure to radiation lead to serious complications to human health and environment, it has been relevant to study molecular mechanisms underlying cell responses to gamma-rays in different cell types, especially in normal cells. In radiobiology, dose rate (DR) is an important factor to be taken in account, on the basis of previous results in the literature. In this context, two distinct DR (0.5 and 2.0Gy/min.) were tested aiming to verify the influence of DR on profiles of gene and protein expression displayed by human fibroblasts and lymphocytes. Confluent primary fibroblasts were irradiated with 4Gy and lymphocytes with 2 Gy of -rays, doses delivered at 0.5 and 2.0 Gy/min. RNA was extracted at 6 h post-irradiation for the expression analysis by the cDNA array method in fibroblasts. Few DNA repair genes and proteins (H2AX, PCNA and FEN1) were analyzed by qPCR and Western blot, respectively, in both cell types, at two time-points (2 and 6 h post-irradiation). Results on gene expression were analyzed by the SAM method, which indicated 94 up-regulated genes (False discovery rate < 0.05) at 0.5 Gy/min. The most significant biological processes associated with modulated genes were metabolism, DNA repair, apoptosis signaling and stress response. On the other hand, 34 genes were modulated in cells irradiated at 2.0 Gy/min. (4 up-regulated and 30 down-regulated genes). For such DR, the major biological processes were metabolism, DNA repair, replication, stress response and apoptosis. By using qPCR method, some DNA repair genes (ERCC1, ERCC3 (or XPB), XPF, XPA, FEN1) and ATM (damage sensor) were studied. A wide difference in gene modulation was detected in response to different DR, mainly for fibroblasts analyzed at 2 h post-irradiation. However, this difference was slight in lymphocytes, suggesting that other alternative repair pathways could occurr in irradiated lymphocytes under low TD, possibly in consequence of DNA lesions such as double strand breaks, which are efficiently induced by 2 Gy. Interestingly, the expression of PCNA was down-regulated in fibroblasts irradiated at 2.0 Gy/min, while the expression of H2AX in lymphocytes decreased at both DR 6 h post-irradiation, These findings indicated several biological processes involved in stress responses generated by irradiation at two different DR in human cells. Actually, DR influenced cellular responses at transcriptional and protein levels. These data obtained at molecular level provide relevant information towards clarifying the mechanisms underlying cellular responses displayed by irradiated- normal cells.

Submitted by Amanda Silva (amanda.osilva2@ufpe.br) on 2015-03-04T12:50:41Z No. of bitstreams: 2 Tese Viriato Leal Neto.pdf: 9433751 bytes, checksum: 294db75bb53b26527c9ed291ddca51d3 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-04T12:50:41Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Tese Viriato Leal Neto.pdf: 9433751 bytes, checksum: 294db75bb53b26527c9ed291ddca51d3 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2013 / Dados são constantemente produzidos e tratados pelo Grupo de Dosimetria Numérica (GDN), gerando informações importantes para interessados em radiologia. Entre as informações, citam-se: novos algoritmos para fontes radioativas; resultados dosimétricos utilizando diversos modelos computacionais de exposição (MCEs); e softwares para a realização de tarefas computacionais que vão desde a leitura de arquivos ASCII ou binário até a análise e apresentação de resultados gráficos, alfanuméricos e imagens. Neste trabalho é apresentado o Sistema de Informações Dosimétricas (SID). O sistema foi desenvolvido utilizando-se modernas ferramentas computacionais para a criação de aplicativos desktop, web e bancos de dados (BDs). Entre outras tarefas, o SID permite criar arquivos de entrada para simulações Monte Carlo no sistema EGS (Electron Gamma Shower), acessar BDs para obter fantomas de voxels, resultados dosimétricos e protocolos de radiodiagnósticos, bem como um software desktop, desenvolvido para realizar as tarefas computacionais necessárias para obtenção de resultados dosimétricos com os MCEs utilizados pelo GDN. O sistema já se constitui uma importante ferramenta computacional para usuários de informações radiológicas. Anteveem-se várias possibilidades de continuidade deste trabalho, em particular a criação da versão em inglês do sistema, a incorporação das ferramentas atualmente disponível apenas em desktop, adição de mais informações aos atuais BDs e criação de um novo BD para organizar e disponibilizar objetos 3D úteis no desenvolvimento de modelos antropomórficos.

O presente trabalho teve como objetivo avaliar as alterações causadas pela radiação ionizante em diferentes tipos e quantidades de produtos ricos em amido (farinhas de trigo, de mandioca, centeio, trigo integral, polpa de banana verde e milho) nas características reológicas, tecnológicas, físicas e de textura. As amostras foram irradiadas em fonte de 60Co, com doses de 1, 3 e 9kGy, e taxa de dose 2kGy/h. Foram estudadas a energia de deformação e a extensibilidade, para farinhas de trigo forte e fraca e observou-se o comportamento das características reológicas um, cinco e trinta dias após a irradiação. A característica tecnológica estudada, por até 1 mês após irradiação, foi a atividade enzimática das farinhas de trigo forte e fraca irradiadas. As características físicas: altura, peso e perda de umidade e textura de fatias de pães confeccionadas com a substituição parcial (30%) da farinha de trigo por diferentes farinhas irradiadas foram estabelecidas. Os resultados mostraram que com o aumento da dose de radiação houve uma diminuição no valor da atividade enzimática, principalmente a 9kGy, desta forma não haveria necessidade do acréscimo de melhoradores enzimáticos na elaboração de pães. A altura, o peso, e a perda de umidade dos pães apresentaram diversos comportamentos dependendo do tipo de produto utilizado na sua formulação em substituição à farinha de trigo. Com o aumento da dose de radiação aplicada, houve um aumento na altura dos pães, bem como, diminuição da perda de umidade para a farinha de trigo e farinha de trigo contendo 30% de farinha de banana verde. Do ponto de vista tecnológico, a atividade enzimática não foi negativamente afetada pela radiação. Considerando as características estudadas, a aplicação da dose de 9kGy seria recomendável visando a produção de pães de forma. Embora o processo de irradiação seja geralmente aplicado na preservação da qualidade higiênica de produtos alimentícios, a irradiação de farinhas induz algumas características tecnológicas benéficas para seu uso na produção de pães. / In this work, an evaluation of the changes caused by ionizing radiation in different types and quantities of products rich in starch (wheat flour, cassava, rye, whole wheat, green banana pulp and maize) on rheological, technological, physical and texture characteristics was studied. The samples were irradiated in a 60Co source with doses up to 10kGy, and dose rate about 2kGy/h. It was studied the force and the extensibility of strong and weak wheat flours and the rheological behavior was observed for one, five and thirty days after irradiation. The technological characteristic studied for up to 1 month after irradiation, was the enzymatic activity of the irradiated, weak and strong flours. The physical characteristics: height, weight and moisture loss and texture of loaves made with a partial replacement (30%) of wheat flour by different irradiated flours was established. The results showed that with the increase of radiation dose there was an increase of enzymatic activity, especially for higher doses (9kGy). These results corroborate for the understanding that there would be no need of addition of enzymatic improvers for the bread confection. The height, weight, and loss of moisture from the products developed with different substitutions of flours used in the formulations, showed different behaviors. With an increasing of the radiation dose applied, there was an increase in the height of the loaves, as well as a reduced loss of moisture on the products developed with substitution of 30% of the wheat flour with irradiated wheat flour and pulp of green banana flour. From a technological standpoint, the enzymatic activity was not adversely affected by radiation. Considering the characteristics studied, the dose of 9kGy would be recommended seeking the production of loaves. Although the irradiation process is generally applied in the preservation of hygienic quality of food products, its use on different kinds of flours used in bread production may induce some beneficial technological characteristics.