Considerando que a SAA é uma proteína de fase aguda e que uma concentração elevada desta proteína é observada em pacientes obesos e com resistência à insulina, estimulou-se pré-adipócitos murinos 3T3-L1 a baixas concentrações de rSAA durante o processo de proliferação e diferenciação. Ensaios de incorporação de [metil-3H]-timidina, ciclo e viabilidade celular por citometria de fluxo foram realizados, assim como genes adipogênicos foram determinados durante a fase de diferenciação. Ainda, investigou-se a participação da rSAA metabolismo da glicose, bem como a expressão do seu receptor GLUT4 e os perfis de lipólise. Como resultados, obteve-se que a rSAA causou um aumento na proliferação celular assim como na porcentagem de células na fase S. Este efeito foi dose dependente e mediado via sinalização da ERK1/2. Ainda, rSAA inibiu a diferenciação por meio da diminuição da expressão de fatores transcrição (PPARγ, C/EBPβ e C/EBPα) e proteínas adipogênicas (FABP4 e perilipina). Em relação à captação de 2-desoxi-[1,2-3H]-D-glicose, a rSAA preveniu este processo, corroborando com os resultados de expressão diminuída receptor GLUT4. Ainda, o aumento da lipólise provocada pela rSAA, favorece resistência à insulina no modelo estudado. Portanto, conclui-se que a SAA aumenta a proliferação mas inibe a diferenciação de células 3T3-L1 sugerindo papel importante desta proteína no processo de adipogênese. / Considering that SAA is an acute phase protein and increased serum levels are associated with chronic hyperglycemia, insulin resistance and obesity, we first examined the possibility that rSAA could affect proliferation and differentiation 3T3-L1 preadipocytes. 3T3-L1 adipocytes were treated with recombinant human SAA and [methyl-3H]-thymidine incorporation, flow cytometric analysis of cell cycle and viability were performed. Also, gene expression profiles of adipogenic factor were performed during differentiation protocol as well as glucose uptake, GLUT4 gene expression and lipolysis assay. rSAA caused an increment in cell proliferation consisted with FACS analysis with a percentage of cells in the S phase. Cell proliferation was mediated by ERK1/2 signaling pathway and in dose-dependent manner. Also, SAA inhibited differentiation process by decreasing adipogenic genes PPARγ, C/EBPβ, C/EBPα, and proteins FABP4, and perilipin expression. Also, rSAA prevented 2-deoxy-[1,2-3H]-glucose uptake and GLUT4 expression. In addiction, lipolysis was increased favoring insulin resistance in 3T3L1 adipogenic model. In conclusion, it was demonstrated that rSAA enhances proliferation but prevents differentiation in 3T3-L1 adipocytes, supporting a even more complex participation, than previously expected, of inflammatory proteins the adipogenic process.

O Gerenciamento de Facilidades é considerado por muitos autores como um campo interdisciplinar dedicado a garantir a funcionalidade do ambiente construído através da integração de pessoas, lugar, processos e tecnologia. Para desenvolver um modelo arquitetônico que possa ser usado para lidar com a Gerência Facilidades (GF), é primeiramente necessário estabelecer o papel que ele deve ter nos negócios, como deve executar esses papéis e então verificar se ele atinge esses requisitos. Um ponto crítico no desenvolvimento de um modelo para gerenciar facilidades é a falta de uma arquitetura corporativa; devido a que os sistemas prediais e outros sistemas referentes à infraestrutura foram concebidos sem uma visão de GF; por outro lado, estes sistemas normalmente são compostos por diversas tecnologias heterogêneas às quais para funcionar corretamente, devem satisfazer exigências como desempenho, confiabilidade, portabilidade, escalabilidade e interoperatividade, entre outras. Este trabalho de dissertação propõe utilizar uma arquitetura de objetos distribuídos para otimizar o processo de GF, aplicado em um caso real, especificamente em uma indústria de eletroeletrônicos do Pólo Industrial de Manaus. O objetivo de utilizar a referida arquitetura é para reduzir a sua complexidade através da abstração e separação de requisitos de projeto e, ao mesmo tempo, direcionar os passos que serão tomados pelas tarefas envolvidas. O método proposto para atingir tal objetivo é a identificação do processo de GF, a especificação, onde a informação obtida será classificada em forma de visões utilizando o RM-ODP, e a modelagem, onde se analisa as complexidades, como relacionamentos, dependências e limitações do processo de negócios, objetivando elaborar uma arquitetura que será implementada nos domínios de aplicação do processo de GF. / The Facilities Management is considered by many authors as an interdisciplinary field devoted to ensure the functionality of the built environment by integrating people, place, process and technology. To develop an architectural model that can be used to deal with management facilities, it is first necessary to establish the role that it must have in business, how to perform these roles and then see if it achieves these requirements. A critical point in developing a model for managing facilities is the lack of an enterprise architecture, due to the building systems and other systems related to infrastructure were designed without a vision of FM on the other hand, these systems usually consist of several heterogeneous technologies in which to function properly must meet requirements such as performance, reliability, portability, scalability and interoperability, among others. This dissertation work proposes to use distributed object architecture to optimize the process of Facilities Management, applied in a real case, especially in a consumer electronics industry of the Industrial Pole of Manaus. The purpose of using this architecture is to reduce complexity through abstraction and separation of design requirements, while directing the steps to be taken by the tasks involved. The proposed method for achieving this goal is the identification of the FM process, specifying where the information obtained will be sorted in order of views using the RM-ODP, and modeling which analyzes the complexities, such as relationships, dependencies and constraints in the process of business, aiming to develop an architecture that will be implemented in the areas of application of the FM process.

O Gerenciamento de Facilidades é considerado por muitos autores como um campo interdisciplinar dedicado a garantir a funcionalidade do ambiente construído através da integração de pessoas, lugar, processos e tecnologia. Para desenvolver um modelo arquitetônico que possa ser usado para lidar com a Gerência Facilidades (GF), é primeiramente necessário estabelecer o papel que ele deve ter nos negócios, como deve executar esses papéis e então verificar se ele atinge esses requisitos. Um ponto crítico no desenvolvimento de um modelo para gerenciar facilidades é a falta de uma arquitetura corporativa; devido a que os sistemas prediais e outros sistemas referentes à infraestrutura foram concebidos sem uma visão de GF; por outro lado, estes sistemas normalmente são compostos por diversas tecnologias heterogêneas às quais para funcionar corretamente, devem satisfazer exigências como desempenho, confiabilidade, portabilidade, escalabilidade e interoperatividade, entre outras. Este trabalho de dissertação propõe utilizar uma arquitetura de objetos distribuídos para otimizar o processo de GF, aplicado em um caso real, especificamente em uma indústria de eletroeletrônicos do Pólo Industrial de Manaus. O objetivo de utilizar a referida arquitetura é para reduzir a sua complexidade através da abstração e separação de requisitos de projeto e, ao mesmo tempo, direcionar os passos que serão tomados pelas tarefas envolvidas. O método proposto para atingir tal objetivo é a identificação do processo de GF, a especificação, onde a informação obtida será classificada em forma de visões utilizando o RM-ODP, e a modelagem, onde se analisa as complexidades, como relacionamentos, dependências e limitações do processo de negócios, objetivando elaborar uma arquitetura que será implementada nos domínios de aplicação do processo de GF. / The Facilities Management is considered by many authors as an interdisciplinary field devoted to ensure the functionality of the built environment by integrating people, place, process and technology. To develop an architectural model that can be used to deal with management facilities, it is first necessary to establish the role that it must have in business, how to perform these roles and then see if it achieves these requirements. A critical point in developing a model for managing facilities is the lack of an enterprise architecture, due to the building systems and other systems related to infrastructure were designed without a vision of FM on the other hand, these systems usually consist of several heterogeneous technologies in which to function properly must meet requirements such as performance, reliability, portability, scalability and interoperability, among others. This dissertation work proposes to use distributed object architecture to optimize the process of Facilities Management, applied in a real case, especially in a consumer electronics industry of the Industrial Pole of Manaus. The purpose of using this architecture is to reduce complexity through abstraction and separation of design requirements, while directing the steps to be taken by the tasks involved. The proposed method for achieving this goal is the identification of the FM process, specifying where the information obtained will be sorted in order of views using the RM-ODP, and modeling which analyzes the complexities, such as relationships, dependencies and constraints in the process of business, aiming to develop an architecture that will be implemented in the areas of application of the FM process.

Considerando que a SAA é uma proteína de fase aguda e que uma concentração elevada desta proteína é observada em pacientes obesos e com resistência à insulina, estimulou-se pré-adipócitos murinos 3T3-L1 a baixas concentrações de rSAA durante o processo de proliferação e diferenciação. Ensaios de incorporação de [metil-3H]-timidina, ciclo e viabilidade celular por citometria de fluxo foram realizados, assim como genes adipogênicos foram determinados durante a fase de diferenciação. Ainda, investigou-se a participação da rSAA metabolismo da glicose, bem como a expressão do seu receptor GLUT4 e os perfis de lipólise. Como resultados, obteve-se que a rSAA causou um aumento na proliferação celular assim como na porcentagem de células na fase S. Este efeito foi dose dependente e mediado via sinalização da ERK1/2. Ainda, rSAA inibiu a diferenciação por meio da diminuição da expressão de fatores transcrição (PPARγ, C/EBPβ e C/EBPα) e proteínas adipogênicas (FABP4 e perilipina). Em relação à captação de 2-desoxi-[1,2-3H]-D-glicose, a rSAA preveniu este processo, corroborando com os resultados de expressão diminuída receptor GLUT4. Ainda, o aumento da lipólise provocada pela rSAA, favorece resistência à insulina no modelo estudado. Portanto, conclui-se que a SAA aumenta a proliferação mas inibe a diferenciação de células 3T3-L1 sugerindo papel importante desta proteína no processo de adipogênese. / Considering that SAA is an acute phase protein and increased serum levels are associated with chronic hyperglycemia, insulin resistance and obesity, we first examined the possibility that rSAA could affect proliferation and differentiation 3T3-L1 preadipocytes. 3T3-L1 adipocytes were treated with recombinant human SAA and [methyl-3H]-thymidine incorporation, flow cytometric analysis of cell cycle and viability were performed. Also, gene expression profiles of adipogenic factor were performed during differentiation protocol as well as glucose uptake, GLUT4 gene expression and lipolysis assay. rSAA caused an increment in cell proliferation consisted with FACS analysis with a percentage of cells in the S phase. Cell proliferation was mediated by ERK1/2 signaling pathway and in dose-dependent manner. Also, SAA inhibited differentiation process by decreasing adipogenic genes PPARγ, C/EBPβ, C/EBPα, and proteins FABP4, and perilipin expression. Also, rSAA prevented 2-deoxy-[1,2-3H]-glucose uptake and GLUT4 expression. In addiction, lipolysis was increased favoring insulin resistance in 3T3L1 adipogenic model. In conclusion, it was demonstrated that rSAA enhances proliferation but prevents differentiation in 3T3-L1 adipocytes, supporting a even more complex participation, than previously expected, of inflammatory proteins the adipogenic process.

The best way to conquer breast cancer is early detection of the disease. Research studies show that earlier detection results in the increase of life span of the affected person. Traditional two-dimensional mammography is the most prevalent method used in detecting breast cancer. Recently, a three-dimensional digital breast tomosynthesis (DBT) system has been created, which is hopeful to surpass the technology of traditional mammography systems. The DBT system can provide three-dimensional information, allowing physicians to reduce the amount of false negative screening in addition to better monitoring of breast cancer and to catch lesions that may be otherwise cancerous. In this research, the View Angle (VA) and number of projection images (N) were investigated and compared with parallel imaging configurations using two reconstruction algorithms, including Back Projection (BP) and Shift-And-Add (SAA). Modulation Transfer Function (MTF) analyses were conducted with both algorithms, in order to determine which method displayed better image qualities to ultimately improve the detection of breast cancer.

The combination of partial nitritation and anaerobic ammonium oxidation (Anammox) is a composting way to remove the nitrogen in the wastewater. In this article the analysis was made to investigate how the salinity in the wastewater affects the process. Two strategies of salt concentration increase were tested in two reactors. The physical, chemical parameters and the activity of the bacteria in the reactors were monitored. The results of two strategies were compared and the reactor with less salt in each period showed higher bacteria activities and efficiency. Finally the outlook for the future research was made.

Visando novos estudos com a proteína amilóide sérica A (SAA), propusemos a produção de seu recombinante humano em Escherichia coli, mais especificamente, a isoforma encontrada na fase aguda (A-SAA1) e da constitutivamente expressa (C-SAA4). Realizamos a expressão, identificação e purificação das proteínas recombinantes. Concomitantemente, também avaliamos o efeito da hipóxia na expressão e produção da proteína SAA nativa em linhagens de pré-adipócitos murinos 3T3-L1, não diferenciados e diferenciados e adipócitos humanos. Aparentemente quanto maior o grau de diferenciação celular, maior a expressão e produção da proteína. Para os adipócitos humanos, o perfil de expressão de mRNA da SAA mostra que SAA1>SAA2>SAA4 nas relações 500:150:1. Na hipóxia, há um aumento na expressão de SAA, entretanto não associamos esta expressão a um aumento da concentração da proteína. A importância do reconhecimento de que SAA pode ser umas das proteínas induzidas pela hipóxia em adipócitos é discutida em relação ao seu papel pró-inflamatório. / In order to provide more complex studies with the protein serum amyloid A (SAA), this study proposed the production of its human recombinant in bacteria (Escherichia coli), more specifically, the synthesis of the main isoform found in the acute phase (A-SAA1) and the constitutively expressed (C-SAA4). The expression, identification and purification of the recombinants proteins was performed. Concurrently, we also did a study evaluating the effect of hypoxia in the expression and protein production of native SAA in undifferentiated and differentiated murine preadipocytes 3T3-L1 and humans adipocytes. Apparently, the protein expression and production increases with the cell differentiation degree. For human adipocytes, we demonstrated the mRNA expression profile of SAA, in which SAA1 > SAA2 > SAA4 (500:150:1). In hypoxia, there is an increased expression of SAA, but we could not link it to an increase of protein concentration. The importance of recognizing that SAA may be one of the proteins induced by hypoxia in adipocytes is discussed in relation to the proinflammatory role of this protein.

Visando novos estudos com a proteína amilóide sérica A (SAA), propusemos a produção de seu recombinante humano em Escherichia coli, mais especificamente, a isoforma encontrada na fase aguda (A-SAA1) e da constitutivamente expressa (C-SAA4). Realizamos a expressão, identificação e purificação das proteínas recombinantes. Concomitantemente, também avaliamos o efeito da hipóxia na expressão e produção da proteína SAA nativa em linhagens de pré-adipócitos murinos 3T3-L1, não diferenciados e diferenciados e adipócitos humanos. Aparentemente quanto maior o grau de diferenciação celular, maior a expressão e produção da proteína. Para os adipócitos humanos, o perfil de expressão de mRNA da SAA mostra que SAA1>SAA2>SAA4 nas relações 500:150:1. Na hipóxia, há um aumento na expressão de SAA, entretanto não associamos esta expressão a um aumento da concentração da proteína. A importância do reconhecimento de que SAA pode ser umas das proteínas induzidas pela hipóxia em adipócitos é discutida em relação ao seu papel pró-inflamatório. / In order to provide more complex studies with the protein serum amyloid A (SAA), this study proposed the production of its human recombinant in bacteria (Escherichia coli), more specifically, the synthesis of the main isoform found in the acute phase (A-SAA1) and the constitutively expressed (C-SAA4). The expression, identification and purification of the recombinants proteins was performed. Concurrently, we also did a study evaluating the effect of hypoxia in the expression and protein production of native SAA in undifferentiated and differentiated murine preadipocytes 3T3-L1 and humans adipocytes. Apparently, the protein expression and production increases with the cell differentiation degree. For human adipocytes, we demonstrated the mRNA expression profile of SAA, in which SAA1 > SAA2 > SAA4 (500:150:1). In hypoxia, there is an increased expression of SAA, but we could not link it to an increase of protein concentration. The importance of recognizing that SAA may be one of the proteins induced by hypoxia in adipocytes is discussed in relation to the proinflammatory role of this protein.

Nos últimos anos, nosso grupo de pesquisa vem descrevendo vários efeitos da SAA em células do sistema imune no que diz respeito à expressão e liberação de citocinas pró-inflamatórias. Neste estudo centramos nossa atenção na verificação dos efeitos da SAA sobre células mononucleares. Para isto, usamos três modelos experimentais. Em murinos, descrevemos a habilidade da SAA induzir a produção de NO por macrófagos peritoneais e, com uso de animais knockout para TLR4, sugerimos que SAA seja um ligante endógeno do TLR4. Em células mononucleares de sangue periférico humano, a SAA induz a expressão e liberação de CCL20, uma quimiocina importante na transição da resposta imune inata para adaptativa, bem como a expressão dos fatores M-CSF e VEGF. Em células THP-1, mostramos a cinética de fosforilação de proteínas tirosina quinases promovida pela SAA e comparamos com LPS, um estímulo pró-inflamatório clássico. Ainda em células THP-1 mostramos que a SAA induz a fosforilação de duas proteínas importantes no processo inflamatório por induzirem a ativação de NFκB; a p38 e a ERK1/2. Com este estudo contribuímos com o conhecimento a respeito do papel regulatório da SAA em células mononucleares. A ação da SAA sobre estas células torna-se importante, pois estas são cruciais na resposta imune inata e também atuam como células acessórias na resposta imune adaptativa. Desta forma, evidencia-se que, no processo de fase aguda, a expressão e a síntese de SAA resultam na modulação de etapas que controlam este processo e sua progressão. / In the past few years, our research group has described various effects of serum amyloid A (SAA) on cells of the immune system regarding the expression and release of pro-inflammatory cytokines. In this study we have focused on the effects of SAA on mononuclear cells. In order to do this, we have used three experimental models. In the murine experimental model, we described SAA\'s ability to induce the production of NO through peritoneal macrophages and, by using knockout animals for TLR4, we suggested that SAA is an endogenous agonist of TLR4. In mononuclear cells of peripheral human blood, SAA induced the expression and release of CCL20, an important chemokine in the transition from the innate to the adaptive immune response, as well as the expression of M-CSF and VEGF-factors. In THP-1 cells, we showed the phosporylation kinetics of tyrosine protein kinases induced by SAA, and we compared it to LPS, a classic pro-inflammatory stimulus. We also demonstrated, in THP-1 cells, that SAA induced the phosphorylation of two proteins, namely p38 and ERK1/2, that are crucial in the inflammatory process because they induce the activation of transcription factors. With this study, we contributed to the knowledge of the regulatory role of SAA in mononuclear cells. Activity of SAA on these cells is highly important, for they are crucial in the innate immune response and act as accessory cells in the adaptive immune response. Hence it is evident that, in the acute phase process, the expression and synthesis of SAA result in the modulation of the phases that control this process and its progression.

Estágio realizado na INDAQUA MATOSINHOS - Gestão de Águas de Matosinhos, S. A. - e orientado pela Eng. Teresa Paiva / Tese de mestrado integrado. Engenharia do Ambiente. Área de Especialização de Gestão. Faculdade de Engenharia. Universidade do Porto. 2012