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Yes / Size Exclusion Chromatography is traditionally carried out in either aqueous or non-polar solvents. A system to present molar mass distributions of polymers using methanol as a mobile phase is presented. This is shown to be a suitable system for determining the molar mass distributions poly(N-isopropylacrylamide)s (PNIPAM); a polymer class that is often difficult to analyze by size exclusion chromatography. DOSY NMR was used to provide intrinsic viscosity data that was used in conjunction with a viscometric detector to provide absolute calibration. Then the utility of the system was shown by providing the absolute molar mass distributions of dispersed highly branched PNIPAM with biologically functional end groups. / Wellcome Trust

Parmi les voies de signalisation, la voie hedgehog (HH) intervient dans la formation de la polarité segmentaire. Si elle est défectueuse, elle entraine plusieurs malformations. De nombreux cancers présentent une suractivation de cette voie. La voie HH activée par la fixation du ligand HH sur le récepteur Patched (hPtc) et fait intervenir plusieurs partenaires cytoplasmiques dont Supressor of Fused (SUFU).Peu de données moléculaires et structurales sont disponibles pour cette voie et pourtant, ces données sont nécessaires pour comprendre sans ambiguïté son fonctionnement. De plus, la voie HH a été proposée comme pouvant être la cible de traitements chimio thérapeutiques mais, la protéine hPtc est impliquée dans l’efflux des drogues anticancéreuses. Une inhibition de hPtc par la fixation de son ligand entraine l’inhibition de l’efflux de drogues. Néanmoins, le site de fixation de HH sur son récepteur n’a pas encore été déterminé.Durant cette thèse, les travaux effectués ont permis l’étude structurale de la protéine hPtc notamment la détermination du site de fixation de HH. Dans un deuxième volet de cette thèse, j’ai effectué des études structurales de certaines protéines SUFU.Dans un premier temps, je me suis concentrée sur les domaines extracellulaires de hPtc qui ont été décrits comme nécessaires pour la fixation du ligand HH. J’ai cloné une protéine chimère constituée de ces deux domaines liés par le lysozyme du phage T4 (hPtcD1D2). Cette construction a été exprimée dans la bactérie E.coli. Les conditions d’expression testées permettent d’obtenir la protéine sous forme de corps d’inclusion dans le cytoplasme de la bactérie. Dans un deuxième temps, j’ai cloné la protéine dans un vecteur d’expression en levure. De manière concomitante, j’ai exprimé la protéine hPtc tronquée de ses régions N et C terminales (hPtcΛNΛC). Ce sont des régions intrinsèquement désordonnées qui ne permettraient pas une bonne cristallisation de la protéine. L’expression a été effectuée dans la levure. La solubilisation de cette protéine membranaire est en cours d’expérimentation.Ce travail a permis de poser les bases de l’expression de hPtcD1D2 et de hPtcΛNΛC. Ceci va notamment permettre la surexpression de la protéine et sa cristallisation afin de déterminer sa structure 3D et de caractériser le site de fixation de son ligand.Enfin, j’ai entrepris des études structurales des protéines SUFU. Un nouveau site de fixation du Zn a été caractérisé. En effet, après purification de la protéine, j’ai effectué des mesures d’affinité à l’aide d’un composé colorimétrique, le PAR et des expériences de spectroscopie d’émission atomique dans lesquelles j’ai fait varier le pH et la concentration en Zn. Ainsi, j’ai pu déterminer que SUFU a une affinité nanomolaire pour le Zn meilleure à pH 8 qu’à pH 6,5. La fixation du Zn se ferait donc sur un site basique. La structure de SUFU a été publiée en 2013 par deux équipes, je me suis inspirée des conditions de cristallisation de ces deux articles, pour cristalliser SUFU en présence de Zn. Les expériences de dichroïsme circulaire ont permis d’affirmer que ces protéines sont organisées en hélices α et en feuillets β. De plus, grâce à la diffusion des rayons X aux petits angles, j’ai pu déterminer que dSUFU, hSUFU et zSUFU n’ont pas la même conformation en solution. Alors que SUFU de drosophile est un monomère globulaire, les protéines humaine et de poisson zèbre seraient plutôt allongées et dimériques. La région N-terminale potentiellement impliquée dans la dimérisation de hSUFU a été tronquée et hSUFUΛ30 présente des différences d’état d’oligomérisation. / The hedgehog (HH) signalling pathway is involved in the segmentary polarity formation. A dysfunction of this pathway is involved in several malformations. Many cancers are caused by an overactivation of this pathway. The HH signalling pathway is activated by the binding of HH on the receptor Patched (hPtc) and included many cytoplasmic partners such as Suppressor of Fused (SUFU). Few molecular and structural data are available on this pathway even if these data are important to fully understand the pathway functioning. Furthermore, the HH signalling pathway maybe be the target of chemotherapy treatments. However, hPtc is involved in drugs efflux. Inhibition of hPtc by the binding of its ligand HH may lead to this efflux inhibition. Yet, the binding site of HH on its receptor hPtc is not yet determined.During this thesis, the structural study of hPtc have been engaged especially the study of the binding site of HH. On the second hand, I have structurally studied some SUFU proteins.First of all, I have expressed the extracellular domains of hPtc. These domains have been described as necessary for HH binding. I have cloned a chimeric protein made by the extracellular domains of hPtc associated with the lysozyme T4 (hPtcD1D2). This protein have been expressed in the E.Coli bacteria. The protein expressed in inclusion bodies in the cytoplasm of the bacteria. In the other hand, I have cloned the protein in a yeast expression vector. Part of this, I have also expressed the protein hPtc without its N and C terminus regions (hPtcNC). These regions are intrinsically disrupted. They may lead to crystallization problems. The protein has been expressed in yeast.This work permits to expressed hPtcD1D2 and hPtcΛNΛC. This will lead to the expression of the protein and its crystallisation in order to determine its 3D structure and to characterize its ligand binding site.Finally, I structurally studied the protein SUFU. A novel Zn binding site has been characterized. In fact, after the protein purification, I have made affinity measures using a colorimetric compound, PAR. I also performed spectroscopic experiments in which I varied the pH and the Zn concentration. I determined the SUFU has a nanomolar affinity for the Zn best at pH 8 than pH 6.5. Indeed, the Zn binding site may be basic.The SUFU 3D structure has been published in 2013 by two teams. Inspired by their crystallization conditions, I crystallized SUFU with Zn. Circular dichroism experiments permitted to know that the proteins are organized in  helices and  sheets. Moreover, small angles X ray spectroscopy experiments show that dSUFU, hSUFU and zSUFU did not have the same conformation in solution. Drosophila SUFU is globular and human and zebrafish SUFU are long and dimeric. The N-terminal region involved in hSUFU has been removed and hSUFUΛ30 is present in different oligomerization forms.

Th. 3e cycle--Hist. mod.--Paris--E.H.E.S.S., 1986.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Comunicação e Expressão / Made available in DSpace on 2012-10-16T08:27:34Z (GMT). No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2016-01-08T19:32:08Z : No. of bitstreams: 1 102461.pdf: 5294950 bytes, checksum: 8bab9de35760a0b28bbe1d5e96ffc8ea (MD5) / Resgate de dramaturgia brasileira de autoria feminina do século XIX, visando fundamentalmente contribuir para a re-construção do passado histórico das mulheres brasileiras. Realizado em duas direções, esse resgate se concretiza através da organização de um Índice Bibliográfico de Dramaturgas Brasileiras do Século XIX e da leitura crítica da obra dramatúrgica de uma dessas autoras, Josephina Alvares de Azevedo, cuja comédia, intitulada O voto feminino, foi escrita, representada e publicada no Rio de Janeiro, em 1890.

Orientador: Maria Célia de Moraes Leonel / Banca: Márcia Valéria Zamboni Gobbi / Banca: Maria Lúcia Outeiro Fernandes / Banca: Ana Paula Arnaut / Banca: Luiz de França Costa Lima Neto / Resumo: Esta tese explora a presença do silêncio como elemento significante do discurso em romances da escritora portuguesa Teolinda Gersão, notadamente em Os teclados e A cidade de Ulisses. O silêncio pode presentificar-se na obra literária em seus diferentes modos de existir, isto é, silêncio que atravessa as palavras devido à sua condição de anterioridade (as palavras é que rompem o silêncio); silêncio que existe entre as palavras, advindo de sentidos silenciados pela eleição de um determinado discurso que apaga, necessariamente, os demais; silêncio que indica que o sentido pode sempre ser outro ou, ainda, que aquilo que é mais importante nunca se diz. O trabalho procura demonstrar como, por meio desses modos de existir, o silêncio participa dos sentidos do discurso e, no caso do corpus em análise, ajuda a colocar em cena críticas a aspectos da sociedade que caracterizam formas de opressão e autoritarismo. O silêncio, nesse cenário, também surge como meio de resistência. A pesquisa apoia-se nos conceitos teóricos sobre o silêncio propostos por Eni Orlandi (2007), George Steiner (1988), Ludwig Wittgenstein (1968), Santiago Kovadloff (2003) e Susan Sontag (1987). / Resumen: Esta tesis explora la presencia del silencio como elemento significativo del discurso en novelas, da escritora portuguesa Teolinda Gersão, especialmente en Os teclados y A cidade de Ulisses. El silencio se puede hacer presente en la obra literaria en sus diferentes modos de existir, es decir, silencio que atraviesa las palabras debido a su condición de anterioridad (las palabras es que rompen el silencio); el silencio que existe entre las palabras, proveniente de sentidos silenciados por la elección de un determinado discurso que apaga, necesariamente, a los demás; silencio que indica que el sentido puede siempre ser otro o, aún, que lo que es más importante nunca se dice. Buscamos demostrar cómo, por medio de estos modos de existir, el silencio participa de los sentidos del discurso y, en el caso del corpus en análisis, ayuda a poner en escena críticas a aspectos de la sociedad que caracterizan formas de opresión y autoritarismo. El silencio, en ese escenario, también surge como medio de resistencia. La investigación se apoya en los conceptos teóricos sobre el silencio propuestos por Eni Orlandi (2007), George Steiner (1988), Ludwig Wittgenstein (1968), Santiago Kovadloff (2003) y Susan Sontag (1987). / Doutor

Submitted by Edileide Reis (leyde-landy@hotmail.com) on 2013-05-14T13:45:08Z No. of bitstreams: 4 Norma Suely da Silva Pereira P4.pdf: 4962338 bytes, checksum: 20bb76fee6bbd3d1dbfc6a26d62f4fdf (MD5) Norma Suely da Silva Pereira P3.pdf: 6414148 bytes, checksum: 57203b43a4cb1c5c196cdf7bf30cd6bd (MD5) Norma Suely da Silva Pereira P2.pdf: 5648304 bytes, checksum: 4addb9bb85f3d0dbebd3827c1a7ab314 (MD5) Norma Suely da Silva Pereira P1.pdf: 1133509 bytes, checksum: 0ffab81706795507fc820fb78f13902e (MD5) / Approved for entry into archive by Alda Lima da Silva(sivalda@ufba.br) on 2013-05-16T17:48:41Z (GMT) No. of bitstreams: 4 Norma Suely da Silva Pereira P4.pdf: 4962338 bytes, checksum: 20bb76fee6bbd3d1dbfc6a26d62f4fdf (MD5) Norma Suely da Silva Pereira P3.pdf: 6414148 bytes, checksum: 57203b43a4cb1c5c196cdf7bf30cd6bd (MD5) Norma Suely da Silva Pereira P2.pdf: 5648304 bytes, checksum: 4addb9bb85f3d0dbebd3827c1a7ab314 (MD5) Norma Suely da Silva Pereira P1.pdf: 1133509 bytes, checksum: 0ffab81706795507fc820fb78f13902e (MD5) / Made available in DSpace on 2013-05-16T17:48:41Z (GMT). No. of bitstreams: 4 Norma Suely da Silva Pereira P4.pdf: 4962338 bytes, checksum: 20bb76fee6bbd3d1dbfc6a26d62f4fdf (MD5) Norma Suely da Silva Pereira P3.pdf: 6414148 bytes, checksum: 57203b43a4cb1c5c196cdf7bf30cd6bd (MD5) Norma Suely da Silva Pereira P2.pdf: 5648304 bytes, checksum: 4addb9bb85f3d0dbebd3827c1a7ab314 (MD5) Norma Suely da Silva Pereira P1.pdf: 1133509 bytes, checksum: 0ffab81706795507fc820fb78f13902e (MD5) Previous issue date: 2008 / A pesquisa de fontes em periódicos do início do século XX revelou a existência de uma outra face do poeta Arthur de Salles, não mais apenas o poeta do mar, mas um Salles cronista e crítico. Com o objetivo de conhecer melhor esse outro lado de sua vasta produção, procedeu-se ao resgate de suas paginas de crítica, de modo a colaborar para a sua justa reinserção no cânone. A pesquisa objetiva ainda analisar as estratégias de enunciação presentes nos textos selecionados, a partir do que, espera-se poder ajudar a ampliar o perfil do poeta baiano. Para tanto, selecionou-se um corpus que compreende 11 textos de discurso crítico, todos em prosa, sendo nove textos veiculados em periódicos e dois textos de natureza epistolar. O corpus foi editado, conforme a tradição de cada texto, seguindo-se uma orientação conservadora. A obra crítica de Arthur de Salles insere-se numa tendência do período em que a crítica literária tem muitas vezes a feição de recensão crítica. Trata-se da apresentação relativamente breve de novas publicações, analisadas sob um ponto de vista, sobretudo, impressionista, de teor mais descritivo do que propriamente interpretativo veiculada em periódicos literários e de divulgação. Para dar um testemunho da importância dos periódicos no início do século passado, faz-se uma breve descrição dos jornais e das revistas nas quais foram publicados os textos editados, salientando-se a relação existente entre os periódicos, os poetas e a sociedade de então, com destaque para os caminhos percorridos pela crônica e pela crítica literária, e a participação de Arthur de Salles na crítica literária do período. A partir da análise dos textos críticos do autor são apresentadas as tendências de linhas temáticas seguidas, observando-se as estratégias de enunciação realizadas, à luz da teoria bakhtiniana e as estratégias utilizadas na construção do ethos discursivo, a partir de uma ótica pragmática da linguagem, através da concepção proposta por Maingueneau, que utiliza o conceito retórico na análise de discurso, adaptando-o para análise de textos escritos e não necessariamente argumentativos. Salles demonstra em seus textos críticos erudição, conhecimento enciclopédico e literário, que fazem dos seus textos mais que simples recensão informativa de obras publicadas. Contudo, não possui critérios objetivos de análise, sua crítica é de simpatia, predominantemente elogiosa. Na construção da argumentação as vozes do poeta e do crítico se confundem e o texto, não raro, toma feições de prosa poética. A análise das escolhas lexicais, assim como das demais estratégias discursivas utilizadas revelam a intenção do locutor de garantir a adesão do interlocutor, a legitimação do discurso. As marcas presentes na enunciação mostram um ethos parcial, erudito e de estilo eclético. / Salvador

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:07Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-03-04Bitstream added on 2014-06-13T20:23:02Z : No. of bitstreams: 1 toneto_djm_dr_arafcl.pdf: 1508652 bytes, checksum: 7113d07f75353006dd53c31770eb57c1 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Este trabalho tem por objetivo analisar o poema A Máquina do Mundo Repensada de Haroldo de Campos, sob a perspectiva da abordagem sincrônica da literatura. O poema em questão é um espaço dialógico por excelência. Nele, história e utopia, ciência e religião apresentam-se inexoravelmente ligadas pela linguagem (em ação) do poema-palimpsesto: máquina cuja engrenagem procura instituir convergências entre as diversas áreas do conhecimento, rompendo fronteiras por meio da articulação entre o pensamento poético e outras formas de pensamento. A tese está dividida em três partes. Na primeira parte, são feitos comentários sobre a tópica da máquina do mundo e seu caráter alegórico. Em seguida, apresenta-se uma leitura analítica do poema. Esta parte está dividida em três capítulos, cada um correspondendo à análise de um dos três cantos do poema, os quais revelam, segundo a perspectiva de leitura aqui adotada, o caminho do poeta que repensa o mundo, a partir do ritual poéticoantropofágico que realiza com as obras de outros “pensadores do mundo”. Na última parte, apresenta-se uma discussão teórica sobre poesia e pensamento, em que são retomados aspectos mencionados ao longo da leitura do poema, vinculando-os ao estado das artes da poesia haroldiana. / The aim of this work is to analyze the poem A Máquina do Mundo Repensada de Haroldo de Campos, by synchronic perspective of literature approach. This poem is a dialogical space, by excellence. In it, history and utopia, science and religion are closely related by the language in action that organizes the poem-palimpsest: machine which engines constructs convergences between the different areas, above mentioned, and poetry, broking frontiers by the articulation of poetic thought and other ways of knowledge. The thesis is divided in three parts. At the first part, commentaries of the world machine are presented in relation to its allegorical character. Then, at the second part, there is an analytical reading of the whole poem. This part is divided in three chapters, each one corresponding to one of the three parts of the poem, which reveals, since the perspective here adopted, the way followed by the poet that thinks about the world, using his poetic words and an “anthropophagical ritual” with other poets that has thought about the world. At the last part, there is a theory discussion about the relations between poetry and thought, in which, the aspects that has been analyzed in the poem reading are retaking to show the state of arts of haroldian poetry.