A utilização de inóculos líquidos na produção de Shiitake (Lentinula edodes (Berk.) Pegler) é uma tecnologia promissora para a industrialização do cultivo em sistema axênico, uma vez que permite a inoculação do micélio de forma rápida e bem distribuída, reduzindo riscos de contaminação e o período de incubação dos substratos. Neste trabalho, o cultivo submerso para a produção de micélio de Shiitake foi avaliado em um biorreator airlift de circulação externa, idealizado e projetado no grupo, utilizando o meio de cultura Mushroom Complete Medium adicionado de micronutrientes, nas condições de operação: taxas de aeração: 0.16, 0.20, e 0.24 vvm e tamanhos de inóculo (i.s.): 1.0 g.L-1 e 2.0 g.L-1. Na melhor condição de operação (0.16 vvm e 1.0 g.L-1 i.s.), um modelo matemático foi desenvolvido usando o software EMSO para descrever a cinética da cultura em ajuste aos dados experimentais. Foram atingidos 15,47 g.L-1 de biomassa total, após 10 dias de cultivo, 0,516 d-1 de taxa máxima de crescimento específico, fatores de rendimento Yx/s 1,06 g.g-1, YP/X 0,485 (g.L-1).g-1, YP/S 0,140 (g.L-1).g-1 e produtividade PX 0,061 (g.L-1).h-1. A predição do modelo demonstrou ser um parâmetro confiável para estudos de aumento de escala já que descreveu bons resultados preditivos para biomassa em relação aos produtos do metabolismo (CO2 e síntese de H+ pela acidificação do meio) e ao consumo de nutrientes (O2 e glicose). A seleção e a avaliação de linhagens no cultivo também são fatores a serem considerados para obtenção de boas produtividades e, deste modo, o desempenho produtivo de cinco linhagens de Shiitake foi avaliado em cultivo axênico, utilizando um planejamento composto central (CCD) para avaliar as variáveis independentes: tempo de incubação I(t), e percentual de farelo de trigo em relação a serragem Eucalypitus saligna (representada pela relação carbono/nitrogênio (RC/N)), tendo a eficiência biológica (BE) e o peso unitário dos cogumelos como resultados de destino . Os substratos utilizados tiveram sua composição físico-química determinada e as taxas de suplementação do substrato foram otimizadas, não só para o rendimento em cultivo, mas também para o crescimento vegetativo do micélio. Os melhores resultados de BE em todas as linhagens foram obtidos em cultivos com RC/N 57,62/1, com indução dos primórdios em 130 dias de I(t). Os cogumelos colhidos nesta condição de produção tiveram sua composição centesimal determinada. Atividades enzimáticas amilolíticas e celulolíticas, β-glicosidase e proteases específicas foram realizadas em ensaios de colonização do substrato. Três linhagens foram selecionadas para o isolamento de esporos e hibridização intraespecífica. As linhagens híbridas foram comparadas com as parentais em termos de rendimento e síntese das enzimas extracelulares. Os resultados deste trabalho demonstraram que a linhagem cultivada tem um efeito considerável sobre o rendimento, sobre o peso unitário e sobre a síntese de enzimas extracelulares produzidas pelo fungo, tanto pelas linhagens híbridas, como pelas parentais. / The use of liquid inoculant production of Shiitake (Lentinula edodes (Berk.) Pegler) is a promising technology for the industrialization farming of this fungus in axenic system because it allows the mycelium inoculation in a quick and well distributed way, thus reducing the risks of contamination and the incubation time of cultures. In this work, the submerged cultivation for the production of Shiitake mycelium was evaluated in an airlift bioreactor of external circulation, conceived and designed in the group, using the culture medium Mushroom Complete Medium added of micronutrients, under the operating conditions: rates of aeration: 0.16, 0.20, and 0.24 vvm and inoculum sizes (i.s.): 1.0 g. L-1 and 2.0 g. L-1. Under the best operating condition (0.16 vvm and 1.0 g L-1 i.s.), a mathematical model was developed using the EMSO software to describe the kinetics of culture fittnes to experimental data. It was possible to obtain 15.47 g L-1 of total biomass, after 10 days of cultivation, a maximum specific growth rate of 0.516 d-1, yields of Yx/s 1,06 g.g-1, YP/X 0,485 (g.L-1).g-1, YP/S 0,140 (g.L-1).g-1 and PX (productivity) 0.061 (g.L-1).h-1. The prediction of the model has proven to be a reliable parameter for studies for scaling up because it was predictive for biomass considering the products of metabolism (CO2 and H+ synthesis by acidification of the medium) and nutrient consumption (O2 and glucose). The selection and evaluation of strains in cultivation are also factors to be considered to obtain good productivity and, therefore, the productive performance of five strains of Shiitake cultivated under axenic system, was carried out using a central composition design (CCD) to evaluate the independent variables: incubation time I(t), and percentage of wheat bran in relation to sawdust of Eucalypitus saligna (represented by the carbon/nitrogen ratio (RC/N)), and having the biological efficiency (BE) and the unit weight of the mushrooms as target results. The best results for BE for all the strains were obtained in cultures with RC/N 57.62/1, with primordia induced at 130 days of I(t). The substrates used had their physico-chemical composition determined and the rates of substrate supplementation have been optimized, not only for the cultivation yields, but also for vegetative growth of the mycelium. The mushrooms harvested in this condition of production had their centesimal composition determined. Amilolytic, cellulolytic, β-glucosidase and specific proteases activities were performed in tests of colonization of the substrate. Three strains were selected for the isolation of spores and intraspecific hybridization was carried out. Hybrid strains were compared with the parental strains in terms of yields and synthesis of extracellular enzymes. The results of this study showed that strain has a considerable effect on both the yield and the unit weight of mushrooms.

Orientador: José Roberto Sartori / Resumo: Dois experimentos foram realizados com objetivo de avaliar a inclusão de diferentes níveis de resíduos de colheita de shiitake no desempenho produtivo e saúde de frangos de corte e de galinhas poedeiras comerciais. No experimento I, um total de 192 galinhas Lohmman® Brown foram alojadas em gaiolas. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado, com quatro tratamentos (0,0; 1,0; 1,5 e 2,0% de inclusão de resíduo de colheita de shiitake na ração (RCS)) com 6 gaiolas por tratamento. Foram avaliados: consumo de ração, taxa de postura, peso de ovos, massa de ovos e conversão alimentar por dúzia e por massa de ovos; qualidade interna e externa de ovos e parâmetros reprodutivos e séricos. No experimento II, foram alojados 720 pintainhos da linhagem Ross 308, em galpão experimental, dividido em 24 boxes, sendo 31 aves por boxe, durante o período de 1 a 42 dias de idade. Os pintinhos foram distribuídos em delineamento experimental inteiramente casualizado, com quatro tratamentos (0,0; 0,15; 0,30 e 0,45% de inclusão de RCS). Avaliou-se o desempenho, viscosidade do conteúdo intestinal, titulação de anticorpos contra o vírus da doença de NewCastle, diferencial celular, histomorfometria intestinal e colesterol e triglicerídeos sanguíneos. Os dados foram analisados pelo procedimento GLM do Minitab 17. Os diferentes níveis de resíduo de colheita de shiitake na alimentação de galinhas poedeiras comerciais não afetaram os parâmetros de desempenho, qualidade dos ovos e os parametros... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Mestre

Produtos naturais são cada vez mais vendidos como suplementos dietéticos devido a várias das suas propriedades terapêuticas, enfatizando a pesquisa para novos medicamentos. Este trabalho mostra que extratos aquosos de Lentinula edodes, Pleurotus sajor-caju e Agaricus blazei exercem atividade citotóxica, através do ensaio da redução do sal de brometo tetrazólio, nas linhagens celulares humanas de carcinoma de laringe (Hep-2) e carcinoma cervical (HeLa). Os extratos foram obtidos inicialmente em três diferentes temperaturas (4C, 22ºC e 50C). Entretanto, a temperatura ambiente foi escolhida para a realização dos outros experimentos já que apresentou os melhores resultados na redução da viabilidade celular. Ensaios bioquímicos realizados em paralelo indicaram uma maior quantidade de polifenóis nos extratos do L. edodes nas três temperaturas de extração e também uma melhor capacidade de eliminação do radical 2,2-difenil-1-picrilhidrazilo. Os resultados para a atividade citotóxica revelaram que o extrato de P. sajor-caju foi mais eficiente do que os extratos de L. edodes e A. blazei, nas linhagens testadas. Modificações morfológicas observadas nas células foram confirmadas pela coloração de Giemsa, após o tratamento com os extratos, sugerindo a inibição da proliferação e indução da apoptose dose/dependente. O tipo de morte celular foi testada com o método da anexina V acoplada a um fluorocromo mais iodeto de propídio, confirmando que tanto os extratos de L. edodes e P. sajor-caju induzem a apoptose tardia. Ensaios da composição química obtidos por cromatografia gasosa acoplada ao espectrômetro de massas mostraram a presença de ácidos graxos nos extratos, com uma prevalência do ácido palmítico no extrato de L. edodes e P. sajorcaju e ácido esteárico no extrato de A. blazei. A quantificação dos carboidratos e proteínas indicaram uma maior quantidade de carboidratos no L. edodes, e o A. blazei apresentou um maior teor de proteínas. Estes resultados indicam que os extratos aquosos dos cogumelos L. edodes, P. sajor-caju e A. Blazei são potenciais fontes antioxidantes, ricos em proteínas e ácidos graxos e possuem atividade anticancerígena por indução da apoptose. No entanto, novos estudos são necessários para explorar seus usos terapêuticos e para elucidar o seu modo de ação no organismo. / Submitted by Marcelo Teixeira (mvteixeira@ucs.br) on 2014-06-11T12:32:57Z No. of bitstreams: 1 Dissertacao Tiane Cristine Finimundy.pdf: 150195 bytes, checksum: 16fa4de06cc7be6b6a285105c8c35610 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-06-11T12:32:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Tiane Cristine Finimundy.pdf: 150195 bytes, checksum: 16fa4de06cc7be6b6a285105c8c35610 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Natural products are increasingly sold as dietary supplements due to several of its therapeutic properties, emphasizing the search for new drugs. This work shows that aqueous extracts of Lentinula edodes, Pleurotus sajor-caju and Agaricus blazei, exert cytotoxic activity by testing the reduction of tetrazolium bromide salt in human cell lines of laryngeal carcinoma (Hep-2) and cervix carcinoma (HeLa). The extracts were obtained initially at three different temperatures (4C, 22ºC and 50C), however ambient temperature was chosen to carry out other experiments that have shown the best results in the reduction of cell viability. Biochemical assays performed in parallel showed an increased amount of polyphenols in the extracts of L. edodes the three extraction temperatures and also a better ability to eliminate the radical 2,2-diphenyl-1- picrylhydrazyl. The results for the cytotoxic activity revealed that the extract of P. sajor-caju was more efficient than that of L. edodes and A. blazei, the strains tested. Observed morphological changes in the cells was confirmed by Giemsa staining after treatment with the extracts, suggesting that the inhibition of proliferation and induction of apoptosis dose/dependent. The type of cell death was assayed by the method of annexin V bound to a fluorochrome and propidium iodide further confirming that both of L. edodes and P. sajor-caju induce apoptosis late. Testing the chemical composition obtained by gas chromatography mass spectrometer showed the presence of fatty acids in the extracts, with a prevalence of palmitic acid in the extract of L. edodes and P. sajor-caju and stearic acid extract of A. blazei. The quantification of carbohydrates and proteins indicated a greater amount of the carbohydrates L. edodes and A. blazei showed a higher protein content. These results indicate that the aqueous extracts of the mushroom L. edodes , P. sajor-caju and A. blazei, are potential sources antioxidants, high in protein and fatty acids and have anticancer activity by induction of apopt sis. However, further studies are needed to explore their therapeutic use and to elucidate its systemic effects.

A utilização de inóculos líquidos na produção de Shiitake (Lentinula edodes (Berk.) Pegler) é uma tecnologia promissora para a industrialização do cultivo em sistema axênico, uma vez que permite a inoculação do micélio de forma rápida e bem distribuída, reduzindo riscos de contaminação e o período de incubação dos substratos. Neste trabalho, o cultivo submerso para a produção de micélio de Shiitake foi avaliado em um biorreator airlift de circulação externa, idealizado e projetado no grupo, utilizando o meio de cultura Mushroom Complete Medium adicionado de micronutrientes, nas condições de operação: taxas de aeração: 0.16, 0.20, e 0.24 vvm e tamanhos de inóculo (i.s.): 1.0 g.L-1 e 2.0 g.L-1. Na melhor condição de operação (0.16 vvm e 1.0 g.L-1 i.s.), um modelo matemático foi desenvolvido usando o software EMSO para descrever a cinética da cultura em ajuste aos dados experimentais. Foram atingidos 15,47 g.L-1 de biomassa total, após 10 dias de cultivo, 0,516 d-1 de taxa máxima de crescimento específico, fatores de rendimento Yx/s 1,06 g.g-1, YP/X 0,485 (g.L-1).g-1, YP/S 0,140 (g.L-1).g-1 e produtividade PX 0,061 (g.L-1).h-1. A predição do modelo demonstrou ser um parâmetro confiável para estudos de aumento de escala já que descreveu bons resultados preditivos para biomassa em relação aos produtos do metabolismo (CO2 e síntese de H+ pela acidificação do meio) e ao consumo de nutrientes (O2 e glicose). A seleção e a avaliação de linhagens no cultivo também são fatores a serem considerados para obtenção de boas produtividades e, deste modo, o desempenho produtivo de cinco linhagens de Shiitake foi avaliado em cultivo axênico, utilizando um planejamento composto central (CCD) para avaliar as variáveis independentes: tempo de incubação I(t), e percentual de farelo de trigo em relação a serragem Eucalypitus saligna (representada pela relação carbono/nitrogênio (RC/N)), tendo a eficiência biológica (BE) e o peso unitário dos cogumelos como resultados de destino . Os substratos utilizados tiveram sua composição físico-química determinada e as taxas de suplementação do substrato foram otimizadas, não só para o rendimento em cultivo, mas também para o crescimento vegetativo do micélio. Os melhores resultados de BE em todas as linhagens foram obtidos em cultivos com RC/N 57,62/1, com indução dos primórdios em 130 dias de I(t). Os cogumelos colhidos nesta condição de produção tiveram sua composição centesimal determinada. Atividades enzimáticas amilolíticas e celulolíticas, β-glicosidase e proteases específicas foram realizadas em ensaios de colonização do substrato. Três linhagens foram selecionadas para o isolamento de esporos e hibridização intraespecífica. As linhagens híbridas foram comparadas com as parentais em termos de rendimento e síntese das enzimas extracelulares. Os resultados deste trabalho demonstraram que a linhagem cultivada tem um efeito considerável sobre o rendimento, sobre o peso unitário e sobre a síntese de enzimas extracelulares produzidas pelo fungo, tanto pelas linhagens híbridas, como pelas parentais. / The use of liquid inoculant production of Shiitake (Lentinula edodes (Berk.) Pegler) is a promising technology for the industrialization farming of this fungus in axenic system because it allows the mycelium inoculation in a quick and well distributed way, thus reducing the risks of contamination and the incubation time of cultures. In this work, the submerged cultivation for the production of Shiitake mycelium was evaluated in an airlift bioreactor of external circulation, conceived and designed in the group, using the culture medium Mushroom Complete Medium added of micronutrients, under the operating conditions: rates of aeration: 0.16, 0.20, and 0.24 vvm and inoculum sizes (i.s.): 1.0 g. L-1 and 2.0 g. L-1. Under the best operating condition (0.16 vvm and 1.0 g L-1 i.s.), a mathematical model was developed using the EMSO software to describe the kinetics of culture fittnes to experimental data. It was possible to obtain 15.47 g L-1 of total biomass, after 10 days of cultivation, a maximum specific growth rate of 0.516 d-1, yields of Yx/s 1,06 g.g-1, YP/X 0,485 (g.L-1).g-1, YP/S 0,140 (g.L-1).g-1 and PX (productivity) 0.061 (g.L-1).h-1. The prediction of the model has proven to be a reliable parameter for studies for scaling up because it was predictive for biomass considering the products of metabolism (CO2 and H+ synthesis by acidification of the medium) and nutrient consumption (O2 and glucose). The selection and evaluation of strains in cultivation are also factors to be considered to obtain good productivity and, therefore, the productive performance of five strains of Shiitake cultivated under axenic system, was carried out using a central composition design (CCD) to evaluate the independent variables: incubation time I(t), and percentage of wheat bran in relation to sawdust of Eucalypitus saligna (represented by the carbon/nitrogen ratio (RC/N)), and having the biological efficiency (BE) and the unit weight of the mushrooms as target results. The best results for BE for all the strains were obtained in cultures with RC/N 57.62/1, with primordia induced at 130 days of I(t). The substrates used had their physico-chemical composition determined and the rates of substrate supplementation have been optimized, not only for the cultivation yields, but also for vegetative growth of the mycelium. The mushrooms harvested in this condition of production had their centesimal composition determined. Amilolytic, cellulolytic, β-glucosidase and specific proteases activities were performed in tests of colonization of the substrate. Three strains were selected for the isolation of spores and intraspecific hybridization was carried out. Hybrid strains were compared with the parental strains in terms of yields and synthesis of extracellular enzymes. The results of this study showed that strain has a considerable effect on both the yield and the unit weight of mushrooms.

A utilização de inóculos líquidos na produção de Shiitake (Lentinula edodes (Berk.) Pegler) é uma tecnologia promissora para a industrialização do cultivo em sistema axênico, uma vez que permite a inoculação do micélio de forma rápida e bem distribuída, reduzindo riscos de contaminação e o período de incubação dos substratos. Neste trabalho, o cultivo submerso para a produção de micélio de Shiitake foi avaliado em um biorreator airlift de circulação externa, idealizado e projetado no grupo, utilizando o meio de cultura Mushroom Complete Medium adicionado de micronutrientes, nas condições de operação: taxas de aeração: 0.16, 0.20, e 0.24 vvm e tamanhos de inóculo (i.s.): 1.0 g.L-1 e 2.0 g.L-1. Na melhor condição de operação (0.16 vvm e 1.0 g.L-1 i.s.), um modelo matemático foi desenvolvido usando o software EMSO para descrever a cinética da cultura em ajuste aos dados experimentais. Foram atingidos 15,47 g.L-1 de biomassa total, após 10 dias de cultivo, 0,516 d-1 de taxa máxima de crescimento específico, fatores de rendimento Yx/s 1,06 g.g-1, YP/X 0,485 (g.L-1).g-1, YP/S 0,140 (g.L-1).g-1 e produtividade PX 0,061 (g.L-1).h-1. A predição do modelo demonstrou ser um parâmetro confiável para estudos de aumento de escala já que descreveu bons resultados preditivos para biomassa em relação aos produtos do metabolismo (CO2 e síntese de H+ pela acidificação do meio) e ao consumo de nutrientes (O2 e glicose). A seleção e a avaliação de linhagens no cultivo também são fatores a serem considerados para obtenção de boas produtividades e, deste modo, o desempenho produtivo de cinco linhagens de Shiitake foi avaliado em cultivo axênico, utilizando um planejamento composto central (CCD) para avaliar as variáveis independentes: tempo de incubação I(t), e percentual de farelo de trigo em relação a serragem Eucalypitus saligna (representada pela relação carbono/nitrogênio (RC/N)), tendo a eficiência biológica (BE) e o peso unitário dos cogumelos como resultados de destino . Os substratos utilizados tiveram sua composição físico-química determinada e as taxas de suplementação do substrato foram otimizadas, não só para o rendimento em cultivo, mas também para o crescimento vegetativo do micélio. Os melhores resultados de BE em todas as linhagens foram obtidos em cultivos com RC/N 57,62/1, com indução dos primórdios em 130 dias de I(t). Os cogumelos colhidos nesta condição de produção tiveram sua composição centesimal determinada. Atividades enzimáticas amilolíticas e celulolíticas, β-glicosidase e proteases específicas foram realizadas em ensaios de colonização do substrato. Três linhagens foram selecionadas para o isolamento de esporos e hibridização intraespecífica. As linhagens híbridas foram comparadas com as parentais em termos de rendimento e síntese das enzimas extracelulares. Os resultados deste trabalho demonstraram que a linhagem cultivada tem um efeito considerável sobre o rendimento, sobre o peso unitário e sobre a síntese de enzimas extracelulares produzidas pelo fungo, tanto pelas linhagens híbridas, como pelas parentais. / The use of liquid inoculant production of Shiitake (Lentinula edodes (Berk.) Pegler) is a promising technology for the industrialization farming of this fungus in axenic system because it allows the mycelium inoculation in a quick and well distributed way, thus reducing the risks of contamination and the incubation time of cultures. In this work, the submerged cultivation for the production of Shiitake mycelium was evaluated in an airlift bioreactor of external circulation, conceived and designed in the group, using the culture medium Mushroom Complete Medium added of micronutrients, under the operating conditions: rates of aeration: 0.16, 0.20, and 0.24 vvm and inoculum sizes (i.s.): 1.0 g. L-1 and 2.0 g. L-1. Under the best operating condition (0.16 vvm and 1.0 g L-1 i.s.), a mathematical model was developed using the EMSO software to describe the kinetics of culture fittnes to experimental data. It was possible to obtain 15.47 g L-1 of total biomass, after 10 days of cultivation, a maximum specific growth rate of 0.516 d-1, yields of Yx/s 1,06 g.g-1, YP/X 0,485 (g.L-1).g-1, YP/S 0,140 (g.L-1).g-1 and PX (productivity) 0.061 (g.L-1).h-1. The prediction of the model has proven to be a reliable parameter for studies for scaling up because it was predictive for biomass considering the products of metabolism (CO2 and H+ synthesis by acidification of the medium) and nutrient consumption (O2 and glucose). The selection and evaluation of strains in cultivation are also factors to be considered to obtain good productivity and, therefore, the productive performance of five strains of Shiitake cultivated under axenic system, was carried out using a central composition design (CCD) to evaluate the independent variables: incubation time I(t), and percentage of wheat bran in relation to sawdust of Eucalypitus saligna (represented by the carbon/nitrogen ratio (RC/N)), and having the biological efficiency (BE) and the unit weight of the mushrooms as target results. The best results for BE for all the strains were obtained in cultures with RC/N 57.62/1, with primordia induced at 130 days of I(t). The substrates used had their physico-chemical composition determined and the rates of substrate supplementation have been optimized, not only for the cultivation yields, but also for vegetative growth of the mycelium. The mushrooms harvested in this condition of production had their centesimal composition determined. Amilolytic, cellulolytic, β-glucosidase and specific proteases activities were performed in tests of colonization of the substrate. Three strains were selected for the isolation of spores and intraspecific hybridization was carried out. Hybrid strains were compared with the parental strains in terms of yields and synthesis of extracellular enzymes. The results of this study showed that strain has a considerable effect on both the yield and the unit weight of mushrooms.

Produtos naturais são cada vez mais vendidos como suplementos dietéticos devido a várias das suas propriedades terapêuticas, enfatizando a pesquisa para novos medicamentos. Este trabalho mostra que extratos aquosos de Lentinula edodes, Pleurotus sajor-caju e Agaricus blazei exercem atividade citotóxica, através do ensaio da redução do sal de brometo tetrazólio, nas linhagens celulares humanas de carcinoma de laringe (Hep-2) e carcinoma cervical (HeLa). Os extratos foram obtidos inicialmente em três diferentes temperaturas (4C, 22ºC e 50C). Entretanto, a temperatura ambiente foi escolhida para a realização dos outros experimentos já que apresentou os melhores resultados na redução da viabilidade celular. Ensaios bioquímicos realizados em paralelo indicaram uma maior quantidade de polifenóis nos extratos do L. edodes nas três temperaturas de extração e também uma melhor capacidade de eliminação do radical 2,2-difenil-1-picrilhidrazilo. Os resultados para a atividade citotóxica revelaram que o extrato de P. sajor-caju foi mais eficiente do que os extratos de L. edodes e A. blazei, nas linhagens testadas. Modificações morfológicas observadas nas células foram confirmadas pela coloração de Giemsa, após o tratamento com os extratos, sugerindo a inibição da proliferação e indução da apoptose dose/dependente. O tipo de morte celular foi testada com o método da anexina V acoplada a um fluorocromo mais iodeto de propídio, confirmando que tanto os extratos de L. edodes e P. sajor-caju induzem a apoptose tardia. Ensaios da composição química obtidos por cromatografia gasosa acoplada ao espectrômetro de massas mostraram a presença de ácidos graxos nos extratos, com uma prevalência do ácido palmítico no extrato de L. edodes e P. sajorcaju e ácido esteárico no extrato de A. blazei. A quantificação dos carboidratos e proteínas indicaram uma maior quantidade de carboidratos no L. edodes, e o A. blazei apresentou um maior teor de proteínas. Estes resultados indicam que os extratos aquosos dos cogumelos L. edodes, P. sajor-caju e A. Blazei são potenciais fontes antioxidantes, ricos em proteínas e ácidos graxos e possuem atividade anticancerígena por indução da apoptose. No entanto, novos estudos são necessários para explorar seus usos terapêuticos e para elucidar o seu modo de ação no organismo. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Natural products are increasingly sold as dietary supplements due to several of its therapeutic properties, emphasizing the search for new drugs. This work shows that aqueous extracts of Lentinula edodes, Pleurotus sajor-caju and Agaricus blazei, exert cytotoxic activity by testing the reduction of tetrazolium bromide salt in human cell lines of laryngeal carcinoma (Hep-2) and cervix carcinoma (HeLa). The extracts were obtained initially at three different temperatures (4C, 22ºC and 50C), however ambient temperature was chosen to carry out other experiments that have shown the best results in the reduction of cell viability. Biochemical assays performed in parallel showed an increased amount of polyphenols in the extracts of L. edodes the three extraction temperatures and also a better ability to eliminate the radical 2,2-diphenyl-1- picrylhydrazyl. The results for the cytotoxic activity revealed that the extract of P. sajor-caju was more efficient than that of L. edodes and A. blazei, the strains tested. Observed morphological changes in the cells was confirmed by Giemsa staining after treatment with the extracts, suggesting that the inhibition of proliferation and induction of apoptosis dose/dependent. The type of cell death was assayed by the method of annexin V bound to a fluorochrome and propidium iodide further confirming that both of L. edodes and P. sajor-caju induce apoptosis late. Testing the chemical composition obtained by gas chromatography mass spectrometer showed the presence of fatty acids in the extracts, with a prevalence of palmitic acid in the extract of L. edodes and P. sajor-caju and stearic acid extract of A. blazei. The quantification of carbohydrates and proteins indicated a greater amount of the carbohydrates L. edodes and A. blazei showed a higher protein content. These results indicate that the aqueous extracts of the mushroom L. edodes , P. sajor-caju and A. blazei, are potential sources antioxidants, high in protein and fatty acids and have anticancer activity by induction of apopt sis. However, further studies are needed to explore their therapeutic use and to elucidate its systemic effects.

Orientador: Marlene Rita de Queiroz / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Agrícola / Made available in DSpace on 2018-08-17T11:09:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Sampaio_SaraMedeiros_M.pdf: 362284 bytes, checksum: 9f40de09eb4c685cbda1a3c211ebaf16 (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: A finalidade principal deste trabalho foi reunir subsídios para orientar os processos desecagem, armazenagem e reidratarão do cogumelo Shiitake. A pesquisa foi realizada durante o ano de 2002 no Laboratório de Tecnologia Pós-Colheita/Secagem da Faculdade de Engenharia Agrícola da Universidade Estadual de Campinas e consistiu em duas etapas: secagem e armazenagem por 3 meses. Os fatores estudados foram: na secagem - geometria de corte (Shiitake inteiro e fatiado), temperatura de secagem (50ºC e 70°C), teor de umidade final (5% e 15%); na armazenagem - geometria de corte (Shiitake inteiro e fatiado), teor de umidade inicial (5% e 15%), embalagem (com e sem saco de polipropileno) e tempo de armazenagem (3 meses); na reidratação - tempo de imersão em água (8 tempos), geometria de corte (Shiitake inteiro e fatiado), teor de umidade inicial (5% e 15%) e tempo de armazenagem (3 meses). Os parâmetros de qualidade estudados foram: cor, textura, massa, teor de umidade, capacidade de reidratação. Os parâmetros de secagem estudados foram: cinéticas experimentais de secagem. As cinéticas de secagem mostraram que a secagem ocorreu no período de taxa decrescente e que a secagem dos cogumelos fatiados secos à 70ºC ocorreu em menor tempo que os demais tratamentos. A temperatura de secagem de 70ºC proporcionou menor escurecimento e os resultados do efeito da secagem sobre a textura do cogumelo foram pouco conclusivos. O tempo de armazenagem afetou a qualidade dos cogumelos ocorrendo maior dureza, gomosidade e escurecimento. Entretanto, o uso da embalagem retardou o escurecimento. Cogumelos fatiados armazenados com 15% de umidade inicial e embalados obtiveram pouca variação de mastigabilidade, teor de umidade e massa durante a armazenagem. O tempo de armazenagem provocou redução da capacidade de reidratação para os cogumelos com 5% de umidade inicial. Os cogumelos fatiados, com 5% de umidade inicial e embalados obtiveram valores de reidratação superiores aos demais tratamentos / Abstract: Mushroom (Shiitake), drying, storage and re-hydration: effect on quality parameter process determinations. To orient drying, storage and re-hydration processes, accumulated subsidies by studying some parameters on mushroom Shiitake. During three months, drying, storage and re-hydration processes, were studied on mushroom in 2002 at Drying/Post-harvesting Technology Lab from Agricultural Engineering School of the Campinas State University. In drying process were studied: drying temperature (50º and 70 ºC), final moisture content (5% and 15%), cutting geometry (mushroom whole and sliced); in re-hydration process besides drying temperature and cutting geometry, were assessed also, water immersion (8 times), initial moisture content (5%% and 15%) and storage time (3 months); in packing up process; (with/without polypropylene bag), storage time (3 months) and initial moisture content were evaluated. Color, texture, mass, moisture content, and re-hydration capacity, were also evaluated. Drying kinetics showed that drying occurred at increased rate in the period and sliced mushroom dried at 70º C, occurred in lesser time than other treatments. Drying temperature at 70 ºC had less darkening and the results on mushroom texture drying effects were not conclusive. Drying time affected mushroom quality, occurring great hardness, gummosis and darkening. However, packing up use, delayed the darkening. Stored sliced and wrapped mushrooms with 15% initial moisture content had less, chew property variation, moisture content and mass during storage. Storage time provoked rehydration capacity decrease on mushrooms with 5% of initial moisture. Sliced and wrapped mushrooms, with 5% initial moisture, had re-hydration values greater than other treatments / Mestrado / Tecnologia Pós-Colheita / Mestre em Engenharia Agrícola

Este trabalho foi desenvolvido sobre o tema da sustentabilidade na indústria de palmito, propondo a utilização dos estipes de palmeira como substrato para o desenvolvimento do cogumelo Shiitake [Lentinula edodes (Berk.) Pegler], comparativamente ao uso tradicional de toras de eucalipto. Sendo o cogumelo shiitake um biodecompositor natural, seu aproveitamento nos processos de destinação dos resíduos agroflorestais e agroindustriais representa uma alternativa viável no aproveitamento para transformação em alimentos destinados ao consumo humano. Essa alternativa vem de encontro às expectativas ambientais, retirando do campo os resíduos que podem causar o aparecimento de pragas e doenças em áreas de cultivo em função do processo de decomposição natural, onerando custos e comprometendo produtividade e qualidade. Após a constatação da viabilidade de uso dos resíduos como substrato, procedeu-se a análise bromatológica, cujos resultados, foram compatíveis aqueles encontrados na literatura. As análises econômicas também apontam para uma alternativa de trabalho e renda para o pequeno produtor, com produtos de maior valor agregado. / This work was developed on the theme related to the sustainability of the cabbage palm industry, considering the use of palm stipes as substrate for the development of the shiitake mushroom, Lentinula edodes (Berk.Pegler), in comparison to the traditional use of eucalyptus logs. As a natural biodecomposition agent, its exploitation in the bioconversion processes help to prevent environmental impact caused by the accumulation of forest and agricultural wastes and can also provide uses of the residues for mushroom production intended to human consumption. This alternative comes up to the environmental expectations, by removing the residues that can be responsible for plagues and illnesses in the field cultures, because of the natural decomposition process; this situation can be responsible for raising costs and compromising productivity and quality. After certification of the viability of the palm residues as substrate for shiitake mushroom cultivation, the product was submitted to bromatologic analysis and the results showed to be compatible to the literature date. The economic analyses also point out to an alternative income activity for the small producer, providing opportunity of offering products with higher aggregated value.

Orientador: Lorena Benathar Ballod Tavares. / Coorientador: Cristiane Vieira Helm. / Dissertação (Mestrado em Engenharia Ambiental) - Programa de Pós-Graduação em Engenharia Florestal, Centro de Ciências Tecnológicas, Universidade Regional de Blumenau, Blumenau.

by Lai, Shiu Hong. / Thesis (M.Phil.)--Chinese University of Hong Kong, 1993. / Includes bibliographical references (leaves 129-147). / TITLE PAGE --- p.I / THESIS COMMITTEE --- p.II / ABSTRACT --- p.III / ACKNOWLEDGMENTS --- p.V / ABBREVIATIONS --- p.VI / TABLE OF CONTENTS --- p.VII / LIST OF TABLES --- p.XI / LIST OF FIGURES --- p.XII / Chapter Chapter 1. --- Arbitrarily Primed Polymerase Chain Reaction (AP-PCR) Analysis of Lent inula edodes / Chapter 1. --- Introduction / Chapter 1.1 --- General Introduction --- p.1 / Chapter 1.2 --- Purpose of Study --- p.4 / Chapter 2. --- Literature Review / Chapter 2.1 --- Biology of Lentinula edodes / Chapter 2.1.1 --- "Overview," --- p.6 / Chapter 2.1.2 --- Life Cycle of Lentinula edodes --- p.6 / Chapter 2.1.3 --- Dedikaryotization (Monokaryotization) --- p.12 / Chapter 2.2 --- Genome Analysis of the Mushroom --- p.13 / Chapter 2.3 --- Genetic Markers of Lentinula edodes / Chapter 2.3.1 --- Overview --- p.15 / Chapter 2.3.2 --- Auxotrophic Markers --- p.16 / Chapter 2.3.3 --- Biochemical Markers --- p.17 / Chapter 2.3.4 --- Molecular Markers / Chapter 2.3.4.1 --- RFLPs --- p.19 / Chapter 2.3.4.2 --- PCR-Based Markers --- p.20 / Chapter 2.4 --- Polymerase Chain Reaction (PCR) / Chapter 2.4.1 --- The principle of PCR --- p.22 / Chapter 2.4.2 --- Applications of PCR on Mushroom Studies --- p.26 / Chapter 2.5 --- Arbitrarily Primed Polymerase Chain Reaction / Chapter 2.5.1 --- Principle of AP-PCR --- p.27 / Chapter 2.5.2 --- Applications of AP-PCR on Mushroom Studies --- p.29 / Chapter 2.6 --- Genetic Linkage Analysis / Chapter 2.6.1 --- Overview --- p.31 / Chapter 2.6.2 --- The LOD Score Method --- p.34 / Chapter 3. --- Materials and Methods / Chapter 3.1 --- Mushroom Strains and Culture Media --- p.36 / Chapter 3.2 --- Culture Method --- p.36 / Chapter 3.3 --- Solutions --- p.36 / Chapter 3.4 --- Primers --- p.38 / Chapter 3.5 --- Isolation of DNA from Lentinula edodes / Chapter 3.5.1 --- Mini-Preparation of Fungal DNA from L. edodes for PCR amplification --- p.42 / Chapter 3.5.2 --- Cesium Chloride Method: Mini-Preparation of Fungal DNA for PCR amplification --- p.43 / Chapter 3.6 --- Quantitative Measurements of DNA --- p.44 / Chapter 3.7 --- Arbitrarily Primed Polymerase Chain Reaction (AP-PCR) for the Amplification of Genomic DNA of L. edodes --- p.45 / Chapter 3.8 --- Analysis of DNA Samples with Agarose Gel Electrophoresis --- p.46 / Chapter 3.9 --- Analysis of DNA Samples with Polyacrylamide Gel Electrophoresis (PAGE) --- p.47 / Chapter 3.10 --- Silver Staining --- p.48 / Chapter 3.11 --- Single Stranded Conformation Polymorphism (SSCP) Analysis of Polymorphic DNA Fragments / Chapter 3.11.1 --- Elution and Amplification of DNA --- p.49 / Chapter 3.11.2 --- PCR-SSCP --- p.50 / Chapter 3.12 --- Segregation and Linkage Analysis / Chapter 3.12.1 --- Chi-Square Test --- p.51 / Chapter 3.12.2 --- The LOD Score Method --- p.52 / Chapter 4. --- Results / Chapter 4.1 --- DNA Extraction --- p.54 / Chapter 4.2 --- AP-PCR Amplified Fragments and Fragment Number --- p.58 / Chapter 4.3 --- Dedikaryotization Demonstration --- p.60 / Chapter 4.4 --- Identification of Polymorphic Genetic Markers --- p.64 / Chapter 4.4.1 --- AP-PCR Fingerprints from Single Primer --- p.66 / Chapter 4.4.2 --- AP-PCR Fingerprints Using Two Primers --- p.76 / Chapter 4.5 --- Segregation of Polymorphic Markers in Single Spore Isolates (SSIs) --- p.81 / Chapter 4.6 --- Single Stranded Conformation Polymorphism (SSCP) of Identified Polymorphic DNA Fragments --- p.86 / Chapter 4.7 --- Linkage Analysis of the Identified AP-PCR Markers --- p.89 / Chapter 5. --- Discussions / Chapter 5.1 --- DNA Extraction --- p.92 / Chapter 5.2 --- Arbitrary Primers --- p.93 / Chapter 5.3 --- Dedikaryotization Demonstration --- p.95 / Chapter 5.4 --- Identification of Polymorphic Genetic Markers --- p.96 / Chapter 5.5 --- AP-PCR Analysis of a Mushroom --- p.97 / Chapter 5.6 --- Mendelian Segregation Pattern of the Polymorphic Markers --- p.99 / Chapter 6. --- Conclusion and Further Studies --- p.101 / Chapter 2. Electrophoretic Karyotype Analysis of Lentinula edodes / Chapter 7. --- Introduction --- p.106 / Chapter 8. --- Literature Review / Chapter 8.1 --- Overview --- p.108 / Chapter 8.2 --- Protoplasts --- p.109 / Chapter 8.3 --- Pulsed Field Gel Electrophoresis (PFGE) / Chapter 8.3.1 --- Principle --- p.110 / Chapter 8.3.2 --- Applications of PFGE in Studies of Fungi --- p.112 / Chapter 9. --- Materials and Methods / Chapter 9.1 --- Strains and Culture Media --- p.114 / Chapter 9.2 --- Solutions --- p.114 / Chapter 9.3 --- Production of Lentinula edodes Protoplast --- p.115 / Chapter 9.4 --- Electrophoretic Conditions --- p.116 / Chapter 9.4.1 --- Condition for Saccharomyces cerevisiae chromosomes --- p.117 / Chapter 9.4.2 --- Condition for Candida albicans chromosomes --- p.117 / Chapter 9.4.3 --- Condition for Schizosaccharomyces pombe chromosomes --- p.118 / Chapter 10. --- Results / Chapter 10.1 --- Protoplast Production of Lentinula edodes / Chapter 10.1.1 --- Effects of Age of Mycelium on Protoplast Yield --- p.119 / Chapter 10.1.2 --- Effects of Various Osmotic Stabilizers on Protoplast Yield --- p.121 / Chapter 10.1.3 --- Effects of Two Lytic Enzymes on Protoplast Yield --- p.123 / Chapter 10.1.4 --- The Optimal Condition --- p.123 / Chapter 10.2 --- Electrophoretic Karyotype of L. edodes --- p.124 / Chapter 11. --- Discussions / Chapter 11.1 --- Protoplast Production of Lentinula edodes --- p.126 / Chapter 11.2 --- Electrophoretic Karyotype --- p.127 / REFERENCES