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Purificação e caracterização bioquímica de poligalacturonases termoestáveis produzidas pelo fungo Thermoascus aurantiacus através de fermentação submersa e fermentação em estado sólido

Martins, Eduardo da Silva [UNESP] 05 June 2006 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:55Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006-06-05Bitstream added on 2014-06-13T19:22:45Z : No. of bitstreams: 1 martins_es_dr_rcla.pdf: 4883436 bytes, checksum: 90e9eddebe5cd615b809d1494e86d994 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Pectinases termoestáveis apresentam características interessantes do ponto de vista da sua aplicação industrial, como alta estabilidade ao pH e à temperatura. Além disso, o tipo de processo fermentativo pode influenciar a produção e propriedades físico-químicas destas enzimas. A produção de poligalacturonase (PG) pelo fungo Thermoascus aurantiacus foi realizada em fermentação submersa (FSM) e em estado sólido (FES), usando substratos contendo pectina comercial ou subprodutos agro- industriais como fonte de carbono. A PG bruta obtida em FES apresentou atividade ótima a 65ºC e pH 5,0, com estabilidade na faixa de pH entre 4,0 e 5,0 e entre 7,5 e 8,5 e manteve 85% da atividade original quando incubada a 60ºC, por 1 hora. Em FSM, o melhor meio de cultivo foi a água amarela, com pH inicial de 5,5, após 5 dias de cultivo a 45ºC. A enzima em sua forma bruta apresentou temperatura ótima de 60ºC e pH ótimo de 5,0, maior estabilidade em pH ácido (3,0 a 4,5) e menor termoestabilidade, quando comparada com a obtida em FES, mantendo apenas 13% da atividade original quando incubada a 60ºC, por 1 hora. As enzimas foram purificadas utilizando-se cromatografias de filtração em gel e troca iônica. A PG purificada proveniente da FSM apresentou pH e temperatura ótimos de 5,5 e 60-65ºC, estabilidade em pH 5,0-5,5 e manteve, após 1 hora de incubação, 100% da atividade original até 50ºC. Resultados similares foram obtidos para a PG proveniente da FES. A PG de FES apresentou massa molar de 29,3 kDa, Km de 1,58 mg/mL e Vmáx de 1553,1 ? mol/min/mg, enquanto que a da FSM apresentou massa molar de 30,1 kDa, km de 1,46 mg/mL e Vmáx de 2433,3 ? mol/min/mg. Íons como Fe+3, Ca+2, e K+ praticamente não afetaram a atividade da enzima... / Thermostable pectinases present important characteristics under the view of their industrial application, as their high stability to pH and temperature. Besides, the type of fermentative process used can affect the ir production and physical-chemical properties. The polygalacturonase (PG) production by the thermophilic fungus Thermoascus aurantiacus was carried out by submerged fermentation (SMF) and solid state fermentation (SSF) using substrates containing commercial pectin or agro- industrial residues as carbon sources. The crude PG from SSF presented optimum activity at 65ºC and pH 5.0, with stability at pH 4.0-5.0 and 7.5-8.5 and maintained 85% of its original activity at 60º C for 1 hour. In SMF the best cultivation medium was the liquid waste from juice extraction, with initial pH of 5.5, after 5 days of cultivation at 45ºC. The crude enzyme showed an optimum activity at 60ºC and pH 5.0, higher stability in acid ic pH (3.0 to 4.5) and was less thermostable when compared to that obtained in SSF, wich maintained only 13% of its original activity at 60ºC, for 1 hour. Purification of enzymes was carried out using filtration and ion-exchange chromatographies. The purified PG, from SMF, showed optimum pH and temperature of 5.5 and 60-65ºC, stability at pH 5.0-5.5 and preserved, after 1 hour incubation, 100% of its original activity at 50ºC. Similar results were obtained to PG from SSF. The PG obtained by SSF presented molar mass of 29.3 kDa, Km of 1.58 mg/ml and Vmáx of 1553.1 ? mol/min/mg, while that the enzyme from SMF presented molar mass of 30.1 kDa, km of 1.46 mg/ml and Vmáx of 2433.3 ? mol/min/mg. Ions such as Fe3+, Ca2+ and K+ practically did not affect the enzyme activity, while Mg2+, Mn2+ and Zn2+ decreased 7%, 75% and 50%... (Complete abstract, click electronic address below)
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Produ??o de enzimas celulol?ticas e xilanol?ticas por fungos filamentosos utilizando res?duos da cadeia do biodiesel como fonte de carbono / Production of cellulolytic and xylanolytic enzymes by filamentous fungi utilizing wastes from biodiesel production chain as carbon source

Santos, Ricardo Salviano dos 11 December 2012 (has links)
Submitted by Rodrigo Martins Cruz (rodrigo.cruz@ufvjm.edu.br) on 2015-02-19T13:34:44Z No. of bitstreams: 5 ric.pdf: 5207435 bytes, checksum: f03a11b8bcdc89eef456751ccb1f74f2 (MD5) license_url: 52 bytes, checksum: 3d480ae6c91e310daba2020f8787d6f9 (MD5) license_text: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) license.txt: 2110 bytes, checksum: b4c884761e4c6c296ab2179d378436d4 (MD5) / Approved for entry into archive by Rodrigo Martins Cruz (rodrigo.cruz@ufvjm.edu.br) on 2015-02-20T10:28:40Z (GMT) No. of bitstreams: 5 ric.pdf: 5207435 bytes, checksum: f03a11b8bcdc89eef456751ccb1f74f2 (MD5) license_url: 52 bytes, checksum: 3d480ae6c91e310daba2020f8787d6f9 (MD5) license_text: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) license.txt: 2110 bytes, checksum: b4c884761e4c6c296ab2179d378436d4 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-02-20T10:28:40Z (GMT). No. of bitstreams: 5 ric.pdf: 5207435 bytes, checksum: f03a11b8bcdc89eef456751ccb1f74f2 (MD5) license_url: 52 bytes, checksum: 3d480ae6c91e310daba2020f8787d6f9 (MD5) license_text: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) license.txt: 2110 bytes, checksum: b4c884761e4c6c296ab2179d378436d4 (MD5) Previous issue date: 2013-09-20 / A pesquisa b?sica e aplicada voltada para o conhecimento e produ??o de celulases e xilanases microbianas constituem-se em valorosa a??o para o desenvolvimento de produtos e processos biotecnol?gicos. Estas enzimas t?m sido utilizadas na ind?stria de alimentos, cervejarias, vin?colas, produ??o de ra??o, ind?stria t?xtil e fabrica??o de papel. A demanda por tais catalisadores tem crescido rapidamente, encorajada principalmente pela ind?stria de biocombust?veis, em especial para a produ??o de etanol de 2? Gera??o. Neste contexto, o objetivo deste trabalho foi produzir enzimas celulol?ticas e xilanol?ticas com o uso de fungos filamentosos de ocorr?ncia natural, utilizando res?duos s?lidos da cadeia produtiva do biodiesel como fontes de carbono. Tr?s linhagens de fungos filamentosos isoladas de amostras ambientais foram avaliadas para produ??o de celulases e xilanases. Como par?metro de compara??o, utilizou-se o Trichoderma reesei CCT2768, linhagem conhecida como produtora de celulases. Dentre as linhagens avaliadas, um isolado denominado Aspergillus sp AN1257 foi o que se destacou para a produ??o de enzimas celulol?ticas e xilanol?ticas, superando inclusive a produ??o de celulases por T. reesei nas mesmas condi??es fermentativas. A fonte de carbono que melhor induziu a produ??o das enzimas investigadas pelo Aspergillus sp AN1257 foi a torta de caro?o de algod?o. Em busca da condi??o ?tima para a produ??o das enzimas estudadas foi realizado um planejamento fatorial e posteriormente aplicado um delineamento composto central rotacional (DCCR). Ap?s a aplica??o das condi??es ?timas para a produ??o enzim?tica desejada, o extrato obtido apresentou valores de 3,12 U/mL para atividade endoglucan?sica e 76,4 U/mL para a atividade xilan?sica. O extrato enzim?tico produzido apresentou atividade promissora quando utilizado na hidr?lise de lignocelulose em alguns res?duos agroindustriais. / Disserta??o (Mestrado) ? Programa de P?s-Gradua??o em Qu?mica, Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri, 2012. / ABSTRACT The basic and applied research focused on the knowledge and production of microbial cellulases and xylanases constitute a valuable action for the development of biotechnology products and processes. These enzymes have been used in the food industry, breweries, wineries, feed production, textile and paper manufacturing. The demand for such catalysts has grown rapidly, encouraged mainly by the biofuels industry, in particular for the production of 2nd Generation ethanol. In this context, the aim of this work was to produce cellulolytic and xylanolytic enzymes using naturally occurring filamentous fungi and solid waste of the biodiesel productive chain as carbon source. Three strains of filamentous fungi isolated from ambient samples have been evaluated for production of cellulases and xylanases. As reference microbial strain, it was used Trichoderma reesei CCT2768, known a good producer of cellulases. Among the strains tested, an isolated named Aspergillus sp AN1257 stood out for the production of cellulolytic and xylanolytic activity, surpassing even the production of cellulases by T. reesei under the same fermentation conditions. The carbon source which better induced the production of the investigated enzymes by Aspergillus sp AN1257 was cottonseed cake. In search of the optimum condition for the production of the investigated enzymes it was performed a factorial design and then it was applied a rotational central composite design (RCCD). After application of optimal condiction for enzyme production, the extract obtained showed values ??of 3.12 U/mL for endoglucanasic activity and 76.4 U/mL for xylanolytic activity. The enzyme extract produced showed promising application when used in the hydrolysis of lignocellulose in some agro-industrial residues.
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Estimation of Submerged Aquatic Vegetation Height and Distribution in Nova Avanhandava Reservoir (São Paulo State, Brazil) Using Bio-Optical Modeling

Rotta, Luiz Henrique da Silva [UNESP] 11 March 2015 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-06-17T19:34:05Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-03-11. Added 1 bitstream(s) on 2015-06-18T12:47:27Z : No. of bitstreams: 1 000835339.pdf: 4433443 bytes, checksum: c258cceb81b138f03e2027a4de764d4a (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Modelos semi-analíticos vêm sendo desenvolvidos para remover a influência da coluna da água e, com isso, recuperar a resposta do substrato em corpos águas, com o intuito de estudar alvos submersos. Porém, a maioria desses modelos foram elaborados para águas oceânicas e costeiras, ou seja, ainda são limitados os estudos sobre a recuperação da resposta do substrato a partir de sensoriamento remoto em ambientes aquáticos continentais devido à complexidade desses ambientes, pois apresentam altas concentrações de constituintes suspensos e dissolvidos da água, o que dificulta a detecção do sinal do substrato. Os objetivos do trabalho foram: avaliar a disponibilidade de radiação subaquática na coluna de água e o total de sólidos suspensos (TSS) no Reservatório de Nova Avanhandava, para analisar sua influência no desenvolvimento da VAS (Vegetação Aquática Submersa); recuperar a resposta do substrato e gerar modelos bio-ópticos para estimar a altura e posição da vegetação aquática submersa no reservatório de Nova Avanhandava; e finalmente utilizar e avaliar o desempenho dos modelos bio-ópticos por meio de imagem multiespectral (SPOT-6).... / Semi-analytical models have been developed to remove the water column influence and then retrieve the bottom reflectance in water bodies in order to study submerged targets. However, the majority of these models were elaborated for oceanic and coastal waters, in other words, there are still limited studies about the retrieval of the bottom response from remote sensing in continental aquatic environments. The reason for that is the complexity of those environments as they present high concentrations of dissolved and suspended constituents, which make it difficult to detect the bottom signal. The objectives of this thesis were: to assess the availability of sub-aquatic radiation in the water column and the total suspended solids concentration (TSS) in the Nova Avanhandava reservoir in order to analyze their influence on the SAV (Submerged Aquatic Vegetation) development; to recover the bottom albedo and generate bio-optical models to estimate the aquatic submerged vegetation height and position in the Nova Avanhandava reservoir; and finally, to use and assess the bio-optical models performance by using multi-spectral imagery (SPOT-6). Hyperspectral data were collected by using the radiometer RAMSES - TriOS. It was found that studies on subaquatic radiation availability measured by the vertical attenuation of downwelling irradiance in the water column can aid in understanding SAV behaviour in tropical reservoirs and, therefore, contribute to its management. SPOT-6 image, acquired on July the 9th of 2013, was atmospherically corrected by the empirical line method... / CNPq: 472131/2012-5 e 482605/2013-8 / FAPESP: 2013/09045-7 e 2012/19821-1
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Produção de protease por aspergillus niger (sis 18) em fermentação submersa utilizando meios alternativos contendo resíduos agroindustriais.

Felipe André Pereira da Cunha Amaral 09 June 2017 (has links)
Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A biotecnologia microbiana tem evoluído muito nas últimas décadas, principalmente pela utilização de diferentes micro-organismos para produção de inúmeros bioprodutos utilizados nos diferentes setores industriais e ambientas. As enzimas desempenham um importante papel catalítico em inúmeras reações metabólicas existentes, e as de origem microbiana apresentam diversas vantagens em relação as de origem animal e vegetal. A reutilização de resíduos agroindustriais oriundos da indústria alimentícia na elaboração de meios de produção de produtos biotecnológicos, tem surgido como uma alternativa econômica viável, pois diversos nutrientes descartados, apresentam um elevado teor nutricional que pode ser reaproveitado pelos micro-organismos nos processos fermentativos. As proteases são enzimas que constituem um grande grupo de enzimas hidrolíticas que catalisam a hidrólise de proteínas e as degradam em pequenos peptídeos e aminoácidos. A relevância deste grupo de enzimas, ricas em diversidade e mecanismos de ação estrutural se reflete na importância de suas aplicações em processos industriais. Foram realizados ensaios de seleção de amostras de Aspergillus niger (SIS 18, SIS 19 e SIS 20) em diferentes temperaturas (28, 30, 40oC) e diferentes pH ( 6, 7, 8) para a obtenção da melhor amostra para a produção de protease. Após a seleção da melhor amostra, foram realizados ensaios de produção da enzima através de fermentação submersa utilizando 4 diferentes meios. Os ensaios ocorreram em câmara incubadora com agitação orbital, 150 rpm, 37oC, 96 horas, onde foram realizados a determinação do pH, da atividade enzimática e curva de crescimento. Em seguida, após a seleção do melhor meio de produção, foram realizados novos ensaios utilizando planejamento fatorial 22 completo com 4 repetições, utilizando os resíduos de soro de leite e de sorvete, nas mesmas condições cinéticas pré-estabelecidas. Os resultados obtidos indicaram que a amostra de A. niger (SIS 18) apresentou a formação do maior halo característico de 3,0 cm, com 96 h de crescimento. Os ensaios realizados com diferentes meios de produção em fermentação submersa, indicaram que o meio denominado 3, apresentou uma atividade proteolítica de 0,104 U/mL, após 96 horas de fermentação. No planejamento fatorial 22, utilizando meios contendo substratos agroindustriais, o melhor resultado obtido foi no ensaio 2, que apresentou uma atividade proteolítica de 0,118U/mL com o soro de leite e 0,093U/mL para o resíduo de sorvete.Esses resultados validam que a utilização de resíduos agroindustriais tem sido uma alternativa viável para produção de protease em fermentação submersa, e com isso pode reduzir os custos de produção e o descarte desses resíduos no meio ambiente. / Microbial biotechnology has evolved a lot in the last decades, mainly by the use of different microorganisms for the production of numerous bioproducts used in the different industrial and environmental sectors. Enzymes play an important catalytic role in numerous metabolic reactions, and those of microbial origin have several advantages over those of animal and plant origin. The reuse of agroindustrial residues from the food industry in the elaboration of means of production of biotechnological products has emerged as a viable economic alternative because several discarded nutrients present a high nutritional content that can be reused by the microorganisms in the fermentative processes. Proteases are enzymes that constitute a large group of hydrolytic enzymes that catalyze the hydrolysis of proteins and degrade them in small peptides and amino acids. The relevance of this group of enzymes, rich in diversity and mechanisms of structural action, is reflected in the importance of their applications in industrial processes. Sampling assays of Aspergillus niger (SIS 18, SIS 19 and SIS 20) were carried out at different temperatures (28, 30, 40C) and different pH (6, 7, 8) to obtain the best sample for the production of Protease. After the selection of the best sample, enzyme production assays were performed by submerged fermentation using 4 different media. The tests were carried out in an orbital shaker, 150 rpm, 37oC, 96 hours, where the pH, the enzymatic activity and growth curve were determined. Then, after the selection of the best production medium, new assays were performed using a 22 complete factorial design with four replicates using milk serum and ice cream residues, under the same pre-established kinetic conditions. The results indicated that the A. niger (SIS 18) sample showed the formation of the largest characteristic halo of 3.0 cm, with 96 h of growth. The assays performed with different production media in submerged fermentation indicated that the medium 3 was a proteolytic activity of 0.104 U/mL after 96 hours of fermentation. In factorial design 22, using media containing agroindustrial substrates, the best result obtained for test 2, which presented a proteolytic activity of 0.118 U/mL with serum of milk and 0.093 U/mL for ice cream residue.These results validate that the use of agroindustrial residues has been a viable alternative for the production of protease in submerged fermentation, and with this can reduce the costs of production and the discard of these residues in the environment.
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Produção de amilase por amostra de aspergillus tamarii UCP 1261 através de fermentação submersa utilizando resíduos agroindustriais.

Tainã Crisia de Souza Fonseca 21 June 2017 (has links)
Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A produção de enzimas microbianas envolve processos fermentativos que são aprimorados constantemente para produção de metabólitos secundários de interesse industrial e/ou ambiental. As amilases E.C. 3.2.1.1. são enzimas que estão envolvidas em diversos processos tecnológicos. A utilização de resíduos agroindustriais tem surgido com uma alternativa viável na formulação de meios alternativos para produção biotecnológica de baixo custo, foram utilizados para identificação, amostras de Aspergillus spp. isolados de solos da Caatinga nordestina com potencial produção de amilase em meio sólido. Após a seleção e identificação do micro-organismo produtores de amilase, novos ensaios envolvendo a produção da enzima através de fermentação submersa foram realizados com diferentes meios de produção. Em seguida, novos ensaios foram realizados utilizando um planejamento fatorial completo 23 contendo resíduos agroindustriais como cascas de tubérculos (macaxeira e batata inglesa) muito consumidos na região Nordeste. Os experimentos foram conduzidos durante 96 horas, 150 rpm e 37C. Os resultados obtidos demonstram que a amostra de Aspergillus tamarii UCP 1261 apresentou maior formação de halo característico (68 mm) 37C, pH 6 e 72 h. Os ensaios envolvendo a seleção de meios como Czapeck dox apresentou valores de atividade amilolítica de 4 UA/mL após 48h de incubação. No planejamento fatorial 23 a máxima produção da enzima ocorreu na condição 4 apresentando pH 6 e valor da atividade amilolítica de 3 UA/mL. Posterirormente, foi realizado um planejamento fatorial 22, utilizando os resíduos de forma individual, observando-se uma máxima atividade amilolítica de 9,0 UA/mL, em 48h de cultivo com o substrato casca de macaxeira e pH 6. Os resultados obtidos neste trabalho descrevem o potencial biotecnológico de fungos filamentosos isolados do bioma Caatinga na indução do amido presente em cascas de tubérculos (macaxeira e batata inglesa) em produção de amilase, evidenciando a formulação de um meio alternativo e promissor na produção de amilase. / The production of microbial enzymes involves fermentative processes that are constantly improved for the production of secondary metabolites of industrial and / or environmental interest. Amylases E.C. 3.2.1.1. are enzymes that are involved in several technological processes. The use of agro-industrial waste has emerged as a viable solution in the formulation of alternative media for low-cost biotechnological production were performed to better identify samples of Aspergillus spp. isolated from soils of the northeastern Caatinga with potential production of amylase on solid medium. After selection and identification of microorganism producing amylase, new assays involving enzyme production by submerged fermentation were carried out with different media of production. Then, new tests were performed using a 23 full factorial design containing agroindustrial residues such as tuber (cassava and potato) peels, widely consumed in the Northeast region. The experiments were conducted for 96 hours, 150 rpm and 37C. The results obtained show that Aspergillus tamarii UCP 1261 presented higher formation (68 mm) of characteristic halo at 37C, pH 6 and 72 h. Assays involving the selection of media such as Czapek dox showed values of amylolytic activity of 4 AU/mL after 48h of incubation. In 23 factorial design the maximum enzyme production occurred in condition 4 presenting pH 6 and amylolytic activity value of 3 AU/mL. A 22 factorial design was carried out, using the individual residues, with a maximum amylolytic activity of 9,0 AU/mL in 48 hours of culture with the substrate cassava peel and pH 6. The results obtained in this work describe the biotechnological potential of filamentous fungi isolated from the Caatinga biome for the production of amylase with the induction of starch present in tuber peels (cassava and potato), evidencing the formulation of an alternative and promising medium in the production of amylase.
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Caracterização microestrutural do metal de solda depositado por arco submerso em chapas de aço-carbono estrutural /

Araújo, Márcia Regina Vieira de. January 2006 (has links)
Orientador: Juno Gallego / Banca: Vicente Afonso Ventrella / Banca: Itamar Ferreira / Resumo: O processo de soldagem por Arco Submerso é um dos processos de soldagem mais importantes na fabricação de modernas estruturas de engenharia, utilizado na fabricação metálica como tubos, navios, perfis, vasos de pressão e trocadores de calor, diferencia-se dos demais processos de soldagem pela utilização de um fluxo granular composto basicamente de componentes minerais como óxidos e silicatos. Este fluxo é alimentado à região de solda proporcionando uma solda sem respingos, luminosidade e radiação, além de proteger a região de solda da oxidação atmosférica. As propriedades mecânicas dependem da microestrutura do metal de solda, neste sentido, estudos realizados demonstram que a microestrutura ferrita acicular possui uma ótima combinação entre resistência mecânica e tenacidade. Inclusões não metálicas presentes no metal de solda podem promover a formação da ferrita acicular durante a transformação de fase, no entanto há nucleação de outras microestruturas. A microestrutura ferrita acicular (AF) depende da composição e tamanho das inclusões não metálicas presentes no metal de solda. Estas inclusões são geralmente óxidos, silicatos que são formados durante o processo de soldagem. Algumas substâncias como a zircônia e zirconita são potenciais nucleadores da ferrita acicular, neste sentido adicionou-se no metal de base a zircônia, zirconita e alumina para análise de uma eventual participação destes aditivos na formação da microestrututura do metal de solda. .Os ensaios de soldagem foram realizados com controle e monitoramento dos parâmetros elétricos, visto que estes são fatores importantes na formação da geometria do cordão de solda. Os materiais utilizados como metal de base... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Submerged-Arc Welding (SAW) is one of the most important welding processes applied in the fabrication of modern engineering structures. During the deposition of molten steel, which is protected against oxidation by agglomerated flux layer, the microstructure of the weldment undergoes considerable changes because of the heating and cooling cycles directly related to the welding process were employed. Mechanical properties of welded joint can be improved by a well design welding microstructure. Some studies have shown that acicular ferrite provides an optimum combination of strength and toughness in steel weld metal. The flux formulations are prepared using mineral compounds, such as oxides and silicates, and it is possible to increase the content of acicular ferrite by higher quantity of intragranular nucleation sites. So, dispersed non-metallic inclusions can promote the formation of acicular ferrite during phase transformation, at the expense of other undesirable weld phases such as allotriomorphic and Widmanstätten ferrite. In experimental procedure ASTM A36 steel grade was used as a metal base, together AWS E70-S6 solid wire and a commercial active flux commonly applied for SAW processing. Bead on plate welding was performed in flat position and nominal heat input changed from 1.0 to 3.3 kJ/mm. Transverse sections of weld deposit were prepared according standard grinding (up to 1200-grit SiC paper) and polishing (1.0 æm alumina) methods, followed by moderate etching in 2% nital for optical microscopy (OM). So, it was possible to determine some important weld bead geometry parameters such as penetration, reinforcement and bead width. Using quantitative metallography techniques allowed that some microstructure features were determined too... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre
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Isolamento de linhagens fúngicas termofílicas produtoras de pectinases termoestáves: produção, caracterização e purificação parcial da poligalacturonase

Martin, Natalia [UNESP] 19 May 2006 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:24Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006-05-19Bitstream added on 2014-06-13T20:56:26Z : No. of bitstreams: 1 martin_n_me_rcla.pdf: 594054 bytes, checksum: 3eb11fdae84b0f246f67f6ebbed3a1e0 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Os fungos, em função de suas características de reprodução e crescimento, adaptam-se a uma grande variedade de substratos, sendo excelentes decompositores de material orgânico. As pectinases produzidas por fungos termofílicos apresentam características importantes para aplicação em bioprocessos, como estabilidade ao pH e à temperatura. O tipo de processo fermentativo utilizado para a obtenção dessas enzimas influência a quantidade obtida e as propriedades das mesmas. O presente trabalho teve como objetivos isolar e identificar linhagens fúngicas termofílicas produtoras de pectinases e cultivá-las por FES e por FSM para a avaliação do potencial de produção de poligalacturonases, além de caracterizar a PG produzida. Foram coletadas amostras (0,5 g) de compostagem e depósitos de resíduos agrícolas e agro-industriais, as quais foram transferidas para tubos contendo pectina como única fonte de carbono. As linhagens fúngicas isoladas foram cultivadas a 45°C, por 120 horas em FES, utilizando-se como substratos, farelo de trigo (FT), bagaço de laranja industrializado (BL), bagaço de canade- açúcar (BC) e casca de laranja lavada (CL) e em FSM utilizando-se meio nutriente líquido contendo 1% de pectina como fonte de carbono. As amostras foram retiradas a cada 24 horas e a atividade enzimática foi avaliada a partir da quantificação do ácido galacturônico liberado por hidrólise de pectina citrus (1%). De um total de 40 amostras coletadas, foram isoladas 34 linhagens fúngicas entre as quais as maiores produtoras de poligalacturonases por FSM foram Thermomyces sp N4 (1,8 U/mL) e Scopulariopsis sp N7.1 (0,74 U/mL). As maiores produtoras de PG em FES foram as linhagens Thermomucor sp N31 (15 U/g), Aspergillus sp N12 (76,1 U/g) e Aspergillus sp N29 (64,7 U/g). A linhagem maior produtora de PG foi a Rhizomucor sp N31, em meio composto... / Fungi, due to their reproduction and growth characteristics, are well adapted to a large variety of substrates, being excellent decomposers of vegetal matter. Pectinases produced by thermophilic fungi exhibit important characteristics for application in bioprocesses, such as stability towards pH and temperature. The type of fermentation process used for the production of these enzymes has great influence on the amount of enzyme that is produced and on their properties. The goal of this work was to isolate and identify thermophilic fungal strains that produce pectinases and cultivate them in solid state fermentation (SSF) and in submerged fermentation (SmF) in order to evaluate their potential to produce polygalacturonases (PG), as well as to characterize the PG produced. Samples (0.5 g) were collected from piles of composting material and from deposits of agricultural and agro-industrial residues, which were transferred to tubes containing pectin as the only carbon source. The isolated fungal strains were cultivated at 45°C, for 120 hours in SSF, using wheat bran (WB), orange peel (OP), sugar cane bagasse (SB) and washed orange bagasse (WP) as substrates and in SmF, using a liquid nutrient medium containing 1.0% pectin as carbon source. Samples were taken every 24 hours and the enzymatic activity was assayed through the quantification of galacturonic acid released by citrus pectin (1.0%) hydrolysis. Of a total of 40 samples collected, 34 fungal strains were isolated, of which the best PG producers in SmF were Thermomyces sp N4 (1.8 U/mL) and Scopulariopsis sp N7.1 (0.74 U/mL). The best PG producers in SSF were Thermomucor sp N31 (15.0 U/g), Aspergillus sp N12 (76.1 U/g) and Aspergillus sp N29 (64.7 U/g). The strain with the most production of PG was Rhizomucor sp N31, in medium containing 50% WB and 50% WP in 24 hours of fermentation... (Complete abstract, click electronic address below)
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Estimation of Submerged Aquatic Vegetation Height and Distribution in Nova Avanhandava Reservoir (São Paulo State, Brazil) Using Bio-Optical Modeling /

Rotta, Luiz Henrique da Silva. January 2015 (has links)
Orientador: Nilton Nobuhiro Imai / Coorientador: Enner Herenio de Alcântara / Banca: Antonio Maria Garcia Tommaselli / Banca: Ligia Flavia Antunes Batista / Banca: Deepak Ranjan Mishra / Banca: Arcilan Trevenzoli Assireu / Resumo: Modelos semi-analíticos vêm sendo desenvolvidos para remover a influência da coluna da água e, com isso, recuperar a resposta do substrato em corpos águas, com o intuito de estudar alvos submersos. Porém, a maioria desses modelos foram elaborados para águas oceânicas e costeiras, ou seja, ainda são limitados os estudos sobre a recuperação da resposta do substrato a partir de sensoriamento remoto em ambientes aquáticos continentais devido à complexidade desses ambientes, pois apresentam altas concentrações de constituintes suspensos e dissolvidos da água, o que dificulta a detecção do sinal do substrato. Os objetivos do trabalho foram: avaliar a disponibilidade de radiação subaquática na coluna de água e o total de sólidos suspensos (TSS) no Reservatório de Nova Avanhandava, para analisar sua influência no desenvolvimento da VAS (Vegetação Aquática Submersa); recuperar a resposta do substrato e gerar modelos bio-ópticos para estimar a altura e posição da vegetação aquática submersa no reservatório de Nova Avanhandava; e finalmente utilizar e avaliar o desempenho dos modelos bio-ópticos por meio de imagem multiespectral (SPOT-6).... / Abstract: Semi-analytical models have been developed to remove the water column influence and then retrieve the bottom reflectance in water bodies in order to study submerged targets. However, the majority of these models were elaborated for oceanic and coastal waters, in other words, there are still limited studies about the retrieval of the bottom response from remote sensing in continental aquatic environments. The reason for that is the complexity of those environments as they present high concentrations of dissolved and suspended constituents, which make it difficult to detect the bottom signal. The objectives of this thesis were: to assess the availability of sub-aquatic radiation in the water column and the total suspended solids concentration (TSS) in the Nova Avanhandava reservoir in order to analyze their influence on the SAV (Submerged Aquatic Vegetation) development; to recover the bottom albedo and generate bio-optical models to estimate the aquatic submerged vegetation height and position in the Nova Avanhandava reservoir; and finally, to use and assess the bio-optical models performance by using multi-spectral imagery (SPOT-6). Hyperspectral data were collected by using the radiometer RAMSES - TriOS. It was found that studies on subaquatic radiation availability measured by the vertical attenuation of downwelling irradiance in the water column can aid in understanding SAV behaviour in tropical reservoirs and, therefore, contribute to its management. SPOT-6 image, acquired on July the 9th of 2013, was atmospherically corrected by the empirical line method... / Doutor
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Estudo da produção de glutationa a partir de Saccharomyces cerevisiae e avaliação da aplicação de campos magneticos durante as fermentações / Study of the production of glutatione from Saccharomyces cerevisiae and evaluation of application of magnetic fields during fermentation

Santos, Lucielen Oliveira dos 03 July 2008 (has links)
Orientador: Ranulfo Monte Alegre / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-10T05:07:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Santos_LucielenOliveirados_D.pdf: 924736 bytes, checksum: c840daae6a578f96bb26b7b8ad94bddd (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: A glutationa (GSH) é um tripeptídeo composto por ácido glutâmico, L-cisteína e glicina. Uma de suas funções mais importantes é atuar como antioxidante contra os efeitos tóxicos do oxigênio e de outros compostos oxidativos. A GSH é importante em várias funções metabólicas nas células, tais como: proteção da oxidação por peróxidos, transporte de aminoácidos através da membrana celular e eliminação de metais pesados. Com a descoberta de mais funções e propriedades, este composto tornou-se de interesse nas indústrias de aditivos para alimentos, cosméticos e fármacos. Este tripeptídeo é normalmente produzido por fermentação com leveduras. A aplicação dos campos magnéticos (CM) nos processos fermentativos pode causar efeitos estimulantes ou inibitórios. Poucos trabalhos têm sido direcionados para aplicação de CM em Saccharomyces cerevisiae. O objetivo deste trabalho foi o estudo da produção de GSH e avaliar o efeito da aplicação de CM durante o processo. O microrganismo utilizado foi a levedura S. cerevisiae ATCC 7754 e o acompanhamento das fermentações foi feito com determinações de pH, concentrações celular, de glicose e de GSH. Na primeira etapa, em frascos Erlenmeyer (250 mL), foram feitos três delineamentos experimentais. Os níveis de temperatura, pH inicial, agitação, concentrações de inóculo e inicial de glicose foram estudados. A maior concentração de GSH obtida foi de 168,9 mg/L após 48 h, no ensaio a 24°C, 300 rpm, pH inicial 5, 60 g/L de glicose e 5% de inóculo. Foi obtido um modelo de segunda ordem e o percentual de variação explicado por este foi de 95%. Os resultados mostraram que as melhores condições de cultivo foram 300 rpm, 20°C, pHinicial 5, 54 g/L de glicose e 5% de inóculo. Na segunda etapa, feita em fermentador Bioflo III (5 L), as condições de agitação, aeração, fonte de nitrogênio e adição de aminoácidos foram estudadas. A maior concentração de GSH (205,7 mg/L) ocorreu em 72 h no ensaio feito a 20°C, 500 rpm, 54 g/L de glicose, 1,1 vvm, com adição de aminoácidos e utilizando extrato de levedura. Na terceira etapa foi feita a aplicação de CM gerados por bobina. Para tal, foi utilizado um delineamento experimental e as variáveis tempo do tratamento e indução magnética foram estudadas. A concentração de GSH chegou a 340 mg/L, quando foram aplicados 25 mT por 16 h. Na quarta etapa o meio de cultivo foi recirculado passando por ímãs e foi variado o tempo de exposição ao CM. No ensaio com aplicação de 20 mT por 72 h foi observada a maior concentração de GSH, de 271,9 mg/L. Em todas as etapas o ensaio no qual foi obtida a maior concentração de GSH (340 mg/L) foi conduzido com aplicação de 25 mT por 16 h e nas seguintes condições de cultivo: 20ºC, pHinicial 5, 200 rpm, 54 g/L de glicose, 50 g/L de extrato de levedura, 12 g/L de MgSO4.7H2O, 5% de inóculo (v/v), 3,2 vvm e com adição de aminoácidos durante a fermentação / Abstract: Glutathione (GSH) is a tripeptide consisting of L-glutamate, L-cysteine and glycine. One of its most important functions is a role as an antioxidant against the toxic effects of oxygen and other oxidative compounds. GSH is important for several metabolic functions of cells, such as protection from oxidation by peroxides, transport of amino acids across cell membranes and elimination of heavy metals. Moreover the discovery of more functions and properties of GSH, this compound is of interest in the food additive, cosmetic and pharmaceutics industries. This tripeptide is currently produced by yeast fermentation. The application of magnetic fields (MF) in the fermentative process can cause stimulants or inhibitory effects. Literature is very poor about the application of MF in S. cerevisiae. The objective of this work was to study the production of GSH and evaluate the application of MF fields in this process. The microorganism used was the yeast S. cerevisiae ATCC 7754 and the fermentations were monitored with the measurements of pH, concentrations of cell, glucose and GSH. In the first step, in the Erlenmeyer flasks (250 mL), have made three experimental design. The levels of temperature, pHinitial, agitation rate, concentrations of glucose and inoculum were studied. The highest concentration of GSH was 168.9 mg/L after 48 h, in run at 24ºC, 300 rpm, pHinitial 5, 60 g/L of glucose and 5% of inoculum. It was obtained a second order model equation and the percent of variation explained by the model was 95%. The results showed that the optimal culture conditions were 300 rpm, 20°C, pHinitial 5,54 g/l of glucose and 5% of inoculum concentration. In the second step, made in fermentor Bioflo III (5 L), the conditions of agitation, aeration, a source of nitrogen and addition of amino acids were studied. The highest concentration of GSH (205.7 mg/L) occurred in 72 h in run at 20°C, 500 rpm, 54 g/L of glucose, 1.1 vvm, with the addition of amino acids and yeast extract as a source of nitrogen. The third step was the application of MF generated by coil, it was used an experimental design and variables time of treatment and induction were studied. The concentration of GSH reached was 340 mg/L, when it was applied 25 mT for 16 h. In the fourth step the fermentation medium was recycled through magnets and was varied the time of exposure to the MF. In run with application of 20 mT by 72 h was seen the highest concentration of GSH of 271.9 mg/L. At all stages in which the run was obtained the highest concentration of GSH (340 mg/L) was conducted with application of 25 mT by 16 h of cultivation in the following conditions: 20°C, pHinicial 5, 200 rpm, 54 g/L of glucose, 50 g/L of yeast extract, 12 g/L of MgSO4.7H2O, 5% of inoculum (v/v), 3.2 vvm and with the addition of amino acids during fermentation / Doutorado / Doutor em Engenharia de Alimentos
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Produção, caracterização parcial e aplicação ambiental de ramnolipídios de Pseudomonas aeruginosa isolada de resíduos de pescado

Prieto, Lígia Machado January 2007 (has links)
Dissertação(mestrado) - Universidade Federal do Rio Grande, Programa de Pós-Graduação em Engenharia e Ciência de Alimentos, Escola de Química e Alimentos, 2007. / Submitted by Caroline Silva (krol_bilhar@hotmail.com) on 2012-09-25T19:06:21Z No. of bitstreams: 1 microsoft word - dissertao.final.pdf: 515857 bytes, checksum: afa0c33effce4f7fb4a24ce581f95202 (MD5) / Approved for entry into archive by Bruna Vieira(bruninha_vieira@ibest.com.br) on 2013-06-18T18:32:39Z (GMT) No. of bitstreams: 1 microsoft word - dissertao.final.pdf: 515857 bytes, checksum: afa0c33effce4f7fb4a24ce581f95202 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-06-18T18:32:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 microsoft word - dissertao.final.pdf: 515857 bytes, checksum: afa0c33effce4f7fb4a24ce581f95202 (MD5) Previous issue date: 2007 / Os biossurfactantes compreendem uma classe importante de compostos anfipáticos de origem microbiana. A bactéria gram negativa Pseudomonas aeruginosa é conhecida por sua habilidade de produzir biossurfactante do tipo ramnolipídio a partir de diversas fontes de carbono. A investigação da produção por novas linhagens pode resultar em processos mais eficientes, maiores rendimentos e biossurfactantes com características distintas, sendo aplicados em várias indústrias, tais como as indústrias farmacêutica, de cosméticos, de petróleo e de alimentos. Por outro lado, com o maior consumo de petróleo e derivados, cresceu a exposição de ambientes a possíveis acidentes relacionados à produção, transporte, carga e descarga desses materiais, sendo cada vez mais necessário buscarem-se alternativas tecnológicas para a recuperação desses ambientes. A biorremediação pode ser definida como o uso das potencialidades dos microrganismos em degradar compostos poluentes, reduzindo o grau de contaminação ou mesmo descontaminando ambientes degradados. Entre as técnicas disponíveis, a bioestimulação é uma das mais usadas, em que a microbiota nativa é estimulada pela adição de nutrientes e coadjuvantes como os biossurfactantes. Este trabalho teve como objetivo estudar a produção de ramnolipídios de Pseudomonas aeruginosa isolada de resíduos de pescado capturado no extremo sul do Brasil, utilizando diversas fontes de carbono (óleo de soja, borra de óleo de soja, óleo de pescado, glicerol e glicose) e fontes de nitrogênio (nitrato de sódio, nitrato de amônio, uréia e sulfato de amônio), bem como diferentes relações C/N. O biossurfactante foi caracterizado quanto à influência de fatores físicoquímicos na formação de emulsões. A degradação de petróleo em solo retirado de local próximo a um oleoduto, por técnicas de bioestimulação, com e sem a utilização do biossurfactante, também foi estudada. Os cultivos microbianos foram realizados em triplicata, sendo conduzidos em incubadora rotatória a 30°C e 180rpm, por um período de 96 horas. Pelo teste de Tukey, a 95% de confiança, o óleo de soja (40g/L) e o nitrato de sódio (8g/L) foram as melhores fontes de carbono e nitrogênio, respectivamente, obtendose, com uma relação C/N 22, 0,94g/L de ramnose e índice de emulsificação de 62,1%. Com uma relação C/N 100 foram produzidos 1,42g/L de ramnose e índice de emulsificação de 60,7%, indicando que a produção é favorecida em condição nitrogêniolimitante. A formação de emulsões estáveis foi melhor em concentrações salinas menores que 0,5%, pH na faixa de 6-9 e temperaturas na faixa de 35-40°C, mantendo cerca de 80% de sua atividade original para salinidade de até 3% e 120 min de exposição a 100°C. Quanto à biorremediação, os melhores resultados foram obtidos nos tratamentos com adição de nutrientes e adição de nutrientes mais biossurfactante, com 90,4% e 80,9% de remoção de hidrocarbonetos totais de petróleo, respectivamente, demonstrando efetiva melhoria em relação ao controle (42,2%), havendo uma clara relação entre a dinâmica da microbiota local e a biodegradação. / Biosurfactants consist of an important class of amphipathic compounds of microbial origin. The Gram-negative bacteria Pseudomonas aeruginosa is known for its ability to produce rhamnolipid-type biosurfactant from diverse carbon sources. The investigation of the production by new strains can result in more efficient processes, greater yields and biosurfactants with distinct characteristics, being applied in various industries, such as pharmaceuticals, cosmetics, oils and foods. On the other hand, with the huge consumption of petroleum and its derivatives, the exposure of environments to possible accidents related to the production, transport, loading and unloading of these materials has increased, making it necessary to search for technological alternatives to restore of these environments. Bioremediation can be defined as the use of the potential of microrganisms in degrading pollutant compounds, reducing the degree of their contamination or decontaminating degraded environments. Among the available techniques, biostimulation is one of most commonly used, where native microbiota is stimulated by the addition of nutrients and amendments as surfactants. This work had as its objective to study the production of biosurfactant from a strain of Pseudomonas aeruginosa isolated from fish samples captured in the extreme south region of Brazil, using diverse carbon sources (soybean oil, soybean oil soapstock, fish oil and glycerol) and nitrogen sources (sodium nitrate, ammonium nitrate, urea and ammonium sulphate), as well as different C/N ratios. The biosurfactant was characterized taking into account the influence of physio-chemical factors in emulsion formation. The degradation of oil from the soil removed from a place next to a pipe-line in the region by different biostimulation techniques, with and without the use of the biosurfactant, also was studied. The microbial culture assays, carried out in triplicate, were conducted in a rotary shaker at 30°C and 180rpm, for a period of 96 hours, and the results analyzed by the Tukey test. The soybean oil (40g/L) and the sodium nitrate (8g/L) were the best sources of carbon and nitrogen, respectively, obtaining with a C/N 22, 0.94 g/L of rhamnose and an emulsification index of 62.1%. With a C/N ratio 100, 1.42 g/L of rhamnose and an emulsification index of 60.7% were produced, indicating that the production is favored in a nitrogen-limiting condition. The formation of stable emulsions was better in saline concentrations less than 0.5%, pH in the range of 6-9 and temperatures in the range of 35-40°C, maintaining about 80% of its original activity for salinity up to 3% and 120 min of exposure at 100°C. For bioremediation, the best results were obtained in the treatments with addition of nutrients and addition of nutrients with more biosurfactant, with 90.4% and 80.9% of TPH removal, respectively, demonstrating effective improvement in relation to the control (42.2%), having a clear relation between the dynamics of local microbiota and the biodegradation.

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