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Effects of Stress on Several Immune and Health Responses of Weanling CalvesShank, Alba Maria Montana 19 September 2002 (has links)
The effects of weaning stressors on several immune and health responses were measured in three experiments. Sixty-four beef calves from 2 sources were bled on d - 7 (pre-weaning), 0 (weaning), 7, 14, and 21 (post-weaning). Serum selenium (Se), neutrophil and lymphocyte counts, and glutathione peroxidase (GSH-Px) activity for erythrocytes and leukocytes were measured for each calf at each date. Erythrocyte GSH-Px activity remained constant over time, while leukocyte GSH-Px and serum Se increased on d 7 (P<0.0001). Effects of single mineral vs. multi-mineral supplementation were measured for several immune and health responses in 2 trials. Trial 1: 36 heifers weaned on-site at SVAREC were randomly assigned 1 of 2 dietary supplements: 1) no supplement; 2) 15% CP at 0.5% BW; and 1 of 3 injection treatments: 1) no treatment (control); 2) Mu-Se injection; 3) Multi-Min injection. Whole blood Se and serum Cu increased post-weaning and serum Zn decreased post-weaning. Mu-Se-supplemented heifers gained weight faster between d 14-28 vs. Multi-Min-supplemented (P=0.01) or control heifers (P=0.02). Trial 2: 48 steers purchased at auction and transported to SVAREC were randomly assigned to 1 of 4 pasture management systems: 1) control (no treatment); 2) litter fed; 3) litter applied; 4) inorganic fertilizer; and 1 of 3 injection treatments (same as Trial 1). Whole blood Se and serum Cu increased post-stress and serum Zn decreased post-stress. Oxidative burst activity decreased in Mu-Se and Multi-min supplemented steers between d 0-4 vs. control steers (P<0.01). Multi-min-supplemented steers had higher phagocytic activity vs. steers in either Mu-Se or control groups (P=0.04). / Master of Science
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Crystallographic studies on redox enzymes containing the thioredoxin fold /Ren, Bin, January 1900 (has links)
Diss. (sammanfattning) Stockholm : Karol. inst., 1999. / Härtill 4 uppsatser, 1 appendix.
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Estudo da produção de glutationa por Saccharomyces cerevisiae ATCC 7754 em meios proteicos de baixo custo / Study of the production of glutatione from Saccharomyces cerevisiae ATCC 7754 in protein sistems of low costPiedrahita-Aguirre, Cesar Augusto, 1980- 14 April 2008 (has links)
Orientador: Ranulfo Monte Alegre / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-11T02:28:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2008 / Resumo: A glutationa ou GSH (L-g-glutamil-L-cisteinilglicina) é um tripeptídeo sintetizado através de consecutivas reações enzimáticas. O qual possui várias funções metabólicas nas células, sendo que a principal é antioxidante. Alterações na concentração deste tripeptídeo têm sido observadas em pacientes com doenças, tais como, intoxicações com metais pesados, diabetes, processos inflamatórios no pulmão, doenças coronarianas, câncer e estados de imunodeficiência. É utilizada nas indústrias farmacêutica, de cosméticos e de alimentos. Os métodos químicos e enzimáticos de produção possuem várias desvantagens, desta forma a produção industrial é feita por fermentação, sendo utilizados principalmente as leveduras. Sendo assim, o objetivo deste trabalho foi estudar a composição do meio de cultura para produção de glutationa por Saccharomyces cerevisiae ATCC 7754 em frascos Erlenmeyer utilizando fontes alternativas mais econômicas e produtivas de carbono, nitrogênio e aminoácidos. Para se estudar a influência das variáveis concentrações de glicose, água de maceração de milho, extrato de levedura, lecitina e proteína de soro de leite, empregou-se um planejamento fatorial fracionado (25-1) totalizando 19 experimentos. Os ensaios foram realizados com pH inicial 5,0, temperatura 20°C, agitação 300 rpm e tempo de fermentação de 96 h. O melhor rendimento equivalente a 264,49 mg GSH/L foi obtido em 96h de fermentação, com um meio contendo 54 g/L de glicose, 50 g/L água de maceração de milho, 50g/L extrato de levedura, 6 mM de lecitina e 50 g/L de proteína de soro. Após verificar-se que nenhuma variável era estatisticamente significativa e, devido aos custos do extrato de levedura, empregou-se outros dois planejamentos Plackett-Burman 12 (PB-12) seqüenciais. No primeiro adicionou-se a variável MgSO4 e analisou-se os efeitos da composição do meio na concentração celular, obtendo-se na melhor condição uma concentração celular de 23,33 g/L e um rendimento de 278,42 mg/L de GSH com concentração de 90 g/L de glicose, 50 g/L de água de maceração de milho, 10 g/L de extrato de levedura, 5 mM de lecitina, 50 g/L de proteína de soro de leite e 10 g/L de MgSO4. Para o segundo planejamento PB-12 decidiu-se observar os efeitos das variáveis nos níveis experimentais mais baixos e fixou-se à proteína de soro de leite em 30 g/L, atingindo-se produção de 166,84 mg/L de GSH e 18,75 g/L de biomassa com meio de composição de 60 g/L de glicose, 30 g/L de água de maceração de milho, 4 g/L extrato de levedura, 0,5 mM de lecitina e 2 g/L de MgSO4. Nas condições deste trabalho, não se otimizou o meio de fermentação mas atingiu-se o objetivo de obter boa quantidade de GSH com o meio fermentativo de baixo custo / Abstract: Glutathione or GSH (Lg-glutamyl-L-cisteinilglicina) is a tripeptide synthesized through consecutive enzymatic reactions. Besides being a main antioxidant, it has several other metabolic functions. Changes in its concentration have been observed in patients who suffered from poisoning with heavy metals, diabetes, inflammatory processes in the lung, coronary diseases, cancer and states of immunodeficiency. It is used in the pharmaceutical, cosmetic and food industry. Chemical and enzymatic production methods have several disadvantages, thus standard industrial production is done by means of fermentation by yeast. The objective of this work was to study the composition of a low cost culture medium for the production of glutathione by Saccharomyces cerevisiae ATCC 7754 in bottles Erlenmeyer flask using alternative, more efficient sources of carbon, nitrogen and amino acids. To study the influence of variables such as glucose, water, corn steep liquor extract, yeast, lecithin and of whey protein, a fractional factorial design (25-1) was used is used totaling 19 experiments. The tests were performed at pH 5.0, 20°C, 300 rpm stirring and 96 h of fermentatio n. The higher yield equivalent to 264.49 GSH mg/L was obtained in 96 hours of fermentation, with a medium containing 54 g/L glucose, 50 g/L of water maceration of maize, 50 g/L yeast extract, 6 mM lecithin and 50 g/L whey protein. Based on the results it was verified that no variable was statistically significant and because of the cost of yeast extract, two other Plackett-Burman 12 (PB-12) sequential, plans were use to a the first plan, the variable MgSO4 was added and the effects of the composition of the medium concentration in the cell, were verified. As a result an optimed condition could be conclued being a cell concentration of 23.33 g/L and an feed of 278.42 mg/L of GSH with concentration of 90 g/L glucose, 50 g/L of water maceration of maize, 10 g/L yeast extract-, 5 mM lecithin, 50 g/L of whey protein and 10 g/L of MgSO4. For the second PB-12 planning it was decided to observe the effects of experimental variables in the lower levels and fix the concentration of whey protein, 30 g/L, reaching a production of GSH of up to 166.84 mg/L and 18.75 g/L of biomass with a composition of 60 g/L glucose, 30 g/L of water maceration of corn, 4 g/L yeast extract, 0.5 mM lecithin and 2 g/L of MgSO4. The medium could not be optimized but the objetive to obtain a reasonable amount of GSH utilizing a low cost culture medium was obtained. / Mestrado / Mestre em Engenharia de Alimentos
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Estudo da produção de glutationa a partir de Saccharomyces cerevisiae e avaliação da aplicação de campos magneticos durante as fermentações / Study of the production of glutatione from Saccharomyces cerevisiae and evaluation of application of magnetic fields during fermentationSantos, Lucielen Oliveira dos 03 July 2008 (has links)
Orientador: Ranulfo Monte Alegre / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-10T05:07:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2008 / Resumo: A glutationa (GSH) é um tripeptídeo composto por ácido glutâmico, L-cisteína e glicina. Uma de suas funções mais importantes é atuar como antioxidante contra os efeitos tóxicos do oxigênio e de outros compostos oxidativos. A GSH é importante em várias funções metabólicas nas células, tais como: proteção da oxidação por peróxidos, transporte de aminoácidos através da membrana celular e eliminação de metais pesados. Com a descoberta de mais funções e propriedades, este composto tornou-se de interesse nas indústrias de aditivos para alimentos, cosméticos e fármacos. Este tripeptídeo é normalmente produzido por fermentação com leveduras. A aplicação dos campos magnéticos (CM) nos processos fermentativos pode causar efeitos estimulantes ou inibitórios. Poucos trabalhos têm sido direcionados para aplicação de CM em Saccharomyces cerevisiae. O objetivo deste trabalho foi o estudo da produção de GSH e avaliar o efeito da aplicação de CM durante o processo. O microrganismo utilizado foi a levedura S. cerevisiae ATCC 7754 e o acompanhamento das fermentações foi feito com determinações de pH, concentrações celular, de glicose e de GSH. Na primeira etapa, em frascos Erlenmeyer (250 mL), foram feitos três delineamentos experimentais. Os níveis de temperatura, pH inicial, agitação, concentrações de inóculo e inicial de glicose foram estudados. A maior concentração de GSH obtida foi de 168,9 mg/L após 48 h, no ensaio a 24°C, 300 rpm, pH inicial 5, 60 g/L de glicose e 5% de inóculo. Foi obtido um modelo de segunda ordem e o percentual de variação explicado por este foi de 95%. Os resultados mostraram que as melhores condições de cultivo foram 300 rpm, 20°C, pHinicial 5, 54 g/L de glicose e 5% de inóculo. Na segunda etapa, feita em fermentador Bioflo III (5 L), as condições de agitação, aeração, fonte de nitrogênio e adição de aminoácidos foram estudadas. A maior concentração de GSH (205,7 mg/L) ocorreu em 72 h no ensaio feito a 20°C, 500 rpm, 54 g/L de glicose, 1,1 vvm, com adição de aminoácidos e utilizando extrato de levedura. Na terceira etapa foi feita a aplicação de CM gerados por bobina. Para tal, foi utilizado um delineamento experimental e as variáveis tempo do tratamento e indução magnética foram estudadas. A concentração de GSH chegou a 340 mg/L, quando foram aplicados 25 mT por 16 h. Na quarta etapa o meio de cultivo foi recirculado passando por ímãs e foi variado o tempo de exposição ao CM. No ensaio com aplicação de 20 mT por 72 h foi observada a maior concentração de GSH, de 271,9 mg/L. Em todas as etapas o ensaio no qual foi obtida a maior concentração de GSH (340 mg/L) foi conduzido com aplicação de 25 mT por 16 h e nas seguintes condições de cultivo: 20ºC, pHinicial 5, 200 rpm, 54 g/L de glicose, 50 g/L de extrato de levedura, 12 g/L de MgSO4.7H2O, 5% de inóculo (v/v), 3,2 vvm e com adição de aminoácidos durante a fermentação / Abstract: Glutathione (GSH) is a tripeptide consisting of L-glutamate, L-cysteine and glycine. One of its most important functions is a role as an antioxidant against the toxic effects of oxygen and other oxidative compounds. GSH is important for several metabolic functions of cells, such as protection from oxidation by peroxides, transport of amino acids across cell membranes and elimination of heavy metals. Moreover the discovery of more functions and properties of GSH, this compound is of interest in the food additive, cosmetic and pharmaceutics industries. This tripeptide is currently produced by yeast fermentation. The application of magnetic fields (MF) in the fermentative process can cause stimulants or inhibitory effects. Literature is very poor about the application of MF in S. cerevisiae. The objective of this work was to study the production of GSH and evaluate the application of MF fields in this process. The microorganism used was the yeast S. cerevisiae ATCC 7754 and the fermentations were monitored with the measurements of pH, concentrations of cell, glucose and GSH. In the first step, in the Erlenmeyer flasks (250 mL), have made three experimental design. The levels of temperature, pHinitial, agitation rate, concentrations of glucose and inoculum were studied. The highest concentration of GSH was 168.9 mg/L after 48 h, in run at 24ºC, 300 rpm, pHinitial 5, 60 g/L of glucose and 5% of inoculum. It was obtained a second order model equation and the percent of variation explained by the model was 95%. The results showed that the optimal culture conditions were 300 rpm, 20°C, pHinitial 5,54 g/l of glucose and 5% of inoculum concentration. In the second step, made in fermentor Bioflo III (5 L), the conditions of agitation, aeration, a source of nitrogen and addition of amino acids were studied. The highest concentration of GSH (205.7 mg/L) occurred in 72 h in run at 20°C, 500 rpm, 54 g/L of glucose, 1.1 vvm, with the addition of amino acids and yeast extract as a source of nitrogen. The third step was the application of MF generated by coil, it was used an experimental design and variables time of treatment and induction were studied. The concentration of GSH reached was 340 mg/L, when it was applied 25 mT for 16 h. In the fourth step the fermentation medium was recycled through magnets and was varied the time of exposure to the MF. In run with application of 20 mT by 72 h was seen the highest concentration of GSH of 271.9 mg/L. At all stages in which the run was obtained the highest concentration of GSH (340 mg/L) was conducted with application of 25 mT by 16 h of cultivation in the following conditions: 20°C, pHinicial 5, 200 rpm, 54 g/L of glucose, 50 g/L of yeast extract, 12 g/L of MgSO4.7H2O, 5% of inoculum (v/v), 3.2 vvm and with the addition of amino acids during fermentation / Doutorado / Doutor em Engenharia de Alimentos
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Niveis de zinco plasmatico e leucocitario em adolescentes com hepatite auto-imune / Plasma and leukocyte zinc levels in adolescents with autoimmune hepatitisPereira, Thalita Cremonesi 12 August 2018 (has links)
Orientador: Gabriel Hessel / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-12T18:27:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2009 / Resumo: A deficiência de zinco em crianças ou adolescentes acarreta danos ao crescimento, desenvolvimento e ao sistema imune dos indivíduos. Essa deficiência ainda não foi investigada em pacientes com hepatite auto-imune que apresentam comprometimento hepático e utilizam medicamentos que podem causar a deficiência de vitaminas e minerais no organismo. Esta pesquisa teve por finalidade verificar a existência de deficiência de zinco plasmático e/ou leucocitário em adolescentes com hepatite auto-imune. Para isso, participaram do estudo 23 pacientes com hepatite auto-imune entre 10 e 18 anos atendidos no Ambulatório de Hepatologia Pediátrica do Hospital de Clínicas da Unicamp e 23 adolescentes com idade pareada com os pacientes formaram o grupo controle. Foi coletado sangue dos indivíduos dos dois grupos em quantidade suficiente para preencher dois tubos de heparina para a dosagem de zinco leucocitário e um tubo de EDTA para a análise de glutationa reduzida eritrocitária. O zinco plasmático foi analisado pelo HC/Unicamp como exame de rotina. Foi avaliado nos grupos o estado nutricional por meio da aferição de dados antropométricos como peso, altura, circunferência do braço, prega cutânea tricipital e subescapular. Somente no grupo de pacientes também foi realizado o exame de bioimpedância elétrica com aparelho que fornecia dados de resistência e reactância que foram utilizados em cálculos por equações preditivas para estimar a gordura corporal dos pacientes. A ingestão alimentar dos pacientes e do grupo controle foi avaliada pelo preenchimento, pelos próprios adolescentes, de três dias de diário alimentar. Os testes estatísticos empregados foram o de Mann Whitney, correlação de Spearman e análise de concordância interclasses. O nível de significância adotado foi de 5%. A média de zinco plasmático nos pacientes foi de 71.91±11.79 µg/dl e no grupo controle foi de 80.74±10.92 µg/dl, essa diferença foi significante (p=0.04). O nível de zinco leucocitário nos pacientes foi igual a 222.33±166.13 pmol/106 células e no grupo controle foi de 226.64±217.81 pmol/106 células, não ocorrendo diferença estatisticamente significante entre esses (p=0.45). A análise de glutationa mostrou média de 57.34±25.95 mg/dl nos pacientes e de 52.55±23.08 mg/dl no grupo controle, sem diferença estatística (p=0.50). A avaliação do estado nutricional mostrou que a eutrofia é prevalente nos pacientes e estes possuem maior
valor de gordura corporal que o grupo controle com diferença significativa. A ingestão alimentar média de zinco (mg/dia) foi de 9.40±3.60 nos pacientes e de 10.94±4.32 no grupo controle, sendo que esta diferença não foi significante (p=0.16). Em comparação com as recomendações nutricionais, a ingestão de zinco e macronutrientes apresenta alta probabilidade de adequação tanto nos pacientes como no grupo controle. Entretanto, a proteína foi o único nutriente estudado que apresentou ingestão significantemente menor nos pacientes quando comparada ao grupo controle, mas ainda dentro do ideal. Conclui-se que os pacientes com hepatite auto-imune apresentam deficiência de zinco plasmático; não apresentam deficiência de zinco leucocitário; possuem ingestão alimentar adequada em relação à Zn, carboidratos, proteínas e lipídeos; não estão em estresse oxidativo e apresentam estado nutricional prevalente de eutrofia com tendência à obesidade. / Abstract: Zinc deficiency in children and adolescents impairs their growing, development and immune system. This deficiency was still not investigated in patients with autoimmune hepatitis who present hepatic involvement and use medications that may cause vitamin and mineral deficiency in their organism. The aim of this research was to verify the existence of plasma and leukocyte zinc deficiency in adolescents with autoimmune hepatitis. The study comprised 23 patients with autoimmune hepatitis, aged 10-18 years, assisted at the Ambulatory Service of Pediatric Hepatology of the University of Campinas Teaching Hospital (HC/Unicamp); and adolescents with ages compatible with the patients'ages comprised the control group. Two blood tubes containing heparin for the dosage of leukocyte zinc and one tube with EDTA for analysis of reduced erythrocitary glutathione were collected from both groups. The plasma zinc was analyzed by HC/Unicamp as custom examination. The nutritional state in both groups was evaluated by anthropometric data measurement, such as weight, height, arm circumference, triciptal and subscapular cutaneous fold. Only the patient group underwent electrical bioimpedance examination with device that provided resistance and reactance data, which were used in calculations by predictive equations in order to estimate the patients' body fat. The alimentary ingestion of the group of patients and control group was evaluated by the application of a three-day alimentary inquiry, filled by adolescents. The following statistical tests were used: Mann Whitney, Spearman's correlation and interclass concordance analysis. The significance level adopted was 5%. The mean plasma zinc in patients was 71.91±11.79 µg/dl, and in the control group, it was 80.74±10.92 µg/dl, showing a significant difference (p=0.04). The leukocyte zinc level in patients was 222.33±166.13 pmol/106 células, and in the control group, it was 226.64±217.81 pmol/106 células; there was not statistical significance between them (p=0.45). The glutathione analysis showed a mean of 57.34±25.95 mg/dl in patients and 52.55±23.08 mg/dl in the control group; without statistical significance (p=0.50). The evaluation of the nutritional state showed that the eutrophy is prevalent in patients, and they presented a higher body fat value than the control group, with significant difference. The mean alimentary ingestion of zinc (mg/day) was of 9.40±3.60 in patients, and of 10.94±4.32 in the control group; therefore, there was not a significant difference (p=0.16). In comparison with nutritional recommendations, zinc and macronutrient ingestion had a high probability of adequacy in group of patients and control group. However, the protein was the only nutrient studied that presented ingestion significantly lower in patients when compared with the control group, but within of recommended values. The results showed that patients with autoimmune hepatitis presented plasma zinc deficiency; did not present leukocyte zinc deficiency; and they showed adequate alimentary ingestion in relation to Zn, carbohydrates, proteins and lipids; as well as they were not in oxidative stress and presented prevalent nutritional state of eutrophy with obesity tendency. / Mestrado / Saude da Criança e do Adolescente / Mestre em Saude da Criança e do Adolescente
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BIOCHEMICAL AND TOXICOLOGICAL IMPACT OF INSECTICIDE SYNERGISTS ON THE HONEY BEE APIS MELLIFERA L.TODESCHINI, VALERIA 31 May 2017 (has links)
Il sinergizzante piperonil-butossido (PBO) usato in combinazione con insetticidi è in grado di contrastare i parassiti resistenti inibendo temporaneamente i sistemi di detossificazione. Nuovi sinergizzanti sono stati sintetizzati a partire dalla struttura molecolare del PBO, ma anche gli insetti utili come le api possono risentire di una maggiore efficacia degli insetticidi.
In questo studio abbiamo osservato l’attività enzimatica in vitro (esterasi, acetilcolinesterasi, glutatione S-transferasi e monossigenasi P450) di api operaie Italiane e Carniche in presenza del PBO e dei suoi nuovi derivati del benzodiossolo e 2,3-diidrobenzofurano mediante saggi spettrofotometrici, per determinare se i sistemi di detossificazione e altri sistemi enzimatici sono influenzati dai sinergizzanti.
I nuovi derivati del PBO possono inibire parzialmente le esterasi in alcune popolazioni di api più sensibili.
Altri sistemi enzimatici non sembrano essere inibiti dai sinergizzanti studiati.
Studi di tossicità acuta orale e di contatto sono stati condotti in laboratorio presso il Bee Research Institute (Dol, Repubblica Ceca) su api operaie Carniche per verificare il possibile incremento di tossicità degli insetticidi imidacloprid e alfa-cipermetrina in combinazione con PBO e i suoi derivati del benzodiossolo.
Gli studi hanno mostrato una differenza significativa tra la tossicità dei due principi attivi da soli e in combinazione con i sinergizzanti. / The synergist piperonyl-butoxide (PBO) has been proved to successfully control resistant pests when combined with insecticides by temporarily inhibiting the detoxification systems which lead to resistance. New synergists, starting from the molecular structure of PBO, have been developed but pollinators may also suffer from an increased efficacy of insecticides.
In this study we observed in vitro enzyme (esterases, acetylcholinesterases, glutathione S-transferases and P450 mixed function oxidases) activity of Italian and Carniolan honey bee workers in presence of the synergist PBO and its novel benzodioxole and 2,3-dihydrobenzofuran derivatives through spectrophotometric assays, to determine if detoxification systems and other enzymatic systems are affected by synergists.
This data show that novel PBO derivatives may partially inhibit esterases in some honey bee populations which are more sensitive.
Other enzymatic systems seem not to be targeted by the studied synergists.
Acute oral and contact toxicity studies were conducted in laboratory conditions at the Bee Research Institute (Dol, Czech Republic) on adult Carniolan workers to investigate the possible increase of imidacloprid and alpha-cypermethrin toxicity when combined with PBO and its benzodioxole derivatives.
Tests showed some significant difference between the toxicity of the two active principles alone and combined with the synergists.
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Asociace vybraných polymorfismů genů oxidativního stresu s diabetes mellitus 1. a 2. typu / Association of genetic polymorphism of oxidative stress with diabetes mellitus type 1 and 2Kloboučková, Lucie January 2015 (has links)
Diabetes mellitus is a chronic autoimmune disease in which the immune system attacks the insulin-secreting ß-cells in the pancreas. It leads to an absolute deficiency of insulin. Chronic hyperglycemia induces increased production of reactive oxygen species, which leads to a decrease of natural antioxidant level in blood, and it contributes to genesis of diabetes complications (e.g. vascular or pulmonic). Moreover, the oxidative stress results in onset of pancreas inflammations and the damage of its ß-cells. Aims: Our aim was to assess whether or not certain genotypes or their combinations occur with higher frequency among groups of patients of type 1 diabetes (T1D) and type 2 diabetes and in a control group of healthy individuals. Methods: The study included groups of 40 T1D patients, 40 T2D patients and 45 healthy individuals. The polymorphisms of genes involved in the oxidative stress response were analyzedby using RFLP, PCR with TaqMan probes and allele specific PCR. The target genes involved superoxide dismutase SOD1 and SOD3 genes; glutathione-S-transferase GSTM1, GSTT1, GSTP1 genes; glutathioneperoxidase gene GPX1 and catalase gene CAT. The levels of plasma malondialdehyde were measured by using liquid chromatography. Results: Statistically significant differences were found in the...
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Avaliação de marcadores genéticos associados a detoxificação de xenobióticos e ao estresse oxidativo na evolução de pacientes com leucemia linfóide aguda da infância no estado da Bahia-Brasil / Avaliação de marcadores genéticos associados a detoxificação de xenobióticos e ao estresse oxidativo na evolução de pacientes com leucemia linfóide aguda da infância no estado da Bahia-BrasilPaz, Silvana Sousa da January 2012 (has links)
Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2012-08-29T21:11:40Z
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Silvana Sousa Paz Avaliação de marcadores....pdf: 756990 bytes, checksum: 5aac886be232eac44d86b25a30837ac4 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-08-29T21:11:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1
Silvana Sousa Paz Avaliação de marcadores....pdf: 756990 bytes, checksum: 5aac886be232eac44d86b25a30837ac4 (MD5)
Previous issue date: 2012 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, Bahia, Brasil / As leucemias são malignidades hematopoiéticas, caracterizadas por subgrupos biologicamente distintos, sendo os tipos mais frequentes de cânceres em crianças e adolescentes. Polimorfismos em genes de enzimas que metabolizam xenobióticos podem estar relacionados com a inserções/deleções, polimorfismos de nucleotídeo simples (SNP’s) e variações no número de cópias e têm sido relacionados com a patogênese de algumas neoplasias hematológicas, como a leucemia linfóide aguda (LLA). O objetivo deste estudo foi o de determinar as frequências de polimorfismos em genes associados ao estresse oxidativo e metabolismo de xenobióticos (GSTT1, GSTM1, CYP2E1, NQO1 e MPO), em pacientes pediátricos com LLA, associando-as a aspectos clínicos e marcadores de evolução da doença. A casuística foi composta por 37 pacientes pediátricos seguidos na clínica ONCO e tratados pelo protocolo GBTLI-LLA 93. O perfil hematológico dos pacientes foi realizado ao diagnóstico e durante o tratamento e os polimorfismos gênicos foram investigados por reação da polimerase em cadeia - polimorfismo de tamanho de fragmento de restrição (PCR-RFLP) e por reação da polimerase em cadeia multiplex (PCR Multiplex). As análises estatísticas apresentaram significância para os valores de leucócitos totais nos D1 e D7 (p= 0,0016) e nos D1 e D14 (p= 0,0059); linfócitos nos D1 e D7 (p= 0,0088) e D1 e D14 (p= 0,0101); segmentados neutrófilos nos D1 e D7 (p= 0,0033) e D1 e D14 (p= 0,0252); blastos periféricos D1 e D7 (p< 0,0001) e D1 e D14 (p< 0,0001) e; para a contagem de blastos na medula óssea (MO) nos D1 e D15 (p<0,0001), D1 e D28 (p< 0,0001) e D15 e D28 (p= 0,0005). As frequências alélicas e genotípicas para os genes estudados estavam em equilíbrio de Hardy-Weinberg. A mutação do gene MPO foi associada a infiltração da MO (p= 0,0473) e presença de blastos no líquor (p= 0,0473). O polimorfismo do gene GSTT1 foi associado à contagem de leucócitos (p= 0,014) e plaquetas (p= 0,0034) no D1 e a contagem de leucócitos (p=0,037) e segmentados neutrófilos (p= 0,0008) no D7. A presença do polimorfismo no gene NQO1 foi associado à infiltração da MO (p= 0,0410) e a presença de blastos no líquor (p= 0,0410). Entretanto, o polimorfismo NQO1 apresentou associação com a presença de palidez (p=0,0096). Os dados encontrados corroboram em parte com dados encontrados na literatura, sendo necessária a realização de um estudo com numero maior de pacientes para confirmação dos achados relacionados aos genes investigados e a LLA. / Leukemia is characterized by biologically distinct subgroups and is the most frequent hematological malignity in childhood. Polymorphisms in genes of enzymes that metabolize xenobiotics may be related to insertions/ deletions, single nucleotide polymorphisms (SNP's) and gene copies variation and have been related to the pathogenesis of some hematologic malignancies, including acute lymphoblastic leukemia (ALL). The aim of this study was to investigate genes polymorphisms associated with the oxidative stress and xenobiotic metabolism (GSTT1, GSTM1, CYP2E1, NQO1 and MPO) in a group of childhood ALL patients, associating them with clinical evolution and prognostic markers. The casuistic was compound by 37 pediatric patients followed and treated at the clinic ONCO with the protocol GBTLI-LLA 93. The hematological profile of patients was performed at diagnosis and during treatment and gene polymorphisms were investigated by Polimerase Chain Reaction - Restriction Fragment Length Polymorfism (PCR-RFLP) and Polimerase Chain Reaction Multiplex (Multiplex PCR). Statistical analyses were significant for values of total leukocytes in D1 and D7 (p= 0.0016) and in D1 e D14 (p= 0.0059); lymphocytes in D1 and D7 (p= 0.0088), D1 and D14 (p= 0.0101); neutrophils in D1 and D7 (p= 0.0033), D1 and D14 (p= 0.0252). It was also find statistical significance at the number of peripheral blasts in D1 and D7 (p< 0.0001), D1 and D14 (p< 0.0001); the blast count in bone marrow (BM) in D1 and D15 (p<0.0001), D1 and D28 (p< 0.0001) and D15 and D28 (p= 0.0005). The allelic and genotypic frequencies of all gene polymorphism investigated were in Hardy-Weinberg equilibrium. The MPO gene mutation was associated with infiltration of the BM in D28 (p= 0.0473) and the presence of blasts in the CSF (p= 0.0473). The GSTT1 gene polymorphism was associated with leukocyte (p= 0.014) and platelet counts (p= 0.0034) in D1 and with leukocytes (p=0,037) and neutrophils counts (p= 0.0008) in D7. The NQO1 gene polymorphism presence was associated with BM infiltration at D28 (p= 0.0410) and the presence of blasts in the CSF (p= 0.0410). However, the NQO1 polymorphism was associated with the presence of pallor (p=0.0096). Result described here corroborated in part with previous described data, being necessary to carry out additional study with a larger number of patients to confirm the finding related to genes polymorphism investigated and the clinical evolution of ALL patients.
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Lippia Aff. Gracilis, Lippia Gracilis e L-Glutamina e suas aÃÃes antibacteriana, antioxidante e imunomoduladora em modelos de ratos diabÃticos / Lippia Aff.Gracilis, Lippia Gracilis and L-Glutamine and hers actions antibacterial, antioxidant and imunomodulating in model diabetic ratsRenato Motta Neto 14 December 2007 (has links)
CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / O efeito antibacteriano de Ãleos essenciais extraÃdos de folhas das espÃcies de Lippia aff. gracilis e Lippia gracilis frente a cepa de Staphylococcus aureus isolada de Ãlcera de paciente com pà diabÃtico foi avaliado mediante experimentaÃÃo in vitro e in vivo, utilizando-se o modelo experimental de ratos diabÃticos aloxano induzidos. Cento e doze ratos machos Wistar diabÃticos com peso mÃdio de 180g foram distribuÃdos ao acaso em dois experimentos. Cada experimento foi dividido em dois procedimentos que avaliaram a atividade antibacteriana de soluÃÃes dos Ãleos essenciais a 5%, em dois diferentes procedimentos: um no ato da administraÃÃo do inÃculo bacteriano e outro apÃs vinte e quatro horas de administraÃÃo. A administraÃÃo tanto do inÃculo 108ufc/ml quanto da suspensÃo dos Ãleos foi por via subcutÃnea no membro pÃlvico dos ratos diabÃticos. CinqÃenta e seis ratos Wistar foram utilizados para cada experimento, no qual os mesmos foram distribuÃdos ao acaso em 8 (oito) diferentes grupos: 4 grupos por experimento, apresentando 7 ratos por grupo (G1-Branco; G2-Controle negativo; G3-Controle positivo; G4-Teste). Foi verificado que no procedimento 1(S.aureus sem Lippia aff gracilis 108  698 versus S.aureus com Lippia aff gracilis 293,1  79,07; S.aureus sem Lippia gracilis 108  873 versus S.aureus com Lippia gracilis 302  57,2) e no procedimento 2 (S.aureus sem Lippia aff gracilis 108  313 versus S.aureus com Lippia aff gracilis 13,28  4,03; S.aureus sem Lippia gracilis 108  818 versus S.aureus com Lippia gracilis 13,14  4,27); houve reduÃÃo na contagem bacteriana tanto para Lippia aff. gracilis quanto para Lippia gracilis. Quando comparados os grupos G4 com G3, observou-se que esta suspensÃo a 5% nÃo apresentou efeito prÃ-inflamatÃrio. Para a validaÃÃo destes resultados, foram utilizados os testes Mann-Whitney e Bartletts &Newman-Keuls (MÃdia  - E.P.M) com nÃvel de significÃncia de (p<0,05). Ainda neste estudo foi avaliado a aÃÃo antioxidante e imunomoduladora da L-glutamina em modelos de ratos Wistar diabÃticos quando administrada por gavagem a uma concentraÃÃo de 0,7g/kg em um perÃodo de 30 dias. Quarenta ratos Wistar machos foram distribuÃdos ao acaso em 5 grupos (GI-nÃo diabÃtico; GII-diabÃtico; GIII-diabÃtico com salina; GIV-diabÃtico com L-glutamina; GV-diabÃtico com ProteÃna do Soro do Leite). Passado este perÃodo, foram determinadas as concentraÃÃes de substÃncias reativas ao Ãcido tiobarbitÃrico (TBARS) e glutationa reduzida (GSH) no soro e nos tecidos hepÃticos, pancreÃticos, mÃsculo esquelÃtico, rins e tecido adiposo. Para as comparaÃÃes entre o grupo tratado com L-glutamina com os demais, utilizou-se a anÃlise de variÃncia (ANOVA-teste Tukey). As comparaÃÃes entre grupos foram feitas utilizando-se o teste t de Student. Valores de p<0,05 foram considerados significantes. A suplementaÃÃo com L-glutamina induziu ao aumento nas concentraÃÃes de GSH (MÃdia  E.P.M) e reduÃÃo significante nas concentraÃÃes de TBARS (MÃdia  E.P.M), quando comparadas com o grupo controle, nos espÃcimes analisados. A aÃÃo imunomoduladora foi avaliada atravÃs da quantificaÃÃo de linfÃcitos CD4+ e CD8+ em sangue total. Vinte e quatro ratos Wistar machos diabÃticos foram distribuÃdos igualmente em 3 grupos (G1-diabÃtico com salina; G2-diabÃtico com L-glutamina; G3- diabÃtico com ProteÃna do Soro do Leite). Observou-se um aumento significante nas populaÃÃes de linfÃcitos CD4+ (MÃdia  E.P.M) com reduÃÃo nas populaÃÃes de linfÃcitos CD8+ (MÃdia  -E.P.M) do grupo G2 quando comparado com o grupo controle, ressaltando a importÃncia da L-glutamina como imunonutriente / The antibacterial effect of essential oils extracted from leaves of the species of Lippia aff. gracilis and Lippia gracilis against strains of Staphylococcus aureus isolated from patients with diabetic foot ulcers were evaluated in vitro and in vivo experimetation utilizing an experimental model of alloxan-induced diabetic rats. One hundred and twelve male diabetic Wistar rats with mean weight of 180g were distributed by chance into two experiments. Each experiment was divided in two procedures with evaluation of antibacterial activity of essential oils at 5% solutions; one procedure in the act of administration of bacterial inoculums and the other one 24 hours later. 108 CFU (Colony Forming Unit) /mL, as well as oils suspension inoculated in the subcutaneous tissue of the pelvic member of diabetic rats. Lower than 5% concentration of administered solution presented antibacterial effect in the in vitro experiment. Fifty-six Wistar rats were utilized in each experiment, randomly distributed in 08 different groups: 04 groups per experiment, each group with 07 rats (G1-White; G2-Negative Control; G3- Positive control; G4-Test). There was decrease in CFU/mL in procedure 1 (S.aureus without Lippia aff gracilis 108  698 versus S.aureus with Lippia aff gracilis 293,1  9,07; S.aureus without Lippia gracilis 108  873 versus S.aureus with Lippia gracilis 302Â57,2), which evaluated antibacterial effect of oils concomitantly with the administration of inocula as well as in procedure 2 (S.aureus without Lippia aff gracilis 108  313 versus S.aureus with Lippia aff gracilis 13,28  4,03; S.aureus without Lippia gracilis 108  818 versus S.aureus with Lippia gracilis 13,14  4,27) , which evaluated antibacterial effect of oils 24 hours after the administration of the inoculum . When comparing group G4 with G3, it was observed that 5% solution presented no pro-inflammatory effect, for analysis of these results, the tests of Mann-Whitney and Bartletts & Newman-Keuls (X  S.E.M) with level of significance (p<0,05) were used. Part of this study evaluated the antioxidant and immunomodulating effect of L-glutamine in models of Wistar diabetic rats when administered by gavages at a 0,7g/kg during 30 days. Fourty Wistar male rats were randomly distributed in 5 groups (GI- non diabetic; GII-diabetic; GIII-diabetic with saline; GIV- diabetic with L-glutamine; GV- diabetic with Whey Protein). After 30 days concentrations of TBARS and GSH in serum and in hepatic, pancreatic, skeletal muscles, kidneys and fat tissues were determined. For comparisons between the group treated with L-glutamine with the others, the ANOVA â Tukey test was utilized and the comparisons between groups were done using Studentâs t test. Values of p<0.05 were considered significant. The supplementation with L-glutamine induced an increase in the concentrations of GSH (MeanS.E.M) and significant reduction in the TBARS (mean  S.E.M) concentrations, when compared to the control group, in the analyzed specimens. The immunomodulating effect was evaluated by quantification of CD4+ and CD8+ lymphocytes in total blood. Twenty-four Wistar male diabetic rats were distributed equally in 3 groups (G1-diabetic with saline; G2-diabetic with L-glutamine; G3- diabetic with Whey Protein). It was seen a significant increase of CD4+ (mean  S.E.M) lymphocytes with reduction of CD8+ (mean  S.E.M) lymphocytes in group G2 when compared to the control group, showing the importance of L-glutamine as an immunonutrient
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