Submitted by Barroso Patrícia (barroso.p2010@gmail.com) on 2013-03-21T21:06:08Z No. of bitstreams: 1 Tese final isabela.pdf: 19026738 bytes, checksum: 2fd44c6a0db527266480ebdc1ac7ea15 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-03-21T21:06:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese final isabela.pdf: 19026738 bytes, checksum: 2fd44c6a0db527266480ebdc1ac7ea15 (MD5) Previous issue date: 2011 / A medicina regenerativa busca o reparo de tecidos lesionados, por meio do controle e ampliação da capacidade natural de regeneração dos tecidos. A bioengenharia tecidual óssea insere-se neste contexto e visa à utilização de biomateriais que atuem como arcabouços capazes de regenerar defeitos ósseos de dimensões críticas com a finalidade de restabelecer a função e/ou estética do indivíduo acometido. Com o intuito de se alcançar um incremento do reparo ósseo, produzido localmente pelos biomateriais, quando implantados em defeitos críticos, pode-se instituir uma estratégia de atuação no metabolismo ósseo com o medicamento ranelato de estrôncio, com a associação do efeito local e sistêmico. Portanto, o objetivo deste trabalho foi avaliar, por meio de análise histomorfométrica, o potencial osteogênico do ranelato de estrôncio associado a microesferas de hidroxiapatita, juntamente com selante de fibrina, para regeneração em defeito ósseo crítico. Foram utilizados 64 rattus norvegicus da linhagem wistar, albinos, machos, adultos, que receberam via oral diariamente 900 mg/ Kg de ranelato de estrôncio, nos quais se realizou defeito ósseo crítico transfixado de 8,5 mm de diâmetro na região da calvária. Estes animais foram distribuídos aleatoriamente em quatro grupos - grupo controle com administração do ranelato de estrôncio (GCRS) - defeito ósseo sem implantação de biomaterial, apenas com a presença do coágulo sanguíneo; grupo hidroxiapatita com administração de ranelato de estrôncio (GHARS) - defeito ósseo com implantação de microesferas de HA; grupo fibrina com administração de ranelato de estrôncio (GFRS) - defeito ósseo com implantação de fibrina; e grupo hidroxiapatita associado à fibrina (GHAFRS) - defeito ósseo com implantação de microesferas de HA e fibrina; os grupos citados foram comparados com grupos controle-negativo (GC, GHA, GF, GHAF), cujo modelo animal foi similar, porém os animais não receberam o medicamento ranelato de estrôncio. Os animais foram sacrificados aos 15, 45 e 120 dias de pós-operatório e analisados por meio de microscopia óptica e, ainda, os grupos GC e GCRS foram avaliados, no ponto biológico de 120 dias, por microscopia eletrônica de varredura, microscopia eletrônica de transmissão e por espectrometria de energia dispersiva de raios-X. A administração do ranelato de estrôncio promoveu a regeneração parcial do defeito ósseo, sem o restabelecimento do volume ósseo original, com maior percentual de neoformação óssea quando utilizado sem associação com biomateriais; o elemento estrôncio foi incorporado à estrutura do tecido ósseo quando houve a administração do ranelato de estrôncio; as microesferas de HA foram biocompatíveis, atuaram, fundamentalmente, como biomaterial para preenchimento do defeito ósseo, e o seu potencial osteogênico restringiu-se à osteocondutividade; o selante de fibrina mostrou-se eficaz como agente aglutinante e acelerou a maturação óssea quando associado exclusivamente com o ranelato de estrôncio. / Universidade Federal da Bahia, Instituto de Ciências da Saúde

Submitted by Tatiana Silva (tsilva@icict.fiocruz.br) on 2013-02-15T17:31:59Z No. of bitstreams: 1 rosane_m_b_teles_ioc_bcm_0062_2006.pdf: 5160654 bytes, checksum: b367a20dca7499410e166c2d8679bf26 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-02-15T17:31:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 rosane_m_b_teles_ioc_bcm_0062_2006.pdf: 5160654 bytes, checksum: b367a20dca7499410e166c2d8679bf26 (MD5) Previous issue date: 2006 / Fundação Oswaldo Cruz.Instituto Oswaldo Cruz. Rio de janeiro, RJ, Brasil / Metaloproteinases de matriz (MMP) são endopeptidases dependentes de zinco e cálcio que coletivamente são capazes de degradar os componentes da matriz extracelular. MMP-2 e MMP-9 pertencem ao grupo das gelatinases e são capazes de degradar a membrana basal, estando envolvidas na transmigração de células dos vasos sanguíneas para o interstício em processos fisiológicos e patológicos. Logo, estas gelatinases participam da quebra da barreira nervo-sangue e na migração de células inflamatórias para os tecidos, estando envolvidas com a severidade de doenças como, artrite reumatóide, esclerose múltipla e tuberculose. A hanseníase é caracterizada por alterações na pele e nervos periféricos em todas as formas clínicas. Estas alterações também são observadas nos estados agudos de resposta imuno-inflamatórias contra o M. leprae denominados episódios reacionais. Nestes episódios podemos observar uma intensa infiltração de leucócitos na derme o que pode causar lesão em nervos periféricos. O objetivo deste estudo foi analisar a participação de MMP-2 e MMP-9 na inflamação e lesão tecidual na pele e no nervo periférico na hanseníase. Para verificar a expressão de mediadores inflamatórios em amostras de tecido e células, foi realizada a RT-PCR. A atividade de MMPs em sobrenadantes de cultura e em amostras de derme foram analisadas por zimografia. Imunohistoquímica e imunocitoquímica foram realizadas para detectar MMPs no tecido e em células, respectivamente. Além disso, a secreção de MMP-9 e TIMP-1 em sobrenadantes de PBMC foi detectada por ELISA. M. leprae (ML) induziu a expressão de RNAm de MMP-9 em PBMC depois de 6 horas de estímulo, TIMP-1 não foi alterado. TNF induziu altos níveis de MMP-9 em PBMC amplificando a indução pelo ML. A comparação dos níveis de RNAm entre a derme de pacientes multi (MB) e paucibacilares (PB) foi realizada. Um aumento de RNAm de IFN, TNF, MMP-2, MMP-9 em PB foi observada. Os níveis de RNAm de IL-10 e TIMP-1 não foram modificados entre pacientes PB e MB. A comparação da derme antes e durante a reação mostrou um aumento significativo de RNAm de TNF, MMP-2 e MMP-9, os níveis de TIMP-1 não foram alterados. A razão MMP-9/TIMP-1 aumentou na derme durante a reação em comparação com antes da reação. Estudos funcionais da ativação de MMP mostraram que o ML induziu a produção de MMP-9 de acordo com os resultados do ELISA. Altos níveis de MMP-2 e MMP-9 ativas foram detectadas na derme de pacientes reacionais. As biópsias de nervo de pacientes com hanseníase mostraram altos níveis de RNAm de TNF, TACE, MMP-2 e MMP-9. Assim como, foi verificado a presença de TNF, TACE, MMP-2 e MMP-9 no nervo de pacientes com hanseníase por imunohistoquímica. Os níveis de RNAm de MMP-2 e MMP-9 aumentaram em CS estimuladas com ML, os níveis de TIMP-1 não foram alterados pelo ML. Da mesma forma como observado em PBMC, o TNF amplificou os efeitos do ML na expressão de RNAm de MMP-9. Finalmente, MMP-2 e MMP-9 devem estar envolvidas no processo inflamatório na hanseníase, e devem ser críticas para o mecanismo da lesão tecidual em nervos periféricos. / Matrix metalloproteinases (MMP) are zinc and calcium dependent endoproteases that, together, are able to degrade extracellular matrix componentes. MMP-2 and MMP-9 belong to the gelatinase group and are able to degrade the basal membrane, being involved in cell transmigration from blood vessels to intersticy in both physiological and pathological processes. These gelatinases paticipate in the breakdown of the blood-nerve barrier and in the migration of inflammatory cells into tissues, having been associated with disease severity in rheumatoid artritis, multiple sclerosis and tuberculosis. Leprosy is characterized by alterations in skin and peripheral nerves in all clinical forms. These alterations are also observed in the acute state of the immune-inflammatory response against M. leprae called reactional episodes. In these episodes we can observe an intense leukocyte infiltration in the dermis that can cause peripheral nerve lesion. The aim of this study was to analyze the participation of MMP-2 and MMP-9 in the inflammation and tissue lesion in the skin and peripheral nerve. To verify the mRNA expression of inflammatory mediators in cells and tissue samples, RT-PCR was performed. The activity of MMPs in the culture supernatants and in dermal samples was analyzed by zymography. Immunohistochemistry and immunocytochemistry were performed to detect MMPs in cells and tissues. In addition, MMP-9 and TIMP-1 secretion in PBMC supernatants were detected by ELISA. M. leprae (ML) induced MMP-9 mRNA expression in PBMC after 6 hours of stimulation, TIMP-1 was not altered. TNF induces high levels of MMP-9 in PBMC amplifying the ML induction. The comparison of mRNA levels between the dermis of multi- (MB) and paucibacillary (PB) patients was performed. An increase in IFN, TNF, MMP-2 and MMP-9 mRNA levels in PB was observed. IL-10 and TIMP-1 mRNA levels were not modified between PB and MB patients The comparison of dermis before and during reaction showed a significant increase in TNF, MMP-2 and MMP-9 mRNA levels, TIMP-1 was not altered. The ratio MMP-9/TIMP-1 showed an increase in the dermis in reactional states, compared to the dermis before reaction. Functional studies of MMP activation, performed by zymography, suggested that ML induces the production of MMP-9, in accordance with the ELISA results. Higher levels of active MMP-2 and MMP-9 were detected in dermis of reactional patients. Nerve biopsies of leprosy patients showed high levels of TNF, TACE, MMP-2 and MMP-9 mRNA. MMP-2 and MMP-9 mRNA levels were increased in the ML-stimulated SC and ML did not induced TIMP-1. Similar to what was observed with PBMC, TNF amplified the effect of ML in MMP-9 mRNA expression. Finally, MMP-2 and MMP-9 might bearer probably involved in the inflammatory processes in leprosy, and may play a critical role in the mechanism of tissue lesion in peripheral nerves.

Made available in DSpace on 2014-06-12T17:35:09Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo4406_1.pdf: 834156 bytes, checksum: 5bf579a51f2a65ab61e5d9b5de44d1a4 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2002 / As Úlceras de Pressão (UP), decorrentes da baixa perfusão tecidual induzida pela compressão do corpo sobre o leito vascular, podem gerar necrose isquêmica da pele. A terapia com lasers de baixa intensidade deflagra uma ação antiinflamatória, aumento da fagocitose, síntese de colágeno e epitelização. Estudos relacionados às alterações resultantes da ação do Laser nos processos de regeneração ainda estão em fase incipiente, especialmente em seres humanos. Alguns trabalhos demonstram que a fotoestimulação in vitro promove a síntese de ácidos nucléicos, divisão celular em cultura de fibroblastos humanos e aumenta o pool de células tipo I e II procolágeno e RNAm em feridas de pele em porcos. O objetivo foi avaliar as possíveis alterações provocadas pela ação do Laser de baixa potência AsGa (Arsenito- Gálio), quando irradiado em UP analisando-se as alterações clínicas e modificações histológicas decorrentes desta forma de terapia. A amostra foi constituída por 12 casos, sendo seis do grupo controle, que apresentavam UP não infectadas, submetidos à limpeza cirúrgica da ferida e internados nos hospitais públicos: Carlos Macieira HCM, Socorrão I e II e Hospital Aldenora Belo, da cidade de São Luís Maranhão. Para tanto, utilizou-se de uma metodologia quantitativa , na qual os pacientes foram separados em dois grupos, sendo o primeiro grupo A submetido à irradiação Laser AsGa, durante 5 dias consecutivos e o segundo grupo B irradiado durante 15 dias alternados, ambos com comprimento de onda 904 nm, dose 3 J/cm2, durante 1 minuto e aplicação pontual. Na avaliação clínica após a irradiação laser pudemos observar a presença de exsudação, tecido de granulação e pontos de sangramento, após o terceiro dia de irradiação, evidenciando início de vascularização colateral em ambos os grupos. A análise morfoquantitativa computadorizada demonstrou que nos casos submetidos à irradiação laser durante 15 dias a área ocupada pelos vasos foi de 4115,922 μm2, e nos irradiados durante 5 dias de 4348,253 μm2, ambos em uma área de 0,25 cm2 de derme demonstrando um aumento na vascularização, sugerindo assim que tal tratamento estimula a angiogênese bem como reparação tecidual (cicatrização). Os resultados obtidos sugerem que esta terapêutica foi eficaz como auxiliar nos processos de regeneração tecidual nos pacientes tratados na pesquisa

Orientador: Osmir Batista de Oliveira Junior / Banca: Gisele Faria / Banca: Wilton Rogério Lustri / Resumo: A engenharia de tecidos tem como perspectiva desenvolver opções terapêuticas para quadros clínicos com prognóstico limitado, objetivando substituir ou regenerar os tecidos lesados por meio do uso de biomateriais. A metodologia baseia-se no cultivo de células sobre uma matriz ou scaffold que deve ser otimizado para minimizar o risco de infecções e permitir a liberação das moléculas bioativas no local pretendido. As propriedades dos diversos biomateriais são essenciais para o sucesso da metodologia e estes podem ser manipulados de forma a mimetizar a arquitetura da matriz nativa. Assim, nos propomos a desenvolver um novo biocompósito baseado em celulose bacteriana (CB)/ fibroína (FB) visando aplicações em regeneração tecidual na odontologia, em 3 concentrações diferentes (CB/FB25%, CB/FB50% e CB/FB75%). Estes foram caracterizados por análise termogravimétrica, Espectroscopia Vibracional na Região do Infravermelho (FT-IR), Difração de Raios-X, e Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV), demonstrando boa estabilidade físico-química, inclusive resitência à degradação térmica em altas temperaturas. A investigação da citocompatibilidade foi conduzida por meio de testes in vitro apenas com as amostras de CB/FB50%. Os testes aplicados foram MTT, azul de tripano, adesão e proliferação celular. As análises estatísticas foram realizadas por meio do software Graph Prism 5.0. Os resultados demonstraram que o material desenvolvido é biocompatível e não citotóxico. As imagens de MEV revelaram um número muito maior de células aderidas à superfície dos scaffolds de CB/FB quando comparado ao de CB pura. Com base nos dados obtidos é possível sugerir que o nanocompósito baseados em CB/FB50% configura uma excelente alternativa como scaffold para a reparação de tecidos. / Abstract: Tissue engineering has the purpose of developping therapeutic options especially designed to be used on limited clinical conditions, aiming to replace or regenerate damaged tissues applying biomaterials for that. The method is based on the cultivation of cells on a matrix or scaffold that should be optimized to offer minimum risk of infections and allow the release of bioactive molecules at the desired location. The success of the methodology depends on Biomaterials' properties that can be manipulated to mimic the three-dimensional architecture of native tissues extracellular matrix. Thus, we purpose to prepare a new nanocomposite based on bacterial cellulose (BC) / fibroin (SF) aiming at applications in the process of tissue regeneration in dentistry. Three different material's compositions were prepared (BC/SF 25 % BC/SF 50 % and BC/SF 75 %) and all of them were characterized by thermogravimetric analysis, Vibrational Spectroscopy in the Infrared Region (FT-IR), X-ray diffraction, and Scanning Electron Microscopy (SEM). The material showed good physical and chemical stability including resistance to thermal degradation at high temperatures. The investigation of the cytocompatibility was realized just using the samples BC/SF 50 % and the in vitro tests conducted were MTT, Trypan Blue, cell adhesion and proliferation assays. The statistical analysis was done applying the software Graph Pad Prism 5.0. The results showed that the developed nanocomposite is biocompatible and non-cytotoxic. SEM images revealed a greater number of cells attached to the scaffold CB / FB surface when compared to pure CB scaffolds. Based on the data obtained, it is possible to suggest that the nanocomposite based on CB/FB50% configures an excellent alternative as a scaffold for tissue repair. / Mestre

Submitted by Hiolanda Rêgo (hiolandarego@gmail.com) on 2017-09-19T16:10:07Z No. of bitstreams: 1 Dissertação_ICS_ Laila da Silva Santos.pdf: 2234004 bytes, checksum: f03ac10a5c8de1a9ce10b68496a45d2e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-09-19T16:10:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação_ICS_ Laila da Silva Santos.pdf: 2234004 bytes, checksum: f03ac10a5c8de1a9ce10b68496a45d2e (MD5) / FAPESB / O Laser é fotobiomodulador celular consagrado que vem despertando o interesse da sua utilização na proliferação e diferenciação de células-tronco. Verificou-se a influência da fototerapia Laser (λ660nm, 40mW, 6J/cm²,  0,04cm2, CW, Twin Flex Evolution, MMoptics®, São Carlos, SP) na imunomarcação com o marcador de células-tronco CD49 no tecido adiposo de ratos submetidos a dieta hiperlípidica. Quarenta e oito ratos Wistar albinus, desmamados foram divididos em dois grupos experimentais: Dieta Padrão (DP) e Dieta Hiperlipídica (DH), alimentados com suas respectivas rações por 20 semanas. Em seguida, os ratos foram submetidos à anestesia geral para confecção de feridas cutâneas dorsais, excisionais, padronizadas em 1cm². Os grupos foram subdivididos em DPC e DHC sem tratamento adicional e DPL e DHL irradiados pelo protocolo supracitado, imediatamente após o ato cirúrgico e a cada 48 horas durante 7 ou 14 dias. Os ratos foram mortos por aprofundamento anestésico, os espécimes processados pela técnica de imunohistoquímica e avaliados por microscopia de luz. O grupo DPC apresentou anticorpos marcados com intensidade de moderada a intensa, enquanto no grupo DHC prevaleceu a coloração fraca para o tempo de 14 dias. O protocolo de irradiação empregado não teve influência sobre o marcador CD49 quando comparados os grupos controle e irradiados sob o mesmo período de tempo; no entanto, quando comparados os grupos DHL em 7 e 14 dias, o marcador apresentou aumento na intensidade da imunomarcação em relação ao tempo, suscitando a hipótese da influência da luz laser sobre células-tronco adipoderivadas recrutadas para o processo de reparo tecidual.

RIBEIRO, J. C. V. Influência da massa molar na biocompatibilidade de membranas de quitosana em tecido subcutâneo de ratos. 2017. 103 f. Tese (Doutorado em Odontologia) - Faculdade de Farmácia, Odontologia e Enfermagem, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2017. / Submitted by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2017-02-24T13:43:58Z No. of bitstreams: 1 2017_tese_jcvribeiro.pdf: 5438414 bytes, checksum: 214a60843657630d29ec1cedae58c032 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2017-02-24T13:44:06Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_tese_jcvribeiro.pdf: 5438414 bytes, checksum: 214a60843657630d29ec1cedae58c032 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-24T13:44:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_tese_jcvribeiro.pdf: 5438414 bytes, checksum: 214a60843657630d29ec1cedae58c032 (MD5) Previous issue date: 2017-01-31 / Tissue engineering is based on the application of concepts from materials science and regenerative medicine with the aim of developing biomaterials capable of reconstructing or regenerating damaged tissue. In this context, chitosan (CS) has aroused a great deal of interest as one such biomaterial on account of its alleged properties of biocompatibility, bioactivity and the ease with which its chemical structure may be modified. CS is a naturally occurring polysaccharide obtained from chitin, an abundant and renewable source. It demonstrates great variability in terms of its main chemical characteristics, such as molar mass (MM) and the degree of deacetylation (DD), which may have an impact on its physical and biological properties. Numerous studies have investigated its use as a scaffold material in the regeneration of various types of tissue, including bone and periodontal tissues. However, few studies have related the possible influence of the MM of CS on its biocompatibility in vivo; this aspect still has not been clarified. The aim of the present study is to investigate the biocompatibility and bioactivity of CS membranes of different MM when implanted in the subcutaneous tissue of rats. CS membranes with a high molecular weight (HMW-CS) and low molecular weight (LMW-CS) were chemically characterized to determine their MM via gel permeation chromatography (GPC) and DD via potentiometric titration. Next, they were inserted into the subcutaneous conjunctive tissue in the backs of 24 animals and compared to a positive λ-carrageenan(Cg) control and a negative control. Biocompatibility was evaluated through histological analyses of the inflammatory leukocyte infiltrate, formation of granulation tissue and of fibrous conjunctive tissue, after 1, 7, 14 and 28 days. Bioactivity was investigated through immunohistochemical analyses carried out to identify the expression of the nuclear transcription factor NF-κΒ and the fibroblast growth factor FGF-2, which are proteins involved in the process of inflammation and tissue repair. The results showed that the chitosan membranes induced leukocyte infiltrate similar to the control after 7, 14 and 28 days, but lower than in the positive control. The LMW-CS induced a greater formation of granulation tissue and fibrous conjunctive tissue than HMW-CS, after 7 and 14 days, and than Cg after 7, 14 and 28 days, and showed inhibitory action on NF-κΒ at day 7. LMW-CS also showed a greater stimulatory effect than HMW-CS at day 1. The results suggest that LMW-CS induced a lower inflammatory response and promoted a faster regeneration of conjunctive tissue than HMW-CS, though both were found to be biocompatible. It may be concluded that MM influenced CS biocompatibility in vivo and this characteristic should be taken into consideration when developing and investigating CS-based scaffolds for tissue regeneration. The evaluated CS membranes presents a potential application for guided tissue regeneration. / A engenharia tecidual fundamenta-se na aplicação de conceitos da ciência dos materiais e da medicina regenerativa no intuito de desenvolver biomateriais capazes de reconstruir ou regenerar tecidos danificados. Neste sentido, a quitosana (QS) tem despertado grande interesse para regeneração tecidual, por suas alegadas propriedades de biocompatibilidade, bioatividade e facilidade de modificação de sua estrutura química. A QS é um polissacarídeo de origem natural, obtido a partir da quitina, uma fonte abundante e renovável. Apresenta grande variabilidade em suas principais características químicas como a massa molar (MM) e o grau de desacetilação (GD), que podem influenciar suas propriedades físicas e biológicas. Inúmeros estudos têm investigado seu uso como material de arcabouço (scaffold) na regeneração de diversos tipos de tecido, inclusive tecido ósseo e periodontal. No entanto, poucos estudos se referem à possível influência da MM da QS sobre sua biocompatibilidade in vivo, sendo este aspecto ainda não elucidado. O presente trabalho tem como objetivo investigar a biocompatibilidade e a bioatividade de membranas de QS de diferentes MMs quando implantadas no tecido subcutâneo de ratos. Membranas de QS de alto peso molecular (QS-APM) e baixo peso molecular (QS-BPM) foram caracterizadas quimicamente para determinar sua MM por cromatografia de permeação em gel (GPC) e seu GD por titulação potenciométrica. Em seguida, foram inseridas no tecido conjuntivo subcutâneo do dorso de 24 animais e comparadas com um controle positivo de carragenina-lambda (CG) e um controle negativo. A biocompatibilidade foi avaliada por análises histológicas do infiltrado inflamatório leucocitário, formação de tecido de granulação e formação de tecido conjuntivo fibroso após 1, 7, 14 e 28 dias. A bioatividade foi avaliada por análises imunohistoquímicas para identificar a expressão do fator de transcrição nuclear NF-κΒ e do fator de crescimento de fibroblastos FGF-2, que são proteínas envolvidas no processo de inflamação e reparo tecidual. Os resultados mostraram que as membranas de quitosana induziram infiltrado leucocitário semelhante ao controle após 7, 14 e 28 dias e inferior ao controle positivo. A QS-BPM induziu maior formação de tecido de granulação e tecido conjuntivo fibroso que a QS-APM aos 7 e 14 dias e que a CG aos 7, 14 e 28 dias e mostrou atividade inibitória sobre o NF-κΒ aos 7 dias. A QS-BPM ainda demonstrou maior atividade estimulatória sobre o FGF-2 que a QS-APM no primeiro dia. Os resultados sugerem que a QS-BPM induziu menor resposta inflamatória e favoreceu uma regeneração mais rápida do tecido conjuntivo que a QS-APM, embora ambas tenham se mostrado biocompatíveis. Pode-se concluir que a MM influenciou a biocompatibilidade e bioatividade da QS in vivo e essa característica deve ser considerada ao se desenvolver e investigar scaffolds à base de QS para regeneração tecidual. As membranas de quitosana avaliadas apresentam potencial de aplicação em regeneração tecidual guiada.

Orientadores: Maria Lourdes Barjas-Castro, Joyce Annicchino Bizzacchi / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-05T09:45:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Correa_MariaElviraPizzigatti_D.pdf: 882619 bytes, checksum: 8e4b1e53b229c75c79f183dde30c420e (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: Os adesivos teciduais são produtos originários de proteínas do plasma humano, utilizados como agentes hemostáticos em diferentes procedimentos cirúrgicos. Objetivos: avaliar a influência da cola de fibrina como agente hemostático local após extrações dentárias em pacientes hemofílicos. Analisar a influência dos adesivos nos processos de reparação tecidual em pele e em alvéolo dentário em modelo animal. Capítulo I Pacientes e Métodos: Foram realizadas extrações dentárias em 31 pacientes hemofílicos, sem prévia terapia de reposição de fatores de coagulação. Os pacientes receberam antifibrinolítico oral (Ipsilon® - 200mg/kg, VO, 8/8 horas, por 7 dias). Foi realizada a avaliação da saúde bucal através dos índices: Gengival (IG); Índice de Placa (IP) e através do Índice CPOD (dentes cariados, perdidos e obturados). Após as extrações os alvéolos foram preenchidos com cola de fibrina autóloga. Os pacientes foram avaliados 24 horas após o procedimento. Resultados: em seis procedimentos (19,4%) foram observados sangramentos que foram controlados com reaplicação da cola de fibrina e dose única de fator de coagulação (um hemofílico grave, 3 hemofílicos moderados e em 2 hemofílicos leves). As médias dos índices IG, IP e CPOD foram, no grupo que sangrou, 1,7; 1,8; e 18 e, no que não apresentou sangramento, 1,8; 1,8; e 19, respectivamente. Conclusão: A cola de fibrina foi efetiva como agente hemostático local após extrações dentárias em pacientes hemofílicos, reduzindo significantemente a terapia de reposição de fatores de coagulação. As condições de saúde bucal, refletidas pelos resultados obtidos através da avaliação dos índices IG, IP e CPOD, demonstraram não haver influência desses fatores na eficácia da cola de fibrina autóloga como agente hemostático local. Capítulo II - Material e Métodos: Vinte e cinco ratos Wistar foram submetidos a duas incisões em dorso de pele após anestesia intramuscular. Na incisão do lado direito, foram inseridas esponjas embebidas em Selante de Fibrina associado ao fator XIII e aprotinina (Beriplast P® - Aventis Beringher) e, na incisão do lado esquerdo, foram inseridas esponjas sem adesivos, como controle. Os animais foram divididos em cinco grupos e sacrificados nos dias 1, 7, 14, 21, e 28 após a cirurgia. O tecido do dorso do animal foi dissecado e preparado blocos para análise microscópica (HE). O estudo histomorfométrico foi realizado em microscópio KS400 (40x - Zeiss, Jena). A composição celular do tecido de granulação foi analisada randomicamente, em 20 campos de cada amostra. Os dados foram estatisticamente analisados usando o Wilcoxon signed rank test. Os resultados mostraram um elevado número de células inflamatórias na periferia do grupo com Selante de Fibrina comparado com o controle. Esses dados sugerem que o Selante de Fibrina induziu uma intensa e prolongada resposta inflamatória no processo cicatricial e que o Selante de Fibrina persistiu até 28 dias após a cirurgia.Capítulo III: Material e Métodos: Setenta e cinco ratos Wistar foram submetidos a extração do incisivo superior após anestesia intramuscular. Os ratos foram divididos em 3 diferentes grupos e os adesivos foram aplicados nos alvéolos. O primeiro grupo (25 ratos) recebeu cola de fibrina, o segundo grupo (25) Selante de Fibrina (Beriplast P® - Aventis Beringher) e o terceiro (25) foi considerado como grupo controle. Os animais foram sacrificados por inalação de éter nos dias 1, 7, 14, e 28 após a cirurgia. Os crânios foram dissecados, submetidos a descalcificação e preparados para análise microscópica (HE). O estudo histomorfométrico foi realizado pelo sistema KS400 (Zeiss,Jena). Neoformação óssea foi cuidadosamente delimitada em quatro regiões alveolares. Os dados foram analisados estatisticamente usando regressão múltipla, ANOVA e Turkey test. Os resultados mostraram que a neoformação óssea (µm2) no grupo controle e com Selante de Fibrina foram estatisticamente similar, entretanto o alvéolo que recebeu a cola de fibrina apresentou menor área de formação óssea comparada com o grupo que recebeu o Selante (p=0,0034). Concluindo, os adesivos defibrina não influenciaram no processo de cicatrização óssea / Abstract: Fibrins adhesives are plasma protein derivate and it has been used in different surgical procedures as a local hemostatic agent. Objectives: Evaluate the autologous fibrin glue as a local hemostatic agent after tooth extraction in hemophilia patients. Analyze the influence of the fibrin adhesives in a tissue healing process in skin and alveolar bone in an animal model. Chapter I: Patients and Methods: Thirty-one hemophilic patients were submitted to teeth extractions using autologous fibrin glue and an oral antifibrinolytic drug (epsilon-aminocaproic acid). Oral health indexes (plaque-PI, gingival-GI and decay-missing-filling-teeth-DMFT index) were evaluated before tooth extraction. Results: Post-surgical bleeding episodes were observed in 6 hemophilic patients (1 severe, 3 moderate and 2 mild type). The media of PI and GI in the bleeding group were 1.8 and 1.7, respectively and in the non-bleeding group 1.8 for both (PI: p=0.8; GI: p=0.56). The global DMFT index was 18 in the bleeding group and 19.6 in the non-bleeding group (p=0.67). Conclusion: The autologous fibrin glue was efficient as a local hemostatic agent after tooth extraction in hemophilia patients. The status of oral health did not interfere in the dental extraction bleeding of hemophilic patients. Chapter II: Material and Methods: Twenty-five Wistar rats were submitted to intramuscular anesthesia. Two incisions were realized on animal back and subcutaneous ventrally pockets were made. Into the right side a vegetal sponge imbibed in FS associated to factor XIII and aprotinina (BeriplastP®-Aventis- Beringher) was introduced and in the left side the sponge without FS was insert as control. Animals were divided in 5 groups and they were sacrificed on days 1, 7, 14, 21 and 28 after the surgery. Animal back tissues were dissected and blocks were prepared for light microscopy study (H&E). The morphometric study was performed by microscopy (KS400)-40x. Twenty randomized fields from each sponge were analyzed and the cellular composition of the granulation tissue was examined with regard to its content of capillaries, granulation tissue cells and inflammatory cells. The data were statistically analyzed using the Wilcoxon signed rank test for the weight differences between the numbers of inflammatory cells for each animal in both groups. The results showed a high number of inflammatory cells in the peripheral area of the FS group comparing with the controls. The results suggest that the FS induced an intense and prolonged inflammatory response in wound healing, and the FS persisted up to 28 days after surgery. Chapter III: Material and Methods: Seventy-five Wistar rats were submitted to a superior incisor extraction after intramuscular anesthesia. The rats were divided into tree different groups and the sealants were introduced into the alveolar bone. The first group (25) received human homemade fibrin glue, the second group (25) FS associated to factor XIII and aprotinin(Beriplast®¿Aventis-Beringher) and the third group (25) was the control. Animals were sacrificed by prolonged diethyl inhalation on days 1, 7, 14 and 28 after surgery. Animal craniums were dissected and submitted to a decalcification, and preparated for H&E light microscopy. The morphometric study was performed by means of an interactive computerized image analysis system KS400(Zeiss, Jena). New bone formation was carefully delimited in four different alveolar regions of each specimen. The data were statistically analyzed using multiple regression, ANOVA and Tukey's test. Results showed that the amount of alveolar bone formation(µm2) in the control group and commercial sealant was statistically similar. However, alveolus receiving homemade sealant presented less amount of new bone formation comparing to commercial sealant and control group (p=0.0034). The present study demonstrated that fibrin adhesives did not influence on the alveolar healing process / Doutorado / Clinica Medica / Doutor em Clínica Médica

Orientador: Rondinelli Donizetti Herculano / Resumo: O látex de natural, extraído da seringueira Hevea brasiliensis, pode estimular a regeneração tecidual, isso ocorre pela formação de capilares sanguíneos que aumentam a vascularização no local de sua aplicação. No entanto, a aplicação do látex natural encontra desafios como o aumento do exsudato quando aplicado em feridas diabéticas, a necessidade de remoção cirúrgica quando utilizado como implante, entre outros. Portanto, é necessário o desenvolvimento de matrizes que apresentem a característica do látex natural de estímulo da regeneração tecidual, aliada à outras propriedades, tais como a absorção de fluídos em aplicações no tratamento de lesões exsudativas, aumento da degradabilidade do material em tratamentos onde o implante é necessário, e o fornecimento de nutrientes que auxiliem na regeneração dos tecidos. O presente trabalho apresenta os resultados do desenvolvimento e caracterização membranas composta por látex natural, alginato e colágeno. Por meio de técnicas padrões de caracterização de biomateriais, foi observado que, devido às suas propriedades mecânicas, químicas e biológicas, membrans híbridas compostos por bNRL, alginato e colágeno mostram uma grande promessa para o tratamento de feridas dérmicas como úlceras diabéticas. A biocompatibilidade das membrans e a capacidade de criar um ambiente favorável ao redor do leito da ferida são características-chave que contribuem para o seu valor em facilitar e acelerar a regeneração de tecidos. / Abstract: Natural latex from the rubber tree Hevea brasiliensis can stimulate tissue regeneration, this occurs by the formation of blood capillaries that increase vascularization at the site of its application. However, the application of natural latex faces challenges such as increased exudate when applied to diabetic wounds, the need for surgical removal when used as an implant, among others. Therefore, it is necessary to develop matrices that have the characteristic of natural latex to stimulate tissue regeneration, combined with other properties, such as fluid absorption in applications in the treatment of exudative lesions, increased material degradability in treatments where the implant it is necessary, and the supply of nutrients that assist in tissue regeneration. The present work presents the results of the development and characterization of membranes composed of natural latex, alginate, and collagen. Through standard techniques for characterizing biomaterials, it was observed that, due to their mechanical, chemical, and biological properties, membranes composed of bNRL, alginate, and collagen show great promise for the treatment of dermal wounds such as diabetic ulcers. The biocompatibility of the membranes and the ability to create a favorable environment around the wound bed are key characteristics that contribute to its value in facilitating and accelerating tissue regeneration. / Doutor

Orientador: Carlos Roberto Teixeira / Resumo: Este estudo avaliou a cicatrização de feridas cutâneas limpas induzidas em papagaios, por meio de tratamentos tópicos. Para tratar foram utilizados 18 papagaios-verdadeiro, Amazona aestiva, distribuídos em seis grupos a saber: dexpantenol, ricinus, clorexidine, solução fisiológica, laserterapia e grupo controle sem tratamento. Foram induzidas quatro feridas de 8mm de diâmetro em cada um dos indivíduos. Essas foram tratados de acordo com cada grupo, em dias alternados. Além disso, de acordo com os dias pós-cirúrgicos (5°, 14° e 21°) foram realizados hemogramas, análise de fibrinogênio e biópsias para avaliação histopatológica (quantificados em termos de neovascularização, infiltrado inflamatório, fibroplasia e epitelização). Pelas avaliações macroscópicas e microscópicas os tratamentos foram mais eficientes quando comparados ao grupo controle. Excluindo o grupo controle, o grupo solução fisiológica e o grupo clorexidine apresentaram os melhores resultados sem diferença estatística entre eles. Na sequência estavam os grupos laserterapia e dexpantenol. O grupo ricinus apresentou em sua totalidade aspecto sujo da região, e em uma das aves rarefação de penas importante após o tratamento, não sendo recomendado seu uso tópico. Os leucócitos permaneceram no limite inferior diminuindo com o decorrer dos primeiros dias e posterior recuperação na etapa final de cicatrização. O fibrinogênio apresentou aumento no momento 5 e em seguida, queda e normalização nos momentos seguintes. Alteraç... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Mestre

VERÍSSIMO, Denusa Moreira. Avaliação da biocompatibilidade e bioatividade de membranas colágeno polianiônico mineralizadas e reticuladas em modelos de animais. 2012. 168 f. Tese (Doutorado em Farmacologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, 2012. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2013-07-26T16:19:08Z No. of bitstreams: 1 2012_tese_dmveríssimo.pdf: 6961527 bytes, checksum: af03b746912fd2ba6a02fb512fada0d0 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes(erikaleitefernandes@gmail.com) on 2013-08-06T11:53:08Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_tese_dmveríssimo.pdf: 6961527 bytes, checksum: af03b746912fd2ba6a02fb512fada0d0 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-08-06T11:53:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_tese_dmveríssimo.pdf: 6961527 bytes, checksum: af03b746912fd2ba6a02fb512fada0d0 (MD5) Previous issue date: 2012 / The aim of this study was to evaluate polyanionic collagen (PAC) membranes reticulated and impregnated with hydroxyapatite, manufactured by the Physics Department, Federal University of Ceará. This study was divided into two stages, initially it was evaluated the biocompatibility and biodegradation of six different membranes of PAC, divided into the following groups: three with 0, 25 and 75 cycles of impregnation with apatite (PAC, PAC 25, PAC 75 ) and three more whose membranes were crosslinked with glutaraldehyde (GA) (GA PAC, PAC 25GA, PAC 75GA) inserted into the subcutaneous tissue of rats. Histopathological analyzes of inflammatory infiltration, myeloperoxidase activity (MPO), cytokine, thickness of fibrous capsule, immunohistochemistry for metalloproteinase and degradation of the membranes were evaluated after 1, 7, 15, 30, 60 and 120 days. Subsequently, it was evaluated the effect of the three best membranes in guided bone regeneration using bone critical defects in rat calvaria (DOC), where the membranes were placed over the defect. Bone formation was evaluated based on digital radiography (DR), computed tomography (CT) and histological analysis, 24 hours, 4, 8 and 12 weeks after surgery. MPO and cytokine were performed after 24 hours. In the subcutaneous tissue, the membranes crosslinked with GA showed thick fibrous capsule, less inflammatory reaction and remained intact after 120 days. In the bone regeneration model in rat calvaria, after 12 weeks, PAC GA and PAC 25GA groups showed significant reduction in radiolucent area compared to the baseline group. Histological analysis showed that in PAC GA and PAC 25GA groups, membranes were still intact, surrounded by a thick fibrous capsule and in PAC 75GA group, membranes showed early resorption. There was no statistical difference between groups in MPO activity and IL-1β. We conclude that the crosslinked membranes were more biocompatible and remained free from degradation during the observation period. These membranes induced closure of bone defects and did not induce inflammatory reaction. The impregnation of hydroxyapatite did not accelerate the healing of surgical defect. Our results suggest that the crosslinked membranes CPA may be useful in cases where new bone formation is dependent on a longer duration of mechanical barrier. / O objetivo desse estudo foi avaliar membranas de colágeno polianiônico (CPA) reticuladas e impregnadas com hidroxiapatita, manufaturadas pelo Departamento de Física da Universidade Federal do Ceará. Dividiu-se o trabalho em 2 etapas, onde inicialmente avaliou-se a biocompatibilidade e a biodegradação de 6 diferentes membranas de CPA, divididas nos seguintes grupos: três com 0, 25 e 75 ciclos de impregnação com hidroxiapatita (CPA, CPA 25, CPA 75) e mais três cujas membranas foram reticuladas com glutaraldeído (GA) (CPA GA, CPA 25GA, CPA 75GA) inseridas em tecido subcutâneo de ratos. Análises histopatológicas do infiltrado inflamatório, atividade de mieloperoxidase (MPO), dosagem de citocinas, espessura de cápsula fibrosa, imunohistoquímica para metaloproteinase e biodegradação das membranas foram avaliadas após 1, 7, 15, 30, 60 e 120 dias. Posteriormente, avaliou-se o efeito das 3 melhores membranas na regeneração óssea guiada usando defeito ósseo crítico em calvária de ratos (DOC), onde as membranas foram posicionadas sobre o defeito. Formação óssea foi avaliada com base na radiografia digital (RD), tomografia computadorizada (TC) e análise histológica, 24 horas, 4, 8 e 12 semanas após o procedimento cirúrgico. MPO e dosagem de citocinas foram realizadas após 24 horas. No subcutâneo, as membranas reticuladas com GA mostraram espessa cápsula fibrosa e menor reação inflamatória permanecendo intactas após 120 dias. No modelo de regeneração óssea em calvária de ratos, após 12 semanas, os grupos CPA GA e CPA 25GA apresentaram redução significativa da área radiolúcida quando comparadas ao grupo basal. A análise histológica mostrou que nos grupos CPA GA e CPA 25GA as membranas ainda estavam intactas, envolvidas por uma espessa cápsula fibrosa e as membranas do grupo CPA 75GA apresentaram início de reabsorção. Não foi encontrada diferença estatística entre os grupos quanto a atividade MPO e citocina IL-1β. Concluímos que as membranas reticuladas mostraram-se mais biocompatíveis e se mantiveram livre de biodegradação no período de observação. Essas membranas induziram o fechamento dos defeitos ósseos e não induziram reação inflamatória. A impregnação de hidroxiapatita não acelerou a cicatrização do defeito cirúrgico. Nossos resultados sugerem que as membranas de CPA reticuladas poderão ser úteis nos processos em que a formação de um novo osso depende de uma duração mais prolongada da barreira mecânica.