Submitted by Fernanda Rodrigues de Lima (fernanda.rlima@ufpe.br) on 2018-08-20T20:59:24Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Fabíola Bernardo Carneiro.pdf: 3023831 bytes, checksum: 529d070bb96efe5eb6775ad4f7dbc996 (MD5) / Approved for entry into archive by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-08-28T18:16:05Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Fabíola Bernardo Carneiro.pdf: 3023831 bytes, checksum: 529d070bb96efe5eb6775ad4f7dbc996 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-28T18:16:05Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Fabíola Bernardo Carneiro.pdf: 3023831 bytes, checksum: 529d070bb96efe5eb6775ad4f7dbc996 (MD5) Previous issue date: 2017-04-27 / medicina tradicional e a medicina complementar e alternativa reforçando o compromisso de estimular o desenvolvimento de políticas públicas a fim de inseri-las no sistema oficial de saúde. As iniciativas do Ministério da Saúde, em parceria com órgãos do governo e sociedade civil, visam viabilizar a utilização racional de plantas medicinais e fitoterápicos, tendo como linhas condutoras à preservação da biodiversidade, o desenvolvimento sustentável, a repartição de benefícios, além do benefício à população brasileira. A qualidade da matéria-prima vegetal tem um importante papel na obtenção de produtos fitoterápicos, já que esta apresenta como características a complexidade e a variabilidade da sua composição. A Schinus terebinthifolius Raddi é popularmente conhecida por aroeira pertence à família Anacardiaceae e apresenta atividades antiinflamatória, antidiarréica, diurética e antipirética. Neste trabalho aSchinus terebinthifolius Raddi, coletada em diferentes estados do nordeste brasileiro, foi caracterizada por métodos cromatográficosaplicados em um estudo de monitorização quantitativa dos extratos vegetais obtidos pelo processo de turbólise. A análise química mostrou que os exemplares estudados apresentaram compostos químicos majoritários distintos, α-pineno, limoneno, felandreno e careno, infere-se que, as variações obtidas possam estar relacionadas às condições ambientais, a diferença de solo, além da idade fisiológica das plantas. Estudo quimiométrico de análise de componentes principais (PCA)foi realizado para confirmar as semelhanças químicas entre as plantas coletadas. Os ensaios realizados por cromatografia gasosa acoplada a detector de massas e tratados por PCA demonstraram que o grupo A formado pelos estados de RN, PB, SE, PE, AL, grupo B formado pelo estado do CE e o grupo C formado pelos estados de PI, MA, BA apresentaram respectivamente careno, felandreno e limoneno, como marcadores que influenciaram na formação dos grupos por similaridade, podendo-se afirmar que as plantas pertencentes ao mesmo grupo são semelhantes porque apresentam os mesmos metabólitos secundários. A Análise realizada por CCD-AE revelou a presença de ácido gálico e catequina confirmado por CLAE-DAD e foi útil na separação e identificação de taninos e flavonoides em folhas de S. terebinthifolius. Em função dos resultados encontrados pode-se concluir que os métodos empregados neste trabalho permitiram alcançar os objetivos propostos de caracterização qualitativa e quantitativa do extrato bruto de folhas deS. terebinthifolius. Para avaliar a atividade biológicados extratos,sobre o crescimento das cepas de bactérias e de fungos, foi realizado o teste de concentração inibitória mínima (CIM) nas concentrações de 1024 μg/mL a 32 μg/mL, os quais não produziraminibição nesta concentração, o que não quer dizer que a amostra vegetal não tenha atividade contra os micro-organismos testados em concentrações superiores a esta. / In Brazil, the federal government has invested in the global strategy for traditional medicine, complementary and alternative medicine through number programs, reinforcing the commitment to stimulate the development of public policies in order to introduce them into the official health system. The Ministry of Health initiatives, in partnership with government agencies and civil society, aim to enable the rational use of medicinal plants and phytotherapics, having as a guideline the preservation of biodiversity, sustainable development, health and economic benefits to the population. The quality of the vegetal raw material has an important role in the production of herbal products due to the complexity and variability of its composition. Schinus terebinthifolius Raddi is popularly known as aroeira belongs to family Anacardiaceae and has anti-inflammatory, antidiarrheal, diuretic and antipyretic activities. In the present work, Schinus terebinthifolius Raddi collected in different states of northeastern Brazil, was characterized by chromatographic methods and used in a quantitative monitoring study of the plant extracts obtained by the turbo extraction process. The chemical analysis showed that the studied specimens presented different chemical compounds, α-pinene, limonene, phellandrene and carene, it is inferred that, the variations obtained could be related to the environmental conditions, the soil differences, in addition to the physiological age of the plants. A major component analysis (PCA) was performed to confirm the chemical similarities between the collected plants. The tests performed by gas chromatography coupled to mass detector and treated by PCA, demonstrated that the group A formed by the strains collected on the states of RN, PB, SE, PE, AL, group B formed by the strains collected on the state of the EC and group C formed by the strains collected ont the states of PI , MA, BA, presented carene, phellandrene and limonene as markers that influenced the formation of groups by similarity, and it is correct to say that plants belonging to the same group are similar because they have the same secondary metabolites. Analysis by high-performance thin-layer chromatography revealed the presence of gallic acid and catechin, which was confirmed by high performance liquid chromatography. Such techniques were useful in the separation and identification of tannins and flavonoids presents in the leaves of S. terebinthifolius. Based on the results, it can be concluded that the methods peformed in this work made it possible for us to characterize the raw extracts of S. terebinthifolius leaves. In order to evaluate the biological activity of the extracts on the growth of bacterial and fungal strains, a minimum inhibitory concentration (MIC) test was performed at concentrations from 1024 μg / mL to 32 μg / mL. No inhibition was observed at these concentrations. The fact that there was no CIM does not mean that the plant sample has no activity. Concentrations higher than tested may exhibit antibacterial and fungicidal activity.

A Hanseníase é uma doença de evolução crônica e lenta causada pelo bacilo Mycobacterium leprae, com inflamação especifica, que acomete o sistema nervoso periférico. A detecção da perda de sensibilidade protetora é importante para identificar pacientes que apresentam neuropatia periférica. O método mais utilizado para medir a sensibilidade das fibras de adaptação lenta é o de estesiometria por monofilamentos de Semmes-Weinstein (SW). Um dos fatores etiológicos da úlcera plantar neuropática é a alta pressão em determinado local na região plantar. O Baropodômetro é um aparelho eficiente para avaliar a pressão plantar tanto na postura estática como na dinâmica. Este estudo teve como objetivo descrever clinico-epidemiologicamente pacientes com hanseníase em tratamento no CRNDS do HCFMRP - USP, correlacionando os respectivos resultados dos testes baropodométricos na postura estática e dinâmica com teste de sensibilidade pelos monofilamentos SW. Foram avaliados 51 pacientes com hanseníase, com idade entre 18 e 60 anos, 30 classificados operacionalmente em multibacilares (MB) e 15 em paucibacilares (PB). 20 sujeitos sem neuropatia foram selecionados para o Grupo Controle (GC). Somente os pacientes com hanseníase foram submetidos à estesiometria. Os resultados demonstraram estatisticamente que o paciente MB e PB apresentaram maiores picos de pressão plantar e maior taxa de alteração de sensibilidade na região do calcanhar. Pacientes MB apresentaram maiores picos de pressão plantar na estática, e o GC na dinâmica. Tanto o grupo PB quanto o MB apresentaram úlceras ou calosidades plantares, sendo que no MB estas ocorreram nas áreas de sensibilidade alterada, enquanto no PB as lesões apresentaram-se em áreas coincidentes de alteração de sensibilidade e picos máximos de pressão. Assim, os resultados evidenciaram que a baropodometria contribui para o melhor entendimento da biomecânica do processo de ulceração plantar, além de ser um método prático e não invasivo para o diagnóstico funcional dos pacientes com neuropatia hansênica em relação à distribuição pressórica plantar. / Leprosy is a disease of chronic evolution that causes specific and slow inflammatory reaction, damaging the peripheral neural system. The detection of the sensibility loss is important to identify patients with peripheral neuropathy, and the standard method for it is the Semmes-Weinstein\'s monofilament sensibility test. One of the etiologic factors of the plantar ulcers on neuropathic feet is the high pressure on determined plantar spot. The Podometry is effective to evaluate the plantar pressure during standing position and gait. The aim of this study was to describe epidemically and clinically leprosy\'s patients through podometric evaluations during gait and static posture, and compare these data with Semmes-Weinstein monofilaments sensitivity tests. Methods: 51 leprosy subjects, 18 to 60 years old, already on treatment at the CRNDS of HCFMRP - USP were evaluated and classified as multibacillary (MB) and paucibacillary (PB). Also, 20 normal subjects performed the podometric test and have their data taken as a control group (GC). The statistical analysis of the data showed that leprosy patients have both greater sensitivity loss and plantar peak pressure on the heel area. The MB group showed higher plantar peak pressures during standing position, as well as GC on gait analysis. Both MB and PB presented plantar callus and ulcer; MB skin damage was found within the areas of sensory loss, and PB\'s within the areas of sensitivity loss plus higher peak pressures. The results showed that podometry offers an important contribution to understanding plantar ulcer\'s biomechanics; besides, it is a practical and non-invasive method to functionally diagnose leprosys neuropathy related to plantar pressure distribution.

A Hanseníase é uma doença de evolução crônica e lenta causada pelo bacilo Mycobacterium leprae, com inflamação especifica, que acomete o sistema nervoso periférico. A detecção da perda de sensibilidade protetora é importante para identificar pacientes que apresentam neuropatia periférica. O método mais utilizado para medir a sensibilidade das fibras de adaptação lenta é o de estesiometria por monofilamentos de Semmes-Weinstein (SW). Um dos fatores etiológicos da úlcera plantar neuropática é a alta pressão em determinado local na região plantar. O Baropodômetro é um aparelho eficiente para avaliar a pressão plantar tanto na postura estática como na dinâmica. Este estudo teve como objetivo descrever clinico-epidemiologicamente pacientes com hanseníase em tratamento no CRNDS do HCFMRP - USP, correlacionando os respectivos resultados dos testes baropodométricos na postura estática e dinâmica com teste de sensibilidade pelos monofilamentos SW. Foram avaliados 51 pacientes com hanseníase, com idade entre 18 e 60 anos, 30 classificados operacionalmente em multibacilares (MB) e 15 em paucibacilares (PB). 20 sujeitos sem neuropatia foram selecionados para o Grupo Controle (GC). Somente os pacientes com hanseníase foram submetidos à estesiometria. Os resultados demonstraram estatisticamente que o paciente MB e PB apresentaram maiores picos de pressão plantar e maior taxa de alteração de sensibilidade na região do calcanhar. Pacientes MB apresentaram maiores picos de pressão plantar na estática, e o GC na dinâmica. Tanto o grupo PB quanto o MB apresentaram úlceras ou calosidades plantares, sendo que no MB estas ocorreram nas áreas de sensibilidade alterada, enquanto no PB as lesões apresentaram-se em áreas coincidentes de alteração de sensibilidade e picos máximos de pressão. Assim, os resultados evidenciaram que a baropodometria contribui para o melhor entendimento da biomecânica do processo de ulceração plantar, além de ser um método prático e não invasivo para o diagnóstico funcional dos pacientes com neuropatia hansênica em relação à distribuição pressórica plantar. / Leprosy is a disease of chronic evolution that causes specific and slow inflammatory reaction, damaging the peripheral neural system. The detection of the sensibility loss is important to identify patients with peripheral neuropathy, and the standard method for it is the Semmes-Weinstein\'s monofilament sensibility test. One of the etiologic factors of the plantar ulcers on neuropathic feet is the high pressure on determined plantar spot. The Podometry is effective to evaluate the plantar pressure during standing position and gait. The aim of this study was to describe epidemically and clinically leprosy\'s patients through podometric evaluations during gait and static posture, and compare these data with Semmes-Weinstein monofilaments sensitivity tests. Methods: 51 leprosy subjects, 18 to 60 years old, already on treatment at the CRNDS of HCFMRP - USP were evaluated and classified as multibacillary (MB) and paucibacillary (PB). Also, 20 normal subjects performed the podometric test and have their data taken as a control group (GC). The statistical analysis of the data showed that leprosy patients have both greater sensitivity loss and plantar peak pressure on the heel area. The MB group showed higher plantar peak pressures during standing position, as well as GC on gait analysis. Both MB and PB presented plantar callus and ulcer; MB skin damage was found within the areas of sensory loss, and PB\'s within the areas of sensitivity loss plus higher peak pressures. The results showed that podometry offers an important contribution to understanding plantar ulcer\'s biomechanics; besides, it is a practical and non-invasive method to functionally diagnose leprosys neuropathy related to plantar pressure distribution.

NASCIMENTO, A. A. Frequência e sensibilidade antifúngica de candida spp. isoladas de úlceras de pé diabético. 2017. 110 f. Dissertação (Mestrado em Ciências da Saúde) - Curso de Medicina, Campus de Sobral, Universidade Federal do Ceará, Sobral, 2017 / Submitted by Mestrado Ciências da Saúde (ppgcsufcsobral@gmail.com) on 2017-01-25T19:25:24Z No. of bitstreams: 1 2017_dis_aanascimento.pdf: 1432101 bytes, checksum: 188ea1d5536b9c9c7a462bb91ce2d2c4 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Márcia Sousa (marciasousa@ufc.br) on 2017-01-26T14:37:47Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_dis_aanascimento.pdf: 1432101 bytes, checksum: 188ea1d5536b9c9c7a462bb91ce2d2c4 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-01-26T14:37:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_dis_aanascimento.pdf: 1432101 bytes, checksum: 188ea1d5536b9c9c7a462bb91ce2d2c4 (MD5) Previous issue date: 2017-01-20 / Patients with diabetes represent a unique group of individuals who appear to be more likely to develop infections than others. Foot problems represent one of the most important chronic complications of diabetes mellitus. The risk of lower limb amputation can be increased if ulceration is followed by bacterial, fungal, and, in more severe cases, synergism between bacterial and fungal infections. However, there is a lack of reports in the literature of the incidence of fungal pathogens in these samples. This study aims to describe, through a prospective study, the culture, isolation, identification and sensitivity test of Candida spp. present in diabetic patient´s foot ulcers. Samples were collected at the North Regional Hospital from September 2015 to September 2016. A total of 154 samples were collected from 77 patients, where 50.65 % were female and 49.35 % were male. Of the total number of patients, 59.74 % were diagnosed with type 2 diabetes mellitus, where hypertension was the most prevalent comorbidity. Patients aged 71-80 years were more susceptible to complications of diabetes and the majority of patients (70.13 %) had fasting glycemia values above the reference value. Peripheral vascular disease was present in all patients, where 97.40 % had necrotic and infected lesions in the feet, increasing cases of debridement and revascularization. Of the total number of pacientes, 70.13 % had local or generalized amputation, being classified in grade 4 or 5, by Wagner's Classification, where, consequently, all of them were in antibacterial use, but none were using antifungal. In total, 59.74 % and 54.54 % of the patients never received care orientation or did daily selfexamination of the feet, respectively; and 97.40 % had their wounds reinfected, being necessary to perform new vascular procedures. The fungal species that grew in culture were identified through the conventional mycological methodology. Most of the samples identified were C. tropicalis (44.33 %) and all samples of C. albicans identified and isolated in the study were tested for antifungal sensitivity. Species of Candida nonalbicans are being more incident than the species of C. albicans. All C. albicans samples from this study were considered sensitive to the sensitivity test, according to the methodology and references of CLSI-M27A2. The number of deaths of patients related to diabetic foot in this study was worrisome (14.29 %). Preventive and primary measures should be taken to decrease the high mortality rate in diabetic patients with foot ulcers. Self-care is an important factor in the prevention of complications in diabetic feet and, for good disease control, effective self-management is necessary. We believe that our results have important implications for the prevention and recognition of fungal infections in diabetic foot and we recommend that diabetic patients with foot problems should be routinely examined for mycological evaluation because fungi play a potential role in the pathogenesis of ulceration. / Pacientes com diabetes representam um grupo único de indivíduos que parecem ser mais propensos a desenvolver infecções do que outros. Os problemas com os pés representam uma das mais importantes complicações crônicas do diabetes mellitus. O risco de amputação de membros inferiores pode ser aumentado se a ulceração é seguida por infecções bacterianas, fúngicas e, em casos mais graves, sinergismo entre infecções bacterianas e fúngicas. Entretanto, há escassez de relatos na literatura da incidência de patógenos fúngicos nessas amostras. Este estudo tem por objetivo descrever, através de um estudo prospectivo, a cultura, isolamento, identificação e teste de sensibilidade de Candida spp. presentes em úlceras dos pés de pacientes diabéticos. A coleta das amostras foi realizada no Hospital Regional Norte, entre setembro de 2015 a setembro de 2016. Foram coletadas 154 amostras de 77 pacientes, onde 50,65 % eram do gênero feminino e 49,35 % eram do gênero masculino. Do total de pacientes, 59,74 % foram diagnosticados com diabetes mellitus tipo 2, onde a hipertensão foi a comorbidade de maior prevalência. Pacientes entre 71-80 anos foram mais susceptíveis às complicações do diabetes e a maioria dos pacientes (70,13 %) estava com valores de glicemia de jejum acima do valor de referência. A doença vascular periférica estava presente em todos os pacientes, onde 97,40 % apresentavam lesões necrosadas e infectadas nos pés, aumentando os casos de desbridamentos e revascularizações. Do total de pacientes, 70,13 % tinham amputação local ou generalizada, sendo classificados em grau 4 ou 5, pela Classificação de Wagner, onde, consequentemente, todos estes estavam em uso de antibacterianos, porém nenhum estava em uso de antifúngico. No total, 59,74 % e 54,54 % dos pacientes nunca receberam orientação para os cuidados ou fizeram autoexame diário dos pés, respectivamente; e 97,40 % tiveram suas feridas reinfectadas, sendo necessário realizar novos procedimentos vasculares. As espécies fúngicas que cresceram em cultivo foram identificadas através da metodologia micológica convencional. A maioria das amostras identificadas foram C. tropicalis (44,33 %) e todas as amostras de C. albicans identificadas e isoladas no estudo foram realizadas testes de sensibilidade antifúngica. Espécies de Candida não albicans estão sendo mais incidentes que a espécie de C. albicans. Todas as amostras de C. albicans deste estudo foram consideradas sensíveis ao teste de sensibilidade, segundo a metodologia e referências do CLSI-M27A2. Foi preocupante a quantidade de óbitos dos pacientes relacionados ao pé diabético neste estudo (14,29 %). Medidas preventivas e primárias devem ser tomadas para diminuir a elevada taxa de mortalidade em pacientes diabéticos com úlceras nos pés. O autocuidado é fator importante na prevenção de complicações em pés diabéticos e, para bom controle da doença, é preciso autogerenciamento efetivo. Nós acreditamos que nossos resultados têm implicações importantes para a prevenção e reconhecimento sobre as infecções fúngicas no pé diabético e recomendamos que pacientes diabéticos com problemas nos pés devam ser examinados rotineiramente para avaliação micológica, pois os fungos possuem papel potencial na patogênese da ulceração.

Submitted by Hiolanda Rêgo (hiolandarego@gmail.com) on 2014-10-22T18:58:12Z No. of bitstreams: 1 Dissertação_ICS_ Carine Souza Aguiar.pdf: 1618744 bytes, checksum: a297cae4dbf16da3ebefd6282adb27c1 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-10-22T18:58:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação_ICS_ Carine Souza Aguiar.pdf: 1618744 bytes, checksum: a297cae4dbf16da3ebefd6282adb27c1 (MD5) / Os venenos de serpentes são constituídos por uma mistura complexa de substâncias e como consequência podem apresentar distintas funções biológicas, bioquímicas e farmacológicas. Devido ao seu elevado grau de especificidade do alvo, toxinas têm sido cada vez mais utilizadas como instrumentos farmacológicos e como protótipos para o desenvolvimento de drogas. As infecções estão entre as dez principais causas de morte no mundo, por isso é necessária a descoberta de novas alternativas para o tratamento das infecções que envolvem os diversos microrganismos patogênicos. Apesar dos efeitos tóxicos, os venenos possuem grande potencial para produção de novos medicamentos. Através de metodologias como disco difusão e microdiluição é possível identificar se um composto possui ou não atividade antimicrobiana e avaliar a intensidade dessa atividade. Existem vários relatos de atividade antimicrobiana em venenos de diferentes serpentes. A descoberta de novas moléculas que possuam alguma atividade biológica decorre de testes com substâncias que ainda não foram utilizadas para este fim e/ou que não tenham sido estudadas em sua totalidade, por isso, dentre as várias espécies de serpentes peçonhentas, foram escolhidos como alvo deste trabalho as serpentes Bothrops leucurus e Crotalus durissus cascavella, pois o uso dos venenos produzidos por elas constituem-se como fontes potenciais para o estudo de atividades bactericida e antifúngico. O objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade antimicrobiana dos venenos totais dessas serpentes contra 20 cepas bacterianas e 8 espécies fúngicas através do teste de disco difusão, determinar a concentração inibitória mínima (CIM) e comparar a atividade antimicrobiana desses venenos. Os testes mostraram que o veneno VBL apresentou atividade através da formação de halos de inibição frente a 19 cepas de bactérias e o VCC em 18 cepas. A ação dos dois venenos foi dose-dependente no teste de disco difusão para a maioria dos microrganismos. O veneno VBL em solução aquosa manteve sua atividade após o congelamento nos teste de microdiluição em caldo frente a 10 cepas de bactérias e o VCC em apenas 6 cepas. Em relação aos fungos filamentosos o VBL apresentou atividade em 4 e o VCC em 2 das espécies testadas. Os valores das CIM's determinadas para os dois venenos demonstram que o VBL possui maior atividade na inibição de todos os microrganismos do que o VCC. Diante dos resultados encontrados, acredita-se que é possível termos mais de uma substância agindo na inibição do crescimento dos microrganismos. É importante ressaltar que como se trata de venenos totais, muitas substâncias podem estar atuando sobre esses microrganismos. Bactérias e fungos variam amplamente na composição das suas membranas e paredes, portanto, era esperado que exibissem diferentes sensibilidades aos venenos, não sendo ainda possível avaliar se uma ou mais substâncias são responsáveis pelos resultados encontrados.

Submitted by JAIME GAZOLA FILHO (DINTER) null (jaime@saolucas.edu.br) on 2017-01-13T22:14:56Z No. of bitstreams: 1 Tese Jaime pdf.pdf: 1161900 bytes, checksum: 88085fe3b7f98950a6283f7926a857fd (MD5) / Approved for entry into archive by Juliano Benedito Ferreira (julianoferreira@reitoria.unesp.br) on 2017-01-17T19:27:19Z (GMT) No. of bitstreams: 1 gazolafilho_j_dr_araca.pdf: 1161900 bytes, checksum: 88085fe3b7f98950a6283f7926a857fd (MD5) / Made available in DSpace on 2017-01-17T19:27:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 gazolafilho_j_dr_araca.pdf: 1161900 bytes, checksum: 88085fe3b7f98950a6283f7926a857fd (MD5) Previous issue date: 2016-12-16 / Streptococcus mutans é conhecido por sua capacidade de aderir, colonizar e formar biofilme nas superfícies dentárias. Para sobreviver na cavidade bucal, S. mutans coordena a expressão de vários genes em resposta aos fatores ambientais, como na presença de agentes antimicrobianos. Os objetivos deste estudo foram: 1) avaliar a influência de concentrações subinibitórias (sub-MIC) de fluoreto de sódio (NaF) e digluconato de clorexidina (Chx) sobre o crescimento planctônico; 2) avaliar a influência desses antimicrobianos em concentrações sub-MIC na formação de biofilme das cepas de S. mutans; 3) avaliar a expressão dos genes covR e vicR de cepas de S. mutans expostas aos sub-MIC de Chx e NaF. Cepas de S. mutans padrão (ATCC 25175 e UA159) e isolada de criança com cárie precoce da infância (3FV2) foram reativadas em BHI caldo e expostas a Chx e NaF para determinação da MIC e MBC. A partir desses valores, curvas de crescimento foram obtidas para as cepas de S. mutans expostas a concentrações sub-MIC de Chx (0,25 x MIC a 0,75 x MIC) e NaF (0,125 x MIC a 0,75 x MIC). Ensaios de biofilme foram realizados para as cepas de S. mutans expostas ou não aos sub-MIC dos agentes antimicrobianos (0,25 x MIC; 0,5 x MIC e 0,75 x MIC). A expressão dos genes covR e vicR foram avaliadas por PCR quantitativo para as cepas de S. mutans em condições planctônicas expostas a 0,125/0,25/0,5 x MIC de NaF e Chx. Os dados obtidos foram submetidos à análise estatística considerando p≤0,05. Os resultados mostraram que sub-MIC de Chx e de NaF afetaram o crescimento planctônico das cepas de S. mutans, de maneira dose-dependente. Sub-MIC de Chx afetou somente a formação de biofilme de 3VF2 e valores de NaF acima de 0,5 x MIC causaram redução do crescimento do biofilme para todas as cepas testadas, de maneira dose-dependente, com exceção da cepa ATCC 25175, que foi afetada igualmente por todas as concentrações avaliadas. Concentrações sub-MIC gradativas de Chx induziram a expressão crescente do gene vicR das cepas avaliadas. Quando NaF e Chx foram associados, o gene covR teve sua expressão reduzida quando expostas a 0,5 x MIC. Conclui-se que concentrações sub-MICs de NaF acima de 0,5 x MIC causaram redução do crescimento planctônico e em biofilme das cepas de S. mutans. Concentrações sub-MIC de Chx induzem a expressão de vicR podendo favorecer a formação de biofilme pelas cepas de S. mutans. / Streptococcus mutans is known for its ability to adhere, colonize and form biofilm on dental surfaces. To survive in the oral cavity, S. mutans coordinates the expression of several genes in response to environmental factors, such as in the presence of antimicrobial agents. The objectives of this study were: 1); to evaluate the influence of subinhibitory concentrations (sub-MIC) of chlorhexidine (Chx) and sodium fluoride (NaF) on planktonic growth 2) to evaluate the influence of sub-MIC of these agents on biofilm formation of S. mutans strains; 3) to evaluate the expression of the covR and vicR genes of S. mutans strains exposed to sub-MIC of Chx and NaF. Standard strains of S. mutans (ATCC 25175 or UA159) and clinical strain isolated from child with caries (3FV2) were reactivated in BHI broth and exposed to Chx and NaF for determination of MIC and MBC. From these values, growth curves were obtained for S. mutans strains exposed to sub-MIC concentrations of Chx (0.25 x MIC to 0.75 x MIC) and NaF (0.125 x MIC to 0.75 x MIC). Biofilm assays were performed for S. mutans strains exposed or not to the sub-MIC of antimicrobial agents (0.25, 0.5 and 0.75 x MIC). Expression of covR and vicR genes were evaluated by quantitative PCR for strains of S. mutans under plankton conditions exposed to 0.125 / 0.25 / 0.5 x MIC of NaF and Chx. The data were submitted to statistical analysis considering p≤0.05. The results showed that Chx and NaF sub-MIC affected planktonic growth of S. mutans strains in a dose-dependent manner. Sub-MIC of Chx only affect the biofilm formation for ATCC 25175, and, NaF values above 0.5 x MIC caused reduction of the biofilm growth for all tested strains, in a dose-dependent manner, except for ATCC 25175, which was also affected by all concentrations evaluated. Gradual sub-MIC concentrations of Chx induced increasing expression of the vicR gene of the strains evaluated. When NaF and Chx were related, the covR gene had its expression reduced when exposed to 0.5xMIC. It is concluded that sub-MICs concentrations of NaF above 0.5 x MIC caused reduction of planktonic and biofilm growth of S. mutans strains. Sub-MICs concentrations of Chx induce vicR expression and may favor biofilm formation by S. mutans strains.

Orientador: Rinaldo Poncio Mendes / Resumo: A candidemia constitui um grande problema em hospitais terciários, por sua elevada incidência – 3,9 casos por 1.000 admissões e letalidade – 50 a 72%. Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar a taxa de infecções da corrente sanguínea por Candida spp., em um período de sete anos, determinar o perfil de sensibilidade dos isolados a antifúngicos, caracterizar as espécies do complexo Candida glabrata e avaliar aspectos epidemiológicos, clínicos e terapêuticos dos pacientes-fonte. Methodology. O perfil de sensibilidade antifúngica foi realizado no equipamento Vitek2. A análise molecular de C. glabrata foi realizada por PCR utilizando-se primer senso CGL1 e antisenso CGL2 e de C. nivariensis e C. bracarensis por PCR multiplex com o primer senso NIV-f e BRA-f e antisenso universal UNI-5.8S. Aspectos epidemiológicos, clínicos e terapêuticos foram coletados de prontuário eletrônico e registrados em ficha padronizada para este estudo. Results. Foram avaliados 84 isolados de hemocultura e os dados clínicos de 59 pacientes. A taxa de incidência de candidemia (por 1.000 admissões) foi maior em mulheres que em homens (0,76 vs 0,54; p<0,0001), não se alterou ao longo dos anos e variou em função da unidade de internação, predominando na Clínica Cirúgica, Clínica Médica, Oncologia e Unidade de terapia Intensiva. C. albicans foi a espécie predominante e, dentre as não-C. albicans, a C. glabrata foi a mais frequente. Todos os isolados do complexo C. glabrata foram identificadas como C. glabra... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Background. Candidemia is the major problem in hospitals because of its high incidence - 3.9 cases per 1,000 admissions and lethality - 50 to 72%. Therefore, the objective of this study was to evalue the rate of the bloodstream infecction by Candida spp, to determine the sensitivity profile of the antifungal isolated, characterize the Candida glabrata complex species and to evaluate the epidemiological aspects, clinical and therapeutic patients sources. Methodology. The antifungal sensitivity profile was performed into Vitek2 device. Molecular analysis of C. glabrata was performed by PCR using primers ford CGL1 and reverse CGL2 and C. nivariensis and C. bracarensis by multiplex PCR with primers ford NIV-f and BRA-f universal reverse UNI-5.8S. Epidemiological, clinical and therapeutic aspects were collected from an electronic medical record and registered in a standard form for this study. Results. Were evaluated 84 patients with hemoculture and clinical data from 59 patients. The incidence rate of candidemia (per 1,000 admissions) was higher in women than men (0.76 vs 0.54, p <0.0001), not very different through out the years and varied according to the hospitalization unit, predominating in the Clínica Surgical, Clinical Medicine, Oncology and Intensive Care Unit. C. albicans was a predominant genus and, among non-C. albicans, C. glabrata was more frequent. All compounds of the C. glabrata complex were as C. glabrata stricto sensu. Predisposing factors - gastric surgery, use... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

A tuberculose (TB) é uma doença infecto-contagiosa causada pelo complexo Mycobacteruim tuberculosis. A melhor forma de prevenção se baseia na detecção e na cura dos casos. Um diagnóstico acurado de TB seria essencial para a identificação e tratamento dos pacientes. O diagnóstico laboratorial recomendado baseia-se na baciloscopia e na cultura de material clínico. Novos métodos, os quais empregam técnica genética baseada na amplificação e detecção do DNA bacteriano ou do RNA, visam melhorar a velocidade, sensibilidade e especificidade da detecção da bactéria. O principal teste desse grupo é o método da reação da cadeia da polimerase (PCR). Entretanto, há discordância na literatura quanto as dados de validade da PCR aplicada ao diagnóstico de tuberculose. O presente estudo realizou uma meta-análise sobre o teste da PCR no diagnóstico de TB. O método estatístico usado estimou efeitos do teste entre os estudos primários. A sensibilidade e a especificidade foram calculadas de acordo com as suas definições: Sensibilidade = TPR, taxa de verdadeiros positivos e Especificidade = 1 FPR, onde FPR = taxa de falsos positivos. Calculamos os logit de TPR e FPR a soma e suas diferenças e fizemos uma back transformação aos eixos de TPR vs. FPR com posterior construção da curva SROC (Moses & Shapiro, 1993). A curva SROC representa uma estimativa da medida de acurácia do teste índice a qual é ajustada pelo ponto de corte tanto quanto pela interdependência dos valores de sensibilidade e especificidade obtidos de cada estudo. Foram localizados 1375 artigos através de busca base de dados do Medline no período de 1988 a 2000. Considerando os critérios de elegibilidade, foram aceitos 111 artigos. A caracterização dos estudos, a validade e a sua aplicabilidade foram apreciadas. A medida combinada de todos os estudos foi de 0,86 para a sensibilidade e 0,95 para a especificidade usando-se o método de efeitos aleatórios. A PCR in-house apresentou melhor performance do que a Amplicor. O AMTD obteve os maiores valores de acurácia possivelmente devido o rRNA apresentar múltiplas cópias por célula. Diante das evidências, a PCR se constitui num teste complementar para tuberculose devendo ter critérios próprios para a sua utilização. No entanto, este teste não contempla os atributos requeridos para a substituição da baciloscopia na rotina diagnóstica.

A tuberculose (TB) é uma doença infecto-contagiosa causada pelo complexo Mycobacteruim tuberculosis. A melhor forma de prevenção se baseia na detecção e na cura dos casos. Um diagnóstico acurado de TB seria essencial para a identificação e tratamento dos pacientes. O diagnóstico laboratorial recomendado baseia-se na baciloscopia e na cultura de material clínico. Novos métodos, os quais empregam técnica genética baseada na amplificação e detecção do DNA bacteriano ou do RNA, visam melhorar a velocidade, sensibilidade e especificidade da detecção da bactéria. O principal teste desse grupo é o método da reação da cadeia da polimerase (PCR). Entretanto, há discordância na literatura quanto as dados de validade da PCR aplicada ao diagnóstico de tuberculose. O presente estudo realizou uma meta-análise sobre o teste da PCR no diagnóstico de TB. O método estatístico usado estimou efeitos do teste entre os estudos primários. A sensibilidade e a especificidade foram calculadas de acordo com as suas definições: Sensibilidade = TPR, taxa de verdadeiros positivos e Especificidade = 1 FPR, onde FPR = taxa de falsos positivos. Calculamos os logit de TPR e FPR a soma e suas diferenças e fizemos uma back transformação aos eixos de TPR vs. FPR com posterior construção da curva SROC (Moses & Shapiro, 1993). A curva SROC representa uma estimativa da medida de acurácia do teste índice a qual é ajustada pelo ponto de corte tanto quanto pela interdependência dos valores de sensibilidade e especificidade obtidos de cada estudo. Foram localizados 1375 artigos através de busca base de dados do Medline no período de 1988 a 2000. Considerando os critérios de elegibilidade, foram aceitos 111 artigos. A caracterização dos estudos, a validade e a sua aplicabilidade foram apreciadas. A medida combinada de todos os estudos foi de 0,86 para a sensibilidade e 0,95 para a especificidade usando-se o método de efeitos aleatórios. A PCR in-house apresentou melhor performance do que a Amplicor. O AMTD obteve os maiores valores de acurácia possivelmente devido o rRNA apresentar múltiplas cópias por célula. Diante das evidências, a PCR se constitui num teste complementar para tuberculose devendo ter critérios próprios para a sua utilização. No entanto, este teste não contempla os atributos requeridos para a substituição da baciloscopia na rotina diagnóstica.

Cryptococcus neoformans species complex são fungos oportunistas que desencadeiam meningite, tanto em pacientes imunocompetentes como em indivíduos hígidos. Este trabalho teve como objetivo estudar as espécies circulantes de Cryptococcus neoformans species complex isolados no Estado de Sergipe tanto a partir do LCR (líquido céfalo raqueanao) de pacientes com meningite infecciosa como de diversos substratos ambientais. Foram utilizadas amostras do LCR que deram entrada no IPH/HEMOLACEN/SE no período de 2001 a 2007. Foram realizadas 104 coletas ambientais dentro do Estado de Sergipe, das quais 55 foram obtidas a partir de excretas de aves e quatro de amostras de fezes de morcegos coletadas em cavernas. As demais foram obtidas de materiais de origem vegetal, perfazendo 45 amostras: 21 de Eucalyptus spp., oito de material de troncos vegetais em decomposição, 10 de restos vegetais coletados em duas praças e seis de Anacardium occidentale L. (cajueiro). O líquor foi examinado por microscopia direta e cultivado a 25ºC e a 37ºC. No período de 2005 a 2007 foram obtidos 141 isolados ambientais e 35 isolados clínicos de Cryptococcus neoformans species complex. Foram determinadas inferências ecológicas e epidemiológicas dos isolados obtidos além de realização de provas para identificação presuntiva fenotípica em meioNíger e, das espécies em meio CGB, teste de sensibilidade frente aosantifúngicos, caracterização enzimática de interesse biotipar e/ou marcador de linhagens, determinação de mating type sexual utilizando PCR e PCR Fingerprintig com iniciador M13. Nas linhagens de Cryptococcus spp. isoladas de líquor de pacientes com meningite infecciosa no Estado de Sergipe prevaleceu a espécie C. neoformans. Em relação às linhagens ambientais, somente uma amostra, dentre 140, foi identifcada como C. gattii. Todas as amostras oriundas de excretas de aves foram positivas no isolamento da levedura. Os isolados clínicos de C. neoformans e C. gattii oriundos de pacientes com meningite criptocócica no Estado de Sergipe apresentaram valores altos de concentração inibitória mínima (CIM) para os agentes antifúngicos testados, o que simboliza alta taxa de resistência, principalmente à Anfotericina B e ao Fluconazol. Em relação ao mating type sexual foi evidenciando que a maioria das linhagens clínicas foi identificada como MAT, confirmando o caráter de virulência que esta levedura desenvolve. Entretanto, no isolados ambientais o MATa foi mais prevalente, evidenciando o caráter menos virulento destas linhagens frente às de origem clínica. Cryptococcus neoformans foi a única espécie amplificada por PCR fingerprinting. Houve presença, dentre as amostras locais, de três perfis genéticos distintos epertencentes a uma mesma espécie. _________________________________________________________________________________________ ABSTRACT: Cryptococcus neoformans species complex are opportunistic fungi that cause meningitis in both immunocompetent patients and in healthy individuals. This work aimed to study the species of circulating Cryptococcus neoformans species complex isolated from northeastern Brazil from both the CSF (cerebrospinal fluid) of patients with infectious meningitis as various environmental substrates. Samples of CSF were received at IPH/HEMOLACEN/SE in the period 2001 to 2007. Were carried out 104 environmental samples within the state of Sergipe, of which 55 were obtained from the feces of birds and four stool samples collected from bat caves. The other samples were obtained from plant materials, totaling 45 samples: 21 from Eucalyptus spp., eight from material of decomposing trunks of plants, 10 from plant collected in two squares, six from Anacardium occidentale L. - (Cashew). CSF was examined by direct microscopy by staining with Indian ink and cultured in Sabouraud agar with chloramphenicol at 25 °C and 37 ºC. In the period from 2005 to 2007 were obtained from 141 environmental isolates and35 clinical isolates of Cryptococcus neoformans species complex. Ecological and epidemiological inferences were determined. In addition characteristics of isolates were carried out by tests for presumptive phenotypic identification, through Niger medium and species into the CGB test, sensitivity to the antifungal, enzymatic characterization of biotypes of interest and/or marker lines, determining sexual mating type using PCR and PCR Fingerprintig with primer M13. Among the strains of Cryptococcus spp. isolated from CSF of patients with infectious meningitis in the state of Sergipe, in the period from 2001 to 2009, prevaled the species C. neoformans. Among the environmental strains, only one sample of 140, was identified as C. gattii. All samples from thefeces of birds were positive in the isolation of yeast. Clinical isolates ofCryptococcus neoformans and C. gattii originating from patients withcryptococcal meningitis in the state of Sergipe exhibited higher values ofminimum inhibitory concentration (MIC) to the antifungal agents tested, which symbolizes high rate of resistance, especially to amphotericin B and fluconazole. In relation to sexual mating type was evident that most of the clinics were MAT strains, confirming the character of virulence of this yeast. However, among the environmental isolates the MATa was more prevalent, showing the character of these less virulent strains. Cryptococcus neoformans was the only species amplified by PCR fingerprinting. There was a presence among the local samples of three different genetic profiles belonging to the same species.