Orientadores: Laura Sterian Ward, José Vassallo / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-20T01:32:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Cunha_LucasLeite_M.pdf: 2465982 bytes, checksum: a87a268c547961632aa1f42747034935 (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: O câncer de tireoide é a neoplasia endócrina mais comum. O objetivo geral deste projeto é investigar o padrão de expressão gênica e protéica de tumores resistentes e suscetíveis à ativação do sistema imunológico, bem como pesquisar evidências de mecanismos de evasão tumoral da resposta imune. Foram investigados 398 pacientes cujas amostras de tecidos foram mantidas no banco de tecidos do Hospital A.C.Camargo, São Paulo, sendo 253 carcinomas papilíferos, 13 carcinomas foliculares e 132 tumores benignos. O perfil de expressão protéica dos tumores foi avaliado por imunoistoquímica e a infiltração de células do sistema imunológico foi caracterizada por meio de marcadores imunoistoquímicos. Tiroidite linfocítica crônica concomitante ao câncer foi mais freqüente entre as mulheres, em tumores menos agressivos que não apresentavam invasão extratireoideana ou metástases ao diagnóstico, e em tumores pequenos, menores que 2 cm. O teste de log-rank mostrou que a presença de Tiroidite linfocítica crônica concomitante ao câncer está associada ao maior tempo livre de doença. A infiltração de macrófagos foi mais freqüente entre as mulheres e foi associado à maior tempo de sobrevida livre de recidiva. A infiltração de linfócitos CD3+ se correlacionou à malignidade e está associada à presença de metástases ao diagnóstico. As infiltrações de linfócitos CD4+ e CD20+ foram relacionadas às características de melhor prognóstico e a infiltração de linfócitos CD8+ pode ser um marcador de melhor prognostico. A expressão da proteína CD56 foi mais freqüente entre os tecidos benignos e não está associada ao prognóstico dos pacientes com carcinoma diferenciado de tireóide. Por sua vez, a infiltração de linfócitos FoxP3+ se correlacionou a características de menor agressividade tumoral. A expressão de RNAm B7-H1 foi característica de tecidos malignos e a proteína B7-H1 apontou um comportamento mais agressivo dos carcinomas. Tanto a infiltração de linfócitos Th17 e quanto células supressoras derivadas da linhagem mielóide foram mais freqüentes entre os tumores malignos, ainda que somente a infiltração de Th17 se correlacionasse a características de melhor prognóstico. Nossos dados sugerem que o carcinoma diferenciado de tireóide seja ricamente infiltrado por um conjunto de diferentes células do sistema imunológico. Provavelmente esta infiltração é dependente do padrão de expressão gênica e protéica destes cânceres, padrão este que pode refletir a imunogenicidade destes tumores. Mais ainda, a associação entre a infiltração destas células e características de melhor prognóstico, sugere que exista uma resposta imunológica ativa paramentada contra o carcinoma diferenciado de tireóide capaz de exercer papel antitumoral / Abstract: Thyroid cancer is the most common endocrine malignancy. The objective of this project is to investigate the pattern of gene and protein expression of tumors resistant and susceptible to activation of the immune system as well as research evidence tumor evasion mechanisms of the immune response. We investigated 398 patients whose tissue samples were kept in the tissue bank ACCamargo Hospital, São Paulo, with 253 papillary carcinomas, 13 follicular carcinomas and 132 benign tumors. The protein expression profile of tumors was assessed by immunohistochemistry and the infiltration of immune cells was characterized by immunohistochemical markers. Chronic lymphocytic thyroiditis concurrent to cancer was more frequent among women, less aggressive tumors that did not have extra thyroid invasion or metastases at diagnosis, and small tumors smaller than 2 cm. The log-rank test showed that the presence of chronic lymphocytic thyroiditis concurrent to cancer was associated with longer relapse-free. Macrophage infiltration was more frequent among women and was associated with relapse-free survival. The infiltration of CD3+ lymphocytes correlates with malignancy and is associated with the presence of metastases at diagnosis. The infiltration of CD4+ and CD20+ were related to the better prognosis. The infiltration of CD8+ lymphocytes may be a marker of better prognosis. The CD56 protein expression was more frequent among benign tissues and is not associated with prognosis of patients with differentiated thyroid carcinoma. The infiltration of FoxP3+ lymphocytes correlated with less aggressive tumor characteristics. The mRNA expression of B7-H1 was characteristic of malignant tissues and B7-H1 protein could point to a more aggressive behavior of the differentiated thyroid carcinoma. Both the infiltration of Th17 lymphocytes and the myeloid derived suppressor cells were more frequent in malignant tumors, although only the infiltration of Th17 correlated with features of better prognosis. Our data suggest that differentiated thyroid carcinoma is enriched by a number of different immune cells. Probably this infiltration is dependent on the pattern of gene and protein expression of these cancers, a pattern that may reflect the immunogenicity of these tumors. Moreover, the association between these cells and infiltration characteristics of better prognosis, suggests that there is an active immune response against attired differentiated thyroid carcinoma can exert antitumor / Mestrado / Ciencias Basicas / Mestre em Clinica Medica

京都大学 / 0048 / 新制・課程博士 / 博士(医学) / 甲第22337号 / 医博第4578号 / 新制||医||1041(附属図書館) / 京都大学大学院医学研究科医学専攻 / (主査)教授 佐藤 俊哉, 教授 福原 俊一, 教授 鈴木 実 / 学位規則第4条第1項該当 / Doctor of Medical Science / Kyoto University / DFAM

Submitted by Rosina Valeria Lanzellotti Mattiussi Teixeira (rosina.teixeira@unisantos.br) on 2019-01-23T19:10:52Z No. of bitstreams: 1 Adriana Duarte M. Queiroz.pdf: 895696 bytes, checksum: 1f1af189f22327c9526a39e8514a1ccc (MD5) / Made available in DSpace on 2019-01-23T19:10:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Adriana Duarte M. Queiroz.pdf: 895696 bytes, checksum: 1f1af189f22327c9526a39e8514a1ccc (MD5) Previous issue date: 2018-11-12 / Atualmente o carcinoma de tireoide (CT) vem apresentado um crescimento da taxa de incidência na maioria dos países (cerca de 1% ao ano). A incidência anual varia entre as populações, mas encontra-se entre 2-3 casos/100 mil homens e 4-9 casos/100 mil mulheres. Para a Paraíba, a estimativa do Instituto Nacional do Câncer para o biênio 2018-2019 é de 5,88/100.000 para mulheres e 2,08/100.000 em homens. Objetivo: Verificar a relação entre fatores clínico-epidemiológicos dos pacientes com carcinoma diferenciado da tireoide (CDT) atendidos em um hospital de referência no Estado da Paraíba e risco de recorrência da doença. Métodos: Tratou-se de um estudo transversal, realizado através da coleta de dados obtidos de prontuários dos pacientes com CDT atendidos na Fundação Assistencial da Paraíba (FAP) entre abril de 2011 a abril de 2018. Foram considerados fatores de risco: história de exposição ocupacional a substâncias ou à radiação ionizante, tabagismo, presença de doença autoimune da tireoide (DAT), neoplasia maligna prévia e história familiar de câncer de tireoide. Foi utilizado o teste de Qui-quadrado para associação de variáveis qualitativas e para análise dos possíveis fatores associados foram utilizados modelos de regressão logística com nível de significância de 5%. Resultados: Foram selecionados 284 pacientes, a maioria do sexo feminino (86,6%), com idade média de 46,3±14,4 anos, cerca de 40% dos indivíduos eram agricultores, 70,6% não referiam exposição ocupacional e 97,6% não referiram exposição à radiação. Quarenta e três (20%) referiam história familiar de CT e 75,7% não apresentavam DAT. A variante papilífero clássica do CDT foi a mais prevalente (69,4%) e 32,7% dos CDT eram multifocais. Na avaliação de risco de recidiva, 98 (34,5%) apresentaram com risco intermediário e 43 (15,1%) com alto risco. A análise univariada identificou ¿idade¿ (OR=1,05; IC=1,046-2,723; p=0,031), ¿zona de moradia¿ (OR=1,87; IC=1,10-3,17; p=0,02), ¿exposição à agrotóxicos¿ (OR=2,03; IC=1,135-3,618; p=0,016), ¿DAT¿ (OR=5,63; IC=1,204-26,351; p=0,045), ¿subtipos histológicos de maior agressividade¿ (OR=5,12; IC=1,037-25,28; p=0,001) e ¿tumor multifocal¿ (OR=2,56; IC=1,527-4,278; p=0,001) como fatores de risco para recidiva, contudo na análise múltipla final, apenas subtipo histológico mais agressivo, exposição ocupacional e tumor multifocal mostraram-se estatisticamente significantes. Discussão: Alguns resultados desse estudo são concordantes com os dados encontrados na literatura como idade ao diagnóstico, maior prevalência do sexo feminino e da variante papilífero clássica do CDT. Na regressão múltipla, tumores multifocais e variantes consideradas mais agressivas também foram concordantes. Apesar da exposição ocupacional mostrar associação estatisticamente significante com risco de recidiva, esse estudo apresenta limitação quanto ao desenho pois exposição e doença não são condições contemporâneas e não foi mensurado o tempo de exposição e se há presença de contato atual ou passado com as substâncias. Conclusão: Variantes histológicas mais agressivas e tumores multifocais são fatores de risco para recidiva da doença. Exposição ocupacional a agrotóxicos apresenta controvérsias quanto a esse risco, portanto novos estudos são necessários para esclarecer essa relação. / Currently thyroid carcinoma (TC) has shown an increase in the incidence rate in most countries (about 1% per year). The annual incidence varies among populations, however it is between 2-3 cases / 100,000 men and 4-9 cases / 100,000 women. In the context of Paraíba, the National Cancer Institute's estimate for the biennium 2018-2019 is 5.88 / 100,000 for women and 2.08 / 100,000 for men. Objective: To verify the relationship between clinical and epidemiological factors of patients with differentiated thyroid carcinoma (DTC) treated at a reference hospital in the state of Paraíba, and risk of recurrence of the disease. Methods: The present paper presents a cross-sectional study, carried out through the collection of data obtained from the medical records of patients with DTC attended at Fundação Assistencial da Paraíba (FAP) from April 2011 to April 2018. It were considered risk factors as: history of occupational exposure to substances or ionizing radiation, smoking, presence of autoimmune thyroid disease (AITD), previous malignant neoplasm, and family history of thyroid cancer. It was used the Chi-square test for the association of qualitative variables and it were used logistic regression models with a significance level of 5% for analysis of possible associated factors. Results: 284 patients were selected, most of them female (86.6%), with an average age of 46.3 ± 14.4 years; about 40% of the individuals were farmers; 70.6% did not report occupational exposure; and 97.6% did not report radiation exposure. Forty-three (20%) reported a family history of TC and 75.7% did not present DTC. The classical variant papillary of DTC was the most prevalent (69.4%) and 32.7% of DTCs were multifocal. In the evaluation of risk of relapse, 98 (34.5%) presented intermediate risk and 43 (15.1%) high risk. The univariate analysis identified ¿age¿ (OR=1,05; IC=1,046-2,723; p=0,031), "dwelling zone" (OR=1,87; IC=1,10-3,17; p=0,02), "pesticides exposure" (OR=2,03; IC=1,135-3,618; p=0,016), "AITD" (OR=5,63; IC=1,204-26,351; p=0,045), "histological subtypes of greate aggressiveness" (OR=5,12; IC=1,037-25,28; p=0,001) and "multifocal tumor" (OR=2,56; IC=1,527-4,278; p=0,001) as risk factors for recurrence, nevertheless in the final multiple analysis, only more aggressive histological subtype, occupational and multifocal tumor were statistically significant. Discussion: Some results of this study are consistent with the data found in the literature such as age at diagnosis, higher prevalence of females and the classical variant papillary of DTC. In the multiple regression, multifocal tumors and variants considered more aggressive were also concordant. Regardeless of occupational exposure shows a statistically significant association with risk of recurrence, this study has a limitation concerning the design since exposure and disease are not contemporary conditions, the time of exposure was not measured, and also if there is presence of current or past contact with the substances. Conclusion: More aggressive histological variants and multifocal tumors are risk factors for recurrence of the disease. Occupational exposure to agrochemicals presents controversies regarding this risk, therefore new studies are needed to clarify this relationship.

Orientadores: Laura Sterian Ward, Alfio Jose Tincani / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas. Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-15T22:19:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Araujo_PriscilaPereiraCosta_M.pdf: 1297912 bytes, checksum: 19cfc4774cb3ee3c6b79a18cfc0b0a7f (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: Introdução: O câncer de tireóide é a neoplasia endócrina mais comum em humanos, correspondendo a cerca de 1% de todos os tumores malignos. A presença de nódulos em tireóide é bastante comum, principalmente em mulheres acima dos 60 anos. O gene BRAF está sabidamente implicado na origem dos carcinomas da variante papilífera. Sua mutação BRAFV600E tem sido frequentemente relacionada ao grau de agressividade do tumor e ao prognóstico dos pacientes. Apesar do papel da expressão deste gene ser bem estabelecida como um importante iniciador da via de sinalização MAP quinase, sua relação a suscetibilidade ao câncer e o prognóstico clínico dos doentes é ainda pouco compreendida. O objetivo deste trabalho foi mensurar a expressão do gene BRAF numa determinada população portadora de nódulos de tireóide, de modo a correlacionar estes achados com o prognóstico clínico ao seguimento, bem como verificar retrospectivamente as implicações diagnósticas de sua ocorrência. Material/Métodos: Foram determinados os níveis de expressão relativa do tipo selvagem de BRAF e da mutação hot spot BRAFV600E através de tecidos coletados a fresco, utilizando-se a técnica de PCR quantitativa em tempo real (qRT-PCR) e PCR convencional com a utilização de enzimas de restrição (cDNA - PCR-RFLP - restriction fragment length polymorphism) em uma população inicial de 166 pacientes portadores de nódulos de tireóide, dos quais foram selecionados para estudo 32 portadores de carcinomas papilíferos e 35 com nódulos benignos, todos submetidos a tireoidectomia total e seguidos por até 56 meses (média de 21,3±12,45 meses). Neste material foram feitas comparações entre os parâmetros clínicos e referentes ao tumor já bem estabelecidos para o carcinoma bem diferenciado de tireóide. Resultados: Dos 32 pacientes portadores de carcinomas papilíferos, 28 (87,5%) eram do sexo feminino e um paciente apresentou recorrência local (3,1%). A mutação de BRAF foi identificada em nove pacientes (28,1%). Dos 35 pacientes portadores de nódulos benignos, sete (20%) eram portadores de adenomas foliculares e 28 (80%) correspondiam a bócios atóxicos multinodulares. Vinte e sete pacientes (77,1%) eram do sexo feminino. Estes 35 pacientes tiveram sua expressão de BRAF mensurada de modo a realizar estudo comparativo. A expressão de BRAF distinguiu entre nódulos benignos e malignos com uma sensibilidade de 80,6%, especificidade de 77,1% e acurácia de 78,8%. Verificou-se um risco para malignidade aumentado em 14 vezes quando a expressão de BRAF era acima do ponto de corte de 4,7 unidades arbitrárias (UA). Não houve correlação significativa entre a expressão de BRAF (excluídos os casos portadores da mutação) e sobrevida (r=0,54; p =0,007). Conclusão: Conclui-se que a quantificação da expressão de BRAF pode ser útil no diagnóstico de nódulos malignos. Nódulos com expressão de BRAF acima do ponto de corte (4,712 UA) apresentam 14 vezes mais risco para malignidade. Não houve correlação significativa entre a expressão de BRAF e sobrevida na amostra estudada. / Abstract: Background: Thyroid cancer is the most common endocrine malignancy, corresponding to 1% of all human neoplasms. Thyroid nodules are very frequent, mainly in women over 60 years. The relationship of BRAF gene with papillary thyroid tumorigenesis is well recognized in the literature. Its BRAFV600E mutation has been related to tumor aggressiveness and patients' prognosis. Despite the role of BRAF gene expression as an important MAPK pathway promoter, its relationship to patients' cancer suscetibility and clinical outcome is still poorly understood. The objective of this thesis was to measure mRNA BRAF expression in a determined population harboring thyroid nodules, in order to correlate these findings with prognosis at follow up, as well as to verify retrospectively the clinical importance of its ocurrence. Material/Methods: We determined the relative expression levels of wildtype BRAF and BRAFV600E mRNA obtained from fresh tissue samples collected by quantitative PCR (qRT-PCR) and cDNA-PCR-RFLP (restriction fragment length polymorphism) in a population of 166 thyroid nodule patients, in which 32 papillary thyroid cancer patients were selected for study as well as 35 patients harboring benign nodules, all submitted to total thyroidectomy and followed up to 56 months (21,3±12,45 months on average). Comparisons were made to well-recognized determinants in differentiated thyroid cancer. Results: Twenty-eight (87.5%) of 32 papillary thyroid carcinoma patients were female and one presented local recurrence at follow up (3,1%). BRAF hot spot mutation was identified in nine patients (28,1%). Of the 35 patients harboring benign nodules, seven (20%) comprehended follicular adenomas and 28 (80%) were multinodular goiters. Twenty-seven patients (77,1%) were female. These 35 patients had BRAF expression measured in order to perform a comparative study, in which BRAF expression distinguished benign and malignant nodules with a sensitivity of 80.6%, specificity of 77.1% and an accuracy of 78.8%. A 14-times increased risk for malignity was observed when BRAF expression was above the cut-off point of 4,712 arbitrary units (AU). There was not a significant correlation among BRAF expression (when mutation was excluded) and survival (r=0,54; p=0,007). Conclusion: We concluded that the quantification of BRAF expression may be useful for diagnosing malignant nodules. Nodules with BRAF expression higher than the cut-off point of 4,712 UA harbored a 14-times increased risk for malignity. There was not a significant correlation among BRAF expression and survival at this sample. / Mestrado / Clinica Medica / Mestre em Clinica Medica