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Associação entre o exame clínico andrológico e testes de viabilidade espermática, integridade de acrossoma e fragmentação de cromatina para determinar a qualidade seminal de touros / Association between clinical andrologic examination and tests of spermatic viability, integrity of acrosome and fragmented chromatin to determine seminal quality of bullsSilva, Rogério Orfaly Addad da 08 December 2006 (has links)
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Previous issue date: 2006-12-08 / Thirty six Nelore bulls with age between 30 and 120 months were used to evaluation of the seminal quality and the reproductive aptitude. The animals had been kept in extensive conditions, with feeding the grass, receiving mineral supplementation and serving a herd with 3,782 females of some categories (heifers and cows). Data enclosed measured of scrotal circumference and evaluation of the semen collected by eletroejaculation and evaluated the physical characteristics (volume, mass activity, motility, strong), morphologic (major, minor and total defects) and spermatic structure integrity (integrity of plasmatic membrane, acrosome and chromatin) in this period had been carried through that preceded three consecutive mating season (2003, 2004 and 2005). The data had been submitted analyze of variance, the averages compared for test SNK and the coefficient of correlation of Pearson was calculated using the SAS. The bulls presented scrotal circumference of 33.8 ± 2.8cm, 15.6 ± 8.5% of total spermatic defects, 40.1 ± 23.1% of gametes with normal membrane and acrosome and 8.8 ± 3.8% of fragmented chromatin. The relations between scrotal circumference, physical and morphologic characteristics, spermatic integrity and the reproductive performance of the herd had been low and not significant (P< 0.05). In sexually mature bulls the integrity of plasmatic membrane, acrosome and nuclear chromatin had not been the most frequent trouble of the spermatic morphology. / Foram utilizados 36 touros da raça Nelore com idade entre 30 e 120 meses, para avaliação da qualidade seminal e da aptidão reprodutiva. Os animais foram mantidos em condições extensivas, com alimentação a pasto, recebendo suplementação mineral e servindo um rebanho com 3782 fêmeas de várias categorias (novilhas, vacas primíparas e pluríparas). Foram realizadas colheitas de dados que abrangiam medidas de circunferência escrotal e avaliação do sêmen colhido por eletroejaculação e avaliadas as características físicas (volume, turbilhonamento, motilidade, vigor), morfológicas (defeitos maiores, menores e totais) e de integridade espermática (integridade de membrana plasmática, de acrossoma e de cromatina) no período que antecedeu três estações de monta consecutivas (2003, 2004 e 2005). Os dados foram submetidos a analise de variância, as médias comparadas pelo teste SNK e o coeficiente de correlação de Pearson foi calculado utilizando o SAS. Os touros apresentaram circunferência escrotal de 33,8 ± 2,8cm, 15,6 ± 8,5% de defeitos espermáticos totais, 40,1 ± 23,1% de gametas com membrana e acrossoma íntegros e 8,8 ± 3,8% de cromatina fragmentada. As relações entre circunferência escrotal, as características físicas, morfológicas e de integridade espermática e o desempenho reprodutivo do rebanho foram baixas e não significativas (P>0,05). Em touros sexualmente maduros a integridade de membrana plasmática, acrossoma e fragmentação de cromatina nuclear não foram os distúrbios mais freqüentes da morfologia espermática.
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Efeito de atributos espermáticos na produção in vitro de embriões bovinos / Effect of sperm traits on bovine in vitro productionAdriano Felipe Perez Siqueira 31 May 2016 (has links)
A produção in vitro de embriões (PIVE) bovinos é uma ferramenta importante na reprodução animal, com aplicações acadêmicas e comerciais, e com grande relevância econômica. Apesar da sua aplicabilidade, a eficiência da PIVE ainda pode ser aumentada. Efeitos espermáticos podem ser evidenciados no desenvolvimento embrionário durante a PIVE apresentando grandes variações nas taxas de produção. Devido ao aspecto multifatorial da fertilidade, as avaliações espermáticas apresentam resultados inconstantes, mesmo com o uso de métodos mais precisos de análise como a citometria de fluxo, combinada às sondas fluorescentes, que permitem avaliar maior número de espermatozoides e de atributos simultaneamente. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito de atributos espermáticos (motilidade antes e após gradiente de Percoll®, integridade de membranas plasmática e acrossomal, alto potencial de membrana mitocondrial e resistência da cromatina) de maneira individual, (diferença para apenas para um atributo espermático) e de maneira combinada em perfis espermáticos (diferença para todos os atributos espermáticos simultaneamente). O efeito foi avaliado por meio das taxas de clivagem, blastocisto e eficiência de desenvolvimento embrionário (taxa de blastocisto/taxa de clivagem). Os resultados demonstraram que os atributos motilidade prévia ao Percoll®, a integridade da membrana acrossomal e o potencial de membrana mitocondrial, individuais, apresentam efeito negativo sobre as taxas de desenvolvimento embrionário e de blastocisto. A motilidade após o gradiente de Percoll®, a integridade da membrana plasmática e a resistência da cromatina, bem como a combinação de todos os atributos espermáticos analisados, sob mesmas condições, não apresentaram efeito sobre a PIVE. Deste modo, conclui-se que controversamente alguns atributos espermáticos podem apresentar efeitos negativos sobre as taxas da PIVE e que a função e interação de atributos espermáticos com o processo in vitro devem ser mais bem compreendidas, a fim de permitir o aprimoramento deste processo podendo aumentar as taxas de produção, maximizando a eficiência da PIVE. / In vitro production (IVP) of bovine embryos is an important technology of animal reproduction. This technology is applied on research and livestock, with economic highlights, however IVP efficiency could be higher, and can be influenced by male effects. Until now, sperm evaluations had failed to determine these male effects, even using advanced technologies such as large mix of fluorescent probes by flow cytometry analysis, which evaluates a large number of sperm cells and traits simultaneously. Then, the aim of this study was to determine the effect of sperm traits (motility before and after Percoll® selection, plasma membrane and acrosome integrity, high mitochondrial membrane potential, and chromatin structure) on IVP rates. Effect of each trait was enriched to evaluate the individual trait effect (differences between groups of bulls exclusively for the enriched trait, while others traits was homogenous). Combined effect of traits was also evaluated (differences between groups of bulls, and groups of batches from same bulls, for all traits simultaneously, generating a sperm profile). Enriched and combined effects were evaluated on cleavage, blastocyst and embryo development (blastocyst/cleavage) rates. Results showed that motility before Percoll® selection, acrosome integrity, and high mitochondrial membrane enriched effects had negative impact on blastocyst and embryo development rates. Motility after Percoll® selection, plasma membrane integrity, chromatin structure, and combined effects were not significant on IVP rates. We can conclude that controversially, some sperm traits could have a negative effect on IVP outcomes, thereafter sperm traits physiology and interactions with in vitro systems must be better understood to enhance in vitro fertilization conditions, increasing IVP yields.
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Efeitos da disponibilidade de sombra na pastagem sobre as características reprodutivas de touros da raça Nelore / Effects of the overshadow availability at pasture on the reproductive characteristics in Nelore BullsOctavio Fabián Bao Tarragó 15 July 2009 (has links)
Sabe-se que a principal causa da diminuição do desempenho reprodutivo de um touro é o estresse térmico levando conseqüentemente à degeneração testicular. Esta alteração patológica poderá ocorrer mesmo nos animais zebuínos. O objetivo deste experimento foi verificar os efeitos da disponibilidade de sombras na pastagem sobre as características reprodutivas de touros da raça Nelore. Foram utilizados 10 touros com idades de 26 ± 2 meses. Previamente ao início do experimento, os animais foram mantidos durante 30 dias em regime de colheita de sêmen a cada 15 dias para avaliação das características físicas e morfológicas. Então, logo após, os animais foram classificados segundo um índice que representou a soma dos valores das características espermáticas e distribuídos uniformemente em dois grupos ou tratamentos experimentais: Com Sombra (CS) e Sem Sombra (SS). No grupo CS, cinco (5) animais foram colocados em um piquete (2 hectares) com área de sombra, consistente em Sombrites de polietileno com 90% de retenção da luz solar, com 10 m2 de sombra por animal. No grupo SS, os outros cinco (5) animais permaneceram em outro piquete (2 hectares) porém, não tiveram acesso à área de sombra. Foram realizadas colheitas de sêmen de cada animal a cada 15 dias, durante quatro (4) meses, bem como, mensurações do perímetro escrotal e da consistência testicular. Logo após a colheita, o sêmen foi avaliado quanto ao volume, concentração, parâmetros de motilidade espermática por sistema computadorizado (CASA Computer Assisted Semen Analysis), alterações morfológicas por contraste de interferência diferencial (DIC), integridade das membranas plasmáticas, acrossomal e função mitocondrial por microscopia de epifluorescência. Os dados obtidos dos procedimentos experimentais foram analisados utilizando o programa estatístico Statistical Analysis System (SAS Institute Inc., 2004). Não foram observadas diferenças estatísticas significativas (P>0.05) em nenhuma das características reprodutivas estudadas quando touros da raça Nelore foram submetidos aos ambientes com ou sem sombra. / It is known that heat stress is the main cause that affects bulls reproductive performance, consequently leaded to testicular degeneration. This pathologic alteration can also occur in Bos Indicus cattle. The objective of this experiment was verify the shadow availability effect at pasture on reproductive characteristics in Nelore, a Bos Indicus bull. For this work, 10 bulls with ages of 20 ± 10 months were used. A month before the experiment started, semen samples were collected each 15 days for physical and morphological sperm evaluation. After this, animals were classified with a score according to the sperm characteristics values sum and then distributed in two groups: with Overshadow (CS) and without Overshadow (SS). In the group CS, 5 animals were kept in a picket (2 ha), with a 10 m2 shaded area per animal, consisted in a polyethylene filter with 90% solar light retention. In the group SS, the others 5 animals were placed in another picket (2 ha) with no access to shaded area. Semen collection, scrotal perimeter and testicular consistence measures ocurred every 15 days, for a 4 months period After collection, semen samples were submitted to following analysis: volume, sperm concentration, sperm motility by computer system (CASA - Computer Assisted Semen Analysis), morphological defects using differential interference contrast (DIC), plasmatic acrossomal membrane integrity and mitochondrial function by epifluorescence microscopy. Data obtained from experimental proceedings were analyzed by Statistical Analysis System program (SAS Institute Inc., 2004). It wasn´t find any statistical differences (P>0,05) in reproductive characteristics, when Nelore bulls were kept under envirormental conditions with or without overshadow.
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Avaliação do comportamento sexual em touros da raça Nelore (Bos taurus indicus): comparação entre os testes da libido feitos em curral e comportamento sexual a campo / Evaluation of the sexual behavior in bulls of the race Nelore (Bos taurus indicus): comparison among libido tests performed in corral and sexual behavior at fieldOliveira, Cleber Barbosade 07 December 2000 (has links)
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Previous issue date: 2000-12-07 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O experimento foi conduzido na Fazenda Mundo Novo, município de Brotas - SP, de outubro de 1999 a março de 2000. Os objetivos foram determinar a eficiência do teste da libido realizado em curral, comparando-o ao teste realizado a campo, e relacioná-los à taxa de gestação em estação de monta de 120 dias; testar a tabela de classificação da libido proposta pelo CBRA (1998), para animais da raça Nelore (Bos taurus indicus); propor modificações no teste, e confirmar a relação comportamento sexual/aspectos físicos e morfológicos do sêmen. Foram utilizados 13 touros, todos classificados como aptos à reprodução, avaliados por exame andrológico (exame biométrico dos órgãos sexuais e exame físico e morfológico do sêmen e avaliação clínica), e submetidos ao teste da libido em curral, por 3 h. Destes, 9 touros foram submetidos à avaliação a campo, com proporção touro/vaca 1:33. A cada 21 dias, foi diagnosticada a gestação por ultra-sonografia. Observou-se que, quanto maior o tempo de teste, maiores foram os escores de classificação, sendo que nenhum touro conseguiu efetuar serviço completo dentro dos 10 minutos do teste. Touro classificado como muito bom teve 84,80% de prenhez, porém touros questionáveis tiveram 86,67% e 96,55% ao final da estação. As correlações entre características físicas e morfológicas do sêmen ficaram próximas de zero ou nulas (p>0,05). Os touros reconhecem a fêmea que está em estro pelo ato de cheirar ou lamber o corpo da fêmea, cheirar ou lamber a vulva, seguindo-se ou não o reflexo de Flehmen. A receptividade das fêmeas é testada e os machos efetuam o coito precedido por eventos tais como exposição de pênis, reflexo de monta, tentativa de monta, monta abortada e serviço completo ou cópula. / The experiment was carried out during the period from October 1999 to March 2000 in Fazenda Mundo Novo, Brotas county - SP. The objectives were: to determine the efficiency of the libido test performed in corral, by comparing it to the one accomplished at field, as well as to relate them to the gestation rate over a reproductive period of 120 days; to test the libido classification table proposed by CBRA (1998) for animals of the race Nelore (Bos taurus indicus); to propose modifications for the test and confirm the relationship sexual behavior/ physical and morphologic aspects of the semen. Thirteen bulls were used, all being classified as reproductors and evaluated by breeding soundness evaluation (sexual organ biometric evaluation, and physical and morphologic evaluation of the semen and clinical evaluation), and submitted to the libido test for 3 hours in corral. From these, nine bulls were submitted to the evaluation at field, with a bull/cow proportion of 1:33. At every 21 days, the gestation was diagnosed by ultrasonographic test. It was observed that as longer was the test time as higher were the classification scores, and no bull was able to perform a complete mating service within 10 minutes under testing. The bull classified as xiiivery good showed a conception rate of 84.80%, while the questionable bulls showed 86.67% and 96.55% at the end of the mating period. The correlation among physical and morphologic characteristics of the semen were close to zero or null (p>0.05). The bulls do recognize the female being in oestrous by either the act of smelling or licking the female body or smelling or licking the vulva, following or not the Flehmen reflex. The receptivity of the females is tested and the males perform the coitus preceded by some events such as: penis exhibition, mating reflex, mating attempt, aborted mating) and complete mating service or copulation.
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Análise quantitativa da imagem ultra-sonográfica de testículos de bovinos jovens da raça NeloreCardilli, Diogo José [UNESP] 27 February 2008 (has links) (PDF)
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cardilli_dj_me_jabo.pdf: 1854352 bytes, checksum: c87bee660fac9140ecfc34f52d06f40d (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O exame ultra-sonográfico dos testículos é um método não invasivo e rápido, que aliado aos dados de exame clínico, pode conduzir ao diagnóstico precoce de desordens desse órgão, no entanto, a análise da imagem é subjetiva, pois depende do examinador. Sendo assim, instituir valores aos diferentes tons da escala de cinza possibilita a determinação quantitativa do padrão de normalidade para o parênquima testicular. O objetivo do trabalho é avaliar o aspecto ultra-sonográfico e analisar quantitativamente as imagens dos testículos de bovinos jovens da raça Nelore, e estabelecer parâmetros e padrões fisiológicos normais. Foram realizados exames ultrasonográficos dos testículos de 130 bovinos hígidos da raça Nelore, sendo 19 animais da fazenda 1 e 111 animais da fazenda 2. Os animais da fazenda 1 foram avaliados em cinco momentos: aos nove, 11, 13, 15 e 18 meses; ao passo que os da segunda foram avaliados aos nove, 13 e 15 meses. Com o auxílio do software “Echo Image Viewer” (EIV), foram selecionadas regiões de interesse (RI) em cada plano de varredura, assim denominadas: frontal direita (RIFD); frontal esquerda (RIFE); transversal direita (RITD); transversal esquerda (RITE). Automaticamente o software EIV calculou a média da escala de cinzas, a qual variou de 0 a 100%, sendo 0% preto (menor ecogenicidade) e 100% branco (maior ecogenicidade). O teste de Tukey foi empregado para comparar as médias das RI dentro e entre cada momento (p<0,05) utilizando-se o programa estatístico SAS (2001). A ecogenicidade testicular aumentou com o passar da idade nos animais de ambas as fazendas. Touros púberes apresentaram maior ecogenicidade testicular que os impúberes com a mesma idade. A cauda do epidídimo mostrou-se menos ecogênica que o parênquima testicular. A espessura do mediastino testicular, o volume testicular e o perímetro escrotal aumentaram com o passar da idade... / The ultrasononographic examination of testicles is a noninvasive and rapid method that, allied to clinical examination, can lead to an early diagnostic of testicles disorders, however, the image’s analysis is subjective, because it depends on the professional. To institute values to different tones of gray scale aloud, then, a quantitative determination of normality’s standard to testicular parenchyma. The aim of that study is to evaluate the ultrasonographic´s aspect and analyse in a quantitative way the images of young Nelore bovine’s testicles, and to establish normal and physiological parameters and standards. Ultrasonographic examinations of 130 healthy Nelore bovines were realized, 19 in farm 1 and 111 in farm 2. The animals of farm 1 were evaluated in five moments: at nine, 11, 13, 15 and 18 months; and the animals of farm 2 were evaluated at nine, 13 and 15 months. With the support of the software “Echo Image Viewer” (EIV), interesting areas (IA) were selected in each plane, forward denominated: right frontal (IArf), left frontal (IAlf), right transversal (IArt), left transversal (IAlt). Automatically the EIV software calculated the gray scale average, on a scale of 0 (black, the less echogenicity) to 100% (white, the most echogenicity). The Tukey test were used to compare the IA`s averages in and between each moments (p<0,05) using the SAS statistic program (2001). The testicular echogenicity increased along the ages on both farm’s animals. Bulls at puberty showed bigger testicular echogenicity than bulls not at puberty with the same age. The tail of epididymis showed less echogenicity than testicular`s parenchyma. The thickness of mediastinum testis, testicular volume and scrotal circumference increased along the ages and positive correlations were found between testicular echogenicity, testicular volume and scrotal circunference.
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Inovações metodológicas na congelação de sêmen bovinoAlberti, Karina [UNESP] 23 February 2007 (has links) (PDF)
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alberti_k_me_botfmvz.pdf: 429138 bytes, checksum: 5c7610a2c5faf82b82e472d5ee545e50 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Dentre as biotecnologias de reprodução que visam acelerar os ganhos genéticos e econômicos dos rebanhos, a congelação de sêmen desponta como uma das principais. O sêmen congelado bovino é utilizado em larga escala há anos e não houve grandes evoluções nas técnicas de congelação visando minimizar os efeitos deletérios do processo nos espermatozóides, colaborando ativamente para o incremento da fertilidade dos rebanhos. Neste trabalho propôs inovações nas técnicas de congelação utilizando uma nova formulação de meio diluente, a introdução da centrifugação para a remoção do plasma seminal pré-congelação e a determinação do tempo ideal de estabilização do sêmen. Foram realizados três experimentos; o primeiro testou o efeito de três diferentes meios diluentes, com ou sem a remoção do plasma seminal, no ejaculado de 40 touros diferentes. Nos resultados exibidos o diluente M20 foi superior (p<0,01) aos demais diluentes na maioria das variáveis pesquisadas a remoção do plasma seminal melhorou (p<0,01) os índices de congelabilidade do sêmen. Outro experimento foi a verificação dos tempos de 60, 120, 180 e 240 min. de refrigeração do sêmen a 5ºC. O tempo de 180 minutos foi o considerado o melhor para a congelabilidade após a verificação dos resultados. No teste de fertilidade foram inseminados 418 vacas e o grupo que foi inseminado com sêmen congelado com M20 sem plasma seminal obteve uma tendência de superioridade (0,05<p<0,10) aos demais grupos. Com os resultados dos experimentos concluiu-se que as inovações propostas por este estudo incrementam os índices de congelabilidade do sêmen bovino. / Semen freezing is considered as one of the main reproduction biotechnologies that aim to accelerate genetic and economical gains of herds. Frozen bovine semen has been used in large scale for years and there were not great evolutions in freezing techniques to minimize the deleterious effects of the process in spermatozoa, actively contributing for the increase in herds fertility. Innovations in freezing techniques were proposed in this work by using a new formulation of the extenders, introducing centrifugation for the removal of prefreezing seminal plasma and determining the appropriate time for semen cooled. Three experiments were carried out: 1) the effect of three different extenders was tested, with or without the removal of seminal plasma, in the ejaculate of 40 different bulls; results showed that the extender M20 was superior (p<0,01) in relation to the other extenders in most of variables studied. The removal of the seminal plasma improved (P<0,01) semen freezability indexes. 2) verification of 60, 120, 180 and 240 min. times for semen cooling at 5ºC; after results, the time of 180 minutes was considered the most appropriate for freezability. 3) fertility test: 418 cows were inseminated and the group with frozen semen with M20 without seminal plasma obtained a superiority tendency (0,05<p<0,10) in relation to the other groups. The results of the experiments concluded that the innovations proposed in this work increase freezability indexes of bovine semen.
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Avaliação in vitro do potencial de fertilidade de touros portadores ou não de aplasia segmentar da bainha mitocondrial / In vitro assessment of the potential fertility from bulls with the presence of segmental aplasia of the mitochondrial sheathDiaz Miranda, Edgar Andres 23 February 2018 (has links)
Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2018-06-28T16:55:35Z
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Previous issue date: 2018-02-23 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / O reprodutor tem grande importância na cadeia produtiva por possuir maior potencial de difusão do seu material genético dentro do rebanho que as fêmeas que produzem apenas uma cria por ano, em manejo de monta natural. Entretanto, este potencial somente se torna real quando os machos apresentam boa qualidade seminal, resultando em menores taxas de não retorno ao estro. Não há duvidas da importância da morfologia espermática na fertilidade de touros. Entre as anomalias espermáticas identificadas nos ejaculados de bovinos, a aplasia segmentar da bainha mitocondrial (ASBM) é classificada como defeito espermático maior, comprometendo a fertilidade dos reprodutores, pelo fato dos ejaculados apresentarem baixa motilidade e vigor espermático. Este estudo teve como objetivo estudar a fisiopatologia de ejaculados com altos porcentuais da patologia espermática ASBM, utilizando como base o exame andrológico e análise espermática por citometria de fluxo. Portanto, os touros foram divididos em dois grupos: o primeiro foi o grupo controle com morfologia espermática normal (n = 3) e o segundo foi o grupo com morfologia anormal (n = 3) com alta porcentagem de SAMS. Cinco ejaculados foram coletados de cada animal. Ejaculados de touros com ASBM apresentaram baixa motilidade (P<0,05), baixo potencial mitocondrial (P<0,05), maior porcentagem de espermatozoides com fragmentação do DNA (P<0,05), baixa integridade da membrana plasmática e acrossomal (P<0,05) e alta porcentagem de espermatozoides com desorganização da bicamada lipídica ou fluidez da membrana (P<0,05) em comparação aos touros com morfologia espermática normal. Além de possuir baixa porcentagem de viabilidade espermática, sêmen com alta porcentagem de ASBM pode estar sofrendo apoptose, possivelmente devido ao estresse oxidativo. Esses resultados indicam que touros com alta porcentagem desta patologia espermática são inférteis e sugere também que esta anomalia espermática seja de origem genética na raça estudada. / Bulls are of great importance in the productive chain because they have a higher potential for diffusion of genetic material within the herd than females that produce only one calf per year in natural mating management. However, this potential is only possible when males present good seminal quality, resulting in lower rates of non- return to estrus. There is no doubt about the importance of sperm morphology in bull fertility, among the sperm anomalies identified in bovine ejaculates, the segmental aplasia of the mitochondrial sheath (SAMS) is classified as a major sperm defect, compromising the reproductive fertility; ejaculates with presence of this anomaly show low sperm motility and sperm vigor. This study aimed to understand the pathophysiology of ejaculates with high percentage of spermatozoa with SAMS, using Breeding Soundness Evaluation and sperm analysis by flow cytometry. Therefore, the bulls were divided in two groups: The first one was the control group with normal sperm morphology (n=3) and the second was the abnormal one (n=3) with high percentage of SAMS. Five ejaculates were collected from each animal. Bulls with SAMS exhibited poor motility (P<0.05), low mitochondrial membrane potential (P<0.05), a high percentage of sperm with DNA fragmentation (P<0.05), low acrosome and plasma membrane integrity (P<0.05), and high membrane fluidity (P<0.05) in comparison with bulls that have a normal morphology; in addition to have a low percentage of viability, sperm with a high percentage of SAMS may be undergoing apoptosis. These findings indicate that bulls with this sperm pathology are infertile; furthermore, it suggests there is a putative genetic basis for this sperm defect in this breed.
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Perfil bidimensional de proteínas do plasma seminal e características ligadas ao desempenho reprodutivo de touros de corte / Two-dimensional seminal plasma proteins profile and traits linked to beef bulls reproductive performanceGraciana Corrêa Romitto 17 December 2003 (has links)
Estudou-se o perfil de proteínas de plasma seminal de touros das raças Nelore (Bos taurus primigerus indicus) e Simental (Bos taurus primigerus taurus), criados a campo, em regime de acasalamento múltiplo e manejo extensivo, na região de Dourados/MS, a fim de analisar a relação entre estas proteínas e características ligadas ao desempenho reprodutivo de touros. Coletaram-se amostras de sêmen no período de inverno (Julho/2001) e verão (Fevereiro/2002), realizando-se inicialmente o exame andrológico nos animais, e em seguida a análise padrão do sêmen. O plasma seminal foi, então, submetido à dosagem de proteínas totais, à dosagem de substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS), para avaliação da ocorrência de lipoperoxidação, e à eletroforese bidimensional de proteínas. Para análise do perfil proteico de plasma seminal da cada raça, foram utilizados os seguintes parâmetros: comparação entre os períodos de inverno e verão; comparação de grupos de amostras separados de acordo com a quantificação de características ligadas ao desempenho reprodutivo (morfologia espermática, dosagem de proteína total e dosagem de TBARS); e comparação de grupos de amostras separados de acordo com classificações para avaliação da capacidade reprodutiva, previamente descritas na literatura (Breeding Soundness Evaluations BSEs). Os touros da raça Simental demonstraram menor adaptação às condições ambientais tropicais, com valores mais altos de defeitos espermáticos maiores, proteína total e dosagem de TBARS no período de verão. Observou-se grande variabilidade no perfil proteico entre as raças Nelore e Simental e, dentro de cada raça, encontrou-se expressiva variação individual. O perfil de proteínas de plasma seminal de touros Nelore apresentou 155 spots, entre os quais 04 se destacaram como possíveis marcadores de características ligadas ao desempenho reprodutivo. Já na raça Simental foram identificados 248 spots, com destaque para 04 spots, que demonstraram maior potencial como marcadores de características de interesse para a reprodução. Os resultados mostram que o perfil de proteínas de plasma seminal está relacionado ao desempenho reprodutivo de touros, fazendo-se necessários maiores estudos sobre as proteínas que se destacaram como marcadores, a fim de identificar as funções que elas exercem no trato reprodutivo e nos eventos ligados à fertilização. / Seminal plasma proteins profiles from Nelore (Bos taurus primigerus indicus) and Simmental (Bos taurus primigerus taurus) bulls, used for multiple-sire breeding under range conditions, at Dourados/MS region, were studied aiming to analyze the relation between these proteins and traits linked to bulls reproductive performance. Semen samples were collected in the winter (July/2001) and summer (February/2002). Initially, an andrological examination was performed, followed by standard semen analysis. Seminal plasma was subjected to total protein quantification, thiobarbituric acid reactive substances quantification (TBARS, to evaluate lipid peroxidation), and two-dimensional protein electrophoresis. To analyze seminal plasma protein profile of each breed, the following parameters were used: comparison between winter and summer, comparison among groups of samples divided by quantification of traits linked to reproductive performance (sperm morphology, total protein quantification, TBARS quantification) and comparison among groups of samples divided by breeding soundness evaluations (BSEs), previously reported in literature. Simmental bulls showed lower adaptability to tropical environment conditions, with higher values of major sperm defects, total protein and TBARS in the summer. A great variability was observed in the protein profile between Nelore and Simmental breeds, and, for each breed it was found great individual variability too. Nelore seminal plasma protein profile presented 155 spots, 04 of which were considered potential markers for traits linked to reproductive performance. For Simmental breed, 248 spots were identified, with special interest for 04 spots, which showed higher potential as markers to reproductive characteristics. Results show that seminal plasma protein profile is related to bulls reproductive performance. Further studies about those proteins which are potential markers are needed, to determine their function at bulls reproductive system and in the events related to fertilization.
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Efeito do resveratrol na criopreservação do sêmen bovinoAssunção, Carolina Marinho de 28 March 2016 (has links)
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Previous issue date: 2016-03-28 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / FAPEMIG - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais / Apesar da grande aplicação do sêmen congelado na bovinocultura, a criopreservação ainda resulta em considerável diminuição da viabilidade e fertilidade espermática. Diversos fatores são responsáveis por essa perda, sendo importante ressaltar os danos causados ao espermatozoide pelo estresse oxidativo. O objetivo do trabalho foi avaliar o efeito antioxidante resveratrol na criopreservação de sêmen bovino. Foram utilizados oito touros holandeses selecionados previamente por exame andrológico. O sêmen foi diluído em meio Tris-gema-glicerol e divididos nos grupos: R0 (controle- sem antioxidante), R1 (50 μM de resveratrol), R2 (100 μM de resveratrol) e R3 (1000 μM de resveratrol). Os espermatozoides após o descongelamento foram avaliados através da análise de motilidade e vigor espermáticos por microscopia de contraste de fase, parâmetros cinéticos por sistema automatizado (CASA), integridade de membrana plasmática e acrossomal, função mitocondrial e fertilidade in vitro. Os dados foram analisados por ANOVA e as médias foram comparadas pelo teste de Tukey-Krammer e Student-Newman-Keuls ao nível de significância de 5% através dos programas Statistical Analysis System (SAS Institute, Cay, NC, USA) e Graph Pad Prism versão 5 (Graph Pad Software, California, Estados Unidos). Na análise de motilidade do sêmen por microscopia óptica observou-se maior média (P<0,05) do tratamento R1 em relação a R3, não sendo estes diferentes (P>0,05) do controle e de R2. Entretanto, os resultados da análise de motilidade progressiva pelo CASA mostraram que o tratamento com resveratrol 50 μM apresentou melhor (P<0,05) resultado em relação ao controle e outros tratamentos. Os dados dos parâmetros cinéticos do CASA também revelaram um número maior de espermatozoides com trajetória linear no grupo R1. Há também mais células com membrana plasmática integra no grupo tratado (R1) em relação ao controle. Na análise de função mitocondrial e na produção in vitro de embriões não houve diferença entre controle e tratamento (P>0,05). Conclui-se que o resveratrol na concentração de 50 μM protege a membrana plasmática de células espermáticas e melhora parâmetros cinéticos do sêmen sem alterar a capacidade fecundante do espermatozoide. / Despite the wide application of frozen semen in livestock, cryopreservation yet results in decrease in viability and fertility of sperm. Several factors are responsible for this loss as injuries caused on sperm by oxidative stress. The aim of the study was to evaluate the antioxidant effect of resveratrol on cryopreservation of bovine sperm. We used eight Holstein bulls selected previously by andrological exam. Semen was diluted in Tris-yolk-glycerol extender and distributed in groups: R0 (control - no antioxidant), R1 (50 μM resveratrol), R2 (100 μM resveratrol) and R3 (1000 μM resveratrol). Motility and vigorous thawed bull sperm were evaluated by phase contrast microscopy and kinetics parameters by an automated system (CASA). Plasmatic and acrosomal membrane integrity, mitochondrial function, and in vitro fertilization were also evaluated in thawed sperm. The data were analyzed by ANOVA and averages were compared by Tukey-Krammer and Student-Newman-Keuls tests by the Statistical Analysis System (SAS Institute, Cay, NC, USA) and Graph Pad Prism versão 5 (Graph Pad Software, California, Estados Unidos). The level of 5% was considered significant. With optical microscopy was observed higher sperm motility in treatment R1 than R3, and they were not different (P>0.05) to control and R2. However, the results of progressive motility analysis by CASA showed that treatment with 50 μM resveratrol had better (P <0.05) results than control and other treatments. The data of the kinetic parameters of CASA also revealed greater (P <0.05) number of spermatozoa with linear trajectory in R1 treatment. There is also more (P <0.05) cells with plasma membrane intact in R1 compared to the control. In mitochondrial function analysis and in vitro embryo production no difference was found between treatment and control (P>0.05). We conclude that the resveratrol 50 μM concentration protects the sperm cell plasmatic membrane and improves kinetic parameters without affect fertilization potential of spermatozoa.
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Influência da somatotropina recombinante bovina (rBST) sobre parâmetros metabólicos, hormonais e de qualidade de sêmen em touros / Influence of bovine recombinant somatotropin (rBST) on metabolic parameters, hormones and semen quality of bullsVIEIRA, Marcelo Brandi 07 May 2007 (has links)
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Previous issue date: 2007-05-07 / The growth hormone (GH) have as main function improve proliferation and cellular development, but also participates of processes related to the immune system and reproductive function. The effect of GH is exerted by the IGF-I (insulin-like growth factor I), that is a hormone polypeptidic mitotic secreted by all cells that carry through mitosis. Since the development of the recombinant form of the bovine recombinant somatotropin (rBST) various studies have been developed on milk and meat production in farm animals. The objective of this study was to evaluate the effect of rBST on metabolic markers of energetic, protein, mineral and hepatic metabolism, as well as, to evaluate its effect on concentrations of IGF-I, insulin and quality parameters semen in bulls. This study was carried in central of artificial insemination ABS/PECPLAN using 20 bulls of european breeds. These animals were divided in two groups, a group that received a placebo application (NaCl, 0.9%) and another that received rBST (Lactotropin®/Elanco Animal Health). Five blood collections for evaluation of metabolic and hormonal markers and 6 semen collections with posterior freezing for the accomplishment of the corresponding semen evaluations. There was no effect of rBST (P > 0,05) in metabolic markers, except in the concentration of gamma- glutamyltransferase (GGT), that increased in the group that received rBST (P < 0,05), but inside the physiological range, in the hormones evaluations, IGF-I increased in the group treated with rBST (P < 0,05), but there wasn t difference in the insulin concentrations (P > 0,05). In relation to the semen evaluations, there were no differences observed (P > 0,05) in motility and morphology evaluated in the period before freezing. In after freezing evaluations, being that motility, morphology, integrity of plasmatic membrane by fluorescent sounding leads and the hiposmotic test, differences have been observed (P < 0,05) between groups, showing beneficial effect of rBST in these characteristics. In this way can be observed that rBST, beyond raising the IGF-I levels positively influenced the seminal after freezing characteristics evaluated without causing disequilibrium in the metabolism of treated animals since the concentrations of the evaluated metabolic markers were in accordance with the physiological standards for the bovine species. / O hormônio do crescimento (GH) possui como principal função realizar a proliferação e desenvolvimento celular, participando também de processos relacionados ao sistema imune e a reprodução. O efeito do GH é exercido pelo IGF-I (fator de crescimento semelhante à insulina I), que é um hormônio polipeptídico mitótico secretado por todas as células que realizam mitose. A partir do desenvolvimento da forma recombinante da somatotropina recombinante bovina (rBST) foram desenvolvidos inúmeros estudos relacionados a produção de leite e carne em animais de produção. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito do rBST sobre marcadores metabólicos relacionados ao metabolismo energético, protéico, mineral e hepático, bem como avaliar o seu efeito nas concentrações de IGF-I, insulina e nos parâmetros de qualidade de sêmen em touros. Este estudo foi realizado na central de inseminação artificial ABS/PECPLAN, com 20 touros de raças predominantemente européias. Estes animais foram divididos em dois grupos, sendo que um grupo recebeu a aplicação do placebo (solução fisiológica, NaCl 0,9%) e outro rBST (Lactotropin®/Elanco Saúde Animal). Foram realizados 5 coletas de sangue para avaliação dos marcadores metabólicos e hormonais e 6 coletas de sêmen com posterior congelamento para a realização das correspondentes avaliações de sêmen. De acordo com os resultados não foi observado (P > 0,05) efeito do rBST nas avaliações dos marcadores metabólicos, exceto nas concentrações da enzima hepática gama - glutamiltransferase (GGT), que foi mais elevada no grupo que recebeu o rBST (P < 0,05), mas de acordo com os padrões fisiológicos. Nas avaliações hormonais os níveis de IGF-I foram mais elevados no grupo tratado com rBST (P < 0,05), não sendo, porém, observadas diferenças para os níveis de insulina (P > 0,05). Em relação às avaliações de sêmen, não foram observadas diferenças entre os dois grupos (P > 0,05) na motilidade e morfologia espermática avaliadas no período pré-congelamento. Nas avaliações pós-congelamento que incluíam a motilidade, morfologia, integridade de membrana plasmática por sondas fluorescentes e pelo teste hiposmótico foram observadas diferenças (P < 0,05) entre os grupos, sendo demonstrado melhores índices no grupo que recebeu o tratamento com rBST. Desta forma pode-se observar que o rBST, além de elevar o níveis de IGF-I, influenciou positivamente as características seminais avaliadas no pós-congelamento sem que tivesse ocasionado desequilíbrio no metabolismo dos animais tratados, já que as concentrações dos marcadores metabólicos avaliados estavam de acordo com os padrões fisiológicos para a espécie bovina.
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