Las E. coli productoras de tipo shiga (STEC) son patógenas en el hombre y pueden provocarle colitis hemorrágica y síndrome urémico hemolítico. Dentro de este grupo, el serotipo E. coli O157:H7 es el que más se ha reportado como problema de salud pública. Las infecciones por este agente generalmente se producen por consumir alimento contaminado, siendo la carne de bovino el principal vehículo de este patógeno, en el Perú se ha reportado que es causante de diarreas y hospitalizaciones en niños. El objetivo del estudio es identificar la presencia de E. coli O157:H7 productora de toxinas shiga en canales de bovinos faenados en Lima. Para ello se recolectaron 180 muestras de 2 mataderos de Lima en 2 momentos del oreo; momento lavado (final del lavado e inicio de oreo) y momento oreo ( 2-3 h. en la playa de oreo). Se emplearon 2 metodologías, una técnica estándar para E. coli que requiere de medios tripticasa de soya (37°C por 24 h) y agar Mac conkey (37°C por 24 h) y una técnica microbiológica específica para la detección de E. coli no fermentadoras de sorbitol (característica de la E. coli O157:H7) usando los medios específicos EC con novobiocina (37°C por 24 h) y agar Mac conkey sorbitol (37°C por 24 h). Las colonias compatibles con E. coli se confirmaron con pruebas bioquímicas, luego se guardó a 2 °C una cepa de cada placa positiva para posteriormente y en conjunto realizar un PCR múltiple con la finalidad de identificar los factores de virulencia Stx1, Stx2, eaeA, rfbO157, hlyA y fliCH7. No se detectó E. coli O157:H7. Se encontró 29.4% (53/180) E. coli positivos, 5.6% (10/180) STEC, 1.1% (2/180) E. coli O157 y 0.5% (1/180) STEC O157. No se encontró diferencia significativa (p>0.05) entre la presencia de agentes (E. coli y STEC) y el momento de muestreo; ni con algunas de las técnicas microbiológicas. Los resultados obtenidos muestran la presencia de E. coli en las canales bovina desde su procesamiento primario, en los mataderos evaluados. Palabras claves: cepas, diarrogénicas, PCR, oreo, enfermedades transmitidas por alimentos / --- Shiga toxin producing E. coli (STEC) are pathogenic in humans and it can cause them hemorrhagic colitis and hemolytic uremic syndrome. Within this group, E. coli serotype O157: H7 is the most widely reported as a public health problem. Infections by this agent are generally produced by consuming contaminated food, being beef the main vehicle for this pathogen. In Peru it has been reported to be causing diarrhea and hospitalizations in children. The aim of the study is to identify the presence of E. coli O157: H7 shiga toxinproducing in cattle carcasses of slaughtered in Lima. For this purpose, 180 samples were collected of 2 slaughterhouses in Lima in 2 times of oreo; washing time (end of washing and beginning of oreo) and oreo time (2-3 h. in oreo). 2 methodologies were used, a standard technique for E. coli, which requires trypticase soy media (37°C for 24 h) and Mac Conkey agar (37°C for 24 h) and a specific microbiological technique for detecting E . coli non fermenting sorbitol (characteristic of E. coli O157: H7) using EC medium with specific novobiocina (37°C for 24 h) and Mac Conkey sorbitol agar (37°C for 24 h). Compatible colonies with E. coli were confirmed by biochemical tests, then stored at 2 °C one isolate from each positive plate, later and together make a multiple PCR for the purpose of identify virulence factors Stx1, Stx2, eaeA, rfbO157, hlyA and fliCH7. E. coli O157: H7 wasn´t detected. It was detected 29.4% (53/180) positive E. coli, 5.6% (10/180) STEC, 1.1% (2/180) E. coli O157 and 0.5% (1/ 180) STEC O157. No significant difference (p>0.05) was found between the presence of agents (E. coli y STEC) and the sampling time neither with some microbiological techniques. The results show the presence of E. coli in cattle from its primary processing, in slaughterhouses evaluated. Keywords : strains, diarrheagenic, oreo, foodborne diseases

Memoria para optar al Título Profesional de Médico Veterinario / Salmonella corresponde a una de las principales causas de enfermedades gastroentéricas, principalmente por la ingestión de alimentos de origen animal contaminados. Para detectar la presencia de Salmonella en alimentos existe el método tradicional y métodos alternativos. El método tradicional es bastante extenso y laborioso, retrasando la obtención de resultados. Los métodos alternativos permiten obtener resultados más rápidamente, aun cuando, deben ser validados y verificados frente a un método tradicional. Este estudio tiene por finalidad verificar al interior de la Unidad de Bacteriología Pecuaria del Servicio Agrícola y Ganadero (SAG) un nuevo método alternativo denominado VIDAS® UP SALMONELLA para la detección de Salmonella spp. en dos matrices del ámbito alimentario, como lo son esponja sobre carcasa de bovino y enjuague de carcasa de pollo. Para ello se analizaron, en forma simultánea, 52 muestras de cada matriz por el método alternativo y por el método tradicional, de tal manera de obtener valores de sensibilidad relativa, especificidad relativa y exactitud relativa del método alternativo, y la concordancia entre ambos métodos mediante el índice Kappa. Para la matriz esponja sobre carcasa de bovino se obtuvo una sensibilidad relativa de 100%, especificidad relativa de 100% y exactitud relativa de 100%. Mientras que en la matriz enjuague de carcasa de pollo los valores fueron de 80,7%, 100% y 90,4% respectivamente. La concordancia alcanzada fue de 1,0 y 0,81 para esponja sobre carcasa de bovino y enjuague de carcasa de pollo respectivamente. Los resultados permiten concluir que este nuevo método alternativo obtiene criterios muy buenos en comparación con su contraparte tradicional, entregándole a la Unidad de Bacteriología Pecuaria una nueva herramienta de análisis

O Staphylococcus aureus está freqüentemente envolvido em surtos de intoxicação alimentar. Geralmente esses surtos têm início abrupto, causando náusea e vômito nos acometidos. Na elucidação deste tipo de surtos é necessário que seja investigada a presença da enterotoxina no alimento e/ou a capacidade enterotoxigênica da bactéria isolada. A partir disso, o objetivo do presente estudo foi implantar uma técnica de detecção de enterotoxinas e avaliar a capacidade enterotoxigênica de linhagens de Staphylococcus aureus isolados de surtos. Trinta linhagens isoladas, no período de 2002 a 2003, de alimentos envolvidos em surtos no Rio Grande do Sul foram identificadas e avaliadas quanto à capacidade de produzir enterotoxinas SEA, SEB, SEC e SED, através da técnica de sensibilidade ótima em placa-OSP.Ao lado disso, os dados epidemiológicos relativos aos surtos de origem foram coletados. Os resultados obtidos demonstraram que todas as linhagens foram positivas no teste da catalase, coagulase em tubo, prova de termonuclease, teste de hemólise e fermentaram a maltose e o manitol, sendo confirmadas como Staphylococcus aureus. Todas as linhagens produziram enterotoxina SEA, 24 produziram SEB, 12 SEC e 6 SED, isoladamente ou em associação.A maioria das linhagens foi isolada de alimentos submetidos à grande manipulação durante seu preparo e apresentaram contagens superiores a 106 UFC/g de Staphylococcus aureus, demonstrando que condições favoráveis à produção de enterotoxinas devem ter ocorrido durante o seu preparo e armazenamento. / Staphylococcus aureus often occurs in food poisoning outbreaks. These outbreaks usually start abruptly, causing nausea and vomit on affected people. In order to investigate these outbreaks, it is necessary to check the presence of enterotoxin in food and/or enterotoxigenic capacity of isolate. So the purpose of this study was to propose a method to the enterotoxin detection and evaluate the enterotoxigenic capacity of coagulase positive Staphylococci strains which were isolated from foods involved with outbreaks. On the period of 2002 to 2003, thirty strains detected in foods poisoning outbreaks in RS were identified and evaluated on their SEA, SEB, SEC and SED enterotoxins production capacity checking their sensitivity on OSP - plates. Moreover, epidemiological information related to the origin outbreaks was collected. The results showed that all the strains were positive according to following tests: catalase, coagulase in vitro/tube, termonuclease and hemolysis. Besides the strains have fermented maltose and manitol as to confirm as being Staphylococcus aureus. All the strains produced SEA enterotoxin; 24 of them produced SEB, 12 SEC and 6 SED, isolated or in association. Most strains were isolated in food that had been under intense manipulation during their preparation and which had presented levels higher than 106 CFU/g to Staphylococcus aureus, indicating that favorable conditions to the production of enterotoxins should have occured during their preparation and storage.

O Staphylococcus aureus está freqüentemente envolvido em surtos de intoxicação alimentar. Geralmente esses surtos têm início abrupto, causando náusea e vômito nos acometidos. Na elucidação deste tipo de surtos é necessário que seja investigada a presença da enterotoxina no alimento e/ou a capacidade enterotoxigênica da bactéria isolada. A partir disso, o objetivo do presente estudo foi implantar uma técnica de detecção de enterotoxinas e avaliar a capacidade enterotoxigênica de linhagens de Staphylococcus aureus isolados de surtos. Trinta linhagens isoladas, no período de 2002 a 2003, de alimentos envolvidos em surtos no Rio Grande do Sul foram identificadas e avaliadas quanto à capacidade de produzir enterotoxinas SEA, SEB, SEC e SED, através da técnica de sensibilidade ótima em placa-OSP.Ao lado disso, os dados epidemiológicos relativos aos surtos de origem foram coletados. Os resultados obtidos demonstraram que todas as linhagens foram positivas no teste da catalase, coagulase em tubo, prova de termonuclease, teste de hemólise e fermentaram a maltose e o manitol, sendo confirmadas como Staphylococcus aureus. Todas as linhagens produziram enterotoxina SEA, 24 produziram SEB, 12 SEC e 6 SED, isoladamente ou em associação.A maioria das linhagens foi isolada de alimentos submetidos à grande manipulação durante seu preparo e apresentaram contagens superiores a 106 UFC/g de Staphylococcus aureus, demonstrando que condições favoráveis à produção de enterotoxinas devem ter ocorrido durante o seu preparo e armazenamento. / Staphylococcus aureus often occurs in food poisoning outbreaks. These outbreaks usually start abruptly, causing nausea and vomit on affected people. In order to investigate these outbreaks, it is necessary to check the presence of enterotoxin in food and/or enterotoxigenic capacity of isolate. So the purpose of this study was to propose a method to the enterotoxin detection and evaluate the enterotoxigenic capacity of coagulase positive Staphylococci strains which were isolated from foods involved with outbreaks. On the period of 2002 to 2003, thirty strains detected in foods poisoning outbreaks in RS were identified and evaluated on their SEA, SEB, SEC and SED enterotoxins production capacity checking their sensitivity on OSP - plates. Moreover, epidemiological information related to the origin outbreaks was collected. The results showed that all the strains were positive according to following tests: catalase, coagulase in vitro/tube, termonuclease and hemolysis. Besides the strains have fermented maltose and manitol as to confirm as being Staphylococcus aureus. All the strains produced SEA enterotoxin; 24 of them produced SEB, 12 SEC and 6 SED, isolated or in association. Most strains were isolated in food that had been under intense manipulation during their preparation and which had presented levels higher than 106 CFU/g to Staphylococcus aureus, indicating that favorable conditions to the production of enterotoxins should have occured during their preparation and storage.

O Staphylococcus aureus está freqüentemente envolvido em surtos de intoxicação alimentar. Geralmente esses surtos têm início abrupto, causando náusea e vômito nos acometidos. Na elucidação deste tipo de surtos é necessário que seja investigada a presença da enterotoxina no alimento e/ou a capacidade enterotoxigênica da bactéria isolada. A partir disso, o objetivo do presente estudo foi implantar uma técnica de detecção de enterotoxinas e avaliar a capacidade enterotoxigênica de linhagens de Staphylococcus aureus isolados de surtos. Trinta linhagens isoladas, no período de 2002 a 2003, de alimentos envolvidos em surtos no Rio Grande do Sul foram identificadas e avaliadas quanto à capacidade de produzir enterotoxinas SEA, SEB, SEC e SED, através da técnica de sensibilidade ótima em placa-OSP.Ao lado disso, os dados epidemiológicos relativos aos surtos de origem foram coletados. Os resultados obtidos demonstraram que todas as linhagens foram positivas no teste da catalase, coagulase em tubo, prova de termonuclease, teste de hemólise e fermentaram a maltose e o manitol, sendo confirmadas como Staphylococcus aureus. Todas as linhagens produziram enterotoxina SEA, 24 produziram SEB, 12 SEC e 6 SED, isoladamente ou em associação.A maioria das linhagens foi isolada de alimentos submetidos à grande manipulação durante seu preparo e apresentaram contagens superiores a 106 UFC/g de Staphylococcus aureus, demonstrando que condições favoráveis à produção de enterotoxinas devem ter ocorrido durante o seu preparo e armazenamento. / Staphylococcus aureus often occurs in food poisoning outbreaks. These outbreaks usually start abruptly, causing nausea and vomit on affected people. In order to investigate these outbreaks, it is necessary to check the presence of enterotoxin in food and/or enterotoxigenic capacity of isolate. So the purpose of this study was to propose a method to the enterotoxin detection and evaluate the enterotoxigenic capacity of coagulase positive Staphylococci strains which were isolated from foods involved with outbreaks. On the period of 2002 to 2003, thirty strains detected in foods poisoning outbreaks in RS were identified and evaluated on their SEA, SEB, SEC and SED enterotoxins production capacity checking their sensitivity on OSP - plates. Moreover, epidemiological information related to the origin outbreaks was collected. The results showed that all the strains were positive according to following tests: catalase, coagulase in vitro/tube, termonuclease and hemolysis. Besides the strains have fermented maltose and manitol as to confirm as being Staphylococcus aureus. All the strains produced SEA enterotoxin; 24 of them produced SEB, 12 SEC and 6 SED, isolated or in association. Most strains were isolated in food that had been under intense manipulation during their preparation and which had presented levels higher than 106 CFU/g to Staphylococcus aureus, indicating that favorable conditions to the production of enterotoxins should have occured during their preparation and storage.

Orientador: João Francisco Galera Monico / Resumo: A modernização do GNSS (Global Navigation Satellite System) com a inclusão de novas constelações e melhorias nos sistemas já disponíveis foi avaliada com grande interesse na última década. A combinação de diferentes constelações de satélite expande as aplicações possíveis; portanto, o termo multi-GNSS apareceu para designar o uso desses múltiplos sistemas. O IGS (International GNSS Service), observando a necessidade dos usuários que começaram a usar o multi-GNSS, lançou em 2011 a proposta de projeto experimental IGMA (International GNSS Monitoring Assessment). O projeto visa criar um sistema internacional de análise GNSS com resultados que apresentem confiabilidade para usuários em todo o mundo. Na chamada para a participação como centro de análise a FCT-Unesp foi aceita como parte do projeto para avaliar dois dos quatro parâmetros propostos: Diluição da Precisão da Posição (PDOP) e a acurácia das efemérides transmitidas. Dos sistemas disponíveis, quatro foram escolhidos: GPS, Galileo. GLONASS e BeiDou nessa pesquisa. Foi realizado um estudo sobre o estado da arte para as aplicações de PDOP e WPDOP (Diluição da precisão ponderada na posição). Nas análises de acurácia, foi utilizado a correção entre o centro de fase e o centro de massa do satélite para comparar corretamente as efemérides finais e as transmitidas durante 600 dias (os 120 primeiros dias de cada ano entre 2015 e 2019). O GPS apresentou um RMSE 3D de 1,94 m, Galileo 1,19 m, GLONASS 7,21 m e BeiDou 3,19 m. As análi... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The modernization of GNSS (Global Navigation Satellite System) with the inclusion of new constellations and improvements in the already available systems has been assessed with great interest over the last decade. The combination of different satellite constellations expands the possible applications, so the term multi-GNSS appeared to designate the use of these multiple navigation systems. The IGS (International GNSS Service), observing the need of the users who started using multi-GNSS, launched in 2011 the proposal for the IGMA (International GNSS Monitoring Assessment) trial Project. It aims to create an international GNSS analysis system with results that present reliability for users around the world. In the call for participation as a center of analysis, FCT-Unesp was accepted as part of the trial project to evaluate the following parameters: Position Dilution of Precision (PDOP) and the accuracy of the broadcast ephemeris. Of the available systems, four were chosen: GPS, Galileo, GLONASS e BeiDou. A state-of-the-art study of PDOP and WPDOP (Weighted Position Dilution of Precision) applications was performed. On the accuracy analysis, it was used the phase center vector to correctly compare the final and broadcast ephemeris for 600 days (the first 120 days for each year between 2015 and 2019). The results show that GPS had an overall RMSE of 1.94 m, Galileo 1.94 m, GLONASS 7.21 m and BeiDou 3.19 m. The PDOP and WPDOP analyzes were carried out to evaluate the correlatio... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Magíster en Alimentos mención Gestión, Calidad e Inocuidad de los Alimentos / En Chile, el sistema de vigilancia de las enfermedades transmitidas por los alimentos (ETA), investiga todos los brotes notificados desde la red de salud a la autoridad sanitaria, con el fin de evitar nuevos casos en el mismo evento y prevenir futuros brotes, a través del aprendizaje de ellos. Se planteó como objetivo, el estudio de los brotes de ETA registrados en Chile durante 2013, aportando información que contribuya al conocimiento de esta problemática y a la toma de decisiones operativas y regulatorias para su control y prevención. Metodológicamente, este proceso se inició con la identificación de los brotes notificados, seleccionando aquellos casos confirmados, para luego establecer su distribución en el país, la identificación de las fuentes de exposición, de los agentes, de los alimentos involucrados y sus relaciones. Se incluyó en el estudio, el análisis de los factores contribuyentes de brotes, y las acciones sanitarias asociadas al proceso de investigación de estos eventos. Los resultados obtenidos muestran un sistema de vigilancia activo en cuanto a la notificación e investigación de brotes de ETA, incluidas las acciones de control. Los resultados observados son similares a los informados en otros estudios nacionales y por sistemas de vigilancia de otros países. Sin embargo, es baja la identificación de los agentes causales de estos casos en muestras clínicas y aún más baja desde muestras de alimentos. Se observó también que la inspección de instalaciones de alimentos utiliza criterios regulatorios por sobre los de una investigación de brote de ETA. En apoyo a la investigación ambiental de brotes, se proponen los pasos generales que deben desarrollarse en este proceso

Memoria para optar al Titulo Profesional de Médico Veterinario / Las Enfermedades Transmitidas por Alimentos son un problema mundial en aumento. Uno de los agentes causales es Salmonella enterica serovar Enteritidis (SE), serotipo predominante en Chile y asociado a alimentos de origen animal, entre ellos, carne de pescado. Una forma reciente de controlar la presencia de SE en los alimentos, ya en uso internacional, es el biocontrol mediante bacteriófagos. Para poder realizar a futuro estudios ajustados al escenario nacional que permitan evaluar su efecto directamente en alimentos, es primordial contar previamente con protocolos de contaminación experimental de las muestras. Por esto, el presente estudio analizó protocolos de contaminación experimental con SE, en carne de salmón congelada fresca y ahumada, mantenida 10 días a temperatura de refrigeración y ambiente. Las variables analizadas fueron: presentación de los alimentos (molido y laminado) y técnica de contaminación (goteo con y sin homogeneización). En cada protocolo se determinó la menor dosis bacteriana (entre 102 a 106 UFC/mL) que lograra ≥ 80% de muestras contaminadas. Además, se evaluó la eficiencia de Piruvato de Sodio en la recuperación de SE en estas carnes contaminadas y refrigeradas. Las menores dosis que lograron ≥ 80% de muestras contaminadas fueron de 102 UFC/mL para todos los protocolos independiente de la temperatura, excepto salmón fresco molido sin homogeneizar refrigerado, cuya dosis fue 103 UFC/mL. Los cuatro protocolos comparados por cada matriz no presentaron diferencias estadísticas (p>0,05) en la bacteriología cualitativa (detección) y cuantitativa (recuentos). La adición de Piruvato de Sodio no generó diferencias estadísticamente significativas (p>0,05) en la recuperación de SE / Proyecto Fondecyt N° 1110038

Memoria para optar al Titulo Profesional de Médico Veterinario / Las Enfermedades Transmitidas por Alimentos representan un problema de salud pública creciente, siendo Salmonella spp. el patógeno más frecuentemente aislado en los brotes. En Chile, la mayor prevalencia la registra Salmonella Enteritidis (SE), aislado principalmente desde productos de origen animal como carnes de diferentes especies. En este trabajo se implementaron protocolos de contaminación experimental con SE en alimentos cárneos crudos de riesgo, como un paso previo para la investigación del uso de bacteriófagos líticos en la disminución de la carga bacteriana en estos alimentos. Se implementaron cuatro diferentes protocolos de contaminación experimental con SE en productos cárnicos crudos considerados como riesgosos: pollo, pavo, cerdo y bovino. Se determinó la menor dosis de inóculo bacteriano (102 hasta 106 UFC/mL), forma de aplicación del inóculo (goteo con/sin homogeneización) y forma de presentación de las carnes (molido y laminado) con las cuales se logró porcentajes ≥ 80% de contaminación de las muestras, mantenidas por 10 días a temperatura ambiente y de refrigeración. Además, se estudió la eficiencia del Piruvato de Sodio adicionado a los medios de cultivo en los recuentos de SE en las muestras contaminadas y almacenadas a temperatura de refrigeración. En la mayoría de los protocolos analizados se obtuvo elevados porcentajes de muestras contaminadas con bajas dosis de SE (102 UFC/mL y 103 UFC/mL) tanto a temperatura ambiente como en refrigeración, obteniendo recuentos similares entre protocolos. La adición de Piruvato de Sodio no produjo recuentos significativamente mayores (p > 0,05) que aquellos obtenidos sin la adición del suplemento / Proyecto FONDECYT 1110038

Memoria para optar al Titulo Profesional de Médico Veterinario / En Chile y el mundo, el aumento de la prevalencia de Salmonella enterica serotipo Enteritidis en enfermedades transmitidas por alimentos (ETAs), ha generado gran preocupación sanitaria y económica. La principal fuente de infección para el ser humano es el consumo de productos avícolas, aunque también se ha sugerido el rol de aves silvestres en la transmisión directa del agente, hacia personas y aves comerciales. El objetivo de este trabajo, fue determinar la diversidad fenotípica ligada a virulencia de cepas de S. Enteritidis, aislada desde aves comerciales, aves acuáticas y seres humanos en Chile y observar su asociación a estos hospederos. Los fenotipos de virulencia testeados in vitro fueron la supervivencia en acidez (pH3), en estrés oxidativo (H2O2/NaNO2) y hambruna. Bajo acidez, se observó diferencias significativas (p≤ 0,05) entre cepas a los 30min de ensayo. En estrés oxidativo (H2O2/NaNO2), se determinó diferencias (p≤ 0,05) entre cepas a los 30min y 3h respectivamente. Finalmente, bajo hambruna se observó diferencias (p≤ 0,05) entre cepas y entre hospederos en todos los días de medición (días 10, 20, 30 y 40). En conclusión, existe diversidad fenotípica ligada a virulencia entre cepas de S. Enteritidis y en el caso de hambruna, se evidenció que la diversidad también se asocia al hospedero de origen, lo que sugiere procesos de adaptación de la bacteria a condiciones específicas frente a la falta de nutrientes en cada uno de ellos o en el ambiente en que viven / Proyecto FONDECYT DE INICIACIÓN 11110398