Submitted by Isaac Francisco de Souza Dias (isaac.souzadias@ufpe.br) on 2016-07-14T17:52:30Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Tese Rebecca Peixoto.pdf: 2781137 bytes, checksum: a39e340101c4eea79b7e183333724dd1 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-14T17:52:30Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Tese Rebecca Peixoto.pdf: 2781137 bytes, checksum: a39e340101c4eea79b7e183333724dd1 (MD5) Previous issue date: 2016-02-26 / CAPES / A adolescência é um período nutricionalmente vulnerável, e dados atuais demonstram um aumento na prevalência de excesso de peso nesta faixa etária, associada a uma provável deficiência de micronutrientes, como as vitaminas lipossolúveis. A obesidade tem sido associada a um quadro inflamatório crônico de baixa intensidade, e evidências sugerem que na maior adiposidade e na presença de inflamação pode ocorrer diminuição da concentração das vitaminas lipossolúveis entre os adolescentes. Neste trabalho foi investigado a prevalência e os fatores associados à deficiência das vitaminas A, D, E e β- caroteno entre adolescentes escolares do nordeste do Brasil. Foi verificado também a associação entre estado inflamatório, adiposidade e as concentrações das vitaminas lipossolúveis nos adolescentes. Para tal, foi realizado um estudo transversal nas escolas públicas da cidade do Recife envolvendo adolescentes na faixa etária de 12 a 19 anos, de ambos os sexos, no período de março a abril de 2013. Foram excluídos os adolescentes que faziam uso farmacológico de vitamina A, D, E ou polivitamínicos, nos últimos 3 meses. A coleta dos dados foi realizada mediante aplicação de questionário abordando variáveis sócio-demográficas, estilo de vida e de consumo alimentar dos adolescentes. Em seguida, realizou-se a avalição antropométrica e coleta de sangue para análise das concentrações séricas de α-1-glicoproteína ácida (AGA), retinol, β-caroteno, α-tocoferol e 25- hidroxivitamina D (25(OH)D). Os resultados encontrados indicam que os adolescentes apresentam inadequação na ingestão da vitaminas A (50,3%), E (94,0%) e D (99,8%), assim como insuficiência/deficiências dos níveis séricos do α-tocoferol (88,1%), β- caroteno (74,1%), 25(OH)D (50,9%) e retinol (46,6%). Foi observado também maior risco de deficiência do α-tocoferol nas meninas (RP=1,11), e maior risco de insuficiência de 25(OH)D nos meninos (RP=1,41), bem como maior probabilidade de insuficiência do β- caroteno (RP=1,14) e da 25(OH)D (RP=1,38) no excesso de peso. Os níveis de AGA foram maiores na presença da obesidade abdominal nos adolescentes de ambos os sexos. Segundo avaliação pelo sexo, os meninos com níveis séricos de α-tocoferol insuficientes expressaram níveis reduzidos de AGA (p=0,03), e apresentaram um maior risco de deficiência de 25(OH)D e β-caroteno na adiposidade total e abdominal, enquanto as meninas mostraram maior risco de insuficiência de β-caroteno com a obesidade abdominal. Com isso, conclui-se que os adolescentes apresentam um risco potencial na inadequação das vitaminas lipossolúveis, e fatores como sexo e excesso de peso parecem interferir nas concentrações séricas destas vitaminas. Além disso, a adiposidade abdominal reflete um maior risco de inflamação, e causa alterações distintas nas concentrações das vitaminas lipossolúveis, de acordo com o sexo. No entanto, investigações futuras são necessárias para melhor compreensão do comportamento dessas vitaminas nos adolescentes frente a adiposidade e inflamação. / Adolescence is a nutritionally vulnerable period, and current data demonstrate an increase in the prevalence of overweight in this age group, associated with a possible deficiency of micronutrients, such as fat-soluble vitamins. Obesity has been associated with a chronic inflammatory condition of low intensity, and evidence suggests that in fat and higher in the presence of inflammation may occur decreasing the concentration of fat-soluble vitamins among teenagers. This work investigated the prevalence and factors associated with deficiency of vitamins A, D, E and β-carotene among school adolescents in northeastern Brazil. It was also verified the association between inflammatory state, adiposity and the concentrations of the fat-soluble vitamins in adolescents. To this end, we conducted a cross-sectional study in public schools in the city of Recife involving adolescents aged 12- 19 years, of both sexes, from March to April 2013. teenagers who were pharmacological use of vitamin were excluded A, D, E or multivitamins, in the past 3 months. Data collection was conducted through a questionnaire covering socio-demographic, lifestyle and food consumption of adolescents. Then there was the anthropometric APPRAISAL and blood collection for analysis of serum acid α-1-glycoprotein (AGA), retinol, β-carotene, α- tocopherol and 25-hydroxyvitamin D (25 (OH) D) . The results indicate that adolescents have inadequate intake of vitamins A (50.3%), and (94.0%) and D (99.8%), and failure / shortcomings of serum α-tocopherol levels ( 88.1%), β-carotene (74.1%), 25 (OH) D (50.9%) and retinol (46.6%). It was also observed higher risk of deficiency of α-tocopherol in girls (PR = 1.11), and increased risk of insufficient 25 (OH) D in boys (PR = 1.41) and greater likelihood of β failure -carotene (OR = 1.14) and 25 (OH) D (OR = 1.38) in overweight. AGA levels were higher in the presence of abdominal obesity in adolescents of both sexes. According to evaluation by sex, boys with insufficient α-tocopherol serum levels expressed low levels of AGA (p = 0.03), and had a higher risk of deficiency of 25 (OH) D and β-carotene in the total and abdominal adiposity while girls showed a greater risk of failure of β-carotene with abdominal obesity. Thus, it is concluded that adolescents present a potential inadequacy of the fat-soluble vitamins, and factors such as sex and overweight seem to interfere in serum concentrations of these vitamins. Furthermore, abdominal adiposity reflects an increased risk of inflammation and causes different changes in the concentrations of fat-soluble vitamins, according to sex. However, future research is needed to better understand the behavior of these vitamins in adolescents in adiposity and inflammation.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / In this work two voltammetric methods were investigated to study the interaction between metals, Cd and Pb, and fat-soluble vitamins (retinol palmitate VA; cholecalciferol VD; α-tocopherol acetate VE; filloquinona - VK). Due to hydrophobic characteristic of these vitamins, the voltammetric measurements were conducted in non aqueous media. In the first method (Method I) acetone was used was used as organic media, tetrabutylamonium iodide (ITBA) 0.2 mol L-1 as electrolyte and an electrode modified reference with double liquid junction - Ag/AgCl/LiCl saturated in ethanol/ITBA 0.02 mol L-1 in N,N - dimetylformamide (DMF). In the second method (Method II) ethanol was used as organic media, acetate buffer pH the 4.6 (in ethanol) as electrolyte and an electrode modified reference with double liquid junction - Ag/AgCl/LiCl saturated in ethanol/acetate buffer pH 4,6 (in ethanol). During the method development the behavior of Cd and Pb in studied conditions was evaluated. Each vitamin was studied individually. Method I was not the more adequate to study the interaction metal-vitamin because in most of the case the vitamin additions caused an increase on the voltammetric signals. Method II presented reduction of the Cd and Pb signals and the anodic shift of peak potentials in presence of the vitamins. The reduction of the signals increased in the order: VK < VD < VE < VA. High peak reduction was observed for Pb with the VA, VE and VD and for Cd with the VK. Measurements of alternating current voltammetry were also investigated to study the adsorption of vitamins on the electrode surface. Comparing the results obtained by the anodic stripping voltammetry with the results by alternated current, it was observed that the variations on the voltammetric signals are related predominantly with to adsorptions of VA and VD while to VE and VK the effect of adsorption was not predominant. / No presente trabalho dois métodos voltamétricos foram investigados para o estudo da interação entre os metais, Cd e Pb, e vitaminas lipossolúveis (palmitato de retinol VA; colecalciferol VD; acetato de α-tocoferol VE; filoquinona - VK). Devido à característica hidrofóbica destas vitaminas, a voltametria foi conduzida em meio orgânico. No primeiro método (Método I) utilizou-se acetona como meio, iodeto de tetrabutilamônio (ITBA) 0,2 mol L-1 como eletrólito e um eletrodo de referência modificado de dupla junção líquida Ag/AgCl/LiCl saturado em etanol/ITBA 0,02 mol L-1 em N,N dimetilformamida (DMF). No segundo método (Método II) utilizouse etanol como meio, o tampão acetato pH 4,6 (em etanol) e o eletrodo de referência modificado de dupla junção líquida Ag/AgCl/LiCl saturado em etanol/Tampão acetato pH 4,6 (em etanol). Na etapa de desenvolvimento dos métodos o comportamento dos metais nas condições estudadas foi avaliado e, após a otimização, estudou-se a modificação dos sinais voltamétricos em função das adições das vitaminas sobre os metais. Cada vitamina foi estudada individualmente. O Método I não foi o mais adequado ao estudo da interação metal-vitamina porque em muitos casos as vitaminas causaram um aumento dos sinais, comportamento contrário ao esperado. O Método II apresentou diminuição dos sinais do Cd e do Pb e ainda o deslocamento anódico dos potencias de pico destes metais na presença de todas as vitaminas. A diminuição dos sinais para Cd e Pb aumentou na ordem: VK < VD < VE < VA, sendo que esta diminuição foi maior para o Pb com VA, VE e VD e maior para o Cd com VK. Medidas por voltametria de corrente alternada foram também realizadas para estudar a adsorção das vitaminas no eletrodo de mercúrio. Comparando os resultados obtidos pela voltametria de redissolução com aqueles de corrente alternada, observou-se que as variações nos sinais voltamétricos estão relacionadas predominantemente ao efeito de adsorção para VA e VD enquanto que para VE e VK o efeito da adsorção não é predominante.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Oxidative stress is a process characterized by the antioxidant defense system decrease and/or an excessive reactive species (RS) production. RS are substances capable of attacking proteins, lipids and DNA. The oxidative damage caused to lipids is known as lipid peroxidation, which leads to the increase of malondialdehyde (MDA) levels. Oxidative stress is involved in the pathogenesis of many chronic diseases, including diabetes, cancer, Parkinson s disease and damaged tissue in exposed to chemical agents, such as neurotoxicity, hematotoxicity and nefrotoxicity. It is known that there is a close relation between organic solvents, present in paints, and oxidative stress. Thus, the body has an elaborate antioxidant defense system, the exogenous antioxidants, such as lipid soluble vitamins, and the endogenous system, such as antioxidant enzymes. In this study a method has been validated and optimized for simultaneous quantification of retinol, α-tocopherol, lycopene and β- carotene using high performance liquid chromatography (HPLC-UV/fluorescence). The analytical parameters of validation analyzed were linearity, precision, accuracy, recovery and limits of detection (LOD) and quantification (LOQ). For all the vitamins analyzed, the linear regression coefficients were > 0.99, CV% < 5%;% bias < ± 6% recovery > 92% and the LOD and LOQ values obtained were satisfactory for routine clinical application for all analytes. The validated method was applied to a group of occupationally exposed to paints (n = 45) and a non-exposed group (control group, n = 30). The results indicated that all vitamins, except vitamin E, were significantly lower in the exposed group. Moreover, the possible correlation between endogenous and exogenous antioxidants and lipid damage was evaluated. Quantifications were done to assess endogenous antioxidants, reduced glutathione (GSH) in erythrocytes, the enzymes superoxide dismutase (SOD) and catalase (CAT) in whole blood through spectroscopic methods, and malondialdehyde (MDA) levels in plasma through HPLC-VIS in both study groups, exposed (n=42) and controls (n=28). The biological monitoring was performed by measurement of blood toluene, since in previous studies, it was suggested that this solvent would be the major inducer of lipid peroxidation. Despite the low levels of toluene found, exposed workers presented higher levels of MDA and the antioxidant enzymes (SOD and CAT) activities were significantly elevated when compared with the control group; and this increase was accompanied by depletion of GSH levels. Also, several correlations were observed between MDA and the enzymatic (SOD and CAT) and non-enzymatic antioxidants (GSH), and with lipid-soluble vitamins as well, except vitamin E. Through statistical tests the antioxidants which have a greater influence on the levels of MDA were evaluated. Among the antioxidants tested, GSH and carotenoids (mainly β- carotene) were suggested as main responsible for the reduction of lipid peroxidation. Thus, it can be suggested that high intakes of exogenous antioxidants, such as carotenoids,, tend to decrease lipid damage in occupationally exposed individuals to solvents constituent of paints. / O estresse oxidativo é um processo caracterizado pela diminuição do sistema de defesa antioxidante e/ou por uma produção excessiva de espécies reativas (ERs). As ERs são substâncias capazes de lesar proteínas, lipídios e DNA. Quando os lipídios são atingidos ocorre um processo chamado de peroxidação lipídica que leva ao aumento nos níveis de malondialdeído (MDA). O estresse oxidativo está envolvido com a patogênese de muitas doenças crônicas, como diabetes, câncer, doença de Parkinson e em danos teciduais em expostos a agentes químicos, como neurotoxicidade, hematotoxicidade e nefrotoxicidade. Sabe-se que existe uma estreita relação entre os solventes orgânicos, presentes em tintas, e o estresse oxidativo. Diante disso, o organismo dispõe de um elaborado sistema de defesa antioxidante, os antioxidantes exógenos, como as vitaminas lipossolúveis e o sistema endógeno como enzimas antioxidantes. Dessa forma, nesse estudo foi primeiramente otimizada e validada metodologia para simultânea quantificação de antioxidantes exógenos: retinol, α-tocoferol, licopeno e β-caroteno, utilizando cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE-VIS/fluorescência). Os parâmetros analíticos de validação analisados foram linearidade, precisão, exatidão, recuperação e limites de detecção (LD) e quantificação (LQ). Para todas as vitaminas analisadas, os coeficientes de regressão linear foram > 0,99; CV% < 5%; bias% < ± 6%; recuperação > 92% e os valores de LD e LQ obtidos foram satisfatórios para aplicação na rotina clínica. O método validado foi aplicado em um grupo de expostos ocupacionalmente a tintas (n=45) e um grupo de não expostos (controle, n=30). Os resultados indicaram que todas as vitaminas, exceto a vitamina E, foram significativamente menores no grupo exposto. Além disso, avaliou-se o possível efeito protetivo de antioxidantes exógenos e endógenos sobre o dano lipídico. Foram realizadas as dosagens dos antioxidantes endógenos, glutationa reduzida (GSH) em eritrócitos, das enzimas superóxido dismutase (SOD) e catalase (CAT) em sangue total por métodos espectrofotométricos e os níveis de malondialdeído (MDA) em plasma por CLAE-VIS nos dois grupos de estudo, expostos (n=42) e controles (n=28). A monitorização biológica foi realizada através da dosagem de tolueno sanguíneo, uma vez que, em trabalhos prévios, foi sugerido que este solvente seria o principal indutor de peroxidação lipídica. Apesar dos baixos níveis de tolueno sanguíneo encontrados, os trabalhadores expostos apresentaram níveis de MDA e atividade das enzimas antioxidantes (SOD e CAT) significativamente elevados, quando comparados com o grupo controle e esse aumento foi acompanhado de depleção nos níveis de GSH. Ainda, foram observadas várias correlações entre os níveis de MDA e os antioxidantes endógenos enzimáticos (SOD e CAT) e não enzimático (GSH) e ainda com as vitaminas lipossolúveis, exceto vitamina E. Através de testes estatísticos foram avaliados quais antioxidantes teriam uma maior influência nos níveis de MDA. Dentre os antioxidantes analisados, a GSH e os carotenóides (principalmente o β- caroteno) foram sugeridos como principais responsáveis pela redução da peroxidação lipídica. Com isso, pode-se sugerir que aumento nos níveis de carotenóides, via dieta, tendem a diminuir o dano lipídico em indivíduos ocupacionalmente expostos a solventes constituintes de tintas.