Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A proteína óxido nítrico sintase induzível (iNOS) é a mais importante proteína da família das óxido nítrico sintases, a qual é capaz de produzir grandes quantidades de óxido nítrico. A indução permanente de iNOS foi levantada como potencialmente mutagênica, apresentando um papel central na biologia tumoral. O objetivo deste estudo é investigar o papel da iNOS no desenvolvimento de carcinomas de células escamosas bucais (CCEB), usando um modelo experimental de carcinogênese lingual em camundongos knockouts para NOS2 e amostras humanas derivadas da mucosa normal, leucoplasia bucal e CCEB. Camundongos selvagens (iNOS+/+) e knockout (iNOS-/-) para iNOS foram desafiados com 4-nitroquinolina-1-óxido (4NQO) diluída em água potável por 16 semanas e sacrificados após 0, 8 e 16 semanas de acompanhamento. As línguas foram removidas e o número de displasias e carcinomas foram contados. Sangue periférico destes camundongos foram analisados, por citometria de fluxo, em busca de células tumorais circulantes. Amostras humanas derivadas da mucosa normal, leucoplasia e CCEB, foram utilizadas para quantificar o RNA mensageiro (mRNA) de NOS2. As amostras humanas também foram imuno-coradas com anticorpos anti-iNOS e anti-nitrotirosina. Em ambos os grupos, foram observadas uma redução no número de displasias e um aumento de carcinomas da 16 semana até a 32 semanas. Camundongos iNOS-/- demonstraram menor número de lesões displásicas e neoplásicas em todos os períodos de avaliação, sendo menores e menos invasivas, quando comparados aos animais selvagens. Aparentemente, há uma tendência em ascensão nos níveis do mRNA e da proteína iNOS durante a carcinogênese bucal humana. Dados similares foram obtidos com a imuno-detecção de nitrotirosina. Além disso, as imuno-marcações de iNOS e nitrotirosina foram associadas a várias características clínicopatológicas dos CCEB (tamanho, presença de metástase, estadiamento e recidiva). Nossos resultados demonstraram que iNOS afeta o processo de carcinogênese bucal experimental e humana, estando associada com a gênese e progressão dos CCEB. Mais estudos devem ser feitos, para nos fornecer, uma compreensão profunda das funções de iNOS no desenvolvimento de câncer bucal. / Inducible nitric oxide synthase (iNOS) is most important protein of nitric oxide
synthases family, which is capable to produce huge amounts of nitric oxide. Permanent
induction of iNOS has been raised as potentially mutagenic; presenting pivotal roles in tumor
biology. The aim of this study is to investigate the role of iNOS in the development of oral
squamous cells carcinomas (OSCC), using a mouse model of oral carcinogenesis in NOS2
knockout animals and human samples derived from normal mucosa, leukoplakia and OSCC.
Wild-type (iNOS+/+) and NOS2-knockout (iNOS-/-) mices, were challenged with 4-
nitroquinoline- 1-oxide (4NQO) in drinking water for 16 weeks and killed after 0, 8 and 16
weeks of after treatment. Tongues were removed and the number of dysplasias and carcinomas
was counted. Mice’s peripheral blood were analyzed by flux cytometry in search of circulating
tumor cells. Human samples derived from normal mucosa, leukoplakia and OSCC, were
utilized to relative quantify the amount of NOS2-mRNA. The human samples were also
immune-stained with anti-iNOS and anti- Nitrotyrosine antibodies.
In both groups, a reduction of dysplasias and an increase of carcinomas from week 16
to week 32 were observed. iNOS-/- mices had shown a small number of dysplastic and
neoplastic lesion in all evaluated periods, moreover these lesions were usually smaller and less
invasive when compared to wild type animals. Apparently, there is a rising tendency in the
iNOS mRNA and protein levels during human oral carcinogenesis. Similar findings were
obtained in the nitrotyrosine staining. Furthermore, iNOS and nitrotyrosine imuno-stained is
associated with several clinic-pathological features of OSCC (site, presence of metastasis,
staging and recidive).
Our results shows that, iNOS affects the process of experimental and human oral
carcinogenesis, being associated with OSCC genesis and progression. More studies should be
done to provide us a deep understanding of the iNOS functions in oral cancer development. / Tese (Doutorado)
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/urn:repox.ist.utl.pt:RI_UFU:oai:repositorio.ufu.br:123456789/17835 |
| Date | 26 August 2016 |
| Creators | Servato, João Paulo Silva |
| Contributors | Faria, Paulo Rogério de, Loyola, Adriano Mota, Silva, Marco Túllio Brazão, Rodrigues, Denise Bertulucci Rocha, Cardoso, Sergio Vitorino, Vieira, Carlos Ueira |
| Publisher | Universidade Federal de Uberlândia, Programa de Pós-graduação em Imunologia e Parasitologia Aplicadas, Brasil |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFU, instname:Universidade Federal de Uberlândia, instacron:UFU |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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