Submitted by Hiolanda Rêgo (hiolandar@gmail.com) on 2013-09-11T19:23:00Z No. of bitstreams: 1 Dissertação_ODONTO_Flávia Caló de Aquino.pdf: 1450921 bytes, checksum: c2df2bc28eeb600f745df589edb6037a (MD5) / Approved for entry into archive by Flávia Ferreira(flaviaccf@yahoo.com.br) on 2013-09-12T01:41:12Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação_ODONTO_Flávia Caló de Aquino.pdf: 1450921 bytes, checksum: c2df2bc28eeb600f745df589edb6037a (MD5) / Made available in DSpace on 2013-09-12T01:41:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação_ODONTO_Flávia Caló de Aquino.pdf: 1450921 bytes, checksum: c2df2bc28eeb600f745df589edb6037a (MD5) / CAPES / A queilite actínica refere-se a uma lesão cancerizável que acomete os lábios, causada por radiação ultravioleta e que histologicamente pode apresentar de graus variados de displasia epitelial ao carcinoma escamocelular de lábio. Para contribuir com o entendimento da carcinogênese bucal, avaliou-se pela técnica imuno-histoquímica a p63, uma proteína homóloga à p53, utilizando-se o anticorpo anti-p63 (Clone 4A4), que reconhece as seis isoformas da p63, para se estabelecer o comportamento deste em quarenta lesões de queilite actínica e sessenta e cinco casos de carcinoma escamocelular de lábio, no intuito de verificar sua utilidade como biomarcador de risco para transformação maligna. Para isso, associou-se o grau histológico das displasias presentes nas queilites actínicas seguindo os critérios propostos por Bánóczy e Csiba (1976), e a graduação histológica de malignidade dos carcinomas escamoceluares de lábio, de acordo com o sistema estabelecido por Anneroth, Batsakis e Luna (1987), modificado por Bryne et al. (1989), com o percentual de células imunomarcadas pela p63. Em todos os casos estudados foi possível detectar a presença da proteína p63, onde nas lesões de queilite actínica o padrão de marcação foi basal e suprabasal, já nos carcinomas escamocelulares observou-se a maior parte das células tumorais expressando a proteína. Não existiu diferença estatisticamente significante entre o percentual de células imunomarcadas nas displasias severas e moderadas, assim como entre os carcinomas de alto e baixo escore de malignidade (p > 0,05). Com isso, a avaliação pelo anticorpo anti-p63 (4A4) não mostrou qualidades como um biomarcador de risco para o desenvolvimento do câncer de lábio. Sendo assim, uma reavaliação pode ser conduzida na hipótese da produção de anticorpos para os seis diferentes isotipos da p63, pois isoladamente podem apresentar valor preditivo, principalmente as isoformas Np63. / Salvador

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A proteína óxido nítrico sintase induzível (iNOS) é a mais importante proteína da família das óxido nítrico sintases, a qual é capaz de produzir grandes quantidades de óxido nítrico. A indução permanente de iNOS foi levantada como potencialmente mutagênica, apresentando um papel central na biologia tumoral. O objetivo deste estudo é investigar o papel da iNOS no desenvolvimento de carcinomas de células escamosas bucais (CCEB), usando um modelo experimental de carcinogênese lingual em camundongos knockouts para NOS2 e amostras humanas derivadas da mucosa normal, leucoplasia bucal e CCEB. Camundongos selvagens (iNOS+/+) e knockout (iNOS-/-) para iNOS foram desafiados com 4-nitroquinolina-1-óxido (4NQO) diluída em água potável por 16 semanas e sacrificados após 0, 8 e 16 semanas de acompanhamento. As línguas foram removidas e o número de displasias e carcinomas foram contados. Sangue periférico destes camundongos foram analisados, por citometria de fluxo, em busca de células tumorais circulantes. Amostras humanas derivadas da mucosa normal, leucoplasia e CCEB, foram utilizadas para quantificar o RNA mensageiro (mRNA) de NOS2. As amostras humanas também foram imuno-coradas com anticorpos anti-iNOS e anti-nitrotirosina. Em ambos os grupos, foram observadas uma redução no número de displasias e um aumento de carcinomas da 16 semana até a 32 semanas. Camundongos iNOS-/- demonstraram menor número de lesões displásicas e neoplásicas em todos os períodos de avaliação, sendo menores e menos invasivas, quando comparados aos animais selvagens. Aparentemente, há uma tendência em ascensão nos níveis do mRNA e da proteína iNOS durante a carcinogênese bucal humana. Dados similares foram obtidos com a imuno-detecção de nitrotirosina. Além disso, as imuno-marcações de iNOS e nitrotirosina foram associadas a várias características clínicopatológicas dos CCEB (tamanho, presença de metástase, estadiamento e recidiva). Nossos resultados demonstraram que iNOS afeta o processo de carcinogênese bucal experimental e humana, estando associada com a gênese e progressão dos CCEB. Mais estudos devem ser feitos, para nos fornecer, uma compreensão profunda das funções de iNOS no desenvolvimento de câncer bucal. / Inducible nitric oxide synthase (iNOS) is most important protein of nitric oxide synthases family, which is capable to produce huge amounts of nitric oxide. Permanent induction of iNOS has been raised as potentially mutagenic; presenting pivotal roles in tumor biology. The aim of this study is to investigate the role of iNOS in the development of oral squamous cells carcinomas (OSCC), using a mouse model of oral carcinogenesis in NOS2 knockout animals and human samples derived from normal mucosa, leukoplakia and OSCC. Wild-type (iNOS+/+) and NOS2-knockout (iNOS-/-) mices, were challenged with 4- nitroquinoline- 1-oxide (4NQO) in drinking water for 16 weeks and killed after 0, 8 and 16 weeks of after treatment. Tongues were removed and the number of dysplasias and carcinomas was counted. Mice’s peripheral blood were analyzed by flux cytometry in search of circulating tumor cells. Human samples derived from normal mucosa, leukoplakia and OSCC, were utilized to relative quantify the amount of NOS2-mRNA. The human samples were also immune-stained with anti-iNOS and anti- Nitrotyrosine antibodies. In both groups, a reduction of dysplasias and an increase of carcinomas from week 16 to week 32 were observed. iNOS-/- mices had shown a small number of dysplastic and neoplastic lesion in all evaluated periods, moreover these lesions were usually smaller and less invasive when compared to wild type animals. Apparently, there is a rising tendency in the iNOS mRNA and protein levels during human oral carcinogenesis. Similar findings were obtained in the nitrotyrosine staining. Furthermore, iNOS and nitrotyrosine imuno-stained is associated with several clinic-pathological features of OSCC (site, presence of metastasis, staging and recidive). Our results shows that, iNOS affects the process of experimental and human oral carcinogenesis, being associated with OSCC genesis and progression. More studies should be done to provide us a deep understanding of the iNOS functions in oral cancer development. / Tese (Doutorado)