A utilização de medicamentos veterinários é de grande importância na produção animal, porém também pode trazer conseqüências negativas, como a presença de resíduos em alimentos, como o leite bovino. As sulfonamidas são uma classe de antibióticos utilizados no tratamento veterinário e humano, sendo de grande importância sua análise em alimentos de origem animal, como o leite, uma vez que podem provocar resistência bacteriana, reações alérgicas e intoxicações, comprometendo a segurança alimentar da população e prejudicando a fabricação de derivados lácteos. A maioria dos estudos vem utilizando a extração em fase sólida (SPE), na extração das sulfonamidas e no clean up da amostra. Entretanto, o método QuEChERS, introduzido em 2003, vem sendo considerado promissor na extração de diversos compostos em matrizes alimentícias. Assim, a presente pesquisa teve o objetivo de desenvolver e validar métodos analíticos, comparando os métodos de extração SPE e QuEChERS, com posterior análise por cromatografia líquida de alta eficiência com detecção de arranjo de diodos, para a determinação de sulfonamidas (sulfatiazol, sulfametazina e sulfadimetoxina) em leite bovino. Na otimização das condições cromatográficas e do método de extração QuEChERS, utilizou-se planejamentos experimentais. Primeiramente, foram otimizadas as condições cromatográficas, selecionando-se coluna C18 Luna (100 x 4,6 mm, 5 µm), 17 µL de volume de injeção, comprimento de onda de 290 nm, vazão de 0,50 mL min-1, temperatura de 20 °C e eluição gradiente com os solventes água e etanol. No método de extração QuEChERS, o procedimento otimizado utilizou 6 g de leite, 3 mL de água, 6 mL de acetonitrila contendo 1% de ácido acético, 2,4 g de MgSO4 e 0,6 g de acetato de sódio, sendo que na etapa de clean up da amostra utilizou-se 37,5 mg de amina primária e secundária, 25 mg de octadecilsilano e 150 mg de MgSO4. O planejamento experimental foi considerado eficiente na otimização das condições cromatográficas e no procedimento de extração QuEChERS, obtendo-se boa separação entre os picos e valores de recuperação entre 95 e 98%, com desvio padrão relativo inferior a 8,25% para os analitos na concentração de 0,05 mg kg-1. No desenvolvimento do método de extração SPE não foi possível obter boa recuperação dos analitos e clean up da amostra. Acredita-se que as sulfonamidas estudadas sejam perdidas na etapa de pré-tratamento do leite, a qual é importante para a realização da SPE. Desse modo, a extração usando o QuEChERS foi selecionada para a análises das sulfonamidas em leite bovino. Os ensaios de validação demonstraram que o método é adequado para a análise das sulfonamidas, dentro do limite máximo de resíduos (0,1 mg kg-1), estabelecido pela Agencia Nacional de Vigilância Sanitária, com exatidão e precisão dentro da faixa aceitável pelos guias de validação seguidos. Além disso, foi possível utilizar apenas etanol e água como fase móvel cromatográfica, o que é uma vantagem em relação a métodos tradicionais, pois utiliza um solvente orgânico menos tóxico e renovável. A vazão de fase móvel é relativamente baixa, o que contribui para a diminuição do volume de solvente orgânico consumido e de resíduos gerados. / The use of veterinary medicines is of great importance in animal production, but also can have negative consequences, such as the occurrence of residues in food of animal origin, among which bovine milk stands out. Sulfonamides are an antibiotic class used in animal and human treatments, so it is important to analyze this kind of residue in food of animal origin, such as milk, because it can cause allergic reactions and poisoning, affecting food safety and damaging the manufactory of dairy products. Most of the studies have used solid-phase extraction (SPE) in the extraction of sulfonamides and clean up of the sample. However, the QuEChERS method, introduced in 2003, has been considered promising in the extraction of various compounds in food matrices. Thereby, this research aimed to develop and validate analytical methods comparing the extraction methods SPE and QuEChERS, followed by high performance liquid chromatography with diode array detection for the analysis of sulfonamides (sulfathiazole, sulfamethazine and sulfadimethoxine) in bovine milk. In the optimization of the chromatographic conditions and QuEChERS method, we used experimental design. Chromatographic conditions were optimized, selecting column C18 Luna (100 x 4.6 mm, 5 µm), injection volume of 17 µL, wavelength of 290 nm, flow rate of 0.5 mL min-1, temperature of 20 °C and gradient mode, using water and ethanol as mobile phase. In the QuEChERS method, the optimized procedure used 6 g of milk, 3 mL of water, 6 mL of acetonitrile with 1% of acetic acid, 2.4 g of MgSO4 and 0.6 g of sodium acetate, and in the clean up step it was used 37.5 mg of primary and secondary amine, 25 mg of octadecylsilane and 150 mg of MgSO4. Experimental design was considered efficient in the optimization, since it was obtained good separation of the chromatographic peaks and recovery between 95 and 98% with relative standard deviation below 8.25% for the analytes in the concentration of 0.050 mg kg-1. In the development of the extraction method SPE, it was not possible to obtain good recovery for the analytes and clean up of the sample. It is believed sulfonamides are lost in the sample pre-treatment step, which is important in performing SPE. Therefore, the QuEChERS method was selected for this analysis. The validation tests demonstrate the method is appropriate, within the maximum limit residue (0.1 mg kg-1), established by the National Health Surveillance Agency, with accuracy and precision within the accepted limit, according to the followed validation guides. Moreover, it was possible to use just water and ethanol as mobile phase, what is an advantage in relation to traditional methods, because it uses an organic solvent less toxicant and renewable. Rate flow is also relatively low, which contributes to decrease the required volume of organic solvent and the amount of waste produced.

A utilização de medicamentos veterinários é de grande importância na produção animal, porém também pode trazer conseqüências negativas, como a presença de resíduos em alimentos, como o leite bovino. As sulfonamidas são uma classe de antibióticos utilizados no tratamento veterinário e humano, sendo de grande importância sua análise em alimentos de origem animal, como o leite, uma vez que podem provocar resistência bacteriana, reações alérgicas e intoxicações, comprometendo a segurança alimentar da população e prejudicando a fabricação de derivados lácteos. A maioria dos estudos vem utilizando a extração em fase sólida (SPE), na extração das sulfonamidas e no clean up da amostra. Entretanto, o método QuEChERS, introduzido em 2003, vem sendo considerado promissor na extração de diversos compostos em matrizes alimentícias. Assim, a presente pesquisa teve o objetivo de desenvolver e validar métodos analíticos, comparando os métodos de extração SPE e QuEChERS, com posterior análise por cromatografia líquida de alta eficiência com detecção de arranjo de diodos, para a determinação de sulfonamidas (sulfatiazol, sulfametazina e sulfadimetoxina) em leite bovino. Na otimização das condições cromatográficas e do método de extração QuEChERS, utilizou-se planejamentos experimentais. Primeiramente, foram otimizadas as condições cromatográficas, selecionando-se coluna C18 Luna (100 x 4,6 mm, 5 µm), 17 µL de volume de injeção, comprimento de onda de 290 nm, vazão de 0,50 mL min-1, temperatura de 20 °C e eluição gradiente com os solventes água e etanol. No método de extração QuEChERS, o procedimento otimizado utilizou 6 g de leite, 3 mL de água, 6 mL de acetonitrila contendo 1% de ácido acético, 2,4 g de MgSO4 e 0,6 g de acetato de sódio, sendo que na etapa de clean up da amostra utilizou-se 37,5 mg de amina primária e secundária, 25 mg de octadecilsilano e 150 mg de MgSO4. O planejamento experimental foi considerado eficiente na otimização das condições cromatográficas e no procedimento de extração QuEChERS, obtendo-se boa separação entre os picos e valores de recuperação entre 95 e 98%, com desvio padrão relativo inferior a 8,25% para os analitos na concentração de 0,05 mg kg-1. No desenvolvimento do método de extração SPE não foi possível obter boa recuperação dos analitos e clean up da amostra. Acredita-se que as sulfonamidas estudadas sejam perdidas na etapa de pré-tratamento do leite, a qual é importante para a realização da SPE. Desse modo, a extração usando o QuEChERS foi selecionada para a análises das sulfonamidas em leite bovino. Os ensaios de validação demonstraram que o método é adequado para a análise das sulfonamidas, dentro do limite máximo de resíduos (0,1 mg kg-1), estabelecido pela Agencia Nacional de Vigilância Sanitária, com exatidão e precisão dentro da faixa aceitável pelos guias de validação seguidos. Além disso, foi possível utilizar apenas etanol e água como fase móvel cromatográfica, o que é uma vantagem em relação a métodos tradicionais, pois utiliza um solvente orgânico menos tóxico e renovável. A vazão de fase móvel é relativamente baixa, o que contribui para a diminuição do volume de solvente orgânico consumido e de resíduos gerados. / The use of veterinary medicines is of great importance in animal production, but also can have negative consequences, such as the occurrence of residues in food of animal origin, among which bovine milk stands out. Sulfonamides are an antibiotic class used in animal and human treatments, so it is important to analyze this kind of residue in food of animal origin, such as milk, because it can cause allergic reactions and poisoning, affecting food safety and damaging the manufactory of dairy products. Most of the studies have used solid-phase extraction (SPE) in the extraction of sulfonamides and clean up of the sample. However, the QuEChERS method, introduced in 2003, has been considered promising in the extraction of various compounds in food matrices. Thereby, this research aimed to develop and validate analytical methods comparing the extraction methods SPE and QuEChERS, followed by high performance liquid chromatography with diode array detection for the analysis of sulfonamides (sulfathiazole, sulfamethazine and sulfadimethoxine) in bovine milk. In the optimization of the chromatographic conditions and QuEChERS method, we used experimental design. Chromatographic conditions were optimized, selecting column C18 Luna (100 x 4.6 mm, 5 µm), injection volume of 17 µL, wavelength of 290 nm, flow rate of 0.5 mL min-1, temperature of 20 °C and gradient mode, using water and ethanol as mobile phase. In the QuEChERS method, the optimized procedure used 6 g of milk, 3 mL of water, 6 mL of acetonitrile with 1% of acetic acid, 2.4 g of MgSO4 and 0.6 g of sodium acetate, and in the clean up step it was used 37.5 mg of primary and secondary amine, 25 mg of octadecylsilane and 150 mg of MgSO4. Experimental design was considered efficient in the optimization, since it was obtained good separation of the chromatographic peaks and recovery between 95 and 98% with relative standard deviation below 8.25% for the analytes in the concentration of 0.050 mg kg-1. In the development of the extraction method SPE, it was not possible to obtain good recovery for the analytes and clean up of the sample. It is believed sulfonamides are lost in the sample pre-treatment step, which is important in performing SPE. Therefore, the QuEChERS method was selected for this analysis. The validation tests demonstrate the method is appropriate, within the maximum limit residue (0.1 mg kg-1), established by the National Health Surveillance Agency, with accuracy and precision within the accepted limit, according to the followed validation guides. Moreover, it was possible to use just water and ethanol as mobile phase, what is an advantage in relation to traditional methods, because it uses an organic solvent less toxicant and renewable. Rate flow is also relatively low, which contributes to decrease the required volume of organic solvent and the amount of waste produced.

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / A goiaba à uma das frutas tropicais mais populares e de grande aceitaÃÃo no Brasil e no mundo. A fruta goiaba pode ser alvejada por diversas pragas, reduzindo consideravelmente o rendimento da produÃÃo ocasionando a escassez da fruta no mercado. Visando o aumento da produtividade e consequentemente atender a demanda da populaÃÃo sÃo empregadas elevadas quantidades de agrotÃxicos com o intuito de combater as possÃveis pragas que venham acarretar a deterioraÃÃo da fruta. Dessa maneira, o desenvolvimento de mÃtodos analÃticos para a determinaÃÃo multirresÃduos de agrotÃxicos em alimentos à fundamental para o monitoramento da qualidade dos produtos consumidos pela populaÃÃo, alÃm de possibilitar aos ÃrgÃos reguladores a obtenÃÃo de resultados mais rÃpidos e confiÃveis. Neste trabalho, foi adaptado e validado um mÃtodo para a determinaÃÃo de agrotÃxicos na fruta goiaba, executando-se o preparo da amostra atravÃs do mÃtodo QuEChERS modificado, substituindo-se o solvente acetonitrila apÃs a etapa de limpeza (clean up) por solvente ciclohexano / acetato de etila 1:1 e adiÃÃo de carvÃo ativo para maior limpeza do extrato. Os limites de detecÃÃo (LD) variaram entre 0,002 e 0,010 mg kg-1 e os limites de quantificaÃÃo (LQ) variaram entre 0,005 e 0,030 mg kg-1. Todas as curvas analÃticas construÃdas usando o solvente e a matriz apresentaram significÃncia estatÃstica. Quando comparadas Ãs curvas analÃticas, verificou-se forte efeito matriz para o clorobenzilato, diferentemente do hexaclorobenzeno e da ametrina onde o efeito de matriz foi pouco significativo. Nas anÃlises de amostras de goiaba comercializada na cidade de Fortaleza, foi detectado a presenÃa de agrotÃxicos em 7 amostras. Dos agrotÃxicos detectados, apenas a trifloxistrobina à permitida para a cultura da goiaba, entretanto a concentraÃÃo deste composto à inferior ao limite mÃximo de resÃduo permitido para a goiaba (LMR = 0,050 mg kg-1) segundo a ANVISA. / Guava is one of the most popular and widely accepted in Brazil and worldwide tropical fruits. The fruit can be targeted by various pests, reducing considerably the yield thus causing a slowdown or even a shortage of fruit on the market. Aiming the increase in productivity and ultimately the population's demand high amounts of pesticides are used in order to counter potential pests that may lead to a deterioration of the fruit. Thus, the development of analytical methods for multiresidue determination of pesticides in food is essential for the efficient monitoring of these compounds in the products consumed by the population, enabling regulators to obtain faster and more reliable results. In this work a method for the determination of pesticides in guava was developed and validated, running the sample preparation by modified QuEChERS method, replacing the acetonitrile solvent after cleaning step by cyclohexane / ethyl acetate solvent acetate 1:1 and addition of activated charcoal to extract greater cleanliness. The limits of detection (LOD) ranged between 0.002 and 0.010 mg kg -1 and the limits of quantification (LOQ) ranged from 0.005 to 0.030 mg kg-1 . All calibration curves constructed in solvent and in matrix showed statistical significance when compared to the analytical curves and a strong matrix effect for chlorobenzilate, unlike hexachlorobenzene and ametrina where the matrix effect was negligible. In the analyzes of samples of guava sold in the city of Fortaleza, pesticides were found in 7 samples. Pesticides detected, trifloxystrobin is only allowed for the cultivation of guava, however the concentration of this compound is below the maximum residue limit allowed for guava (MRL = 0.050 mg kg-1 ) according to ANVISA

Este trabalho apresenta o desenvolvimento, validação e aplicação de um método analítico para a análise multirresíduo de produtos veterinários em leite bovino in natura. Para a determinação dos analitos foi utilizada cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massas sequencial (LC-MS-MS). Através do método cromatográfico desenvolvido, foi possível obter, em uma única injeção, a separação e detecção de 19 produtos veterinários (de diferentes classes) com ótima sensibilidade. Para o procedimento de preparo de amostra adotou-se uma modificação de um enfoque desenvolvido recentemente denominado QuEChERS. Este enfoque engloba características necessárias a uma metodologia analítica que será empregada para análises de rotina em diversos laboratórios do país: é rápida, barata, não gera volume excessivo de descartes, é fácil de executar, não requer treinamento extenso ou e equipamentos de custo elevado e é robusta. Através do processo de preparo de amostra empregado foi possível obter boa recuperação para 14, dos 19 compostos presentes na corrida cromatográfica. O método analítico foi validado - segundo os parâmetros descritos na Commission Decision 2002/657/EC, da União Européia - e aplicado em uma amostra real de leite bovino adquirida de produtor local. / This study describes the development, validation and application of an analytical method for the multi residue analysis of veterinary products in raw bovine milk. For determination of the analytes was used liquid chromatography coupled with tandem spectrometry (LC-MS-MS). Through the developed chromatographic method, it was possible to separate and detect, with a single injection, 19 veterinary products (of different classes) with optimal sensibility. For the sample preparation procedure it was adopted a new approach: the QuEChERS procedure. This approach presents all the characteristics required for a routine analytical procedure, to be applied in several laboratories across the country: it\'s quick, cheap, doesn\'t generates large residue material, it\'s easy to execute, doesn\'t requires training or the use of expansive equipments and it\'s rugged. Through the sample preparation procedure, it was obtained good recovery to 14 of the 19 compounds in the chromatographic run. The analytical procedure was validated according to the Commission Decision 2002/657/EC, of the European Union and a real sample of raw milk, from local producer, was tested.

Os pesticidas têm sido largamente empregados na agricultura para controle de pragas, doenças e ervas daninhas. O uso intensivo de pesticidas nas culturas de tomates, desrespeitando as boas práticas agrícolas, tem causado preocupações quanto à provável contaminação do produto final e muitos métodos multirresíduos têm sido empregados para avaliar e determinar os níveis de resíduos em amostras de alimentos. Para tanto, o objetivo deste estudo foi a validação do método usando QuEChERS no preparo de amostra e LC-MS/MS para a quantificação de resíduos de 61 pesticidas de diferentes classes químicas em tomate. A detecção foi realizada utilizando espectrômetro de massas no modo MRM dinâmico, o tempo de análise foi de 13 min com coluna analítica recheada com partículas de 1,8 \'mü\'m de partícula. Dos 61 pesticidas estudados, 46 estão de acordo com os parâmetros de validação da Comissão Européia e Anvisa, 15% dos pesticidas validados apresentaram efeito matriz médio e as recuperações ficaram entre 87 e 116% e coeficiente de variação de 5 a 17%. Mais de 85% dos compostos investigados apresentaram limites de detecção igual ou menor que 5 \'mü\'g kg-1 e de quantificação igual ou menor que 10 \'mü\'g kg-1. Foram analisadas 58 amostras de tomate coletadas em supermercados da cidade de Piracicaba, SP, Brasil. Doze compostos foram detectados em trinta e cinco amostras (60% do total analisado), todos abaixo do limite máximo de resíduos permitido no Brasil para acefato, acetamiprido, azoxistrobina, benalaxil, bromuconazol, diflubenzurom, imidacloprido, iprodiona, procloraz e tiametoxam, e 15 amostras positivas para metamidofós e 1 para oxamil, que não possuem uso autorizado para a cultura de tomate. Foi realizado um estudo de lavagem de tomates contaminados com produtos formulados (8 pesticidas) com água, solução com 10% de vinagre e com 10% de bicarbonato de sódio e analisada a casca e polpa, para avaliar a capacidade de remoção de cada procedimento. Todos os tratamentos de lavagens (n=3) diferiram estatisticamente para todos os pesticidas avaliados (n=8), com exceção do fipronil, para o qual as lavagens com solução de 10% de bicarbonato de sódio e água não apresentaram diferença no nível de significância de 5%. A lavagem com água ou outras soluções antes do consumo é indicada para a redução de resíduos de pesticidas em tomate e a retirada da casca também contribui para essa redução / Pesticides have been widely used in agriculture to control pests, diseases and weeds. The intensive use of pesticides in tomato crops disrespecting good agricultural practices have been causing concerns about the possible contamination of the final product and many multiresidue methods have been used in order to evaluate and determine the levels of residues in food samples. Therefore, the aim of this study was validate the method using QuEChERS sample preparation and LC-MS/MS for quantification of 61 pesticides residues from different chemical classes in tomato. Detection was performed using mass spectrometry in dynamic MRM mode, run time had 13 min and analytical column packed with 1,8 \'mü\'m particles. Of the 61 pesticides studied, 46 are in accordance with the validation parameters of the European Commission and ANVISA, 15% of the validated pesticides presented matrix effect, recoveries were between 87 and 116% and coefficient of variation 5 to 17%. More than 85% of the compounds investigated showed limits of detection less or equal than 5 \'mü\'g kg-1 and the limits of quantification less or equal than 10 \'mü\'g kg-1. 58 real samples of tomato were analyzed and collected in supermarkets in Piracicaba, SP, Brazil. Twelve compounds were detected in thirty-five samples (60% of the total analyzed), all below the maximum residue limit allowed in Brazil for acephate, acetamiprid, azoxystrobin, benalaxyl, bromuconazole, diflubenzuron, imidacloprid, iprodione, prochloraz and thiamethoxam, and 15 positive samples of methamidophos and 1 for oxamyl, which are not authorized to use at the culture of tomatoes. A wash study was conducted with spiked tomatoes using formulated products (8 pesticides) with water, 10% acetic acid, 10% sodium bicarbonate solution and analyzed concentration in the peel and pulp, in order to evaluate the capacity to remove pesticides in each procedure. All wash treatments (n= 3) differed significantly for all pesticides evaluated (n= 8), with the exception of fipronil, which the washing with 10% of sodium bicarbonate solution and water no showed difference in the level of significance 5%. The washing with water or other solutions before consumption is indicated for the reduction of pesticide residues in tomatoes and the peeling also contributes to this reduction

O estudo objetivou desenvolver uma novo método de extração para analisar os poluentes orgânicos persistentes (POPs), no sedimento da Represa Billings em São Paulo, via cromatografia a gás com espectrometria de massas (GC/MS). O Tratado de Estocolmo realizado na Suécia em 1972, patrocinado pela ONU, possuindo 113 países participantes, inclundo o Brasil objetivou a eliminação de menos doze POPs, colaborando com a questão ambiental. Os POPs são compostos que persistem no meio ambiente e são altamente estáveis, podendo ultrapassar a barreira placentária. Neste trabalho foram abordados o Aldrin, Endrin, Dieldrin, DDT. DDE, DDD e Heptacloro. Para garantir a confiabilidade dos resultados analíticos, foram realizados ensaios de validação do método, baseados nas diretrizes do INMETRO. O método de extração dos analitos foi o Quechers, obtendo resultados de recuperação entre 40 e 120% para todos os POPs analisados neste trabalho, valores aceitáveis para matrizes complexas como o sedimento. Os limites de detecção e quantificação fora, 0,3 e 0,5 μg/kg respectivamente. As amostras analisadas não apresentaram contaminação significativa por POPs perante a Legislação Brasileira vigente. / The objective of this study was to develop a new extraction method to analyze persistent organic pollutants (POPs) in the Billings Reservoir sediment in São Paulo, using gas chromatography with mass spectrometry (GC / MS). The 1972 Stockholm Treaty, sponsored by the UN, with 113 participating countries, including Brazil, aimed at eliminating at least twelve POPs, collaborating with the environmental issue. POPs are compounds that persist in the environment and are highly stable and can overcome the placental barrier. In this work were approached: Aldrin, Endrin, Dieldrin, DDT. DDE, DDD and Heptachlor. In order to guarantee the reliability of the analytical results, validation tests of the method were carried out, based on INMETRO guidelines. The method of extraction of the analytes was Quechers, obtaining results of recovery between 40 and 120% for all POPs analyzed in this work, acceptable values for complex matrices such as sediment. The limits of detection and quantification were, respectively, 0.3 and 0.5 μg / kg. The analyzed samples did not present significant contamination by POPs before the current Brazilian Legislation.

A aquicultura é um dos sistemas de produção de alimentos com maior crescimento no mundo todo. Reconhecidamente, os sistemas intensivos de produção animal para alimentos são favoráveis à propagação de doenças infecciosas devido à alta densidade populacional. Por esta razão, antimicrobianos (antibacterianos e antiparasitários) são largamente empregados na medicina veterinária, sendo que os resíduos destes podem permanecer nos alimentos de origem animal, acima de valores considerados seguros, quando não são respeitadas as boas práticas veterinárias. Este trabalho teve por objetivos: (i) desenvolver e avaliar o desempenho de um método analítico para a determinação simultânea de resíduos de quinolonas (enrofloxacina, ciprofloxacina e difloxacinas), tetraciclinas (clortetraciclina, tetraciclina e oxitetracilina), sulfonamidas (sulfadimetoxina, sulfametazina e sulfatiazol) e bezimadazóis (albendazol) em filés de duas espécies de peixe (tilápia e pacu) de importância comercial no Brasil, empregando a cromatografia líquida de alta eficiência acoplada à espectrometria de massas; (ii) aplicar o método nas análises de amostras de filés de peixes disponíveis comercialmente. O procedimento de preparação da amostra baseou-se no método QuEChERS. Foram avaliadas as influências da composição e volume da solução extratora empregada, variação dos sais utilizados no processo de salting-out e sorventes empregados na etapa de limpeza, visando-se obter a maior eficiência de extração simultânea dos fármacos de interesse em filé de pacu e tilápia. A melhor condição do método de extração foi: 5 g de filé de peixe homogeneizado; 10 mL de ACN:MeOH 1% de ácido fórmico como solvente extrator; 2 g de sulfato de magnésio e 0,5 g de cloreto de sódio; 150 mg mL-1 de sulfato de magnésio e 25mg mL-1 de PSA e C18 para a etapa de limpeza. As eficiências de extração obtidas para todos os resíduos variaram de 70 a 100%. Para a separação cromatográfica, foi empregada fase móvel composta por água (solvente A) e acetonitrila (solvente B), ambas contendo 0,5% de ácido fórmico, sob eluição por gradiente. Como fase estacionária, empregou-se a coluna XTerra C18 MS de dimensões 100 x 3,9 mm, 3.5 ?m. Foi utilizado um sistema de ionização por eletronebulização operando em modo positivo (ESI+), na interface entre o sistema cromatográfico e o espectrômetro de massas, sendo este composto por analisadores de massas do tipo triplo-quadrupolo operando no modo de Monitoramento de Reações Múltiplas (MRM - Multiple Reaction Monitoring). Nestas condições foi possível o monitoramento dos 10 analitos em uma corrida analítica com duração de 14 minutos. O desempenho do método foi avaliado mediante os seguintes parâmetros de validação: seletividade, linearidade, precisão, veracidade/recuperação limites de decisão e capacidade de detecção. Todos os resultados obtidos para os parâmetros avaliados atendem aos critérios de aceitação propostos pelo Manual de Garantia da Qualidade Analítica para Resíduos e Contaminantes em Alimentos, proposto pelo Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento, o que qualifica o método desenvolvido para os objetivos propostos no presente trabalho. O método foi aplicado na ánalise de 20 amostras de filés de peixes de ambas as espécies, adquiridas na cidade de Ribeirão Preto, SP. Todas as amostras analisadas não apresentaram resíduos dos fármacos alvo em níveis detectáveis pelo método empregado. / Aquaculture is one of the fastest growing food production system in the world. Admittedly, the practice of intensive systems of animal food production could lead to the spread of infectious diseases due to the high population density. For this reason, antimicrobials (antibacterials and antiparasitics) are widely used in veterinary medicine, and residues are in animal foods, above safe, when they are not respected as good veterinary practices. The aim of this Project was (i) develop and validated a analytical method for the simultaneous determination of residues of quinolonolones (enrofloxacin, ciprofloxacin and difloxacin), tetracyclines (chlortetracycline, tetracycline and oxitetracilina), sulfonamides (sulfadimethoxine, sulfamethazine and sulfathiazole) and bezimadazóis (albendazole) in fillet two species of fish (tilapia and pacu) of commercial importance in Brazil, employing high performance liquid chromatography coupled to mass spectrometry; (Ii) Apply the method in analyses of sample fillet of fish commercially available. The sample preparation procedure was based on the QuEChERS method. The influence of the composition and volume of the extractive solution used, variation of the salts used in the salting-out process and sorbents used in the cleaning step were evaluated, aiming to obtain the highest efficiency of simultaneous extraction of the drugs of interest in pacu and tilapia fillet. The best condition of the extraction method was: 5 g of homogenized fish fillet; 10 mL of ACN: MeOH 1% formic acid as the extractive solvent; 2 g of magnesium sulfate and 0.5 g of sodium chloride; 150mg mL-1 of MgSO4, 25mg mL-1 of PSA and 25mg mL-1 C18 for the cleaning step. The extraction efficiencies obtained for all residues ranged from 70 to 100%. For a chromatographic separation, the mobile phase was used composed of water (solvent A) and acetonitrile (solvent B), both containing 0.5% formic acid, under gradient elution. As the stationary phase, the XTerra C18 MS column of dimensions 10 x 2.1 mm, 3.5 ?m was used. one by eletronebulização ionization system at the interface between the chromatography system and mass spectrometry operating in positive mode was used (ESI +), with mass analyzers triple-quadrupole operating in Multiple Reaction Monitoring Mode (MRM - Reaction Multiple Monitoring). Under these conditions it was possible to monitor the 10 analytes in an analytical run of 14 minutes. The method was evaluated through the validation requirements: selectivity, linearity, precision, veracity / recovery decision limits and detection capacity. All the results obtained for the quality assurance system for Food Residues and Contaminants, proposed by Ministry of Agriculture, Livestock and Food Supply, approved the developed method for the proposed objectives at this work. The method was applied to analysis of 20 samples of fish fillets from embassies as species, acquired in the retail market of Ribeirão Preto, SP. All analyzed samples showed no residues of the drugs above detectable levels by the method employed.

Grande parte do desenvolvimento científico nas análises em alimentos está relacionado à identificação e quantificação de resíduos de drogas veterinárias e contaminantes ambientais em matéria-prima. Dentre as substâncias mais amplamente estudadas como resíduos em alimentos estão os praguicidas. Cada vez mais as legislações e normas reguladoras buscam garantir que os alimentos levados aos consumidores estejam apropriados à ingestão, diminuindo o risco negligenciável à saúde, através da exigência de níveis cada vez menores dos limites máximos de resíduo, e muitas vezes, banindo diversas substâncias com altos e médios graus de toxicidade. Para tal, tem sendo intensificado o desenvolvimento de métodos precisos, exatos, robustos e baratos para a identificação e quantificação de praguicidas, de forma que tanto os órgãos públicos como as empresas privadas possam realizar o monitoramento dos alimentos oferecidos pelos produtores e fornecedores, e assim identificar possíveis fontes de exposição à substâncias que levem risco através da ingestão diária. Os indivíduos que apresentam maior suscetibilidade aos efeitos nocivos causados pela presença de praguicidas em níveis tóxicos nos alimentos são crianças e idosos, o que exige cuidados e limites ainda mais rígidos. Para garantir que os alimentos infantis fornecidos no mercado se mantenham dentro das condições adequadas para a ingestão, a sua produção deve ser controlada e monitorada. O presente trabalho visa avaliar a presença de praguicidas em Solanum tuberosum (batata), Daucus carota (cenoura) e Arracacia xanthorrhiza (mandioquinha) destinadas para a produção de baby-food e produtos similares, cultivados na área de São José do Rio Pardo, no estado de São Paulo, e disponíveis no varejo da cidade de São Paulo, através da técnica QuEChERS e identificação e quantificação por LC-MS/MS. Através da otimização dos parâmetros de espectrometria de massas e validação do método de extração QuEChERS para 216 compostos, foram identificados quais praguicidas possuíam a capacidade de serem detectados e quantificados com a performance adequada por cromatografia líquida acoplada a espectrometria de massas em tandem nas commodities estudadas. Amostras de batata, cenoura e mandioquinha de fornecedores da área de São José do Rio Pardo e fontes de varejo da cidade de São Paulo foram analisadas para identificar a presença dos analitos validados. Para as amostras investigadas, somente a commodity cenoura apresentou praguicidas quantificados acima do valor da Capacidade de Detecção (CCβ), sendo eles o Linurom, o Tebuconazol e o Triciclazol. Realizada a Avaliação de Risco, verificou-se que a exposição aos praguicidas nas commodities, mesmo nos casos de maior concentração, não era evidenciada como um risco, tendo em vista que os mesmos obtiveram resultados de 0,25% (Linurom), 0,1% (Tebuconazol) e 0,03% (Triciclazol) dos valores de suas Ingestões Diárias Aceitáveis (IDA). / Great part of the scientific development on food analysis is related to the identification and quantification of veterinary drugs and environmental contaminants residues in raw materials. Among the most studied residue substances in food are the pesticides compounds. Increasingly, legislations and regulatory standards seek to ensure that the food served to consumers are appropriate to the intake, reducing a negligible health risk, by requiring each time lower maximum residue levels, and often banning various substances with high and medium levels of toxicity. With this purpose, the development of accurate, robust and cheap methods has been intensified for the identification and quantification of pesticides, so that both public bodies and private companies are able to carry out the monitoring of food and feed offered by the producers and suppliers, and by doing so, identify possible sources of exposure to substances that lead to risk by daily intake. The individuals who are more susceptible to adverse effects caused by the presence of pesticides in toxic levels in food are children and the elderly, and because of this fact, the requirement for extensive care and limits even stricter is higher. In the attempt to ensure that children\'s food and feed market supplies fall within the right conditions for ingestion, its production should be controlled and monitored. The present study aims to evaluate the presence of pesticides in Solanum tuberosum (potato), Daucus carota (carrot) and Arracacia xanthorrhiza (mandioquinha) in samples grown in the area of São José do Rio Pardo, in the State of São Paulo, and directed to baby-food and similar products production, and in samples available at the market retail in the city of São Paulo, through the QuEChERS technique, and identification and quantification by LC-MS/MS. The pesticides molecules which had the ability to be detected and quantified with adequated performance by liquid chromatography coupled to tandem mass spectrometry in the studied commodities were identified by optimizing the mass spectrometer parameters and validating the QuEChERS extraction method of 216 compounds. Potato, carrot and mandioquinha samples, provided by suppliers in the area of Sao Jose do Rio Pardo and retail sources from São Paulo, were analyzed for the presence of the validated pesticides. Among the investigated samples, only the carrot commodity presented quantified pesticides above the value of Detection Capability (CCβ), namely Linuron, the Tebuconazole and Tricyclazole. Held the chemical risk assessment, it was found that the exposure to pesticides by the commodities, even in cases of higher concentrations, was not shown as a risk, given that they achieved results of 0.25% (Linuron), 0, 1% (Tebuconazole) and 0.03% (Tricyclazole) of the Acceptable Daily Intakes (ADI) values.

As Sulfonamidas (SAs) são antibióticos de uso muito comum na medicina veterinária, sendo também aplicadas na medicina humana. Os resíduos dessas substâncias, ou dos seus metabolitos na carne e outros alimentos, podem causar efeitos adversos para a saúde dos consumidores como, por exemplo, resistências a antibióticos e alergias. Este trabalho apresenta o desenvolvimento e aplicação de métodos modernos de preparo de amostra para determinação de multiresíduo de sulfonamidas em alimentos por cromatografia líquida acoplada a espectrometria de massas e ultravioleta visível. Dentre os métodos de preparo de amostra, aplicou-se o método de extração QuEChERS (Quicky, Easy, Cheap. Effective, Rugged, Safe) modificado, em combinação com a cromatografia liquida acoplada a espectrometria de massas, para a análise de dez sulfonamidas em amostras de músculo de frango e bovino. No segundo estudo, seguindo a tendência de miniaturização, sintetizou-se um polímero molecularmente impresso (Sulfadimetoxina-MIP) para uso como sorbente em dispositivos de Microextração com Sorbentes Empacotado (MEPS). O método, denominado SDM-MIP-MEPS, foi otimizado e aplicado em amostras de músculo de frango usando a cromatografia liquida com detecção por ultravioleta-visivel. Embora o uso do polímero molecularmente impresso (MIP) como sorbente seletivo para o MEPS já tenha sido reportada em dois trabalhos, pela primeira vez é descrito a aplicação de um MIP impresso com sulfdimetoxina (SDM), usando MEPS para extração de sulfonamidas em músculo de frango. Portanto, a novidade neste caso, é o uso da nova técnica extração miniaturizada (MEPS) com o polímero sintetizado sulfadimetoxina-MIP como sorbente de empacotamento. As metodologias foram validadas com sucesso de acordo com as diretrizes 657/2002/EU. / Sulfonamides are widely used in veterinary and human medicine. Residues of these compounds, or their metabolites in animal meats and other foods, are toxic and can cause side effects in human\'s health, such as resistance to antibiotics and allergic reactions. This study describes the development and application of a modern sample preparation approach for sulfonamides multiresidue determination in food by chromatographic methods coupled to mass spectrometry and ultraviolet-visible spectroscopy. Among those sample preparation methods, the modified QuEChERS extraction in combination with liquid chromatography in tandem with mass spectrometric detection was applied to the analysis of residues of 10 sulfonamides in chiken and cattle muscle. In the second study, following the miniaturization trends, it was synthesized a molecularly imprinted polymer (Sulfadimethoxine-MIP), for application as sorbent in Microextraction by Packed Sorbents (MEPS). The extraction method was optimized and successfully applied to chicken muscle samples in combination with highperformance liquid chromatography by ultraviolet-visible detection. Although the use of MIPs as selective packing materials for MEPS has already been reported in two papers, is first time that application of a MIP imprinted with Sulfadimethoxine is evaluated for the extraction of sulfonamides in chicken muscle. Therefore the novelty of the present work is the use of this new miniaturization extraction technique with synthesized sulfadimethoxine-MIP polymer as packing sorbent. The methods were successfully validated according to the 2002/657/EC guidelines.

Grande parte do desenvolvimento científico nas análises em alimentos está relacionado à identificação e quantificação de resíduos de drogas veterinárias e contaminantes ambientais em matéria-prima. Dentre as substâncias mais amplamente estudadas como resíduos em alimentos estão os praguicidas. Cada vez mais as legislações e normas reguladoras buscam garantir que os alimentos levados aos consumidores estejam apropriados à ingestão, diminuindo o risco negligenciável à saúde, através da exigência de níveis cada vez menores dos limites máximos de resíduo, e muitas vezes, banindo diversas substâncias com altos e médios graus de toxicidade. Para tal, tem sendo intensificado o desenvolvimento de métodos precisos, exatos, robustos e baratos para a identificação e quantificação de praguicidas, de forma que tanto os órgãos públicos como as empresas privadas possam realizar o monitoramento dos alimentos oferecidos pelos produtores e fornecedores, e assim identificar possíveis fontes de exposição à substâncias que levem risco através da ingestão diária. Os indivíduos que apresentam maior suscetibilidade aos efeitos nocivos causados pela presença de praguicidas em níveis tóxicos nos alimentos são crianças e idosos, o que exige cuidados e limites ainda mais rígidos. Para garantir que os alimentos infantis fornecidos no mercado se mantenham dentro das condições adequadas para a ingestão, a sua produção deve ser controlada e monitorada. O presente trabalho visa avaliar a presença de praguicidas em Solanum tuberosum (batata), Daucus carota (cenoura) e Arracacia xanthorrhiza (mandioquinha) destinadas para a produção de baby-food e produtos similares, cultivados na área de São José do Rio Pardo, no estado de São Paulo, e disponíveis no varejo da cidade de São Paulo, através da técnica QuEChERS e identificação e quantificação por LC-MS/MS. Através da otimização dos parâmetros de espectrometria de massas e validação do método de extração QuEChERS para 216 compostos, foram identificados quais praguicidas possuíam a capacidade de serem detectados e quantificados com a performance adequada por cromatografia líquida acoplada a espectrometria de massas em tandem nas commodities estudadas. Amostras de batata, cenoura e mandioquinha de fornecedores da área de São José do Rio Pardo e fontes de varejo da cidade de São Paulo foram analisadas para identificar a presença dos analitos validados. Para as amostras investigadas, somente a commodity cenoura apresentou praguicidas quantificados acima do valor da Capacidade de Detecção (CCβ), sendo eles o Linurom, o Tebuconazol e o Triciclazol. Realizada a Avaliação de Risco, verificou-se que a exposição aos praguicidas nas commodities, mesmo nos casos de maior concentração, não era evidenciada como um risco, tendo em vista que os mesmos obtiveram resultados de 0,25% (Linurom), 0,1% (Tebuconazol) e 0,03% (Triciclazol) dos valores de suas Ingestões Diárias Aceitáveis (IDA). / Great part of the scientific development on food analysis is related to the identification and quantification of veterinary drugs and environmental contaminants residues in raw materials. Among the most studied residue substances in food are the pesticides compounds. Increasingly, legislations and regulatory standards seek to ensure that the food served to consumers are appropriate to the intake, reducing a negligible health risk, by requiring each time lower maximum residue levels, and often banning various substances with high and medium levels of toxicity. With this purpose, the development of accurate, robust and cheap methods has been intensified for the identification and quantification of pesticides, so that both public bodies and private companies are able to carry out the monitoring of food and feed offered by the producers and suppliers, and by doing so, identify possible sources of exposure to substances that lead to risk by daily intake. The individuals who are more susceptible to adverse effects caused by the presence of pesticides in toxic levels in food are children and the elderly, and because of this fact, the requirement for extensive care and limits even stricter is higher. In the attempt to ensure that children\'s food and feed market supplies fall within the right conditions for ingestion, its production should be controlled and monitored. The present study aims to evaluate the presence of pesticides in Solanum tuberosum (potato), Daucus carota (carrot) and Arracacia xanthorrhiza (mandioquinha) in samples grown in the area of São José do Rio Pardo, in the State of São Paulo, and directed to baby-food and similar products production, and in samples available at the market retail in the city of São Paulo, through the QuEChERS technique, and identification and quantification by LC-MS/MS. The pesticides molecules which had the ability to be detected and quantified with adequated performance by liquid chromatography coupled to tandem mass spectrometry in the studied commodities were identified by optimizing the mass spectrometer parameters and validating the QuEChERS extraction method of 216 compounds. Potato, carrot and mandioquinha samples, provided by suppliers in the area of Sao Jose do Rio Pardo and retail sources from São Paulo, were analyzed for the presence of the validated pesticides. Among the investigated samples, only the carrot commodity presented quantified pesticides above the value of Detection Capability (CCβ), namely Linuron, the Tebuconazole and Tricyclazole. Held the chemical risk assessment, it was found that the exposure to pesticides by the commodities, even in cases of higher concentrations, was not shown as a risk, given that they achieved results of 0.25% (Linuron), 0, 1% (Tebuconazole) and 0.03% (Tricyclazole) of the Acceptable Daily Intakes (ADI) values.