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Impact of a Genetically Engineered Probiotic Therapy and IGF-1 Genomics in the PAHenu2 Mouse Model of PKU

Durrer, Katherine Elaine 12 1900 (has links)
Absence of functional phenylalanine hydroxylase results in phenylketonuria (PKU). Viable treatments remain few, expensive and secondary conditions such as osteopenia occur in most PKU patients. Objective 1: Given the recently described roles of gut microbes to aid host digestion, an orally administered genetically engineered probiotic as the delivery vehicle for enzyme replacement therapy was created. The engineered probiotic, pHENOMMenal, produced phenylalanine ammonia lyase with significant production of trans-cinnamate (phenylalanine cleavage product) in vitro and resulted in a reduction of 515 μM in blood phenylalanine when fed to PKU animals for 14 days (from 2307µM ± 264µM to 1792µM ± 261µM, n = 6, P < 0.05). The control probiotic produced no change in blood phenylalanine. Thus, pHENOMMenal treatment in PKU mice demonstrated engineered microbes could compensate for a metabolic deficiency of the host. Objective 2: Evaluate the PAHenu2 mouse model of PKU for a genetic discrepancy causing ocular enlargement and delayed development observed only after the PAHenu2 mutation was crossed to the C57BL/6J mouse. When compared to healthy littermates, ELISA indicated a consistent but insignificant decrease in plasma IGF-1 and an increase in ocular IGF-1 in PKU animals. SNP screening demonstrated a differential inheritance of IGF-1 alleles in healthy and PKU animals based on PAH allele inheritance. Ocular and developmental phenotypes in the PAHenu2 colony match those described in previous IGF-1 studies. Understanding the IGF-1 inheritance discrepancy will enable better osteopenia research using PAHenu2 mice and allow breeding of a healthier mouse colony for continued research. Collectively the results from this work describe a new therapeutic approach for treatment of PKU as well as a better understanding of the PAHenu2 mouse model to study this disease.
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Estudo do efeito de microrganismos probióticos sobre Eimeria acervulina (Tyzzer, 1929) em frangos de corte / Study of the effect of probiotic microorganisms on Eimeria acervulina (Tyzzer, 1929) in broilers

Wagner Luiz da Costa Freitas 19 August 2011 (has links)
No presente trabalho avaliou-se o efeito antiparasitário de uma preparação probiótica constituída por quatro espécies de lactobacilos, L. casei ATCC 7469, L. plantarum ATCC 8014, L. fermentum ATCC 9338 e L. acidophillus ATCC 4536, no tratamento da eimeriose aviária causada por Eimeria acervulina. Para tanto, foram utilizados 120 animais, da espécie Gallus gallus, machos, com 14 dias de idade, distribuídos em seis grupos, sendo o Grupo 1 constituído por animais tratados apenas com água e ração (controle negativo); Grupo 2 constituído por animais que receberam diariamente uma dose da preparação probiótica contendo 1x108 UFC/mL; Grupo 3 constituído por animais infectados experimentalmente com 2x105 oocistos esporulados de Eimeria acervulina (controle positivo) e Grupo 4 onde os animais receberam diariamente uma dose da preparação probiótica contendo 1x108 UFC/mL durante o período do experimento e após 7 dias do início do tratamento, foram infectados com 2x105 oocistos esporulados de E. acervulina; no Grupo 5 os animais foram infectados com 2x105 oocistos esporulados de E. acervulina e paralelamente receberam uma dose diária da preparação probiótica em estudo contendo 1x108 UFC/mL; no Grupo 6 os animais foram infectados com 2x105 oocistos esporulados de E. acervulina e após o surgimento dos sinais clínicos da infecção passaram a receber diariamente uma dose da preparação probiótica contendo 1x108 UFC/mL, até o final do experimento. Durante 28 dias, semanalmente, amostras de sangue e fezes foram coletadas para determinação de OoPG, testes bioquímicos e parâmetros zootécnicos. Exames de fezes foram realizados diariamente para se determinar os períodos pré-patente e patente do parasita, bem como o efeito da preparação probiótica no combate a infecção. Os resultados demonstraram que a preparação probiótica em estudo reduziu a infecção intestinal causada por Eimeria acervulina, contribuindo para o bem estar animal. Referente aos parâmetros bioquímicos verificou-se efeito significativo sobre o perfil lipídico no 4º dia pós infecção, não sendo observado diferenças significativas para os demais parâmetros. No tocante ao desempenho zootécnico, verificou-se que a preparação probiótica não resultou em diferenças significativas em relação ao ganho de peso, eficiência e conversão alimentar dos animais avaliados. / This study evaluated the antiparasitic effect of a probiotic preparation which consisted of four species of lactobacilli (Lactobacillus casei ATCC 7469, L. plantarum ATCC 8014, L. fermentum ATCC 9338 and L. acidophilus ATCC 4536) in the treatment of eimeriosis in broilers caused by Eimeria acervulina. Therefore, during 28 days, 120 animals of Gallus gallus species, males, 14 days old, were distributed in six groups, as follow: Group 1 the animals received only feed and water \"ad libidum\" (negative control); Group 2 consisted of animals that received a daily dose of probiotic preparation which contained 1x108 CFU/mL; Group 3 the animals were experimentally infected with 2x105 oocysts of Eimeria acervulina (positive control); Group 4 the birds received a daily dose of probiotic preparation containing 1x108 CFU / mL during the experiment and after 7 days of the treatment beginning, these animals were infected with 2x105 oocysts of E. acervulina; Group 5 was composed by animals that were infected with 2x105 oocysts of the parasite and simultaneously received a daily dose of probiotic preparation containing 1x108 CFU / ml, Group 6 the animals were infected with 2x105 oocysts of E. acervulina and after clinical signs of infection were noticed, the birds were treated daily with a dose of the probiotic preparation containing 1x108 CFU / mL until the end of the experiment. During 28 days six blood and feces samples were collected and parameters such as oocyst elimination, histopathological, and biochemical were evaluated. Stool examinations were performed daily to determine the parasite prepatent and patent periods, and the probiotic effect on the infection. The results showed that the probiotic preparation under study reduced the intestinal infection caused by Eimeria acervulina, contributing to animal welfare. Regarding the biochemical parameters there was a significant effect on the lipid profile on the 4th day after infection, and no significant differences were observed for the other parameters. With regard to zootechnical performance, it was found that the probiotic preparation resulted in no significant differences in weight gain, and in feed conversion efficiency.
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Probiótico na ração de frangos de corte submetidos a antibioticoterapia: desempenho e microbiota intestinal / Dietary probiotic in broiler chickens submitted to antibiotic therapy: performance and intestinal microbiota

Pereira, Rafaela 03 December 2014 (has links)
Este estudo teve o objetivo de avaliar a eficiência do probiótico em manter o equilíbrio da microbiota intestinal de aves submetidas à antibioticoterapia e as associações com o desempenho. Os tratamentos dietéticos consistiram de uma dieta basal única, à base de milho e farelo de soja, à qual foi acrescido ou não o probiótico Bacillus subtillis (100 g/ton de ração), na concentração de 10? UFC/g. Por 3 dias consecutivos a partir de 21 dias de idade, as aves foram submetidas à antibioticoterapia via água de bebida consistindo de 200 ppm de bacitracina metileno dissacilato (efeito em bactérias Gram-positivas ) e 1000 ppm de sulfato de neomicina (efeito em bactérias Gram-negativas). O experimento foi conduzido com frangos de corte no período de 1 a 42 dias, sendo que de 1 a 21 dias as aves receberam somente o tratamento dietético, e, a partir de 21 dias, as aves receberam os tratamentos dietético e terapêutico. Aos 2, 4 e 6 dias após a antibioticoterapia, 3 aves de cada unidade experimental foram sacrificadas para coleta do conteúdo do intestino delgado e do ceco e obtidos \"pools\" dos conteúdos intestinais em cada unidade experimental para constituir uma repetição. O experimento foi realizado com 4 tratamentos, obedecendo a esquema fatorial 2×2 para as variáveis de desempenho (com e sem probiótico × com e sem antibioticoterapia) com 9 repetições e 2×2×3 para as análises da microbiota intestinal (com e sem probiótico na dieta × com e sem antibioticoterapia × 2, 4 e 6 dias após a antibioticoterapia) com 3 repetições. O DNA total foi extraído dos conteúdos do intestino delgado e ceco para o isolamento da região 16S rRNA e análise das comunidades bacterianas. As técnicas moleculares utilizadas foram a de fingerprinting Terminal Restriction Length Polymorphism (T-RFLP), PCR em tempo real (qPCR) e o sequenciamento, sendo que, para todas as técnicas, a região alvo foi o gene 16S rRNA. Os fatores dietético e terapêutico modularam a microbiota intestinal de forma independente. Houve efeito dos fatores probiótico e antibioticoterapia nos grupos predominantes do conteúdo do intestino, desde a classificação taxonômica filo até a classificação gênero. Alguns grupos filogenéticos foram igualmente afetados pelos 2 fatores em estudo, enquanto que outros grupos foram alterados de forma específica em função do probiótico ou antibioticoterapia. A antibioticoterapia, assim como o probiótico dietético, reduziu o número de unidades taxonômicas operacionais (OTUs) no conteúdo do ceco. O melhor desempenho observado nas aves alimentadas com dietas com probiótico provavelmente está relacionado às alterações observadas na estrutura das comunidades intestinais e grupos filogenéticos, como o acréscimo de Lactobacillus e redução de Clostridiales. A antibioticoterapia modificou a estrutura da comunidade bacteriana, entretanto não provocou queda no desempenho das aves. A comunidade bacteriana do intestino das aves medicadas e suplementadas com probiótico apresentou alta similaridade com a comunidade das aves que receberam apenas probiótico dietético, indicando a possível recuperação da microbiota intestinal aos 6 dias após a antibioticoterapia. / The purpose of this study was to verify the ability of a probiotic in the feed to maintain the stability of gut microbiota in chickens after antibiotic therapy and associations with the performance. The dietary treatments consisted of a cornsoybean meal basal diet that was supplemented or not with a probiotic (Bacillus subtilis) in the concentration of 3×109 cfu/kg of feed. Starting on day 21, the birds were submitted to the antibiotic therapy consisting of 200 ppm of bacitracin methylene disalicylate (for Gram-positive bacteria) and 1,000 ppm of neomycin sulfate (for Gram-negative bacteria) in the drinking water, during 3 days. The trial was conducted with broiler chickens from 1 to 42 days of age, however, from 1 to 21 days, the chickens received only the dietary treatment, and after of the 21 days, the birds received the dietary and therapeutic treatments. At 2, 4 and 6 days after the antibiotic therapy, three chickens from each experimental unit were euthanized and the contents of the small intestine and ceca were collected and pooled by pen. The trial was conducted in a completely randomized design with 4 treatments and 9 replicates in a 2×2 factorial arrangement for performance characteristics (with and without probiotic × with and without antibiotic therapy), and in a 2×2×3 factorial arrangement for gut microbiota (with and without probiotic × with and without antibiotic therapy × 2, 4 and 6 days after of the antibiotic therapy) with 3 replicates per treatment. The DNA was extracted from the contents of the small intestine and ceca to isolate the 16S r RNA and study of the bacterial communities. The molecular techniques used were the terminal restriction fragment length polymorphism (TRFLP), quantitative PCR (qPCR) and sequencing, considering the 16S rRNA -genetargeted. The dietary and therapeutic factors modulated the gut microbiota independently. The probiotic and antibiotic therapy affected the main groups within of the gut content from the phylogenetic classification at the phylum level until the phylogenetic classification at the genera level. Some phylogenetic groups were equally affected by the two factors while other groups were changed in a distinct form depending on of the probiotic or antibiotic therapy. The antibiotic therapy and dietary probiotic decreased the number of taxonomic operational unit (OTUs) in cecal content. The improved performance observed in birds supplemented with probiotic was probably related to changes in the structure of intestinal bacterial communities and phylogenetic groups such as higher Lactobacillus and decreased Clostridiales. Antibiotic therapy modified the bacterial community structure; however it did not cause loss of broiler performance. The gut bacterial community in birds medicated and supplemented with probiotic had high similarity with the gut community of birds that received dietary probiotic only, indicating the possible recovery of the gut bacterial community 6 days after the antibiotic therapy.
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Bactérias ácido lácticas isoladas de silagem de colostro bovino: Potencial probiótico e viabilidade de imobilização celular utilizando como suporte grãos de soja / Lactic acid bacteria isolated from bovine colostrum silage: Probiotic potential and viability of cellular immobilization using as support soybean grains

Vitola, Helena Reissig Soares 23 February 2017 (has links)
Submitted by Gabriela Lopes (gmachadolopesufpel@gmail.com) on 2017-03-27T13:33:54Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação Helena Reissig Soares Vitola.pdf: 1434457 bytes, checksum: 51af522eb00ca36c96559b364913e8d2 (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2017-03-28T20:26:28Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação Helena Reissig Soares Vitola.pdf: 1434457 bytes, checksum: 51af522eb00ca36c96559b364913e8d2 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-28T20:26:28Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação Helena Reissig Soares Vitola.pdf: 1434457 bytes, checksum: 51af522eb00ca36c96559b364913e8d2 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2017-02-23 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Bactérias ácido lácticas, com potencial probiótico, são consideradas de grande interesse para o mercado de alimentos funcionais, os quais estão em expansão, devido à contribuição desses alimentos à saúde dos indivíduos. Objetivou-se no presente estudo isolar, caracterizar bactérias acido lácticas com potencial probiótico e imobilizar em grãos de soja, a fim de manter sua viabilidade durante o armazenamento. Foram realizados testes para isolamento e caracterização (coloração de Gram, presença de catalase, propriedades tecnológicas, fermentação de carboidratos) dos isolados a partir de silagem de colostro bovino; avaliação dos parâmetros de segurança microbiológica (atividade das enzimas, hemolisina, DNase e gelatinase, susceptibilidade a antimicrobianos de uso clínico e perfil plasmidial), avaliação do potencial probiótico (simulação da tolerância ao trânsito gastrointestinal, capacidade de auto-agregação, co-agregação, hidrofobicidade, atividade da enzima β galactosidase e atividade antagonista), avaliação da produção de exopolissacarídeos, identificação molecular, imobilização celular utilizando como suporte grãos de soja e microscopia eletrônica de varredura do biocatalizador. Dos isolados caracterizados como bactérias ácido lácticas, seis foram eleitos em testes preliminares (potencial tecnológico, resistência a diferentes concentrações de bile e fermentação de açúcares), três apresentaram-se seguros microbiológicamente e um caracterizou-se como potencialmente probiótico. A bactéria selecionada para imobilização, SCL3, pertencente ao gênero Lactobacillus da espécie casei, produtora de exopolissacarídeo, passou por processo fermentativo que permitiu a adsorção de células na superfície dos grãos de soja. A imobilização possibilitou a viabilidade das células em concentração de 6,23 log UFC.g -1 e 6,71 log UFC.g -1 até o final do 300 dia de armazenamento após secagem (liofilização) e em refrigeração, respectivamente. A microscopia eletrônica de varredura permitiu a visualização das células aderidas a superfície dos grãos de soja. / Lactic acid bacteria, with probiotic potential, are considered of great interest for the functional food market, which are expanding due to the contribution of these foods to the health of individuals. The objective of this study was to isolate, characterize lactic acid bacteria with probiotic potential and immobilize them in soybean grains, in order to maintain their viability during storage. Isolation and characterization tests (Gram staining, presence of catalase, technological properties, carbohydrate fermentation) of the isolates were carried out from bovine colostrum silage; Evaluation of microbiological safety parameters (enzyme activity, hemolysin, DNase and gelatinase, susceptibility to antimicrobials of clinical use and plasmid profile), evaluation of probiotic potential (simulation of gastrointestinal transit tolerance, selfaggregation capacity, co-aggregation, Hydrophobicity, β-galactosidase enzyme activity and antagonist activity), evaluation of exopolysaccharide production, molecular identification, cellular immobilization using as support soybean grains and scanning electron microscopy of the biocatalyst. Of the isolates characterized as lactic acid bacteria, six were selected in preliminary tests (technological potential, resistance to different concentrations of bile and fermentation of sugars), three were microbiologically safe and one was characterized as potentially probiotic. The bacterium selected for immobilization, SCL3, belonging to the genus Lactobacillus of the casei species, exopolysaccharide producer, undergoes a fermentative process that allowed the adsorption of cells on the surface of the soybean grains. The immobilization made possible the viability of the cells at a concentration of 6.23 log CFU.g-1 and 6.71 log CFU.g-1 until the end of the 300 day of storage after drying (lyophilization) and in refrigeration, respectively. Scanning electron microscopy allowed the cells to adhere to the surface of the soybean grains.
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Efeitos de diferentes estratégias de aplicação de probióticos no cultivo do camarão marinho Litopenaeus vannamei (Boone,1931)

SOUZA JUNIOR, Egidio Alves de 11 February 2008 (has links)
Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2017-02-10T11:25:47Z No. of bitstreams: 1 Egidio Alves de Souza Junior.pdf: 332566 bytes, checksum: 00dbf9d5c1a02b578a0d82a7a9f6810b (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-10T11:25:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Egidio Alves de Souza Junior.pdf: 332566 bytes, checksum: 00dbf9d5c1a02b578a0d82a7a9f6810b (MD5) Previous issue date: 2008-02-11 / In the present study, different probiotics application strategies were evaluated with the objective to show the methodology that have the ability of enhance growth parameters and water quality variables in no water exchange super intensive heterotrophic culture of Litopenaeus vannamei. The experiment was realized in laboratory during thirty days. It consisted in twelve 48-L plastic tanks stocked with 40 shrimp (2.26 ± 0.02 g initial weight) each. Tanks received flow-through water coming from one of four 500-L sources corresponding to the treatments with two commercial probiotics (Bacillus sp.) added in the water (WP), feed (FP), water and feed (WFP) and without probiotic addition (NP). Shrimp growth and water quality parameters were recorded during the culture period and bacteriological analysis of shrimp hepatopancreas performed at the end of the experiment. Overall results indicated that growth performance was negatively affected when the probiotic was added in the water, but water quality was significantly improved in all probiotic treatments. The results obtained in this study suggest that all probiotics application strategy tested have the ability to interfere in any ways on the growth parameters and the physical and chemical water quality variables in L. vannamei super intensive heterotrophic culture. / No presente estudo foram avaliadas diferentes estratégias de aplicação de probióticos com o objetivo de determinar a metodologia que tem a capacidade de incrementar os parâmetros de crescimento e a qualidade da água do cultivo super intensivo de Litopenaus vannamei em meio heterotrófico com troca zero de água. O experimento foi realizado em laboratório durante trinta dias. Consistiu de doze tanques plásticos de 48-L cada, estocados com 40 camarões (2,26 ± 0,02 g, peso inicial). Os tanques receberam água recirculada por escoamento através de quatro caixas de 500-L. Cada três tanques corresponderam a um dos quatro tratamentos. Neste experimento foram utilizados dois probióticos comerciais (Bacillus sp.). Estes produtos foram adicionados na água (WP), na ração (FP), água e ração (WFP) e um tratamento não recebeu os probióticos (NP). Os parâmetros de crescimento e as variáveis de qualidade da água foram mensurados durante o período de cultivo e uma análise bacteriológica do hepatopâncreas dos animais foi realizada no final do experimento. De um modo geral os resultados indicaram que os parâmetros de crescimento foram negativamente afetados quando o probiótico foi adicionado na água. Entretanto a qualidade da água foi melhorada significativamente em todos os tratamentos com a utilização de probióticos. As respostas obtidas neste estudo sugerem que todas as estratégias de aplicação utilizadas neste estudo têm a capacidade de interferir de alguma maneira, sobre osparâmetros de crescimento e sobre as variáveis físicas e químicas de qualidade da água no cultivo super intensivo de L. vannamei em meio heterotrófico.
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Utilização de probiótico (Bacillus spp.) na larvicultura do camarão marinho Litopenaeus vannamei

SILVA, Emanuell Felipe Beserra da 10 February 2010 (has links)
Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2017-02-10T13:14:13Z No. of bitstreams: 1 Emanuell Felipe Beserra da Silva.pdf: 411741 bytes, checksum: bc52ae73b30a1e2f1b60236283006192 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-10T13:14:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Emanuell Felipe Beserra da Silva.pdf: 411741 bytes, checksum: bc52ae73b30a1e2f1b60236283006192 (MD5) Previous issue date: 2010-02-10 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / This dissertation consisted of two studies and was divided into two papers, the first evaluated the influence of the addition of probiotic Bacillus spp. in the larviculture of white shrimp Litopenaeus vannamei, while the second compared the use of probiotic and antibiotic in the postlarvae culture of the species. For the first study, three experiments were performed: (I) Nauplios4-5 to Zoea3, where they were exposed to probiotic through water (Pw), microalgae (Pm), water and microalgae (Pwm) and control without probiotic (C); (II) Mysis1 to Mysis3, exposed to probiotic through the water (Pw), Artemia (Pa), water and Artemia (Pwa) and control (C) and (III) PL1 to PL10,subject to the same treatments of experiment II. The water quality parameters showed no significant differences among treatments of each experiment. In general, the weight and survival of shrimp in the treatments with probiotic were significantly higher compared with controls in experiments I and II, but this difference was not observed among treatments of experiment III. The concentration of Vibrio spp. both in the water and postlarvae in experiment III was significantly higher in control compared with treatments with the use of probiotic. Already in experiments I and II, the concentration of Vibrio spp. in the water did not differ among treatments, however, Mysis3 larvae treated with probiotic had a lower concentration of Vibrio spp. compared with the control. In the second study, postlarvae (PL1 to PL10) were cultured in three treatments, corresponding to a biological treatment (TB), which was added probiotic Bacillus spp., chemical treatment (TQ) with the addition of antibiotic (erythromycin) and a control (TC), without both products in the culture water. The water quality parameters, as well as the zootechnical performance of postlarvae (weight, total length and survival) did not differ among treatments. However, the final concentrations of Vibrio spp. both in the culture water and postlarvae were significantly reduced with the use of probiotic (TB) in relation to other treatments. Based on the results obtained in the two studies, suggested that the use of probiotic Bacillus spp. in the larviculture of shrimp L. vannamei can provide an increase in the growth and survival of animals, but mainly provides a reduction in the concentration of Vibrio spp. in the culture system. Furthermore, the use of probiotic has great potential to replace the use of antibiotic in the culture of L. vannamei postlarvae. / A presente dissertação foi composta por dois estudos e dividida em dois artigos científicos, o primeiro avaliou a influência da adição do probiótico Bacillus spp. na larvicultura do camarão branco Litopenaeus vannamei, enquanto o segundo comparou a utilização de probiótico e antibiótico no cultivo de pós-larvas da espécie. Para o primeiro estudo, foram realizados três experimentos: (I) Nauplios4-5 a Zoea3, onde foram expostos ao probiótico através da água (Pw), microalga (Pm), água e microalga (Pwm) e controle sem probiótico (C); (II) Mísis1 a Mísis3, expostos ao probiótico através da água (Pw), Artemia (Pa), água e Artemia (Pwa) e controle (C) e (III) PL1 a PL10, submetidos aos mesmos tratamentos do experimento II. Os parâmetros de qualidade de água não apresentaram diferenças significativas entre os tratamentos de cada experimento. Em geral, o peso e sobrevivência dos camarões nos tratamentos com probiótico foram significativamente superiores em comparação aos controles nos experimentos I e II, porém esta diferença não foi observada entre os tratamentos do experimento III. A concentração de Vibrio spp. tanto na água quanto nas pós-larvas no experimento III foi significativamente maior no controle comparado com os tratamentos com uso de probiótico. Já nos experimentos I e II, a concentração de Vibrio spp. na água não diferiu entre os tratamentos, entretanto, as larvas Mísis3 tratadas com probiótico apresentaramu ma menor concentração de Vibrio spp. comparadas com o controle. No segundo estudo, póslarvas (PL1 a PL10) foram cultivadas em três tratamentos, correspondendo a um tratamento biológico (TB), onde foi adicionado probiótico Bacillus spp., tratamento químico (TQ), com adição de antibiótico (eritromicina) e um tratamento controle (TC), sem ambos os produtos na água de cultivo. Os parâmetros de qualidade de água, assim como o desempenho zootécnico das pós-larvas (peso, comprimento total e sobrevivência) não diferiram entre os tratamentos.Entretanto, as concentrações finais de Vibrio spp. tanto na água de cultivo como nas póslarvas foram reduzidas significativamente com a utilização de probiótico (TB) em relação aos outros tratamentos. Com base nos resultados obtidos nos dois estudos, sugere-se que o uso do probiótico Bacillus spp. na larvicultura do camarão L. vannamei pode proporcionar um incremento no crescimento e sobrevivência dos animais, mas principalmente possibilita uma redução na concentração de Vibrio spp. no sistema de cultivo. Além disso, o emprego do probiótico tem grande potencial para substituir o uso de antibiótico no cultivo de pós-larvas de L. vannamei.
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Bacillus subtilis em dietas de suínos nas fases de crescimento e terminação: resposta no desempenho, balanço nutricional, microbiológica e econômica / Bacillus subtilis in swine diets in the growing and finishing phases: answers on performance, nutrient balance, microbiological and economic

Nataly Villa Paulino da Silva 15 March 2013 (has links)
Os probióticos são indicados como alternativa para reduzir a infecção de patógenos e melhorar a saúde e o desempenho animal. O estudo presente avaliou desempenho zootécnico, balanço nutricional, produção de metano fecal e avaliação econômica e microbiológica da ração e fezes de suínos nas fases de crescimento e terminação, alimentados com dieta contendo probiótico (Bacillus subtilis) comparando-se os resultados aos oriundos de dietas inclusas ou não de antimicrobianos. Constatou-se que além do GPD na fase de crescimento II, as demais variações dos resultados sugerem melhor conversão alimentar dos animais submetidos ao tratamento com probiótico, quando os animais foram segregados da condição comercial de produção para a condição experimental. A inclusão de probiótico na dieta melhorou a digestibilidade aparente da proteína, indicando também melhor digestibilidade da matéria seca, da energia e da relação energia digestível: energia bruta. Não houve significativa perda de capital, quando se optou pela inclusão dietética do probiótico, ao invés do antibiótico. Fezes oriundas da dieta com probiótico produziram menor quantidade de metano que aquelas da combinação probiótico e antibiótico ou só o antibiótico. / Probiotics are indicated as alternatives to reduce infections from pathogenic microorganisms and improve health and animal performance. The objective of this research was to evaluate growth performance, nutrient balance, economic parameters, faces methane production and feces microbial status of pigs feed probiotic (Bacillus subtilis) and different protein. Results from antibiotic diet were compared with probiotic diet in all situations. Beside weight gain (AWG) during growth phase II, most of results suggest better feed conversion for pigs under probiotic diet, under segregation condition form farm and conventional pig production. The probiotic inclusion in the diet improved the protein digestibility as well suggested better dry matter and energy digestibility and digestibility: gross energy rate. There is no significant capital loss with probiotic inclusion in the diet compared to antibiotic inclusion. Feces derived from pigs fed with probiotic diet produced less methane than those pigs fed with probiotic and antibiotic diet or antibiotic diet.
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DesidrataÃÃo de suco de abacaxi probiÃtico por spray dryer / Dehydration of probiotic pineapple juice by spray-dryer

Francisca Diva Lima Almeida 28 February 2012 (has links)
FundaÃÃo Cearense de Apoio ao Desenvolvimento Cientifico e TecnolÃgico / Pesquisas recentes apontam a utilizaÃÃo de sucos de frutas como excelente meio para veicular micro-organismos probiÃticos. Diante disso, o objetivo desse trabalho foi desenvolver um novo alimento probiÃtico de origem nÃo lÃctea, a partir da desidrataÃÃo, por spray dryer, do suco de abacaxi contendo Lactobacillus casei NRRL B-442. Primeiramente, foi realizado um tratamento tÃrmico no suco de abacaxi (90 ÂC /1minuto) com o objetivo de inativar as proteases presentes no mesmo e avaliar a influÃncia da inativaÃÃo dessa enzima na sobrevivÃncia do micro-organismo. Posteriormente, foi avaliado o uso de trÃs temperaturas (150, 120 e 100 ÂC) para a desidrataÃÃo do suco, a fim de definir uma temperatura adequada com base na sobrevivÃncia do micro-organismo apÃs o processo de desidrataÃÃo. Outros parÃmetros tambÃm foram estudados, tais como: o efeito da adiÃÃo de diferentes materiais (gelatina, goma arÃbica, maltodextrina), os quais foram empregados como agentes protetores do micro-organismo, bem como a concentraÃÃo de cada agente utilizada. A viabilidade do L. casei antes e apÃs a secagem, os nÃveis de rendimento e reidrataÃÃo do pà e a cor do suco reconstituÃdo tambÃm foram avaliados. Com base nos resultados obtidos podemos concluir que o uso de temperaturas mais baixas (100ÂC) e a aplicaÃÃo de tratamento tÃrmico no suco favoreceram a sobrevivÃncia do L. casei apÃs desidrataÃÃo do suco. O emprego de 10% de gelatina e 5% de goma arÃbica, como agente de proteÃÃo, garantiu excelentes nÃveis de sobrevivÃncia do micro-organismo apÃs a secagem mostrando, dessa forma, que à possÃvel formular um novo alimento probiÃtico em pà sem as limitaÃÃes dos produtos lÃcteos. / Recent researches show the potential use of fruit juices as an excellent way to carry probiotic microorganisms. Thus, the aim of the following study was to develop a new non-dairy probiotic food from of pineapple juice containing Lactobacillus casei NRRL B-442 dehydrated by spray-drying process. Firstly, the pineapple juice underwent a heat treatment (90  C / 1 minute) in order to inactivate the proteases present in the juice and evaluate the influence of enzyme inactivation on the microorganism survival. Subsequently, the employment of three temperatures (150, 120 and 100  C) on the juice dehydration was appraised, with the purpose of defining an appropriate temperature based on the microorganism survival, after the dehydration process. Other parameters were also studied, such as: the effect of addition of different materials (gelatin, gum arabic, maltodextrin), which were used as protective agents for the microorganism, as well as the concentration of each tested adjuvant. Viability of L. casei (before and after the drying process), powder yield and rehydration levels and the color of the reconstituted juice were also assessed. Based on the attained results, it can be concluded that the utilization of lower temperatures (100  C) and the appliance of heat treatment in the juice favored the survival of L. casei after dehydration. Excellent levels of microorganism survival after the drying process were achieved by using 10% gelatin and 5% gum arabic as protective agents, thus showing a promising possibility of formulating a new powder probiotic food without the restrictions inherent in dairy products.
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Uso de imunoestimulante Saccharomyces cerevesiae em peixes da espécie Cyprinus carpio / Feed with immunostimulant Saccharomyces cerevesiae for fishes of the specie Cyprinus carpio

Pedro Henrique de Oliveira Viadanna 29 March 2012 (has links)
O aquarismo é uma atividade mundialmente difundida e um segmento extremamente grande da indústria de animais de estimação. O Brasil, em 2007, exportou o valor de US$ 5.871.576,73 em peixes. Devido à biologia dos peixes, todo seu manejo pode desencadear uma resposta fisiológica de estresse, que, dependendo da duração, tipo e espécie de manejo leva a uma resposta imunossupressora, que pode acarretar doença e morte aguda e consequentemente grande prejuízo à produção desses animais. O uso de imunoestimulantes, como suplementação dietética pode prover defesa inata e resistência a patógenos. O presente trabalho teve como objetivo avaliar a viabilidade da utilização de mananoligossacarídeo de levedo de cerveja (Saccharomyces cerevesiae), como imunoestimulante adicionado à ração oferecida a peixes da espécie Cyprinus carpio durante 45 dias. Para avaliar a imunidade dos peixes, foram feitas avaliações hematológicas periódicas e, no final do período determinado, os peixes foram desafiados imunologicamente com estresse e infectados com Aeromonas hydrophila. As carpas do grupo controle tiveram uma taxa de crescimento de 0,05 g/dia, conversão alimentar de 14,09 e eficiência protéica de 0,25, enquanto o grupo imunoestimulado obteve a taxa de crescimento de 0,11g/dia, conversão alimentar de 6,15 e eficiência protéica de 0,57. Não houve diferença estatística entre o resultado da hematologia dos animais do grupo controle e do grupo imunoestimulado. Dos animais infectados experimentalmente, 88% morreram em menos de 24 horas por choque endotóxico e, no exame post mortem, não houve diferença entre os grupos. A carpa que recebeu alimentação controle e foi infectada teve anemia macrocítica normocrômica, trombocitopenia, linfopenia, monocitose e aumento do número de CGE. A carpa que recebeu alimentação com MOS, foi infectada e sobreviveu, não apresentou alteração nos parâmetros hematológicos. A ração com MOS foi zootecnicamente melhor para a nutrição das carpas. Com base na taxa de sobrevivência e na avaliação hematológica, não há como responder se a ração suplementada com MOS foi imunologicamente melhor do que a ração controle. / The aquarium hobby is an activity wordwide spread and a segment extremely large of the pet industry. Brazil, in 2007, exported an amount of US$ 5.871.576,73 of fishes. Due to the biology of the fishes, all its management can trigger a physiological response leading to stress, that depending on the duration, type and specie, can conclude in immunosuppressive response, leading to disease and acute death, creating a great prejudice. The use of immunostimulants, as dietary supplementation may provide an innate defense against pathogens. This study aims to evaluate the feasibility of using mannan oligosaccharide of brewer yeast (Saccharomyces cerevesiae) as immunostimulants added to the feed for koi fishes (Cyprinus carpio) during 45 days. To evaluate the immunity of the fishes, periodic hematologic evaluations were made and at the end of the determined period, the fishes were immunologically challenged with stress and inoculation with Aeromonas hydrophila. The control group had a growth rate of 0,05g/day, feed conversion of 14,09 and protein efficiency ratio of 0,25, while the treatment group had growth rate of 0,11g/day, feed conversion of 6,15 and protein efficiency ratio of 0,57. The hematological results showed no statistical difference between the control group and immunostimulant group according. Analyzing the experimental infected animals, 88% died within 24 hours, due to endotoxic shock, and in the post mortem examination, there were no difference between groups. The koi that received control feed and it was infected had macrocytic normochromic anemia, thrombocytopenia, lymphopenia, monocytosis and increased of special granulocytic cells. The koi that received the MOS feed, was infected with A. hydrophila and survived, had no alteration on haematological parameters. The feed with MOS was zootechnical better than the control feed to carps. Based on the rate of survival and hematology, there are no possibility of answering if supplemented feed with MOS was immunologic better than control feed.
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Associação de probióticos no aleitamento e creche em leitões desafiados com Salmonella Typhimurium / Association of probiotics in lactation and nursery in piglets challenged with Salmonella Typhimurium

Esther Ramalho Afonso 28 April 2011 (has links)
O experimento associando probióticos no aleitamento e creche utilizou 144 leitões do nascimento até aos 62 dias de idade no Laboratório de Pesquisa em Suínos (FMVZ USP). No aleitamento, o delineamento experimental foi inteiramente casualizado com dois tratamentos e na creche em blocos casualizados formando o esquema fatorial 2x3 com seis tratamentos. A unidade experimental no aleitamento foi a baia maternidade constituída de grade de parição e na creche gaiola suspensa com 3 animais cada, constituindo, 8 repetições por tratamento. Aos 35 dias de idade os animais da creche foram inoculados com cepa de Salmonella Typhimurium via oral. Na maternidade os tratamentos foram: Placebo (PLA), 1mL de água destilada e Probiótico A (ProbA), 5g em 15mL de água destilada. O ProbA foi aplicado em duas ocasiões, ao nascimento e 12 horas antes do desafio e os animais que não receberam ProbA, receberam PLA. Os tratamentos na creche foram: Probiótico A Probiótico B (ProbA ProbB) 30g/tonelada de ProbB na ração; Controle Probiótico B (CTL ProbB): 30g/tonelada de ProbB na ração; Probiótico A Probiótico A(ProbA ProbA); Controle Controle (CTL CTL); Probiótico A Desafio (ProbA DES); Controle Desafio (CTL DES). As variáveis; peso, consumo, ganho de peso e conversão alimentar, foram analisadas em medidas repetidas no tempo com contrastes e o escore de fezes submetido à análise de variância pelo teste de Tukey. Foi utilizado o programa computacional Statistical Analysis System SAS. Na maternidade o peso médio do ProbA foi superior ao PLA, não observando-se diferenças no ganho de peso. Na creche o ProbA mostrou-se significativamente melhor em comparação aos demais tratamentos na conversão alimentar. No escore fezes, os animais desafiados apresentaram mais diarréia, e mais eliminação de S. Typhimurium, evidenciando o efeito positivo do desafio programado. A avaliação histológica aos 63 dias revelou aspecto similar nos diferentes grupos com e sem desafio. A eficiência econômica destacou o CTL ProbB.. O estudo indicou ação positiva dos probióticos quando aplicado logo ao nascimento, por influenciar diretamente na formação da microbiota intestinal, em fases mais adiantadas como na creche os efeitos são menos diretos. / The experiment involving probiotics in lactation and nursery were used one hundred and forty four piglets were used from birth to 62 days of age at Swine Research Laboratory (USP FMVZ). In the lactation, the experimental design was randomized with two treatments and in the nursery were randomized blocks forming a 2x3 factorial, consisting of six treatments. The experimental unit considered was the pen with 3 animals, with 8 repetitions per treatment. At 35 days of age the nursery animals were inoculated with a Salmonella Typhimurium strain orally. The treatments in the maternity were: Placebo (PLA): 1mL of distilled water and Probiotic A (ProbA): 5g in 15ml of distilled water. The ProbA was applied twice, at birth and 12 hours before the challenge and the animals that received no ProbA, received PLA. At the nursery twelve hours before the challenge, the same group of piglets that received ProbA and PLA in the maternity, received reinforcement for ProbA and PLA. In the nursery: Probiotic A Probiotic B (ProbA ProbB): 30g/ton of diet; Control Probiotic B (ProbB CTL): 30g/ton of diet; Probiotic A probiotic A (ProbA probA) Control Control (CTL CTL) Probiotic Challenge (DES ProbA) Control Challenge (CTL DES).The variables analyzed were weight, consumption, weight gain and feed conversion. The variables were analyzed with repeated measures contrasts and fecal score variable was subjected to analysis of variance by Tukey test. We used the computer program Statistical Analysis System SAS. In maternity, ProbA was superior to PLA treatment and did not observe differences in weight gain. At nursery the ProbA ProbA was significantly better compared to the other treatments in feed conversion. In the feces score, challenged animals showed high scores and greater elimination of S. Typhimurium, showing the effects of the programmed challenge. Histological evaluation at 63 days showed similar appearance within different groups (challenged or not). Economic evaluation shows CTL ProbB. The study indicated positive action of probiotics applied shortly after birth, by directly influencing the formation of the intestinal tract and in nursery as the effects are less direct.

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