FIGUEIREDO, Lanesse Medeiros de. Efeito da acupuntura e da eletro acupuntura sobre a glicemia lactacemia e as concentrações de lactato no fígado e rim de ratos sadios. 2009. 87 f. Dissertação (Mestrado em Cirurgia) - Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2009. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2016-03-07T13:19:38Z No. of bitstreams: 1 2009_dis_lmfigueiredo.pdf: 1247442 bytes, checksum: bbbefbe2ba9dafba54aaee552ed20deb (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2016-03-07T14:08:43Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2009_dis_lmfigueiredo.pdf: 1247442 bytes, checksum: bbbefbe2ba9dafba54aaee552ed20deb (MD5) / Made available in DSpace on 2016-03-07T14:08:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2009_dis_lmfigueiredo.pdf: 1247442 bytes, checksum: bbbefbe2ba9dafba54aaee552ed20deb (MD5) Previous issue date: 2009 / Acupuncture (Ac) and electroacupuncture (EAc) have been widely used in clinical practice for the treatment of various diseases. Traditional Chinese medicine (TCM) recommends the use of acupoints Zusanli (E-36) and Zhongwan (RM-12) for relief of symptoms of diabetes mellitus. Ac and EAc stimulation may release some endogenous opioids, including - endorphins, enhancing insulin secretion. The aim of this study was to evaluate the effects of Ac and EAc on acupoints ST-36 and RM-12 on glycemia, lactacemia and liver and kidneys lactate concentrations in healthy rats. In this study, 48 rats were divided into 4 groups (baseline [GVB] , Ac, EAc10Hz and EAc100Hz) and subdivided into 2 subgroups according to the time of samples collection (T-30, immediately after the end of the session or Ac or EAc and T-60: 30 minutes after the end of the session). All rats were anesthetized and experimental groups (Ac, EAc10Hz and EAc100Hz) were submitted respectively to the EAc and Ac (10 Hz and 100 Hz) on acupoints ST-36 and RM-12 for 30 minutes. Glucose, lactate and LDH were assayed in the blood. Tissue lactate concentration was assayed in liver and kidney of rats at T-30 and T-60 timepoints. Stimulation of acupoints ST-36 and RM-12 by EAc 10Hz significantly reduced blood glucose levels in healthy rats, at the end of electrical stimulation (190.80 ± 24.88 vs. 138.50 ± 21.09, p> 0.001) and 30 minutes later (186.30 ± 23.76 vs. 134.10 ± 25.65 , p> 0.001). Using a frequency 10 times higher (100Hz) similar results were obtained (T-30, 186.30 ± 23.76 vs. 99.17 ± 8.79, p> 0.001, and T-60, 190.80 ± 24.88 vs. 113.40 ± 7.37, p> 0.001). Ac stimulation did not significantly alter blood glucose. There was also a significant reduction in the concentrations of LDH immediately after the acupuncture session and 30 minutes later, both in animals subjected to Ac (T-30, 518.20 ± 43.31 vs. 354.80 ± 44.66, p <0.001, T-60, 637.80 ± 61.01 vs. 325.70 ± 10.54, p <0.001) and EAc (10Hz: T-30, 518.20 ± 43.31 vs. 286.50 ± 59.86, p <0.001, T-60, 637.80 ± 61.01 vs 268.80 ± 43.51, p <0.001 and 100Hz: T-30, 518.20 ± 43.31 vs. 213, 80 ± 24.85, p <0.001, T- 60, 637.80 ± 61.01 vs 188.20 ± 24.00, p <0.001), suggesting a lower anaerobic metabolism. In this study, a significant decrease in serum lactate 30 minutes after the start of the study in rats subjected to EAc 100 Hz suggests the prevalence of aerobic glycolysis (2.10 ± 0.23 vs. 1.19 ± 1.02, p < 0.001). Similar result was observed in the levels of lactate in the liver (T-60, 10 Hz: 1.92 ± 0.42 vs. 0.69 ± 0.29, p <0.001 and 100 Hz: 1.92 ± 0.42 vs. 0.44 ± 0.21, p <0.001) and kidney (T-30, 100 Hz: 1.86 ± 0.87 vs. 0.91 ± 0.38, p <0.05). The results of this study show that the Ac and EAc, can reduce the concentrations of blood glucose in hyperglycemic animals. Higher frequencies have greater hypoglycemic effect. The reduction of blood glucose should be a consequence of the action of endogenous opioids and - endorphin, as suggested in previous studies. The mechanism of reduction of lactate and LDH appears to be related to a prevalence of aerobic glycolysis. / A Acupuntura (Ac) e a Eletroacupuntura (EAc) tem sido amplamente utilizadas na prática clínica para o tratamento de várias doenças. A Medicina Tradicional Chinesa (MTC) preconiza o uso dos acupontos Zusanli (E-36) e Zhongwan (RM-12) para alívio dos sintomas de diabetes mellitus. Por ação da Ac e EAc, ocorre liberação de opióides endógenos, incluindo β-endorfinas, que comprovadamente estimulam a secreção de insulina. O objetivo desse estudo foi avaliar os efeitos da Ac e EAc nos acupontos E-36 e RM-12 sobre as concentrações de glicose e lactato no sangue, fígado e rim de ratos sadios. No presente estudo, 48 ratos foram divididos em 4 grupos (Valores Basais, Ac, EAc10Hz e EAc100Hz) e subdivididos em 2 subgrupos de acordo com os tempos de coleta dos substratos (T-30: imediatamente após o término da sessão de Ac ou EAc e T-60: 30 minutos após o término da sessão). Todos os ratos foram anestesiados e os grupos experimentais (Ac, EAc10Hz e EAc100Hz) foram submetidos, respectivamente, à Ac e à EAc (10 Hz e 100 Hz) nos acupontos E-36 e RM-12, durante 30 minutos. Foram dosadas as concentrações de glicose, lactato e LDH no sangue, fígado e rim dos animais nos tempos T-30 e T-60. A estimulação dos acupontos E-36 e RM-12 por EAc de 10Hz reduziu significativamente a glicemia em ratos sadios, ao término da estimulação elétrica (190,80±24,88 vs. 138,50±21,09, p>0,001) e 30 minutos mais tarde (186,30±23,76 vs. 134,10±25,65, p>0,001). Utilizando-se uma freqüência 10 vezes maior (100Hz) demonstrou-se resultado semelhante (T-30, 186,30±23,76 vs. 99,17±8,79, p>0,001; e T-60, 190,80±24,88 vs. 113,40±7,37, p>0,001). A Ac não alterou significativamente a glicemia. Houve também redução significante das concentrações de LDH imediatamente após o término da sessão de acupuntura e 30 minutos depois, tanto nos animais submetidos à AC (T-30, 518,20± 43,31 vs. 354,80±44,66, p<0,001; T-60, 637,80±61,01 vs. 325,70±10,54, p<0,001) quanto à EA (10Hz: T-30, 518,20± 43,31 vs. 286,50±59,86, p<0,001; T-60, 637,80±61,01 vs 268,80±43,51, p<0,001 e 100Hz: T-30, 518,20± 43,31 vs. 213,80±24,85, p<0,001; T-60, 637,80±61,01 vs 188,20±24,00, p<0,001), sugerindo um menor metabolismo anaeróbio. No presente estudo, a redução significante do lactato sérico 30 minutos após o início do estudo em ratos submetidos à EAc com 100 Hz sugere prevalência da glicólise aeróbica (2,10±0,23 vs. 1,19±1,02, p<0,001). Resultado semelhante foi observado nos níveis de lactato no fígado (T-60, 10 Hz: 1,92±0,42 vs. 0,69±0,29, p<0,001 e 100 Hz: 1,92±0,42 vs. 0,44±0,21, p<0,001) e rim (T-30, 100 Hz: 1,86±0,87 vs. 0,91±0,38, p<0,05). Os resultados deste estudo mostram que a Ac e a EAc nos animais hiperglicêmicos podem reduzir as concentrações de glicose no sangue. Freqüências maiores tem maior efeito hipoglicemiante. A redução da glicemia deve ser conseqüência da ação de opióides endógenos e da β-endorfina, como sugerido em estudos anteriores. O mecanismo e redução das concentrações de lactato e LDH parece estar relacionado a uma prevalência da glicólise aeróbica.

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2016-06-28T08:42:33Z No. of bitstreams: 1 texto completo..pdf: 1713533 bytes, checksum: cd405fdf078ca1121913afb7ac7c4176 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-28T08:42:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo..pdf: 1713533 bytes, checksum: cd405fdf078ca1121913afb7ac7c4176 (MD5) Previous issue date: 2005-10-27 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais / Bactérias do ácido láctico, isoladas de salame tipo italiano, com atividade antagonista a Listeria monocytogenes e Staphylococcus aureus foram caracterizadas. A natureza protéica dos agentes antagonistas nas seis linhagens foi demonstrada por serem conservadas em sobrenadantes neutralizados, pela não sensibilidade à catalase e pela sensibilidade a proteases. Cinco perfis de resistência a Proteinase K, Papaína, Tripsina e Protease de Bacillus polimyxa foram observados entre os seis isolados lácticos. Em todos os isolados, a atividade antagonista manteve-se presente em sobrenadantes neutralizados após tratamento térmico de 98 o C por 40 minutos. Em todos os isolados, a atividade inibitória manteve-se independentemente do pH do meio, entre pH 2 e pH 10. O isolado que apresentou melhor inibição contra L. monocytogenes e S. aureus, inclusive em meio líquido, foi identificado pela análise da seqüência de um gene codificador do rRNA 16S e pelo perfil de fermentação de açúcares como Lactococcus lactis subsp. lactis, e aqui denominado L. lactis subsp. lactis PD 6.9. O modo de ação da bacteriocina produzida por L. lactis subsp. lactis PD 6.9 sobre L. monocytogenes foi definido como bactericida. A produção de bacteriocina e o efeito inibitório sobre L. monocytogenes em condições que simulam o salame foram demonstrados. L. lactis subsp. lactis PD 6.9 atingiu 10 9 UFC/mL e a bacteriocina foi detectada após 8 horas. Em estudo de co-cultivo com L. monocytogenes, o crescimento de L. lactis subsp. lactis PD 6.9 não foi afetado pela presença de L. monocytogenes e apresentou o mesmo comportamento que quando cultivado como monocultura. Porém, o crescimento de L. monocytogenes foi reprimido e o número inicial de 10 6 células foi mantido até aproximadamente 12 horas de cultivo e nenhum crescimento foi detectado após 32 horas em um limite de detecção de 10 UFC/mL. A atividade da bacteriocina produzida por L. lactis subsp. lactis PD 6.9, em meio D-MRS, surge no final da fase logarítmica de crescimento e é máxima na fase estacionária. A atividade foi mais alta em condições ácidas do que em básicas, com atividade máxima em pH 2 e não foi alterada por tratamento térmico a 121 o C por 20 minutos, pelo processo de liofilização ou pelo efeito de congelamento e descongelamento. O armazenamento da bacteriocina nas temperaturas de -20 o C e -80 o C por até 6 meses também não alterou a atividade de inibição. A purificação foi realizada utilizando precipitação com sulfato de amônio, cromatografia de troca iônica, cromatografia de interação hidrofóbica e HPLC- fase reversa. Grande perda de atividade da bacteriocina foi observada especialmente após cromatografia de troca iônica e somente 0,025% da atividade inicial foi recuperada após HPLC-fase reversa. Os resultados obtidos com a purificação indicam que a bacteriocina é pequena, catiônica, hidrofóbica e com capacidade de formar agregados. / Lactic acid bacteria, isolated from Italian type salami, displaying antagonistic activity against Listeria monocytogenes and Staphylococcus aureus were characterized. The proteinaceous nature of the inhibitory agents in the six strains was demonstrated by their maintenance in neutralized supernatants, non sensibility to catalase and by sensibility proteases. Five resistance profiles to Proteinase K, Papain, Trypsin and Protease of Bacillus polimyxa were observed among the six strains. In all the isolates, the antagonistic activity was present in neutralized supernatants after heat treatment at 98 o C for 40 minutes. For all the isolates, the inhibitory activity was maintained, independently of the pH of the broth, between pH 2 and pH 10. The isolate that presented best activity against L. monocytogenes and S. aureus, including in broth, was identified by nucleotide sequence analysis of a gene encoding 16S rRNA and by sugar fermentation pattern as Lactococcus lactis subsp. lactis, here denominated L. lactis subsp. lactis PD 6.9. The bacteriocin produced by L. lactis subsp. lactis PD 6.9 has bactericidal effect on L. monocytogenes. Bacteriocin production and inhibitory effect on L. monocytogenes under conditions that simulate those of salami were demonstrated. L. lactis subsp. lactis PD 6.9 reached 10 9 CFU/mL and the bacteriocin was detected after 8 hours of cultivation in salami broth. In co- cultivation, L. lactis subsp. lactis PD 6.9 was unaffected by the presence of L. monocytogenes and presented the same behavior as when cultivated as monoculture. However, the growth of L. monocytogenes was repressed and the initial number of 10 6 cells was maintained to approximately 12 hours of cultivation and nothing was detected after 32 hours with a limit of detection of 10 CFU/mL. The activity of the bacteriocin produced by L. lactis subsp. lactis PD 6.9, in D-MRS broth, appears at the end of the logarithmic growth phase and reaches its maximum in the stationary phase. The activity was higher under acidic conditions, with maximum activity in pH 2 and it was not altered by heat treatment at 121 o C for 20 minutes, by lyophilization or by freeze-thaw treatment. The storage of the bacteriocin at -20 o C and -80 o C for up to 6 months did not alter the inhibitory activity. Purification was performed by precipitation with ammonium sulphate, ion-exchange chromatography, hydrophobic-interaction chromatography and reverse-phase HPLC. Loss of activity of the bacteriocin was especially observed after ion-exchange chromatography and only 0,025% of the initial activity was recovered after reverse-phase HPLC. The results obtained with the purification indicate that the bacteriocin is small, cationic, hydrophobic and with capacity to form aggregates. / Tese antiga

Una medida ampliamente utilizada para la planificación eficiente de los protocolos de entrenamiento deportivo es el umbral anaeróbico, el cual se define como la mayor intensidad de ejercicio que puede mantener una persona durante un periodo de tiempo prolongado. Existen distintas pruebas para obtenerlo, pero la mayoría son costosas y complejas. Un método alternativo para la estimación del umbral anaeróbico es la fórmula de velocidad crítica, método no invasivo, de baja complejidad, fácil ejecución y de poco costo. No obstante, la evidencia científica es controversial sobre su exactitud, además de existir escasa literatura de su utilización en pruebas de campo para fondistas. Es por esto que el objetivo principal de la presente investigación es determinar si la fórmula de velocidad crítica estima el umbral anaeróbico en una prueba de campo. Para ello se midió la concordancia entre la velocidad obtenida a través de la fórmula de velocidad crítica, y la velocidad lograda al momento de alcanzar el umbral del lactato; este último utilizado como test gold standard para la estimación del umbral anaeróbico en campo. Los datos empleados para la investigación corresponden a las evaluaciones realizadas a 13 deportistas entre 35 y 45 años, pertenecientes al club de fondista del Colegio San Ignacio del Bosque, Providencia. La recolección de datos se realizó durante el periodo comprendido entre Julio y Octubre del año 2010. La modalidad utilizada en este estudio es de tipo no experimental, transversal descriptivo de concordancia. Para el análisis estadístico de los datos se utilizó el método de Bland-Altman y prueba t de Student, los cuales indicaron que no había concordancia entre las velocidades obtenidas con el umbral del lactato y la fórmula de velocidad crítica, existiendo una diferencia significativa entre ellos, por lo tanto ésta última no podría ser empleada como una alternativa simple, no invasiva en la determinación del umbral anaeróbico. / A widely used measure for the efficient planning of sports training protocols is the anaerobic threshold, which is defined as the highest exercise intensity that can hold a person for a large period of time. There are different tests to obtain it, but most of them are expensive and complex. An alternative method for estimating the anaerobic threshold is the critical speed formula. This is a non-invasive method, with low complexity, easy to implement and of low cost. However, scientific evidence about its accuracy is controversial, and there is poor literature about its use in field tests for distance runners. That is why the main objective of this research is to determine if the critical speed formula estimates the anaerobic threshold in a field test. For this was measured the agreement between the velocity obtained through the critical speed formula, and speed when reaching the lactate threshold, the latter used as gold standard test to estimate the anaerobic threshold in the field. The data used correspond to the evaluations made to 13 athletes between 35 and 45 years belonging to San Ignacio del Bosque School’s long distance runners club, Providencia. Data collection was performed during the period between July and October 2010. The method used in this study is non-experimental, transversal, descriptive of agreement. For the statistical analysis of the data was used the Bland-Altman’s method and Student's t-test, which indicated that there was no agreement between the speed obtained with the lactate threshold and the critical speed formula, there is a significant difference between them, therefore, this latter could not be used as a simple and noninvasive anaerobic threshold determination.

Objetivo: Avaliar a formação de aderências intraperitoneais em ratos após o implante peritoneal da tela de polipropileno comparada à tela de SIS, e o efeito do PAF como barreira anti-aderente à tela de polipropileno. Métodos: 55 ratos albinos foram randomizados em três grupos. O tipo de aderência, o percentual de tela coberta por aderência, e a força de rupturas das aderências foram avaliadas. Resultados: Os tipos de aderência 2 e 3 foram mais freqüentes no grupo 1 (polipropileno) e no grupo 3 (polipropileno+PAF); as do tipo 0 e 1 foram mais freqüentes no grupo 2 (SIS). A força media de ruptura foi de 1,58N (±0,719N) no grupo 1, 0,42N (±0,432N) no grupo 2 e 1,23N (±0,432N) no grupo3. Mais de 50% da tela estava coberta por aderências em 12 (80%) casos do grupo 1, em 4 (20%) casos do grupo 2 e em 16 (84,2%) casos do grupo 3. O grupo 2 foi significativamente diferente (p<0.001) dos demais grupos. Conclusão: O uso intraperitoneal da tela de polipropileno levou a elevados índices de aderência, e o uso de PAF como barreira anti-aderente não reduziu estes índices. O implante intraperitoneal de SIS revelou índices baixos de aderências peritoneais.

Objetivo: Avaliar a formação de aderências intraperitoneais em ratos após o implante peritoneal da tela de polipropileno comparada à tela de SIS, e o efeito do PAF como barreira anti-aderente à tela de polipropileno. Métodos: 55 ratos albinos foram randomizados em três grupos. O tipo de aderência, o percentual de tela coberta por aderência, e a força de rupturas das aderências foram avaliadas. Resultados: Os tipos de aderência 2 e 3 foram mais freqüentes no grupo 1 (polipropileno) e no grupo 3 (polipropileno+PAF); as do tipo 0 e 1 foram mais freqüentes no grupo 2 (SIS). A força media de ruptura foi de 1,58N (±0,719N) no grupo 1, 0,42N (±0,432N) no grupo 2 e 1,23N (±0,432N) no grupo3. Mais de 50% da tela estava coberta por aderências em 12 (80%) casos do grupo 1, em 4 (20%) casos do grupo 2 e em 16 (84,2%) casos do grupo 3. O grupo 2 foi significativamente diferente (p<0.001) dos demais grupos. Conclusão: O uso intraperitoneal da tela de polipropileno levou a elevados índices de aderência, e o uso de PAF como barreira anti-aderente não reduziu estes índices. O implante intraperitoneal de SIS revelou índices baixos de aderências peritoneais.

Objetivo: Avaliar a formação de aderências intraperitoneais em ratos após o implante peritoneal da tela de polipropileno comparada à tela de SIS, e o efeito do PAF como barreira anti-aderente à tela de polipropileno. Métodos: 55 ratos albinos foram randomizados em três grupos. O tipo de aderência, o percentual de tela coberta por aderência, e a força de rupturas das aderências foram avaliadas. Resultados: Os tipos de aderência 2 e 3 foram mais freqüentes no grupo 1 (polipropileno) e no grupo 3 (polipropileno+PAF); as do tipo 0 e 1 foram mais freqüentes no grupo 2 (SIS). A força media de ruptura foi de 1,58N (±0,719N) no grupo 1, 0,42N (±0,432N) no grupo 2 e 1,23N (±0,432N) no grupo3. Mais de 50% da tela estava coberta por aderências em 12 (80%) casos do grupo 1, em 4 (20%) casos do grupo 2 e em 16 (84,2%) casos do grupo 3. O grupo 2 foi significativamente diferente (p<0.001) dos demais grupos. Conclusão: O uso intraperitoneal da tela de polipropileno levou a elevados índices de aderência, e o uso de PAF como barreira anti-aderente não reduziu estes índices. O implante intraperitoneal de SIS revelou índices baixos de aderências peritoneais.

Tese de Doutoramento. Engenharia Química e Biológica. Faculdade de Engenharia. Universidade do Porto. 2012

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2017-08-24T13:21:13Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1177730 bytes, checksum: ae33210f9ef99d122bd42327540bae5c (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-24T13:21:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1177730 bytes, checksum: ae33210f9ef99d122bd42327540bae5c (MD5) Previous issue date: 2017-06-30 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Bactérias ácido lácticas (BAL) foram isoladas do ambiente de produção de leite e avaliadas quanto ao potencial benéfico. Testes preliminares e análise por PCR foram aplicados para selecionar e identificar através de sequenciamento de rRNA 16S 15 cepas de BAL: Lactobacillus (n = 11; Lb. casei MSI1, Lb. casei MSI5, Lb. casei MRUV1, Lb. casei MRUV6, Lb. acidophilus MVA3, Lb. nagelli MSIV4, Lb. harbinensis MSI3, Lb. harbinensis MSIV2, Lb. fermentum SIVGL1, Lb. plantarum MLE5 e Lb. plantarum MSI2), Pediococcus (n = 2; P. pentosaceus MLEV8 e P. acidilactici MSI7) e Weissella (n = 2; W. paramesenteroides MRUV3 e W. paramesenteroides MSAV5). Todas as linhagens selecionadas apresentaram resistência ao baixo pH e à presença de sais biliares. O teste API ZYM foi realizado para caracterizar a atividade enzimática entre as cepas e foi observada elevada atividade β-galactosidase em 13 delas. Todas as cepas apresentaram alta taxa de sobrevivência ao suco gástrico e as condições intestinais simulados, capacidade de auto-agregação e co- agregação com micro-organismos indicadores e alta hidrofobicidade da superfície celular. A maioria das cepas foi positiva para os genes de adesão map e EFTu. Os resultados de deconjugação de sais biliares mostraram forte desconjugação para todas as cepas. Todas as cepas mostraram bons resultados para assimilar lactose. Após esta etapa de caracterização do potencial benéfico, as 15 BAL foram avaliadas quanto ao potencial de virulência e de resistência antimicrobiana. A produção de fatores de virulência (hemólise, gelatinase, lipase, desoxirribonuclease e aminas biogênicas: lisina, tirosina, histidina e a ornitina) foi avaliada por métodos fenotípicos, a 25 °C e 37 °C, bem como a resistência a 17 antibióticos. Os isolados foram também submetidos à análise de PCR para identificar a presença de 49 genes associados a fatores de virulência. Nenhuma das cepas apresentou atividade hemolítica, produção de gelatinase, lipase, desoxirribonuclease e aminas biogênicas. Das 15 cepas selecionadas, para 12 tipos de antibióticos no método de difusão em disco, todas as amostras foram resistentes à oxacilina e sulfa/trimetoprim, 14 foram resistentes a gentamicina, 11 foram resistentes a clindamicina, nove cepas foram resistentes à vancomicina, oito cepas para rifampicina, cinco foram resistentes a eritromicina, quatro foram resistentes à tetraciclina, duas cepas foram resistentes à ampicilina, uma cepa foi resistente ao cloranfenicol e nenhuma apresentou resistência ao imipenem. Para um teste quantitativo do antibiograma, 5 antibióticos em fitas Etest® (bioMérieux) foram selecionados. Todas as 15 cepas foram resistentes à vancomicina, duas para rifampicina, uma para gentamicina e uma para o cloranfenicol. Em relação aos genes relacionados com virulência, 19 dos 49 genes testados estavam presentes em algumas cepas. Após a caracterização do potencial virulento das 15 BAL, estas foram avaliadas quanto ao potencial tecnológico para aplicação na indústria de laticínios. Todas as cepas apresentaram capacidade de acidificação, atingindo valores de pH entre 0.73 e 2.11 em 24 horas: Lb. casei MRUV6 apresentou maior capacidade de acidificação (pH 2.11 após 24 h). Dez cepas foram capazes de produzir diacetil a 37 °C, com exceção de Lb. casei MSI1, Lb. harbinensis MSI3, Lb. fermentum SIVGL1, Lb. plantarum MLE5 e W. paramesenteroides MRUV3. Todas as cepas foram capazes de produzir exopolissacarídeos, e apenas duas cepas apresentaram atividade proteolítica (Lb. casei MSI5 e W. paramesenteroides MSAV5). Com base nessa caracterização, Lb. casei MRUV6 foi selecionado para produzir o leite fermentado, armazenado a 4 °C e 10 °C e monitorado até 35 dias de vida útil. As amostras foram submetidas a métodos fenotípicos e moleculares para avaliar a presença de Lb. casei MRUV6 (plaqueamento convencional e RT-PCR, verificando a expressão de gapdh, um gene housekeeping) e verificar a expressão do gene bsh, relacionado à resistência à sais biliares (RT-PCR). A população de Lb. casei MRUV6 se apresentou estável durante todo o período de armazenamento a 4 °C e 10 °C a níveis em torno de 9.9 log UFC/g e também pelo monitoramento da expressão do controle endógeno GAPDH. No entanto, o gene bsh não foi expresso durante o período de armazenamento. O estudo demonstrou o potencial uso da cepa de Lb. casei MRUV6 isolada de um ambiente lácteo para a produção de um produto lácteo fermentado e sua estabilidade durante o armazenamento a 4 °C e 10 °C. Todos os isolados do estudo apresentaram características benéficas, segurança para utilização em alimentos e potencial tecnológico para utilização na indústria de laticínios. Além disso, os mesmos podem ainda ser submetidos a estudos adicionais para avaliações in vivo e realizar a caracterização como probióticos. / Lactic acid bacteria isolated from dairy environment were evaluated for beneficial potential. Preliminary screening and PCR analysis were applied to select and identified through 16s rRNA sequencing 15 LAB strains: Lactobacillus (n = 11; Lb. casei MSI1, Lb. casei MSI5, Lb. casei MRUV1, Lb. casei MRUV6, Lb. acidophilus MVA3, Lb. nagelli MSIV4, Lb. harbinensis MSI3, Lb. harbinensis MSIV2, Lb. fermentum SIVGL1, Lb. plantarum MLE5 and Lb. plantarum MSI2), Pediococcus (n = 2; P. pentosaceus MLEV8 and P. acidilactici MSI7) and Weissella (n = 2; W. paramesenteroides MRUV3 and W. paramesenteroides MSAV5). All selected strains showed resistance to acidic pH and to presence of bile salt. API ZYM test characterized enzymatic activity of the strains and high β-galactosidase activity was observed in 13 strains. All strains presented high values for survival rate to simulated gastric and intestinal conditions, ability to auto and co-aggregate with indicators microorganisms and high cell surface hydrophobicity. Most of the strains were positive for map and EFTu beneficial genes. Strong bile salts deconjugation was applied for all strains and all strains showed good results for assimilating lactose. After this first part of the study, the 15 BAL were evaluated for potential virulence and antimicrobial resistance. The production of virulence factors (hemolysis, gelatinase, lipase, deoxyribonuclease and biogenic amines: lysine, tyrosine, histidine and ornithine) was assessed by phenotypic methods at 25 °C and 37 °C, as well as the resistance to 17 antimicrobials. The isolates were also subjected to PCR to identify the presence of 49 genes associated with virulence factors. None of the strains presented hemolytic activity or the production of gelatinase, lipase, deoxyribonuclease and tested biogenic amines. Of the 15 selected cultures, for 12 types of antibiotics in the disc diffusion method, all strains were resistant for oxacillin and sulfa/trimethoprim, 14 were resistant to gentamicin, 11 were resistant to clindamycin, nine strains were resistant to vancomycin, eight strains to rifampicin, five were resistant to erythromycin, four were resistant to tetracycline, two strains were resistant to ampicillin, one strain was resistant to chloramphenicol and none was resistant for imipenem. For a quantitative test of the antibiogram, five antibiotics were selected in Etest ® strips (bioMérieux). All 15 strains were resistant to vancomycin, two for rifampicin, one for gentamicin and one for chloramphenicol. Regarding the virulence related genes, 19 genes from 49 tested were present in some strains. Results showed that five cultures showed the presence of the int gene, four cultures showed the presence of the ant(4')-Ia gene, three cultures were positive for vanC2, cpd and tdc, two cultures for vanA, tet(K), tet(S), ermA, bcrR, mur-2ed, asa1 and ccf, and one culture was positive for vanC1, ermB, aph(3')-IIIa, aac(6’)-le-aph(2”)-Ia, bcrB and hyl. After characterizing the virulent potential of the 15 BAL, these strains were evaluated for the technological potential for application in the dairy industry. All strains presented acidification capacity, reaching pH values between 0.73 and 2.11 in 24 hours: Lb. casei MRUV6 presented the highest acidification ability (pH 2.11 after 24 h). Ten strains were able to produce diacetyl at 37 °C, except by Lb. casei MSI1, Lb. harbinensis MSI3, Lb. fermentum SIVGL1, Lb. plantarum MLE5 and W. paramesenteroides MRUV3. All strains were able to produce exopolysaccharides, and only two strains presented proteolytic activity (Lb. casei MSI5 and W. paramesenteroides MSAV5). Based on this characterization, Lb. casei MRUV6 was selected for producing fermented milk, stored at 4 °C and 10 °C and monitored until 35 days of shelf life. Samples were subjected to phenotypical and molecular methods to quantify the presence of Lb. casei MRUV6 (conventional plating and RT-PCR, by checking the expression of gapdh, a housekeeping gene) and to verify the expression of bsh gene, related to resistance to bile salts (RT-PCR). Lb. casei MRUV6 population was stable during storage period at 4 and 10 °C at levels around 9.9 log CFU/g, and by monitoring the expression of gapdh gene. However, bsh gene was not expressed during storage period. The study demonstrated the potential use of the beneficial strain Lb. casei MRUV6 isolated from a dairy environment for the production of a fermented milk product, and its stability during storage at 4 and 10 °C. All isolates from the study presented beneficial characteristics, safety for use in food and technological potential for use in the dairy industry. In addition, they may further be subjected to further studies for in vivo evaluations and characterization as probiotics.

Introdução: Os marcadores de hipoperfusão e disóxia tecidual predizem a mortalidade em pacientes sépticos, traumatizados e queimados. O presente estudo avaliou a capacidade do lactado sérico, da saturação venosa central (ScvO2) e da diferença venosa-arterial de dióxido de carbono (GapCO2) na predição da mortalidade da síndrome pós-parada cardiorrespiratória (pós-PCR). Método: Estudo observacional prospectivo. Avaliação seriada do lactato, da depuração do lactato (Clac), do GapCO2 e da ScvO2 nas primeiras 72hs pós-PCR. Considerando o nível de significância estatística um p-valor < 0,05, bicaudal, com intervalo de confiança de 95% estimando um poder de 80%. Resultados: Foram alocados 54 pacientes, média de idade 63,4+14,9 anos dos quais 61,1% eram homens. A PCR foi intra-hospitalar em 94,4% e extra-hospitalar em 5,6% dos casos. PCR por ritmo não-chocável ocorreu em 68,5% dos eventos. No geral a mediana de tempo de retorno à circulação espontânea foi de 8,5 [5-15] minutos. SAPS3 82+16,5 com mortalidade de 75,9% em 28 dias. Entre os marcadores utilizados apenas o lactato, a partir da 6ª hora, e o Clac, em 6, 12 e 24hs, foram associados à mortalidade em 28 dias produzindo uma área sobre a curva ROC de 0,797 (lactato 6ª hora) e 0,717 (Clac 6hs). Em relação à mortalidade em 24 e 72hs, novamente, apenas o lactato e o Clac foram associados ao desfecho. Conclusão: O lactato sérico e o Clac foram superiores à ScvO2 e ao GapCO2 na predição da mortalidade da síndrome pós-PCR.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária Programa de Pós-Graduação em Saúde Animal, 2017. / Submitted by Albânia Cézar de Melo (albania@bce.unb.br) on 2017-05-10T14:46:30Z No. of bitstreams: 1 2017_MayaraLealFernandes.pdf: 1816437 bytes, checksum: 73715d74b27c02fa2ef3401713483bf9 (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline (jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2017-05-12T10:56:29Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_MayaraLealFernandes.pdf: 1816437 bytes, checksum: 73715d74b27c02fa2ef3401713483bf9 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-12T10:56:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_MayaraLealFernandes.pdf: 1816437 bytes, checksum: 73715d74b27c02fa2ef3401713483bf9 (MD5) / Testes de avaliação de potencial de segurança, probiótico e tecnológicos foram realizados em seis isolados de Pediococcus pentosaceus (Ac1Pd, Ac3Pd, Ac4Pd, Ac5Pd, Ac7Pd, Ac22Pd) provenientes de leite de ovelha. Os resultados obtidos demonstraram que nenhum dos isolados foi capaz de produzir aminas biogênicas ou fatores de virulência. Os isolados testados apresentaram baixa hidrofobicidade, alta capacidade de autoagregação e coagregação com L. monocytogenes ATCC 7644, L. sakei ATCC 15521 e E. faecalis ATCC 19444, porém nenhum produziu β-galactosidase e bacteriocinas. Não foi observado desenvolvimento dos isolados em pH 3 e 12, sendo que na faixa de pH de 4 a 10 o desenvolvimento foi variável. Na ausência de bile todos os isolados apresentaram desenvolvimento, observando-se supressão quando em concentrações de 0,1%, 0,3%, 0,6% e 1%. No teste de disco-difusão os isolados testados foram resistentes a oxaciclina, sulfatrimetropim e vancomicina, mas foram sensíveis ao cloranfenicol e à tetraciclina e com resultados variáveis para a penicilina G e foram resistentes à maioria dos medicamentos testados, exceto à amoxicilina tri-hidratada e ibuprofeno. Todas as culturas apresentaram alta capacidade de acidificação do leite somente após 24h e nenhum produziu exopolissacarídeos. Os isolados de P. pentosaceus foram capazes de produzir diacetil, no entanto, nenhuma cultura apresentou atividade proteolítica extracelular e a produção de autólise foi variada de 21,3% a 30,5%, após 24h. Os isolados se desenvolveram em concentrações de NaCl a 4% e 6%, porém o desenvolvimento foi menor na concentração de 10%. Por fim, todos os isolados apresentaram boa capacidade de segurança, mas aplicação limitada como probióticos e alguns aspectos de potencial tecnológico. / Potencial safety, probiotic and technological tests were performed on six isolates (Ac1Pd, Ac3Pd, Ac4Pd, Ac5Pd, Ac7Pd, Ac22Pd) from Pediococcus pentosaceus from sheep's milk. The results showed that none of the isolates were able to produce biogenic amines or virulence factors. The isolates tested showed low hydrophobicity, high self-aggregation capacity and coaggregation with L. monocytogenes ATCC 7644, L. sakei ATCC 15521 and E. faecalis ATCC 19444, but none produced β-galactosidase and bacteriocins. No growth of the isolates at pH 3 and 12 was observed, and in the pH range from 4 to 10 the growth was variable. In the absence of bile, all the isolates showed growth, with suppression at concentrations of 0,1%, 0,3%, 0,6% and 1%. In the disc-diffusion test the isolates tested were resistant to oxacicline, sulfatrimetropim and vancomycin but were sensitive to chloramphenicol and tetracycline and with variable results for penicillin G and were resistant to most of the drugs tested except for amoxicillin trihydrate and ibuprofen. All cultures showed high milk acidification capacity only after 24 hours and none produced exopolysaccharides. The isolates of P. pentosaceus were able to produce diacetyl, however, no culture showed extracellular proteolytic activity and the production of autolysis was varied from 21.3% to 30.5% after 24h. The isolates growth at concentrations of 4% and 6% NaCl, but the growth was lower at 10% concentration. Finally, all the isolates showed good safety, but limited application as probiotics and some aspects of technological potential.