Los carcinomas de ovario y de endometrio son los tumores malignos ginecológicos más frecuentes en nuestro entorno. Se han descrito alteraciones genéticas recurrentes que son características de algunos tipos histológicos y que han permitido definir vías patogenéticas distintas tanto para ovario como para endometrio. Entre estas alteraciones, algunas afectan directamente las vías de señalización celular que regulan el crecimiento y proliferación de la célula. Estas vías representan una de las alteraciones clave implicadas en el desarrollo del cáncer y que han adquirido una trascendencia importante, desde la aplicación en la práctica clínica, de tratamientos dirigidos contra algunas de estas moléculas. Sin embargo, la comprensión de estas vías se complica por la presencia de múltiples interacciones entre ellas, así como redundancias que hacen que el bloqueo de las mismas no siempre produzca los efectos esperados. Dada la complejidad y redundancia de vías que transmiten la señal proliferativa desde la membrana hacia al núcleo, deben existir factores que centralicen la acción oncogénica, de forma que sobre ellas converjan diversas vías y sean representativos del grado de activación de los mismos y por tanto de interés pronóstico y terapéutico. Se seleccionaron 129 neoplasias de ovario que incluyeron 27 tumores benignos, 27 tumores borderline y 75 carcinomas de ovario, y 138 muestras de endometrio que incluyeron 120 carcinomas, 15 endometrios funcionales y atróficos y 3 hiperplasias endometriales. Se construyeron matrices de tejidos (tissue microarrays) a partir de 3 muestras de cada caso y se realizó estudio inmunohistoquímico con los anticuerpos para HER2, EGFR y las formas fosforiladas de AKT, ERK, 4E-BP1, p70S6K y S6. Los resultados se analizaron estadísticamente para valorar de forma descriptiva la expresión de estos marcadores, su relación con las variables clínico-patológicas, la relación entre ellos y con la supervivencia global y libre de enfermedad. De los parámetros estudiados, el estadio según los criterios de la FIGO y el grado de diferenciación fueron las únicas variables clínico-patológicas de valor pronóstico tanto en cáncer de ovario como de endometrio. De los marcadores, HER2 se asoció a peor pronóstico en cáncer de endometrio pero no de ovario, EGFR a mejor pronóstico en cáncer de endometrio. La sobreexpresión de p-4E-BP1 identifica carcinomas de ovario y de endometrio de peor pronóstico y su expresión se relaciona tanto con la activación de AKT como de ERK por lo que apoya su importancia como proteína centralizadora de la señal oncogénica procedente de cualquiera de las 2 vías, representando una buena diana para el tratamiento de estas pacientes. / Ovarian and endometrial carcinomas are the most frequent gynecological malignant tumors in our area. Recurrent genetic alterations that are characteristic of some histological types have been described and have allowed the identification of pathogenetic pathways, in both endometrial and ovarian cancers. Among these alterations, some affect cell signaling pathways that regulate cell growth and cell proliferation. These pathways represent one of the hallmarks of cancer, and have become especially important since the appearance of new drugs that target specific molecules involved in their regulation. However, our understanding of these signaling pathways is complicated by the presence of multiple cross-talks between them, as well as multiple redundancies of molecules, both of with are probably responsible for some of the unexplained results that occur when one of the molecules involved is blocked by a drug. Due to the complexity and redundancy of cell signaling pathways that transmit the proliferative signal from the cellular membrane to the nucleus, there should be some factors that centralize the oncogenic action in a way that several stimuli could converge on them. These factors should be representative of the activation level of the oncogenic process, and therefore, should be of prognostic and therapeutic interest. 129 ovarian neoplasms were selected, including 27 benign tumors, 27 borderline tumors, and 75 ovarian carcinomas. Additionally, 138 endometrial samples were selected including 15 atrophic and functional endometria, 3 hyperplastic endometria and 120 endometrial carcinomas. Tissue microarrays were constructed using 3 samples from each case, and an immunohistochemical study with HER2, EGFR, and the phosphorylated forms of AKT, ERK, 4E-BP1, p70S6K and ribosomal protein S6 was performed. The results obtained were statistically analyzed to evaluate the correlation of these markers with clinicopathological features, the relationship between them, and their impact on overall survival and progression-free survival. Surgical stage defined by FIGO, and differentiation grade were the only clinicopathologic variants with prognostic significance in ovarian and endometrial cancer. Among the cell signaling markers evaluated, HER2 was associated with prognosis in endometrial cancer but not in ovarian cancer and EGFR with better survival in endometrial cancer. P-4E-BP1 overexpression identifies a subset of ovarian and endometrial cancers with worse prognosis, and its expression is related to the activation of AKT and ERK pathways, suggesting that it has a central role in cell signal transduction by both pathways, and therefore could be a therapeutic target in these patients.

El cáncer de mama localmente avanzado (CMLA) representa una colección heterogénea de neoplasias de la mama y constituye aproximadamente el 10 al 20% de todos los tipos de cáncer de mama en países desarrollados y el 30 al 60% en países en vías de desarrollo. La supervivencia global a 3 y 5 años de las pacientes con carcinoma de mama estadio III es del 70% y del 55% respectivamente, con una mediana de supervivencia de 4.9 años. La quimioterapia neoadyuvante o primaria, es un tratamiento pionero que se inició en pacientes con CMLA y se considera el tratamiento estándar de esta enfermedad. La respuesta histológica completa obtenida al tratamiento con quimioterapia se correlaciona con un intervalo libre de enfermedad y una supervivencia global significativamente superiores que en pacientes que no obtienen respuesta histológica completa. El análisis de los factores clínicos y biológicos de pacientes con cáncer de mama localmente avanzado tratados con quimioterapia primaria o neoadyuvante permitirá individualizar la selección del tratamiento y determinar cuál subgrupo de pacientes obtiene el mayor beneficio de la terapia. El presente estudio observacional ambispectivo en pacientes con CMLA tratados con quimioterapia primaria basada en antraciclinas y taxanos analiza la respuesta histológica completa a la quimioterapia primaria y correlaciona estos resultados con la histología inicial, la estadificación, el estado de los receptores hormonales, el índice proliferativo Ki-67, la expresión de p53, y la sobreexpresión de HER-2/neu, así como el curso clínico posterior. Los resultados obtenidos demuestran que los pacientes de este estudio que consiguen respuesta histológica completa a la quimioterapia primaria tendrán una probabilidad de supervivencia a 5 años mayor del 90%. Por el contrario, los pacientes con enfermedad residual ganglionar axilar extensa tendrán mayor probabilidad de recidiva de la enfermedad y de muerte. Los factores clínico-patológicos que mejor se correlacionan con la posibilidad de obtener respuesta histológica completa son la negatividad del receptor de estrógeno y el alto grado histológico. La edad, el estado menopáusico y la expresión de p53 no mostraron correlación con la posibilidad de obtener respuesta histológica completa. Los tumores HER-2/neu positivos presentan una mejor probabilidad de respuesta histológica completa, pero que no es comparable con la que se puede ofrecer desde la introducción del trastuzumab. Los pacientes con tumor lobulillar infiltrante o RE+ RP+ HER-2/neu negativo tienen una muy baja tasa de respuesta histológica completa, pero esto no significa que la quimioterapia primaria no aporte algún beneficio, dado el alto porcentaje de pacientes con estas características que no presentan progresión o muerte a más de cinco años desde el tratamiento. En nuestro estudio la respuesta completa en la resonancia magnética nuclear de mama al finalizar la quimioterapia predice una alta posibilidad de obtener respuesta completa, y podría tener un impacto predictivo en la supervivencia libre de enfermedad y en la supervivencia global. Estudios posteriores en series con mayor número de pacientes deberían realizarse en este sentido. En definitiva, los pacientes con cáncer de mama localmente avanzado han mejorado su pronóstico en comparación con series históricas, gracias al abordaje multidisciplinar que se lleva a cabo en las decisiones terapéuticas, lo que produce posibilidades de supervivencia sin enfermedad a los 5 años mayores del 70%. / Locally advanced breast cancer (LABC) represents a heterogeneous collection of breast neoplasms and constitutes about 10 to 20% of all types of breast cancer in developed countries and 30 to 60% in developing countries. Overall survival at 3 and 5 years of patients with stage III breast cancer is 70% and 55% respectively, with a median survival of 4.9 years. Neoadjuvant or primary chemotherapy is a pioneering treatment initiated in patients with LABC and is considered the standard of care for this disease. Pathological complete response to chemotherapy correlates with a higher disease free survival and overall survival than patients without pathological complete response. The analysis of clinical and biological factors of patients with LABC treated with primary chemotherapy allow to individualized cancer treatment selection and determine which subset of patients get the most benefit from the therapy. This ambispective observational study in patients with LABC treated with anthracyclines and taxanes based primary chemotherapy analyzes the rate of pathologic complete response to primary chemotherapy and correlated these results with initial histology, staging, hormone receptor status, the proliferative index Ki-67, the expression of p53 and HER-2/neu status, and the subsequent clinical course. The results of this study show that patients who achieved pathological complete response to primary chemotherapy have a five years survival rate greater than 90%. By contrast patients with extensive axillary residual nodal disease have greater probability of disease recurrence and death. Clinical and pathological factors that correlate best with the possibility of pathological complete response are estrogen receptor negativity and high histological grade. Age, menopausal status and p53 expression did not correlate with the possibility of pathological complete response. HER-2/neu positive tumors have a better chance of pathological complete response, but that is not comparable to what can be offered since the introduction of trastuzumab. Patients with invasive lobular tumors or ER+ PR+ HER-2/neu negative tumors, have a very low rate of pathological complete response, but this does not mean that primary chemotherapy does not provide any benefit, given the high percentage of patients with these features that not present progression or death more than five years after treatment. In our study, complete response in breast magnetic resonance imaging (MRI) at the end of the chemotherapy predicts a high possibility of pathological complete response and may have predictive impact on disease free survival and overall survival. Further studies on larger series of patients should be made in this regard. Definitely, patients with locally advanced breast cancer have improved prognosis compared with historical series thanks to the multidisciplinary approach that is conducted in treatment decisions, resulting in chances of five years survival rate approximately of 70%.

Els transtorns de la deglució afecten un 29-67% dels pacients post-Ictus. L’aspiració silent, aspiració sense expressió clínica, afecta del 15-39% dels ictus aguts. La disfàgia pot comportar malnutrició, deshidratació, pneumònia broncoaspirativa i mort, i té impacte sobre els costos sanitaris. L’evidència científica suggereix que la detecció de la disfàgia en estadis precoços de l’ictus redueix el risc de broncoaspiració i és útil per determinar l’estratègia terapèutica. Aquesta tesi avalua la capacitat de dos tests clínics de cribatge, el Mètode d’exploració Clínica de Volum Viscositat (MECV-V) i Test de la tos amb àcid cítric (CCT), per la detecció de l’aspiració i l’aspiració silent, respectivament. El MECV-V consisteix en l’administració de líquid a diferents viscositats i volums sota control de pulsioximetria. Canvis en els signes de seguretat com són el to de veu, la tos durant o després del bolus administrat, la desaturació >3% de la saturació basal, és consideren com a test alterat i al pacient com a possible aspirador. EL CCT registra el número de pics de tos durant el minut d’ inhalació oral d’una solució nebulitzada d’àcid cítric a 1M. Es considera > 5 pics de tos normal, mentre que ≤4 es considera disminuït i al pacient com a baix responedor o possible aspirador silent. En compració ala Videofluoroscòpia (VFSS), el gold estàndard, el MECVV detecta aspiració amb una sensibilitat del 88.2% i una especificitat del 71.4% , mentre que el CCT, detecta aspiració silent amb una sensibilitat i especificitat del 19% i 71%, respectivament. En conclusió el MECVV és un test de baix cost i fàcilment aplicable que compleix els criteris de test de cribatge en població afecte d’ictus; mentre que el CCT, a concentració 1M, no sembla un test útil aplicat individualment per la detecció dels potencials aspiradors silents. S’aporten dades recents sobre un assaig clínic dissenyat per valorar l’efectivitat de dues noves tècniques terapèutiques, l’estimulació elèctrica neuromuscular (NMES) i l’entrenament de la musculatura respiratòria, inspiratòria i espiratòria (IEMT) . Els pacients van ser randomitzats a la logopèdia clàssica (SST) , a NMES i SST o al IEMT i SST. La disfàgia es va avaluar amb el MECV-V i la VFSS, i la força de la musculatura respiratòria també es va recollir. La combinació del NMES o IEMT al SST millora significament els resultats en força respiratòria i els signes de seguretat de la deglució al final de la intervenció. Aquest estudi aporta noves evidències sobre teràpies emergents en el tractament de la disfàgia. / Swallowing disorders affect up to 29-67% of patients with stroke. Silent aspiration, aspiration without clinical signs expression, is present in 15-39% of acute stroke samples. Dysphagia can lead to malnutrition, dehydration, bronchoaspirative pneumonia and death, and have impact on health care costs. Available evidence suggests that screening dysphagia in the early stages of stroke onset reduces the risk of bronchoaspiration and is useful to determine the best therapeutic strategy. This thesis project is aimed to evaluate two different screening techniques, the Volume Viscosity Swallow Test (V-VST) and the Citric Cough Test (CCT), for detecting aspiration and silent aspiration, respectively. The V-VST consists of the administration of different liquid viscosities and food consistencies under pulse oximetry control. Changes in security signs as tone of voice, coughing during or after eating, or desaturation of more than 3% compared to baseline oxygen saturation, are considered as a failed test and classifies the patient as potential aspirator or no aspirator. The CCT records the number of cough peaks in the minute to the oral inhalation of a 1M mixture of saline and citric acid through an ultrasonic nebulizer. More than 5 cough peaks are considered as normal responders, whereas those with ≤4 are considered as reduced or absent responders. In comparison with the videofluoroscopic swallow study (VFSS), the gold standard, the V-VST detects aspiration with a sensitivity of 88.2% and specificity of 71.4%, whilst the CCT detects silent aspiration with sensitivity and specificity indexes of 19% and 71%, respectively. In conclusion, the V-VST is low in cost, easy to use and very sensitive, meeting the requirements of oropharyngeal dysphagia and aspiration screening test in subacute stroke; whilst the low sensitivity of the CCT using 1.0% (weight by volume) does not support its use as standalone tool to screen for silent aspiration in stroke patients. In addition, breaking results of a clinical trial aimed to determine effectiveness of two new therapeutic techniques, neuromuscular electrical stimulation (NMES) and inspiratory and expiratory muscle training (IEMT), are discussed. Patients were randomly assigned to standard swallow therapy (SST), IEMT and SST, NMES and SST. Dysphagia was assessed with the V-VST and VFSS, and respiratory muscle strength parameters were also recorded. The combination of IEMT or NMES to the SST was associated with significantly improved respiratory strength and better pharyngeal security. This study provides new evidences on emerging strategies to manage dysphagia

Antecedents: Radioteràpia i cisplatí concomitants poden obtenir un alt control loco-regional i supervivència al càncer de cap i coll (CCC) localment avançat, particularment a la orofaringe, en casos VPH positius i en no fumadors. Diverses revisions recents qüestionen el paper de cetuximab i radioteràpia en aquesta població, suggerint resultats inferiors, cosa que requereix confirmació addicional. El CCC VPH negatiu sembla obtenir encara pitjors resultats amb les estratègies vigents. Aquest treball investiga les associacions existents entre la informació clínica de llarg seguiment d'una cohort de CCC localment avançat i la relacionada amb la senyalització de HER3 i PI3K/mTOR en aquesta mostra. Material i mètodes: S'han avaluat 106 casos tractats amb radioteràpia i cisplatí (n=70) o anti-EGFR (n=36). En 84 d'aquests casos s'ha pogut avaluar l'estat VPH, i 46 tenien material suficient per l'estudi de marcadors. Els resultats s'han analitzat amb el mètode de Kaplan-Meier, el model de Cox i metodologia de riscos competitius. Resultats: El factor més influent en els resultats clínics ha estat el fàrmac administrat, amb diferències clares en tots els paràmetres avaluats (FLR, SLP, SG i SE). Mentre els resultats obtinguts amb cisplatí són similars als d'altres sèries les dades amb anti-EGFR són bastant inferiors. Confirma l'aspecte rellevant de l'efecte dels anti-EGFR en la FLR, essent aquesta la causa més rellevant de fallida a distància. Val a dir que una majoria àmplia d'aquesta mostra era VPHneg , que la presència de tumors d'orofaringe no era massa alta, i que la presència de tumors T4 i fumadors era bastant superior a la d'altres sèries. Pel que fa als marcadors avaluats, indiquen que la ruta PI3K/mTOR és biològicament activa i que s'associa a pitjor pronòstic; que pS6, un element distal d'aquesta ruta, podria ser un indicador d'activitat; la baixa presència de mutacions de PIK3CA (molts casos són VPH negatius); la potencial implicació de HER3 com a mecanisme compensatori; i la disfunció de p53. Conclusions: Els resultats han estat clarament millors, tot i que subòptims, amb radioteràpia i cisplatí en una mostra predominantment VPH negativa. És necessari seguir investigant la millor manera d'integrar els agents anti-EGFR en aquests tumors. Seria d'interès poder avaluar l'efecte clínic del bloqueig de mTOR i de HER3, i la utilitat de pS6 com a marcador d'activitat al CCC VPH negatiu. / Background: Concomitant radiation and cisplatin can achieve high loco-regional control and survival in locally advanced head and neck cancer (HNC), particularly in the oropharynx, in HPV-positive tumors and non-smokers. Recent publications challenge the role of cetuximab plus radiation in this population suggesting inferior outcomes, which needs to be further confirmed. HPV-negative HNC seems to do far worse with current strategies. This study evaluates potential associations between long-term clinical data of a locally advanced HNC cohort and HER3-PI3K/mTOR signaling in that cohort. Material and Methods: 106 HNC patients received definitive treatment with radiation and cisplatin (n=70) or anti-EGFR monoclonal antibody (n=36). 84 patients had tissue available for HPV analysis, and 46 for the biomarker study. Outcomes were analyzed by the Kaplan-Meier method, Cox model and competing risks analysis tools. Results: The strongest factor influencing clinical outcome was the concomitant systemic treatment administered, with significant differences in all the endpoints evaluated (loco-regional failure, progression-free survival, overall survival, specific survival). While cisplatin obtained similar outcomes to those in other series, results with anti-EGFR were clearly inferior. This adds to evidence that anti-EGFR contribute to loco-regional failure (LRF), being LRF the main cause of distant failure. Key characteristics in this sample were: mostly HPV-negative tumors, moderate number of oropharynx cancers, and major presence of T4 tumors and smokers. With regard to biomarkers, PI3K/mTOR signaling is active and confers worse prognosis; pS6 (downstream of this pathway) may indicate an active signaling state; low presence of PIK3CA mutations (being most HPV-negative); potential role of HER3 as a compensatory mechanism; and p53 dysfunction. Conclusions: Radiation and cisplatin achieved better outcomes in this study, being suboptimal and in a predominantly HPV-negative sample. Aditional efforts are needed to best integrate anti-EGFR agents in HNC. Exploratory analyses suggest that mTOR and HER3 blockade may positively affect clinical outcome in HPV-negative HNC.

Introducción: El envejecimiento es uno de los mayores retos de salud a los que nos enfrentamos. Fragilidad y sarcopenia son dos conceptos íntimamente relacionados con el envejecimiento y ampliar el conocimiento sobre ellos permitirá desarrollar estrategias específicas preventivas y terapéuticas para minimizar sus consecuencias a nivel sanitario, económico y social. Los objetivos principales de este estudio fueron determinar las características propias de marcha y equilibrio relacionadas con el estado de fragilidad y determinar las características musculares ecográficas y sonoelastográficas del músculo en individuos frágiles. Material y Método: Se diseñaron dos estudios complementarios observacionales transversales en ancianos robustos, prefrágiles y frágiles aplicando los criterios de fragilidad de Fried. Para el estudio de la marcha y equilibrio se incluyeron 62 individuos. Se analizaron los parámetros temporoespaciales de la marcha utilizando una plataforma de presiones incluida en una cinta sin fin. El equilibrio se valoró mediante posturografía, baropodometría y test clínicos. Para el estudio del músculo por ecografía y sonoelastografía se incluyeron 48 ancianos. Para la validación de la técnica ecográfica, se realizó un estudio de concordancia intra- e inter-observador en una población de 15 jóvenes. Resultados: Los ancianos frágiles presentan un aumento de la fase de apoyo (p<0,05) y de doble soporte (p=0,004), disminuyen la fase de oscilación (p<0,05), la longitud del paso (p=0,004) y de zancada (p=0,005), y la velocidad de marcha (p=0,001). Presentan también un aumento de la velocidad de balanceo del centro de presiones (p<0,001) y peores resultados de los test clínicos (p<0,001). Los ancianos frágiles presentan menor grosor (p=0,019), área seccional (p=0,049) y compresibilidad muscular (p=0,034) que el resto ancianos. Se observa la tendencia a aumentar la ecogenicidad muscular (p=0,087) con la fragilidad y a la aparición con ella de zona de alta dureza en el elastograma (p=0,095). Conclusiones: Los ancianos frágiles presentan cambios en los parámetros temporoespaciales de la marcha, cambios en la capacidad de equilibrio y en las características ecográficas y sonoelastográficas musculares. Estos hallazgos sugieren la posibilidad de diseñar intervenciones específicas para mejorar los déficits de la población anciana frágil. / Introduction: Aging is nowadays one of the biggest challenges in terms of health. Frailty and sarcopenia are two concepts closely related to aging. Increasing knowledge about them, would allow us to develop specific preventive and therapeutic strategies to minimize the consequences on health, economics and social resources. The main objectives in this study were to determine the gait and balance characteristics related to the frailty state and to determine the sonographic and sonoelastographic features of the muscle in frail subjects. Methods: Two complementary observational studies were designed in robust, prefrail and frail elderly subjects following the Fried Frailty criteria. 62 subjects were included for the gait and balance study. The spatiotemporal parameters of gait were analyzed using posturography, baropodometry and clinical test. For the study of the muscle sonography and sonoelastography, 48 elderly subjects were selected. A study of intra- and inter-observer concordance was conducted in a sample of 15 young volunteers to validate the ultrasound technique. Results: Frail subjects show an increase of the stance phase (p < 0,05) and of the double support (p=0,004), a decreased swing phase (p <0.05), decreased step length (p = 0.004), decreased stride length (p = 0.005), and decreased gait speed (p = 0.001). They also show an increase of the average velocity of the center of pressure (p < 0,001) and worse results of the clinical test (p <0.001) compared to prefrail and robust subjects. The frail population show a decreased muscle thickness (p = 0.019), less cross-sectional area of the muscle (p = 0.049) and less muscle compressibility (p = 0.034) compared to the rest of the elderly subjects. There is also a tendency to increase echogenicity of the muscle (p=0,087) and to the appearance of high hardness areas on the elastogram (p=0,095) in relation to the frailty phenotype. Conclusions: Frail elderly show changes in the spatiotemporal parameters of gait, in balance ability and changes in the muscle ultrasound characteristics (echogenicity and sonoelastography). These findings suggest the possibility of designing specific interventions to improve the specific deficits of the frail elderly population.

Introducción. Para la valoración de la capacidad funcional de la columna cervical se utilizan pruebas biomecánicas, ya que las pruebas complementarias clásicas proporcionan una información insuficiente. Se diseñó un trabajo para valorar la fiabilidad test retest de la valoración de la fuerza de columna cervical mediante el dinamómetro Biodex System 3 Pro®, determinar cifras normativas en una población sana y compararla con otra población patológica, y por último determinar criterios de magnificación de la patología cervical mediante el test isométrico cervical. Metodología. Se incluyeron 336 sujetos en un estudio transversal, reclutados desde mayo de 2010 hasta diciembre de 2014. Ciento veintiuno fueron sanos voluntarios y doscientos quince fueron sujetos con dolor cervical agudo. El grupo de pacientes fue subdividido en dos grupos: un grupo de “sinceros” y otro grupo de “no sinceros”. En el subgrupo de “no sinceros” fueron incluidos aquellos pacientes que eran remitidos por sus médicos con alta sospecha de magnificación de la patología, por las incongruencias que explicaban en la exploración física, así como por los resultados obtenidos en las diferentes pruebas complementarias. Se valoró la fuerza isométrica de la columna cervical en sedestación. Resultados. La fiabilidad intraobservador para la valoración de la fuerza isométrica varió de 0.93 a 0.97.La fuerza máxima flexora y extensora en sujetos sanos dependen de forma significativa del sexo del sujeto en la flexión y extensión (P <.001), así como de la edad (flexión, P =0.006; extensión, P =. 0.002). No se observaron efectos de interacción entre la edad y el sexo para la flexión (P = 0.688) y extensión (P = 0.258). En los pacientes observamos un descenso en la fuerza máxima y media de la musculatura flexora y extensora de la columna cervical al compararlos con los sujetos sanos (P <0.001). Los pacientes “no sinceros” tuvieron coeficientes de variación un 50% más elevado que los pacientes “sinceros”, lo que nos demuestra la gran variabilidad en las diferentes valoraciones en los pacientes “no sinceros”. Conclusiones. La valoración de la fuerza isométrica de la columna cervical tiene una alta fiabilidad intraobservador e interobservador, hecho que valida los resultados obtenidos. Los pacientes “sinceros” presentan un descenso de la fuerza flexora y extensora de la columna cervical en comparación con los sanos. El coeficiente de variación y el ratio flexores/extensores pueden ser variables útiles para detectar pacientes magnificadores. / Introduction. For the assessment of the functional capacity of the cervical spine we carry out biomechanical tests. The traditional tests we performed provided insufficient information. This study was designed to assess the test retest reliability of the assessment of the strength of the cervical spine by Biodex System 3 Pro ® , to determine the average figures in a healthy population and to compare it with the pathological population , and finally to determine magnification criteria of cervical pathology by doing an isometric cervical test. Methodology. 336 subjects in a cross-sectional study , recruited from May 2010 to December 2014. One hundred and twenty were healthy volunteers and two hundred and fifteen were subjects with acute neck pain. The patient group was subdivided into two groups : a group of " sincere " and another group " insincere " . In the subgroup of "insincere " we included patients who were referred by their doctors with a high suspicion of magnification of the pathology, because of inconsistencies related to physical examination as well as the results of various tests . Isometric strength of the cervical spine was assessed in a sitting position Results . The intraobserver reliability for assessing isometric strength ranged from 0.93 to 0.97. The maximum flexor and extensor strength in healthy subjects significantly depends on the sex of the subject , on flexion and extension ( P < .001 ) and on age (flexion , P = 0.006 ; extension , P = 0.002 ) . We didn´t observe any effects between age and sex for flexion ( P = 0.688 ) and extension ( P = 0.258 ) . In patients we observed a decrease in maximum strength and in the average on the flexor and extensor muscles of the cervical spine when compared to healthy subjects ( P < 0.001). The " insincere " patients had coefficients of variation 50% higher than the " honest " patients which demonstrates the large variability in the different assessments of the " insincere " patients. Conclusions . The assessment of the isometric strength of the cervical spine has a high intraobserver and interobserver reliability , that validates the results. The "sincere " patients have a decrease of the flexor and extensor strength of the cervical spine compared with healthy people. The variation coefficient and the ratio flexor / extensor may be useful in detecting the variables of magnifiers patients.

La osteoporosis y la artrosis son enfermedades cada vez más prevalentes en nuestro medio debido al aumento de la esperanza de vida, estando muy influenciadas por factores ambientales y genéticos. El objetivo de este estudio fue determinar la implicación de algunos mecanismos epigenéticos en estas enfermedades, mediante el análisis de expresión de microRNAs. Hemos analizado los microARNs en muestras de hueso de sujetos con osteoporosis (n=8) y artrosis (n=8), determinando las diferencias de expresión en los microRNAs mediante arrays. Encontramos diferencias significativas entre los grupos en 9 de los microARNs analizados. Estos resultados fueron validados en un segundo análisis en el que incluimos muestras de hueso de sujetos con osteoporosis (n=19), artrosis (n=19) y controles (n=6). Analizamos la expresión de aquellos microARNs más destacados en los arrays, que fueron miR-187, miR-193a-3p, miR-210, miR-214 y miR-518f. Había una mayor expresión de miR-518f en pacientes con osteoporosis frente a controles y artrosis, mientras que miR-187 mostraba una mayor expresión en artrosis que en controles y pacientes con osteoporosis. Aunque no hemos podido confirmar en cultivos celulares la funcionalidad de estos microARNs, estos resultados sugieren que miR-518f y miR-187 pueden estar implicados en la patogenia de algunas alteraciones esqueléticas como la osteoporosis y la artrosis / The prevalence of osteoporosis and osteoarthritis is increasing in parallel with the increased life expectancy. They are determined by the interplay of environmental and genetic factors. The aim of this study was to determine how epigenetic mechanisms are involved in these diseases, and specifically the analysis of expression of microRNAs. We measured microRNAs in bone samples of patients with osteoporosis (n=8) and osteoarthritis (n=8), using mini-arrays. Significant between group differences were found in 9 of the microRNAs analyzed. These findings were replicated in a second analysis that included bone samples from subjects with osteoporosis (n=19), osteoarthritis (n=19) and controls (n=6). In the replication stage we analyzed the expression of the microRNAs showing the most significant differences in arrays: miR-187, miR-193a-3p, miR-210, miR-214 and miR-518f. We found that miR-518f displayed a significantly higher expression in patients with osteoporosis. On the other hand, miR-187 displayed a signifciantly higher expression in patients with osteoarthritis. Although we could not confirm the functional effects of these microARNs in vitro, our data suggest that miR-518f and miR-187 may participate in the pathogenesis of skeletal disorders, such as osteoporosis and osteoarthritis.

El carcinoma hepatocel.lular (CHC) és la principal causa de mort en pacients cirròtics. Per aquesta raó, aquests pacients s’inclouen en un programa de vigilància amb una ecografia semestral per tal de detectar el CHC en un estadi precoç, quan la curació és possible. Tot i això, només un 40% dels casos es diagnostiquen en un estadi inicial i la taxa de recidiva després del tractament curatiu (resecció quirúrgica o ablació percutània) és molt elevada. Per això, és tan important la identificació de biomarcadors serològics com a eina complementària per la vigilància i per tal de predir la recidiva tumoral després del tractament. L’objectiu principal d’aquesta tesi és l’anàlisi del perfil proteic del plasma de pacients cirròtics amb i sense CHC per identificar biomarcadors diagnòstic inicial de marcadors i malaltia disseminada. Es va analitzar el perfil proteic de 30 mostres de plasma de procedents de 12 pacients amb diferents graus d’hepatopatia crònica (fibrosi moderada n=3, cirrosi compensada Child Pugh A n=7, cirrosi descompensada Child Pugh B n=2), 15 pacients cirròtics amb CHC (BCLC 0/A, n=9; BCLC C/D amb trombosi portal tumoral i/o metàstasi n=6) i 3 voluntaris sans sense malaltia hepàtica. Es van deplecionar les 20 proteïnes majoritàries del plasma i abans de la digestió enzimàtica es va realitzar un pre-fraccionament del plasma amb electroforesi unidimensional. Posteriorment es va fraccionar la mostra per cromatografia líquida d’alta resolució acoblada a un espectròmetre de masses en tàndem per la seqüenciació peptídica (HPLC-MS/MS). Es va identificar un panel de 31 biomarcadors diagnòstic de CHC inicial al comparar el perfil proteic de mostres de pacients cirròtics amb CHC inicial vers pacients cirròtics sense CHC; i un panell de 41 biomarcadors de disseminació tumoral de CHC al comparar pacients amb CHC avançat vers CHC inicial. Es van detectar tres vies de senyalització activades a partir de l’anàlisi Ingenuity Pathway Analysis, observant una activació de la via de resposta aguda i de la via de producció d’òxid nítric en pacients amb CHC, i la via de senyalització LXR/RXR fortament activada relacionada amb la malaltia tumoral disseminada. A més les proteïnes plasmàtiques identificades en pacients amb CHC avançat disseminats van predir l’activació de MYC, VEGF, HGF i HNF1A com a reguladors upstream. És interessant destacar que el 79% del biomarcadors identificats ja s’han relacionat anteriorment en altres càncers i /o CHC. Finalment es van validar els nivells de 2 de 7 biomarcadors candidats seleccionats per la técnica enzyme-linked immunosorbent assays (ELISA). En conclusió, a partir de l’anàlisi proteòmic del plasma vam ser capaços d’identificar un panell de biomarcadors diagnòstic de CHC. Una vegada validats aquest marcadors en una cohort més àmplia independent, el panell proposat podrà utilitzar-se com una eina per millorar el maneig dels pacients amb CHC i així millorar la seva supervivència. / Hepatocellular carcinoma (HCC) is the main cause of death in cirrhotic patients. For that reason, these patients are included in a surveillance program with abdominal ultrasonography twice per year to detect HCC at early tumour stages, when cure is highly likely. Nevertheless, only 40% of the cases are diagnosed at early stages and the HCC recurrence rate after curative treatment -surgical resection or percutaneous ablation- is very high. Therefore, the identification of biomarkers is needed to use them as complementary tools for surveillance and for predicting tumour recurrence after treatment. The main aim of this thesis is to perform proteomic profiling of the plasma of cirrhotic patients with and without HCC to identify diagnostic and invasiveness biomarkers. We analysed the protein profile of 30 plasma samples from 12 selected liver disease patients with different grade of fibrosis (mild fibrosis n=3, cirrhotic Child-Pugh A n=7 and Child-Pugh B n=2), 15 HCC patients (BCLC 0/A, n=9; BCLC C/D with portal thrombosis and/or metastasis, n=6) and 3 healthy voluntaries. Plasma samples were depleted of 20 most abundant interfering proteins fractionated by unidimensional electrophoresis and enzymatically digested, and peptides were analysed by liquid chromatography coupled with mass spectrometry (HPLC-MS/MS). We identified a panel of 31 early diagnostic biomarkers by comparing the plasma proteome of cirrhotic patients with early HCC versus those without HCC and a panel of 41 biomarkers related to tumour invasiveness HCC as compared to early cases. Pathway analysis of the differentially proteins by Ingenuity Pathway Analysis revealed vital canonical pathways involving acute phase response and nitric oxide production signalling and LXR/RXR activation specially in advanced HCC. Furthermore, differentially plasma proteins in advanced HCC suggest activation of MYC, VEGF, HGF and HNF1A as upstream regulators. Interestingly, 79% of identified biomarkers have been already reported in HCC and other cancer. Finally we validate the plasma levels of 2 out 7 biomarker candidates selected by enzyme-linked immunosorbent assays (ELISA). In conclusion we have been able to identify a panel of diagnostic and prognostic biomarkers of HCC by plasma protein analysis. Once validated in an independent cohort, our plasma-based biomarker panels could be used as complementary tools to improve the clinical management of HCC patients.

Objetivo: La expresión del receptor del factor de crecimiento epidérmico(EGFR) se observa en el 50-70% de los tumores colorrectales y está asociada a mal pronóstico. El objetivo de este estudio es determinar si la expresión de EGFR predice la respuesta del tumor a la radioterapia preoperatoria y el valor pronóstico de la expresión de EGFR antes de la radioterapia en un grupo de pacientes con cáncer de recto localmente avanzado tratados con radioterapia preoperatoria. Material y Métodos: Entre diciembre de 1997 y octubre de 2000, se incluyeron 103 pacientes. Tras diagnóstico de confirmación de neoplasia de recto, se realizó radioterapia preoperatoria pélvica. El 61% los pacientes recibieron quimioterapia concomitante. La radioterapia preoperatoria se realizó sobre pelvis con radioterapia 3D. Se administraron 45 Gy a fraccionamiento convencional. A las 4-8 semanas se realizó resección quirúrgica con resección total del mesorrecto en todos los casos. El EGFR se determinó por técnica de Inmunohistoquímica en la biopsia previa a la radioterapia y en las muestras resecadas. La inmunotinción se realizó a través del EGFR anticuerpo monoclonal (Biogenex, MU 207-UC). El análisis inmunohistoquímico para la expresión de EGFR se evaluó de acuerdo con la extensión y la intensidad de la tinción. Definimos tinción positiva (EGFR positivo), cuando la extensión fue de 5% o más. Resultados: Con un seguimiento a 10 años, la expresión de EGFR en la biopsia fue de 54% (56 de 104). La expresión de EGFR no se relaciono con otros factores pronósticos clásicos. Hubo una tasa de respuesta completa patológica en 12 pacientes (11,65%), respuesta parcial en 41 pacientes (39,80%), y no respuesta en 50 pacientes (48,54%). La tasa de respuesta global fue del 61,7% en los pacientes con EGFR negativos vs 42,86% en EGFR positivos (p = 0,07). Tres de los 56 pacientes con EGFR positivo presentaron respuesta completa patológica (5%) en comparación con el 19% (9/47) de los pacientes negativos EGFR (p = 0,006). Por tanto, existe una clara relación entre la expresión de EGFR positivo y la falta de respuesta completa patológica. A la fecha de la progresión, 6 pacientes EGFR-y 2 pacientes EGFR + tenían enfermedad local, equivalente a una tasa de incidencia de la enfermedad local de 1,47 (IC 95% 0,54-3,21) y 0,55 (95% CI 0,66-1,98 ) respectivamente. El test Log-rank para supervivencia libre de control local no muestran asociación significativa con la positividad de EGFR (p-valor = 0,1801). Dos de los 56 tumores EGFR positivos tenías recaída local (3%) en comparación con la tasa de recaída del 12% en los tumores negativos de EGFR (6 de 47). Sin embargo, tumores EGFR positivos era más probable que presentaran metástasis a distancia, 17% de los tumores negativos EGFR (8 de 47) tenían metástasis frente al 34% (19 de 56) de los tumores EGFR positivos. El test Log-rank para supervivencia libre de metástasis presentaba asociación significativa con la positividad de EGFR (p-valor = 0,04). La HR ajustada para metástasis es de 2.73 (IC 95% 1,05-7,13) en el pacientes EGFR positivo respecto al grupo EGFR negativo. La Supervivencia libre de enfermedad fue menor en los pacientes con EGFR positivo antes de la radioterapia (p = 0,003). HR ajustada para no libre de la enfermedad es de 2.73 (IC del 95%: 1,09 a 6,77) en el pacientes EGFR + respecto al grupo EGFR. Conclusiones: EGFR se expresa en un número significativo de tumores de recto localmente avanzados. La expresión de EGFR es un indicador de mala respuesta a la radioterapia preoperatoria en el carcinoma de recto avanzado. La expresión de EGFR-positivo antes de la radioterapia es un indicador de menor supervivencia libre de enfermedad y de supervivencia libre de metástasis. / Background and purpose: Expression of epidermal growth factor receptor (EGFR) is observed in 50–70% of colorectal carcinoma and is associated with poor prognosis. The aim of this study is to determine whether EGFR expression predicts tumor response to preoperative radiotherapy and the prognostic value of EGFR status before radiotherapy in a group of patients with locally advanced rectal cancer treated with preoperative radiotherapy. Patients and methods: From December 1997 to October 2000, 103 patients were included. Treatment consisted of preoperative pelvic radiotherapy and 61 patients (61%) received simultaneous chemotherapy. Preoperative radiotherapy was delivered to the pelvis with 18-MV photons. All patients received conventional fractionation, 1.80 Gy/day, 5 fractions per week to a total dose of 45 Gy. Surgical resection was performed 4–8 weeks later. In all cases, a total mesorectal resection was performed. Immunohistochemistry for EGFR was determined at the preradiation biopsy and in the resected specimens. Immunostaining was performed using EGFR monoclonal antibody (Biogenex, MU 207-UC). Immunohistochemical analysis for EGFR expression was evaluated according to extension and staining intensity. We defined positive staining (EGFR positive), when extension was 5% or more. Results: Follow-up 10 years. A total of 56 of 104 tumors (54%) showed EGFR positive status at biopsy and EGFR expression was associated neither with clinical tumor stage nor with clinical nodal stage. Preoperative treatment resulted in pathologic complete remission in 12 patients (11%), downstaging in 41 patients (40 %), and no response in 50 patients (49 %). The overall response rate was 61.7% in EGFR negative patients vs. 42.86% in those who were EGFR positive (p = 0.07). Three of the 56 EGFR-positive patients (5 %) achieved pathologic complete response, in comparison with 9/47 (19%) of the EGFR negative patients (p =0.006). There is therefore a clear link between positive EGFR expression and lack of pathologic complete response. At the date of progression, 6 patients EGFR- and 2 patients EGFR + had local disease, equivalent to an incidence rate of local disease of 1.47 (95% CI 0.54-3.21) 1000 person-months and 0.55 (95% CI 0.66-1.98) 1000 person months respectively. Log-rank statistics for disease- local control-free survival show no significant association with EGFR positivity (p = = 0.1801). Two of the 56 EGFR positive tumors relapsed locally (3%) in comparison with the 6/47 (12%) relapse rate in the EGFR negative tumors. However, EGFR positive tumors were more likely to recur distantly, with 17 % of EGFR negative tumors (8 of 47) recurring distantly versus 34 % (19 of 56) of EGFR positive tumors. Log-rank statistics for disease-free metastases-free survival show significant association with EGFR positivity (p = = 0.04). The adjusted hazard ratio for metastases is 2.73 (95% confidence interval [CI], 1.05-7.13) in the patients EGFR + respect the group EGFR-. Disease-free survival was lower among patients with EGFR positive status before radiotherapy (p =0.003). The adjusted hazard ratio (HR) for non disease free is 2.73 (95% CI 1.09-6.77) in the patients EGFR + respect the group EGFR-. Conclusions: EGFR is expressed in a significant number of locally advanced rectal tumors. EGFR expression is an indicator for poor response to preoperative radiotherapy in advanced rectal carcinoma. EGFR-positive expression before radiotherapy is an indicator for low disease-free survival and metastases free survival.

El tratamiento actual de la leucemia promielocítica aguda (LPA) con la combinación de ácido trans-retinóico (ATRA) y quimioterapia proporciona una tasa muy elevada de curaciones. No obstante, aunque estrecho, hay un margen de mejora mediante la reducción de cada una de las diferentes causas de fracaso terapéutico. Dada la heterogeneidad de estas causas de fracaso, planteamos la hipótesis de que un análisis de dichas causas y la identificación de las variables ligadas al paciente, a su enfermedad y al propio tratamiento, podrían ser de ayuda en la implementación de las medidas apropiadas para mejorar dichos resultados. Así, la identificación de diferentes variables pronósticas podría ayudar a diseñar esquemas de tratamiento adaptado al riesgo. El análisis pormenorizado, a corto y a largo plazo, de las diferentes complicaciones y de los resultados de los esquemas quimioterápicos en sus diferentes fases, deberían ayudar a refinar el manejo de las complicaciones y optimizar los futuros protocolos con el fin de ofrecer una menor toxicidad, pero al mismo tiempo manteniendo una elevada eficacia antileucémica. Esta Tesis recoge los resultados de 3 estudios publicados en 2 revistas internacionales de alto impacto especializadas en hematología. Todos ellos comparten un nexo común; el análisis de una serie de pacientes tratados con dos protocolos consecutivos del grupo cooperativo Español PETHEMA (LPA96 y LPA99) para el tratamiento de la LPA. El primer estudio evalúa los resultados a largo plazo del protocolo LPA99, con consolidaciones adaptadas al riesgo de recaída según el índice pronóstico desarrollado conjuntamente en el año 2000 por los grupos PETHEMA y GIMEMA. Este trabajo ofreció unos resultados robustos sobre el impacto positivo de las modificaciones realizadas en la intensidad de la dosificación de las antraciclinas y del ATRA en aquellos pacientes con riesgo intermedio y alto de recaída. Éste sirvió de base para los siguientes protocolos de tratamiento de la LPA del grupo PETHEMA. El segundo estudio se centró en el análisis detallado de una complicación propia del tratamiento de inducción: el síndrome de diferenciación. Este estudio se planteó identificar los factores de riesgo para el desarrollo de este síndrome, con el fin de adaptar la profilaxis y el manejo del mismo según el riesgo de presentar formas graves del mismo. Gracias a este trabajo, la prevención del síndrome de diferenciación se implementó de forma adaptada al riesgo en los siguientes protocolos PETHEMA. El tercer trabajo analizó el impacto pronóstico de un marcador molecular presente en la LPA, las mutaciones de FLT3. Existiendo controversia sobre el valor pronóstico independiente de FLT3, y por tanto de su posible incorporación a estrategias terapéuticas adaptadas al riesgo, desde el grupo PETHEMA se realizó este estudio de marcado carácter traslacional. Los resultados ayudaron a establecer la incidencia y las características clínicas y biológicas asociadas a la presencia de FLT3, y sirvieron para tomar la decisión de no realizar modificaciones en los algoritmos terapéuticos basados en la presencia de ese marcador. Este conjunto de estudios ha permitido un conocimiento profundo y un avance en el manejo de la LPA en sus sucesivas fases de tratamiento. Sin embargo, los hallazgos reportados aquí tendrán que ser validados en diferentes contextos terapéuticos. / Current treatment of acute promyelocytic leukemia (APL) with all trans-retinoic acid (ATRA) and chemotherapy combination provides a very high rate of cures. However, although narrow, there is room for improvement by reducing each of the different causes of treatment failure. Given the heterogeneity of the causes of failure, we hypothesize that an analysis of these causes and the identification of prognostic variables associated to the patient, leukemia, or to the treatment itself, could be useful to implement therapeutic measures to improve the clinical outcomes. Thus, the identification of prognostic variables could help to design risk-tadapted strategies. A detailed analysis of the short and long term complications and outcomes in different therapeutic phases, should help to refine the management of these complications and optimise future protocols, in order to offer a lower toxicity while maintaining a high antileukemic efficacy. This study includes the results of 3 manuscripts published in 2 high impact journals specialized in hematology. They all share a common feature; the analysis of a large series of patients treated with two consecutive protocols of the Spanish cooperative group PETHEMA for the treatment of APL (LPA96 and LPA99 trials). The first manuscript assessed the long-term results of the LPA99 trial, using a risk-adapted chemotherapy schedule based on the relapse score developed jointly in 2000 by the PETHEMA and GIMEMA groups. This analysis provided robust results, showing the positive impact of the intensification of the dosage of anthracyclines and ATRA in those patients with intermediate and high risk of relapse. This was the basis for the subsequent APL trials of the PETHEMA group. The second manuscript aimed to analyse a life-threatening complication of induction therapy in APL: the differentiation syndrome. This study identified the risk factors for the development of this syndrome, in order to adapt the prophylaxis and management according to the risk of developing severe forms. Thanks to this work, the prevention of differentiation syndrome was implemented using a risk-adapted startegy in the following PETHEMA trials. The third manuscript examined the prognostic impact of a molecular marker in APL, the FLT3 mutations. There was controversy about the independent prognostic value of FLT3 and its potential use to design risk-adapted therapeutic strategies. Our study permitted to establish the clinical and biological characteristics associated with the presence of FLT3, and recommended not to make changes in the therapeutic algorithms based on the presence of these mutations. This set of studies has allowed a deep understanding and a step forward in the management of APL in successive phases of treatment. However, the findings reported here will have to be validated in different therapeutic contexts.