El productes de plasma dessecat per esprai (SDP) tenen un alt contingut proteic i són components útils per a moltes aplicacions, principalment com a productes valuosos per la nutrició animal. El plasma s'obté a partir de sang de porcs sans aptes pel consum humà. Durant l’obtenció, s’afegeixen anticoagulants i la sang s’emmagatzema en tancs refrigerats. Un cop a la planta de processament, la sang es centrifuga, per separar el plasma de la fracció cel∙lular. El plasma es deshidrata en un procés d'assecat per polvorització per produir un producte final en pols. El dispositiu assecador crea microgotes per aspersió del plasma a alta pressió, l’aigua s'evapora per l'entrada d'aire a 170‐250°C i una temperatura de sortida a 80°C. L'assecat per esprai o polvorització produeix diferents efectes simultanis de deshidratació, canvis de temperatura i altres efectes com canvis osmòtics, dany oxidatiu i desnaturalització proteica que podrien contribuir a explicar un procés encara poc entès d'inactivació microbiana. L'objectiu d'aquesta tesi va ser avaluar si el plasma porcí assecat per aerosol (SDPP), en forma de producte comercial i obtingut a partir de lots de milers de porcs y sotmès a tractament, podria transmetre o no alguns dels virus més resistents a altes temperatures y que per altra banda, de forma molt freqüent, afecten a la producció porcina. Atès que la majoria d'elles poden produir infeccions inaparents, fins i tot a l’edat de final d’engreix, el risc que es puguin trobar a a la sang de recollida d’escorxador no és menyspreable. En el primer estudi es va fer el seguiment de la transmissió del Parvovirus porcí (PPV) durant el subministra d’SDPP comercial, com a model de detecció de virus d'alta resistència tèrmica, en porcs susceptibles. Trenta‐sis porcs Landrace x Duroc deslletats (28 d d'edat) van ser alimentats amb dietes que contenien 0 o 8% SDPP. El lot d’SDPP utilitzat contenia anticossos (ABs) per PPV (títol 1: 400). Es varen prendre mostres de sang dels porcs els dies 0 i 63 per a determinar si l'alimentació SDPP havia causat el desenvolupament d'ABs contra PPV, Virus de la síndrome reproductiva i respiratòria (PRRSV) o el Virus de la malaltia d'Aujeszky (ADV). La inclusió de SDPP a la dieta va millorar el creixement dels porcs sense seroconversió contra els virus estudiats. L'objectiu del segon estudi fou avaluar si l’SDPP comercial que conté genoma del Circovirus porcí tipus 2 (PCV2) podia ser un vehicle de transmissió d'aquest virus. Es varen utilitzar garrins Landrace recent deslletats de truges no virèmiques i seleccionats per baixos títols d'ABs. En aquest estudi, l'absència d'ABs enfront PCV2 en porcs experimentals no era necessari ja que els anticossos materns són comuns a les granges comercials. L’SDPP es va incloure en les dietes d'assaig a 0 o 8%. El lot SDPP utilitzat a l'estudi contenia 2,47 x 105 còpies d'ADN de PCV2 / ml mesurats per PCR quantitativa en temps real (qrt‐PCR). Els porcs van ser mostrejats a dies 0, 10, 35 i 45 . No es va observar virèmia o seroconversió enfront PCV2 en porcs alimentats amb SDPP i tampoc no es va observar seroconversió a cap altre dels virus analitzats (PPV, el virus de la malaltia vesicular porcina i ADV). En el tercer estudi, l’SDPP que contenia ADN de PCV2 es va utilitzar per provar la potencial transmissió del PCV2 de porcs inoculats amb el PRRSV. El PRRSV és un virus amb efectes immunomoduladors que normalment facilita les infeccions concurrents. Vint‐i‐tres porcs Landrace de 3,5 setmanes d'edat distribuïts en un arranjament factorial 2 x 2 i assignats a corralines de nivell de bioseguretat 3 (BSL3) per evitar la contaminació creuada per PRRSV (ja que és un virus molt estès en la producció comercial). Les dietes contenien 0 o 8% SDPP. El lot comercial específic de SDPP utilitzat en aquest estudi contenia 7,56 x 105 còpies del genoma de PCV2 per gram. Els porcs varen ser mostrejats a 0, 14 i 28 dies després de l'exposició PRRSV. Tant els grups desafiats amb PRRSV com amb SDPP no varen donar lloc a la transmissió de PCV2. El quart estudi es va dirigir a avaluar si l’SDPP comercial podia estar involucrat en la transmissió del Virus de l'hepatitis E (VHE), una infecció viral freqüent entre la població de porcs i que ha estat reconegut com a zoonotic potencial. Es van trobar ABs enfront HEV en el 100% de les 84 mostres analitzades de diferents lots comercials d’SDPP d'origen espanyol, mentre que només el 22,4% de les mateixes mostres varen ser positives a l'ARN del VHE. En conseqüència, era un motiu de preocupació saber si SDPP pot contribuir a la transmissió del VHE per SDPP. Es varen analitzar mostres de sèrum d'estudis previs en els quals s'havien alimentat els porcs amb dietes comercials SDPP al 0 o 8% per detectar HEV. L’edat dels porcs va variar de 3 a 15 setmanes d’edat i la durada d'alimentació va ser entre 4 a 9 setmanes, depenent de l'experiment. En una de les mostres d’SDPP es va confirmar que contenia VHE ARN. No es va detectar seroconversió en cap dels animals pertanyents als diferents estudis, el que va portar a la conclusió que l’SDPP no representa un risc per a la transmissió del VHE. Es pot concloure que els resultats dels estudis abans esmentats van contribuir a aclarir que SDPP no sembla ser un vector de patògens i, per tant, és un ingredient d’alt contingut de proteïna natural segur i d'alta qualitat per al seu ús en l'alimentació animal. / El plasma desecado por aerosol (SDP) tiene un alto contenido proteico, que lo convierte en un componente útil para muchas aplicaciones, y de alto valor para la nutrición animal. El plasma se obtiene a partir de sangre de cerdos sanos, aptos para el consumo humano. Durante su obtención, se añaden anticoagulantes y la sangre se almacena en tanques refrigerados. Una vez en la planta de procesado, la sangre se centrifuga, para separar el plasma de la fracción celular. El plasma se deshidrata mediante un proceso de secado por pulverización en aerosol para producir un producto final en polvo. El dispositivo crea un espray de microgotas por aspersión del plasma a alta presión, el agua se evapora por la entrada de aire a 170‐250°C y una temperatura de salida de 80°C. El secado por pulverización produce distintos efectos simultáneos, incluyendo: deshidratación, cambios bruscos de temperatura y otros efectos tales como cambios osmóticos, estrés oxidativo y desnaturalitzación proteica que podrían contribuir a explicar un proceso aún poco entendido de inactivación microbiana. El objetivo de esta tesis fue el de evaluar si el plasma porcino desecado por aerosol (SDPP) en forma de producto comercial y obtenido a partir de lotes de miles de cerdos podría transmitir o no algunos de los virus más resistentes a altas temperaturas y que frecuentemente afectan a la producción porcina. Dado que la mayoría de ellos pueden producir infecciones inaparentes, incluso a la edad de final de engorde, el riesgo que puedan encontrarse en la sangre recogida en matadero no es despreciable. En el primer estudio se realizó un seguimiento de transmisión del Parvovirus porcino (PPV) durante el aporte de SDPP comercial en la dieta, como un modelo de detección de virus de alta resistencia térmica, en cerdos susceptibles. Treinta y seis cerdos Landrace x Duroc recién destetados (28 de edad) se alimentaron con dietas que contenían 0 o 8% SDPP. El lote de SDPP utilizado contenía anticuerpos (ABs) para PPV (título 1: 400). Se tomaron muestras de sangre de cerdos en el día 0 y 63 para determinar si la inclusión de SDPP en el alimento había causado el desarrollo de ABs frente PPV, el Virus del síndrome reproductivo y respiratorio porcino (PRRSV) o el Virus de la enfermedad de Aujeszky (ADV). La inclusión de SDPP en la dieta mejoró el crecimiento de los cerdos sin seroconversión frente a los virus estudiados. El objetivo del segundo estudio consistió en evaluar si el SDPP comercial que contenía genoma de Circovirus porcino tipo 2 (PCV2) podía ser un vehículo de transmisión de este virus. Se utilizaron lechones Landrace recién destetados de cerdas no virémicas y seleccionados por presentar bajos títulos de ABs. En este estudio, la ausencia de ABs frente PCV2 en cerdos experimentales no era una condición excluyente, ya que los anticuerpos maternos son un factor común en los cerdos de granjas comerciales. El SDPP se incluyó en las dietas de ensayo a 0 o 8%. El lote de SDPP utilizado en el estudio contenía 2,47 x 105 copias de ADN de PCV2 / ml medidos por PCR cuantitativa de tiempo real PCR (qrtPCR). Los cerdos fueron muestreados a 0, 10, 35 y 45 días. No se observó viremia o seroconversión frente PCV2 en los cerdos alimentados con SDPP y tampoco se observó seroconversión frente a ninguno de los otros virus analizados (PPV, el virus de la enfermedad vesicular porcina, y ADV). En el tercer estudio, el SDPP que contenía ADN de PCV2 se utilizó para probar la potencial transmisión del PCV2 en cerdos inoculados con el PRRSV. El PRRSV es un virus con efectos inmunomoduladores que normalmente facilita las infecciones concurrentes. Veintitrés cerdos Landrace de 3,5 semanas de edad fueron distribuidos en un diseño factorial 2 x 2 y asignados a corralinas BSL3 para evitar la contaminación cruzada por PRRSV (un virus ampliamente extendido en condiciones de producción comercial). Las dietas contenían 0 o 8% SDPP. El lote comercial específico de SDPP utilizado en este estudio contenía 7,56 x 105 copias del genoma de PCV2 por gramo. Los cerdos se muestrearon a 0, 14 i 28 d después de la exposición al PRRSV. Los grupos desafiados con PRRSV y alimentados con SDPP no dieron lugar a transmisión del PCV2. El cuarto estudio se dirigió a evaluar si el SDPP comercial estaba involucrado en la transmisión del Virus de la Hepatitis E (VHE), una infección viral frecuente entre la población de cerdos que ha sido reconocido como un virus con potencial zoonótico. Se encontraron ABs frente a HEV en el 100% de las 84 muestras analizadas de distintos lotes comerciales de SDPP de origen español, mientras que solo el 22,4% de las mismas muestras fueron positivas por ARN del VHE. En consecuencia, era un motivo de preocupación conocer si el SDPP puede contribuir a la transmisión del el VHE. Se analizaron muestras de estudios previos en los que se habían alimentado los cerdos con dietas comerciales con SDPP al 0 o 8% para detectar HEV. La edad de los cerdos varió entre 3 a 15 semanas de edad y la duración de la alimentación fue entre 4 a 9 semanas, dependiendo del experimento. Una de las muestras de SDPP se confirmó que contenía ARN del VHE. No se detectó la seroconversión en ninguno de los animales pertenecientes a los distintos estudios, lo que condujo a la conclusión que el SDPP no representa un riesgo para la transmisión del VHE. Se concluyó que los resultados de los estudios mencionados contribuyeron a aclarar que el SDPP no parece ser un vector de los agentes patógenos estudiados y, por lo tanto, según los estudios realizados se trata de un ingrediente natural seguro de alta calidad con un alto contenido de proteínas para su uso en nutrición animal. / Spray dried plasma (SDP) products have high protein contents and, therefore, are useful components for many applications, mainly as valuable products for animal nutrition. Plasma is obtained from blood of healthy pigs fit for slaughter for human consumption. Blood is pooled from many animals, collected in tanks with anticoagulant and chilled. In the processing plant, blood is centrifuged to separate the plasma from cellular fraction and dehydrated by a spray‐drying process to produce a powered ingredient. The spray dryer device creates micro‐drops and evaporates water by inlet air at 170‐250°C and outlet temperature at 80°C. Spray‐drying produces concurrent effects of dehydration, changes of temperature and others effects such as osmotic changes, oxidative damage, and protein denaturizing stress that could contribute to explain a poorly understood process of microbial inactivation. The objective of this thesis was to evaluate if commercial spray dried porcine plasma (SDPP) obtained from batches of thousands of pigs could transmit or not some of most common high heat resistant viruses that affect swine production. Since most of them may produce unapparent infections at slaughter age, the risk to be found in collected blood at slaughterhouse is not negligible. In the first study, Porcine parvovirus (PPV) transmission throughout commercial SDPP, as model of high thermally resistant virus, was explored in susceptible naïve pigs. Thirty‐six Landrace × Duroc weanling pigs (28 d of age) were fed with diets containing either 0 or 8% SDPP. The SDPP lot used contained antibodies (ABs) to PPV (titer 1:400). Blood samples were collected from pigs on d0 and 63 to determine whether feeding SDPP caused development of ABs against PPV, Porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV) or Aujezsky disease virus (ADV). Inclusion of SDPP in the diet improved growth of pigs without seroconversion against studied viruses. The objective of the second study was to assess if commercial SDPP containing Porcine circovirus type 2 (PCV2) genome may be a vehicle of transmission for this virus. Weaned Landrace piglets from non viremic sows and selected for low ABs titres were used. In this study, absence of ABs against PCV2 in experimental pigs was not required because maternal antibodies are widespread in commercial farms. SDPP were included in the test diets at 0 or 8%. The SDPP lot used in the study contained 2.47 x 105 PCV2 DNA copies/ml measured by quantitative real time PCR (qPCR). Pigs were sampled at 0, 10, 35 and 45 d. No viremia or seroconversion against PCV2 was observed in pigs fed with SDPP and also no seroconversion to other virus analyzed (PPV, ADV and Swine vesicular disease virus, SVDV) was observed. In the third study, SDPP containing PCV2 DNA was used to test the potential transmission of PCV2 to pigs challenged with PRRSV. PRRSV is a virus with immunomodulatory effects that usually facilitates concurrent infections. Twenty‐three Landrace pigs of 3.5 weeks (w) of age were distributed in a 2 x 2 factorial arrangement and allocated in BSL3 boxes to avoid PRRSV cross‐contamination (since it is a widely spread virus under commercial production conditions). The diets contained 0 or 8% SDPP. The specific commercial lot of SDPP used in this study contained 7.56 x 105 PCV2 genome copies per gram. Pigs were sampled at 0, 14 and 28 d post PRRSV challenge. PRRSV challenged groups and SDPP groups, did not result in PCV2 transmission. The fourth study was addressed to assess if commercial SDPP was involved in the transmission of Hepatitis E virus (HEV), a prevalent viral infection within the pig population that has been recognized with zoonotic potential. HEV ABs were found in 100% of 84 samples of different commercial SDPP lots from Spanish origin, while only 22.4% of the same samples were positive for HEV RNA. Accordingly, it was of concern to know if SDPP may contribute to HEV transmission by SDPP. Serum samples from previous studies in which naïve pigs were fed with commercial SDPP diets at 0 or 8% were analysed to detect HEV. Age of pigs ranged from 3 to 15w of age and the feeding duration was between 4 to 9w, depending on the experiment. One of the lots of SDPP was confirmed to contain HEV RNA. HEV seroconversion was not detected in any of the animals belonging to the different studies, leading to the conclusion that SDPP does not represent a risk for HEV transmission. It can be concluded that the results of the above mentioned studies contributed to clarify that SDPP seems not to be a vector for pathogens and, therefore, it is a natural, safe, high‐quality ingredient with high protein contents for use in animal nutrition.

El objetivo de la presente tesis ha sido obtener información sobre la epidemiología de la Tuberculosis Bovina (TBb) en rebaños vacunos así como la obtención de datos para la implementación de un posible sistema de vigilancia basado en riesgo. En el primer estudio se analizó la variación espacio-temporal del riesgo de TBb en rebaños vacunos desde el año 2006 hasta el 2011. Los resultados indicaron que la prevalencia y la incidencia fueron más elevadas en algunas comarcas y en algunos años, comparando con la evolución global a nivel de país. El análisis de potenciales factores de riesgo indicaron que tanto los movimientos entre granjas provenientes de zonas de elevada incidencia (>1%) como la presencia de ganado de lidia, incrementaban el riesgo de infección. En el segundo estudio se describió una aproximación a un sistema de vigilancia basado en riesgo que se está evaluando actualmente en Nueva Zelanda. Dado que la presencia de TBb en granjas está conducida por un número de factores que incluyen: historial de infección previo en la explotación, frecuencia de test diagnósticos llevados a cabo en la explotación, localización geográfica y los movimientos de animales; el objetivo del estudio fue calcular una puntuación de riesgo de infección para cada granja utilizando datos recogidos durante la campaña de erradicación de forma rutinaria. De esta forma, los rebaños podrían ser clasificados en función de su riesgo de infección y así la vigilancia se podría focalizar en intentar detectar, de una forma más eficiente y economizando los costes, aquellas granjas con la puntuación de riesgo más elevada. En el tercer estudio, la sensibilidad individual de la vigilancia de TBb en mataderos de Cataluña fue evaluada. La probabilidad de detectar un bovino infectado fue estimada mediante el producto de las siguientes probabilidades: 1) probabilidad de que un bovino infectado llegue a matadero presentando lesiones compatibles y detectables macroscópicamente (LDM), 2) probabilidad de que LDM sean detectadas durante la inspección en matadero, 3) probabilidad de que el veterinario oficial de matadero sospeche de TBb y envíe las muestras al laboratorio para su confirmación. La sensibilidad individual de la vigilancia de TBb en los mataderos de bovino de Cataluña, resultó ser de un 31.4% (CI 95%: 28.6-36.2). En el cuarto estudio, la dinámica de transmisión de TBb dentro de un rebaño fue analizada. Para ello se desarrolló un modelo compartimental estocástico SEI (Susceptibles, Expuestos e Infecciosos). Con este modelo se infirieron los parámetros relacionados con la transmisión, en particular el ratio de transmisión (β) y el ratio en el que los animales infectados pasan a ser infecciosos (α). También, debido a la controversia sobre las sensibilidades reportadas de la prueba de la intradermo-tuberculinización simple (IDTs) en condiciones de campo, la probabilidad de detectar tanto los animales infectados como los infecciosos (ϕ y ρ, respectivamente) fue también evaluada. Las distribuciones posteriores de los parámetros modelizados fueron obtenidas mediante el método de las cadenas de Markov Chain Monte Carlo y por métodos de aproximación por computación bayesiana (MCMC-ABC). El promedio obtenido, de 33 rebaños de diferentes áreas de España, para el ratio de transmisión varió entre 0.0001 y 0.0002 por día, y el promedio del ratio de transición de bovinos infectados a infecciosos varió entre 0.011 y 0.0001. / The present PhD Thesis aimed to provide information about the epidemiology of bovine tuberculosis (bTB) in cattle and relevant data for the implementation of a risk based surveillance system. In the first study the space-time variation of the risk of bTB in cattle between 2006 and 2011 was analyzed. The results indicated that in some counties, between some years, the prevalence and the incidence of the disease was higher as compared to the global rate in the rest of the counties of Spain. The analysis of potential risk factors indicated that both, a large number of movements from counties with high incidence (>1%), and presence of bullfighting cattle herds increased the bTB risk. In the second study it was described a risk-based approach for bTB surveillance that is under development in New Zealand. Given that the presence of bTB in a herd is driven by a number of factors including previous infection history, the amount of testing carried out on individual herds, geographic location or herd movement behavior, the objective was to use routinely recorded data to derive a ‘risk score’ for each of these factors and then to combine them to return a composite bTB risk score for each herd. By this way, herds could be ranked and this would enable to focus surveillance in those herds with the highest risk score, providing effective surveillance coverage at a reasonable overall cost. In the third study the individual sensitivity of bovine tuberculosis surveillance in Catalonian slaughterhouses of cattle was assessed. The probability of detection of a bTB-infected cattle by the slaughterhouses in Catalonia was estimated as the product of three consecutive probabilities: P1) the probability that a bTB-infected animal arrived at the slaughterhouse presenting Macroscopically Detectable Lesions (MDL); P2) the probability that MDL were detected by the routine meat inspection procedure, and P3) the probability that the veterinary officer suspected of bTB and sent the sample for laboratory confirmation. The mean individual bTB surveillance sensitivity of the different cattle slaughterhouses in Catalonia obtained in this study was 31.4% (CI 95%: 28.6-36.2). In the fourth study a stochastic compartmental SEI (Susceptible, Exposed (latent), and Infectious) model was developed to mimic Bovine tuberculosis (bTB) within-herd transmission dynamics. This model was used to infer several parameters related to bTB spread within Spanish cattle farms, in particular the cattle-to-cattle transmission rate (β) and the rate at which infected cattle become infectious (α). Also, given the controversy over the sensitivities of the single intradermal tuberculin test (SIT) application in field conditions, the probability of detection of both infected and infectious cattle (ϕ and ρ, respectively), were also evaluated. A Markov Chain Monte Carlo-Approximate Bayesian Computation (MCMC-ABC) method was used to generate posterior distributions and the mean within herd transmission rate (β) estimated in 33 Spanish herds varied between 0.0001 and 0.0002 per day, and the mean rate at which infected cattle become infectious (α) varied between 0.011 and 0.0001.

La present tesi doctoral tenia com a objectiu complementar el coneixement actual sobre l’eficàcia de la vacuna enfront a PCV2 en condicions d’infecció subclínica i explorar dos conceptes nous (en quan a estratègies de vacunació enfront a aquest patogen) que poguessin augmentar l’eficàcia d’aquest tractament. El primer estudi pretenia avaluar la possible interferència de la presència de diferents nivells d’anticossos d’origen maten (AOM) en el moment de la vacunació, en l’evolució del guany mig diari de pes (GMDP). En aquest estudi, només es va detectar una possible interferència en l’eficàcia de la vacuna sobre el GMDP, quan es va considerar la subpoblació d’animals amb els valors S/P més alts. Per tant, l’impacte d’aquesta possible interferència en condicions de camp es probablement negligible en la majoria d’animals i de les granges. En el segon estudi, es va avaluar la viabilitat d’eradicar la infecció de PCV2 en una granja convencional infectada subclínicament amb PCV2 mitjançant una estratègia de vacunació en massa. L’aplicació durant una any de la vacunació en massa enfront a PCV2 (sense implementar mesures específiques de maneig o de bioseguretat) no va ser capaç d’eliminar l’infecció per PCV2. De fet, un cop la vacunació es va aturar, el virus es va detectar de nou. De totes maneres, la disminució dels nivells d’anticossos i la no detecció del virus durant la segona meitat del període de vacunació en massa deixa entreveure que la eradicació de la infecció de PCV2 mitjançant un programa de vacunació més llarg i més extensiu podria ser possible. / This thesis aimed to complement the current knowledge on PCV2 vaccination efficacy under subclinical infection conditions and give new creative concepts (“thinking out of the box”) for future related studies. The first study had the objective to assess the putative interference of different maternally derived antibody (MDA) levels at the time of vaccination on the average daily weight gain (ADWG) evolution. In this study, an apparent interference of vaccine efficacy on ADWG was noticed only when a small subpopulation of pigs with the highest ELISA S/P ratios was considered, Therefore, the impact of this possible interference under field conditions is probably negligible for most of the animals and farms. In the second study, the feasibility to eradicate PCV2 in a conventional PCV2 infected farm by using a mass vaccination strategy was assessed.. One year period of mass PCV2 vaccination (without implementing further farm management practices or biosafety measures) was not able to clear out PCV2 infection. Indeed the virus became detectable again when vaccination was stopped. However, the decreasing antibody levels and the lack of viral detection during the second half of the vaccination period shed a light on eradicating this virus by applying a longer term vaccination in a wider area would be feasible.

El propofol es un agente anestésico inyectable que puede usarse para la inducción o para el mantenimiento de la anestesia. Actualmente su uso está ampliamente extendido tanto en medicina humana como en veterinaria, especialmente en campos tales como la anestesia en pacientes gestantes. No obstante sus efectos sobre el feto no se conocen con exactitud. En la presente tesis doctoral se ha determinado, en primer lugar, la farmacocinética del propofol en ovejas gestantes a término así como el paso placentario del propofol tras la administración de un bolo único endovenoso de 6 mg/kg y tras la administración de un bolo endovenoso de 6 mg/kg seguido de una infusión continua de 0.4 mg/kg/m durante una hora. En la segunda fase del estudio se han determinado los efectos del propofol sobre el sistema cardiovascular y del equilibrio ácido-base de madres y fetos. Para el estudio farmacocinéticos se emplearon 12 ovejas de raza ripollesa. Todas ellas fueron preparadas quirúrgicamente para el procedimiento experimental. Las concentraciones plasmáticas decrecieron siguiendo un modelo bicompartimental, con una primera fase rápida de caída de concentraciones plasmáticas y una segunda fase de eliminación plasmática lenta. Las concentraciones de propofol fetales encontradas en este estudio demostraron ser mucho más bajas que las maternas corroborando los datos previos en los cuales se había observado este efecto de barrera placentaria en muestras de sangre fetal obtenidas después del parto. Si comparamos los parámetros farmacocinéticos del propofol obtenidos en las madres y los fetos después de la administración de un bolo i.v. podemos observar que las AUC son tres veces superiores en las madres en comparación con los fetos. En cambio el tiempo en que el feto esta expuesto al fármaco es similar al de la madre, tal y como se refleja en la similitud entre los MRT encontrados en el estudio (0.4 h en la madre y 0.5 h en el feto). Sin embargo, aunque el tiempo de exposición sea el mismo en las madres que en los fetos los tiempos de vida media para los fetos fueron más del doble de los obtenidos para las madres. Esta eliminación lenta observada en los fetos ha sido descrita anteriormente en neonatos humanos. Cuando se evalua el paso placentario tras la administración de una infusión continua de propofol se puede observar que las concentraciones fetales durante toda la infusión son entre seis y nueve veces inferiores que las de la madre. Esta relación de concentraciones se mantiene elevada durante todo el tiempo en que se mantiene la infusión, mientras que a partir de la supresión del tratamiento esta relación de concentraciones va diminuyendo hasta llegar a una relación de 1:1 a la hora y media de la supresión. Este dato indica que el fármaco no llegaría al feto en grandes cantidades y que el retorno a la madre desde el feto se realizaría con dificultad, de manera que, en la madre, la lenta fase de eliminación terminal estaría marcada por la eliminación fetal de fármaco. Dicha lentitud en la eliminación fetal se ve reflejada en elevados tiempos de vida media de eliminación en el feto (1.1 h) en comparación con los observados en las madres (0.5h), al igual que en la primera parte del estudio. El MRT también mostraria un tiempo de residencia media del propofol en los fetos. En la segunda fase del estudio se emplearon 6 ovejas Ripollesas a término preparadas de forma quirúrgica. La presión arterial media (MAP) y la presión diastólica (DAP) maternas disminuyeron de forma significativa (p<0.05) durante los 15 primeros minutes de la infusión. Durante este periodo de tiempo también disminuyo el pH materno debido a un aumento significativo de la PaCO2. El pH fetal decreció de forma significativa durante el periodo de la infusión mientras que la MAP, DAP y PaCO2 fetales incrementaron de forma significativa. Tras el cese de la infusión todos los parámetros volvieron a valores normales no detectándose diferencias significativas entre el periodo control y el de recuperación. Podemos concluir que el propofol cruza la placenta con rápidez. Las concentraciones de propofol en ovejas gestantes fueron superiores a las detectadas en sus fetos. Los efectos del propofol sobre fetos ovinos fueron relevantes aunque estos recuperaron sus constantes tras el cese de la infusión de propofol. / Propofol is an injectable anaesthetic that is currently used both in veterinary and human medicine for the induction and maintenance of anaesthesia. Although little is known about the pharmacokinetics and the effects of propofol in fetuses, it is widely used in obstetric procedures, particularly in caesarean section. This study determines firtly the pharmacokinetics of propofol in pregnant ewes in the last third of pregnancy, and placental transfer and pharmacokinetics in fetuses after the administration of a 6 mg/kg IV bolus (phase 1) or a 6 mg/kg IV bolus followed by continued infusion of 0.4 mg/kg/minute. In the second part of the study we have determined the effects of propofol on maternal and fetal cardiopulmonary function during the last trimester.Twelve pregnant Ripollesa ewes, free of any clinical signs of illness, between 105 and 135 gestational days were used for the pharmacokynetical study. All ewes were prepared surgically for the experimental study. We have shown that the plasma concentration decreased with a two-phase kinetic profile, one fast phase with the fall of plasma concentrations, and a second slow plasma elimination phase. The fetal PRF concentrations measured in this study were shown to be much lower than the maternal ones, corroborating the previous data in which a placental barrier effect was demonstrated in fetal blood samples taken after giving birth in humans.In comparing the pharmacokinetic parameters of PRF obtained from ewes and from fetuses after the administration of an i.v. bolus, it was apparent that the AUC was three times higher for mothers, indicating that exposure to the medication in fetuses is three times lower than for mothers. The time in which the fetus is exposed to the medication is similar to that for the mother, as reflected by the similarity between the MRT (0.4 h for the dams and 0.5 h for the fetus). Nevertheless, the half-life times for the fetuses were more than twice those for the mothers. This slow elimination observed in the fetuses has been previously described in human neonates. It is possible that the small amounts of PRF found in neonates may be due to its slow elimination and not to the fact that there are large amounts of these drugs in the mother and her fetus. In other words, the fetuses have small amounts of propofol and this is eliminated very slowly. When the placental transfer of propofol is analysed after the administration of an i.v. bolus and infusion, it can be seen that the fetal concentrations throughout infusion were between six and nine times lower than for the mother. The relationship between concentrations remains high throughout the infusion period but after the treatment stops the relationship between concentrations fell until it reached a 1:1 ratio, 90 min later. This indicates that the medication did not reach the fetus in high amounts, and its return to the mother would also occur slowly, so that, in the mother, the slow terminal elimination phase would be characterised by the fetal elimination of the medication. Such slowness is reflected in the higher elimination half-lives in fetuses (1.1 h), in comparison with those observed in mothers (0.5h) The MRT also suggests significant differences between mothers and fetuses, with a higher propofol residency time in the fetuses, compared to the mothers.In the second part of the study six pregnant Ripollesa sheep were used to study the cardiovascular effects of propofol. They were prepared as above. The maternal mean arterial pressure (MAP) and diastolic arterial pressure (DAP) were significantly decreased (p<0.05) during the first 15 min of the infusion period, while the maternal pH was also significantly decreased. The maternal PaCO2 and PaO2 were significantly increased throughout the total infusion period. It was further observed that the fetal pH decreased significantly, throughout the infusion period, whereas the fetal MAP, DAP and PaCO2 were significantly increased during the first 15 min of the infusion, after which time all parameters returned to control values. No differences in either maternal or fetal parameters were observed between the control and the recovery times.We conclude that propofol crosses the placenta very rapidly in sheep. The propofol concentrations in ewes were far greater than those found in the fetuses. Nevertheless, the fetuses showed a far slower elimination of propofol and the effect of propofol on prenatal lambs may be relevant.

Los objetivos del presente estudio se centraban en el desarrollo de un elongador y de un protocolo de distracción ósea sencillo, efectivo y confortable para los pacientes, así como en el estudio de la progresión de los tejidos que forman el callo de distracción. Para tales objetivos, se practicó de forma bilateral no simultánea, una osteotomía centrodiafisaria tibial en 12 perros, y se colocó un elongador unilateral. Tras un período de latencia de 5 días, se llevó a cabo la distracción de los segmentos óseos a un ritmo de 0.5mm cada 12 horas durante 10 días, para posteriormente mantenerlos de forma estática con objeto de obtener la consolidación del callo de distracción formado. Durante todo el período postoperatorio, se realizaron controles clínicos diarios y radiológicos cada 2 semanas hasta la eutanasia de los animales, a las 1, 2, 3, 4, 6, 8, 10, 12, 14, y 18 semanas tras la realización de la osteotomía. El estudio postmortem mediante microscopía electrónica de retrodispersión (BS-SEM) se realizó sobre muestras óseas no decalcificadas.Los resultados clínicos obtenidos pusieron de manifiesto el uso satisfactorio de la extremidad elongada durante todo el estudio, así como su excelente recuperación funcional, sin afectar en ningún momento el bienestar de los animales. Radiológicamente, pudo observarse cómo la mineralización del callo de distracción comenzaba 2 semanas después de la intervención quirúrgica y tenía lugar de forma centrípeta, es decir, desde los fragmentos óseos originales hacia el centro del espacio interfragmentario. La consolidación completa del hueso neoformado ocurrió a las 14 semanas postquirúrgicas. Las imágenes obtenidas mediante microscopía electrónica de retrodispersión (BS-SEM) mostraron el origen principalmente medular y perióstico del callo de distracción, los cuales englobaban posteriormente el área intercortical. Asimismo, pudo observarse que durante la fase de distracción el frente de mineralización del callo de distracción se encontraba compuesto principalmente por tejido condroide, mientras que durante la fase de consolidación, el tejido predominante en esa región era el tejido cartilaginoso calcificado. A medida que se producía la mineralización del callo neoformado, estos dos tejidos eran sustituídos sucesivamente por hueso fibrorreticular, lamelar y osteonal. Por todo ello, consideramos que el mecanismo de osificación del callo de distracción en nuestro estudio no es endocondral, sino más concretamente endocondroidal. / The objectives of the present study were focused on the development of an external fixator and a bone distraction procedure, in order to allow an easy, effective and comfortable way of bone lengthening for the patient. The study of the progression of the regenerated tissues was also an important objective in this work. For these reasons, a non simultaneous, bilateral and middiaphyseal tibial osteotomy was performed in 12 dogs, which was stabilized by a unilateral external fixator. A latency period of 5 days and a rate of distraction of 0.5mm every 12 hours were applied for 10 days. Then, the external fixator was kept in place until complete bone healing was obtained. During the postoperative period, a clinical and radiological follow up were performed daily and bimonthly, respectively, until the animals were euthanized at 1, 2, 3, 4, 6, 8, 10, 12, 14, and 18 weeks after surgery. A postmortem study by means of Backscattered Scanning Electron Microscopy (BS-SEM) was done with non-decalcified bone samples.The clinical results showed a satisfactory use of the limb during the whole study and an excellent limb function recovery, without affecting the well being of the patient. Radiologically, ossification of the distraction callus was observed 2 weeks after the surgical procedure, and it progressed in a centripetal way, from the original bone segments towards the middle of the callus. Complete healing of the regenerated bone took place at 14th week postoperatively. The images obtained by means of Backscattered Scanning Electron Microscopy (BS-SEM) showed how the distraction callus originated mainly from medullary and periosteal regions, which subsequently embraced the intercortical area. It could also be observed that during the distraction process, chondroid tissue was the main component of the mineralization front, while during the consolidation period it was the calcified cartilaginous tissue. Both tissues were finally replaced by woven, lamellar and osteonal bone, successively. The findings in this study allow us to consider the ossification mechanism of the distraction callus is not endochondral but endochondroidal.

EL OBJETIVO DE ESTE TRABAJO SE CENTRA EN DETERMINAR SI UNA HIPERINCLINACION ACETABULAR PROVOCA LESIONES DE TIPO INFLAMATORIO O DEGENERATIVO EN LA ARTICULACION AFECTADA. PARA ELLO SE INTERVINIERON 15 PERROS DE EDADES COMPRENDIDAS ENTRE LOS 2 Y 3 AÑOS Y PESOS ENTRE LOS 25 Y 30 KG, A LOS QUE TRAS REALIZAR UNA TRIPLE OSTEOTOMIA DE CADERA SE LES ESTABILIZO EL ACETABULO CON UNA PLACA DE OSTEOSINTESIS ANGULADA 45 GRADOS, CON LO QUE PROVOCABAMOS UNA HIPERINCLINACION ACETABULAR DE UNOS 16 GRADOS. LA EXTREMIDAD INTERVENIDA FUE EN TODOS LOS CASOS LA IZQUIERDA, MANTENIENDO A LOS ANIMALES EN ESTADO DE EJERCICIO ACTIVO DURANTE UN PERIODO DE SEIS MESES, DURANTE LOS CUALES SE REALIZARON CONTROLES CLINICOS (DOLOR, MOVILIDAD ARTICULAR, APOYO, APLOMO) Y RADIOLOGICOS. UNA VEZ TRANSCURRIDOS ESTOS SEIS MESES, SE REALIZO UN CONTROL GAMMAGRAFICO Y A CONTINUACION SE SACRIFICO A LOS ANIMALES. LOS ESTUDIOS POSTMORTEM CONSISTIERON EN EL ANALISIS DEL LIQUIDO SINOVIAL, LA MEDICION DEL ESPESOR DEL CARTILAGO ARTICULAR Y EL ESTUDIO HISTOLOGICO DE LA ARTICULACION. LOS RESULTADOS OBTENIDOS DEMUESTRAN QUE EN NINGUN CASO APARECIO NI DOLOR NI LESIONES DE TIPO INFLAMATORIO O DEGENERATIVO A NIVEL ARTICULAR DURANTE EL TIEMPO QUE DURO LA EXPERIENCIA. UNICAMENTE SE OBSERVO UNA SERIE DE ALTERACIONES DURANTE EL EXAMEN CLINICO QUE CONSISTIAN EN QUE POR UN LADO SE PRODUCIA UNA DISMINUCION MEDIA DE UN 20+-5% EN EL MOVIMIENTO DE ABDUCCION DEL FEMUR, Y POR OTRO LADO SE PRODUCIA UNA ROTACION EXTERNA DE LA RODILLA EN EL MOMENTO DEL APOYO QUE ASI COMO AL SEPTIMO DIA ERA APROXIMADAMENTE DE UNOS 26 GRADOS, A LOS NOVENTA DIAS QUEDABA PRACTICAMENTE CORREGIDA. POR TODO ELLO PODEMOS AFIRMAR QUE AL REALIZAR UNA HIPERINCLINACION ACETABULAR DE UNOS 16 GRADOS NO SE PROVOCAN MAS ALTERACIONES QUE LAS COMENTADAS RESPECTO A LA ABDUCCION Y AL APLOMO, OBTENIENDO POR CONTRA UN MAYOR RECUBRIMIENTO DE LA CABEZA FEMORAL. FINALMENTE, SE DESCRIBE EL "INDICE DE RECUBRIMIENTO ACETABULAR DORSAL", UTILIZADO DURANTE EL EXAMEN RADIOLOGICO PARA CALCULAR EL RECUBRIMIENTO DORSAL QUE PROPORCIONA EL ACETABULO A LA CABEZA FEMORAL CUANDO EL ANIMAL ESTA EN ESTACION.

Se ha realizado un trabajo experimental en veintidós perros en los que se estudio la cicatrización de osteotomias tibiales. Los objetivos principales eran evaluar el efecto que tenían sobre la cicatrización, la implantación angulada o transversal de los fijadores así como el desplazamiento lateral de éstos. Se controló el proceso de cicatrización ósea por radiología, gammagrafía y microangiografía demostrando una mayor osteolisis peripin en los grupos de angulación donde también se observó una consolidación más rápida. Asimismo los estudios microradiográficos histológicos y de microscopía electrónica de retro-dispersión reflejaron una activación más tardía del proceso de remodelación ósea en el grupo de flexión así como una menor madurez tisular del callo.

La ciclooxigenasa (COX)-2 i els seu metabòlit principal, la prostaglandina E2 (PGE2), són importants en la fisiologia cutània (maduració i proliferació dels queratinòcits) i la seva patofisiologia (processos de cicatrització, inflamació cutània i carcinogènesi). Malgrat l’evidència que suggereix que les prostaglandines derivades de la COX-2 contribueixen a la carcinogènesi, els resultats de múltiples estudis en humans i mamífers són sovint contradictoris. Endemés, el paper de la ruta COX-2/PGE2 en els processos inflamatoris cutanis en animals de companyia no s’ha investigat, deixant desert el camp de les estratègies terapèutiques que involucren la manipulació farmacològica d’aquest sistema en aquestes espècies. En aquesta tesi, hem estudiat l’expressió de la COX-2 en lesions cutànies pre-neoplàstiques (queratosis actíniques (QA)), neoplàstiques (carcinoma de cèl·lules escatoses (CCE), neoplàstiques melanocítiques, limfoma cutani epiteliotròpic de cèl·lules T (LCECT)) i en dermatosis inflamatòries amb afectació epidèrmica. Els resultats han revelat expressió de COX-2 en queratinòcits no neoplàstics canins, felins i equins de les dermatosis inflamatòries i neoplàstiques estudiades. L’expressió de COX-2 es va detectar també en queratinòcits pre-neoplàstics i neoplàstics canins i felins de les mostres de QA i CEE. I un baix nombre de melanòcits neoplàstics dels processos cancerosos melanocítics també expressaren COX-2. Tot i així, i amb l’excepció de les mostres de QA, en tots aquests casos l’expressió de COX-2 es va observar sempre a la superfície de les mostres i majoritàriament en aquelles cèl·lules que tenien un infiltrat inflamatori granulocític al seu voltant. En canvi, no vàrem detectar l’expressió de COX-2 en els limfòcits neoplàstics del LCECT. Tampoc no vàrem detectar expressió de COX-2 en queratinòcits (neoplàstics i no neoplàstics) o melanòcits neoplàstics en absència d’un infiltrat inflamatori de cèl·lules polimorfonuclears. Es va posar a punt un model in vitro per estudiar la resposta inflamatòria dels queratinòcits. Amb aquest model es va estudiar la producció de PGE2 per part d’aquestes cèl·lules davant de diferents estímuls. Aquestes cèl·lules es varen estimular amb diferents concentracions de lipopolisacàrid i amb leucòcits sanguinis canins (que contenien més d’un 90% de neutròfils). Amb aquests estudis vàrem poder observar que la producció de PGE2 per part dels queratinòcits era molt elevada quan aquests s’havien cultivat en presència de leucòcits circulants (principalment neutròfils). Tots aquests resultats suggereixen que la via COX-2/PGE2 podria estar involucrada en la patogènia de les QA tal i com ho està en la QA humana. En canvi, indiquen que aquest no és un mecanisme essencial en el procés carcinogènic del CCE, neoplàsies melanocítiques i LCECT en les espècies canina, felina i equina. Els nostres resultats suggereixen, en canvi, que l’expressió de COX-2 o producció de PGE2 és un epifenomen associat a la resposta inflamatòria d’aquestes neoplàsies i en les dermatosis inflamatòries neutrofíliques. / Cyclooxygenase (COX)-2 and its main metabolite, prostaglandin E2 (PGE2), are important players in the skin physiology (maturation and proliferation of keratinocytes) and pathophysiology (wound healing, skin inflammation and carcinogenesis). Despite the evidence that suggests that COX-2 derived prostaglandins contribute to carcinogenesis, conflicting results have been reported from numerous human and mammalian studies. Moreover, the involvement of the COX-2/PGE2 route in cutaneous inflammatory processes in companion animals have not been investigated. This has left a desert field regarding therapeutic strategies involving the pharmacologic manipulation of the COX-2/PGE2 system in these species. In this thesis COX-2 expression on cutaneous pre-neoplastic (actinic keratosis (AK)), neoplastic (squamous cell carcinoma (SCC), melanocytic neoplasias and cutaneous epitheliotropic T cell lymphoma (CETL)) and inflammatory disorders with an epidermal involvement was studied. We detected COX-2 expression in non-neoplastic canine, feline and equine kerationcytes present in neoplastic or inflammatory dermatoses. COX-2 expression was also detected in pre-neoplastic and neoplastic canine and feline keratinocytes of the AK and SCC samples. A low number of canine and equine melanocytes in the melanocytic neoplasias also expressed COX-2. However, and except for the AK samples, in all these cases COX-2 expression was observed mainly at the surface of the samples and was highly associated to the presence of infiltrating granulocytes. On the contrary, we did not detect COX-2 expression in neoplastic lymphocytes of CETL or in neoplastic and non-neoplastic kerationcytes and neoplastic melanocytes in the absence of a polymorphonuclear infiltrate. We set up an in vitro model to study the keratinocyte inflammatory response and evaluated the in vitro production of PGE2 in response to different stimuli. Keratinocytes cultures were stimulated with different concentrations of LPS and with canine white blood cells (WBC) (containing more than 90% of neutrophils). We could observe that PGE2 production by kerationcytes was highly associated to the presence of WBC (neutrophils) in the culture media. Overall, our results suggest that the COX-2/PGE2 pathway may be involved in the AK pathogenesis as in its human counterpart. However, it is not an essential mechanism in the carcinogenesis process in SCC, melanocytic neoplasias and CETL in the canine, feline and equine species. It is suggested that COX-2 expression or PGE2 production is an epiphenomenon associated to the inflammatory response in these neoplasias and in neutrophilic inflammatory dermatoses.

El objetivo de esta Tesis fue evaluar el uso de nuevas tecnologías en ganadería. Para ello se estudió: 1) la termografía por infrarrojos (IRT), como método para la detección de infecciones intramamarias (Exp. 1 y 2) y, 2) biosensores ruminales para medir la evolución del pH y temperatura (Exp. 3, 4 y 5). En Exp. 1, se utilizaron 83 ovejas lecheras al inicio de lactación (Manchega, n = 48; Lacaune, n = 35) para detectar infecciones intramamarias (IMI) a partir de la temperatura de la piel de la ubre (UST) medida por IRT. Las imágenes IRT de las ubres se tomaron antes y después de cada ordeño (a.m y p.m), mediante una cámara portátil de infrarrojos (IRI 4010, Irisys, Northampton, UK), por duplicado y en un total de 10 sesiones. La detección de IMI se realizó mediante cultivo bacteriano de muestras de leche en laboratorio y California Mastitis Test en granja. En Exp. 2, se utilizaron 9 ovejas al final de la lactación, en las que se indujo una respuesta inflamatoria aguda similar a IMI. Para ello se infundió intramamariamente una única dosis de 1 mL de lipopolisacárido de E. coli O55:B5, 30 min después del ordeño. Las IRT y muestras de leche se tomaron a distintos intervalos de tiempo hasta las 73 h. Pese a la precisión de la cámara (±0.15 ºC), capaz de detectar los efectos del ordeño (P < 0.05 a 0.001) y la diferencia entre razas (P = 0.003), la IRT no resultó de utilidad para detectar la aparición de IMI clínicas o subclínicas (P = 0.48) en ovejas, así como tampoco la respuesta aguda a la infusión de E. coli. En los Exp. 3 y 4, se utilizaron un total de 16 cabras Murciano-Granadinas multíparas y no-lactantes, previamente provistas de bolos ruminales con sensores inalámbricos de pH y temperatura (145 × 27 mm; KB1001, Kahne Bolus, NZ) introducidos mediante cirugía. En la Exp. 3 (n = 8) se evaluaron los efectos de la relación forraje:concentrado (F:C) de la ración (HF, alta forraje 70:30; HC, alto concentrado 30:70), a nivel de mantenimiento, en los parámetros ruminales a lo largo del día (cada 30 min), según un diseño cruzado. La F:C de la ración indujo marcadas diferencias en la evolución del pH del rumen (P < 0.001), pero no en la temperatura ruminal (P = 0.40). Sin embargo, la toma de agua fría (9.8 ºC), redujo marcadamente la temperatura del rumen durante 2 h (nadir, ‒3.5 ºC; P < 0.001). En Exp. 4, las cabras (n = 8) se alojaron en jaulas metabólicas, se sometieron a condiciones ambientales de termo-neutral (TN, 20 a 23°C día y noche, 45% humedad) y estrés por calor (HS, 37°C día y 30.5°C noche; 40% humedad) con fotoperiodo constante (día:noche, 12:12 h), según un diseño cruzado. La ración consistió en una mezcla F:C = 50:50 a nivel de mantenimiento. Las temperaturas ruminal y rectal se vieron afectadas por la temperatura ambiente, siendo mas elevadas en las cabras HS respecto a las TN (P < 0.01). Pese a que la ingestión de materia seca no se vio afectada por la temperatura ambiente (P = 0.18), el pH del rumen fue inferior en las cabras HS respecto a TN (‒0.12; P = 0.003) en respuesta al estrés térmico. Finalmente, en la Exp. 5 se estudió el efecto de la suplementación o no de la misma ración de la Exp. 4 con aceites funcionales (C, control; FO, 1 g/d de Essential, Oligo Basics Agroindustrial, Cascavel, Brasil) en el pH y temperatura ruminales. Estos datos, junto con los de la Exp. 4 fueron utilizados para modelizar la evolución del pH a partir de la temperatura ruminal utilizando regresiones logísticas (RL) o distribuciones normales acumulativas (DNA). Las DNA resultaron tan exactas como las RL, pero mucho más sencillas de calcular. En conclusión, la termografía por infrarrojos no resultó útil para la detección de mamitis en condiciones de granja, pero detectó diferencias producidas por el ordeño y la raza. El uso de biosensores permitió obtener información precisa sobre el pH del rumen en condiciones diversas. La distribución normal acumulativa fue un adecuado modelo para predecir el pH del rumen, aunque para la temperatura del rumen no mostró suficiente precisión y se necesitó incluir otras variables (i.e., ración, temperatura ambiente). / The aim of this Thesis was to evaluate the use of new technologies for livestock. The studied technologies were: 1) Infrared thermography (IRT), as a method for detecting intramammary infections (Exp. 1 and 2), and 2) ruminal biosensors to measure the evolution of ruminal pH and temperature (Exp. 3, 4 and 5). In Exp. 1, 83 dairy sheep (Manchega, n = 48; Lacaune, n = 35) were used to detect intramammary infections (IMI) by measuring the udder skin temperature (UST) by IRT. Udder IRT images were taken in duplicate before and after each milking (a.m. and p.m.) using a portable infrared camera (IRI 4010 Irisys, Northampton, UK) on a total of 10 sessions. Detection of IMI was performed by bacterial culture of milk samples in laboratory and by California Mastitis Test in the farm. In Exp. 2, 9 sheep at late lactation were used to induce an IMI like acute inflammatory response. Ewes were intramammary infused with a single dose of 1 mL endotoxin from E. coli O55: B5, 30 min after milking. The IRT and milk samples were taken at various time intervals until 73 h. Despite the accuracy of the camera (± 0.15 ºC), able to detect the effects of milking (P < 0.05 to 0.001) and breed differences (P = 0.003), IRT was unable to detect the occurrence of clinical or subclinical IMI (P = 0.48) in sheep, neither the acute response to the infusion of E. coli endotoxin. In Exp. 3 and 4, we used a total of 16 Murciano-Granadina multiparous and non-lactating dairy goats, carrying rumen boluses with wireless sensors of pH and temperature (145 × 27 mm; KB1001, Kahne Bolus, NZ), previously introduced by surgery. In Exp 3 (n = 8) the effects of diet forage:concentrategasol19 (F:C) ratio (HF, high forage 70:30; HC, high concentrate 30:70), fed at maintenance level and according to a crossover design, were evaluated on the variation of ruminal parameters throughout the day (every 30 min). The F:C ratio induced marked differences on the evolution of ruminal pH (P < 0.001), but not on ruminal temperature (P = 0.40). However, intake of cold water (9.8°C) dramatically reduced rumen temperature during 2 h (nadir, ‒3.5°C, P < 0.001). In Exp. 4, the goats (n = 8) were housed in metabolic cages, and submitted to environmental conditions of thermal neutral (TN, 20 to 23°C day and night; 45% humidity) and heat stress (HS, 37°C day and 30.5°C night; 40 % humidity) with constant photoperiod (day:night, 12:12 h), according to a crossover design. The ration consisted of a mixture F:C = 50:50 fed at maintenance level. Ruminal and rectal temperatures were affected by ambient temperature, being higher in the HS than in the TN goats (P < 0.01). Despite the fact that dry matter intake did not change by ambient temperature (P = 0.18), rumen pH decreased in the HS goats when compared to TN (‒0.12, P = 0.003) as a response to heat stress. Finally, Exp. 5 studied the effects of supplementing the same ration as in Exp. 4 with or without functional oils (C, control; FO, 1g/d of Essential, Oligo Basics Agroindustrial, Cascavel, Brazil) on ruminal pH and temperature. Joint data of Exp. 4 and 5, were used to model the evolution of ruminal pH and temperature using logistic regressions (LR) or cumulative normal distributions (CND). The CND proved to be as accurate as LR, but it was much easier to calculate. In conclusion, the infrared thermography was not useful for the detection of mastitis in farm conditions, but it detected differences produced by milking and breed. The use of biosensors allowed obtaining accurate information on ruminal pH under various conditions. The cumulative normal distribution was an adequate model to predict the pH of the rumen, although the temperature of the rumen showed no sufficient accuracy and it was needed to include other variables (i.e., ration type, ambient temperature conditions).

Aquesta tesi mostra, primerament, els resultats de l'enquesta efectuada als titulars d'explotacions araneses d'ovins, així com la caracterització morfològica de la raça Aranesa mitjançant l'estudi de 31 mesures morfològiques quantitatives, 17 índexs d'interès etnològic i funcional, i les variables qualitatives més importants en etnologia, així com un estudi de la llana. En total s'han enquestat 54 ramaderies, amidat 197 animals adults per a la biometria i mostrejat 53 animals per a l'estudi de la llana. El cens oví aranès l'any 2003 era de 2.569 ovelles i 92 marrans, estimant-se en unes 1.489 ovelles i uns 61 marrans els ovins purs aranesos. Aquestes xifres fan entrar l'Aranesa dins la categoria 4, estatus de perill d'extinció, d'acord amb els criteris de l'EAAP (European Association for Animal Production). Els ramats són de dimensions enormement variables i s'exploten en sistema extensiu en pastures naturals, amb aprofitament estival en peixius d'alta o mitjana muntanya. L'Aranès és un tipus oví d'aptitud càrnia poc marcada, que produeix corders de tipus pasqual pesat, criats "a braguer". El maneig productiu és força dissimilar entre explotacions. Poc menys de la meitat de les explotacions sincronitzen els zels mitjançant la separació dels mascles; en aquestes explotacions, la paridora es concentra sobretot els mesos de març a maig, i d'agost a gener, amb uns màxims a l'octubre i al novembre. Unes tres quartes parts dels ramaders practiquen alguna mena de desparasitació periòdica. La disposició d'electricitat és irregular entre explotacions, però és el recurs aigua el de més valor en les explotacions. Les explotacions són de tipus individual, poquíssimes a títol principal, i la mitjana d'edat dels ramaders és de 50,2 anys. Morfològicament, la raça ovina Aranesa presenta un dimorfisme sexual força marcat; es dóna poca variabilitat morfològica intrasexe i no es detecten subpoblacions biomètricament diferenciables, al menys entre terçons. És una raça subhipermètrica i longilínia; en relació al cap, podem definir els animals com a subconvexos, mesaticèfals, braquicraniots i mesoprosopis, de banya en espiral oberta, i de capa polícroma, les més habituals de la qual són la blanca, la negra, la beret i la capiroia. La llana està formada per metxes quadrades tancades amb un clar predomini de les fibres curtes-fines, de diàmetre mitjà, i que es classificaria com a tipus comercial V, "entrefí corrent" (XI si es tracta del fenotip negre) de la classificació espanyola. En aquesta tesi, a partir dels caracters morfològics i de la llana, es fa un estudi comparatiu entre races ovines pirinenques, que situa l'Aranesa en el que anomenem "entrefí occità pirinenc". Finalment, pel que fa a l'estudi genètic, es pot destacar que el grau de subestructuració entre els diferents peixius estivals és molt reduït i generalment poc significatiu. A nivell de marcadors microsatèl·lit, la raça ovina Aranesa mostra una elevada variabilitat genètica i una diferenciació genètica poc pronunciada amb races geogràficament veïnes, com la Tarasconesa i la Xisqueta. Les races Aranesa i Tarasconesa corresponen a agrupacions poc diferenciades entre elles, tant en el pla genètic com morfològic. / This thesis gives the results of the research done with the farmers of sheep farms in the Vall d'Aran. It indicates the morphological characteristics of the Araneses breed through the study of 31 measurements and 17 indexes of ethnological and functional value, the most important qualitative variables in ethnology as well as a study of the wool. 54 breeding flocks have been investigated, 197 adult animals have been measured biometrically and a sample study of the wool of 53 animals has been carried out. The ovine census in 2003 was of 2,569 ewes and 92 rams, of which 1,489 ewes and 61 rams were considered to be of pure Aranese breed. These figures put the Araneses breed in category 4, a status indicating danger of extinction according to the criteria of the EAAP (European Association for Animal Production). The flocks are of very different sizes. They are reared on extensive natural pastures, taking advantage of high and medium alps in summer. The Aranese is not a breed marked out for meat production. The lambs reach optimum weight around Easter after rearing by suckling. The way of rearing varies greatly from farm to farm. Slightly less than half the farms synchronize the coming on heat of the ewes by separating them from the rams. In theses farms lambing period goes from March to May and from August to January, peaking in October and November. About three quarters of the breeders periodically practise some form of deparasitation. The electricity supply is irregular on the farms but water resources are always readily avalaible. The main activity of the farmers is not sheep farming. The average age of the farmers is 50.2 yr. In morphological terms the Aranese breed exhibits a very pronounced morphological variability between the sexes and no biometrically different subpopulations can be detected at least among in the studied areas. The breed is subhypermetrical and longilineal. Their heads can be defined as subconvex, mesaticephalic, brachicranial and mesoprosopeial, with horns in an open spiral and with a polychrome coat. The white, the black, the "beret" and the "capiroia" are the most common. The wool is made up of closed square tufs wich a clear predominance of short-fine fibres of medium diametre, which are classified as of the commercial type V (XI if it is the black phenotype) according to the Spanish classification. In this Thesis, starting from the morphological characteristics and from the wool, there is a comparative study of the pyrenean sheep breeds. The Aranese breed belongs to the "entrefí occità pirinenc". Finally, as regards the study of theier genes the degreee of substructuration in the differents alps is very limited and of little significance. Using microsatellite markers, the Aranese breed shows high genetic variability and little genetic differentiation in geographically neighbouring breeds such as the Tarasconese and the Xisqueta. The Aranese and the Tarasconese appear in similar groupings both genetically and morphologically. / Aguesta tèsi mòstre, en prumèr lòc, es resultats dera enquèsta hèta as titulars d'espleites araneses d'ovins, atau com era caracterizacion morfologica dera raça Aranesa miejançant er estudi de 31 mesures morfologiques quantitatives, 17 indèxs d'interès etnologic e foncionau, e es variables qualitatives mès importantes en etnologia, atau coma un estudi dera lan. En totau s'an enquestat 54 ramaderies, mesurat 197 animaus adults entara biometria e mostrejat 53 animaus entar estudi dera lan. Eth cens ovin aranés er an 2003 ei de 2.569 oelhes e 92 mardans, estimant-se en ues 1.489 oelhes e uns 61 mardans es ovins purs aranesi. Aguestes chifres hèn a entrar ara Aranesa laguens dera categoria 4, estatus de perilh d'escandiment, cossent damb es critèris der EAAP (European Association for Animal Production). Es ramats son de dimensions enormament variables e s'espleiten en sistèma extensiu en peisheus naturaus, damb aprofitament estivau en peisheus de mieja o nauta o montanha. Er Aranés ei un tipe d'ovin d'aptitud càrnia pòc mercada, produsint anhèths de tipe pasqual pesat, criats "a braguèr". Eth maneg productiu ei fòrça desparièr entre espleites. Pòc mens dera mitat des espleites sincronizen es zèls miejançant era separacion des mascles; en aguestes espleites, era paridora se concentre sustot es mesi de març a mai, e d'agost a gèr, damb uns maxims en octobre e noveme. Ues tres quataus parts des ramadèrs practiquen bèra sòrta de desparasitacion periodica. Era disposicion d'electricitat ei irregulara entre es espleites, mès ei eth recors aigua eth de mès valor enes espleites. Es espleites son de tipe individuau, ben pògues a títol principau, e era mejana d'edat des ramadèrs ei de 50,2 ans. Morfologicament, era raça ovina Aranesa presente un dimorfisme sexuau fòrça marcat; se da pòga variabilitat morfologica intrasèxe e non se detècten sospoblacions biometricament diferenciables, aumens entre terçons. Ei ua raça subipermetrica e longilinha; en relacion ath cap, podem definir as animaus coma subconvèxi, mesaticèfals, braquicraniòts e mesoprosòpis, de còrna en espirau dubèrta, e de capa policròma, en tot èster era mès abituau era blanca e era nera, era beret e era capiroia. Era lan ei formada per mèches quarrades tancades damb un clar predomini des fibres cuertes-fines, de diamètre mejan, e que se classificarie coma tipe comerciau V, "entrefin corrent" (XI se se tracte deth fenotip nere) dera classificacion espanhòla. En aguesta tèsi, a compdar des caractèrs morfologics e dera lan, se hè un estudi comparatiu entre races ovines pirenenques, en tot èster era Aranesa en que nomentam "entrefin occitan pirenenc". Fin finau, per çò que hè ar estudi genetic, subergés qu'eth grad de sosestructuracion entre es diferenti peisheus estivaus ei plan redusit e generaument pòc significatiu. A nivèu de marcadors microsatellit, era raça ovina Aranesa mòstre ua elevada variabilitat genetica e ua diferenciacion genetica pòc prononciada damb races geograficament vesies, com era Tarasconesa e era Xisqueta. Es races Aranesa e Tarasconesa corresponen a agropacions pòc diferenciades entre eres, autant en plan genetic com morfologic.