Orientador: Fernando Ferreira Costa / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-26T13:55:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Vieira_AlexandraPatriciaZilli_M.pdf: 4771481 bytes, checksum: c93f606d7341691886c4410b37598910 (MD5) Previous issue date: 2000 / Resumo: O complexo da globina beta humana compreende uma região de 70 kb e contém numerosos polimorfismos. O conjunto desses polimorfismos está em desequilíbrio de ligação com o gene da globina 'beta POT. S' e são denominados de haplótipos. O estudo desses haplótipos mostrou que a mutação da globina 'beta POT. S' teve origens independentes em diferentes regiões. Essas regiões dão a denominação aos haplótipos, desta forma os haplótipos clássicos são Bantu, Benin, Senegal, Camarões e Indiano. Nesse estudo foram caracterizados, do ponto de vista molecular, 13 pacientes que apresentaram haplótipos atípicos. Este estudo possibilitou a caracterização desses haplótipos e, nos casos de recombinação, permitiu identificar a região do provável ponto de quebra. Os haplótipos foram determinados pela análise dos seguintes sítios para RFLP: XMn I - 5' gene 'gama G', Hind III- 'psi G' e 'psi A', Hinc II - 'psi beta', Hinf I - 5' 'beta' e Ava II - 'beta'. Adicionalmente, foram selecionadas 3 regiões de repetições de dinucleotídeos, ao longo do "cluster" da globina beta - no interior do LCR-HS2 (repetição de TA), entre o LCR e o gene 'epsilon' (repetição CA) e no interior, do segundo intron do gene 'gama G' (repetição TG). Essas regiões foram analisadas por PCR radioativo e observadas em gel de poliacrilamida desnaturante. Regiões microsatélites são comumente usadas como marcadores polimórficos, porém seu papel funcional é fracamente documentado. Além disso, foram estudadas outras seqüências: 3 localizadas em uma região de 8 kb entre LCR-HS2 e o gene 'epsilon'; uma localizada 5' do gene 'beta' e outra localizada 3' do gene 'beta', no sítio hipersensível 3' (HS3'), por SSCP não radioativo. Foram também caracterizadas por sequenciamento a região de repetição localizada entre LCR e o gene 'epsilon' (repetição CA) e também uma região de repetição localizada na posição ¿530 5' do gene 'beta'- (AT)xTy. Em 8 dos 13 alelos analisados, o ponto de quebra da recombinação ocorreu dentro de uma região de 2 kb entre LCR e gene 'epsilon' - 7 alelos revelaram. um haplótipo híbrido Bantu/Benin e 1 revelou o híbrido Bantu/Senegal. Em 3 outros casos nós observamos dois pontos de quebra no mesmo alelo - um localizado dentro de uma região de 2 kb entre LCR e o gene 'epsilon' e o segundo localizado entre os genes 'delta' e 'beta'. ...Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Human beta globin gene complex spans a region of 70 kb and contains numerous sequence variants. Alleles within the cluster of polymorphic sites stretching from 5' of the 'epsilon'-globin gene to 3' of 'psi' 'beta'-globin gene show strong linkage disequilibrium; similar linkage disequilibrium exists for the alleles in the cluster of sites from 5'of the 'beta' globin gene to 17 kb downstream. No linkage disequilibrium exists between these two subclusters. The 9 kb region between the 5' and 3' clusters has therefore been proposed as a recombination "hot-spot". This study intends to investigate if the length of the repeats is haplotype specific and to narrow the 'beta' globin cluster in order to characterize the most approximate breakpoint. We described 13 sickle cell patients with at least one recombinant allele. 'Beta' haplotypes were derived from the following RFLPs in the 'beta¿ globin gene cluster: XMn I - 5' 'gama SOB. G', Hind III - 'gama SOB. G' and 'gama SOB. A', Hinc II -'psi' 'beta', Rinc II - 3' 'psi' 'beta', Rinf I - 5' 'beta' and Ava II 'beta'. RFLPs were analyzed using restriction enzyme analysis of DNA thât was specifically amplified by the PCR. Furthermore, we selected 3 short tandem repeats (STR) throughout the 'beta' globin cluster - within the LCR - HS2 (TA repeat), between LCR and 'epsilon' gene (CA repeat), and within the second intron (lVS2) of the 'gama SOB. G' (TG repeat). These sequences were analyzed by radiolabeled PCR and observed in denaturing polyacrilamide gel. These microsatellites are commonly used as polymorphic markers but their potential functional role is poorly documented. ln addition, we analyzed other sequences - three sequences located within a region of 8 kb between 'beta'LCR-HS2 (second DNase I hypersensitive site within the, beta locus control region) and 'epsilon' gene, one located 5'of the 'beta' globin gene and one located. ... Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Mestrado / Clinica Medica / Mestre em Clinica Medica

Orientador: Sara Teresinha Olalla Saad / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-26T18:18:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Basseres_DanielaSanchez_D.pdf: 14624286 bytes, checksum: 5ceb46c0380ebac864b2cb51e7be1f58 (MD5) Previous issue date: 2000 / Doutorado / Genetica Humana e Medica / Doutor em Genetica e Biologia Molecular

Orientador: Tereza Cristina Samico Cavalcanti / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-26T23:36:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Vido_AlessandraArchilha_M.pdf: 6161323 bytes, checksum: 17546bbce1d90e50ed98ef457a4160fd (MD5) Previous issue date: 2000 / Resumo: A anemia do câncer é classificada como a anemia de doenças crônicas, embora às vezes seja o primeiro sintoma do câncer. Anemia do câncer inclui um componente hemolítico importante na fase terminal mesmo quando células transfundidas são destruídas rapidamente. A presença de um componente crônico e as complicações terminais da doença limita o estudo do componente hemolítico. o modelo multifocal (várias inoculações simultâneas de células tumorais de Walker 256) de crescimento tumoral foi usado aqui para simular a fase de disseminação metastática terminal. O componente hemolítico da anemia iniciou 3 4 dias após as inoculações em 100% dos ratos e após isto progrediu rapidamente: os níveis de Hb diminuíram de 14,9 :!: 0,02 para 8,7 :!: 0,06 g/dL entre os dias 7 e 11 e 5 vezes a taxa fisiológica normal em ratos) na ausência de hemorragia. O desenvolvimento de anemia foi correlacionado (r=O,86) com o desenvolvimento. de outros efeitos sistêmicos como a anorexia. Houve um decréscimo significativo na fragilidade osmótica dos eritrócitos circulantes: a concentração de NaCI que causou 50% lise foi reduzida de 4,52 :!: 0,06 para 4,10 !:: 0,01 g/L (P <0,01) no dia 7, indicando uma redução no volume dos eritrócitos. Porém, com moderado estresse metabólico (4h de incubação a 37°C), os eritrócitos mostraram um maior aumento na fragilidade osmótica que nos controles, sugerindo uma marcada alteração na homeostasia dos eritrócitos. Também foi observado aumento significativo na fragilidade osmótica das hemácias de ratos normais quando incubadas com o líquido ascítico (baixa concentração de glicose e provavelmente alta de moléculas produzidas pelo tumor). Outros resultados significativos encontrados foram o aumento do consumo de glicose e conteúdo de A TP das hemácias dos animais portadores de tumor em relação aos controles. Estes efeitos podem ser devido a alterações primárias na membrana plasmática (transporte elou permeabilidade elou pode ser secundário às mudanças metabólicas). Este modelo multifocal é adequado para o estudo do componente hemolítico da anemia do câncer visto que ele é rápido, altamente reprodutível e causa sofrimento mínimo ao animal / Abstract: Cancer anemia is an anemia of chronic diseases, although it is sometimes the first symptom of cancer. Cancer anemia includes a hemolytic component, important in the terminal stage YJhen even transfused cells are rapidly destroyed. The presence of a chronic component and the terminal complications of the iIIness limit studies of the hemolytic component. A multifocal model of tumor growth was here to simulate the terminal metastatic dissemination stage (several simultaneous inoculations of Walker 256 cells). The hemolytic component of anemia began 3-4 days afier inoculations in 100 % of the rats and progressed rapidly thereafier: Hb levels dropped 14.9 :f: 0.2 to 8.7 :f: 0.6 g/dL from days 7 to 11 e 5 times the physiological rate in rats) , in the absence of bleeding. The development of anemia wa correlated (r=0.86) with the development of other systemic effects such as anorexia. there was a significant decrease in the osmotic fragility to circulating erythrocytes: the NaCI concentration causing 50% Iysis was reduced from - 0.42 :f: 0.06 g/L, (P<0.01), on day 7, indicating a reduction in erythrocyte volume. However, with mild metabolic stress (4 h- incubation at 37°C), the erythrocytes showed a greater increase in osmotic fragility than the controls, suggesting marked alteration of erythrocyte homeostasis. It was also observed a significative increase in osmotic fragility of normal donors red blood cells YJhen incubated with ascitic liquid (Iow glucose concentration, and probably, a high concentration of molecules produced by tumor). These effects may be due to primary plasma membrane alterations (transports andlor permeability) and/or be secondary to metabolic changes. This multifocal model is adequate for studying the hemolytic component of cancer anemia since it is rapid, highly reproducible causes minimal animal suffering. Another observed significative results were the increase of glucose consumption and red blood cells ATP content in tumor bears animais / Mestrado / Bioquimica / Mestre em Biologia Funcional e Molecular

Orientador: Maria de Fatima Sonati / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-07-27T10:21:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Borges_Eliane_M.pdf: 1830129 bytes, checksum: 871902bfac7d0b2ffe5935f6957148f3 (MD5) Previous issue date: 2000 / Resumo: A microcitose e a hipocromia, sem o concomitante aumento da HbA2, podem ser resultantes da presença de talassemia a, de anemia por deficiência de ferro ou, ocasionalmente, da anemia de doenças crônicas. Não raramente, indivíduos com microcitose e hipocromia, sem anemia e sem a elevação da HbA2, são detectados em exames hematológicos de rotina. Com o objetivo de investigar qual a contribuição da talassemia a nestes casos, foram analisados 339 indivíduos adultos (98 negróides e 241 caucasóides), atendidos nos ambulatórios do Hospital das Clínicas da Unicamp, com exceção do ambulatório de Hematologia Clínica, apresentando níveis de hemoglobina (Hb) ~ 12g/dLpara mulheres e 14g/dL para homens, volume corpuscular médio das hemácias (VCM) e hemoglobina corpuscular média (RCM) ::;80ft e 27pg, respectivamente, e percentuais de Hb A2normais ou diminuídos (::;3.4%). Foram triadas, pela técnica da Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) e análise com enzimas de restrição, as mutações que mais comumente causam talassemia a nas populações de descendência africana e mediterrânea (deleções -a3,7, -a4,2, __MED, -(aiO,5 e as formas não delecionais aHpha, aNcoh, aaNcoI e a Tsaudia), estas últimas pela primeira vez investigadas na população brasileira. Cento e sessenta e nove indivíduos (49,9%) apresentaram talassemia a, sendo 100 caucasóides (29,5%) e 69 negróides (20,4%). Entre os caucasóides, 89 (36,9%) eram heterozigotos da deleção -a3,7 (- a3,7/aa), 6 (2,5%) eram homozigotos (-a3.7/-a3,7),4 (1,7%) apresentaram a forma não delecional aHphIa em heterozigose (aHphIalaa) e 1 (0,4%) apresentou a deleção __MED, em heterozigose (--MED/aa).Entre os negróides, 56 (57,1%) apresentaram o genótipo -a3,7/aa, 12 (12,2%) o genótipo -a3,7/-a3,7 e 1 (l,OOIÓ)apresentou a mutação aHphIa, em heterozigose (aHphIa./aa). Estes resultados demonstram que a talassemia a é uma importante causa de microcitose e hipocromia em indivíduos sem anemia na população analisada, contribuindo com cerca de 50% dos casos (48% deles causados pela deleção -a3.7 e cerca de 2% por outras mutações, como a --MED e a aHphIa).Apesar de OCOITer com altas freqüências em populações negras, a presença da deleção - a3.7 nos caucasóides é provavelmente devida ao elevado grau de miscigenação da população brasileira. Os dados aqui obtidos são de relevância clínica, uma vez que a microcitose e a hipocromia são comumente interpretadas como sinais de deficiência de ferro / Abstract: Microcytosis and hypochromia, without the concomitant increase of HbA2, may be caused by a-thalassemia, sideropenia or, occasionally, chronic disease anemia. Not rarely, individuaIs with microcytosis and hipochromia, without anemia and elevated HbA2, are detected on routine hematologic examination. In order to investigate the contribution of a-thalassemia in these cases, 339 individuaIs (98 Blacks and 241 Caucasians), attended as outpatients at UNICAMP University Hospital, with the exception of those ftom the Clinical Hematology ambulatories, showing total Hb ~12g/dl for women and 14g/dl for men, MCV and MCH :s;80fland 27pg, respectively, and normal or decreased Hb A2(:S;3,4%),were analyzed. Using PCR and restriction enzymes, the most common mutations causing a-thalassemia in African and Mediterranean populations (-a3.7, -a4.2, --ME,D -(a )20.5 and nondeletional aHpha , aNcola , aaNcoI and a Tsaudia forms ) were investigated, the latter for the first time among Brazilian people. One hundred sixty nine individuals (49,9%) showed a-thalassemia: 100 Caucasians (29,5%) and 69 Blacks (20.4%). Among Caucasians, 89 (36.9%) were -a3.7 heterozygotes (-a3.7Iaa), 6 (2.5%) homozygotes (- a3.7/-a3.7), 4 (1,7%) were heterozygous for the nondeletional aHplúa (aHplúa/aa) and 1 (0,4%) was heterozygous for --MEDdeletion (-_MEDlaa).Among Blacks, 56 (57.1%) had the - a3.7laa genotype, 12 (12.2%) the -a3.7/-a3.7genotype and 1 (1,0%) was heterozygous for aHplúa (aHplúa/aa). These results demonstrate that, in the analyzed population, a-thalassemia is an important cause of microcytosis and hypochromia in individuaIs without anemia, contributing with about 50% ofthe cases (48% caused by the -a3.7deletion and around 2% by other mutations, such as __MEDand a,HphIa,).Although the _a,3.?deletion is known to occur at high frequencies in African descendants,its presenceamong Caucasians is probably due to the elevated degree of miscegenation of the Brazilian population. The data obtained here are of clinical relevance, once microcytosis and hypochromia are very often interpreted asindicators of iron deficiency / Mestrado / Patologia Clinica / Mestre em Ciências Médicas

Orientador : Helena Zerlotti Wolf Grotto / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-07-27T22:59:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lima_GiseliaAparecidaFreireMaiade_M.pdf: 17345722 bytes, checksum: 065ea40c010cb23a3b118ef433576273 (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: A fonna solúvel do receptor da transferrina (sTtR) tem sido indicada como um parâmetro útil na avaliação do estado do ferro e da atividade eritropoiética. Reticulócitos imaturos apresentam altas concentrações de receptor da transferrina na sua membrana. Nós testamos a correlação entre sTtR e parâmetros reticulocitários em pacientes com anemia ferropriva (AF) e 13talassemia heterozigota (13 tal hetero). Parâmetros laboratoriais relacionados ao estado do ferro e reticulócitos foram estudados a fim de estabelecer a utilidade clínica dos mesmos na distinção entre os dois tipos de anemia. As medidas dos reticulócitos foram obtidas utilizando contador hematológico semi-automatizado e as concentrações de sTtR foram detenninadas por técnica imunoenzimática. Cinquenta pacientes com AF e quarenta e um com 13tal hetero foram estudados. A contagem de reticulócitos foi significativamente mais elevada na 13tal hetero quando comparada à AF e ao grupo controle. Por outro lado, os valores de sTtR apresentaram-se significativamente maiores na AF do que na 13tal hetero. O melhor parâmetro para distinguir os dois tipos de anemia foi o sTtRI, obtido pela relação entre os níveis de sTtR e ferritina sérica. O compartimento de transporte foi melhor avaliado pela transferrina do que pela capacidade de ligação do ferro à transferrina (TIBC). A associação das medidas de ferro sérico e transferrina (índice de transferrina) melhorou a acurácia do teste de transferrina. A correlação entre reticulócitos altamente imaturos e nível de sTtR foi observado somente no grupo AF, sugerindo que a deprivação de ferro celular é o principal fator responsável pela estimulação da síntese de sTtR em células vennelhas imaturas. Valores elevados de.sTtR em pacientes 13 tal hetero refletem a presença de eritropoiese inefetiva nesta hemoglobinopatia. Nós concluímos que as determinações de sTfR, ferritina e transferrina são parâmetros úteis e precisos na discriminação entre pacientes com AF e 'beta' tal hetero / Abstract: The soluble fonn of transferrin receptor (sTfR) has been pointed as an useful parameter to assess the iron status and erythropoiesis activity. Immature reticulocytes present high sTfR concentration. We tested the correlation between sTfR and reticulocyte parameters in iron deficiency anemia (IDA) and P thalassemia heterozygous (P thal hetero) patients. Laboratorial parameters related to iron status and reticulocytes were studied in order to establish the clinical use of them to distinguish both anemias. Reticulocyte measurements were obtained using a semi-automated analyzer and serum concentration of sTfR was determined by an immonoenzymatic technique. Fifty IDA and 41 Pthal hetero patients were studied. Reticulocyte count was significantly higher in p thal hetero group than in IDA and control groups. On the other hand, sTfR analysis showed increased values in IDA patients, when compared to pthal hetero group. The better parameter to distinguish both anemias was sTfR index, obtained by the ratio sTtR/ferritin leveI. Transport compartment was better evaluated by serum transferrin measurement than transferrin iron binding capacity (TIBC) detenninations. The association of serum iron with transferrin measurements (transferrin index) improved the accuracy of the transferrin test. The correlation between high immature reticulocytes and sTfR leveI was observed only in IDA group, suggesting that cellular iron deprivation is the main responsible factor for the sTfR synthesis stimulation in immature red blood cells. High sTfR values in p thal hetero patients reflect a degree of ineffective erythropoiesis in this hemoglobinopathy. We concluded that sTfR, ferritin and transferrin measurements are useful and precise parameters to discriminate IDA from 'beta' thal hetero patients / Mestrado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Ciências Médicas

Orientador: Sara Teresinha Olalla Saad / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-07-28T15:25:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Leite_RobertaCampaniledeAlmeida_M.pdf: 2956595 bytes, checksum: 95ba2c0e0e8e28a5d1c7b0dc0252ede6 (MD5) Previous issue date: 1999 / Resumo: O presente estudo teve por objetivo a análise molecular de 28 pacientes não relacionados, atendidos no Hemocentro-UNICAMP, portadores de Esferocitose Hereditária (EsH) diagnosticada a partir de dados clínicos, esfregaço de sangue periférico e curva de fragilidade osmótica. Na maioria destes casos, a quantificação das proteínas de membrana das hemácias através da densitometria de gel de políacrilamida-SDS corado pelo azul de Coomassie, detectou deficiência de espectrina e/ou anquirina. O rastreamento de mutações foi feito através de SSCP e confirmadas por sequenciamento. Duas novas mutações foram encontradas em nossa população, ambas tratando-se de substituição de um nucleotídeo com alteração do aminoácido. A primeira no exon 9 (His -> Arg, CAC->CGC) e a segunda no exon 28 (lle->Thr ATC->ACC), totalizando uma frequência de 7.2% de mutações no gene da anquirina na população com Esferocitose Hereditária estudada. Foram também encontrados dois novos polimorfismos: no exon 6 (codon 197, CCG ->CCA) e no exon 29 (codon 1162, AGT -> AGC), além de outros polimorfismos já descritos, no exon 4 (codon 105, AAT->AAC), no exon 16 (codon 594, TCC -> TC A), e no exon 18 (codon 691, GGT -> GGC). Foi ainda realizada a análise da expressão de RNAm do gene da anquirina através de SSCP. Um paciente apresentou defeito na transcrição de um dos alelos, conforme evidenciado pela análise da repetição de nucleotídeos AC na região 3' não transcrita. Assim nossos dados indicam que, diferente da literatura, mutações no gene da anquirina podem não ser frequente em todas as populações / Abstract: In this study, we carried out the molecular analysis of 28 unrelated patients seen at the Hemocentro-UNICAMP with Hereditary Spherocytosis diagnosed by clinical data, peripheral blood smear and osmotic fragility test. Spectrin and/or ankyrin deficiency was detected in these patients, by densitometry of SDS-PAGE stained by Coomassie blue. By SSCP and DNA sequencing, two novel mutations were identified: In exon 9 (His ->Arg, CAC->CGC) and in exon 28 (lle-*Thr ATC->ACC) totalizing a frequency of 7,2% of ankyrin mutations in the Hereditary Spherocytosis population studied. Two novel polymorphisms were also observed: in exon 6 (codon 197,CCG ->CCA) and in exon 29 (codon 1162, AGT -" AGC), besides other polymorphisms already described in exon 4 (codon 105, AAT -> AAC), exon 16 (codon 594, TCC -> TCA), and exon 18 (codon 691, GGT -> GGC). Expression of ankyrin mRNA by SSCP-PCR of the AC repeat at the 3'ut region showed, in one patient, a defect in the transcription of one allele. Then, our data indicated that ankyrin defects might be not frequent in all populations / Mestrado / Mestre em Ciências Médicas

Orientadores: Helena Zerlotti Wolf Grotto, Carmen Silvia Passos Lima / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-08T13:20:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Jacober_MicheleLealVieira_M.pdf: 5411345 bytes, checksum: 3d65908f63a20305387ec02808acdd0e (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: Os pacientes com câncer podem apresentar diversas anormalidades hematológicas, sendo a anemia a alteração mais comum. A etiologia da anemia é multifatorial, envolvendo mecanismos que podem estar relacionados ou não à doença (perda de sangue, hemólise, infiltração medular), ao tipo e estágio do tumor e também à terapêutica utilizada (radioterapia e quimioterapia). A redução nas taxas de hemoglobina pode estar relacionada a alterações na produção e na resposta dos precursores eritróides à Eritropoetina, à liberação de citocinas nas diversas fases da doença e também ao déficit nutricional muitas vezes encontrado nesses indivíduos. O objetivo desse estudo foi avaliar aspectos relacionados à atividade inflamatória sobre o metabolismo do ferro e a eritropoiese em pacientes com tumores sólidos. Foram coletadas amostras de sangue de 402 pacientes adultos com diversos tipos de câncer. Os pacientes com anemia foram sub-classificados como tendo anemia ferropriva (AF) (hipoferremia e hipoferritinemia), Anemia de Doença Crônica (ADC) (hipoferremia e ferritina sérica normal ou aumentada) e Anemia Relacionada ao Câncer (ARC) (sem anormalidades no metabolismo do ferro). Para a avaliação da eritropoiese foram realizados hemograma completo e dosagem de eritropoetina; para a avaliação do metabolismo do ferro: determinações do ferro sérico, capacidade de ligação do ferro à transferrina, ferritina e receptores solúveis da transferrina (sTfR) e Índice sTfR/ log ferritina; para a avaliação da resposta inflamatória: dosagens de Proteína C Reativa (PCR), Interleucinas 1? e 6, Fator de Necrose Tumoral alfa, neopterina e pro-hepcidina séricas e determinação da Velocidade de Hemossedimentação das hemáceas(VHS). Dentre os pacientes com câncer 34,8 % apresentaram anemia. O tipo de anemia mais freqüente foi a ARC (37%) seguido pela ADC (20,7%) e finalmente pela AF (17%). Os níveis de PCR, IL-6, VHS e IL-1? foram significativamente superiores em pacientes com ADC quando comparados com AF, ARC ou em pacientes sem anemia. Os níveis de Pró-Hepcidina, TNF-? e neopterina não foram diferentes entre os grupos de pacientes com câncer, mas foram superiores quando comparados a um grupo de indivíduos normais. O efeito negativo de fatores inflamatórios sobre a eritropoiese foi observado no grupo de pacientes com ADC, onde houve correlação inversa entre hemoglobina e ferritina sérica, PCR e IL-6. Não houve correlação entre os níveis de pro-hepcidina com o grau de anemia ou com parâmetros relacionados ao metabolismo de ferro. De acordo com nossos resultados, embora não tenha sido possível demonstrar uma relação direta entre inflamação e alterações no metabolismo do ferro, a atividade inflamatória presente em todos os grupos de pacientes, aparentemente está especialmente relacionada à patogênese da ADC. A hepcidina é reconhecida como importante reguladora e como principal mediadora das alterações do metabolismo do ferro na ADC. No presente trabalho, usando um ensaio imunoenzimático comercial, não foi possível demonstrar o significado fisiológico da pro-hepcidina na anemia em pacientes com câncer / Abstract: Patients with cancer present several hematological alterations, and anemia is the most common of them. Anemia ethiology is multifactorial and can be related or not to the disease (bleeding, hemolysis, bone marrow infiltration), to the type and stage of the tumor and also to the therapy. Hemoglobin reduction can be consequent to alteration in production and response of erythroid precursor to erythopoietin, releasing of cytokines and nutritional deficiency. The objective of this study was to evaluate some aspects related to inflammatory activity on iron metabolism and erythropoiesis in patients with solid tumors. Blood samples from 402 patients were analyzed and those patients with anemia were subdivided into: iron deficient anemia (IDA) (hypoferremia and hypoferretinemia), chronic disease anemia (CDA) (hypoferremia and serum ferritin normal or elevated) and anemia related to cancer (ARC) (no iron abnormalities). Erythropoiesis was assessed by complete blood cell count and erythropoietin determinations; iron metabolism by serum iron, total iron binding capacity, serum ferritin, soluble transferrin receptors (sTfR) and sTfR/log ferritin indices; inflammatory response by C-Reactive protein (CRP), interleukins 1β e 6, tumor necrosis factor α (TNF- α), neopterin, pro-hepcidin and erythrocyte sedimentation rate (ESR). Anemia was observed in 34.8% of cancer patients. The majority of patients presented ARC (37%), followed by CDA (20.7%) and IDA (17%). CRP, IL-6, ESR and IL-1β levels were significantly higher in patients with CDA than in IDA, ARC and cancer without anemia. Pro-hepcidin, TNF-α and neopterin values were not different among anemic patients groups, although higher levels of neopterin had been observed in patients with cancer when compared to normal individuals. The negative effect of inflammatory factors on erythropoiesis represented by inverse correlations between hemoglobin and serum ferritin, CRP and IL-6 were observed in ADC group. There was correlation neither between pro-hepcidin levels and anemia degree nor between pro-hepcidin and iron metabolism parameters. According to our results, although it was not possible to demonstrate a direct correlation between inflammation and iron metabolism alterations, the inflammatory activity apparently is related to ADC pathogenesis. Hepcidin is an important regulator of iron metabolism and has been recognized as the main mediator of iron metabolism alterations in CDA. In our study, by using ELISA test, it was not possible to show the participation of pro-hepcidin in anemia in cancer patients / Mestrado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Ciências Médicas

Orientador: Fernando Ferreira Costa / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-12T02:54:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Carvalho_RodrigoFranco_M.pdf: 3057488 bytes, checksum: cb959542187ac7e8cd6b5b095813ad77 (MD5) Previous issue date: 2000 / Mestrado

Orientador : Sara T. O. Saad / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-01T03:29:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Duarte_AdrianadaSilvaSantos_M.pdf: 16922639 bytes, checksum: a4862322906bda78788309e185e5ef4f (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: A anemia falcifonne é uma doença hereditária com alta incidência na população, causada por um defeito estrutural na cadeia da f3-globinaque origina a HbS. Essa hemoglobina anômala, sob baixas tensões de oxigênio, fonna polímeros intracelulares, provocando a defonnação dos eritrócitos que por sua vez bloqueiam a microcirculação, ocasionando infarto de vários órgãos. Estudos clínicos demonstraram que a HbF possui a capacidade de inibir a polimerização da HbS e reduzir a falcização, melhorando assim o quadro clínico. A indução farmacológica por vários compostos químicos, dentre os quais a hidroxiuréia (HU), 5-azacitidina, butirato e os hormônios esteróides, aumentam a síntese de HbF em pacientes com anemia falciforme. A regulação da expressão da HbF está relacionada à presença de elementos ativos ligados em "eis" ao complexo da f3-globina, bem como de proteínas regulatórias do processo de transcrição gênica denominadas fatores de transcrição, como as proteínas GATA-I, GATA-2 e NF-E2, expressas principalmente na linhagem eritróide. Esse projeto teve por objetivo estudar o efeito da HU e do honnônio progesterona na modulação da expressão gênica pelos fatores de transcrição GATA-I, GATA-2 e NF-E2 e do gene y globina, em células da linhagem eritróide obtidas através da cultura de duas fases a partir de sangue periférico de doadores de sangue atendidos no Hemocentro da Unicamp. A expressão dos genes destes fatores de transcrição foi determinada por RT-PCR semiquantitativo e quantificação por densitometria. Os nossos resultados mostraram que nas células tratadas com HU ou progesterona houve aumento significativo da expressão do fator de transcrição GATA-I e do gene y globina a partir de 96hs da Fase TI do sistema de cultura líquida em duas fases até o seu término com 2I6hs, quando comparada com as células sem tratamento (P < 0,05, teste de Wilcoxon). A expressão do fator de transcrição NF-E2 não demonstrou softer influência pela administração de HU e progesterona durante todo o processo de diferenciação eritróide e ambos os fármacos não exerceram qualquer influência de caráter significativo sobre a expressão do fator de transcrição GATA-2 (p> 0,05, teste de Wilcoxon) / Abstract: Sickle cell anemia is a very common hereditary disease caused by a structural defect in the beta-globin chain, giving rise to HbS. This anomalous hemoglobin, under low oxygen tensions, forms intracellular polymers, causing deformation of the erythrocytes which, in tum, block the micro-circulation and cause infarction in various organs. Pharmacological induction using various chemical compounds, the best known being hydroxyurea (HU), 5-azacytidine, butyrate and steroid hormones, increase the synthesis of HbF in sickle cell patients. The regulation of the expression of HbF is related to the presence of active elements linked "cis" to the beta-globin as well as to the presence of regulatory proteins of the genomic transcription process (known as transcription factors), such as the GATA-I, GATA-2 and NF-E2 proteins, expressed principally in the erythroid lineage. This project aimed to study the effect of HU and the hormone progesterone on the modulation ofthe genetic expression ofthe transcription factors GATA-I, GATA-2 , NF-E2 and the gamma globin gene in erythroid lineage cells obtained iTomtwo-phase culture of peripheral blood donors at the Hemocenter, UNICAMP. The expression of the transcription factors was determined by semi-quantitative RT-PCR and quantified by densitometry. Our results demonstrate that in the cells treated with HU and progesterone there was a significant increase, when compared with the untreated cells (P<O.O5,Wilcoxon test), in the expression ofthe GATA-I transcription factor and ofthe gamma globin gene after 96h ofphase TI culture until termination at 2I6hs. The expression of the NF-E2 transcription factor was not affected by HU or progesterone administration during the entire process of erythroid differentiation and neither of the chemicals had any significant influence upon the expression of the GATA-2 transcription factor (P>O.O5,Wilcoxon test) / Mestrado / Ciencias Basicas / Mestre em Clinica Medica

Orientador : Helena Zerlotti Wolf Grotto / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-01T18:25:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Salome_MarinaAparecida_M.pdf: 4312758 bytes, checksum: 5d8108405d675cee92e679899ea4e5d8 (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: Pacientes infectados pelo HIV apresentam diversas alterações hematológicas, relacionadas principalmente às citopenias. Dentre elas, a mais freqüente é a anemia caracterizada, na maior parte dos casos, como anemia de doença crônica (ADC), cuja etiologia é multifatorial. O objetivo deste trabalho foi estudar diversos aspectos relacionados à hematopoiese em pacientes com aids, e através dessa análise inicial, selecionamos um grupo com ADC para avaliar a associação entre os aspectos hematológicos, alterações do metabolismo do ferro e a associação com níveis de IFN-g. Parâmetros relacionados com o metabolismo de Fe, tais como Fe sérico, ferritina sérica (FS), receptores solúveis de transferrina (sTfR) e parâmetros relacionados com a hematopoiese, tais como eritropoietina (EPO), hemoglobina (Hb), reticulócitos (RTC), plaquetas (PLT) e línfócitos foram correlacionados com IFN-g e os resultados foram comparados com um grupo de 42 pacientes HIV positivo não anêmicos. Foram realizados os testes para investigação do diagnóstico sorológico, avaliação do perfil hepático, perfil hematológico, estudo do metabolismo do ferro, determinação de IFN-g e dosagem de EPO com a finalidade de determinar a gravidade da doença e a resposta da medula óssea. Os nossos resultados mostraram a freqüência das alterações hematológicas, principalmente as citopenias, nos pacientes HIV positivo estudados. A maioria dos pacientes com anemia apresentaram morfologia normocítica-normocrômica e característica laboratorial de ADC. Além da série vermelha, observamos outras anormalidades hematológicas em relação às contagens de plaquetas, leucócitos, linfócitos, neutrófilos e RTC nos 111 pacientes estudados. Observamos, também, concentrações de FS elevados em pacientes com ADC e dosagens de sTfR normal ou levemente elevados em ambos os grupos. Não houve correlação entre IFN-g e FS e entre determinações de IFN-g e sTfR. Baixos valores de CD4/CD8 foram obtidos nos pacientes com ADC e uma correlação inversa foi observada entre IFN-g e CD4/CD8 nos grupos com e sem anemia. As contagens de RTC e as concentrações de EPO foram similares em ambos os grupos e as porcentagens de RTC imaturos estavam elevadas em pacientes anêmicos, indicando uma aparente tentativa da resposta medular para compensar o aumento da demanda. De acordo com os nossos dados não foi possível confirmar a associação entre o IFN-g e os distúrbios no metabolismo do Fe na ADC, mas nossos resultados reforçam o importante papel do IFN-g na gravidade da doença e a proeminente deterioração do sistema imunológico nos pacientes HIV positivo com ADC. Pudemos, ainda, constatar a dificuldade de se estabelecer o diagnóstico laboratorial da causa da anemia nesses pacientes / Abstract: Not informed / Mestrado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Ciências Médicas