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Functions of allatostatin A (AstA) and myoinhibitory peptides (MIPs) in the regulation of food intake and sleep in Drosophila / Funktion der Allatostatin A (AstA) und myoinhibitorische Peptide (MIP) in Bezug zu Nahrungsaufnahme und Schlaf bei DrosophilaChen, Jiangtian January 2018 (has links) (PDF)
Neuropeptides and peptide hormones carrying neural or physiological information are intercellular signalling substances. They control most if not all biological processes in vertebrates and invertebrates by acting on specific receptors on the target cell. In mammals, many different neuropeptides and peptide hormones are involved in the regulation of feeding and sleep. In \textit{Drosophila}, allatostatin A (AstA) and myoinhibitory peptides (MIPs) are brain-gut peptides. The AstA receptors are homologues of the mammalian galanin receptors and the amino acid sequences of MIPs are similar to a part of galanin, which has an orexigenic effect and is implicated in the control of sleep behaviour in mammals. I am interested in dissecting pleiotropic functions of AstA and MIPs in the regulation of food intake and sleep in \textit{Drosophila}. \par
In the first part of the dissertation the roles of brain-gut peptide allatostatin A are analysed. Due to the genetic and molecular tools available, the fruit fly \textit{Drosophila melanogaster} is chosen to investigate functions of AstA. The aims in this part are to identify pleiotropic functions of AstA and assign specific effects to the activity of certain subsets of AstA expressing cells in \textit{Drosophila} adults. A new and restricted \textit{AstA\textsuperscript{34}-Gal4} line was generated. The confocal imaging result showed that AstA neurons are located in the posterior lateral protocerebrum (PLP), the gnathal ganglia (GNG), the medullae, and thoracic-abdominal ganglion (TAG). AstA producing DLAa neurons in the TAG innervate hindgut and the poterior part of midgut. In addition, AstA are detected in the enteroendocrine cells (EECs).\par
Thermogenetic activation and neurogenetic silencing tools with the aid of the \textit{UAS/Gal4} system were employed to manipulate the activity of all or individual subsets of AstA cells and investigate the effects on food intake, locomotor activity and sleep. Our experimental results showed that thermogenetic activation of two pairs of PLP neurons and/or AstA expressing EECs reduced food intake, which can be traced to AstA signalling by using \textit{AstA} mutants. In the locomotor activity, thermogenetic activation of two pairs of PLP neurons and/or AstA expressing EECs resulted in strongly inhibited locomotor activity and promoted sleep without sexual difference, which was most apparent during the morning and evening activity peaks. The experimental and control flies were not impaired in climbing ability. In contrast, conditional silencing of the PLP neurons and/or AstA expressing EECs reduced sleep specifically in the siesta. The arousal experiment was employed to test for the sleep intensity. Thermogenetically activated flies walked significantly slower and a shorter distance than controls for all arousal stimulus intensities. Furthermore, PDF receptor was detected in the PLP neurons and the PLP neurons reacted with an intracellular increase of cAMP upon PDF, only when PDF receptor was present. Constitutive activation of AstA cells by tethered PDF increased sleep and thermogenetic activation of the PDF producing sLNvs promoted sleep specifically in the morning and evening. \par
The study shows that the PLP neurons and/or EECs vis AstA signalling subserve an anorexigenic and sleep-regulating function in \textit{Drosophila}. The PLP neurons arborise in the posterior superior protocerebrum, where the sleep relevant dopaminergic neurons are located, and EECs extend themselves to reach the gut lumen. Thus, the PLP neurons are well positioned to regulate sleep and EECs potentially modulate feeding and possibly locomotor activity and sleep during sending the nutritional information from the gut to the brain. The results of imaging, activation of the PDF signalling pathway by tethered PDF and thermoactivation of PDF expressing sLNvs suggest that the PLP neurons are modulated by PDF from sLNv clock neurons and AstA in PLP neurons is the downstream target of the central clock to modulate locomotor activity and sleep. AstA receptors are homologues of galanin receptors and both of them are involved in the regulation of feeding and sleep, which appears to be conserved in evolutionary aspect.\par
In the second part of the dissertation, I analysed the role of myoinhibitory peptides. MIPs are brain-gut peptides in insects and polychaeta. Also in \textit{Drosophila}, MIPs are expressed in the CNS and EECs in the gut. Previous studies have demonstrated the functions of MIPs in the regulation of food intake, gut motility and ecdysis in moths and crickets. Yet, the functions of MIPs in the fruit fly are little known. To dissect effects of MIPs regarding feeding, locomotor activity and sleep in \textit{Drosophila melanogater}, I manipulated the activity of MIP\textsuperscript{WÜ} cells by using newly generated \textit{Mip\textsuperscript{WÜ}-Gal4} lines. Thermogenetical activation or genetical silencing of MIP\textsuperscript{WÜ} celles did not affect feeding behaviour and resulted in changes in the sleep status. \par
My results are in contradiction to a recent research of Min Soohong and colleagues who demonstrated a role of MIPs in the regulation of food intake and body weight in \textit{Drosophila}. They showed that constitutive silencing of MIP\textsuperscript{KR} cells increased food intake and body weight, whereas thermogenetic activation of MIP\textsuperscript{KR} cells decreased food intake and body weight by using \textit{Mip\textsuperscript{KR}-Gal4} driver. Then I repeated the experiments with the \textit{Mip\textsuperscript{KR}-Gal4} driver, but could not reproduce the results. Interestingly, I just observed the opposite phenotype. When MIP\textsuperscript{KR} cells were silenced by expressing UAS-tetanus toxin (\textit{UAS-TNT}), the \textit{Mip\textsuperscript{KR}$>$TNT} flies showed reduced food intake. The thermogenetic activation of MIP\textsuperscript{KR} cells did not affect food intake. Furthermore, I observed that the thermogenetic activation of MIP\textsuperscript{KR} cells strongly reduced the sleep duration.\par
In the third part of the dissertation, I adapted and improved a method for metabolic labelling for \textit{Drosophila} peptides to quantify the relative amount of peptides and the released peptides by mass spectrometry under different physiological and behavioural conditions. qRT-PCR is a practical technique to measure the transcription and the corresponding mRNA level of a given peptide. However, this is not the only way to measure the translation and production of peptides. Although the amount of peptides can be quantified by mass spectrometry, it is not possible to distinguish between peptides stored in vesicles and released peptides in CNS extracts. I construct an approach to assess the released peptides, which can be calculated by comparing the relative amount of peptides between two timepoints in combination with the mRNA levels which can be used as semiquantitative proxy reflecting the production of peptides during this period. \par
After optimizing the protocol for metabolic labelling, I carried out a quantitative analysis of peptides before and after eclosion as a test. I was able to show that the EH- and SIFa-related peptides were strongly reduced after eclosion. This is in line with the known function and release of EH during eclosion. Since this test was positive, I next used the metabolic labelling in \textit{Drosophila} adult, which were either fed \textit{ad libitum} or starved for 24 hrs, and analysed the effects on the amount of AstA and MIPs. In the mRNA level, my results showed that in the brain \textit{AstA} mRNA level in the 24 hrs starved flies was increased compared to in the \textit{ad libitum} fed flies, whereas in the gut the \textit{AstA} mRNA level was decreased. Starvation induced the reduction of \textit{Mip} mRNA level in the brain and gut. Unfortunately, due to technical problems I was unable to analyse the metabolic labelled peptides during the course of this thesis.\par / Neuropeptide und Peptidhormone sind interzelluläre Botenstoffe, die neuronale und physiologische Informationen tragen. Sie kontrollieren die meisten - wenn nicht alle - biologische Prozesse in Wirbeltieren und Wirbellosen durch ihre Wirkung auf spezifische Rezeptoren an den Zielzellen. So sind bei Säugetieren z.B. viele unterschiedliche Neuropeptide an der Regulierung des Freßverhaltens und des Schlafs beteiligt. In \textit{Drosophila} sind Allatostatin A (AstA) und myoinhibitorische Peptide (MIP) typische Gehirn-Darm- Peptide. Die AstA-Rezeptoren sind Homologe des Galanin-Rezeptors der Wirbeltiere, und die Aminosäurensequenz von MIP sind ähnlich zu einer Teilsequenz von Galanin, welches einen orexigenischen Effekt hat und mit der Kontrolle des Schlafverhaltens in
Säugetieren verbunden ist. Ich bin interessiert an der Identifierung möglicher pleiotroper Funktionen von AstA und MIP in der Regulation von Nahrungsaufnahme und Schlaf in \textit{Drosophila}. \par
Im ersten Teil der Dissertation wird die Rolle der Hirn-Darm- Peptide der AstA-Familie analysiert. Aufgrund der verfügbaren genetischen und molekularen
Werkzeuge wurde die Taufliege \textit{Drosophila melanogaster} als Modell ausgewählt, um die Funktionen von AstA zu erforschen. Der Fokus lag dabei darauf, die pleiotropen Funktionen von AstA zu identifizieren, und herauszufinden, ob den verschiedenen AstA-exprimierenden Zelltypen jeweils unterschiedliche Funktionen zukommen. Eine neue, eingeschränkte AstA-Gal4-Linie wurde generiert. AstA-exprimierende Neuronen lassen sich im posterio-lateralen Protocerebrum (PLP), dem Gnathalganglion (GNG), der
Medulla und dem thorakal-abdominalen Ganglion(TAG) finden. DLAa-Neuronen im TAG innervieren den Enddarm und den vorderen Teil des Mitteldarms. Ausserdem wird AstA auch in enteroendokrinen Zellen (EEC) im Mitteldarm exprimiert.\par
Thermogenetische Aktivierung und neurogenetische Stillegung wurden zusammen mithilfe des UAS/Gal4-Systems eingesetzt, um die Aktivität vieler oder einzelner Untergruppen von AstA-Zellen zu manipulieren und die Effekte auf Nahrungsaufnahme, Laufaktivität und Schlaf zu untersuchen. Unsere Ergebnisse zeigen, dass die thermogenetische Aktivierung der zwei Paare von PLP-Neuronen und/oder AstA-exprimierenden EEC Schlaf und Nahrungsaufnahme reduziert, was auf die signalisierende Funktion von AstA zurückzuführen ist. In der Laufaktivität führte die thermogenetische Aktivierung der zwei Paare von PLP-Neuronen und/oder AstA-exprimierende EEC zu
starker Hemmung, und förderte Schlaf ohne geschlechtsspezifischen Unterschied, was während der Aktivitätsgipfel am Morgen und Abend am besten zu beobachten war. Die Experimental- sowie die Kontrollfliegen waren im generellen Klettervermögen nicht beeinträchtigt. In Kontrast dazu reduzierte eine konditionale Stillegung von PLP-Neuronen und allen \textit{AstA-Gal4} exprimierenden Neuronen besonders den Siesta-Schlaf. Fliegen mit thermogenetisch aktivierten AstA-Zellen liefen wesentlich langsamer und weniger als die Kontrollgruppe bei allen Erregungsintensitäten. Außerdem wurde der PDF-Rezeptor in den PLP-Neuronen ermittelt. Die PLP-Neuronen reagierten auf PDF-Gabe mit einem intrazellulären Anstieg von cAMP nur dann, wenn der PDF-Rezeptor anwesend war. Konstitutive Aktivierung von AstA-Zellen durch "tethered" PDF steigerte den Schlaf, und thermogenetische Aktivierung von PDF-produzierenden sLNvs förderte Schlaf besonders am Morgen und Abend.\par
Die Studie zeigt, dass die PLP-Neuronen und/oder EECs via AstA eine anorexigenische und schlafregulierende Funktion in \text{Drosophila} ausübt. PLP-Neuronen verzweigen im posterio-superioren Protocerebrum, wo die für Schlaf relevanten dopaminergen Neurone lokalisiert sind. Die EECs erstrecken sich bis zum Darmlumen. Daher sind die PLP-Neuronen gut positioniert, um Schlaf zu regulieren, und EECs modulieren potenziell die Verdauung und möglicherweise auch Laufaktivität und Schlaf durch Vermittlung der Nahrungsinformationen vom Darm zum Gehirn. Die Ergebnisse von Imaging, Aktivierung des PDF-wegs durch "tethered" PDF und Thermoaktivierung von PDF-exprimierenden s-LNvs weisen darauf hin, dass die PLP-Neuronen durch PDF aus sLNv-Uhr-Neuronen moduliert werden. AstA in den PLP-Neuronen scheint ein indirektes Ausgangssignal der inneren Uhr das die Laufaktivität und Schlaf modelliert. Die AstA-Rezeptoren sind Homologe der Galanin-Rezeptoren; beide sind an der Regulierung von Ernährung und Schlaf beteiligt, was auf eine evolutionär bewahrte Funktion hindeutet. \par
Im zweiten Teil der Dissertation habe ich die Rolle der MIP analysiert. MIP sind Hirn-Darm- Peptide der Insekten und Polychaeta. Auch in \textit{Drosophila} wird MIP durch Neurone im ZNS und durch EEC im Darm exprimiert. Bisherige Studien haben Funktionen von MIP bei der Nahrungsaufnahme, Regulation der Darmbewegung und Häutung in Motten und Grillen demonstriert. Für \textit{Drosophila} waren Funktionen von MIP nicht bekannt. Um mögliche Effekte von MIP bezüglich des Freßverhaltens, Laufaktivität und und Schlaf in \textit{Drosophila melanogaster} zu finden, habe ich die Aktivität von MIP\textsuperscript{WÜ}-Zellen mit Hilfe der neu in unserem Labor hergestellten \textit{Mip\textsuperscript{WÜ} -Gal4}-Linien manipuliert. Dabei konnte ich keinen Effekt auf das Freßverhalten finden, nachdem ich die MIP\textsuperscript{WÜ}–Zellen thermogenetisch aktiviert oder genetisch stillgelegt habe. Allerdings führte dies zu Änderungen des Schlafstatuses. \par
Meine Ergebnisse stehen im Widerspruch zu einer neueren Veröffentlichung von Min Soohong und Kollegen, die eine Rolle der MIP in der Regulation von Nahrungsaufnahme und Körpergewicht von \textit{Drosophila} nachweisen konnten. Sie zeigten dass konstitutive Stillegung der MIP\textsuperscript{KR}-Zellen Nahrungsaufnahme und Körpergewicht steigerte, während thermogenetische Aktivierung der MIP\textsuperscript{KR}-Zellen Nahrungsaufnahme und Körpergewicht durch \textit{MIP\textsuperscript{KR}-Gal4}-Treiber verringerte. Ich habe daraufhin die Versuche mit der von Soohong eingesetzen \textit{Mip\textsuperscript{KR}-Gal4}-Treiber wiederholt, konnte aber damit die Ergebnisse nicht bestätigen. Interessanterweise habe ich genau das Gegenteil beobachtet. Wenn ich MIP\textsuperscript{KR}-Zellen durch Expresseion von UAS-Tetanustoxin (UAS-TNT) ausgeschaltet habe, zeigten die \textit{Mip\textsuperscript{KR}$>$TNT}-Fliegen eine reduzierte Nahrungsaufnahme. Eine thermogenetische Aktivierung der MIP\textsuperscript{KR}-Zellen hat die Nahrungsaufnahme nicht
beeinflusst. Weiterhin habe ich beobachtet, dass die thermogenetische Aktivierung der MIP\textsuperscript{KR}-Zellen die Schlafdauer stark reduziert.\par
Im dritten Teil der Dissertation haben ich eine Methode zur metabolischen Markierung für \textit{Drosophila}-Peptide adaptiert und verbessert, um die relative Menge von Peptiden und die Peptidausschüttung mittels Massenspektrometrie unter verschiedenen physiologischen Bedingungen und Verhaltenskontexten zu quantifizieren. qRT-PCR ist eine praktische Technik um die Transkription und die entsprechende mRNA-Menge für ein gegebenes Peptid zu messen. Dies ist allerdings kein zwingendes Maß für die Translation und Menge eines Peptids. Massenspektrometisch kann die Peptidmenge zwar quantifiziert werden, es kann aber nicht zwischen in Vesikel gespeicherten Peptiden und ausgeschütteten Peptiden in ZNS-Extrakten unterschieden werden. Ich habe nach einem Zugang zu den ausgeschütteten Peptiden gesucht, die durch Vergleich der relativen Menge der Peptide zwischen zwei Zeitpunkten kalkuliert werden können, wenn die mRNA-Menge, welche ein semiquantitatives Proxy der Produktion der Peptide in dieser Periode darstellt, bekannt ist. \par
Nachdem ich das Protokoll für die metabolische Markierung optimiert hatte, habe ich als Test eine quantitative Peptidomanalyse vor und nach dem Adultschlupf durchgeführt. Dabei konnte ich zeigen, dass die EH- und SIFa-relatierte Peptide nach dem Schlupf stark reduziert sind. Dies passt gut überein mit der bekannten Funktion und Freisetzung von EH während des Schlupfs. Da dieser Test positiv war, habe ich dann als nächsten Schritt die metabolische Markierung in adulten \textit{Drosophila} eingesetzt, die für 24h entweder \textit{ad libitum} gefüttert oder gehungert wurden, und geschaut, wie sich dies auf die Menge der AstA und MIP auswirkt. Meine Ergebnisse zeigten, dass das \textit{AstA} mRNA-Niveau im Gehirn der Fliegen, die 24 Stunden gehungert haben im Vergleich zu \textit{ad libitum} gefütterten Fliegen steigt, während das \textit{AstA} mRNA-Niveau im Darm sank. Hunger führte zur Reduzierung des \textit{Mip} mRNA-Spiegels in Gehirn und Darm. Wegen technischer Probleme konnte ich die metabolisch markierten Peptide
während meiner Forschungsphase leider nicht mehr analysieren. \par
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La voie de signalisation AstA, qui est conservée au cours de l’évolution, contrôle le déclenchement de la métamorphose et régule la croissance chez Drosophila melanogaster / AstA signaling functions as an evolutionary conserved mechanism timing metamorphosis and growth in Drosophila MelanogasterDeveci, Derya 31 October 2018 (has links)
La maturation sexuelle se fait en réponse à l'intégration de divers signaux internes homéostatiques et externes. Jusqu'à présent, on ignore en grande partie quels mécanismes sensoriels internes sont impliqués dans le couplage de ces signaux. Chez les mammifères, le début de la puberté est associé à des pulsations élevées de GnRH conduisant à un pic d'hormone stéroïdienne. Le système ligand/récepteur, KISS/KISSR, est un régulateur en amont des neurones producteurs de GnRH. Chez Drosophila melanogaster, un pic d'hormone prothoracicotrope (PTTH) produite par deux paires de neurones (PTTHn) conduit à la production de l'ecdysone, la principale hormone stéroïdienne chez les insectes. PTTH est l'un des premiers signaux à activer la cascade d'événements menant à la maturation. Si la production de PTTH est bloquée, un retard dans le début de la transition du stade juvénile au stade adulte est observé, tandis qu'une maturation précoce est observée lors de la surexpression de PTTH. Ceci indique donc un rôle important des PTTHn dans l'intégration des signaux. Afin de découvrir les signaux intégrés par les PTTHn, nous avons criblé une collection d’ARN interférents dans les PTTHn. Nous avons ainsi identifié le récepteur à l’allatostatine A (AstA-R1) comme un régulateur positif des PTTHn. La perte de fonction de AstA-R1 retarde la maturation avec une augmentation de la taille finale de l’organisme. Une réduction de la quantité du ligand allatostatine A (AstA) a également une incidence sur le déclenchement de la maturation. AstA est produite dans le cerveau par une paire de neurones bilatéraux qui étendent leurs axones vers les dendrites des PTTHn. De plus, les neurones AstA projettent également leurs axones vers les cellules productrices d’insuline (IPCs), connues pour réguler le taux de croissance larvaire. L’inactivation d’AstA-R1 dans les IPCs donne des organismes plus petits. Nos résultats impliquent que les neurones AstA sont capables de réguler le rythme de croissance ainsi que le déclenchement de la maturation en jouant sur deux circuits différents ciblant les PTTHn et les IPCs. De façon intéressante, AstA/AstAR1 est homologue à KISS/KISSR (GPR54), un facteur d’entrée dans de la puberté humaine. Ceci suggère donc qu’un circuit neuronal est conservé au cours de l’évolution pour l'intégration des signaux qui contrôlent le déclenchement de la maturation sexuelle. / The onset of puberty occurs in response to the integration of various internal homeostatic and external signals. Up until now, it remains largely unknown which internal sensory mechanisms are involved in the coupling of those signals. In mammals, the onset of puberty is associated with elevated GnRH pulsations leading to a peak of steroid hormones. The KISS/KISSR system is a pivotal upstream regulator of GnRH producing neurons. In Drosophila melanogaster a peak of prothoracicotropic hormone (PTTH) produced by two pairs of neurons (PTTHn) leads to the production of the insect steroid hormone ecdysone. PTTH is one of the first signals to activate the cascade of events leading to maturation. Once PTTH production is blocked, a delay is observed in the onset of the transition from juvenile to adult stage, whereas precocious maturation is observed upon PTTH over-expression, denoting an important role for PTTHn in the integration of cues. In order to uncover signals integrated by PTTHn we have conducted a biased RNAi screen in PTTHn. After two rounds of screening we identified the GPCR Allatostatin A receptor 1 (AstA-R1) as a positive regulator of PTTHn. AstA-R1 knock down delays maturation with a subsequent increase in final pupal size. Down regulation of its ligand, Allatostatin-A (AstA) on the brain is also affecting the timing of maturation. We found that AstA is produced in the central brain by a bilateral pair of neurons that extend their axons towards the PTTHn dendrites. In addition, AstA neurons also project their axons towards the Drosophila insulin producing cells (IPCs) that are known to regulate larval growth. Knockdown of AstA-R1 on the IPCs leads to smaller pupae. These findings imply that the AstA neurons are able to regulate growth and maturation timing by interacting with 2 different circuits: the PTTHn and IPCs. Unexpectedly, AstA-R1 and AstA genes share a common evolutionary origin with KISSR and KISS, respectively, suggesting a common mechanism between insects and mammals for the integration of signals that control the onset of puberty.
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Yemeni Jewish identity in the works of Simha Zaramati AstaHunter, Stephanye Ann 12 December 2013 (has links)
In this paper, I consider the collection of short stories and photographs Neighborhood Album A by Yemeni Israeli author Simha Zaramati Asta. I argue that Asta contributes to a distinctively Yemeni Jewish literature and identity in Israel. While Asta could be considered a Mizrahi author, I claim that a study of Asta’s text as Mizrahi in fact erases the distinctive Yemeni elements of Asta’s writing. Instead, Asta is purposeful about her inclusion of Yemeni culture and her establishment of Yemeni identity in her text. This Yemeni culture is evident in Asta’s inclusion of the songs of Yemeni Jewish women which constitute an oral tradition of memory within Yemen and Israel. Asta further creates a distinctive Yemeni identity through a sense of place in the Yemeni Quarter of Tel Aviv in both her stories and photographs. Through descriptions of the sights, smells, and traditions of the Yemeni Quarter of Tel Aviv, Asta elevates the neighborhood, claiming it as a place where the divine spirit can be found. While Asta is purposeful in her creation of a distinctively Yemeni Jewish literature and identity, she demonstrates the hybridization of this Yemeni Jewish literature and identity with Israeli literature and identity. By noting the importance of Yemeni Jews to the creation of Israel and the influence of Israel on these Yemeni Jews, Asta claims Israeli identity for Yemeni Jews. She demonstrates the hybridization of the Yemeni Jewish identity and Israeli identity through intertextual references to canonical Israeli poets and authors. Yet while Asta values this hybridization, she uses the characters in her stories to question whether the hybridization of Yemeni Jews in Israel can in fact succeed. / text
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Rôles fonctionnels de neuropeptides chez Drosophila melanogaster : développement d'outils génétiques et exemples d'études physiologique et comportementaleSellami Chakroun, Azza 25 June 2010 (has links)
Dans le but d’étudier le rôle fonctionnel des neuropeptides chez la drosophile, nous avons essayé d’utiliser le récepteur µ aux opioïdes (MOR) afin d’inhiber temporairement la libération de neuropeptides. Cependant, quand nous l’avons exprimé dans les cellules endocrines produisant l’hormone adipokinétique (AKH), le récepteur MOR a présenté une activité constitutive empêchant tout contrôle dans le temps. Nous proposons d’utiliser les récepteurs RASSL (Receptors Activated Solely by Synthetic Ligands) développés chez les vertébrés. Ces récepteurs, activés uniquement par des ligands synthétiques, ont été modifiés afin qu’ils soient dénués d’activité constitutive. Afin de tester rapidement l’efficacité d’un récepteur RASSL inhibiteur chez la drosophile, nous avons cherché une alternative à la mesure des taux de tréhalose et de glycogène (démontrant la libération d’AKH) qui en plus d’être laborieuse produit des résultats variables. L’hormone GPA2/GPB5, récemment découverte, est particulièrement intéressante, en effet, elle semble avoir un rôle antidiurétique. Nous avons généré des lignées transgéniques exprimant la protéine Gal4 dans les cellules GAP2/GPB5 et nous avons montré que l’ablation génétique de ces cellules compromet la survie suggérant qu’elles pourraient représenter un bon système pour tester l’efficacité du RASSL inhibiteur. Ensuite nous nous sommes intéressés au contrôle de la libération du neuropeptide AKH qui a un rôle fonctionnel homologue à celui du glucagon des vertébrés. Malgré quelques résultats encourageants, nous n’avons pas pu confirmer le rôle inhibiteur de l’AstA sur la libération de l’AKH. Enfin nous nous sommes intéressés au réseau qui contrôle le comportement de cour. Nous avons généré des lignées transgéniques exprimant la protéine Gal4 sous la dépendance du promoteur potentiel du récepteur du neuropeptide SIFamide (SIFR) et nous avons démontré que ce neuropeptide contrôle le comportement de cour via son récepteur SIFR en agissant, du moins en partie, sur les neurones fruitless. / In order to study the functional roles of neuropeptides in Drosophila, I attempted to use the µ opioïd receptor (MOR) to temporarily inhibit liberation of neuropeptides. However, when expressed in the AKH (adipokinetic hormone) endocrine cells of Drosophila, MOR turned out to be constitutively active, making it impossible to use it as envisioned. Others have encountered and subsequently solved similar problems for the so-called RASSL (Receptors Activated Solely by Synthetic Ligands) in vertebrates. As the bioassay for testing release of AKH is cumbersome, time-consuming and variable, I searched for an alternative neuroendocrine system to test the efficiency of an inhibitory RASSL in Drosophila. The recently discovered GPA2/GPB5 seemed particularly attractive, as it is likely an antidiuretic hormone. Transgenic flies expressing Gal4 in the GPA2/GPB5 were produced and genetic ablation of these cells severely compromised survival, suggesting that this might indeed be good model system. Attempts so demonstrate a physiological role of allatostatin A in the release of AKH yielded inconclusive results. In order to study the role of the neuropeptide SIFamide, which modulates sexual behavior in Drosophila, I generated transgenic flies expressing Gal4 under dependence of potential promoter of this neuropeptide receptor (SIFR) and showed that SIFamide controls courtship at least in part by acting directly on fruitless neurons.
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En studie om digital avstämning av tidplan / A study about digital progress reporting of a project planNilsson, Elina, Bakhtiar, Kandan January 2017 (has links)
Enligt undersökningar som har gjorts konstateras att digitala verktyg används mindre inom byggsektorn i jämförelse med andra branscher. Den digitala utvecklingen är viktig för hur byggbranschen kommer att se ut i framtiden. I nuläget finns ett intresse för att öka användningen av digitala verktyg från byggföretaget Skanska. En mobil version av tidplaneringsprogrammet Asta Powerproject finns på marknaden, nämligen Site Progress. Site Progress används för att stämma av projektets aktiviteter via mobila enheter. Syftet med studien är att undersöka hur en digital avstämning av tidplan går till genom att använda Site Progress. Vidare analyseras applikationens användarvänlighet och målet är att komma fram till om Site Progress skulle kunna implementeras i kommande projekt. I studien genomförs en undersökning på projekt Kvarteret Trollhättan 31, som är en om- och tillbyggnation av kontor. I början av undersökningen observerades hur avstämningen går till i nuläget på projektet. Därefter genomfördes samma avstämning med det digitala verktyget Site Progress. Undersökningen avslutades med kvalitativa intervjuer i syfte att ta del av produktionsledarnas tankar om det nuvarande arbetssättet samt deras inställning till införande av Site Progress. Studien resulterar i att Site Progress medför att avstämning sker direkt på plats och att all dokumentation hamnar på en enhet. I nuläget går det ej att tilldela fler personer på en och samma summa i Site Progress Manager, detta kan försvåra arbetet med avstämning. För att Site Progress ska implementeras i arbetet med avstämning av tidplan krävs justeringar för att åtgärda verktygets brister. / Compared to other industries, digital tools are seldomly used in construction, for which digital development is vital for the growth of that industry. Skanska, a Swedish construction company, has a growing interest in the use of such tools. A mobile version of Asta Powerproject, called Site Progress, is currently available on the market and enables mobile users to record the task progress from a remote location. The purpose of this bachelor thesis is to analyse how Site Progress works. This thesis also examines the usage of the mobile application, in order to achieve the goal to determine if Site Progress can be implemented in progress reporting for future projects. During the bachelor thesis a study has been performed on the project Kvarteret Trollhättan 31, which is a rebuilding and extension of an office building. In order to gain a better understanding of how the reporting process is today, an observation was made. Production managers were interviewed in order to take their thoughts about the product into consideration in the thesis work. They also shared their thoughts about progress reporting today and the process behind it. The study showed that the progress update through Site Progress can be made at any time and from any location. Also, all of the project data ends up on the same device. One of the difficulties with Site Progress Managers today is that it is not possible to assign more than one person to one task. Some adjustments and improvements needs to be done in order to implement Site Progress in the work with project progress reporting.
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Stability and Non-stationary Characteristics of QueuesFralix, Brian Haskel 10 January 2007 (has links)
We provide contributions to two classical areas of queueing. The first part of this thesis focuses on finding new conditions for a
Markov chain on a general state space to be Harris recurrent,
positive Harris recurrent or geometrically ergodic. Most of our
results show that establishing each property listed above is
equivalent to finding a good enough feasible solution to a
particular optimal stopping problem, and they provide a more
complete understanding of the role Foster's criterion plays in the
theory of Markov chains.
The second and third parts of the thesis involve analyzing queues
from a transient, or time-dependent perspective. In part two, we
are interested in looking at a queueing system from the
perspective of a customer that arrives at a fixed time t. Doing
this requires us to use tools from Palm theory. From an intuitive
standpoint, Palm probabilities provide us with a way of computing
probabilities of events, while conditioning on sets of measure
zero. Many studies exist in the literature that deal with Palm
probabilities for stationary systems, but very few treat the
non-stationary case. As an application of our main results, we
show that many classical results from queueing (in particular ASTA and Little's law) can be generalized to a time-dependent
setting.
In part three, we establish a continuity result for what we refer
to as jump processes. From a queueing perspective, we basically
show that if the primitives and the initial conditions of a
sequence of queueing processes converge weakly, then the
corresponding queue-length processes converge weakly as well in
some sense. Here the notion of convergence used depends on
properties of the limiting process, therefore our results
generalize classical continuity results that exist in the
literature. The way our results can be used to approximate
queueing systems is analogous to the way phase-type random
variables can be used to approximate other types of random
variables.
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Pengar, makt och arbete : En undersökning om modern arbetarlitteraturBarker, Hannah January 2022 (has links)
This essay is an explorative essay of the essence of modern working-class literature. By using Magnus Nilsson's adaption of Lars Furudal's original theory of working-class literature - working class literature for, from and about workers - three novels were examined. These were Pengar på fickan by Asta Olivia Nordenhof, Dagarna, dagarna, dagarna by Tone Schunnesson and Jag for ner till bror by Karin Smirnoff. By examining these three modern novels with Nilssons adaption of Furulands definition of working-class literature the essay's aim is to explore if they can be categorized as modern working-class literature. The answer to the essay's question was ambiugos and can most easily be summarized as: both yes and no. The study found that none of the above novels could easily be categorized as working-class literature according to Furuland’s definition, as none of the novels meets all three criteria. Then again, according to Nilsson’s definition, at least two of the works can be placed within intersections of Furuland’s critera, and thus they can be defined as modern working class literature. However, it is clear, both from the study and Nilsson’s own reasoning, that whether a novel is working-class literature or not is complicated. There is no obvious definition, and as the present day is constantly evolving, it is difficult to draw clear lines about the definition of modern working-class literature.
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En studie om digital avstämning av tidplan / A study about digital progress reporting of a project planNilsson, Elina, Bakhtiar, Kandan January 2017 (has links)
Enligt undersökningar som har gjorts konstateras att digitala verktyg används mindre inom byggsektorn i jämförelse med andra branscher. Den digitala utvecklingen är viktig för hur byggbranschen kommer att se ut i framtiden. I nuläget finns ett intresse för att öka användningen av digitala verktyg från byggföretaget Skanska. En mobil version av tidplaneringsprogrammet Asta Powerproject finns på marknaden, nämligen Site Progress. Site Progress används för att stämma av projektets aktiviteter via mobila enheter. Syftet med studien är att undersöka hur en digital avstämning av tidplan går till genom att använda Site Progress. Vidare analyseras applikationens användarvänlighet och målet är att komma fram till om Site Progress skulle kunna implementeras i kommande projekt. I studien genomförs en undersökning på projekt Kvarteret Trollhättan 31, som är en om- och tillbyggnation av kontor. I början av undersökningen observerades hur avstämningen går till i nuläget på projektet. Därefter genomfördes samma avstämning med det digitala verktyget Site Progress. Undersökningen avslutades med kvalitativa intervjuer i syfte att ta del av produktionsledarnas tankar om det nuvarande arbetssättet samt deras inställning till införande av Site Progress. Studien resulterar i att Site Progress medför att avstämning sker direkt på plats och att all dokumentation hamnar på en enhet. I nuläget går det ej att tilldela fler personer på en och samma summa i Site Progress Manager, detta kan försvåra arbetet med avstämning. För att Site Progress ska implementeras i arbetet med avstämning av tidplan krävs justeringar för att åtgärda verktygets brister.
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Karakteristike oleorizina mlevene začinske paprike dobijenog klasičnom i ekstrakcijom superkritičnim ugljen-dioksidom / Characteristics of ground pepper oleoresin, produced byclassic and supercritical fluid extraction with carbon-dioxideTepić Aleksandra 03 September 2009 (has links)
<p>Cilj istraživanja u ovom radu bilo je ispitivanje uticaja<br />različitih vidova ekstrakcije (konvencionalna ekstrakcija<br />organskim rastvaračem i superkritična ekstrakcija ugljendioksidom)<br />na kvalitet oleorizina začinske paprike u pogledu<br />kvalitativnog i kvantitativnog sadržaja bojenih materija,<br />sastava masnih kiselina i antioksidativnih svojstava. Pošto u<br />Vojvodini postoje značajni kapaciteti za proizvodnju i preradu<br />začinske paprike, smatramo da će rezultati ovih ispitivanja<br />dati uvid u kinetiku različitih tipova ekstrakcije i pružiti<br />informacije o uslovima potrebnim za dobijanje proizvoda<br />vrhunskog kvaliteta.</p> / <p>The aim of the work was to investigate the influence of<br />different extraction methods (conventional extraction using<br />organic solvent and supercritical carbon-dioxide extraction)<br />to qualitative and quantitative pigment content, fatty acid<br />content and antioxidant properties of oleoresins. As there<br />have been significant production and processing capacities of<br />spice pepper in Vojvodina, the results of these investigations<br />will give a closer insight into the kinetics of different types of<br />extraction and conditions for obtaining the high quality<br />product.</p>
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Reliving the railroadRasmussen, Joshua Stephen 11 December 2013 (has links)
The Austin Steam Train Association operates a tourist train on a stretch of track in Texas from Cedar Park to Burnet. The diverse assortment of restored cars, some dating back to the 1920s, is pulled most-recently by a diesel engine, No. 442, as Southern Pacific No. 786, the original steam engine, is in the process of being repaired.
The train requires more than $1 million annually to operate and would have folded long ago if not for an all-volunteer crew. ASTA staffs the crew of at least 10-15 people per train 105-110 times per year and has been doing so for more than 20 years.
During a ride on the train, passengers see a wide variety of scenery, including some relics with historical significance. Among them are several large chunks of granite which fell of trains shuttling the stone decades ago from Marble Falls to Austin for the construction of the capitol building. Trains also carried granite to Galveston after the infamous hurricane hit.
ASTA also provides entertainment inside the train. Themes rides sell out months in advance. Murder mystery trips are always hits but the Wine Flyer is gaining popularity. With a layover in Burnet on the Saturday Hill Country Flyers trips, passengers take time to explore a new city, have lunch and maybe do a little quick shopping.
ASTA takes the operation of the train seriously and makes safety a priority. ASTA runs the train with fantastic dedication and perseverance and subsequently, generates a rolling work of history for study by families, first-timers and enthusiasts alike on a weekly basis. / text
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