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Funcionalização de hidrogéis de nanocelulose bacteriana para mimetização de microambiente tumoral

Reis, Emily Marques dos January 2016 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro Tecnológico, Programa de Pós-Graduação em Engenharia Química, Florianópolis, 2016. / Made available in DSpace on 2017-06-27T04:03:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 343967.pdf: 2834668 bytes, checksum: 484629c01c1a6c6270fbb1754d5a9156 (MD5) Previous issue date: 2016 / O desenvolvimento de um sistema adequado de cultura de células em três dimensões (3D) para a seleção de fármacos anticâncer continua a ser uma necessidade não atendida. Um modelo 3D do microambiente tumoral simples, rápido, reprodutível e de baixo custo ainda não foi desenvolvido. Alterações do microambiente são fundamentais para a metástase e culturas em 3D podem ser utilizadas para estudar os mecanismos e efeitos que estas alterações causam na sinalização de células tumorais. O objetivo deste trabalho foi desenvolver modelos de bioengenharia para o estudo do comportamento de células endoteliais e células de melanoma que possam servir como matrizes para o rastreio de potenciais fármacos antitumorais. Primeiramente, hidrogéis de nanocelulose bacteriana (BNC) foram oxidados com HNO3/H3PO4-NaNO2, seguido por derivatização com um agente de acoplamento e finalmente, a heparina ou IKVAV foram imobilizadas sobre os hidrogéis através de ligações covalentes, funcionalizando assim esses biomateriais. O sucesso das imobilizações foi confirmado por técnicas de caracterização de materiais. As células endoteliais de veia umbilical humana (HUVECs) foram semeadas nas superfícies inferior e superior dos hidrogéis BNC e BNC-HEP e o comportamento celular foi observado. A superfície inferior do BNC-HEP é capaz de suportar a adesão celular, proliferação e induzir tubulogênese. Células de melanoma humano (SK-MEL-28) quando semeadas sobre as superfícies superior e inferior dos hidrogéis BNC e BNC-IKVAV adquiriram diferentes plasticidades tumorais como, por exemplo, o mimetismo vasculogênico. Os resultados aqui apresentados indicam que o comportamento celular pode ser controlado por interações simples com grupos funcionais em vez de biomoléculas solúveis ou materiais complexos, o que tornaria a produção de materiais para o estudo da angiogênese, mecanismos de invasão celular e mimetismo vasculogênico, mais baratos e facilmente controlados. Os biomateriais aqui desenvolvidos e estudados podem ser utilizados para a elucidação de diversos mecanismos celulares que levam à metástase tumoral. Assim, fármacos poderão ser testados contra diversas plasticidades celulares, visando o tratamento de câncer e de outras doenças de interesse biomédico.<br> / Abstract : The development of a suitable system of three dimensions in cell culture (3D) for the selection of anticancer drugs remains an unmet need. A 3D model of the tumor microenvironment simple, fast, reproducible and low cost has not yet been developed. Changes in the microenvironment are fundamental to metastasis and 3D cultures can be used to study the mechanisms and effects that these changes have on the signaling of tumor cells. The aim of this study was to develop bioengineering models for the study of endothelial cell behavior and of melanoma cells that can serve as matrix for the screening of potential anti-tumor drugs. First, hydrogels bacterial nanocelulose (BNC) were oxidized with HNO3/H3PO4-NaNO2, followed by derivatization with a coupling agent and finally heparin or IKVAV were immobilized on hydrogels by covalent bonds. The success of immobilization was confirmed by techniques for material characterization. Endothelial cells from human umbilical vein (HUVECs) were seeded in the top and bottom surfaces of hydrogels BNC and BNC-HEP and cell behavior was observed. The bottom surface of HEP-BNC is capable of supporting cell adhesion, proliferation and induce tubulogênese. Human melanoma cells (SK-MEL-28) when seeded on the upper and lower surfaces of hydrogels BNC and BNC-IKVAV acquired different tumor plasticities as, for example, vasculogenesis mimicry. The results presented herein indicate that the cellular behavior can be controlled by simple interactions with the functional groups instead of soluble biomolecule or complex materials. Thus, the production of material for the study of angiogenesis, cell invasion mechanisms and vasculogenesis mimicry can be easily controlled. Biomaterials developed and studied here may be used for the elucidation of many cellular mechanisms that lead to tumor metastasis. Thus, drugs can be tested against various cellular plasticity, targeting the treatment of cancer and other diseases of biomedical interest.
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Capacidade de adaptação e tolerância em bactérias contaminantes de alimentos frente ao óleo essencial de Origanum vulgare L. e carvacrol

Luz, Isabelle da Silva 12 February 2014 (has links)
Submitted by Daniella Sodre (daniella.sodre@ufpe.br) on 2015-04-08T18:47:28Z No. of bitstreams: 2 TESE Isabelle da Silva Luz.pdf: 2533844 bytes, checksum: ef1a1e69d6d1ea40a549974b8e76af50 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-04-08T18:47:28Z (GMT). No. of bitstreams: 2 TESE Isabelle da Silva Luz.pdf: 2533844 bytes, checksum: ef1a1e69d6d1ea40a549974b8e76af50 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2014-02-12 / CNPq; FACEPE / A crescente demanda por alimentos saudáveis isentos de conservantes químicos tem estimulado a pesquisa de tecnologias alternativas para a produção de alimentos seguros. Neste cenário, os óleos essenciais surgem como possíveis agentes antimicrobianos para uso em alimentos, em especial aqueles obtidos da espécie Origanum vulgare L. (OEOV). A ação antimicrobiana do OEOV tem sido atribuída aos compostos fenólicos naturalmente presentes em sua constituição, sendo o carvacrol (CAR) frequentemente citado como seu constituinte majoritário. Considerando estes aspectos, este estudo foi desenvolvido com objetivo de investigar a capacidade de adaptação e de desenvolvimento de tolerância ao OEOV e CAR em algumas cepas de bactérias contaminantes de alimentos (Listeria monocytogenes, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa e Salmonella Typhimurium) e avaliar a ocorrência de injúria e alterações na composição de ácidos graxos da membrana citoplasmática de S. Typhimurium quando exposta a concentrações subletais destes agentes. A determinação da Concentração Inibitória Mínima (CIM) foi realizada por macrodiluição em caldo. Para os ensaios de tolerância direta e cruzada (45oC; pH 5.2; NaCl 5-15 g/100 mL), as cepas foram expostas a concentrações subletais (1/2 CIM e 1/4 CIM) do OEOV ou do CAR em caldo base carne (18 h) e em modelo base carne (72 h). Para os ensaios de verificação de injúria subletal, S. Typhimurium foi exposta a concentrações subletais do OEOV ou CAR e semeadas em meios adicionados de agentes seletivos. O perfil de ácidos graxos da membrana citoplasmática foi determinado por meio de cromatografia gasosa. Os valores da CIM frente às bactérias testadas variaram entre 0.62 μL/mL e 5.0 μL/mL para OEOV e entre 0.62 μL/mL e 2.5 μL/mL para CAR. Ensaios de indução de tolerância direta e cruzada em caldo base carne revelaram ausência do desenvolvimento de tolerância em todas as cepas bacterianas ensaiadas. Resultados semelhantes foram observados para P. aeruginosa em modelo base carne. Ensaios adicionais de indução de tolerância direta nas cepas bacterianas quando em caldo base carne adicionado de concentrações crescentes (1/16 CIM - 2 CIM) dos compostos também não evidenciaram desenvolvimento de tolerância bacteriana. A exposição de S. Typhimurium a concentrações subletais de OEOV ou CAR revelou injúria à membrana citoplasmática e à membrana externa, bem como alterações em sua composição de ácidos graxos, especialmente relacionadas ao aumento da razão ácidos graxos insaturados:ácidos graxos saturados. Os resultados obtidos neste estudo demonstram que a exposição das cepas bacterianas a concentrações subletais do OEOV ou CAR não induziu o desenvolvimento de tolerância bacteriana direta e cruzada quando cultivadas em meio base carne. Ainda, sugeriram que estes compostos podem induzir uma resposta adaptativa em S. Typhimurium, relacionada à mudanças no perfil de ácidos graxos de membrana. Estes achados revelam o potencial antimicrobiano do OEOV e do CAR em sistemas de conservação de alimentos, quando considerada a sua destacável capacidade de inibição do crescimento das cepas utilizadas no estudo, concomitante ao não desenvolvimento de tolerância bacteriana direta e cruzada, considerando avaliações de uso em concentrações subletais.
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Morfologia e taxonomia de Atractus latifrons (Günther, 1868) (Serpentes: Dipsadidae) e seu relacionamento mimético com corais verdadeiras na Amazônia

ALMEIDA, Paula Carolina Rodrigues de January 2012 (has links)
Submitted by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2013-02-15T20:50:17Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_MorfologiaTaxonomiaAtractus.pdf: 5634526 bytes, checksum: 6358e290a16df2173fc8f4d35e8a1ce0 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Rosa Silva(arosa@ufpa.br) on 2013-02-18T15:28:03Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_MorfologiaTaxonomiaAtractus.pdf: 5634526 bytes, checksum: 6358e290a16df2173fc8f4d35e8a1ce0 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-02-18T15:28:03Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_MorfologiaTaxonomiaAtractus.pdf: 5634526 bytes, checksum: 6358e290a16df2173fc8f4d35e8a1ce0 (MD5) Previous issue date: 2012 / A coloração animal é um importante atributo biológico com diferentes funções relacionadas às estratégias de vida adotadas pelos indivíduos no ambiente, como a termorregulação, a defesa e a comunicação inter e intraespecífica. O mimetismo é talvez, um dos mais importantes mecanismos biológicos de comunicação, frequentemente envolvendo similaridade de cor com conotação defensiva. Os sistemas miméticos refletem um complexo processo de evolução, que acentua semelhanças morfológicas ou comportamentais entre duas ou mais espécies, garantindo vantagens adaptativas em pelo menos uma delas. Apesar de comum entre os invertebrados, o mimetismo também pode ser observado em grupos de vertebrados como lagartos e serpentes, por exemplo. Dentre os exemplos mais comuns de mimetismo em serpentes são descritas as relações entre os corais verdadeiras e falsas. A falsa-coral, Atractus latifrons (Günther, 1868) é endêmica da Amazônia e ocorre nos territórios de Brasil, Colômbia, Guiana Francesa, Peru, Suriname e Venezuela. Em função da semelhança cromática de seus diferentes padrões, esta espécie foi relacionada à algumas espécies de corais verdadeiras do gênero Micrurus que também apresentam distribuição amazônica. Embora a variação cromática desta espécie tenha sido relatada por alguns autores, algumas questões sobre o polimorfismo intraespecífico e sua relação com a distribuição geográfica, assim como a relação mimética com as corais verdadeiras de Micrurus ainda não foram estudadas. Com o objetivo de contribuir com a elucidação destas questões, este estudo foi organizado em dois capítulos: no primeiro capítulo, intitulado “Variação morfológica e taxonomia de Atractus latifrons (Günther, 1868) (Serpentes: Dipsadidae)”, foram apresentadas as variações da morfologia externa e hemipeniana da espécie, incluindo sua redescrição e descrição do holótipo, além das descrições dos padrões cromáticos e análise de dimorfismo sexual; e no segundo capítulo, intitulado “Relações miméticas entre Atractus latifrons e corais verdadeiras na Amazônia”, foram identificados os possíveis modelos miméticos para A. latifrons, inferindo suas relações miméticas através da análise de co-ocorrência e apresentando mapas de distribuição dos padrões miméticos entre as espécies envolvidas. / Animal coloration is an important biological attribute with different functions related to the strategies adopted by individuals in the environment, such as thermoregulation, defense and inter and intraspecific communication. The mimicry is perhaps one of the most important biological communication mechanisms, often involving similarity of color with a defensive connotation. Systems mimetics reflect a complex evolution process that accentuates similarities morphological or behavioral between two or more species guaranteeing adaptive advantages at least one. Though common between invertebrates, mimicry also observed in vertebrate groups as lizards and serpents eg. For examples common mimicry snakes are described relations between corals true and false. The false coral, Atractus latifrons (Günther, 1868) is endemic in the Amazon and occurs in the Brazil, Colombia, French Guiana, Peru, Suriname and Venezuela. Due to the similarity of their different color patterns, this species was related to some species of the genus Micrurus coral snakes that also have Amazon distribution. Although the chromatic variation of this species has been reported by some authors, some questions about the intraspecific polymorphism and its relation to geographic distribution, as well as the mimetic relationship with the coral snakes Micrurus not yet been studied. With the purpose of contribute to the elucidation of these issues, this study was organized into two chapters: In first entitled "Variation Morphological and Taxonomy Atractus latifrons (Günther, 1868) (Serpentes: Dipsadidae)" were presented morphological variations species including descriptions their standards chromatic and variations morphological intraspecific A. latifrons and analysis sexual dimorphism group; in second chapter entitled "Relations mimicry between Atractus latifrons and corals true Amazon" were identified for possible models mimetics A. latifrons, inferring their mimetic relationships through the analysis of co-occurrence and distribution maps showing patterns among mimetic species involved.

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