A aflatoxicose é uma doença causada pela ingestão de aflatoxinas, as quais constituem um grupo de metabólitos altamente tóxicos e carcinogênicos, produzidos principalmente pelos fungos Aspergillus flavus e Aspergillus parasiticus. O mecanismo de ação das micotoxinas na célula animal ocorre na maioria das vezes, através de alterações dos processos metabólicos básicos e de alterações da função mitocondrial, da síntese protéica e de ácidos nucléicos, sendo este último um dos principais sítios de ação das aflatoxinas. A aflatoxicose pode se apresentar de duas formas. A forma aguda se caracteriza por desordem hepática, hemorragias e alta mortalidade; e a crônica, pela queda na produção, penas arrepiadas, paralisia imunossupressão e diarréia. Foram estudados 18 lotes de frangos de corte com 28 dias de idade, provenientes de seis produtores de nível bom produtivo, seis de nível médio e seis produtores de baixo nível de produção; totalizando 180 aves. As aves foram pesadas e sacrificadas, sendo coletadas amostras de fígados e de soros. Os fígados foram fixados em formalina a 10%, para análise histopatológica e congelados a -20°C para teste de ELISA. Das amostras de soro foram realizados testes de dosagem enzimática de aspartato aminotransferase (AST) e creatina quinase (CK) na tentativa de confirmar a lesão hepática. Os cortes histológicos de fígado foram analisados e escores de lesão estabelecidos para necrose e vacuolização dos hepatócitos, hiperplasia dos ductos biliares e infiltração periportal de células inflamatórias. Os escores de cada lesão foram comparados com os níveis de aflatoxina obtidos pelo teste de ELISA, com o peso das aves e com os valores de AST e CK. Além disso, foram comparados os níveis de aflatoxina com o peso dos frangos e com os valores enzimáticos. Por fim, estes valores de AST e CK foram relacionados com o peso dos frangos. Foi possível concluir que, nas condições estudadas, os escores de lesões hepáticas são inversamente proporcionais aos níveis de aflatoxina detectados nos fígados de frangos com 28 dias de idade. Observou-se também, que não há relação entre os valores de AST, em função dos níveis de lesão hepática e dos valores de aflatoxina detectados; e a dosagem de AST não se presta como teste preliminar para detecção de lesão hepática causada pela ingestão de aflatoxina em frangos de corte aos 28 dias de idade.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:08Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-06-21Bitstream added on 2014-06-13T18:38:50Z : No. of bitstreams: 1 foguel_mv_me_araiq.pdf: 1424253 bytes, checksum: 63eeed20ff10405c2717879b8b49170a (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Muitas espécies de fungos pertencentes ao gênero Aspergillus sp. são capazes de contaminar e produzir micotoxinas em grãos e cereais, sendo responsáveis por doenças em animais e humanos. As espécies Aspergillus flavus e Aspergillus parasiticus são produtoras das aflatoxinas, que têm recebido grande atenção, devido a seus efeitos tóxicos no organismo como carcinogenicidade e mutagenicidade. Dentre os diversos tipos de aflatoxinas, destaca-se a aflatoxina B1, devido à alta potencialidade tóxica. Várias técnicas têm sido aplicadas na detecção desta toxina e o desenvolvimento de imunossensores eletroquímicos tem sido uma alternativa, devido à simplicidade, especificidade e alta sensibilidade. Superfícies metálicas de ouro, como CD-Rs de ouro (Au-CDtrodos), têm sido amplamente utilizadas como transdutores para a construção de imunossensores, devido à capacidade de imobilizar moléculas biológicas na presença ou ausência de monocamadas auto-organizadas (“selfassembled monolayers” - SAM). O presente trabalho relata o desenvolvimento de imunossensores, amperométrico e impedimétrico, para detecção de aflatoxina B1 em alimentos empregando CDtrodos de ouro. As etapas de construção dos imunossensores incluem as modificações do transdutor de ouro com p-aminotiofenol (p-ATP), proteína A ou ácido lipóico, seguido da imobilização do anticorpo anti-AFB1 e imunoensaios com o antígeno (AFB1). Empregando técnicas eletroquímicas (espectroscopia de impedância eletroquímica e voltametria cíclica) definiu-se que a SAM de ácido lipóico ativada com EDC/NHS foi o modificador que apresentou maior eficiência para a imobilização do anticorpo anti-AFB1. A partir de estudos quimiométricos, por meio do planejamento fatorial completo, definiram-se as melhores condições para o desenvolvimento do imunossensor:... / Many fungi species belonging to the genus Aspergillus sp. are able to infect and produce mycotoxins in grains and cereals, they are responsible for diseases in animals and humans. Aspergillus flavus and Aspergillus parasiticus are producers of aflatoxina, which have received great attention, due to toxic effects on the organism, such as carcinogenicity and mutagenicity. Among the different types of aflatoxins, aflatoxina B1 stands out due to high toxic potential. Several techniques have been applied in the detection of this toxin and the development of electrochemical immunosensors has been an option due to simplicity, specificity and high sensitivity. Metallic surfaces of gold, as gold CD-R (Au-CDtrodes), have been widely used as transducers for construction of immunosensors, due to the ability to immobilize biological molecules in presence or absence of self-assembled monolayers (SAM). This work describes the development of immunosensors, amperometric and impedimetric, for aflatoxin B1 detection in foods using gold CDtrodes. The construction steps of the immunosensors include modifications of the gold transducer with p-aminothiophenol (p-ATP), protein A or lipoic acid, followed by anti-AFB1 immobilization and immunoassays with antigen (AFB1). Employing electrochemical techniques (electrochemical impedance spectroscopy and cyclic voltammetry) was defined that the lipoic acid SAM activated with EDC/NHS was the modifier with the highest efficiency for the anti-AFB1 antibody immobilization. Using chemometric studies, through the full factorial design, was defined the best conditions for the immunosensor development: anti-AFB1 antibody at 1:2000 dilution and surface blocking with 0.5% bovine serum albumin, both with incubation 1 hour and antibody- AFB1 antigen immunoreaction for 30 minutes... (Complete abstract click electronic access below)

A aflatoxicose é uma doença causada pela ingestão de aflatoxinas, as quais constituem um grupo de metabólitos altamente tóxicos e carcinogênicos, produzidos principalmente pelos fungos Aspergillus flavus e Aspergillus parasiticus. O mecanismo de ação das micotoxinas na célula animal ocorre na maioria das vezes, através de alterações dos processos metabólicos básicos e de alterações da função mitocondrial, da síntese protéica e de ácidos nucléicos, sendo este último um dos principais sítios de ação das aflatoxinas. A aflatoxicose pode se apresentar de duas formas. A forma aguda se caracteriza por desordem hepática, hemorragias e alta mortalidade; e a crônica, pela queda na produção, penas arrepiadas, paralisia imunossupressão e diarréia. Foram estudados 18 lotes de frangos de corte com 28 dias de idade, provenientes de seis produtores de nível bom produtivo, seis de nível médio e seis produtores de baixo nível de produção; totalizando 180 aves. As aves foram pesadas e sacrificadas, sendo coletadas amostras de fígados e de soros. Os fígados foram fixados em formalina a 10%, para análise histopatológica e congelados a -20°C para teste de ELISA. Das amostras de soro foram realizados testes de dosagem enzimática de aspartato aminotransferase (AST) e creatina quinase (CK) na tentativa de confirmar a lesão hepática. Os cortes histológicos de fígado foram analisados e escores de lesão estabelecidos para necrose e vacuolização dos hepatócitos, hiperplasia dos ductos biliares e infiltração periportal de células inflamatórias. Os escores de cada lesão foram comparados com os níveis de aflatoxina obtidos pelo teste de ELISA, com o peso das aves e com os valores de AST e CK. Além disso, foram comparados os níveis de aflatoxina com o peso dos frangos e com os valores enzimáticos. Por fim, estes valores de AST e CK foram relacionados com o peso dos frangos. Foi possível concluir que, nas condições estudadas, os escores de lesões hepáticas são inversamente proporcionais aos níveis de aflatoxina detectados nos fígados de frangos com 28 dias de idade. Observou-se também, que não há relação entre os valores de AST, em função dos níveis de lesão hepática e dos valores de aflatoxina detectados; e a dosagem de AST não se presta como teste preliminar para detecção de lesão hepática causada pela ingestão de aflatoxina em frangos de corte aos 28 dias de idade.

Orientadores: Cesar Francisco Ciacco, Jose Francisco Lopes Filho / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-28T09:10:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Gloria_EduardoMicottida_D.pdf: 30431477 bytes, checksum: a4694532b76fd1905724f759736f859c (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: A indústria de moagem úmida do milho, assim como outros segmentos agroindustriais usuários do milho no Brasil, utilizam geralmente o sistema de classificação oficial modificado ou não, como único instrumento de controle de qualidade de sua matéria-prima. Os usuários do milho, também relacionam os tipos definidos pela classificação e os níveis de presença de grãos avariados em um lote com a presença, distribuição e nível de aflatoxinas nos lotes de milho. Os limites de presença de grãos com defeitos compreendidos na classificação brasileira não guardam relação com a qualidade dos lotes de milho destinados aos mais diversos tipos de utilização ou com a contaminação com aflatoxinas. Por isso, são necessários estudos que determinem melhor a influência dos tipos de avarias e dos níveis de presença destes sobre o processo de moagem úmida e sobre a contaminação com aflatoxinas. Neste projeto pretendeu-se verificar a influência do nível de presença de avarias do milho sobre: a presença e distribuição de aflatoxinas, o rendimento do processo de moagem úmida aplicado para extração do amido e, em algumas características do amido extraído. A distribuição dos pontos com fluorescência amarelo esverdeada brilhante, visualizados através da técnica da luz ultravioleta, entre os grupos de defeitos definidos pela classificação e sua relação com a contaminação da amostra também foi verificada. Os resultados mostraram que, normalmente, o grupo de grãos 1 ( grãos ardidos, brotados, mofados e queimados) apresentavam os níveis mais elevados de contaminação com aflatoxinas e o grupo 3 (grãos normais) os níveis mais baixos. Os grupos 2 (grãos carunchados, chochos, quebrados, prejudicados por diferentes causas e fermentados até 1/4) e 4 (Impurezas, matéria-estranha e fragmentos de milho) normalmente apresentaram níveis de contaminação entre os grupos 1 e 3. A contribuição de cada grupo para o nível de contaminação total da amostra variou de amostra para amostra, mas o grupo 2 normalmente foi o que mais contribuiu. Não se observou nas amostras uma correlação significativa entre as percentagens de presença dos grupos de grãos e o nível total de contaminação da amostra. A distribuição dos pontos fluorescentes mostrou que os grupos de defeitos 2 e 4 apresentavam normalmente a maioria dos pontos fluorescentes das amostras contaminadas. Os resultados de correlação entre número de pontos fluorescentes e o nível de contaminação sugerem que a visualização do grupo de defeitos 2 deva ser estudada como meio de aumentar à eficiência da técnica da luz ultravíoleta para detectar amostras possivelmente contaminadas. A presença dos grupos de grãos nos limites de presença estabelecidos pela classificação oficial do Brasil não afetou os rendimentos da moagem úmida (sólidos na água de maceração, germe, fibras, amido, glúten e sólidos no filtrado do glúten). Apesar dos limites da classificação não influenciarem os rendimentos da moagem úmida, os grupos de grãos 1 e 2 podem influenciar os rendimentos quando presentes em altos níveis como observado nos tratamentos E e F, onde 100% da matéria-prima que sofreu moagem consistia-se de grãos dos grupos 1 e 2, respectivamente ¿Observação: O resumo, na íntegra poderá ser visualizado no texto completo da tese digital. / Abstract: The corn wet milling industry like other com processors has generally the official classification with modifications or not as unique tool of quality control of their raw material. Com users associate too, the grain defects kinds defined for official classification e levels of presence the damaged grains in the com lot with presence, distribution and aflatoxin level in one corn lot. The adoption of limits to damaged grains, established by Brazilian official classification, to assess com lots quality destined to wet milling or to establish relation with presence or aflatoxin levels, does not have fundamental technical. Therefore, they are necessary studies that determine better the influence of kinds of damage and levels of presence these over wet milling process and aflatoxin contamination. In this project we intended to check the influence of presence level of damage grains in com lots over: aflatoxin presence and distribution, yields of wet milling process used to extract starch and some characteristics of starch. The blight greenish yellow fluorescent points distribution, observed by ultraviolet light technique, among groups of damaged grains defined in official classification and its relationship with levei of sample contamination was checked too. The results showed that normally the group one of grains (fermented, sprouted, mouldy and heated grains) had the highest levels of aflatoxin contamination and the group three (normal grains) had the lowest leveI. The group two (insect attacked, immature, broken, damaged by different sources and up to % of surface fermented grains) and four (Impurites, strange material and fragments of corn) normally showed contamination levels between group one and three. The contribution of each defect group to total contamination level of sample ranged from sample to sample, but the group two normally contributed more to total leveI. It was not observed on samples a significant correlation between presence percentage of grains group and total level of sample contamination. The distribution of fluorescent points showed that defect groups two and four had normally the most fluorescent points of contaminated samples. The correlation results between the number of fluorescent points observed in each group and the contamination level suggest that visualization of group two should be studied as way to improve the efficiency of ultraviolet light technique to detect probably contaminated samples. The presence of grain groups into Brazilian official classification limits did not affected the wet milling products yields (steep liquor solids, germ, fiber, starch and gluten filtrate solids). Despite Brazilian official classification limits of group grains did not influence the wet milling yields, the grain group one and two may to influence yields when present in high levels as observed in treatment E and F, where 100% of wet milling raw material was of the group one and two, respectively. When compared to wet milling of raw material compound just of normal grains, the wet milling of raw material with ali grains of group one decreased the germ and starch yield while increased gluten. Ever the wet milling of raw material with ali grains of group two decrease the germ and fiber yields while increased starch ...Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations. / Doutorado / Doutor em Tecnologia de Alimentos

Made available in DSpace on 2016-04-28T20:17:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 1998 - Jose Luis de Carvalho.pdf: 155465 bytes, checksum: 7d8adfe2d500eb89d6de012ebb6c3718 (MD5) Previous issue date: 1998-09-22 / The present thesis was concerned to imnunoassays, carried out in order to evaluate the aflatoxin interference on the inflammatory mechanisms. Experiments were done by in vivo procedures. In the in vivo experiments, chickens (Hubard x Hubard) received 100 μg / g de aflatoxin, 2 hours before infection with Escherichia coli. The blood clearance of Escherichia coli, was determined by haemoculture and quantification of the bacteria colonies in tryptose agar medium at different intervals ( 5, 10, 15, 30, 45, 60, 120 minutes). A significant decrease of the number of colonies recovering was observed at the 15 minutes period, of aflatoxin-trated chikens. From there on, animals intoxicated with aflatoxin were not able to eliminate the circulating bacterias. Aflatoxin-trated chikens, there were detectable a significant decrease of number of bacteria colonies on the organ, than in the control group. The per cent of bacterias were found in the spleen and liver, with the rate of 91.9 % and 7.6 %, respectively. The results have been shown, aflatoxin to be a micotoxin hepatotoxic and nephrotoxic. / O presente trabalho foi realizado com o intuito de determinar a extens?o dos preju?zos causados ao sistema imunit?rio pela aflatoxina. A modula??o inflamat?ria foi avaliada atrav?s de ensaios in vivo, realizados em aves Hubard x Hubard, previamente expostos ? aflatoxina (100 μg / g de peso vivo - 2 horas antes da infec??o). Os experimentos in vivo basearam-se na elimina??o ( clearance ) de Escherichia coli (amostra k-12 - FIOCRUZ), apartir de infec??es experimentais, seguidas de sangria, hemocultivo e contagem do n?mero de bact?rias circulantes em diferentes intervalos de tempo. Observou-se uma acentuada diminui??o do n?mero de bact?rias circulantes durante os 15 minutos de avalia??o no grupo tratado. Apartir de ent?o, os animais intoxicados mostraram-se incapazes de eliminar bact?rias circulantes, evidenciando ter havido uma supress?o da resposta inflamat?ria. Nos animais intoxicados, foi dectado uma acentuada diminui??o do n?mero de bact?rias nos ?rg?os em compara??o com os n?o tratados . O percentual de bact?rias foi maior no ba?o e f?gado, com uma taxa de 91,9% e 7,6% respectivamente. Os resultados mostraram a hepatoxicidade e nefrotoxicidade das aflatoxinas.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias. / Made available in DSpace on 2012-10-17T18:52:21Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Foram pesquisadas a presença de mercadores biológicos para aflatoxina B1 (AFB1), através do aduto AFB1-Lys em residentes da cidade de São Paulo no mês de junho de 1999, mês este de festas juninas, com maior exposição da população à alimentos contaminados com a AFB1, através da ingestão de amendoim, milho e seus derivados.Foram também realizados levantamentos da ocorrência de carcinoma hepatocelular (CHC), um dos efeitos tóxicos crônicos da AFB1, em pacientes de hospitais de São Paulo(Antônio Carlos Camargo - HACC) no periodo de 1953 a 1991 e de Santa Catarina (Infantil Joana de Gusmão - HIJG; Governador Celso Ramos - HGCR e Universitário - HU) no período de 1981 a 1998, correlacionando com hábitos alimentares (AFB1), bem como, possíveis doenças precursoras de CHC (hepatite e cirrose). Todas as amostras avaliadas, apresentaram níveis do aduto AFB1 - Lys( adutode AFB1-Lys por mg de albumina sangüinea), sendo que 62% dos residentes apresentaram níveis acima de 3 pg/mg de aduto AFB1-lys. Estes n´veis, oscilaram de 3 a 57,3pg/mg com teor médio deste aduto de 14,9 pg/mg. As amostras que apresentaram n´veis mais elevados, atingiram 57,1 e 57,3 pg/mg de AFB1-Lys, respectivamente. Todos os residentes eram provenientes da área urbana e a presença do aduto independeu daprofissão e idade. No Estudo de ocorrência de CHC nos hospitais dos Estados de São Pauloe Santa Catarina, foi observado que em São Paulo, o HACC, registrou 122 casos com suspeita de CHC e que 66% foram a óbito. No estudo pela faixa etária, 31% depacientes estavam entre 41 e 80anos e 64% eram do sexo masculino. Dez Estados brasileiros (São Paulo, Bahia, Minas Gerais, Paraná, Mato Grosso, Goiás, Rondônia, PARÁ, Paraíba e Piauí) foram registrados como a residência nos últimos dez anos desses pacientes, com prevalência de São Paulo seguido da Bahia. Somente 7% dos pacientes apresentaram cirrose. Em Santa Catarina, dos hospitais avaliados, o HIJF registrou 14% de CHC e 40% de cirrose, sendo 54% dos pacientes do sexo feminino. AS regiões em que residiam a maior parte dos pacientes foram a Lesta(Grande Florianópolis) e do Vale (Vale do Itajaí) com 29% cada, e 28,6% foram à óbito. No HGCR e HU, 68% foram homens sendo registrados 16,5% de CHC e 51,7% de cirrose, 17,7% foram à óbito por CHC e a faixa etária da maioria dos casos foi dos 41 anos aos 80 anos. Quanto `a residência,56,6% eram da região do Vale do Itajaí e o maior n´mero de DH registrado, ocorreu noano de 1996(11%). A AFB1 pode estar presente em diversos alimentos e sendo esta comprovadamenta carcinogênica, é importante considerar que as crianças são mais susceptíveis aos efeitos tóxicos.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro Tecnológico. Programa de Pós-Graduação em Engenharia Química. / Made available in DSpace on 2012-10-22T22:12:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 233701.pdf: 6761763 bytes, checksum: b6dc1d517c055b53d3ef86256eb53763 (MD5) / As argilas são utilizadas como matéria-prima para diversas aplicações na indústria. Nestes processos industriais as argilas mais procuradas são as bentonitas. As bentonitas são argilas amplamente encontradas na natureza e possuem propriedades tecnológicas bastante atraentes para o desenvolvimento de produtos para as mais variadas áreas. As propriedades tecnológicas que mais despertam o interesse industrial são: (a) capacidade de troca de cátions, (b) grau de inchamento, e (c) alto poder de adsorção. Estas propriedades podem ser modificadas através de tratamentos térmicos e também por tratamentos químicos. Os métodos de obtenção de argilas organofílicas têm sido estudados extensivamente. As argilas organofílicas são argilas quimicamente modificadas sendo o agente transformador a espécie química de amina quaternária. O processo para obtenção de argilas organofílicas consiste na preparação de uma solução de sal quaternário de amônio que contém os cátions orgânicos. Esta solução é adicionada à suspensão de bentonita proporcionando assim a troca dos cátions trocáveis inorgânicos da bentonita pelos cátions trocáveis orgânicos da solução de sal quaternário. O Brasil possui depósitos de bentonitas policatiônicas na região nordeste nos estados da Paraíba, Piauí, Pernambuco e Bahia. Também na região sudeste nos estados de São Paulo e Minas Gerais. Na Região Sul no estado do Paraná também foram observadas jazidas de bentonita. A produção interna bruta de bentonita ainda é modesta. Em 2002 as reservas brasileiras de bentonita totalizaram 78 milhões de toneladas das quais 46,1% são relativos às reservas medidas. A produção nacional de bentonita bruta obteve um aumento expressivo de 62% e a beneficiada um acréscimo mais modesto de 9,1% por isso a exportação da bentonita brasileira é ainda pouco significativa. O Brasil continua importando cerca de 27% dessa matéria-prima principalmente de países da América latina como Argentina, de onde são importados 48% destes bens primários. Neste trabalho de tese três tipos de bentonitas de formações distintas foram usadas como matéria-prima para a obtenção de organofílicas. Uma bentonita nacional do estado do Paraná, município de Quatro Barras e duas outras importadas da Argentina. As bentonitas da Argentina são da província de Neuquén (região centro-oeste), e da província de San Juan (região oeste). O agente transformador utilizado foi um sal quaternário de amônio importado e comercializado pela Fluka, denominado cloreto de alquil benzil dimetil amônio ou cloreto de benzalcônio. O objetivo da pesquisa é estudar o grau de adsorção das bentonitas organofílicas desenvolvidas com relação às micotoxinas. Micotoxinas são poluentes orgânicos encontrados em grãos e rações administradas aos animais. Existem pelo menos 200 tipos de micotoxinas catalogadas. Dentre estas, 14 são carcinogênicas. Nesta tese dois tipos de micotoxinas chamadas Aflatoxina B1 e Fumonisina B1 foram estudadas. Elas são as de maior ocorrência no Brasil e em países da América latina. A etapa inicial do trabalho de tese foi realizar um estudo químico e mineralógico nas bentonitas naturais usando técnicas e métodos como análise química, difração de Raiox X, análises térmicas, densidade real, porosidade, microscopia eletrônica de varredura, espectroscopia na região do infravermelho e cromatografia líquida de alta eficienciência. A segunda etapa foi realizar a transformação organofílica utilizando o sal quaternário cloreto de benzalcônio. Na terceira etapa, um estudo químico e mineralógico foi realizado com o objetivo de verificar as transformações efetivadas com o processamento organofílico nas três bentonitas organofílicas desenvolvidas. E o teste de adsorção in vitru foi realizado nas amostras organofílicas. Os resultados mostram que as três bentonitas organofílicas desenvolvidas conseguem adsorver melhor as aflatoxinas B1 e fumonisinas B1 que antes do tratamento com o sal quaternário de amônio. Numa comparação entre as três bentonitas estudadas os melhores níveis de adsorção para as micotoxinas estudadas foram observados para a bentonita de Neuquén. Clays are used as row material for different applications in industrial processes. In addition, bentonites are mainly searched to use in these Bentonites are a kind of clay widely found in nature and they have technological properties being suitable for the development of products used in several areas. The main technological properties are: (a) cation exchange capacity, (b) swelling degree, and (c) high adsorption. These properties can be modified by way of thermal treatments and also by chemical ones. Methods to obtein organophilic clays have been studied deeply. Organophilic clays are obteined by modifying natural clays with chemical processes by using the quaternary amine. The obtention process of organophilic clays is made up of the preparation of a solution of ammonium quaternary salt which has organics cations. This solution is added to a bentonite suspention given, in this way, the interchange between inorganic interchanging cations of the bentonite and the organic ones of the solution of salt. Brazil has deposits of policationic bentonites in the northeast region in the states of Paraíba, Piauí, pernambuco and Bahia. In the southeast region in the states of São Paulo and Minas Gerais, too. In the south region, more precisely, in the states of Paraná deposits of bentonite were observed. However, the internal production is still modest. In 2002 the Brazilian reserves of bentonites were 78 millions of tons which 46,1% were relative to measured reserves. The national production of row bentonite has shown an important increase of 62%. An the other hand, the production of improved bentonites has had a modest increment of 9,1%. For this reason, the explotation of Brazilian bentonites is not very significant. Brazil imports almost 27% of this kind of clay, mainly of coutries of latin American as Argentina. In this Thesis, three kinds of bentonites were used as row material to obtain organophilic clays. One national bentonite from Paraná, Quatro Barras and two imported from Argentina. The Argentinian bentonites were from Neuqén province (West Center Region) and San Juan province (West Region). A imported ammonium quaternary salt which is called as dimethil benzil alquil ammonium chloride or benzalkonium chloride was used as transforming agent. The objective of this research is to study the degree of adsorption of the developed organophilic clays when they are used to adsorb mycotoxins. Mycotoxins are organic pollutes found in animal feed as for example corn grains. There are aproximately 200 sorts of identified mycotoxins. Among them, 14 are cancerogenic. The latter set, two mycotoxins were studied, namely Aflatoxin B1 and Fumonisin B1 since they appears frequently in Brazil and the rest of countries of latin America. First at all, the chemical and mineralogic study of the natural bentonites were performed by using methods and techniques as chemical analysis, X ray diffraction, thermal analysis, real density porosity, scanned electronic microseopy, infrared spectroscopy and high efficiency liquid chromatography. After that, the transformation in organophilic clay by using the benzalkonium chloride salt took place. Finaly, a chemical and mineralogic study was corried out in order to verify the organic transformations into the three developed organophilic bentonites. The in vitru adsorption test was made with the organophilic samples. Its results showed that the three organophilic bentonites adsorb Aflatoxins B1 and Fumonisins B1, being their adsorption degrees larger than the respective ones for the natural bentonites. By comparing these results, it is possible to see that the better result was obtained for the bentonite of Neuquén.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Físicas e Matemáticas, Programa de Pós-Graduação em Química, Florianópolis, 2015. / Made available in DSpace on 2016-10-19T13:12:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 338842.pdf: 2155823 bytes, checksum: ad41ab956f2c09fb498e2bc0e962248f (MD5) Previous issue date: 2015 / Neste trabalho foi proposto, pela primeira vez, a combinação simultânea das técnicas de microextração em fase líquida suportada em fibra oca (HF-LPME) e microextração líquido-líquido dispersiva (DLLME) para aplicação em amostras líquidas. Dois estudos foram desenvolvidos utilizando a metodologia proposta, a qual foi denominada de DLLME suportada com membrana oca (HF-DLLME). O primeiro estudo foi à determinação de aflatoxinas (AFB1, AFB2, AFG1 e AFG2) em suco de soja por HPLC-FLD. A principal vantagem desta abordagem foi o uso de pequenas quantidades de solventes orgânicos e a não utilização de solventes clorados. As condições ótimas de extração foram: 1-octanol imobilizado nos poros da fibra oca de polipropileno; tolueno e acetona na proporção 1:5 como solventes extrator e dispersor, respectivamente, volume total da mistura de solventes extrator:dispersor igual a 100 µL, adição de NaCl a 2% do volume da amostra e tempo de extração 60 min. As condições ideais para a dessorção líquida foram de 150 µL de acetonitrila:água (50:50 v/v) e tempo de dessorção de 20 min em banho de ultrassom. A faixa linear variou entre 0,03-21 µg L-1, com coeficientes de correlação R2 variando 0,9940-0,9995. . Os limites de detecção e quantificação variaram entre 0,03-0,27 µg L-1 e 0,1-0,9 µg L-1, respectivamente. As recuperações dos analitos variaram entre 72-117% e precisão entre 12 e 18%. O segundo estudo foi a determinação direta de 3 agrotóxicos (parationa metílica, difenoconazol e clorpirifós) em suco de uva e detecção e quantificação por cromatografia líquida acoplada com detector por arranjo de diodos. A condição ideal de extração foi alcançada através do preenchimento dos poros da parede da membrana com dodecanol e usando hexano/acetona como solventes de extração/dispersão. A adição de sal na amostra teve um efeito negativo sobre a eficiência da extração dos analitos e o tempo de extração ótimo foi de 60 min. O volume de hexano/acetona e o pH da amostra foram fatores estudados que não afetaram significativamente o sinal analítico dos compostos nos níveis estudados. Por conseguinte, uma quantidade intermediária destes solventes (250 µL; 1:7,5 v/v) e pH 6 foram selecionados como condições ótimas de extração. A condição ideal de dessorção foi obtida com acetonitrila como solvente e 10 minutos de tempo de dessorção em banho de ultrassom. A faixa linear de trabalho variou entre 58 a 500 µg L-1 (parationa metílica), 62-500 µg L-1 (difenoconazol) e 107-500 µg L-1 (clorpirifós), com coeficientes de correlação que variam 0,9980-0,9942. Os limites de detecção e de quantificação encontrados foram, respectivamente, 17 e 58 µg L-1 paraparationa metílica, 19 e 62 µg L-1 para difenoconazol e 32 e 107 µg L-1 para o clorpirifós. A precisão inter ensaios apresentou valores de desvio padrão relativo entre 3,5 e 11,2%. De acordo com os resultados, a nova combinação das técnicas de HF e DLLME mostrou-se como um procedimento eficiente para a extração de micotoxinas e agrotóxicos em sucos de soja e de uva, respectivamente. A HF-DLLME, comparada com as técnicas tradicionais de preparo de amostra, apresenta-se como uma excelente alternativa para determinação de micotoxinas e agrotóxicos devido a algumas características, tais como: baixo consumo de solvente orgânico, não uso de solventes clorados, não necessidade de centrifugação, baixo custo e fácil aplicação. Apesar de a HF-DLLME apresentar tempo de análise longo (70-90 min.) ela permite a extração simultânea de amostras, aumentando a frequência analítica da técnica. Além disso, esta nova técnica tem um grande potencial para uso em sistemas automatizados como Well Blade 96 o que acarretaria menor tempo de análise para uma amostra (1-2 min.).<br> / Abstract : This work was proposed for the first time, developing a sample preparation method based on simultaneous combination of techniques between hollow-fiber-supported liquid membrane (HF-LPME) and dispersive liquid-liquid microextraction (DLLME) for direct application in liquid matrices. Two studies were developed, first to determination of aflatoxins (AFB1, AFB2, AFG1 and AFG2) in soybean juice by HPLC-FLD. The main advantage of this approach is the use of non-chlorinated solvent and small amounts of organic solvents. The optimum extraction conditions were 1-octanol as immobilized solvent; toluene and acetone at 1:5 ratio as extraction and disperser solvents (100 µL), NaCl at 2% of the sample volume and extraction time of 60 min. The optimal condition for the liquid desorption was 150 µL acetonitrile:water (50:50 v/v) and desorption time of 20 min. The linear range varied from 0.03 to 21 µg L-1, with R2 coefficients ranging from 0.9940 to 0.9995. The limits of detection and quantification ranged from 0.01 µg L-1 to 0.03 µg L-1 and from 0.03 µg L-1 to 0.1 µg L-1, respectively. Recovery tests ranged from 72 to 117% and accuracy between 12 and 18%. The second study was determination of 3 pesticides directly in grape juice, using HF-DLLME method and detection and quantification were performed by liquid chromatography with diode array detection. The optimum extraction condition was reached by filling the pores of the membrane wall with dodecanol and using hexane/acetone as extraction/dispersion solvents. Salt addition had a highly negative effect on the extraction efficiency and the optimum extraction time was 60 min. The volume of hexane/acetone mixture and the sample pH did not affect the signal at the levels studied. Therefore, an intermediate amount of these solvents (250 µL; 1:7.5 v/v) and pH 6 were selected. The optimum desorption condition was obtained with acetonitrile and 10 min of desorption time. The linear working range varied from 58 to 500 µg L-1 (parathion-methyl), 62?500 µg L-1 (difenoconazole) and 107?500 µg L-1 (chlorpyrifos), with correlation coefficients ranging from 0.9980?0.9942. The limits of detection and quantification found were, respectively, 17 and 58 µg L-1for parathion-methyl, 19 and 62 µg L-1for difenoconazole and 32 and 107 µg L-1for chlorpyrifos. The relative standard deviation ranged between 3.5 and 11.2%. According to results, the new combination of HF and DLLME procedure presented efficient data for extraction of mycotoxins and pesticides in soybean and fruit juices, respectively. The HF-DLLME is an excellent alternative due to some characteristics such as low organic solvent consumption, no use ofchlorinate solvents, centrifugation is not required, low cost and easy application. Furthermore, this new technique has great potential for use in automated systems.

Orientador: Hideko Yamanaka / Coorientador: Antonio Aparecido Pupim Ferreira / Banca: Zeki Naal / Banca: Lauro Tatsuo Kubota / Resumo: Muitas espécies de fungos pertencentes ao gênero Aspergillus sp. são capazes de contaminar e produzir micotoxinas em grãos e cereais, sendo responsáveis por doenças em animais e humanos. As espécies Aspergillus flavus e Aspergillus parasiticus são produtoras das aflatoxinas, que têm recebido grande atenção, devido a seus efeitos tóxicos no organismo como carcinogenicidade e mutagenicidade. Dentre os diversos tipos de aflatoxinas, destaca-se a aflatoxina B1, devido à alta potencialidade tóxica. Várias técnicas têm sido aplicadas na detecção desta toxina e o desenvolvimento de imunossensores eletroquímicos tem sido uma alternativa, devido à simplicidade, especificidade e alta sensibilidade. Superfícies metálicas de ouro, como CD-Rs de ouro (Au-CDtrodos), têm sido amplamente utilizadas como transdutores para a construção de imunossensores, devido à capacidade de imobilizar moléculas biológicas na presença ou ausência de monocamadas auto-organizadas ("selfassembled monolayers" - SAM). O presente trabalho relata o desenvolvimento de imunossensores, amperométrico e impedimétrico, para detecção de aflatoxina B1 em alimentos empregando CDtrodos de ouro. As etapas de construção dos imunossensores incluem as modificações do transdutor de ouro com p-aminotiofenol (p-ATP), proteína A ou ácido lipóico, seguido da imobilização do anticorpo anti-AFB1 e imunoensaios com o antígeno (AFB1). Empregando técnicas eletroquímicas (espectroscopia de impedância eletroquímica e voltametria cíclica) definiu-se que a SAM de ácido lipóico ativada com EDC/NHS foi o modificador que apresentou maior eficiência para a imobilização do anticorpo anti-AFB1. A partir de estudos quimiométricos, por meio do planejamento fatorial completo, definiram-se as melhores condições para o desenvolvimento do imunossensor:... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Many fungi species belonging to the genus Aspergillus sp. are able to infect and produce mycotoxins in grains and cereals, they are responsible for diseases in animals and humans. Aspergillus flavus and Aspergillus parasiticus are producers of aflatoxina, which have received great attention, due to toxic effects on the organism, such as carcinogenicity and mutagenicity. Among the different types of aflatoxins, aflatoxina B1 stands out due to high toxic potential. Several techniques have been applied in the detection of this toxin and the development of electrochemical immunosensors has been an option due to simplicity, specificity and high sensitivity. Metallic surfaces of gold, as gold CD-R (Au-CDtrodes), have been widely used as transducers for construction of immunosensors, due to the ability to immobilize biological molecules in presence or absence of self-assembled monolayers (SAM). This work describes the development of immunosensors, amperometric and impedimetric, for aflatoxin B1 detection in foods using gold CDtrodes. The construction steps of the immunosensors include modifications of the gold transducer with p-aminothiophenol (p-ATP), protein A or lipoic acid, followed by anti-AFB1 immobilization and immunoassays with antigen (AFB1). Employing electrochemical techniques (electrochemical impedance spectroscopy and cyclic voltammetry) was defined that the lipoic acid SAM activated with EDC/NHS was the modifier with the highest efficiency for the anti-AFB1 antibody immobilization. Using chemometric studies, through the full factorial design, was defined the best conditions for the immunosensor development: anti-AFB1 antibody at 1:2000 dilution and surface blocking with 0.5% bovine serum albumin, both with incubation 1 hour and antibody- AFB1 antigen immunoreaction for 30 minutes... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: João Domingos Biagi / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Agricola / Made available in DSpace on 2018-07-21T17:50:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Alves_DeniseGomes_M.pdf: 1921540 bytes, checksum: 2a2b6fbe175ff45f5c6575f7b8839b69 (MD5) Previous issue date: 1996 / Resumo: Devido aos graves problemas que o amendoim enfrenta, com relação ao desenvolvimento de fungos, e visto que o produto só pode ser exportado se obedecer os limites aceitáveis de aflatoxina, este trabalho teve por finalidade controlar o aparecimento do fungo Aspergil/us flavus, através do processo de secagem e a produção da aflatoxina durante o período de armazenamento. Os tratamentos utilizados para o projeto de pesquisa foram: secagem artificial- 1 nível de temperatura (400C), 2 fluxos de ar (12.5 e 25 m3 de ar! mino m2), 2 alturas de camada para secagem de camada estática (0,5 e i,o m), 1 altura de camada para secagem de camada em movimento (0,25 m), secagem natural e o armazenamento foi feito com 2 tipos de embalagem (sacos plásticos e sacos de aniagem).Foi utilizado o método de SOARES & RODRIGUEZ-AMAYA (1989) para a determinação"de aflatoxina e o método ASAE S410T para determinar a umidade. As amostras foram armazenadas em prateleiras durante oito meses e analisadas mensalmente com a determinação de umidade e quantidade de aflatoxina. Pela observação dos dados concluiu-se que: a secagem artificial foi mais eficiente que a secagem natural; o fluxo de ar maior toma o processo de secagem mais rápido; a embalagem de plástico mantém o produto mais úmido; os tratamentos que não apresentavam nível de aflatoxina antes do processo de secagem, mantiveram-se isentos de toxina durante o armazenamento, tanto nas embalagens de plástico, quanto nas de aniagem; nos tratamentos que apresentaram aflatoxina desde o processo de secagem, a embalagem não foi capaz de impedir a produção de aflatoxina; a secagem também não impediu a produção de aflatoxina; o produto armazenado em embalagem plástica sotTe menor influência do ambiente / Abstract: Due to the serious problems that the peanut meets because fungus growth and the product can only be exported if it follows the acceptable limits of aflatoxin. The objectives of this work were to analyse the influence of the drying process on the AspergiJ/us flavus L. appearing and the aflatoxin production during the storage period. The treatments utilized were: I level of temperature (400 C), 2 air flows (12,5 e 25 m3 of air/min.m2), 2 drying bed depths for static drying ( 0,5 e 1,0 m), 1 drying bed depths for continuous drying (0,25 m) and the storage was done with 2 types of package (plastic and burlap bags). There was utilized the SOARES & RODRIGUEZ-AMAYA's method (1989) to determinate the aflatoxin and the ASAE S41OT's method to determinate the moisture contento The samples were stored during eight months and the moisture content and aflatoxin quantity were analysed month1y. The results indicated that the artificial drying was more efficient than natural drying; the drying time was lower for the higher air flow, plastic package suffers less influence of the environrnent. The peanut that didn't present aflatoxin before the drying process, were kept ftee of toxin during the storage, for both plastic and burlap bags. For the treatments that presented aflatoxin before the drying process, neither drying nor package type prevented the aflatoxin production. It is important to dry peanut as soon as it is harvested to get a better quality product / Mestrado / Pre-Processamento de Produtos Agropecuarios / Mestre em Engenharia Agrícola