Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2016-03-28T14:22:34Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1099004 bytes, checksum: 5e0e6ab11253361dd7a3dae9321c66a7 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-03-28T14:22:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1099004 bytes, checksum: 5e0e6ab11253361dd7a3dae9321c66a7 (MD5) Previous issue date: 2016-02-19 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Dois experimentos foram conduzidos para avaliar os efeitos da redução da proteína bruta (PB) da ração, corrigindo-se ou não os níveis de energia líquida (EL), sobre o desempenho e características de carcaça de suínos. No experimento I, foram utilizados 72 suínos híbridos comerciais, machos castrados, selecionados para deposição de carne, com peso inicial de 60,0 ± 2,41 kg. Os animais foram distribuídos em delineamento inteiramente casualizado, com quatro tratamentos (T1 - 17,85% de PB e 2589 kcal de EL/kg; T2 - 13,40% de PB e 2631 kcal de EL/kg; T3 - 13,40% de PB e 2589 kcal de EL/kg; T4 - 13,40% de PB e 2589 kcal de EL/kg, alimentação pareada ao T1), nove repetições e dois animais por unidade experimental. No experimento II, foram utilizados 64 suínos, híbridos comerciais, machos castrados, selecionados para deposição de carne, com peso inicial de 90 ± 2,96 kg. Os animais foram distribuídos em delineamento inteiramente casualizado, com quatro tratamentos (T1 -16,62% de PB e 2604 kcal de EL/kg; T2 - 12,34% de PB e 2645 kcal de EL/kg; T3 - 12,34% de PB e 2604 kcal de EL/kg; T4 - 12,34% de PB e 2604 kcal de EL/kg, alimentação pareada ao T1), oito repetições e dois animais por unidade experimental. No experimento I, não houve efeito (P>0,05) dos níveis de PB e de EL da ração sobre os parâmetros de desempenho (peso médio final, PMF; consumo de ração médio diário, CRD; ganho de peso médio diário, GPD; conversão alimentar, CA; consumo de energia líquida, CEL e consumo de lisina digestível, CLD) e de características de carcaça (área de olho de lombo, AOL e espessura de toucinho, ET) avaliados. No experimento II, Os suínos alimentados com a ração com 12,34% de PB e 2645 kcal de EL/kg tiveram maior (P<0,05) GPD comparado aos animais alimentados com ração sem redução de PB (16,62%) e 2604 kcal de EL/kg. Os animais que consumiram as rações contendo 12,34% de PB e 2604 kcal de EL/kg tiveram valor de GPD intermediário aos animais dos demais tratamentos. Não foi observado efeito (P>0,05) dos níveis de PB e de EL da ração sobre os demais parâmetros de desempenho (PMF, CRD, CA, CEL e CLD) e de características de carcaça avaliados (AOL e ET). Para suínos dos 60 aos 90 kg, a redução da PB da ração de 17,85 para 13,40%, mantendo- se ou não o nível de EL da ração, não compromete o desempenho, nem as características de carcaça dos animais. Para suínos dos 90 aos 110 kg, a redução da PB da ração de 16,62 para 12,34%, mantendo-se o mesmo nível de EL (2604 kcal/kg) da ração com 16,62% de PB, não compromete o desempenho nem as características de carcaça dos animais. / Two experiments were conducted to evaluate the effects of low-crude protein diets with or without correction of net energy (NE) levels on swine performance and carcass traits. In the first experiment, 72 crossbred barrows selected for meat deposition with initial body weight of 60.0 ± 2.41 kg were used. A randomized blocks experimental design with four treatments was used (T1 – 17.85% CP and 2,589 kcal NE/kg; T2 – 13.40% CP and 2,631 kcal NE/kg; T3 - 13.40% CP and 2,589 kcal NE/kg; T4 – 13.40% CP and 2,589 kcal NE/kg); nine replications with two animals each were used. There was no effect (P>0.05) of CP and NE levels in the diet on the parameters evaluated. For swine weighing 60 to 90 kg, reduction from 17.85% to 13.40% in CP, while keeping the NE constant in 2,589 kcal/kg did not affect animal performance and carcass traits. In the second experiment, 64 crossbred barrows selected for meat deposition with initial weight of 90.0 ± 2.96 kg were used. A randomized blocks experimental design with four treatments were used (T1 -16.60% CP and 2604 kcal NE/kg; T2 – 12.32% CP and 2,645 kcal NE/kg; T3 – 12.32% CP and 2,604 kcal de NE/kg; T4 – 12.32% de CP and 2,604 kcal NE/kg); eight replications with two animals each were used. Pigs fed the diet containing 12.34% CP and 2,645 kcal NE/kg had greatest (P<0.05) average daily gain (ADG) compared to pigs fed the diet with no reduction on CP (16.62% CP and 2,604 kcal/NE kg). Diets containing 12.34% CP and 2,604 kcal/kg resulted in pigs having an intermediate ADG, compared to pigs in other treatments. There was no effect (P>0.05) of dietary CP or NE levels on any other evaluated parameters. Reduction from 16.62% to 12.32% in CP, while keeping the NE level constant in 2,604 kcal/kg, did not affect animal performance and carcass traits of swine weighing 90 to 110 kg.

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2016-06-06T12:52:06Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1595035 bytes, checksum: 9d032311a25a396e04439a8bc0418a0f (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-06T12:52:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1595035 bytes, checksum: 9d032311a25a396e04439a8bc0418a0f (MD5) Previous issue date: 2016-02-18 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / O presente trabalho foi desenvolvido baseado em trés estudos. 0 obj etivo do primeiro estudo foi avaliar os efeitos da substituioao parcial do milho por glicerina sobre a fermentaoao ruminal utilizando urn sistema de cultura continua de fluxo duplo. Seis fermentadores (1,223 i 21 ml) foram utilizados em urn delineamento em quadrado latino 3X3 replicado, corn trés periodos de 10 d cada, 7 d para adaptaoao a dieta e 3 d para coletas de amostras. Todas as dietas continham 75% de concentrado e trés niveis de glicerina na dieta (0, 15, e 30% com base na matéria seca), totalizando seis repetiooes por tratamento. Os niveis de glicerina nao afetaram a digestibilidade aparente da MS (PLm = 0,13; PQuad, = 0,40), MO (PLin. = 0,72; PQuad_ = 0,15), FDN (PLin, = 0,38; PQuad, = 0,50) e FDA (PUD, = 0,91; Pouad. = 0,18). Além disso, a inclusao de glicerina nao afetou a digestibilidade verdadeira da MS (PLin, = 0,35; PQuad_ = 0,48), e MO (Pm, = 0,08; PQuad, = 0,19). As concentraooes de propionato de (P 0,01) e acidos graxos volateis totais (P < 0,01) aumentaram de forma linear. .121 as concentraeoes de acetato (P < 0,01), butirato (P = 0,01), iso-valerato (P < 0,01), e acidos graxos volateis de cadeia ramificada, assim como a relaoao acetato: propionato (P < 0,01) diminuiram com a inclusao de glicerina. Foi observado aumento linear na concentraoao de N- NH3 dos efluentes (P < 0,01) e no fluxo de N-NH3 (P < 0,01), deVido a inclusao de glicerina nas dietas. A digestibilidade da proteina bruta (P = 0,04) e o fluxo de N microbiano (P 0,04) foram maiores no tratamento controle em comparaoao com os outros tratamentos e responderam de forma quadratica com a inclusao de glicerina. Além disso, a inclusao de glicerina diminuiu linearmente (P = 0,02) 0 fluxo de N nao amoniacal. Os niveis de glicerina nao afetaram os fluxos de N total (Pm, = 0,79; PQuad, = 0,35), e N dietético (PLin, = 0,99; PQuad, = 0,07), assim como a eficiéncia microbiana (PL;n = 0,09; PQuad. = 0,07). Estes resultados sugerem que substituioao ao milho seco por glicerina pode mudar a fermentaoao ruminal, aumentando a concentraoao de acidos graxos volateis totais e propionato, sem afetar a eficiéncia microbiana, o que pode melhorar o potencial gliconeogénico em dietas para bovinos de corte. 0 obj etivo do segundo estudo foi avaliar os efeitos da substituioao do milho seco por glicerina bruto sobre o consumo, digestibilidade aparente, desempenho e caracteristicas de carcaca de novilhos em terminacao. O experimento foi delineado em blocos casualizados, com com 25 d para adaptacao e 100 d para a coleta de dados, onde 3.640 touros da raca Nelore (367 i 36,8 kg; 18 i 3 meses) foram blocados por peso corporal e alocados em 20 baias. Os animais receberam, aleatoriamente, um dos quatro tratamentos: 0, 5, 10, e 15% (com base na matéria seca) de inclusao de glicerina bruto na dieta. Os consumos de matéria seca, matéria organica e fibra em detergente neutro diminuiram linearmente (P 0,05) com a inclusao de glicerina bruto. No entanto, os niveis de glicerina bruto nao afetaram (P > 0,05) 0 consumo de proteina bruta, carboidratos nao fibrosos e nutrientes digestiveis totais. As digestibilidades da matéria seca, matéria organica, fibra em detergente neutro e nutrientes digestiveis totais aumentaram de forma quadratica (P < 0,05) com a inclusao de glicerina bruto na dieta. Inclusao de glicerina bruto nao alterou o consumo de matéria seca digestivel, ganho médio diario, peso corporal final, ganho de carcaca, rendimento de carcaca, eficiéncia alimentar, area muscular do Longissimus thoracis, espessuras de gordura subcutanea e espessuras de gordura subcutanea da garupa (P > 0,05). Estes resultados sugerem que o glicerina bruto pode ser incluido em dietas de acabamento de bovinos de corte em niveis de até 15%, sem prejudicar o desempenho e as caracteristicas de carcaca. Para 0 terceiro estudo, cinco experimentos in vitro foram conduzidos para avaliar a energia metabolizavel e as mudancas na fermentacao ruminal, producao total de gases e concentracao de gases do efeito estufa da glicerina, comparada ao milho e ao amido, bem como sua inclusao em dietas de terminacao para gado de corte. Para 0 Exp. 1, um sistema de 24 garrafas (AnkomRF Gas Production System, Ankom technology, NY, USA) foi usado em 4 corridas consecutivas de 48 h. Os tratamentos foram trés diferentes alimentos: milho, glicerina e amido. A producao total de gases as 24 h, a concentracao de acetato e a relacao acetato: propionato diminuiu (P < 0,01) somente para glicerina. A producao total de gases as 48 h foi maior (P < 0,01) para o milho e semelhante entre glicerina e amido. O tratamento com amido teve a menor (P < 0,01) concentracao total de AGV. O milho apresentou a menor concentracao de propionato (P < 0,01). A energia metabolizavel foi maior (P < 0,01) para o milho e semelhante entre glicerina e amido. Para 0 Exp. 2, um total de 20 garrafas (155ml) foram usadas em 4 corridas consecutivas de 48 h. Os tratamentos foram os mesmos do Exp. 1. A concentracao de CH4 aumentou (P < 0,01) somente para a glicerina. A producao de Co2 em ml/g foi maior (P < 0,01) para o milho e semelhante para glicerina e amido. Comparado com a glicerina, a concentracao de acetato (P < 0,01) e a relacao acetato: propionato (P < 0,01) foram maiores para amido e milho, enquanto a as concentracoes de butirato e valerato foram maiores (P < 0,01) para a glicerina. Para 0 Exp. 3, o mesmo sistema do Exp. 1 foi usado em 4 corridas consecutivas de 48 h. Os tratamentos foram: inclusao de 0, 100, 200 e 30og/kg de MS de glicerina substituindo o milho em dietas de terminacao de bovinos de corte. A inclusao de glicerina nao afetou (P > 0,05) as producoes de gases as 24 e 48 h, 0 pH final, N-NH3, AGV total, e as concentracoes de propionato e butirato. A inclusao de glicerina diminuiu linearmente a concentracao de acetato (P = 0,03) e a relacao acetato: propionato (P = 0,04). Para 0 Exp. 4, um total de 25 garrafas (155ml) foram usadas em 4 corridas consecutivas de 48 h. Os tratamentos foram os mesmos do Exp. 3. A inclusao de glicerina nao afetou (P > 0,05) as concentracoes de CH4, Co2, AGV totais, propionato, butirato, relacao acetato: propionato e pH final. Foi observada diminuicao linear (P = 0,04) na concentracao de acetato deVido a inclusao de glicerina nas dietas. Para 0 Exp. 5, dois sistemas de quatro vasos de digestao de 4 L (Daisyll system, Ankom technology, NY, USA) foram usados em duas corridas consecutivas de 48 h. Os tratamentos foram: feno de orchard (0,4 g/saco), milho (0,4 g/saco), feno de orchard (0,4 g/saco) + glicerina (0,2 g/saco) e milho (0,4 g/saco) + glicerina (0,2 g/saco). O feno de orchard com glicerina apresentou a menor (P 0,01) digestibilidade in Vitro da MS, seguido pelo feno de orchard sem adicao de glicerina e pelos tratamentos com milho. A digestibilidade in Vitro da MS nao diferiu (P > 0,05) entre os tratamentos com milho sem on com adicao de glicerina. Como conclusao, sob essas condicoes experimentais, a glicerina contribuiu mais para o aumento da metanogenese do que carboidratos, mas efetivamente substituiu parcialmente o milho como fonte de energia em dietas para bovinos de corte. / The present work was developed based on three studies. The objective of the firs study was to evaluate the effects of partially replacing dry ground corn with glycerin on ruminal fermentation using a dual-flow continuous culture system. Six fermenters (1,223 i 21 ml) were used in a replicated 3x3 Latin square arrangement with three periods of 10 d each, with 7 d for diet adaptation and 3 d for sample collections. All diets contained 75% concentrate and three dietary glycerin levels (0, 15, and 30% on dry matter basis), totaling six replicates per treatment. Glycerin levels did not affect apparent digestibility of DM (PLin. = 0.13; PQuad, 0.40), OM (Pm, = 0.72; PQuad, = 0.15), NDF (PLin. = 0.38; PQuad. = 0.50) and ADF (PLin- 0.91; PQuad. = 0.18). Also, glycerin inclusion did not affect true digestibility of DM (PLin. 0.35; PQuad_ = 0.48), and OM (Pm. = 0.08; PQuad_ = 0.19). Concentrations of propionate (P 0.01) and total volatile fatty acids (P < 0.01) increased linearly and concentrations of acetate (P < 0.01), butyrate (P = 0.01), iso-valerate (P < 0.01), and total branched-chain volatile fatty acids, as well as the acetate: propionate ratio (P < 0.01) decreased with glycerin inclusion. Linear increases on NH3-N concentration in digesta effluent (P < 0.01) and on NH3-N flow (P < 0.01) were observed due to glycerin inclusion in the diets. Crude protein digestibility (P 0.04) and microbial N flow (P = 0.04) were greater in the control treatment compared with the other treatments and responded quadratically with glycerin inclusion. Furthermore, the inclusion of glycerin linearly decreased (P = 0.02) non- ammonia N flow. Glycerin levels did not affect the flows of total N (PLin. = 0.79; PQuad. = 0.35), and dietary N (PLin, = 0.99; PQuad 0.07), as well as microbial efficiency (Put, = 0.09; PQuad. = 0.07). These results suggest that partially replacing dry ground corn with glycerin may change ruminal fermentation, by increasing total volatile fatty acids, and propionate concentration without affecting microbial efficiency, which may improve glucogenic potential of beef cattle diets. The second study was developed aiming to evaluate the effects of replacing dry ground corn with crude glycerin on intake, apparent digestibility, performance, and carcass characteristics of finishing beef bulls. A completely randomized block design experiment with 25 d for adaptation and 100 d for data collection was conducted, in which 3,640 Nellore bulls (367 ± 36.8 kg; 18 ± 3 mo) were blocked by body weight and assigned to 20 pens. Bulls were randomly assigned to one of four treatments: 0, 5, 10, and 15% (dry matter basis) of crude glycerin in the diet. Intake of dry matter, organic matter, and neutral detergent fiber decreased linearly (P < 0.05) with crude glycerin inclusion. However, crude glycerin levels did not affect (P > 0.05) intakes of crude protein, non-fiber carbohydrates, and total digestible nutrients. Digestibility of dry matter, organic matter, neutral detergent fiber, and total digestible nutrients increased quadratically (P < 0.05) with the inclusion of crude glycerin in the diet. Crude glycerin inclusion did not change the intake of digestible dry matter, average daily gain, final body weight, carcass gain, carcass dressing, gain-to-feed ratio, Longissimus thoracis muscle area, and back and rump fat thicknesses (P > 0.05). These results suggest that crude glycerin may be included in finishing beef diets at levels up to 15% without impairing performance and carcass characteristics. For the third study, five in vitro experiments were conducted to evaluate the metabolizable energy and changes on ruminal fermentation, total gas production and greenhouse gases concentration of glycerin compared to corn and starch, as well as when glycerin was added in finishing beef diets. For Exp. 1, a 24 bottles system (AnkomRF Gas Production System, Ankom technology, NY, USA) was used in 4 consecutive runs of 48 h. The treatments were three different feedstuffs: corn, glycerin, and starch. The 24 h total gas production, acetate concentration, and acetate: propionate ratio decreased (P < 0.01) only with feeding glycerin. The 48 h total gas production was highest (P < 0.01) for corn, and similar between glycerin and starch. The starch treatment presented the lowest (P = 0.01) total VFA concentration. Corn presented the lowest propionate concentration (P < 0.01). The metabolizable energy was highest (P < 0.01) for corn, and similar between glycerin and starch. For Exp. 2, the same system of Exp. 1 was used in 4 consecutive runs of 48h. The treatments were: inclusion of 0, 100, 200, and 30og/kg DM of glycerin replacing corn in finishing beef diets. Glycerin levels did not affect (P > 0.05) 24 h and 48 h total gas production, final pH, NHg-N, total VFA, propionate, and butyrate concentrations. The inclusion of glycerin linearly decreased acetate concentration (P 0.03) and acetate: propionate ratio (P = 0.04). For Exp. 3, a total of 20-serum bottles (155 mL) were used in 4 consecutive runs of 48h. The treatments were the same of Exp. 1. The CH4 concentration increased (P < 0.01) only with feeding glycerin. The Co2 in ml/g was higher (P < 0.01) for corn, but similar for glycerin and starch. The pH decreased (P < 0.01) only with feeding starch. Different feedstuffs had no effect (P > 0.05) on total VFA, and propionate concentration. Compared with glycerin treatment, acetate concentration (P 0.01) and acetate: propionate ratio (P = 0.01) were higher for corn and starch, whereas butyrate and valerate concentrations were higher (P = 0.01) for glycerin. For Exp. 4, a total of 25-serum bottles (155 mL) were used in 4 consecutive runs of 48h. The treatments were the same of Exp. 2. The glycerin inclusion did not affect (P > 0.05) the concentrations of CH4, Co2, final pH, and total VFA, propionate, butyrate, and acetate: propionate ratio. A linear decrease of acetate concentration (P = 0.04) was observed due to inclusion of glycerin in the diets. For Exp. 5, two systems of four 4-L digestion vessels (Daisyll system, Ankom technology, NY, USA) were used in two consecutive runs of 48 h. The treatments were: orchard hay (0.4 g/bag), corn (0.4 g/bag), orchard hay (0.4 g/bag) + glycerin (0.2 g/bag) and corn (0.4 g/bag) + glycerin (0.2 g/bag). Orchard hay with glycerin inclusion presented lowest (P < 0.01) in vitro dry matter digestibility followed by orchard hay without glycerin, and corn treatments. There was a lack of effects for in vitro dry matter digestibility (P > 0.05) between corn with or without glycerin. We concluded that, under these experimental conditions, glycerin contributed more to the enhancement of methanogenesis than carbohydrates, but effectively replaced dietary corn as energy source at up to 30og/kg of the diet.

O trabalho teve por finalidade pesquisar, quantitativamente, a ocorrência de aflatoxinas (B1, B2, G1, G2) e fumonisinas (B1 e B2) em alimentos industrializados à base de milho comercializadas nos municípios de Pirassununga, Porto Ferreira, Leme e Araras, Estado de São Paulo e milho em grão utilizado na fabricação de ração para animais de companhia (PET) coletado no município de Porto Ferreira, Estado de São Paulo. Para isto, foram colhidas, no período de setembro de 2006 a fevereiro de 2007, milho em grão, fubá e farinha de milho, pertencentes a quatro diferentes marcas comerciais, totalizando 72 amostras. Para ração animal, foram colhidas 24 diferentes amostras de milho em grão no período de março a junho/2008 de diferentes produtores rurais. A determinação de aflatoxinas e fumonisinas foi efetuada através de cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). Das 24 amostras comerciais analisadas, 23 de fubá (95,80%) e 20 de farinha de milho (83,30%), apresentaram concentração total de aflatoxinas abaixo de 5 µg/kg, apenas uma amostra de milho em grão (4,20%) apresentou níveis totais acima do permitido pelo legislação brasileira (20 µg/kg). Para fumonisinas, 47 amostras (65,30%) apresentaram níveis acima dos limites de detecção (30 µg/kg), sendo que 15 amostras de milho em grão (62,50%), 16 de farinha de milho (66,70%), e 15 de fubá (62,50%), apresentaram-se positivas para FB1. Em relação ao milho destinado à fabricação de ração animal, 100% das amostras analisadas apresentaram concentração total de aflatoxinas abaixo de 5 µg/kg e 100% apresentaram-se positivas para FB1. Os resultados do estudo foram utilizados para estimar o grau de exposição humana às aflatoxinas e fumonisinas, considerando as altas concentrações encontradas em produtos de milho e derivados comercializados na região de Pirassununga. / The objective of this study was to verify the occurrence of aflatoxins (B1, B2, G1, G2) and fumonisins (B1 e B2) in industrialized foods made with corn commercially traded in the cities of Pirassununga, Porto Ferreira, Leme and Araras, state of São Paulo, and corn used for the manufacture feeds intended for pet feeding in Porto Ferreira City, São Paulo State. Seventy-two samples of corn kernels, corn meal and corn flour of four different commercial brands were collected from September 2006 to February 2007. In the case of pet feeding, 24 samples of corn kernels regarding different rural producers were collected from March to June 2008. Analysis of aflatoxins and fumonisins were accomplished by high performance liquid chromatography (HPLC). From 24 commercial samples analyzed, 23 of corn meal (95.80%) and 20 of corn flour (83.30%) showed total aflatoxins levels below 5 µg/kg, and only one sample of corn in grain (4.20%) with total aflatoxins concentration above the tolerance limit adopted by Brazilian regulations (20 µg/kg). As for fumonisins, 47 (65.30%) samples showed detectable levels (>30 µg/kg), being 15 samples of corn in grain (62.50%), 16 of corn flour (66.70%), and 15 of corn meal (62.50%) positive samples for FB1. In the case of corn used as ingredient for pet feeds, 100% of analyzed samples showed total aflatoxins levels below 5 µg/kg, and 100% were positive for FB1. The results of this study were used for estimation of the human exposure levels to aflatoxins and fumonisins, taking into account the high concentrations found in corn and corn-based products in the region of Pirassununga.

Com o objetivo de avaliar a ingestão calórica e características fecais de cães adultos em manutenção e em atividade, dois grupos de animais foram utilizados, sendo o primeiro grupo composto por 4 cães ativos da raça Border Collie e o segundo composto por 14 cães de raças variadas. Foram fornecidos dois tipos de alimentos comerciais secos, um deles considerado superpremium (S) e o outro considerado popular (P). O experimento teve duração de 40 dias, e os resultados mostraram que o alimento S produz menor peso fecal e consistência mais firme, enquanto que o alimento P obteve peso fecal maior e consistência menos firme. Além disso, os animais ativos necessitam de maior demanda energética para o seu conforto metabólico do que os animais inativos, apesar de não terem perdido peso vivo e o escore corporal não ter sido modificado. / The aim of this study was to evaluate the energy comsumption and faecal characteristics of the adult dogs in maintenance and agility, two groups of animals have been used, first four active dogs Border Collie breed and the second 14 dogs of different breeds. Two tips of commercial dry feeds were offered, one of them superpremium (S) and the second usual (P). The experiment were carried out in 40 days, and the results should that feed S produced lower faecal weight and more consistent. Forthermore, the agility animals needed higher energetic demand for it metabolic comfort then inactive animals, otherwise had not lost body weight and score had not modified.

O trabalho teve por finalidade pesquisar, quantitativamente, a ocorrência de aflatoxinas (B1, B2, G1, G2) e fumonisinas (B1 e B2) em alimentos industrializados à base de milho comercializadas nos municípios de Pirassununga, Porto Ferreira, Leme e Araras, Estado de São Paulo e milho em grão utilizado na fabricação de ração para animais de companhia (PET) coletado no município de Porto Ferreira, Estado de São Paulo. Para isto, foram colhidas, no período de setembro de 2006 a fevereiro de 2007, milho em grão, fubá e farinha de milho, pertencentes a quatro diferentes marcas comerciais, totalizando 72 amostras. Para ração animal, foram colhidas 24 diferentes amostras de milho em grão no período de março a junho/2008 de diferentes produtores rurais. A determinação de aflatoxinas e fumonisinas foi efetuada através de cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). Das 24 amostras comerciais analisadas, 23 de fubá (95,80%) e 20 de farinha de milho (83,30%), apresentaram concentração total de aflatoxinas abaixo de 5 µg/kg, apenas uma amostra de milho em grão (4,20%) apresentou níveis totais acima do permitido pelo legislação brasileira (20 µg/kg). Para fumonisinas, 47 amostras (65,30%) apresentaram níveis acima dos limites de detecção (30 µg/kg), sendo que 15 amostras de milho em grão (62,50%), 16 de farinha de milho (66,70%), e 15 de fubá (62,50%), apresentaram-se positivas para FB1. Em relação ao milho destinado à fabricação de ração animal, 100% das amostras analisadas apresentaram concentração total de aflatoxinas abaixo de 5 µg/kg e 100% apresentaram-se positivas para FB1. Os resultados do estudo foram utilizados para estimar o grau de exposição humana às aflatoxinas e fumonisinas, considerando as altas concentrações encontradas em produtos de milho e derivados comercializados na região de Pirassununga. / The objective of this study was to verify the occurrence of aflatoxins (B1, B2, G1, G2) and fumonisins (B1 e B2) in industrialized foods made with corn commercially traded in the cities of Pirassununga, Porto Ferreira, Leme and Araras, state of São Paulo, and corn used for the manufacture feeds intended for pet feeding in Porto Ferreira City, São Paulo State. Seventy-two samples of corn kernels, corn meal and corn flour of four different commercial brands were collected from September 2006 to February 2007. In the case of pet feeding, 24 samples of corn kernels regarding different rural producers were collected from March to June 2008. Analysis of aflatoxins and fumonisins were accomplished by high performance liquid chromatography (HPLC). From 24 commercial samples analyzed, 23 of corn meal (95.80%) and 20 of corn flour (83.30%) showed total aflatoxins levels below 5 µg/kg, and only one sample of corn in grain (4.20%) with total aflatoxins concentration above the tolerance limit adopted by Brazilian regulations (20 µg/kg). As for fumonisins, 47 (65.30%) samples showed detectable levels (>30 µg/kg), being 15 samples of corn in grain (62.50%), 16 of corn flour (66.70%), and 15 of corn meal (62.50%) positive samples for FB1. In the case of corn used as ingredient for pet feeds, 100% of analyzed samples showed total aflatoxins levels below 5 µg/kg, and 100% were positive for FB1. The results of this study were used for estimation of the human exposure levels to aflatoxins and fumonisins, taking into account the high concentrations found in corn and corn-based products in the region of Pirassununga.

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2017-11-09T17:17:40Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1282473 bytes, checksum: 55b8ca729e6aa6bf5c3e24b5be1d53a6 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-11-09T17:17:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1282473 bytes, checksum: 55b8ca729e6aa6bf5c3e24b5be1d53a6 (MD5) Previous issue date: 2017-07-14 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O estudo foi conduzido com para avaliar o comportamento ingestivo e o desempenho dos animais consumindo dietas contendo crescentes concentrações de fibra e tamanho de partículas. Os tratamentos consistiram em 34, 41, 47 e 59% de fibra em detergente neutro oriunda da forragem (FDNf), associados aos tamanhos de 2, 5 e 15 cm da partícula. Foram utilizados 48 animais, sendo quatro repetições por tratamento em delineamento inteiramente casualizado. Para avaliação comportamental foram contabilizados os segundos gastos a cada cinco minutos ao longo de 24 horas para atividades de ruminação, alimentação e ócio. Na mensuração da produção foi realizada a pesagem do leite diariamente. Para análise inicial das atividades ingestivas utilizamos a análise de agrupamento sendo utilizado o coeficiente de correlação cofenética para escolha da medida de dissimilaridade e do algoritmo. Os dendrogramas foram gerados e os agrupamentos considerados dissimilares a 5% de significância do p-valor aproximado (AU). Os tratamentos agrupados foram modelados por meio do processo autor regressivo e média móvel. A produção de leite foi avaliada empregando-se modelos não lineares e os parâmetros comparados para os diferentes tratamentos por meio do intervalo de confiança a 5% de significância. No comportamento alimentar os agrupamentos foram significativos, sendo o primeiro grupo similar para partículas com 2 cm independente da concentração e o segundo grupo contendo os demais tratamentos. Nas atividades de ruminação, ócio e mastigação os padrões nictemerais dos tratamentos foram similares. Não houve efeito significativo para o parâmetro da taxa média de declínio (k) após o pico de produção das curvas de lactação, em relação às diferentes concentrações de fibra e aos tamanhos da partícula. Contudo, foi possível observar característica crescente do valor deste parâmetro com aumento na concentração de fibra na dieta. Os resultados podem ser associados à seletividade da espécie, ao estagio fisiológico e disponibilidade de energia. O aumento na concentração de fibra influencia na redução da produção de leite. A associação das concentrações de fibra e do tamanho da partícula pode alterar comportamento alimentar e refletir no desempenho animal. / The study was conducted to evaluate ingestive behavior and performance of animals consuming diets with different fiber concentrations and different particle sizes. The treatments consisted of 34; 41; 47 and 59% of neutral detergent fiber derived from forage (FDNf) associated with particle sizes of 2; 5 and 15 cm. A total of 48 animals were used with four repetitions per treatment in a completely randomized design. In relation to ingestive behavior, the spent seconds of activities were counted every five minutes over 24 hours. In the evaluation of the production, milk yield was weighed daily of all animals. Thus, the application of cluster analysis was used to compare the treatments. Values of the coefficient of correlation cophenetic were used to select the dissimilarity measurement and algorithm. The dendrograms were generated and the groupings were considered dissimilar in 5% of significance of the approximate p-value (AU). The milk production was evaluated by non-linear models and the parameters compared for the different treatments through the confidence interval at 5% of significance. Regarding feeding behavior, the patterns were significant for particle sizes, being dissimilar the treatment of two cm with those of five and fifteen cm. In the rumination activities, idleness and chewing (feeding + rumination), the nictemeral patterns of the treatments were similar. There was no significant effect on the parameter of average rate of decline (k) after the peak production of the lactation curves, in relation to the different fiber concentrations and particle sizes. However, it was possible to observe an increasing characteristic of the value of this parameter with an increase in fiber concentration in the diet. The results were associated with species selectivity, physiological stage and energy availability. When increase fiber concentration influence reduction of milk production. The association of fiber concentrations and particle size can alter feeding behavior and reflect animal performance.

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2017-11-14T12:59:59Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 3045284 bytes, checksum: 75fae3d40e3e0a912a8276323170df28 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-11-14T12:59:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 3045284 bytes, checksum: 75fae3d40e3e0a912a8276323170df28 (MD5) Previous issue date: 2017-02-22 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Ao nascimento, os bezerros exibem um trato gastrointestinal subdesenvolvido (TGI) cuja maturação é estritamente relacionada à colonização da microbiota. No entanto, pouco se sabe sobre os fatores que afetam o estabelecimento de comunidades de archaeas, bacterias e de fungos anaeróbicos no TGI dos bezerros, bem como as mudanças na estrutura e abundância desses grupos microbianos durante o período de transição da fase de pré-ruminante para verdadeiro ruminante. Para abordar essas lacunas no conhecimento, este trabalho empregou sequenciamento de próxima geração para caracterizar a microbiota do TGI de bezerros leiteiros mestiços (Holandês-Gir) durante o período pré-desmame. O primeiro estudo avaliou mudanças nas comunidades de archaeas metanogênicas, bacterias e fungos anaeróbicos no rúmen de bezerros leiteiros (n = 45) alimentados com duas dietas diferentes (M: somente leite cru (10% do peso vivo (PV)) e MC: leite cru (10% PV e concentrado ad libitum) e que foram abatidos aos 7, 28, 49, 63 dias de idade. No segundo estudo, caracterizamos as alterações nas comunidades bacterianas entre regiões GIT (rúmen, jejuno, ceco e cólon) de bezerros alimentados com MC (n = 17) que foram abatidos aos 7, 28, 49, 63 dias de idade. Os resultados do primeiro estudo revelaram que as comunidades de archaeas metanogênicas, bacterias e fungos coexistem no rúmen desde a primeira semana de vida, mas são afetadas diferentemente pela dieta e idade. A inclusão de concentrado na dieta de bezerros afetou significativamente a comunidade bacteriana do rúmen: observou-se um aumento na abundância de gêneros relacionados, direta e indiretamente, à degradação de amido (i.e. Megasphaera, Sharpea e Succinivribrio) e um decréscimo acentuado na abundancia de gêneros (i.e. Lactobacillus, Bacteroides e Parabacteroides) relacionados com a degradação de nutrientes do leite. Alterações na comunidade bacteriana, indiretamente afetaram a comunidade de metanogênicas: fermentação de carboidratos não fibrosos alterou padrões de fermentação (acetato:propionato) e disponibilidade de hidrogênio que por sua vez, favoreceu a colonização de Methanosphaera em vez de Methanobrevibacter. Na comunidade de fungos anaeróbicos, a abundância do genêro Caecomyces e família Neocallimastigaceae não variou significativamente com a dieta ou idade, provavelmente devido à alta variação inter-animal e baixo teor de fibra de concentrado usado em nosso estudo. In suma, este estudo mostrou que a manipulação da microbiota no rúmen em desenvolvimento é possível através da intervenção dietética. Nossos resultados podem ser úteis na elaboração de estratégias para promover a colonização de comunidades-alvo (isto é, produtores de butirato e utilizadoras de lactato) que estão ligadas ao desenvolvimento de papilas e equilíbrio do pH ruminal. Em relação ao segundo estudo, as comunidades bacterianas diferem qualitativa e quantitativamente entre os compartimentos (rúmen, jejuno, cécum e colón) do trato gastrointestinal e também respondem diferentemente ao avanço da idade que inclui a substituição progressiva da dieta líquida para a dieta sólida (i.e. aumento do consumo de concentrado). No rúmen, a comunidade bacteriana foi composta em sua maioria pelos gêneros Prevotella, Butyrivibrio e Ruminococcus cuja abundância aumentou proporcionalmente com a idade devido a maior disponibilidade de carboidratos não fibrosos no rúmen. No jejuno, o gênero Lactobacillus foi abundante desde a primeira semana de vida, mas sua dominância foi substituída por membros da família Clostridiaceae em bezerros mais velhos. As comunidades do ceco e do cólon foram compostas pelos gêneros Blautia, Paraprevotella, Prevotella Phascolarctobacterium and Succiniclasticum cuja abundância aumentou com a idade. Em resumo, nossos resultados mostraram que, embora comunidades bacterianas coexistam em regiões distintas do TGI, uma análise mais detalhada da estrutura, abundância e dinâmica dessas comunidades revela uma marcante segregação e sucessão ecológica no TGI de bezerros. Nosso estudo acrescenta novos insights sobre a colonização bacteriana no TGI de pré-ruminantes que podem servir como base para formulação de estratégias para promover a colonização de comunidades-alvo (i.e. bactérias probióticas) para melhorar a saúde e desempenho de bezerros leiteiros no período pré-desmame. / At birth, calves display an underdeveloped gastrointestinal tract (GIT) whose maturation is strictly related to microbiota colonization. However, little is known about the factors that affect the establishment of archaeal, bacterial and fungal communities in the GIT of calves, as well as the changes in their structure and abundance during calf development into a functional ruminant. To address these gaps in knowledge, this work employed next-generation sequencing to characterize the GIT microbiota of Holstein- Gyr crossbred dairy calves across pre-weaning development. The first study aimed to assess changes on the rumen archaeal, bacterial and fungal communities of crossbred dairy calves (n=45) across pre-weaning development (7, 28, 49, 63 days) on two different diets (M: only raw milk at 10% of body weight at birth (BW) and MC: raw milk (10% BW) plus starter concentrate ad libitum). In the second study, we characterized changes in the bacterial communities across GIT regions (rumen, jejunum, cecum and colon) of MC-fed calves (n=17) at 7, 28, 49, 63 days of age. The results of first study revealed that archaeal, bacterial and fungal communities co-occur in the rumen since early calf development but are impacted differently by pre-weaning diet and age. The inclusion of starter concentrate in the calf diet significantly affected rumen bacterial community by promoting increases of genera, direct and indirectly, related to degradation of readily fermentable carbohydrates (i.e. Megasphaera, Sharpea and Succinivribrio) and depressing those reliant on milk nutrients like lactose (i.e. Lactobacillus, Bacteroides and Parabacteroides). These bacterial changes resulted in apparent diet-driven archaeal differences due to altered fermentation patterns and availability of hydrogen in the rumen that favoured the colonization of members from genus Methanosphaera instead of Methanobrevibacter. No such differences were found for fungi community represented by members from genus Caecomyces and family Neocallimastigaceae, likely due to high inter-animal variation and low fibre content of concentrate used our study. Altogether, this study showed that manipulation of the microbiota in the developing rumen is possible through dietary intervention. Our results may be useful in designing strategies to promote colonization of target communities (i.e. butyrate- producers and lactate-utilizing) linked to functional development of the calf. In regards to second study, bacterial communities in the calf GIT differ qualitatively and quantitatively among compartments and respond differently to age advance that encompass the GIT development (i.e. rumen) and progressive replacement of milk- based to grain-diet (i.e. increase of starter concentrate intake). In the rumen, bacterial community was composed majority by members from genera Prevotella, Butyrivibrio and Ruminococcus whose abundance increased proportionally with age possibly due greater availability of readily fermentable carbohydrates in the rumen. Members from genus Lactobacillus were overrepresented in the jejunum but their predominance was replaced by members from Clostridiaceae family in older calves. The cecum and colon displayed similar abundance at taxa level and the abundance of genera Blautia, Paraprevotella, Prevotella, Phascolarctobacterium and Succiniclasticum increased significantly with age. In summary, our results showed that although there are bacterial communities “common” to distinct regions, a closer look at their structure, abundance and dynamic reveals marked segregation and ecological succession in the calf GIT. Our study adds new insights into bacterial colonization across GIT of pre-ruminant that may be considered in formulating strategies to promote the colonization of target communities aiming improve health (i.e. bacteria with probiotic capability) and performance of dairy calves in the pre-weaning period.

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2017-11-17T11:32:42Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 789889 bytes, checksum: 39db07b357fd431efdb9fb78a2134f4f (MD5) / Made available in DSpace on 2017-11-17T11:32:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 789889 bytes, checksum: 39db07b357fd431efdb9fb78a2134f4f (MD5) Previous issue date: 2017-07-20 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Objetivou-se avaliar a variabilidade entre animais com relação à taxa de degradação da fração insolúvel potencialmente degradável da matéria seca (MS), proteína bruta (PB) e fibra em detergente neutro (FDN) e estabelecer o número mínimo de animais e um perfil padronizado de tempos de incubação para ensaios de degradação ruminal in situ com bovinos para alimentos produzidos em condições tropicais. Foram avaliadas três forragens e quatro concentrados, respectivamente: cana-de-açúcar in natura, silagem de milho, feno de capim Tifton 85, farelo de soja, milho grão, casca de soja e farelo de algodão. Foram utilizadas cinco novilhas Nelore, com peso corporal inicial médio de 328±9,8 kg, fistuladas no rúmen, alimentadas ad libitum com dieta basal composta por feno de capim Tifton 85 e concentrado comercial, com relação volumoso:concentrado de 80:20 com base na MS. Foram conduzidas sequencialmente três baterias de incubação, nas quais foram avaliados os alimentos de acordo com a seguinte disposição: bateria 1 – cana-de-açúcar, silagem de milho e feno de Tifton 85; bateria 2 – farelo de soja e milho grão; e bateria 3 – farelo de algodão e casca de soja. Em cada bateria todos os alimentos foram incubados em todos os animais. Os sacos para incubação foram confeccionados em tecido náilon (porosidade 50 μm). Os alimentos foram processados em moinho de facas com peneira de porosidade 2 mm e acondicionados nos sacos na proporção de 20 mg de MS por cm 2 de superfície. Os tempos de incubação utilizados foram: 0, 3, 6, 9, 12, 18, 24, 30, 36, 48, 72, 96, 120, 144, 168 e 240 horas, para as amostras de forragem; e 0, 3, 6, 12, 18, 24, 30, 36, 48, 72, 96, 120 e 144 horas, para amostras de concentrado. Os resíduos da incubação das amostras de forragem foram analisados quanto aos teores de MS e FDN e os resíduos de incubação das amostras de concentrado foram analisados quanto teores de MS e PB. Os perfis de degradação foram interpretados por modelos não lineares fixos ou mistos, nos quais considerou-se a influência aleatória de animais sobre a taxa de degradação da fração insolúvel potencialmente degradável. Posteriormente, os modelos foram ajustados considerando- se todas as combinações possíveis dos animais experimentais em grupos de quatro, três e dois animais, buscando-se verificar qual o número mínimo de animais a serem utilizados para ensaios de incubação in situ. Os perfis foram comparados no tocante ao comportamento das estimativas das taxas de degradação e das variâncias entre animais sobre a taxa de degradação e variância residual, utilizando-se como referência o ajustamento com todos os animais (n = 5). Posteriormente, modelos foram ajustados aos dados de degradação para cada alimento e cada componente em sua forma completa (com todos os tempos de incubação) e sob diferentes formas reduzidas (diferentes combinações de tempos) de forma a definir o número mínimo e o posicionamento dos pontos para que os perfis sejam ajustados sem comprometimentos da exatidão e precisão das estimativas dos parâmetros dos modelos. As análises estatísticas foram realizadas por intermédio dos procedimentos NLIN e NLMIXED do SAS 9.4. O ajustamento por modelo fixo ou misto conduziu a estimativas similares (P>0,34) das taxas de degradação. Contudo com a consideração da variação aleatória entre animais sobre a taxa de degradação, verificou-se redução da variância residual sobre as frações degradadas da MS e PB ou frações não degradadas da FDN variando de 11,9 a 46,7%. A variação no número de animais não afetou drasticamente as estimativas médias de taxa de degradação, variância entre animais sobre a taxa de degradação e variância residual, porém o que se observou foi que com menor número de animais, ampliou-se a dispersão das estimativas das características avaliadas, com a observação de valores com grande afastamento das estimativas médias considerando-se todas as possíveis combinações entre animais. A utilização de três animais é recomendada pela minimização do risco da influência de efeitos aleatórios extremos de animal sobre a taxa de degradação. O esquema de mínimo de incubação sugerido para estudos de degradação da MS e da PB de concentrados deve se basear nos tempos: 0, 3, 6, 12, 24, 30, 48, 72 e 96 horas. Para o estudo da degradação da MS de forragens, os tempos de incubação sugeridos são: 0, 3, 6, 12, 24, 30, 48, 72 e 120 horas. A avaliação do perfil de degradação da FDN de forragens deve seguir os tempos de incubação obtidos para o estudo da degradação da MS, acrescido do tempo 240 horas. / The aim of this work was to evaluate the variability among animals with regard the degradation rate of the potentially degradable insoluble fraction of dry matter (DM), crude protein (CP), and neutral detergent fiber (NDF) and to establish the minimum number of animals as well as to provide a standardized profile of incubation times for ruminal in situ degradation assays with cattle for feeds produced in the tropics. Seven feeds were evaluated, being three forages – sugarcane, corn silage, and Tifton 85 hay – and four concentrates – soybean meal, ground corn, soybean hulls, and cottonseed meal. Five ruminally cannulated Nellore heifers, averaging 328±9.82 kg of with mean initial body weight, had ad libitum access to a basal diet composed by Tifton 85 hay and commercial concentrate in a ratio of 80:20 on DM basis. The samples were arranged into three sequential groups for incubation: group 1 – sugarcane, corn silage, and Tifton 85 hay; group 2 – soybean meal and ground corn; group 3 – soybean hulls and cottonseed meal. In each group, all samples were incubated into all animals. Nylon bags (50-μm porosity) were individually identified and used in this study. The feeds were ground in a knife mill to pass through a 2-mm screen sieve and placed into the nylon bags (20 mg DM per cm2 of surface). The incubation times were: 0, 3, 6, 9, 12, 18, 24, 30, 36, 48, 72, 96, 120, 144, 168, and 240 h for forage samples; and 0, 3, 6, 12, 18, 24, 30, 36, 48, 72, 96, 120, and 144 h for concentrates samples. The incubation residues of forages were analyzed with regard DM and NDF contents whereas the incubation residues of concentrates were analyzed regarding DM and CP contents. The degradation profiles were interpreted by using fixed or mixed nonlinear models, where the random influence of animals on the degradation rate of potentially degradable insoluble fraction was considered. Additionally, models were adjusted considering all possible combinations of experimental animals using groups of four, three, and two animals aiming to verify the minimal number of animals to be used for in situ incubation assays. The profiles were compared regarding the estimates of degradation rates, variances among animals on the degradation rate, and residual variance by using as reference the adjustment with all animals (n = 5). Moreover, models were adjusted to data of degradation for each feed and each component using all incubation time and different reduced schemes (different combination of incubation times) aiming to define the minimal number and disposition of incubation times to adjust profiles without compromising accuracy and precision of the estimates of the model parameters. Statistical analyses were performed by using the NLIN and NLMIXED procedures of SAS 9.4. The adjustment by fixed or mixed models led to similar estimates (P>0.34) of degradation rates. However, considering the random variation among animals on the degradation rate, there was a decreasing of the residual variance on the DM and CP degraded fractions or NDF undegraded fractions ranging from 11.9 to 46.7%. The variation in the number of animals did not drastically affect the average estimates of degradation rates, variance among animals on the degradation rate, and residual variance. However, it was observed that smaller number of animals increased the dispersion of the estimates of the characteristics, with the observation of values with great deviations from the average estimates obtained considering all possible combinations among animals. The use of three animals is recommended by minimizing the risk of the influence of extreme random animal effects on the degradation rate. The minimal incubation scheme suggested for the degradation studies of DM and CP of concentrates is based on the times: and 0, 3, 6, 12, 24, 30, 48, 72, and 96 h. For the degradations studies of forages, the suggested incubation times are: 0, 3, 6, 12, 24, 30, 48, 72, and 120 h. The evaluation of degradation profiles of the NDF of forage should follow the incubation times recommended for the study of DM degradation, including an incubation point at 240 hours.

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2016-02-18T14:08:01Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 2562998 bytes, checksum: 273a8314c10a7b7d96ab2dce28158e59 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-02-18T14:08:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 2562998 bytes, checksum: 273a8314c10a7b7d96ab2dce28158e59 (MD5) Previous issue date: 2015-11-25 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Em ruminantes, a eficiência de utilização do nitrogênio (N; g de N em produto/g de N consumido) é baixa quando comparada a outras espécies (e.g., suínos, aves). Por esta razão, há uma excreção excessiva de compostos nitrogenados para o meio ambiente. No entanto, entendendo os mecanismos envolvidos no controle do metabolismo de N, tais como a eficiência de captura do N reciclado no rúmen e o metabolismo de aminoácidos (AA) pode melhorar a eficiência de utilização de N. Objetivando o entendimento destes fatores, esta tese foi desenvolvida a partir de três estudos. O objetivo do primeiro estudo foi avaliar os efeitos da suplementação com proteína degradável (PDR) e não-degradável no rúmen (PNDR) sobre a digestão de nutrientes, metabolismo de N, cinética de ureia, e degradação de proteína muscular em novilhas Nelore (Bos indicus) consumindo feno de capim-Braquiária [5% de proteína bruta (PB); 80% de fibra em detergente neutro (FDN); ambos em % da matéria seca (MS)]. Foram utilizadas cinco novilhas Nelore canuladas no rúmen e abomaso (248±9 kg) distribuídas em um quadrado latino 5 × 5. Os tratamentos foram: controle (sem suplemento); e suplementação com PDR para atender 100% das exigências de PDR mais suplementação com PNDR visando suprir 0%, 50%, 100% ou 150% das exigências de PNDR. O suplemento com PDR (caseína e N não-proteico) foi fornecido duas vezes ao dia, enquanto a PNDR suplementar foi continuamente infundida no abomaso. Infusão venosa de [ 15 N 15 N]-ureia com a avaliação do enriquecimento urinário foi realizada para mensurar a cinética de ureia. A relação entre 3-metil- histidina e creatinina foi utilizada para estimar a degradação de proteína muscular. O consumo de FDN (2,48 kg/dia) não foi afetado pela suplementação (P>0,37), mas elevou a digestão ruminal de FDN (P<0,01). O consumo total e a retenção de N aumentaram (P<0,001) com a suplementação e linearmente com os níveis de PNDR. A produção hepática de ureia (UER) e a reciclagem de ureia para o trato gastrointestinal (GER) foram ampliados pela suplementação (P<0,001). A suplementação com PNDR incrementou linearmente UER (P=0,02) e tendeu a aumentar linearmente GER (P=0,07). A ureia reciclada utilizada para fins anabólicos tendeu (P=0,07) a ser ampliada pela suplementação e os níveis de PNDR também tenderam (P=0.08) a aumentar linearmente a quantidade de ureia reciclada para o anabolismo. A fração de N microbiano assimilado a partir da ureia reciclada (MNU) foi maior (P<0,001) para novilhas controle (22%) do que para as novilhas suplementadas (10%). A relação urinária 3-metil- histidina:creatinina foi cerca de duas vezes superior (P<0,001) em novilhas controle do que suplementadas. Novilhas não-suplementadas reabsorveram uma fração maior de ureia a partir dos túbulos renais do que as novilhas suplementadas (P<0,001). No geral, novilhas não- suplementadas apresentaram maior mobilização de AA a partir da proteína miofibrilar para fornecer N para síntese de ureia e subsequente reciclagem. Suplementação com PNDR, associada a suplementação com PDR, além de ampliar a retenção de N, também aumenta a reciclagem de N-ureia e a síntese de proteína microbiana. No segundo capítulo, foram avaliadas a cinética de ureia e assimilação microbiana de N-ureia reciclado em ruminantes utilizando meta-análise. Valores de 107 médias de tratamentos foram compiladas a partir de 25 estudos com ruminantes (bovinos de corte, vacas de leite e ovinos) publicados entre 2001 e 2016. O conjunto de dados foi analisado de acordo com técnicas de meta-análise utilizando modelos mistos lineares e não-lineares, considerando a variação aleatória entre experimentos. Houve um aumento linear (P<0,05) entre UER e GER em função do consumo de N (g/BW 0,75 ), correspondendo a cerca de 71,5% e 35,2% do consumo de N, respectivamente. A UER foi positivamente associada (P<0,05) com os níveis de PB na dieta e PB em relação à matéria orgânica digerida (PB:MOD). A análise da máxima curvatura indicou que dietas com níveis de PB acima de 17% promovem uma sobrecarga na síntese hepática de ureia, devido a um possível excesso de N dietético, produção de amônia e detoxificação no fígado. A relação entre GER e UER reduziu com o aumento do conteúdo de PB na dieta (P<0,05). A fração GER:UER torna- se relativamente constante quando são fornecidas dietas com níveis de PB acima de 19%. A fração de UER excretada como N-ureico e a contribuição deste para excreção total de N urinário foram positivamente associadas com o teor de PB na dieta (P<0,05), atingindo o platô em níveis de PB próximo de 17%. Em relação à cinética de ureia, a fração de GER excretada nas fezes e utilizada para o anabolismo foram reduzidas, enquanto a fração que retorna para o ciclo da ornitina ampliou com níveis de PB (P<0,05). A fração de N microbiano assimilado a partir da ureia reciclada foi reduzida (P<0,05) com níveis de PB e PB:MOD da dieta. Considerando o intervalo de confiança da assíntota do modelo de predição de MNU em função da PB:MOD, a eficiência de assimilação microbiana do N-ureia reciclado estabilizou (P>0,05) a partir de 194 g PB/kg MOD. Os modelos obtidos neste estudo podem contribuir para o atual conhecimento da utilização de N nos sistemas de predição de dietas para otimização da reciclagem de ureia, reduzindo perdas de N que contribuem para a poluição do ar e da água. O objetivo do estudo descrito no terceiro capítulo foi avaliar a eficiência de utilização de lisina em novilhos em crescimento. Cinco novilhos holandeses fistulados no rúmen (165±8 kg) e mantidos em gaiolas metabólicas foram utilizados segundo delineamento em quadrado latino 6 × 6. Todos os novilhos receberam dieta restrita (2,46 kg de MS/dia) fornecida duas vezes ao dia, contendo baixo teor de PNDR (81% de casca de soja, 8% de palha de trigo, 6% de melaço e 5% de vitaminas e minerais). Os tratamentos foram: 0, 3, 6, 9, 12 e 15 g/dia de L-lisina infundida continuamente no abomaso. Uma mistura de todos os AA essenciais foram também infundidos em conjunto para prevenir a limitação de outros AA, exceto lisina. Adicionalmente, os novilhos receberam infusão contínua de 10 g/dia de ureia, 200 g/dia de ácido acético, 200 g/dia de ácido propiônico e 50 g/dia de ácido butírico no rúmen; e 300 g/dia de glicose no abomaso. Estas infusões forneceram concentração de amônia no rúmen e energia suplementar adequados sem promoverem alteração sobre a produção de proteína microbiana. Cada período experimental foi constituído de seis dias, sendo dois dias de adaptação e quatro dias de coleta total de fezes e urina para mensurar o balanço de N. Amostras de sangue foram coletadas no sexto dia (10 horas após alimentação). A digestibilidade de MO da dieta não foi alterada (P≥0,66) pelos tratamentos sendo, em média, 73,7%. A excreção urinária de N reduziu de 32,3 para 24,3 g/dia entre os níveis de 0 a 9 g/dia de suplementação com lisina, com nenhum aumento verificado com níveis superiores a 9 g/dia (efeito linear e quadrático, P<0,01). Os efeitos sobre a excreção urinária total de N foram principalmente devido a excreção de N-ureia. O aumento da suplementação com lisina de 0 para 9 g/dia ampliou a retenção de N de 21,4 para 30,7 g/dia, com nenhum aumento verificado após este último nível de suplementação (efeito linear e quadrático, P<0,01). Sobre a resposta linear verificada com a suplementação de lisina variando de 0 a 9 g/dia a eficiência de utilização de lisina para deposição de proteína foi de 40%. A concentração plasmática de N-ureia tendeu a reduzir linearmente (P=0,06) com a suplementação de lisina, conforme observado para a redução na excreção urinária de N-ureia. A concentração plasmática de lisina aumentou linearmente (P<0,001), mas as concentrações de leucina, serina, valina e tirosina foram reduzidas linearmente (P<0,02) com os níveis de lisina suplementar, provavelmente devido a maior utilização destes AA para deposição de proteína. De acordo com este modelo, a suplementação com lisina promoveu aumento significativo na retenção de N que foi maximizada com a suplementação de 9 g/dia de lisina, apresentando 40% de eficiência de utilização. / In cattle, efficiency of nitrogen (N) utilization (g N in product/g N intake) is lower compared to others species (e.g., pig, chicken). For that reason, there is an extensive loss of N in manure, leading to environmental pollution. However, understanding the key mechanisms involved in control of N metabolism, such as efficiency of N capture in the rumen from recycled N and metabolism of amino acids (AA) in the body can improve efficiency of N utilization. To understand these factors, this dissertation was developed based on three studies. The objective of the first study was to evaluate the effects of supplemental ruminally degradable (RDP) and undegradable protein (RUP) on nutrient digestion, N metabolism, urea kinetics, and muscle protein degradation in Nellore heifers (Bos indicus) consuming low-quality signal grass hay [5% of crude protein (CP), 80% of neutral detergent fiber (NDF); dry matter (DM) basis). Five ruminally and abomasally cannulated Nellore heifers (248 ± 9 kg) were used in a 5 × 5 Latin square. Treatments were: control (no supplement); and RDP supplementation to meet 100% of the RDP requirement plus RUP provision to supply 0%, 50%, 100%, or 150% of the RUP requirement. Supplemental RDP (casein plus nonprotein N) was dosed ruminally twice daily, and RUP supply (casein) was continuously infused abomasally. Jugular infusion of [ 15 N 15 N]- urea with measurement of enrichment in urine was used to evaluate urea kinetics. The ratio of urinary 3-methylhistidine to creatinine was used to estimate skeletal muscle protein degradation. Forage NDF intake (2.48 kg/d) was not affected (P > 0.37) by supplementation, but supplementation did increase ruminal NDF digestion (P < 0.01). Total N intake (by design) and N retention increased (P < 0.001) with supplementation and also increased linearly with RUP provision. Urea entry rate (UER) and gastrointestinal entry rate of urea (GER) were increased by supplementation (P < 0.001). Supplementation with RUP linearly increased (P = 0.02) UER and tended (P = 0.07) to linearly increase GER. Urea use for anabolic purposes tended (P = 0.07) to be increased by supplementation, and RUP provision also tended (P = 0.08) to linearly increase the amount of urea used for anabolism. The fraction of recycled urea- N incorporated into microbial N (MNU) was greater (P < 0.001) for control (22%) than for supplemented (10%) heifers. Urinary 3-methylhistidine:creatinine of control heifers was more than double that of supplemented heifers (P < 0.001). Control heifers reabsorbed a greater (P < 0.001) fraction of urea from the renal tubule than did supplemented heifers. Overall, unsupplemented heifers had greater mobilization of AA from myofibrillar protein, which provided N for urea synthesis and subsequent recycling. Supplemental RUP, when RDP was supplied, not only increased N retention, but also supported increased urea-N recycling and increased ruminal microbial protein synthesis. In the second chapter, urea kinetics and microbial assimilation of recycled urea N in ruminants were evaluated using a meta-analytical approach. Treatment mean values were compiled from 25 studies with ruminants (beef cattle, dairy cows, and sheep) which were published from 2001 to 2016, totaling 107 treatment means. The dataset was analyzed according to meta-analysis techniques using linear or non-linear mixed models, taking into account the random variations among experiments. Urea N synthesized in the liver (UER) and urea N recycled to the gut (GER) linearly increased (P < 0.001) as N intake (g/BW 0.75 ) increased, with increases corresponding to 71.5% and 35.2% of N intake, respectively. The UER was positively associated (P < 0.05) with dietary CP and the ratio of CP to digestible OM (CP:DOM). Maximum curvature analyses indicate that above 17% of CP there is a prominent increase on hepatic synthesis of urea N due to an excess of dietary N and NH 3 input. The GER:UER decreased with increasing dietary CP content (P < 0.05). At dietary CP ≥ 19%, the fraction of GER became constant. The fraction of UER eliminated as urinary urea N and the contribution of urea N to total urinary N were positively associated with dietary CP (P < 0.05), plateaued at about 17% of CP. The fractions of GER excreted in the feces and utilized for anabolism decreased, whereas the fraction of GER returned to the ornithine cycle increased with dietary CP content (P < 0.05). Recycled urea N assimilated by ruminal microbes (as a fraction of GER) decreased as dietary CP and CP:DOM increased (P < 0.05). The efficiency of microbial assimilation of recycled urea N plateaued at 194 g CP/kg DOM. The models obtained in this study can to contribute to the knowledge on N utilization in feeding models and optimizing urea recycling, reducing N losses that contribute to air and water pollution. The objective of the third chapter was to evaluate the efficiency of lysine (Lys) utilization by growing steers. Five ruminally cannulated Holstein steers (165 kg ± 8 kg) housed in metabolism crates were used in a 6 × 6 Latin square design; data from a sixth steer was excluded due to erratic feed intake. All steers were limit fed (2.46 kg DM/d) twice daily diets low in RUP (81% soybean hulls, 8% wheat straw, 6% cane molasses, and 5% vitamins and minerals). Treatments were: 0, 3, 6, 9, 12, and 15 g/d of L-Lys abomasally infused continuously. To prevent AA other than Lys from limiting performance, a mixture providing all essential AA to excess was continuously infused abomasally. Additional continuous infusions included 10 g urea/d, 200 g acetic acid/d, 200 g propionic acid/d, and 50 g butyric acid/d to the rumen and 300 g glucose/d to the abomasum. These infusions provided adequate ruminal ammonia and increased energy supply without increasing microbial protein supply. Each 6-d period included 2 d for adaptation and 4 d for total fecal and urinary collections for measuring N balance. Blood was collected on d 6 (10 h after feeding). Diet OM digestibility was not altered (P ≥ 0.66) by treatment and averaged 73.7%. Urinary N excretion decreased from 32.3 to 24.3 g/d by increasing Lys supplementation to 9 g/d, with no further reduction when more than 9 g/d of Lys was supplied (linear and quadratic P < 0.01). Changes in total urinary N excretion were predominantly due to changes in urinary urea-N. Increasing Lys supply from 0 to 9 g/d increased N retention from 21.4 to 30.7 g/d, with no further increase beyond 9 g/d of Lys (linear and quadratic P < 0.01). Break-point analysis estimated maximal N retention at 9 g/d supplemental Lys. Over the linear response surface of 0 to 9 g/d Lys, the efficiency of Lys utilization for protein deposition was 40%. Plasma urea-N tended to be linearly decreased (P = 0.06) by Lys supplementation in agreement with the reduction in urinary urea-N excretion. Plasma concentrations of Lys increased linearly (P < 0.001), but leucine, serine, valine, and tyrosine (P ≤ 0.02) were reduced linearly by Lys supplementation, likely reflecting increased uptake for protein deposition. In our model, Lys supplementation promoted significant increases in N retention and was maximized at 9 g/d supplemental Lys with efficiency of utilization of 40%.

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2016-06-21T15:17:42Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 468549 bytes, checksum: ecfd8b7aff68f74ef6ba8fb1e41a4833 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-21T15:17:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 468549 bytes, checksum: ecfd8b7aff68f74ef6ba8fb1e41a4833 (MD5) Previous issue date: 2016-03-09 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / A reprodução é o componente econômico individual de maior importância em sistemas de produção de carne bovina e a baixa taxa de desfrute observada no rebanho brasileiro reflete a baixa taxa de fertilidade de vacas e a elevada idade à puberdade das novilhas de reposição. Com o intuito de fornecer mais informações sobre estratégias nutricionais para desenvolver novilhas e melhorar o desempenho de matrizes, dois estudos foram realizados e são aqui apresentados na forma de três artigos. Cinquenta novilhas Nelore com 131,8 ± 9,9 kg de peso corporal (PC) médio e 138 ±19 dias de idade foram suplementadas dos 4 aos 14 meses para avaliar os efeitos de alto (A) e baixo (B) níveis de suplementação durante as fases de amamentação e recria sobre o desempenho e as respostas endócrina, metabólica e reprodutiva. Os animais foram distribuídos em cinco planos de suplementação: AA – as novilhas receberam suplemento na quantidade de 6 g/kg do PC durante a amamentação e recria; AB – as novilhas receberam 6 g/kg do PC na fase de amamentação e 3 g/kg do PC durante a recria; BA – as novilhas receberam 3 g/kg do PC durante a amamentação e 6 g/kg do PC durante a recria; BB – as novilhas receberam 3 g/kg do PC durante a amamentação e recria; e CC – controle, nenhum suplemento foi oferecido, apenas sal mineral. Interação entre os níveis fornecidos na amamentação e recria não foram significativos para nenhuma das variáveis de desempenho avaliadas (P > 0,10). O nível de suplementação oferecido durante a amamentação não apresentou efeito sobre as variáveis de desempenho avaliadas posteriormente, na fase de recria (P > 0,10). Houve efeito significativo da suplementação e do nível de suplementação na recria sobre o ganho médio diário (GMD) na recria e PC final (P < 0,05). O GMD total foi também afetado apenas pela suplementação e nível de suplementação utilizado na recria (P < 0,05), animais que receberam 6 g/kg do PC após o desmame tiveram maior GMD total. O diâmetro folicular foi também maior para os animais que receberam 6 g/kg do PC na recria (P < 0,05). Na fase de amamentação, houve uma tendência para maiores níveis de hormônio do crescimento (GH) nas novilhas que receberam 6 g/kg do PC (P < 0,10), e na recria os níveis de GH foram menores para as novilhas suplementadas (P < 0,05). Não houve diferença entre os tratamentos com relação aos níveis de insulina durante a amamentação (P > 0,10), entretanto, os níveis de insulina foram afetados pelo nível de suplementação utilizado na recria (P < 0,05). A maioria dos metabólitos não foi afetada pelo nível de suplementação utilizado durante a amamentação (P > 0,10). Não houve diferença nos níveis de colesterol total, HDL e LDL entre os tratamentos durante a amamentação (P > 0,10). Todos os metabólitos relacionados com o metabolismo da gordura reduziram na recria em relação à fase de amamentação, mas apenas o LDL diferiu significativamente entre os tratamentos (P < 0,05). Houve um efeito positivo do nível de suplementação sobre a concentração de proteína total no soro durante a recria (P < 0,05). A suplementação também aumentou os níveis de albumina na recria (P < 0,05) e, entre os animais suplementados, animais que receberam alta quantidade de suplemento durante a recria apresentaram níveis mais elevados de albumina (P < 0,05). Mas não houve diferença significativa nas concentrações de globulinas (P > 0,10). Em resumo, o desempenho e variáveis endócrina, metabólica e reprodutiva foram incrementados pelo nível de suplementação fornecido na recria, novilhas que receberam suplemento na quantidade de 6 g/kg do PC na recria apresentaram melhores respostas de forma independente do nível recebido anteriormente, durante a amamentação. Os mesmos cinquenta pares vaca-bezerra utilizados no estudo descrito no primeiro artigo foram também utilizados para avaliar os efeitos de alto e baixo níveis de suplementação para bezerras Nelore sobre o desempenho, a produção de leite e o perfil metabólico de suas mães apresentado no segundo artigo. Os mesmos tratamentos avaliados durante a fase de amamentação do artigo anterior foram também aqui avaliados: 0 - controle, nenhum suplemento foi fornecido às bezerras; 3 – as bezerras receberam suplemento em quantidade de 3 g/kg do PC; 6 - as bezerras receberam suplemento em quantidade de 6 g/kg do PC. Não houve efeito significativo do nível de suplementação fornecido à prole sobre o PC, escore de condição corporal e espessura de gordura subcutânea da vaca ao desmame (P > 0,10). O nível de suplementação das bezerras não afetou significativamente a produção de leite corrigida para 4% de gordura (P > 0,10). Os teores de gordura, proteína, lactose e sólidos totais do leite também não diferiram entre os níveis de suplementação (P > 0,10). O nível de suplemento fornecido à prole não influenciou os teores de glicose, colesterol total, HDL, LDL, triglicerídeos, proteínas totais, albumina e globulinas (P > 0,10). Em conclusão, a suplementação de bezerras lactentes nas quantidades de 3 ou 6 g/kg do PC diariamente não afeta o desempenho da matriz lactante. No segundo estudo, apresentado no terceiro artigo, foram realizados dois experimentos com o objetivo de avaliar os efeitos de estratégias de fornecimento de suplemento para vacas de corte no terço final da gestação. No Experimento 1, delineado para avaliar o desempenho e as respostas reprodutivas, 35 vacas Nelore gestantes foram distribuídas em delineamento experimental inteiramente casualizado com quatro tratamentos: controle - os animais receberam apenas sal mineral durante todo o experimento; 30d – os animais receberam suplementação durante os últimos 30 dias de gestação na quantidade de 3.0 kg/d; 60d – os animais receberam suplementação durante os últimos 60 dias de gestação na quantidade de 1.5 kg/d e; 90d – os animais receberam suplementação durante os últimos 90 dias de gestação na quantidade de 1.0 kg/d. Todos os tratamentos suplementados receberam a mesma quantidade total de suplemento ao longo do experimento (90 kg; 20% de proteína bruta). O Experimento 2 do terceiro artigo foi delineado com o objetivo de avaliar os efeitos das quantidades que foram diariamente fornecidas para as vacas do Experimento 1 sobre o consumo e metabolismo. Para tanto, quatro vacas Nelore multíparas e gestantes foram utilizadas em delineamento quadrado latino 4 × 4, com 4 períodos experimentais de 15 dias cada. Houve efeito linear de estratégia de suplementação sobre o PC ao parto (P < 0,05) e efeito quadrático sobre a variação de peso pós-parto (P < 0,05), vacas na estratégia 60d perderam menos peso do parto até os 31 dias pós-parto. Nenhuma diferença significativa foi encontrada no PC da prole ao nascimento (P > 0,10). Houve uma tendência quadrática sobre a taxa de gestação na primeira inseminação artificial em tempo fixo (IATF; P < 0,10), mais vacas da estratégia 60d conceberam na primeira IATF, embora nenhuma diferença estatística nas taxas de gestação total tenha sido observada (P > 0,10). O nível de suplementação utilizado não afetou o consumo de forragem ou a digestibilidade da fibra em detergente neutro (P > 0,10). A excreção de N através da urina tendeu a aumentar linearmente com o nível de suplementação (P < 0,10). Conclui-se, portanto, que o fornecimento de 1,5 kg de suplemento durante os últimos 60 dias de gestação melhora o desempenho reprodutivo de vacas de corte na estação de monta subsequente sem nenhum efeito negativo sobre o consumo de forragem. / Reproduction is the single most important economic component in any beef production system and the low offtake rate observed in the Brazilian herd reflects the low fertility rate of cows and the late age at puberty of replacement heifers. In order to provide more information about nutritional strategies to better develop Nellore heifers and to improve dams’ performance, two studies were conducted and the results are here presented in three papers. In the first paper, fifty Nellore heifers with 131.8 ± 9.9 kg average body weight (BW) and 138 ± 19 d of age were supplemented from 4 to 14 months to evaluate the effects of high (H) and low (L) supplementation levels pre and post-weaning on performance, endocrine, metabolic and reproductive responses of heifers. Heifers were distributed in five supplementation plans: HH – animals received 6 g/kg of BW pre and post-weaning; HL – animals received 6 g/kg of BW of supplement pre-weaning and 3 g/kg of BW post-weaning; LH – animals received 3 g/kg of BW pre-weaning and 6 g/kg of BW post-weaning; LL – animals received 3 g/kg of BW pre and post-weaning; and CC – control, no supplement was fed. Interactions between level fed pre and post-weaning were not significant for any performance variables evaluated (P > 0.10). Level of supplement fed pre-weaning did not affect any of the performance variables evaluated at the end of the experiment (P > 0.10). There was a significant effect of supplementation and level of supplementation offered post-weaning on average daily gain (ADG) in the post-weaning phase and final BW (P < 0.05). Overall ADG was also affected only by supplementation and level of supplement fed post-weaning (P < 0.05) with animals receiving 6 g/kg of BW post-weaning gaining more. Follicular diameter was greater for animals receiving 6 g/kg of BW post-weaning (P < 0.05). Growth hormone tended to be higher for heifers receiving 6 g/kg of BW pre-weaning (P < 0.10) and in the post-weaning phase, growth hormone was lower for heifers receiving supplementation (P < 0.05). No difference in insulin levels was observed in the pre-weaning phase (P > 0.10) and insulin levels post-weaning were affected only by level of supplementation offered in that phase (P < 0.05). Most metabolites were not affected by pre-weaning treatment (P > 0.10). There was no difference in total cholesterol, HDL and LDL levels among treatments pre-weaning (P > 0.10). All metabolites related to fat metabolism reduced after weaning but only LDL was significantly different among treatments (P < 0.05). There was a positive effect of level of supplementation post-weaning on serum total protein concentration (P < 0.05). Supplementation increased albumin levels (P < 0.05) and animals receiving high amount of supplement had higher albumin levels as well (P < 0.05). There was no significant difference in globulins concentrations (P > 0.10). In summary, performance, endocrine, metabolic and reproductive variables evaluated were improved by level of supplement fed post-weaning, with heifers receiving 6 g/kg of BW having greater responses, independently of level received pre-weaning. The same fifty pairs used in the study described for the previous paper were used in the second paper to evaluate the effects of high and low supplementation levels for Nellore heifer calves on performance, milk production and metabolic prolife of their dams. The same treatments evaluated during the pre-weaning phase of the previous paper were also here evaluated: 0 – control, no supplement was fed to calves; 3 - calves received supplement in the amount of 3 g/kg of BW; 6 - calves received supplement in the amount of 6 g/kg of BW. There was no significant effect level of supplementation offered to offspring on cow BW, BCS and subcutaneous fat thickness (P > 0.10). Level of supplementation of heifer calves did not significantly affect milk production corrected to 4% of fat (P > 0.10). Fat, protein, lactose and total solids of the milk also did not differ among supplementation strategies (P > 0.10). Level of supplement fed to calves had no effect on cows’ glucose, total cholesterol, HDL, LDL, triglycerides, total protein and albumin levels (P > 0.10). In conclusion, creep-feeding calves in the amounts of 3 or 6 g/kg of BW daily has no major impact on dams’ performance. In the second study, presented in the third paper, two experiments were conducted aiming to evaluate the effects of supplementation strategies for beef cows on the last third of gestation. In Experiment 1, to evaluate performance and reproductive responses, thirty-five pregnant Nellore cows were assigned to a completely randomized design with 4 treatments: control, which received no supplement; supplementation for the last 30 d of gestation (30d; 3.0 kg/d); supplementation for the last 60 d of gestation (60d; 1.5 kg/d); or supplementation for the last 90 d of gestation (90d; 1.0 kg/d). All supplemented treatments received the same total amount of supplement (20% of crude protein) throughout the experiment, 90 kg. Experiment 2 was delineated aiming to evaluate the effects of the amounts fed for cows in Experiment 1 on intake and metabolism. Four multiparous pregnant Nellore cows were assigned to a 4 × 4 Latin square design, with 4 experimental periods of 15 d each. There was a linear effect of days of supplementation on calving body weight (BW; P < 0.05) and a quadratic effect on BW change from parturition to d 31 post-calving (P < 0.05), with cows on the 60d strategy loosing less BW. No difference was found in offspring birth BW (P > 0.10). The 60d strategy tended to have higher pregnancy rate in the first fixed time artificial insemination (FTAI; P < 0.10), but there was no difference in the overall pregnancy rates (P > 0.10). Level of supplementation did not affect forage intake or neutral detergent fiber digestibility (P > 0.10). Nitrogen excreted through urine tended to increase linearly with level of supplementation (P < 0.10). We conclude that providing 1.5 kg of supplement during the last 60 d of gestation improves cow reproductive performance in the following breeding season with no negative effect on forage intake.