Made available in DSpace on 2018-06-27T18:56:26Z (GMT). No. of bitstreams: 3 Marcia Ebling de Souza.pdf: 2695265 bytes, checksum: a2e937aea21007fe96d911a8926690fc (MD5) Marcia Ebling de Souza.pdf.txt: 137369 bytes, checksum: 1823ab125cb3d2d640b4054a50610fcf (MD5) Marcia Ebling de Souza.pdf.jpg: 3457 bytes, checksum: 86b6a5529e61dfd18d87fbf869cbc570 (MD5) Previous issue date: 2014-08-21 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Infections caused by Candida species are an important cause of morbidity and mortality in immunocompromised patients. This growing trend has been linked to resistance to antimicrobial therapy and the ability of the organism to form biofilms. Melaleuca alternifolia oil is traditionally used as an herbal antimicrobial that shows activity in biofilms formed by Candida species. The present study aimed to evaluate the antimicrobial and antibiofilm activity nanoparticles and the essential oil of M. alternifolia. Oil and characterization of nanoparticles M. alternifolia. Antimicrobial activity was determined by the microdilution technique was performed. The ability to form biofilms at different glucose concentrations and measured the levels of exopolysaccharides and proteins in the biofilms was verified. The qualitative analysis of biofilms was performed by staining of Calcofluor White. The cytotoxicity of nanoparticles and the oil was assessed. The chromatographic profile showed that M. alternifolia oil conforms with ISO 4730 with the main constituents, 41.9% of Terpinen-4-ol, 20.1% of γ-terpinene, 9.8% of α-terpinene and 6.0% of 1.8-Cineol. Nanoparticles M. alternifolia oil had a pH of 6.3, particle diameter of 158.2 ± 2 nm, polydispersity 0.213 ± 0.017 and zeta potential of -8.69 ± 0.80 mV. The oil and nanoparticles M. alternifolia showed antimicrobial activity against most microorganisms evaluated. Microorganisms that showed an increased capacity to form biofilms were C. albicans, C. tropicalis, C. membranafaciens, C. parapsilosis and C. glabrata at a concentration of 1% glucose. Administration of oil or nanoparticles of M. alternifolia oil represented a significant reduction of biofilm formed by all Candida species used, as well as a reduction in protein levels and exopolysaccharide biofilms. Was possible to visualize the reduction of biofilm in the presence of nanoparticles of M. alternifolia with Calcofluor White staining. The oil and nanoparticles M. alternifolia showed cytotoxic character at all concentrations evaluated. With the increase in the concentration of fetal calf serum medium, an inhibition of the toxic effect of the nanoparticles occurs. There are probably involved in protein-corona effect on the cytotoxicity of nanoparticles / As infecções causadas por espécies de Candida são importante causa de morbi-mortalidade em pacientes imunodeprimidos. Esta tendência crescente tem sido associada a resistência a terapia antimicrobiana e a capacidade do microrganismo em formar biofilmes. O óleo de Melaleuca alternifolia é um fitoterápico tradicionalmente utilizado como antimicrobiano, que apresenta atividade em biofilmes formados por espécies de Candida. O presente estudo teve como objetivo avaliar a atividade antimicrobiana e antibiofilme de nanopartículas e do óleo essencial de M. alternifolia. Foi realizada a caracterização do óleo e das nanopartículas de M. alternifólia A atividade antimicrobiana foi determinada através da técnica de microdiluição. Foi verificada a capacidade de formação de biofilmes em diferentes concentrações de glicose e mensurados os níveis de exopolissacarídeos e proteínas nos biofilmes formados. A análise qualitativa dos biofilmes foi realizada através da coloração de Calcoflúor Branco. Foi avaliada a citotoxicidade do óleo e das nanopartículas. O perfil cromatográfico demonstrou que óleo de M. alternifolia está de acordo com a ISO 4730 com os constituintes majoritários, 41,9% de Terpinen-4-ol, 20,1% de γ-Terpineno, 9,8% de α-Terpineno e 6,0% de 1,8-Cineol. As nanopartículas de óleo de M. alternifolia apresentaram pH de 6,3, diâmetro de partícula de 158,2 ± 2 nm, índice de polidispersão de 0,213 ± 0,017 e potencial zeta de -8,69 ± 0,80 mV. O óleo e as nanopartículas de M. alternifolia apresentaram atividade antimicrobiana frente a maioria dos microrganismos avalidados. Os microrganismos que apresentaram uma maior capacidade na formação de biofilmes foram C. albicans, C. tropicalis, C. membranafaciens, C. parapsilosis e C. glabrata na concentração de 1% de glicose. A administração de óleo ou as nanopartículas de óleo de M. alternifolia representou uma redução significativa do biofilme formado por todas as espécies de Candida utilizadas, bem como uma redução nos níveis de proteínas e exopolissacarídeos dos biofilmes. Foi possível visualizar a redução do biofilme na presença das nanopartículas de M. alternifolia com a coloração Calcofluor Branco. O óleo e as nanopartículas de M. alternifolia apresentaram caráter citotóxicos em todas as concentrações avaliadas. Com o aumento na concentração de soro fetal bovino do meio, ocorre uma inibição do efeito tóxico das nanopartículas. Provavelmente há o envolvimento do efeito proteína-corona na citotoxicidade das nanopartículas

Fundação de Apoio a Pesquisa e à Inovação Tecnológica do Estado de Sergipe - FAPITEC/SE / Staphylococcus aureus has been considered a major public health problem worldwide due mainly to the ability to develop resistance to antibiotics. The prevalence of methicillin resistant strains of S. aureus (MRSA) in both hospital and community settings has been increasing, with cases of infections and deaths reported in healthy children and adults. Bacteriocins have been identified as promising alternatives for the control of this pathogen. However, besides the therapeutic use of these peptides still not approved, some studies indicate the possibility of selection of resistant strains. Therefore, prior to the therapeutic use of bacteriocins, studies must be carried out to understand the effect that bacteriocin may have on the selection of resistant strains to avoid the current problem with lineages resistant to traditional antibiotics. In view of the above, the objective of this study was to verify the antimicrobial activity of nisin against strains of MRSA and MSSA isolated from the oropharynx of health professionals and verify the selection of strains resistant to bacteriocin. For the genotypic characterization of the MRSA and MSSA strains, the nucA, LuckPV, mecA and mecC genes were tested. The MSSA lines were positive for amplification of the nucA gene only, confirming the identification of genus and species of these strains. For MRSA strains, the only gene that was not detected was mecC, confirming the methicillin resistance phenotype and that these strains are of human origin and of community environments. The results obtained by the agar diffusion test demonstrated that 80% of the MSSA strains (n = 30) were inhibited by nisin and only one MRSA line (n = 6) showed no sensitivity to bacteriocin. The MIC of MSSA strains ranged from 97.7 to 1250 IU / mL and from MRSA strains of 937.50 to 5000 IU / mL. The DBM for MSSA strains varied from 97.7 IU / mL to values greater than 50,000 IU / mL, and for MRSA, this variation was between 5000 IU / mL at values greater than 10,000 IU / mL depending on the lineage. For most lineages DBM was higher than MIC, showing that the effect of bacteriocin depends on bacteriocin concentration: low concentrations exert bacteriostatic effect and high concentrations bactericidal effect. The addition of increasing concentrations of the bacteriocin to the BHI medium generally resulted in the increase in the lag phase and decrease in the specific growth rate and maximal DO reached by the MSSA and MRSA cultures. MSSA and MRSA strains were transferred for approximately 30 generations in the presence of bacteriocin and a decrease in sensitivity was observed with a consequent increase in nisin MIC for all strains tested. The bacteriocin resistance phenotype has been shown to be a stable trait for these strains and may be associated with a genetic factor. It has also been observed that the use of nisin may trigger cross-resistance to some antibiotics. The results obtained demonstrated that nisin is efficient in controlling the growth of MSSA and MRSA. However, the fact that these lines demonstrate resistance to bacteriocin after transfer in the presence of the same indicates the need to develop strategies to avoid in the future the current problem of resistance to antibiotics. The best way to use bacteriocins therapeutically is to suggest that it is in combination with traditional antibiotics. / Staphylococcus aureus têm sido considerado um dos maiores problemas de saúde pública a nível mundial devido, principalmente, a habilidade de desenvolver resistência a antibióticos. A prevalência de linhagens de S. aureus resistentes a meticilina (MRSA) tanto em ambiente hospitalar quanto em ambientes comunitários têm aumentado, sendo descritos casos de infecções e relatos de mortes em crianças e adultos saudáveis. Bacteriocinas tem sido apontadas como alternativas promissoras para o controle deste patógeno. Entretanto, além do uso terapêutico destes peptídeos ainda não ser aprovado, alguns estudos indicam a possibilidade de seleção de linhagens resistentes. Portanto, antes do uso terapêutico de bacteriocinas, estudos precisam ser realizados para o entendimento do efeito que a bacteriocina possa ter na seleção de linhagens resistentes para evitar o problema da atualidade com linhagens resistentes aos antibióticos tradicionais. Diante do exposto, o objetivo deste trabalho foi verificar a atividade antimicrobiana da nisina contra cepas de MRSA e MSSA isoladas da orofaringe de profissionais da área de saúde e verificar a seleção de linhagens resistentes à bacteriocina. Para a caracterização genotípica das linhagens MRSA e MSSA, foram testados os genes nucA, LuckPV, mecA e mecC. As linhagens MSSA foram positivas para amplificação apenas do gene nucA, confirmando a identificação de gênero e espécie destas linhagens. Para as linhagens MRSA, o único gene que não foi detectado foi o meC, confirmando o fenótipo de resistência a meticilina e que estas linhagens são de origem humana e de ambientes comunitários. Os resultados obtidos pelo teste de difusão em ágar demonstraram que 80% das linhagens MSSA (n=30) foram inibidas pela nisina e apenas uma linhagem MRSA (n=6) não apresentou sensibilidade à bacteriocina. A CIM das linhagens de MSSA variou de 97,7 a 1250UI/mL e das linhagens MRSA de 937,50 a 5000 UI/mL. A DBM para as linhagens de MSSA variou de 97,7 UI/mL a valores superiores a 50000 UI/mL, e para MRSA esta variação ficou entre 5000 UI/mL a valores maiores que 10000 UI/mL dependendo da linhagem. Para a maioria das linhagens a DBM foi maior que a CIM, mostrando que o efeito da bacteriocina depende da concentração da mesma: baixas concentrações exercem efeito bacteriostático e altas concentrações efeito bactericida. A adição de concentrações crescentes da bacteriocina ao meio BHI resultaram, de maneira geral, no aumento da fase lag e diminuição da velocidade específica de crescimento e DO máxima atingida pelas culturas MSSA e MRSA. Linhagens de MSSA e MRSA foram transferidas por aproximadamente 30 gerações na presença da bacteriocina e foi observada diminuição na sensibilidade com consequente aumento da CIM da nisina para todas as linhagens testadas. O fenótipo de resistência à bacteriocina demonstrou ser uma característica estável para estas linhagens, podendo estar associado a um fator genético. Foi observado também que a utilização da nisina pode desencadear resistência cruzada a alguns antibióticos. Os resultados obtidos demonstraram que a nisina é eficiente em controlar o crescimento de MSSA e MRSA. Entretanto, o fato destas linhagens demonstrarem resistência a bacteriocina após transferência na presença da mesma indica a necessidade de desenvolver estratégias para evitar no futuro o problema atual de resistência a antibióticos. A melhor maneira de usar bacteriocinas terapeuticamente sugere-se que seja em combinação com antibióticos tradicionais. / São Cristóvão, SE

Made available in DSpace on 2016-08-10T10:29:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Sheila Elke Araujo Nunes.pdf: 1602464 bytes, checksum: abd927bf50d2a5777d548fc35de84e8c (MD5) Previous issue date: 2010-06-28 / The indication of phytotherapy as an alternative health practice is a recommendation by the World Health Organization (WHO) and a worldwide practice. In many Brazilian states and cities this kind of therapeutic alternative is available in basic health services, which has favorably indicated the amplification of the medicare prescription drug coverage. This work aims to expose information to implement a phytotherapic project in the basic health assistance web in the district of Imperatriz, state of Maranhão. Between June and August, 2009, an ethnopharmacologic research was made in 29 basic health units of the family health program, in which 624 over eighteen years users were interviewed who were at the health unit during the period of the research and all agreed on participating. It was also collected information from 69 health professionals, among medical doctors, nurses and pharmacologists. It was noticed that 602 (96,5%) out of 624 interviewed users agreed on the inclusion of phytotherapic drugs in the roll of basic medications available by the city and 502 (80,45%) of them use medicinal plants as alternative therapy. One perturbing fact is that 433 (86,3%) of the interviewed users informed that they use medicinal plants without any restriction relating to the preparation, therapeutic measures and intermission between the dosages relying on the belief that there is no harm from medicinal plants. There is accordance among the health professionals relating to the implementation of the project and 64 (92,7%) showed interest in participating on specialization or capabilities courses in the field. In the city of Imperatriz the implement of the project is possible, and it disposes of a good acceptance among users and health professionals. / A indicação da fitoterapia como prática alternativa de saúde, trata-se de uma recomendação da Organização Mundial de Saúde (OMS), praticada mundialmente. No Brasil vários estados e municípios dispõem desta alternativa terapêutica nos serviços básicos de saúde, o que vem pontuando de forma favorável na ampliação da cobertura medicamentosa. Este trabalho tem como objetivo viabilizar informações para a implantação de um projeto de fitoterapia na rede de atenção básica do município de Imperatriz, estado do Maranhão. No período de junho a agosto de 2009 realizou-se um levantamento etnofarmacológico, em 29 Unidades Básicas de Saúde do Programa Saúde da Família, no qual foram entrevistados 624 usuários maiores de dezoito anos, que se encontrava na unidade de saúde no momento da pesquisa e que concordaram participar. Coletou-se também informações de 69 profissionais de saúde, entre, médicos, enfermeiros e farmacêuticos. Observou-se que 602 (96,5%) dos 624 usuários entrevistados aprovam a inclusão de medicamentos fitoterápicos na relação de medicamentos básicos disponibilizados pelo município e 502 (80,45%) destes utilizam plantas medicinais como alternativa terapêutica. Um dado preocupante é o fato de 433 (86,3%) dos pesquisados, informarem que utilizam plantas medicinais sem qualquer restrição quanto a forma de preparo, medidas terapêuticas e intervalo entre as administrações, por acreditarem que as plantas medicinais não causam danos à saúde. Quanto aos profissionais de saúde todos, os entrevistados, concordaram com a implantação do projeto e 64 (92,7%) demonstram ter interesse em participar de cursos de especialização ou capacitação na área. Conclui-se que no município de Imperatriz a implantação do projeto é viável, e dispõe de uma boa aceitação entre usuários e profissionais de saúde.