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ATIVIDADE ANTIMICROBIANA E ANTIBIOFILME DE NANOPARTÍCULAS DE ÓLEO DE Melaleuca alternifoliaSouza, Márcia Ebling de 21 August 2014 (has links)
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Previous issue date: 2014-08-21 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Infections caused by Candida species are an important cause of morbidity and mortality in immunocompromised patients. This growing trend has been linked to resistance to antimicrobial therapy and the ability of the organism to form biofilms. Melaleuca alternifolia oil is traditionally used as an herbal antimicrobial that shows activity in biofilms formed by Candida species. The present study aimed to evaluate the antimicrobial and antibiofilm activity nanoparticles and the essential oil of M. alternifolia. Oil and characterization of nanoparticles M. alternifolia. Antimicrobial activity was determined by the microdilution technique was performed. The ability to form biofilms at different glucose concentrations and measured the levels of exopolysaccharides and proteins in the biofilms was verified. The qualitative analysis of biofilms was performed by staining of Calcofluor White. The cytotoxicity of nanoparticles and the oil was assessed. The chromatographic profile showed that M. alternifolia oil conforms with ISO 4730 with the main constituents, 41.9% of Terpinen-4-ol, 20.1% of γ-terpinene, 9.8% of α-terpinene and 6.0% of 1.8-Cineol. Nanoparticles M. alternifolia oil had a pH of 6.3, particle diameter of 158.2 ± 2 nm, polydispersity 0.213 ± 0.017 and zeta potential of -8.69 ± 0.80 mV. The oil and nanoparticles M. alternifolia showed antimicrobial activity against most microorganisms evaluated. Microorganisms that showed an increased capacity to form biofilms were C. albicans, C. tropicalis, C. membranafaciens, C. parapsilosis and C. glabrata at a concentration of 1% glucose. Administration of oil or nanoparticles of M. alternifolia oil represented a significant reduction of biofilm formed by all Candida species used, as well as a reduction in protein levels and exopolysaccharide biofilms. Was possible to visualize the reduction of biofilm in the presence of nanoparticles of M. alternifolia with Calcofluor White staining. The oil and nanoparticles M. alternifolia showed cytotoxic character at all concentrations evaluated. With the increase in the concentration of fetal calf serum medium, an inhibition of the toxic effect of the nanoparticles occurs. There are probably involved in protein-corona effect on the cytotoxicity of nanoparticles / As infecções causadas por espécies de Candida são importante causa de morbi-mortalidade em pacientes imunodeprimidos. Esta tendência crescente tem sido associada a resistência a terapia antimicrobiana e a capacidade do microrganismo em formar biofilmes. O óleo de Melaleuca alternifolia é um fitoterápico tradicionalmente utilizado como antimicrobiano, que apresenta atividade em biofilmes formados por espécies de Candida. O presente estudo teve como objetivo avaliar a atividade antimicrobiana e antibiofilme de nanopartículas e do óleo essencial de M. alternifolia. Foi realizada a caracterização do óleo e das nanopartículas de M. alternifólia A atividade antimicrobiana foi determinada através da técnica de microdiluição. Foi verificada a capacidade de formação de biofilmes em diferentes concentrações de glicose e mensurados os níveis de exopolissacarídeos e proteínas nos biofilmes formados. A análise qualitativa dos biofilmes foi realizada através da coloração de Calcoflúor Branco. Foi avaliada a citotoxicidade do óleo e das nanopartículas. O perfil cromatográfico demonstrou que óleo de M. alternifolia está de acordo com a ISO 4730 com os constituintes majoritários, 41,9% de Terpinen-4-ol, 20,1% de γ-Terpineno, 9,8% de α-Terpineno e 6,0% de 1,8-Cineol. As nanopartículas de óleo de M. alternifolia apresentaram pH de 6,3, diâmetro de partícula de 158,2 ± 2 nm, índice de polidispersão de 0,213 ± 0,017 e potencial zeta de -8,69 ± 0,80 mV. O óleo e as nanopartículas de M. alternifolia apresentaram atividade antimicrobiana frente a maioria dos microrganismos avalidados. Os microrganismos que apresentaram uma maior capacidade na formação de biofilmes foram C. albicans, C. tropicalis, C. membranafaciens, C. parapsilosis e C. glabrata na concentração de 1% de glicose. A administração de óleo ou as nanopartículas de óleo de M. alternifolia representou uma redução significativa do biofilme formado por todas as espécies de Candida utilizadas, bem como uma redução nos níveis de proteínas e exopolissacarídeos dos biofilmes. Foi possível visualizar a redução do biofilme na presença das nanopartículas de M. alternifolia com a coloração Calcofluor Branco. O óleo e as nanopartículas de M. alternifolia apresentaram caráter citotóxicos em todas as concentrações avaliadas. Com o aumento na concentração de soro fetal bovino do meio, ocorre uma inibição do efeito tóxico das nanopartículas. Provavelmente há o envolvimento do efeito proteína-corona na citotoxicidade das nanopartículas
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Potencial da nisina no controle de Staphylococcus aureus resistente (MRSA) e sensível (MSSA) à meticilina / Potencial of nisin in the control of methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) and methicillin-sensitive (MSSA)Silva, César Matos Ribeiro da 07 February 2018 (has links)
Fundação de Apoio a Pesquisa e à Inovação Tecnológica do Estado de Sergipe - FAPITEC/SE / Staphylococcus aureus has been considered a major public health problem worldwide due
mainly to the ability to develop resistance to antibiotics. The prevalence of methicillin
resistant strains of S. aureus (MRSA) in both hospital and community settings has been
increasing, with cases of infections and deaths reported in healthy children and adults.
Bacteriocins have been identified as promising alternatives for the control of this pathogen.
However, besides the therapeutic use of these peptides still not approved, some studies
indicate the possibility of selection of resistant strains. Therefore, prior to the therapeutic use
of bacteriocins, studies must be carried out to understand the effect that bacteriocin may have
on the selection of resistant strains to avoid the current problem with lineages resistant to
traditional antibiotics. In view of the above, the objective of this study was to verify the
antimicrobial activity of nisin against strains of MRSA and MSSA isolated from the
oropharynx of health professionals and verify the selection of strains resistant to bacteriocin.
For the genotypic characterization of the MRSA and MSSA strains, the nucA, LuckPV, mecA
and mecC genes were tested. The MSSA lines were positive for amplification of the nucA
gene only, confirming the identification of genus and species of these strains. For MRSA
strains, the only gene that was not detected was mecC, confirming the methicillin resistance
phenotype and that these strains are of human origin and of community environments. The
results obtained by the agar diffusion test demonstrated that 80% of the MSSA strains (n = 30)
were inhibited by nisin and only one MRSA line (n = 6) showed no sensitivity to bacteriocin.
The MIC of MSSA strains ranged from 97.7 to 1250 IU / mL and from MRSA strains of
937.50 to 5000 IU / mL. The DBM for MSSA strains varied from 97.7 IU / mL to values
greater than 50,000 IU / mL, and for MRSA, this variation was between 5000 IU / mL at
values greater than 10,000 IU / mL depending on the lineage. For most lineages DBM was
higher than MIC, showing that the effect of bacteriocin depends on bacteriocin concentration:
low concentrations exert bacteriostatic effect and high concentrations bactericidal effect. The
addition of increasing concentrations of the bacteriocin to the BHI medium generally resulted
in the increase in the lag phase and decrease in the specific growth rate and maximal DO
reached by the MSSA and MRSA cultures. MSSA and MRSA strains were transferred for
approximately 30 generations in the presence of bacteriocin and a decrease in sensitivity was
observed with a consequent increase in nisin MIC for all strains tested. The bacteriocin
resistance phenotype has been shown to be a stable trait for these strains and may be
associated with a genetic factor. It has also been observed that the use of nisin may trigger
cross-resistance to some antibiotics. The results obtained demonstrated that nisin is efficient
in controlling the growth of MSSA and MRSA. However, the fact that these lines demonstrate
resistance to bacteriocin after transfer in the presence of the same indicates the need to
develop strategies to avoid in the future the current problem of resistance to antibiotics. The
best way to use bacteriocins therapeutically is to suggest that it is in combination with
traditional antibiotics. / Staphylococcus aureus têm sido considerado um dos maiores problemas de saúde pública a
nível mundial devido, principalmente, a habilidade de desenvolver resistência a antibióticos.
A prevalência de linhagens de S. aureus resistentes a meticilina (MRSA) tanto em ambiente
hospitalar quanto em ambientes comunitários têm aumentado, sendo descritos casos de
infecções e relatos de mortes em crianças e adultos saudáveis. Bacteriocinas tem sido
apontadas como alternativas promissoras para o controle deste patógeno. Entretanto, além do
uso terapêutico destes peptídeos ainda não ser aprovado, alguns estudos indicam a
possibilidade de seleção de linhagens resistentes. Portanto, antes do uso terapêutico de
bacteriocinas, estudos precisam ser realizados para o entendimento do efeito que a
bacteriocina possa ter na seleção de linhagens resistentes para evitar o problema da atualidade
com linhagens resistentes aos antibióticos tradicionais. Diante do exposto, o objetivo deste
trabalho foi verificar a atividade antimicrobiana da nisina contra cepas de MRSA e MSSA
isoladas da orofaringe de profissionais da área de saúde e verificar a seleção de linhagens
resistentes à bacteriocina. Para a caracterização genotípica das linhagens MRSA e MSSA,
foram testados os genes nucA, LuckPV, mecA e mecC. As linhagens MSSA foram positivas
para amplificação apenas do gene nucA, confirmando a identificação de gênero e espécie
destas linhagens. Para as linhagens MRSA, o único gene que não foi detectado foi o meC,
confirmando o fenótipo de resistência a meticilina e que estas linhagens são de origem
humana e de ambientes comunitários. Os resultados obtidos pelo teste de difusão em ágar
demonstraram que 80% das linhagens MSSA (n=30) foram inibidas pela nisina e apenas uma
linhagem MRSA (n=6) não apresentou sensibilidade à bacteriocina. A CIM das linhagens de
MSSA variou de 97,7 a 1250UI/mL e das linhagens MRSA de 937,50 a 5000 UI/mL. A DBM
para as linhagens de MSSA variou de 97,7 UI/mL a valores superiores a 50000 UI/mL, e para
MRSA esta variação ficou entre 5000 UI/mL a valores maiores que 10000 UI/mL dependendo
da linhagem. Para a maioria das linhagens a DBM foi maior que a CIM, mostrando que o
efeito da bacteriocina depende da concentração da mesma: baixas concentrações exercem
efeito bacteriostático e altas concentrações efeito bactericida. A adição de concentrações
crescentes da bacteriocina ao meio BHI resultaram, de maneira geral, no aumento da fase lag
e diminuição da velocidade específica de crescimento e DO máxima atingida pelas culturas
MSSA e MRSA. Linhagens de MSSA e MRSA foram transferidas por aproximadamente 30
gerações na presença da bacteriocina e foi observada diminuição na sensibilidade com
consequente aumento da CIM da nisina para todas as linhagens testadas. O fenótipo de
resistência à bacteriocina demonstrou ser uma característica estável para estas linhagens,
podendo estar associado a um fator genético. Foi observado também que a utilização da nisina
pode desencadear resistência cruzada a alguns antibióticos. Os resultados obtidos
demonstraram que a nisina é eficiente em controlar o crescimento de MSSA e MRSA.
Entretanto, o fato destas linhagens demonstrarem resistência a bacteriocina após transferência
na presença da mesma indica a necessidade de desenvolver estratégias para evitar no futuro o
problema atual de resistência a antibióticos. A melhor maneira de usar bacteriocinas
terapeuticamente sugere-se que seja em combinação com antibióticos tradicionais. / São Cristóvão, SE
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SUBSÍDIOS PARA IMPLANTAÇÃO DO PROGRAMA DE FITOTERAPIA NO MUNICÍPIO DE IMPERATRIZ, ESTADO DO MARANHÃONunes, Sheila Elke Araujo 28 June 2010 (has links)
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Previous issue date: 2010-06-28 / The indication of phytotherapy as an alternative health practice is a recommendation
by the World Health Organization (WHO) and a worldwide practice. In many Brazilian
states and cities this kind of therapeutic alternative is available in basic health
services, which has favorably indicated the amplification of the medicare prescription
drug coverage. This work aims to expose information to implement a phytotherapic
project in the basic health assistance web in the district of Imperatriz, state of
Maranhão. Between June and August, 2009, an ethnopharmacologic research was
made in 29 basic health units of the family health program, in which 624 over
eighteen years users were interviewed who were at the health unit during the period
of the research and all agreed on participating. It was also collected information from
69 health professionals, among medical doctors, nurses and pharmacologists. It was
noticed that 602 (96,5%) out of 624 interviewed users agreed on the inclusion of
phytotherapic drugs in the roll of basic medications available by the city and 502
(80,45%) of them use medicinal plants as alternative therapy. One perturbing fact is
that 433 (86,3%) of the interviewed users informed that they use medicinal plants
without any restriction relating to the preparation, therapeutic measures and
intermission between the dosages relying on the belief that there is no harm from
medicinal plants. There is accordance among the health professionals relating to the
implementation of the project and 64 (92,7%) showed interest in participating on
specialization or capabilities courses in the field. In the city of Imperatriz the
implement of the project is possible, and it disposes of a good acceptance among
users and health professionals. / A indicação da fitoterapia como prática alternativa de saúde, trata-se de uma
recomendação da Organização Mundial de Saúde (OMS), praticada mundialmente.
No Brasil vários estados e municípios dispõem desta alternativa terapêutica nos
serviços básicos de saúde, o que vem pontuando de forma favorável na ampliação
da cobertura medicamentosa. Este trabalho tem como objetivo viabilizar informações
para a implantação de um projeto de fitoterapia na rede de atenção básica do
município de Imperatriz, estado do Maranhão. No período de junho a agosto de
2009 realizou-se um levantamento etnofarmacológico, em 29 Unidades Básicas de
Saúde do Programa Saúde da Família, no qual foram entrevistados 624 usuários
maiores de dezoito anos, que se encontrava na unidade de saúde no momento da
pesquisa e que concordaram participar. Coletou-se também informações de 69
profissionais de saúde, entre, médicos, enfermeiros e farmacêuticos. Observou-se
que 602 (96,5%) dos 624 usuários entrevistados aprovam a inclusão de
medicamentos fitoterápicos na relação de medicamentos básicos disponibilizados
pelo município e 502 (80,45%) destes utilizam plantas medicinais como alternativa
terapêutica. Um dado preocupante é o fato de 433 (86,3%) dos pesquisados,
informarem que utilizam plantas medicinais sem qualquer restrição quanto a forma
de preparo, medidas terapêuticas e intervalo entre as administrações, por
acreditarem que as plantas medicinais não causam danos à saúde. Quanto aos
profissionais de saúde todos, os entrevistados, concordaram com a implantação do
projeto e 64 (92,7%) demonstram ter interesse em participar de cursos de
especialização ou capacitação na área. Conclui-se que no município de Imperatriz a
implantação do projeto é viável, e dispõe de uma boa aceitação entre usuários e
profissionais de saúde.
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