Utilizou-se técnicas de geoprocessamento e imagens geradas pelo Sistema Landsat 7 - ETM+, para identificar áreas favoráveis ao crescimento das populações de Amblyomma cajennense e, conseqüentemente, o risco de infestação humana pelo carrapato no Município de Piracicaba, São Paulo, Brasil. As imagens de satélite permitiram determinar os valores de temperatura e do Índice de Vegetação por Diferença Normalizada (NDVI) que, em associação com as variáveis, densidade de eqüinos e modelo preditivo de distribuição de capivaras (Hydrochoerus hydrochaeris), foram utilizadas para construir um modelo de risco multivariado identificando assim áreas favoráveis ao crescimento de populações do carrapato. Verificou-se que a população humana exposta às regiões altamente desfavoráveis ou desfavoráveis ao crescimento de populações de A. cajennense é de, no mínimo, 70,14% podendo chegar a 96,16%. Por outro lado, de 0,04% a 15,23% da população está exposta a áreas favoráveis ou altamente favoráveis ao longo do ano. / Geoprocessing techniques and Landsat 7 - ETM+ images were used to identify suitable areas for the development of Amblyomma cajennense populations and the resulting risk of human infestation by that tick in Piracicaba, São Paulo, Brazil. Temperature and Normalized Difference Vegetation Index (NDVI) were calculated based on satellite images, and those data were later associated with horse density and a predictive model of spatial distribution of capybaras (Hydrochoerus hydrochaeris) to build a multi-variant risk model. It was observed that the human population exposed to extremely unsuitable or unsuitable areas ranges from 70.14% to 96.16%. On the other hand, 0.04% to 15.23% of the human population is exposed to suitable or extremely suitable areas throughout the year.

Com o objetivo de obtermos isolados de Rickettsia spp. para confirmar as evidências sobre o papel do A. dubitatum e do A. triste na transmissão de riquétsia do GFM no Brasil e Uruguai, respectivamente, realizou-se em áreas endêmicas para febre maculosa nesses dois países, a avaliação da presença de riquétsia em carrapatos da espécie A. dubitatum no município de Pedreira, estado de São Paulo e em carrapatos da espécie A. triste, em uma área suburbana no sudeste do Uruguai, além da tentativa de isolamento em cultivo de células Vero e posterior caracterização molecular de isolados provenientes dessas duas espécies de carrapatos. Foram coletados um total de 841 (367 machos e 474 fêmeas) carrapatos adultos da espécie A. dubitatum e 78 (25 machos e 53 fêmeas) amostras de A. triste, os quais foram submetidos ao teste de hemolinfa. Todas as amostras foram submetidas à extração de DNA e testadas pela técnica da PCR para o gene gltA, presente em todas as espécies de riquétsias. Dos 841 A. dubitatum colhidos, em 153 (18,18%) amostras de hemolinfa foram observados organismos morfologicamente compatíveis com riquétsias, 452 foram negativas (53,74%) e 236 (28,06%) amostras de carrapatos foram inconclusivas. Todas as 78 amostras de carrapatos da espécie A. triste provenientes do Uruguai foram negativas no teste de hemolinfa. Dos 841 A. dubitatum, um total de 378 (44,94%) amostras foram positivas para o gene gltA e, posteriormente, foram testadas para o gene ompA, sendo que nenhuma das amostras foi positiva. Dos 378 A. dubitatum positivos na PCR, o produto amplificado de 93 foi seqüenciado, sendo todos identificados como Rickettsia bellii de acordo com seqüências disponíveis no GenBank. Das 78 amostras de carrapatos da espécie A. triste, provenientes do Uruguai, duas amostras, denominadas de carrapatos #5 e #35, foram positivas na PCR e, submetidas à tentativa de isolamento em células Vero, pela técnica de \"shell vial\". O estabelecimento do isolado de riquétsia somente foi obtido com sucesso do carrapato #5, sendo este isolado designado de At#5-URG, o qual foi depositado como amostra de referência em nosso laboratório. Amostras de DNA do isolado At#5-URG foram testadas para uma bateria de oligonucleotídeos iniciadores objetivando a amplificação de fragmentos de mais três genes de riquétsias: gltA, ompB e omp, os quais foram, posteriormente seqüenciados e os fragmentos de 1.084, 775 e 491 nucleotídeos dos genes gltA, ompB e ompA, respectivamente, foram obtidos e mostraram 100% de identidade com as seqüências correspondentes disponíveis no GenBank para a cepa Maculatum de Rickettsia parkeri dos EUA. / Owing to the potential role of the tick Amblyomma dubitatum and Amblyomma triste in the transmission of the Spotted Fever Group (SFG) Rickettsia, this study evaluated infection by Rickettsia in ticks collected in Brazil and Uruguay, where rickettsial infection is endemic. A total of 841 (367 males e 474 females) A. dubitatum adult ticks were collected in Pedreira, an area of Brazilian Spotted Fever (BSF) endemicity in the state of São Paulo, and 78 adult ticks (25 males, 53 females) identified as A. triste were collected from vegetation in the suburban area of Toledo Chico, southern Uruguay. At the laboratory, all samples were individually processed by the hemolymph test with Gimenez staining and PCR targeting a fragment of the rickettsial gene gltA, present in all Rickettsia species. From 841 A. dubitatum ticks tested by the hemolymph test, 153 (18.18%) samples were positive, 452 (53.74%) were negative, and 236 (28.06%) were inconclusive. All 78 samples of A. triste ticks from Uruguay were negative by the hemolymph test. All 841 samples of A. dubitatum were submitted to PCR, being 378 (44.94%) positive and afterwards tested by PCR targeting a 150-bp fragment of the ompA (a major outer membrane protein A present only in SFG Rickettsia), being all samples negative. From the 378 PCR-positive samples of A. dubitatum, DNA sequence was determined for 93 samples, being all identified as Rickettsia bellii according to GenBank available sequences. For the A. triste samples, only 2 ticks (1 male, 1 female) yielded expected amplicons by PCR. Rickettsia isolation in cell culture was attempted by using the shell vial technique from these two PCR-positive ticks. Rickettsiae were successfully isolated and established in Vero cell culture from the female tick. This isolate, designated as At#5-URG, has been deposited as a reference strain in the Rickettsial Collection of Faculty of Veterinary Medicine in the University of São Paulo. DNA extracted from infected cells of the third passage was tested by a battery of PCRs that used primer pairs targeting fragments of 3 rickettsial genes: gltA, ompB (a major outer membrane protein B), and ompA. PCR products of expected size were obtained in all reactions and subjected to DNA sequencing. Fragments of 1,084, 775, and 491 bp of the gltA, ompB, and ompA genes, respectively, were obtained and showed 100% identity to the corresponding sequences available in GenBank for the Maculatum strain of Rickettsia parkeri from United States.

Serine protease inhibitors (serpins) are a large superfamily of proteins that regulate critical proteolytic pathways by inhibiting serine proteases. Tick-encoded serpins are thought to play a vital role in the feeding process. To determine the relationship of Amblyomma americanum serpin 6 (S6) to tick feeding regulation, this study attempted to define the biological significance of this molecule through transcription and protein expression profiles, biochemical characterization of recombinant s6 (rS6), and the effects of in vivo post-transcriptional gene silencing on blood meal acquisition and fecundity. Transcriptional analysis revealed that S6 mRNA is ubiquitously expressed in unfed and partially fed ticks through the initial 5 days of the feeding period. S6 mRNA abundance in dissected tick organs showed a 3.7, 3.4, and 1.7- fold upregulation from 24 h to 96 h in the salivary gland (SG), midgut (MG) and the carcass (CA) remnant after removal of SG, MG respectively before downregulating at 120 h. Native S6 protein is downregulated in response to tick feeding, with correlation between transcription and protein expression profiles only consistent from the unfed to 48 h. Similarly, S6 protein expression in dissected female tick tissues is reduced as feeding progresses, with S6 being identified in SG, MG, ovary (OV), and CA from 24 h until 72 h. Biochemical characterization of S6 was not achieved, as rS6 did not form an irreversible complex when incubated with chymotrypsin or trypsin. Although complete silencing of S6 and S6/S17 mRNA was achieved, post-transcriptional gene knockdown had no effect on tick feeding efficiency or fecundity. These findings have been discussed in regards to the development of a vaccine against A. americanum and necessary future studies have been suggested for further characterization and assessment of biological significance.

Com o objetivo de obtermos isolados de Rickettsia spp. para confirmar as evidências sobre o papel do A. dubitatum e do A. triste na transmissão de riquétsia do GFM no Brasil e Uruguai, respectivamente, realizou-se em áreas endêmicas para febre maculosa nesses dois países, a avaliação da presença de riquétsia em carrapatos da espécie A. dubitatum no município de Pedreira, estado de São Paulo e em carrapatos da espécie A. triste, em uma área suburbana no sudeste do Uruguai, além da tentativa de isolamento em cultivo de células Vero e posterior caracterização molecular de isolados provenientes dessas duas espécies de carrapatos. Foram coletados um total de 841 (367 machos e 474 fêmeas) carrapatos adultos da espécie A. dubitatum e 78 (25 machos e 53 fêmeas) amostras de A. triste, os quais foram submetidos ao teste de hemolinfa. Todas as amostras foram submetidas à extração de DNA e testadas pela técnica da PCR para o gene gltA, presente em todas as espécies de riquétsias. Dos 841 A. dubitatum colhidos, em 153 (18,18%) amostras de hemolinfa foram observados organismos morfologicamente compatíveis com riquétsias, 452 foram negativas (53,74%) e 236 (28,06%) amostras de carrapatos foram inconclusivas. Todas as 78 amostras de carrapatos da espécie A. triste provenientes do Uruguai foram negativas no teste de hemolinfa. Dos 841 A. dubitatum, um total de 378 (44,94%) amostras foram positivas para o gene gltA e, posteriormente, foram testadas para o gene ompA, sendo que nenhuma das amostras foi positiva. Dos 378 A. dubitatum positivos na PCR, o produto amplificado de 93 foi seqüenciado, sendo todos identificados como Rickettsia bellii de acordo com seqüências disponíveis no GenBank. Das 78 amostras de carrapatos da espécie A. triste, provenientes do Uruguai, duas amostras, denominadas de carrapatos #5 e #35, foram positivas na PCR e, submetidas à tentativa de isolamento em células Vero, pela técnica de \"shell vial\". O estabelecimento do isolado de riquétsia somente foi obtido com sucesso do carrapato #5, sendo este isolado designado de At#5-URG, o qual foi depositado como amostra de referência em nosso laboratório. Amostras de DNA do isolado At#5-URG foram testadas para uma bateria de oligonucleotídeos iniciadores objetivando a amplificação de fragmentos de mais três genes de riquétsias: gltA, ompB e omp, os quais foram, posteriormente seqüenciados e os fragmentos de 1.084, 775 e 491 nucleotídeos dos genes gltA, ompB e ompA, respectivamente, foram obtidos e mostraram 100% de identidade com as seqüências correspondentes disponíveis no GenBank para a cepa Maculatum de Rickettsia parkeri dos EUA. / Owing to the potential role of the tick Amblyomma dubitatum and Amblyomma triste in the transmission of the Spotted Fever Group (SFG) Rickettsia, this study evaluated infection by Rickettsia in ticks collected in Brazil and Uruguay, where rickettsial infection is endemic. A total of 841 (367 males e 474 females) A. dubitatum adult ticks were collected in Pedreira, an area of Brazilian Spotted Fever (BSF) endemicity in the state of São Paulo, and 78 adult ticks (25 males, 53 females) identified as A. triste were collected from vegetation in the suburban area of Toledo Chico, southern Uruguay. At the laboratory, all samples were individually processed by the hemolymph test with Gimenez staining and PCR targeting a fragment of the rickettsial gene gltA, present in all Rickettsia species. From 841 A. dubitatum ticks tested by the hemolymph test, 153 (18.18%) samples were positive, 452 (53.74%) were negative, and 236 (28.06%) were inconclusive. All 78 samples of A. triste ticks from Uruguay were negative by the hemolymph test. All 841 samples of A. dubitatum were submitted to PCR, being 378 (44.94%) positive and afterwards tested by PCR targeting a 150-bp fragment of the ompA (a major outer membrane protein A present only in SFG Rickettsia), being all samples negative. From the 378 PCR-positive samples of A. dubitatum, DNA sequence was determined for 93 samples, being all identified as Rickettsia bellii according to GenBank available sequences. For the A. triste samples, only 2 ticks (1 male, 1 female) yielded expected amplicons by PCR. Rickettsia isolation in cell culture was attempted by using the shell vial technique from these two PCR-positive ticks. Rickettsiae were successfully isolated and established in Vero cell culture from the female tick. This isolate, designated as At#5-URG, has been deposited as a reference strain in the Rickettsial Collection of Faculty of Veterinary Medicine in the University of São Paulo. DNA extracted from infected cells of the third passage was tested by a battery of PCRs that used primer pairs targeting fragments of 3 rickettsial genes: gltA, ompB (a major outer membrane protein B), and ompA. PCR products of expected size were obtained in all reactions and subjected to DNA sequencing. Fragments of 1,084, 775, and 491 bp of the gltA, ompB, and ompA genes, respectively, were obtained and showed 100% identity to the corresponding sequences available in GenBank for the Maculatum strain of Rickettsia parkeri from United States.

Amblyomma maculatum Koch (Acari: Ixodidae) is the primary vector for Rickettsia parkeri which is a causative agent of American Boutonneuse fever. Infection rates of R. parkeri in A. maculatum populations from the United States are approximately 0-56%. The first human clinical case of Rickettsia parkeri infection was reported in 2014 and the patient presented with a febrile illness similar to Rocky Mountain spotted fever but showing milder clinical symptoms. Through 2016, approximately 40 human clinical cases of R. parkeri infection have been reported within southern United States. Amblyomma maculatum may also be infected with a rickettsia of unknown pathogenicity “Candidatus Rickettsia andeanae” which has 0-6.3% infection rates in much of the southeastern United States. However, the interaction between R. parkeri and “Ca. R. andeanae” is largely unknown. In studies presented here, we found infection rates of R. parkeri and “Ca. R. andeanae” in questing A. maculatum from Mississippi between 2013 and 2015 to be within the reported ranges for the Southeast, though higher than those previously reported for this area; levels of R. parkeri were also higher than “Ca. R. andeanae” in individual infected ticks. Using animal tickeeding trials, we found tick tissue levels of both rickettsiae to increase over time, while transovarial transmission was most successful for “Ca. R. andeanae” when present alone in ticks or co-infecting with R. parkeri. Finally, adult ticks transmitted R. parkeri to naïve coeeding ticks, and tick acquisition and survival was more efficient when coeeding ticks were in close proximity and naïve ticks uninfected with “Ca. R. andeanae.” In summary, this dissertation research filled specific gaps in our knowledge of R. parkeri-“Ca. R. andeanae” interactions in individual A. maculatum ticks and tick populations. Through this research, we have contributed to a better understanding of the human pathogen, R. parkeri, and sympatric species, “Ca. R. andeanae.” We anticipate that sharing these data with the research community will lead to a better understanding of the complexities of spotted fever rickettsiosis in the United States.

As riquétsias são pesquisadas por muitos grupos em diversas regiões do mundo, pois podem infectar os humanos e animais. No período de julho de 2008 a junho de 2009 no Núcleo Itutinga Pilões, localizado no Parque Estadual da Serra do Mar, foram realizadas coletas mensais de carrapatos (455 adultos, 1939 ninfas e 46 bolos de larvas) distribuídas por seis trilhas distintas. No presente estudo constatou-se a existência de cerca de treze espécies de carrapatos no local (A. aureolatum, A. brasiliense, A. dubitatum, A. fuscum, A. incisum, A. longirostre, A. naponense, A. nodosum, A. ovale, Ixodes aragaoi, Ixodes loricatus. Haemaphysalis juxtakochi e Riphicephalus sanguineus) As espécies de maior expressão foram: A. incisum, frequentemente presente em antas, seguido por H. juxtakochi e A. ovale. Encontramos R. parkeri , R. belliie R. amblyommii. Em A. ovale infectados com a R. parkeri, tivemos uma prevalência de 11,7% para o ambiente e 15,3% para os carrapatos coletados em hospedeiros cães. O R. sanguineus que se coalimentou com A. ovale em cães também estava infectado com R. parkeri. Podemos concluir que indivíduos que freqüentem a região onde encontramos o A. ovale infectado pode adquirir bactérias do Grupo Febre Maculosa. / Rickettsia has been receiving attention from several researcher groups around the world, once these bacteria can infect animals and human being. In this study, monthly, during the period of July, 2008 and June, 2009, was carried out at Núcleo Itutinga Pilões, localized in the Parque Estadual da Serra do Mar, a field research when ticks were collected from vegetation in six specific trials into the forest, overall were collected 455 adults, 1,939 nymphs and 46 larval agglomerates ticks. This study found out 13 different tick species (A. aureolatum, A. brasiliense, A. dubitatum, A. fuscum, A. incisum, A. longirostre, A. naponense, A. nodosum, A. ovale, Ixodes aragaoi, Ixodes loricatus. Haemaphysalis juxtakochi e Riphicephalus sanguineus). The majority found species were: A. incisum, H. juxtakochi and A. ovale. Three Rickettsia species were found naturaly infecting ticks in the park: R. parkeri, R. bellii e R. amblyommii. A. ovale ticks showed a R. parkeri infection prevalence of 11.7% for free-living ticks and 15.3% for ticks collected upon dogs. Ticks R. sanguineus collected feeding upon the same dogs as A. ovale were also found infected with R. parkeri. Since A. ovale ticks can attach onto human being, we predict that visitors of this park might be exposed to Spotted Fever Group Rickettsia infected ticks.

As riquétsias são pesquisadas por muitos grupos em diversas regiões do mundo, pois podem infectar os humanos e animais. No período de julho de 2008 a junho de 2009 no Núcleo Itutinga Pilões, localizado no Parque Estadual da Serra do Mar, foram realizadas coletas mensais de carrapatos (455 adultos, 1939 ninfas e 46 bolos de larvas) distribuídas por seis trilhas distintas. No presente estudo constatou-se a existência de cerca de treze espécies de carrapatos no local (A. aureolatum, A. brasiliense, A. dubitatum, A. fuscum, A. incisum, A. longirostre, A. naponense, A. nodosum, A. ovale, Ixodes aragaoi, Ixodes loricatus. Haemaphysalis juxtakochi e Riphicephalus sanguineus) As espécies de maior expressão foram: A. incisum, frequentemente presente em antas, seguido por H. juxtakochi e A. ovale. Encontramos R. parkeri , R. belliie R. amblyommii. Em A. ovale infectados com a R. parkeri, tivemos uma prevalência de 11,7% para o ambiente e 15,3% para os carrapatos coletados em hospedeiros cães. O R. sanguineus que se coalimentou com A. ovale em cães também estava infectado com R. parkeri. Podemos concluir que indivíduos que freqüentem a região onde encontramos o A. ovale infectado pode adquirir bactérias do Grupo Febre Maculosa. / Rickettsia has been receiving attention from several researcher groups around the world, once these bacteria can infect animals and human being. In this study, monthly, during the period of July, 2008 and June, 2009, was carried out at Núcleo Itutinga Pilões, localized in the Parque Estadual da Serra do Mar, a field research when ticks were collected from vegetation in six specific trials into the forest, overall were collected 455 adults, 1,939 nymphs and 46 larval agglomerates ticks. This study found out 13 different tick species (A. aureolatum, A. brasiliense, A. dubitatum, A. fuscum, A. incisum, A. longirostre, A. naponense, A. nodosum, A. ovale, Ixodes aragaoi, Ixodes loricatus. Haemaphysalis juxtakochi e Riphicephalus sanguineus). The majority found species were: A. incisum, H. juxtakochi and A. ovale. Three Rickettsia species were found naturaly infecting ticks in the park: R. parkeri, R. bellii e R. amblyommii. A. ovale ticks showed a R. parkeri infection prevalence of 11.7% for free-living ticks and 15.3% for ticks collected upon dogs. Ticks R. sanguineus collected feeding upon the same dogs as A. ovale were also found infected with R. parkeri. Since A. ovale ticks can attach onto human being, we predict that visitors of this park might be exposed to Spotted Fever Group Rickettsia infected ticks.

Os ecossistemas naturais encontram-se sob forte pressão humana o que promove fragmentação e destruição de grandes áreas nativas. Estas mudanças favorecem situações impróprias para o parasita levando ao surgimento ou ressurgimento de doenças infecciosas/parasitárias. Consequentemente, tem se tornado importante pesquisas de fluxo epidemiológico de carrapatos entre animais e ambiente auxiliando a identificação do papel desses vetores na dispersão de patógenos. As coletas ocorreram na Fazenda Experimental Capim Branco – Uberlândia, MG, entre 2015 e 2017. Para a coleta de carrapatos em vida livre foi utilizado o arraste de flanela e a armadilhas de CO2 e nos animais a inspeção visual. Em áreas campestres a maior prevalência foi de Amblyomma sculptum, seguida por Rhipicephalus microplus e Amblyomma dubitatum. Nos piquetes de ovinos coletou R. microplus e Amblyomma spp., com predominância de ninfas de A. sculptum no inverno. Em áreas florestais A. sculptum e A. dubitatum foram os mais frequentes embora a quantidade de A. sculptum tenha sido maior tanto na mata ribeirinha quanto na mata semidecídua. Ainda em área florestal encontrou em menor quantidade R. microplus, Ixodes loricatus e Amblyomma longirostre. Observou uma maior eficiência de coleta de agregados de larvas por arraste enquanto a armadilha de gelo foi mais adequada para ninfas e adultos do gênero Amblyomma. Foi visto também que áreas florestais são constantemente mais infestadas do que áreas campestres. O gado em sua maioria apresentava R. microplus, mas a presença de A. sculptum foi observada com frequência em menor quantidade. Constatando que o parasitismo por este carrapato não é acidental. Dermacentor nitens, A. sculptum e R. microplus foram encontrados em cavalos, respectivamente seguindo a prevalência. Os cães apresentavam Rhipicephalus sanguineus além de A. sculptum e por fim, em pequenos mamíferos não voadores a presença de A. sculptum e I. loricatus, espécie predominante. Nenhum carrapato foi encontrado em ovinos. Consequentemente nota-se que a espécie A. sculptum está presente em diferentes ambientes e também em bovinos, equinos, cães e pequenos mamíferos. Sugerindo ser um carrapato importante no Cerrado pelo fato de ser o vetor mais comum associado à febre manchada no Brasil. / Natural ecosystems are under severe human pressure which promotes fragmentation and destruction of large native areas. These changes favor situations unfit for the parasite leading to the emergence or reemergence of infectious/parasitic diseases. Consequently, epidemiological studies of ticks between animals and environment have become important, helping to identify the role of these vectors in the dispersion of pathogens. The samples were collected in the Experimental Farm Capim Branco - Uberlândia, MG, in 2015 to 2017. For the collection free living ticks use a dragging flag and CO2 traps and for the animals used visual inspection. In rural areas the highest prevalence was of Amblyomma sculptum, followed by Rhipicephalus microplus and Amblyomma dubitatum. In the sheep area collected R. microplus and Amblyomma spp., with predominance of A. sculptum nymphs in winter. In forest areas A. sculptum and A. dubitatum were the most frequent although the A. sculptum was higher in the “ribeirinha” area the semideciduous area. Still in the forest it found in smaller quantity R. microplus, Ixodes loricatus and Amblyomma longirostre. Observed a greater efficiency for the drag in the aggregate of larvae while the ice trap was more suitable for nymphs and adults of the Amblyomma spp. It has also been seen that forest areas are constantly more infested than rural areas. The majority ticks of the cattle were R. microplus, but the presence of A. sculptum was frequently observed in less quantity. The parasitism on cattle by tick is not accidental. Dermacentor nitens, A. sculptum and R. microplus were found in horses, respectively, following the prevalence. The dogs presented Rhipicephalus sanguineus and A. sculptum and finally, in non volant small mammals the presence of I. loricatus was dominant, but A. sculptum was not discarded. No ticks were found in sheep. Consequently it is noted that the A. sculptum is present in different environments as in cattle, horses, dogs and small mammals. It suggests to be an important tick in the Cerrado and the most common vector associated with spotted fever in Brazil. / Tese (Doutorado)

M.Sc. (Zoology) / Please refer to full text to view abstract

Two studies were conducted to evaluate the presence of tick-borne bacterial agents in Amblyomma americanum, lone star tick (LST), and various wildlife in Mississippi. Adult LSTs had DNA evidence of Ehrlichia chaffeensis (3.7%), E. ewingii (6.3%), and Borrelia lonestari (2.6%), while both larval (24.3%) and adult (43.5%) LSTs were positive for a Rickettsia spp. by polymerase chain reaction (PCR). White-tailed deer (WTD) were the only wildlife PCR positive for E. chaffeensis (18.8%), B. lonestari (3.1%), and Anaplasma phagocytophilum (3.1%). In addition, WTD had the highest seroprevalence to B. lonestari (19.3%) and E. chaffeensis (43.9%) antigens while raccoons had the highest seroprevalence to spotted fever group rickettsiae (R. parkeri antigen) (73.7%). These studies demonstrate evidence of potentially zoonotic tick-borne agents in LSTs and wildlife in Mississippi underscoring the importance of monitoring these agents for human and animal health.