• Refine Query
  • Source
  • Publication year
  • to
  • Language
  • 69
  • 11
  • 5
  • 1
  • Tagged with
  • 88
  • 19
  • 18
  • 17
  • 15
  • 12
  • 8
  • 8
  • 8
  • 8
  • 8
  • 7
  • 7
  • 7
  • 6
  • About
  • The Global ETD Search service is a free service for researchers to find electronic theses and dissertations. This service is provided by the Networked Digital Library of Theses and Dissertations.
    Our metadata is collected from universities around the world. If you manage a university/consortium/country archive and want to be added, details can be found on the NDLTD website.
21

Dynamiques et accompagnement des TPE inventives en espace rural isolé : entre territoires et réseaux : l'exemple en Cézallier, Combrailles et Millevaches / Dyanamics and accompaniment of creative SMEs in remote rural areas : between territories and networks : example in "Cézallier", "Combrailles" and "Millevaches"

Lenain, Marie-Anne 16 December 2011 (has links)
En quoi les TPE inventives sont un atout face à la problématique de l'emploi en espace rural isolé ? Plus généralement qu'apportent-elles à cet espace et comment accompagner au mieux la création de ces activités ? Cette question est approfondie sur l'exemple des régions Auvergne et Limousin à partir de travaux qualitatifs portant sur trois terrains : le plateau du Cézallier, le Parc Naturel Régional Millevaches en Limousin et le Pays des Combrailles. Les TPE inventives créent de l'emploi dans des espaces où la plupart des activités économiques sont en difficulté. Elles sont le fait d'individus mettant en place des systèmes complexes et souvent à la marge dans le but de vivre et travailler sur un territoire choisi, et sont, en ce sens, des innovations discrètes. Les modalités et le fort degré d'ancrage territorial de ces TPE inventives en font de réels atouts pour le développement territorial. Le processus de création et d'ancrage des TPE inventives se déploie par le biais de rencontres avec des acteurs de l'accompagnement à la création d'activités et des acteurs du développement territorial. La construction de réseaux professionnels et sociaux par le créateur de TPE inventives est un des résultats notables de ce processus. Si les créateurs sont très investis dans les réseaux locaux ils le sont aussi, dans une moindre mesure, dans des réseaux externes au territoire. Ils en deviennent alors de véritables acteurs du développement de leur territoire. Face à ces spécificités, la tâche des acteurs de l'accompagnement est mise en question. Si les propositions des acteurs institutionnels sont le plus souvent en difficulté face aux TPE inventives, d'autres acteurs déploient des dispositifs répondant mieux à leurs caractéristiques. Enfin, le rôle des collectivités territoriales et des territoires de projet est essentiel dans l'appui à la création des TPE inventives à travers la fonction d'animation territoriale facilitant la mise en réseau et l'organisation territoriale des différents acteurs en lien avec ces TPE. / Why are the creative SMEs an asset in front of the problem of the employment in remote rural areas? More generally what do they offer to this space and how to have a better accompaniment for the creation of these activities? This issue is applied on the example of the Auvergne and Limousin regions from qualitative works concerning three places: “plateau du Cézallier”, “Parc Naturel Régional Millevaches en Limousin” and “Pays des Combrailles”. The creative SMEs create some new jobs in areas where most of the economic activities are in trouble. They are the result of people living and working on a chosen territory and so setting up complex and often marginally systems. Therefore, they are discreet innovations. The modalities and the strong degree of territorial embeddedness of these creative SMEs show that they are real assets for the territorial development. The creation and embeddedness process of these SMEs is supporting by meetings with project support professionnals and territorial development actors. As a result, professional and social networks are built up by the creators of these SMEs. Those are both involved in local networks and, to a lesser extent, in external networks. The creators of creative SMEs become then real stakeholders of the development of their territory. However, the task of project support professionnals is an issue regarding these specificities. Territorial and associative stakeholders display devices fitting those SMEs characteristics, while the proposals of institutional actors are mostly in trouble regarding them. At last, local communities are essential supports for creation process of creative SMEs through territorial animation that facilitate networking and territorial organization of various actors in connection with these SMEs.
22

Bande marine côtière et élus locaux : de la représentation à la prise de décision / Coastal land strip and the locally elected ; from representation to decision-making : from representation to decision-making

Le Moël, Béatrice 04 December 2015 (has links)
Résumé : La bande marine côtière, au-delà d’être un espace physique attaché aux territoires terrestres communaux, est aujourd’hui un lieu à la fois d’enjeux socio-économiques importants et de risques majeurs tels que la submersion marine. Les élus locaux, en première ligne face à ces enjeux, semblent considérer pour la plupart que la mer est en dehors de leur territoire. Nous postulons que sans une évolution de cette vision de la situation, aucune décision durable ne pourra être envisagée. Pour accompagner ce changement de perception, nous préconisons l’étude des représentations, véritables viviers d’information pour identifier les freins et les leviers à la prise de décision. Cerner la représentation qu’ont les élus locaux de leur territoire littoral et marin et comprendre leur cheminement vers la prise décision constitue ainsi l’objectif de cette étude. La combinaison entre une population d’un certain statut et un objet social physique nous a conduit à élaborer une méthodologie multidimensionnelle dont la singularité réside dans la mobilisation du processus d’ancrage à la fois pour l’étude de la représentation sociale, pour celle de la représentation iconospatiale et enfin dans la relation d’emboîtement. Un questionnaire, une carte graphique à main levée et un scénario de submersion marine ont constitué les trois outils clés du travail avec lesquels nous avons établi diverses corrélations s’appuyant sur des techniques d’analyses propres à la psychologie sociale et à la théorie des représentations sociales. Trois recherches se sont succédées. La première a mis à l’épreuve la méthodologie pour cerner la représentation sociale et la représentation iconospatiale. La deuxième s’est attachée à révéler le lien entre les contenus des représentations sociales et ceux des représentations iconospatiales en établissant une corrélation entre une typologie de dessins et une typologie d’élus.Enfin la troisième recherche a tenté de démontrer que certains points d’ancrage d’une représentation stabilisée (la politique communale), au travers d’une relation d’emboitement avec une représentation émergente portant sur un objet social environnemental (la submersion marine), constituaient de potentiels indicateurs d’acceptabilité sociale d’une problématique.Globalement, cette étude suggère l’intérêt certain de l’usage de carte graphique pour l’étude de ce type d’objet social physique sous couvert d’un processus d’ancrage particulièrement efficient pour structurer encore davantage les méthodes de compréhension de la relation homme-territoire. / Abstract : The coastal land strip, beyond being physical space attached to communal land territories, is today a focal point of heightening socio-economic issues, with significant risks of marine flooding and submersion. The majority of elected representatives on the front line facing these various issues seem to consider that the sea is beyond their jurisdiction. We postulate that without overhaul of this viewpoint, no long term decision can be envisaged. To accompany this new viewpoint, we recommend the study of representations, which are true breeding grounds for information that can help in identifying what holds back and what facilitates decision-making. The objective of the present study is to understand the representation that the locally elected have of the coastal and marine territory and further, the pathways in decision making. Linking a population of a certain social standing with a physical social object led us to develop a multi-dimensional methodology whose uniqueness resides in the mobilisation of the anchoring process, this for the study of social and icono-spatial representations, and how they interlink. We have established various correlations founded on analysis techniques used in social psychology and the theory of social representations, this by way of three key tools : a questionnaire, a hand-drawn map and a scenario of marine submersion. Three areas of research ensued. The first deployed the methodology to discern the social and icono-spatial representations. The second was to reveal the link between the contents of social and icono-spatial representations by establishing a correlation between a type of drawing and type of elected representative. The third area of research aimed to demonstrate that certain anchoring points of a stabilised representation (municipal politics) by their interlinking with an emerging representation focussed on an environmental social object (marine submersion) constituted potential indicators of social acceptability of the problem.Overall, this study suggests a strong interest for the map method for the study of this type of social physical object under the guise of the mobilisation of an anchoring process. This is particularly efficient in further structuring the methods to understand man-territory relationships.
23

Dynamique de réorientation et piégeage d'un cristal liquide nématique au contact d'une surface solide

Nespoulous, Mathieu 07 November 2008 (has links) (PDF)
Ce travail expérimental aborde la dynamique réorientationnelle et le piégeage orientationnel d'un cristal liquide nématique au contact d'une surface solide.<br />La première partie expérimentale porte sur l'étude de la dynamique de réorientation de cristal liquide 5CB en phase nématique, sur des surfaces de SiO. Le mouvement de parois de défauts du 5CB est observé, en microscopie optique polarisante, et permet notamment de mettre en évidence la présence d'une friction solide. Celle-ci s'oppose à la réorientation du cristal liquide sur les surfaces d'ancrages.<br />Dans la seconde partie, l'étude fine de l'interface 5CB/SiO montre la présence d'un désordre figé orientationnel. Ce désordre est caractérisé par une méthode originale de cartographie angulaire. Nous discutons du rôle du désordre sur la dynamique, pour expliquer finalement la nature du couple de friction.
24

Théorie de dégradation du béton et développement d'un nouveau modèle d'endommagement en formulation incrémentale tangente. Calcul à la rupture et application au cas des chevilles de fixation ancrées dans le béton

Ung Quoc, Hung 04 December 2003 (has links) (PDF)
Cette recherche sinscrit dans le cadre général de létude du comportement du béton. Elle a pour objectif le développement de nouveau modèle de comportement répondant aux exigences particulières requises pour une exploitation industrielle. Après une analyse des différents modèles proposés, un premier développement a concerné les modèles basés sur la théorie de la fissuration distribuée. Une nouvelle formulation de la théorie a permis de résoudre le problème de blocage de contraintes. Cependant, lanalyse menée a montré des limites inertes à cette théorie malgré lamélioration effectuée.<br />Ensuite, une analyse des mécanismes physiques de dégradation du béton a été menée et a permis de développer le nouveau modèle dendommagement MODEV. Ce modèle se base sur la théorie de la thermodynamique appliquée au cas des matériaux hétérogènes et fragiles. Le modèle MODEV introduit deux modes dendommagement: extension et glissement. Il considère également que le glissement relatif entre les lèvres des microfissures est responsable de lirréversibilité de déformation. Cette déformation devient fonction de lendommagement et de lindice dhétérogénéité du matériau. Leffet unilatéral est pris en compte selon un processus de durcissement/adoucissement élastique lié à la re-fermeture/re-ouverture des fissures. Le modèle est écrit dans le cadre des matériaux non standard généralisés en formulation incrémentale tangente et implémenté dans le code de calcul général aux éléments finis SYMPHONIE. La validation du modèle a été effectuée sur la base de plusieurs essais issus de la littérature.<br />La deuxième partie de cette recherche a concerné lélaboration du logiciel CHEVILAB pour lévaluation de la capacité portante des chevilles de fixation. Cet outil est basé sur lapproche cinématique par lextérieur de la théorie du calcul à la rupture. La solution est obtenue en prenant le minimum des majorations du chargement ultime données par cette approche en considérant plusieurs classes de mécanismes de ruine. CHEVILAB a été ensuite validée par comparaison avec des résultats dessais et des simulations par E.F.
25

Etude des Propriétés Morphologiques, Electriques et Chimiques <br />de l'Interface Métal/Isolant et de leur Impact sur les Performances <br />de la Capacité TiN/Ta2O5/TiN

Gaillard, Nicolas 15 December 2006 (has links) (PDF)
La course à la miniaturisation en microélectronique impose aujourd'hui l'introduction de films métalliques et d'isolants de forte permittivité dans la fabrication des transistors MOS et des capacités MIM afin d'augmenter leur densité tout en maintenant leurs performances électriques. Cependant, l'intégration de ces matériaux doit faire face à certains phénomènes physiques localisés au niveau de l'interface métal/isolant qui peuvent dégrader les performances de ces composants. De ce fait, le choix des matériaux employés ne peut se faire sur la simple considération de leurs propriétés intrinsèques et passe nécessairement par une analyse poussée des propriétés de l'interface qu'ils forment. Nous présentons dans notre étude une caractérisation fine des différentes propriétés de l'interface TiN/Ta2O5 ainsi que leur impact sur les performances de la capacité MIM 5fF.mm-2. Nous étudions dans un premier temps l'effet de la rugosité des interfaces sur les caractéristiques courant-tension de la capacité MIM. Des simulations « in situ » du champ électrique établi dans ce dispositif indiquent alors que la topographie propre à chaque interface peut conduire à des caractéristiques électriques asymétriques. Notre analyse porte ensuite sur les phénomènes fondamentaux qui gouvernent la valeur du travail de sortie des couches métalliques. Cette analyse nécessite l'utilisation d'une technique de microscopie électrique à sonde locale (KFM) qui permet notamment d'observer l'impact de la cristallinité des films sur leurs travaux de sortie. Enfin, l'effet de la composition chimique de l'interface TiN/Ta2O5 sur la hauteur de barrière est présenté. Cette étude, réalisée par spectroscopie de photoélectrons X et UV, permet de construire le diagramme de bande complet de la structure MIS TiN/Ta2O5/Si. On constate alors un décalage important des niveaux du vide aux différentes interfaces induit par la présence de dipôles.
26

Interaction de Tau avec la petite GTPase Rab5

Morisse, Grégoire M. 07 1900 (has links)
La protéine Tau joue un rôle essentiel dans les neurones, notamment par ses interactions avec les éléments du cytosquelette. Des études récentes ont également montré que Tau était impliquée dans la motilité des organelles le long des microtubules axonaux. Dans ce mémoire de Maîtrise, nous avons démontré par recouvrement sur gel une nouvelle interaction in vitro pour Tau avec la petite GTPase Rab5, qui est impliquée dans l’endocytose précoce. De plus, nous avons montré que Tau et Rab5 immuno-précipitaient sur une même population de vésicules in vivo. La sur-expression de Tau dans des neurones primaires de l’hippocampe nous a permis de montrer que Tau et Rab5 avaient une distribution similaire dans l’axone des neurones, suggérant un rôle de Tau dans l’ancrage des endosomes précoces sur les microtubules. Par contre, à la différence de ce qui a pu être observé dans certaines études, la sur-expression de Tau n’a pas inhibé le transport axonal des endosomes précoces. Enfin, nous avons montré que Tau interagissait préférentiellement avec la Rab5 active liée au GTP et des résultats préliminaires nous laissent penser que Tau serait un effecteur ou une GAP pour Rab5. Dans les tauopathies, la Tau devient hyperphosphorylée, décroche des microtubules axonaux et forme des agrégats dans le corps cellulaire du neurone. Ces modifications biochimiques et de localisation de la protéine Tau pourraient être la source d’une perte d’interaction de la Tau avec Rab5 et être responsable de certaines atteintes neurologiques observées dans les tauopathies. / Tau protein plays an essential role in neurons, in particular in its interactions with cytoskeletal elements. Recent studies have shown that Tau was also regulating organelles motility along axonal microtubules. In this work, using far-western blot, we have shown a new in vitro interaction for Tau with the small GTPase Rab5, a protein implicated in early endocytosis. Furthermore, we have shown that Tau and Rab5 were immuno-precipited on a same pool of vesicles in vivo. Over-expression of Tau in primary hippocampal neurons have shown that Tau and Rab5 have a similar distribution in axons, suggesting that Tau plays a role as an anchor protein for early endosomes onto microtubules. In contrast to what has been shown earlier in other studies, Tau did not blocked axonal transport of early endosomes. Finally, we have shown that Tau was interacting preferentially with the active form of Rab5 bound to GTP and preliminary results suggest that Tau would be an effector or a GAP for Rab5. In tauopathies, Tau become hyperphosphorylated, loose its affinity with axonal microtubules and form aggregates in the cell body of the neuron. This biochemicals modifications and relocalisation of Tau protein might be responsible for a loss of interaction between Tau and Rab5 and consequently of some of the neuropathological symptoms observed in tauopathies.
27

Les représentations de l'identité communale : psychosociologie d'un village re-composé, Gigouzac

Bour, Edith 22 February 2013 (has links) (PDF)
Après plusieurs décennies de désertification, certaines campagnes bénéficient aujourd'hui d'un réinvestissement croissant par des populations urbaines. Aussi, la restructuration des sociétés rurales interroge. Le paysage social change, transformant ainsi le rural en un monde social avant tout. Le village fait-il encore sens pour ses habitants ? La thématique de ce travail s'intéresse alors à l'évolution et à la transformation relationnelle de l'espace rural français, avec un intérêt tout particulier pour les communes de moins de 500 habitants et leur identité communale singulière. Le village de Gigouzac dans le Lot, 239 habitants, est mon terrain d'étude depuis plus de 10 ans. Ce choix n'est pas sans raisons et sans conséquences puisque j'habite mon terrain et mon objet d'étude, familialement, personnellement, et scientifiquement.La propriété essentielle de cette recherche est son caractère longitudinal, impliquant une mise à distance et une observation constante et participante. Ces différentes postures " du dedans " mêlent la sociologie et l'audiovisuel à une approche psychosociale. Le concept d'identité doit être défini en le signifiant. Cette thèse tente de saisir l'identité communale. Afin d'observer les effets que peut avoir l'arrivée de nouveaux habitants de culture urbaine sur cette identité, j'ai choisi de la considérer du point de vue de la psychologie sociale et de la dynamique de ses représentations. Les différentes méthodes de recueil de données employées, tour à tour quantitatives, comparatives, qualitatives, et audiovisuelles, montrent les permanences et les dynamiques de la ruralité. Le village évolue, se modernise, se réinvente, mais reste un territoire pertinent et cohérent, une réponse à l'individualisme grandissant de la société moderne.
28

Développement et caractérisation d’une connexion hybride béton-acier utilisée comme rupteur de pont thermique balcon-plancher en Isolation Thermique par l’Extérieur / Developement and characterization of a steel-concrete hybrid connection used as a theral break system for externally insulated buildings

Le Gac, Benoit 20 September 2018 (has links)
L'objectif principal de cette thèse de doctorat est le développement et la caractérisation d'une connexion hybride balcon-plancher à usage de rupteur d( pont thermique pour bâtiments isolés par l'extérieur. Structurellement, elle doit assurer la transmission d'un moment de flexion important et un effort tranchant liés au porte-à-faux du balcon. Ce système est de la famille des connexions hybrides encore peu décrites dans la littérature scientifique et pou laquelle ces travaux apportent une contribution. Les solutions existantes pour corriger les ponts thermiques de balcon impliquent des contraintes architecturales ou techniques. Les rupteurs de ponts thermiques sont une solution pertinente structurellement et them1iqucment. Les principaux systèmes existants n'exploitent pas de technologie hybride béton-acier à ce jour. Le comportement mécanique du rupteur a d'abord été testé expérimentalement sous chargement vertical statique monotone lors d'une campagne de cinq essais. Les résultats mettent en évidence une réponse moment-rotation très ductile et conforme aux attentes des pré-dimensionnements. Dans le prolongement de l'interprétation expérimentale, un modèle semi-empirique a été développé. Le gain apporté par une disposition spécifique d'ancrage en traction par barres transversales soudées a pu être quantifié en comparaison avec les modèles analytiques existants. Le comportement différé de la connexion, imputable au nuage du béton à l'interface avec les éléments hybrides a fait l'objet d'une étude expérimental, Le lien entre l'évolution de la rotation de la connexion et le coefficient de nuage matériel a été établi. Un modèle numérique calibré sur les essais de chargement vertical a permis d'étudier en détail le fonctionnement de la clé de cisaillement du rupteur. La détermination des conditions aux limites du système a permis de justifier les diagrammes d'efforts sur la clé. Enfin, le dernier volet de ce travail de thèse concerne la justification en fatigue du système sous l'action de la dilatation thermique différentielle entre h balcon et le plancher. /\près une série d'essais en fatigue oligocyclique pour établir un critère de résistance et une étude de la sollicitation thermique, la durabilité du rupteur a pu être démontrée. Le développement du rupteur SUNE peut à ce stade être considéré comme abouti et pem1et d'en valider l'aptitude pour une gamme de produit. L'industrialisation et la commercialisation du produit passera nécessairement par une certification pour laquelle des justifications poussées sont d'ores et déjà établies et seront un gage de pertinence scientifique du système. / The main goal of this Ph.D. thesis is the development and characterization of a hybrid balcony-floor connection used as a thermal break for externally insulated buildings. Structurally, it must ensure the transmission of a significant bending moment and a shear force due to the balcony cantilever. This system belongs to the hybrid connections still poorly described in the scientific literature and for which this thesis makes a contribution. Existing solutions to avoid balcony's thermal bridges involve architectural or technical constraints. Thermal break systems are structurally and thermally relevant solutions. The main existing systems do not involve steel concrete hybrid technology to date. The mechanical behavior of the developped system has firstly been tested under vertical static loading during a campaign of five tests. The results show a very ductile moment-rotation response that meets design expectations. As an extension of the experimental interpretation, a semi-empirical model has been developped. The gain of stiffness obtained by a specific anchoring detail has been quantified in relation to existing analytical models. The creep behavior of the connection, due to the concrete creeping at the interface with the hybrid elements has been the object of an experimental study. The link between the evolution of the connection rotation and the material creep coefficient has been established. A finite element mode! has been calibrated on the vertical loading tests and allowed to study in detail the behaviour of the system's shear key. The determination of the boundary conditions of the system justifies the force diagrams on the key. The last part of this work concerns the justification of the system under the fatigue loading provoked by the differential thermal expansion between the balcony and the floor. A series of tests under oligocyclic fatigue loading was performed to establish a resistance criterion and a study of the actual thermal stress action was completed. Finaly, the durability of the connection has been demonstrated. The development of this hybrid connection can be successfully considered and validates the suitability for a range of products. The industrialization and marketing of the product will go through a certification for which the justifications are already established and will be a guarantee of the scientific relevance of the system.
29

Etude du cycle des vésicules synaptiques en microscopie électronique sans fixateur / Study of the synaptic vesicles cycle using electron microscopy without chemical fixatives

Horellou, Suzel 25 September 2014 (has links)
Les synapses chimiques sont des structures spécialisées permettant une transmission d'information unidirectionnelle, d’un élément présynaptique vers un élément postsynaptique. L’organisation des terminaisons présynaptiques permet la conversion d’un potentiel d’action en signal chimique. Elles se présentent sous la forme de varicosités axonales contenant des vésicules synaptiques (VSs) qui concentrent le neurotransmetteur (NT). Une partie des VSs sont apposées (ancrées) à une région de la membrane plasmique, la zone active (ZA ; Bennett et al. 1992, Siksou et al. 2009). La ZA est située face à l’accumulation postsynaptique des récepteurs au NT. La dépolarisation d’une terminaison par un potentiel d’action active des canaux calciques dépendants du voltage. L’influx de calcium qui en résulte entraîne la fusion d’une fraction des VSs ancrées avec la membrane plasmique en moins d’une milliseconde, permettant la libération de NT (Sabatini et Regehr 1996, Lisman et al. 2007). Une endocytose compensatoire permet ensuite la reformation de VSs (Rizzoli et Betz, 2005). Des questions se posent encore quant à ce trafic régulé. Nous avons étudié la régulation de l’ancrage des VSs et développé un outil pour analyser le cycle des VSs en microscopie électronique (ME).La première partie de mon travail de thèse a porté sur la régulation du nombre de VSs ancrées à la ZA. Notre objectif était de savoir si l’ancrage était régulé spécifiquement ou en coordination avec les autres paramètres morphologiques du bouton, et de déterminer le rôle de Rab3-Interacting Molecules (RIMs), protéines centrales de la ZA, dans cette régulation. La régulation de l’ancrage a été étudiée sur un modèle de cultures organotypiques de tranches d’hippocampe dont l’activité est bloquée 3 jours par l’application de tétrodotoxine. Ces tranches ont été immobilisées par congélation sous haute pression (CHP) pour être observées en ME sans les artefacts induits par les fixations aldéhydiques. Le blocage d’activité entraîne une augmentation du nombre de VSs ancrées, de la taille de la ZA, et du nombre de récepteurs postsynaptiques au glutamate de type GluA2. Le nombre de VSs total dans le bouton et la taille du bouton ne changent pas. En immunocytochimie Nous n’avons pas observé de modification de la quantité moyenne de protéines RIM1/2 dans les terminaisons présynaptiques sous l’effet du blocage d’activité. Enfin, les enregistrements électrophysiologiques ne révèlent pas de modification de fréquence des courants excitateurs miniatures malgré l’augmentation du nombre de VSs ancrées. Ces résultats montrent une régulation spécifique de la taille de la jonction synaptique par l’activité neuronale et indiquent que le nombre de VSs ancrées n’est par régulé par la quantité de RIM.La deuxième partie de mon travail a consisté à développer un outil d’étude du cycle des VSs. En effet, la ME ne permet pas d’observer des évènements dynamiques, tandis que la résolution spatiale des microscopes optiques est insuffisante pour observer directement les VSs. Nous avons voulu associer une stimulation optogénétique de neurones avec leur immobilisation rapide par CHP, afin de pouvoir observer en ME les VSs à des temps précis après la stimulation. Nous avons travaillé sur des cultures dissociées de neurones d’hippocampe de rat. Ces neurones ont été infectés avec un Adeno-Associated Virus exprimant une protéine, la ChannelRhodopsine2, pour les rendre activables par des stimulations lumineuses. Une collaboration avec Leica Microsystems a permis de modifier l’appareil de congélation (HPM) pour (i) stimuler les neurones dans l’HPM, et (ii) synchroniser cette stimulation avec la congélation. Ce nouvel outil devrait permettre dans le futur une analyse du trafic des VSs à très haute résolution temporelle et spatiale. / Chemical synapses are highly specialized structures that convey information unidirectionnally, from a presynaptic to a postsynaptic element. Presynaptic terminals convert action potentials into chemical signals. These axonal varicosities contain synaptic vesicles (SVs) filled with neurotransmitter (NT) molecules. A fraction of the SVs are apposed (docked) to a part of the plasma membrane called the active zone (AZ; Bennett et al. 1992, Siksou et al. 2009b). The AZ is located in front of the postsynaptic accumulation of NT receptors. Depolarization of a terminal by an AP activates voltage dependent calcium channels. The resulting calcium influx induces the fusion of a fraction of the docked SVs in less than a millisecond, which release their NT content (Sabatini & Regehr 1996, Lisman et al. 2007). New SVs are then produced through a process of compensatory endocytosis (Rizzoli & Betz, 2005). Unanswered questions remain about the mechanism of this regulated traffic of SVs. We studied the regulation of SVs docking and developed a tool to analyze the cycle of SVs with electron microscopy (EM). The first part of my PhD work was focused on the regulation of the number of docked SVs at the AZ. Our objective was to determine whether SVs docking was regulated specifically or together with other morphological parameters of the bouton. We also investigated the role of Rab3-Interacting Molecules (RIMs), central proteins of the AZ, in this regulation. We worked on organotypic culture of hippocampal slices in which we blocked neuronal activity with tetrodotoxin for 3 days. Slices were immobilized using high pressure freezing (HPF) to avoid artifacts due to chemical fixation, and studied with EM. Activity blockade induced an increase in the number of docked SVs, in the size of the AZ and in the number of GluA2 postsynaptic glutamate receptors. However, the total number of SVs in the bouton and the size of the bouton did not change. With immunocytochemistry we did not detect any change in the mean amount of RIM in presynaptic terminals after chronic activity blockade. Furthermore, electrophysiology recordings showed no increase of the mean frequency of mEPSCs despite the increase in the number of docked SVs. Together these results show a specific regulation of the size of the presynaptic junction by neuronal activity, and indicate that the amount of RIMs does not regulate the number of docked SVs. The second part of my work consisted in the development of a new tool to study the cycle of SVs. Indeed, EM does not allow the visualization of dynamic phenomenon, whereas optical microscopes do not have a sufficient spatial resolution to observe SVs with the required precision. We wanted to associate optogenetic stimulations of neurons with their rapid immobilization by HPF, in order to visualize SVs at precise moments after stimulation. We worked on rats hippocampal dissociated neurons cultures. These neurons were infected with an Adeno-Associated Virus encoding a light sensitive protein channel, the ChannelRhodopsin2, in order to be able to activate them with light stimulations. We collaborated with Leica Microsystems to modify our high pressure machine (HPM), so that we can (i) stimulate the neurons within the HPM, and (ii) synchronize this stimulation with the freezing. In the future, this new tool this system should allow us to analyze the traffic SVs with high temporal and spatial resolution.
30

Comportement de colloïdes piégés aux interfaces de nématiques. / Behavior of colloids at nematic interfaces.

Gharbi, Mohamed Amine 25 October 2011 (has links)
Ce travail expérimental porte sur l'étude du comportement colloïdale aux interfaces de nématiques. Dans un premier temps, nous détaillons la séquence de phase observée par des billes de silice à ancrage homéotrope fort piégés à l'interface air-nématique. En fonction de leur densité ainsi que l'épaisseur du film, les colloïdes forment différentes structures spontanément. A l'aide des pinces optiques, nous mesurons le potentiel de paire et nous discutons les rôles respectifs des forces capillaires et élastiques. Dans un second temps, nous étudions le comportement des colloïdes sur des interfaces nématiquesplus complexes. En contrôlant la géométrie des interfaces et la densité des particules piégées, à l'aide de la technique de microfluidique, nous étudions le comportement colloïdal à la surface des coques nématiques fines. La compétition entre les conditions d'ancrage aux interfaces, l'élasticité du CL, les défauts et les densités des fluides est à l'origine de la formation de nouvelles configurations topologiques. Dans cette partie, nous discutons le rôle des colloïdes dans la formation de ces structures. / The aim of this experimental work is to study the behavior of colloids at nematicinterfaces. Initially, we examine the behavior of spherical solid particles with stronghomeotropic anchoring at an air-nematic interface and we detail the phase behaviorof beads. Depending on their area density, the nematic thickness and the anchoring,colloids spontanously form various structures. Using optical tweezers, we determine thepair potential and we discuss the different roles of capillary and elastic forces. Second,we report the behavior of silica beads at more complex NLC interfaces. By controllingthe geometry of the interfaces and the colloids density, with microfluidic techniques,we study the colloidal behavior at the surface of a thin nematic shell. The competitionbetween anchoring conditions at interfaces, nematic elsticity, topological defects anddensities of fluids is responsable of the formation of new topological configurations. Inthis part we discuss the role of colloids in the formation of these structures.

Page generated in 0.4251 seconds