Orientador: Carmino Antonio de Souza / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-07-20T21:54:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MarquesJunior_JoseFranciscoComenalli_M.pdf: 3153532 bytes, checksum: dee149b9fd40a351e120f1673af8c52b (MD5) Previous issue date: 1995 / Resumo: As transfusões sanguíneas consistem em importantes recursos terapêuticos para a prevenção e o controle de várias complicações em pacientes portadores de doenças falciformes, sendo o seu principal mecanismo de ação, a diminuição das aberrações da reologia sanguínea, causadas pelas hemácias contendo hemoglobina S. Desta forma, a redução na proporção destas células pode resultar em efeito benéfico, relacionado à melhora do fluxo sanguíneo na microcirculação, deste grupo de pacientes. Porém, os regimes de transfusões envolvendo a infusão de concentrados de hemácias, apesar de simples e universalmente disponiveis, esbarram em riscos de aumento súbito da viscosidade sanguínea no período pós-transfusional, pela concomitância de grande quantidade de células contendo hemoglobina S e índice elevado do hematócrito. Quando utilizadas cronicamente, levam à sobrecarga de ferro. A "exsanguíneo-transfusão" foi idealizada no sentido de minimizar estes riscos, porém, quando realizada manualmente, em pacientes adultos, requer muitas horas ou até dias, sendo tediosa e relativamente ineficiente, além de provocar oscilações potencialmente perigosas no volume sanguíneo dos pacient~s. Mediante a disponibilidade de equipamentos para separação de células sanguíneas por centrifugação, envolvendo um circuito extracorpóreo, surgiu a possibilidade da realização de troca de hemácias de forma auto matizada, procedimento denominado de eritrocitaférese terapêutica. Neste estudo, foram avaliados vinte e quatro procedimentos de eritrocitaférese terapêutica automatizada, em dezoito pacientes portadores de doenças falciformes, como procedimento terapêutico ou profilático. Além disso, o estudo incluiu a evolução do impacto do procedimento sobre os parâmetros hematimétricos e bioquímicos, porcentagem de hemoglobina S" balanços volumétrico e eritrocitário, além dos aspectos técnico-operacionais de viabilidade, segurança e rapidez. Nossos resultados demonstraram que a eritrocitaférese auto matizada é um procedimento capaz de promover redução rápida e segura dos níveis de hemoglobina S, sem causar morbidade aos pacientes, oferecendo múltiplas vantagens em relação aos procedimentos de "exsanguíneotransfusão" manual em pacientes adultos / Abstract: The blood transfusions are an important therapeutic approach to prevention and control several sickle ceU disease complications, with the main role to decrease the blood rheologic abnormalities inherent to red blood ceUs containing S haemoglobin. Thus, the reduction of the proportion of those ceUs can result in a good effect due to improvement of blood flow in the microcirculation of this group of patients. However, the transfusion protocols of red blood ceUs concentrates infusions, in spite of being simple and easily available, can increase the blood viscosity on the post-transfusion period, because of the high amount of red blood ceUs containing S haemoglobin and high hematocrit leveI. When chronically used, they can cause iron overload. The "exchange-transfusion" was introduced to minimize these risk factors, however, when performed manuaUy in adult patients, requires a lot of time, perhaps days to complete, becomes tedious and relatively innefective, provides dangerous variation on the blood volume of thepatient. The availability of the blood ceUs separatoFs by centrifugation, in an extracorporeal circuit, makes possible to performs automatized red ceU exchanges. In this study, we have evaluated 24 red blood ceU exchanges using a blood ceU separator in 18 patients with sickle ceU disease, therapeutic or prophylaticaUy, as the impact of the procedure in the hematimetric, haemoglobin S decrease, biochemistry parameters and volumetric and red ceUs balances. We have also evaluated the technical aspects of the viability, safety and timeconsuming. Our results have showed that the proceçlure was able to decrease the S haemoglobin fast and safely without major side effects, offering several advantages when compared to manual "exchange transfusion" procedures in adult patients / Mestrado / Mestre em Clinica Medica

Orientador: Fernando Ferreira Costa / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-02T22:00:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Andrade_TiagoGomesde_M.pdf: 3487571 bytes, checksum: 6337a798573d04fafd889ca82ea3d4c6 (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: Persistência Hereditária de Hemoglobina Fetal (PHHF) consiste num grupo heterogêneo de desordens hereditárias, clinicamente benignas, onde ocorrem falhas na mudança perinatal normal de hemoglobina fetal para hemoglobina adulta, resultando em altos níveis de Hb F durante a vida adulta. Suas alterações moleculares correspondem a desordens no grupo de genes p, sendo divididas em duas categorias: as formas delecionais e as substituições de um nuc1eotídeo. Um total de seis delecões relacionadas a PHHF já foram descritas na literatura, sendo associadas a aumentos de ambos os tipos de cadeias y (y A e y_. (õP)O - Talassemias também se originam a partir de deficiências gênicas, em muitos casos bastante similares às que originam as formas delecionais de PHHF, entretanto com menor incremento de Hb F e concomitância de hipocromia e microcitose nas hemácias. Três hipóteses principais foram propostas para explicar a relação destas deleções com a não supressão normal dos genes y na fase adulta: a remoção de regiões competidoras pelo LCR, a justaposição de elementos acentuadores e a remoção de silenciadores do c1uster. Neste trabalho, investigamos a presença de deleções, associadas a PHHF e (õP)O - talassemias, no c1uster da beta-globina em doadores de sangue do Hemocentro e pacientes do Hospital das Clínicas, Unicamp. Para isto, desenvolvemos uma modificação de uma técnica descrita previamente para Distrofia Muscular Duchennel Becker, baseada na possibilidade de se identificar diferenças quantitativas na amplificação de amostras por PCR, em presença de deleções ou duplicações, onde o produto final de amplificação é diretamente proporcional à quantidade inicial de cópias da seqüência alvo. O método, que quantifica por intensidade de fluorescência, identificou em cinco indivíduos, a deleção responsável por PHHF-2, de origem africana. Identificamos também, com primers específicos que flanqueiam os pontos de quebra de deleções, a presença da (õP)O - talassemias do tipo Siciliana em dois indivíduos estudados, que são heterozigotos compostos, tendo associação desta alteração com p - talassemia e Hb S. Este trabalho contn"buiu para o desenvolvimento e aplicação de um método, particularmente mais rápido e de fácil execução, na investigação de deficiências gênicas (ou aumento do número de cópias), e que pode vir a ser utilizado no estudo de alterações, não só no c1uster da p-globina, mas também em outros genes de interesse. Além disto, os dados apresentados neste trabalho sobre a interação entre (õP)O-talassemia Siciliana com p - Talassemia e Hb S representam os primeiros casos descritos no Brasil, com caracterização clínica e molecular. Também destaca-se a presença marcante de uma alteração benigna (PHHF-2) que sabidamente pode influenciar a evolução clínica de determinadas condições, tais como p-talassemia e anemia falciforme / Abstract: Hereditary Persistence of Fetal Hemoglobin are arare, heterogeneous and benign group of hereditary disorders with an abnormal switch from feta! to adult hemoglobin, resulting in high levels of Hb F in the adult stage. At a molecular leveI, they are divided in deletion and non-deletion fonns. A total of six deletions related to HPFH have been described, associated with increased levels of both y chains. Most (0(3) - Thalassemias also arise from deletions in the _ globin gene cluster, in some cases these deletions are very similar to those that origina te HPFH. However, these forms demonstra te smaller increases in Hb F and are accompanied by microcytic and hypochromic red blood cells, in the heterozygote state. Three main hypothesis were proposed to explain the relationship between these deletions and the non-suppression of y genes: the removal of competitive regions that interact with the LCR; the juxtaposition of enhancer elements; and the removal of silencers. Here we investigate the presence of gene deletions, associated with HPFH and (o_) - Thalassemia in blood donors at the Hemocenter and patients from the Clinical Hospital, Unicamp. For this, we developed a modification of a technique, described first in Duchenne/ Becker dystrophy, based on the possibility of identifying quantitative differences in the amplifications of samples by PCR, in the presence of deletion or duplication carriers, in which the final product of amplification is direct1y proportional to the initial amount of copies of the sequence targets. The method, employing fluorescence intensity for quantification, identified a deletion responsible for HPFH-2, in five individuais of African origino We also identified, using specific primers that bridge the breakpoints, the presence of Sicilian (0(3) - Thalassemia in two individuais that are compound heterozygous for (_) - Tha1assemia and Hb S, respectively. The sequence analysis revealed the same characteristics described for these alterations. This study contributes to the development and application of an extremely rapid and practical method for the identification of deletions (or increase in gene copy number), which could be used in the study of alterations, not only in the (3 globin gene cluster, but also in other genes of interest. Moreover, the data presented here regarding the alterations in Sicilian (0(3) - Thalassemia in association with ((3) - Thalassemia and HbS represents the first cases described in Brazil, with clinical and molecular characterisation. In addition, there is a strong presence of a benign alteration (HPFH-2), that can ameliorate some conditions, such as ((3) - Thalassemia and Sickle Cell Disease / Mestrado / Ciencias Basicas / Mestre em Clinica Medica

Orientador: Sergio Antonio da Silva Leite / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Educação / Made available in DSpace on 2018-07-14T02:28:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Saikali_MariaOlimpiaJabur_M.pdf: 4493432 bytes, checksum: a6113315e5a1de49c32e8327ea6bfe07 (MD5) Previous issue date: 1992 / Resumo: A Anemia Falciforme e" uma doença crônica hereditária, disseminada pelo mundo todo e considerada como um dos mais importantes problemas de saúde pública da atualidade. No Brasil, esta moléstia tem sido objeto de estudos no sentido de caracterizar sua real incidência, definir aspectos clínicos e condutas adequadas para seu tratamento. No entanto, pesquisas que descrevam o portador da Doença Falciforme, seja quanto à aspectos sociais ou quanto ao desenvolvimento emocional e cognitivo, ainda são escassas em nosso meio. Desta forma, o presente estudo teve corno objetivo geral caracterizar o desenvolvimento cognitivo de crianças portadoras de Doença Falciforme, através do acompanhamento de dois sujeitos atendidos pelo programa de Hematologia da Faculdade de Ciência Médicas de Botucatu (UNESP). Em um primeiro momento, buscou-se descrever aspectos do desenvolvimento cognitivo a partir da observação e análise do desempenho escolar e cotidiano dos sujeitos. Para tanto, foram utilizados instrumentos que permitiram avaliar: o desempenho dos sujeitos em leitura, escrita e conceitos; o desempenho escolar dos sujeitos inseridos em seu grupo; o desenvolvimento e ajustamento familiar e social dos sujeitos. Com estas informações coletadas passou-se ao segundo momento deste estudo em que foi observado o desempenho dos sujeitos em situações planejadas de ensino de leitura e escrita, em que se procurou respeitar as características do seu desenvolvimento cognitivo. Os resultados demonstraram que a Doença Falciforme não constitui, por si só, em causa de inadequado desempenho escolar, se for bem compreendida e administrada por todos os envolvidos com a criança falcêmica. Analisando os dados obtidos na primeira avaliação foi possível verificar que os sujeitos estão dentro do esperado para os indivíduos do grupo escolar e que estão inseridos. Além disso, o desempenho dos sujeitos observado na segunda etapa do estudo, revelou que sob condições de ensino em que são considerados como indivíduos capazes e conscientes de seu papel, tornam-se participantes ativos do processo de construção do conhecimento, como qualquer outra criança normal e sadia / Mestrado / Psicologia Educacional / Mestre em Educação

Orientador: Antonio Sergio Ramalho / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-17T03:20:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Goncalves_MarildadeSouza_M.pdf: 1547959 bytes, checksum: 5960c36719deaf0832645c733eb6b1e9 (MD5) Previous issue date: 1989 / Resumo: Apesar de a hematúria ser uma manifestação clínica importante da hemoglobina S, existe na literatura uma inconsistência de dados a respeito da sua real freqüência e da sua exata fisiopatogenia nas síndromes falcêmicas. O presente estudo teve por objetivo determinar a freqüência da hematúria e investigar a sua origem entre 50 pacientes falcêmicos adultos portadores de anemia falciforme (35 homozigotos SS), hemoglobinopatia SC (10 heterozigotos SC) e S/ ß -talassemia (5 heterozigotos S/ ß ¿tal.). A presença de hematúria foi investigada através do exame sumário de urina (Urina I) e a sua origem glomerular ou não glomerular foi determinada pela pesquisa do dismorfismo eritrocitário. A ocorrência de hematúria foi investigada também dentre os antecedentes clínicos dos pacientes. A freqüência de hematúria encontrada na amostra total foi de 22% (25,7% dos SS; 20% dos SC e em nenhum dos S/ ß talassêmicos), tendo a sua origem glomerular sido constatada em 20% dos casos. Por outro lado, episódios antecedentes de hematúria foram verificados em 36% dos casos (31,4% dos pacientes com anemia falciforme, 50% dos heterozigotos Sc e em 2 dos pacientes com S/ ß -talassemia). Estas proporções não variaram com o sexo e a idade dos pacientes. Os resultados obtidos permitiram as seguintes conclusões: 1. A hematúria é uma manifestação clínica freqüente, tanto na anemia falciforme quanto na hemoglobinopatia SC, as duas síndromes falcêmicas de maior prevalência em populações brasileiras; 2.A ocorrência de hematúria não diferiu significativamente entre os pacientes portadores de anemia falciforme e da hemoglobinopatia SC. Já a incidência de hematúria entre os pacientes com anemia falciforme foi significativamente superior à encontrada por Ramalho colaboradores (1978) em indivíduos com o traço falciforme da mesma área geográfica, indicando que as sugestões existentes na literatura a respeito de a prevalência da hematúria ser maior entre os heterozigotos SC e AS que entre os homozigotos SS devem ser revistas; 3. A freqüência de hematúria foi ainda mais elevada quando se investigou os antecedentes clínicos dos portadores falcêmicos. A proporção de casos com hematúria verificada entre os antecedentes clínicos dos pacientes com anemia falciforme foi significativamente maior que a constatada por Hutz (1981) entro pacientes SS do Rio de Janeiro. Da mesma forma, a freqüência de antecedentes positivos de hematúria entre os pacientes se examinados foi significativamente superior àquela verificada por Gomes e Ramalho (1989) entre heterozigotos se da mesma área geográfica. Tais comparações, no entanto devem ser interpretadas com cautela, uma vez que a freqüência de antecedentes clínicos de hematúria depende do vários fatores, sobretudo do tempo de seguimento médico dos pacientes falcêmicos; 4. A hematúria não é uma alteração sugestiva das síndromes falcêmicas em nosso meio, uma vez que a sua incidência entre os pacientes com a hemoglobina S não diferiu significativamente da observada na amostra hospitalar geral; 5. As síndromes falcêmicas devem ter uma pequena importância relativa como causadoras de hematúria em nosso meio, devendo estar incluídas, juntamente com os tumores e outras causas, dentre os 8,5% casos de etiologia a esclarecer; 6. A origem glomerular da hematúria, embora significativa, não deve ser a mais freqüente nas síndromes falcêmicas. Desta forma, as lesões pós - glomerulares devem ocupar lugar de destaque na fisiopatogenia da hematúria pela hemoglobina S; 7. Seria recomendável a inclusão do exame sumário de urina e da pesquisa de dismorfismo eritrocitário no protocolo de seguimento falcêmicos, devido à sua fácil realização, baixo custo operacional e importante contribuição na orientação clínica destes pacientes / Mestrado / Genetica / Mestre em Ciências Biológicas

Materiais luminescentes, como os complexos de Terras Raras trivalentes, atuam como marcadores em citologia e imunologia, podendo ser utilizados como biomarcadores luminescentes, uma vez que, o desenvolvimento destes nanomateriais abre novas possibilidades para diversos campos, particularmente na medicina diagnóstica, além de estabelecer uma classe de sondas fluorescentes, para a qual não existem moléculas orgânicas equivalentes. Devido ao potencial de aplicação no mercado o presente trabalho teve como objetivo desenvolver materiais luminescentes, viabilizando a utilização de supermoléculas de lantanídeos como marcadores para diagnóstico de Anemia Falciforme (HbS). Foram desenvolvidos e caracterizados seis marcadores luminescentes a base de Terras Raras. A principal técnica utilizada para detecção de HbS foi o fluoroimunoensaio que já é utilizado na investigação de enzimas, anticorpos, células e hormônios, entre outros. No decorrer do trabalho utilizou-se também a espectroscopia de absorção no infravermelho por Transformada de Fourier (FTIR), para detectar a HbS. Os métodos estudados foram aplicados para o diagnóstico desta doença, de origem gênica, extremamente comum do grupo das hemoglobinopatias e considerada uma questão de saúde pública no Brasil (ANVISA). A Anemia Falciforme quando diagnosticada precocemente reduz expressivamente a morbidade e mortalidade dos seus portadores. Comparando os resultados obtidos com as metodologias já existentes, concluiu-se que são métodos viáveis para detecção da HbS e quando totalmente desenvolvidas, estas técnicas contribuirão originalmente para produção do diagnóstico da Anemia Falciforme e terão impacto nas Políticas Públicas do Estado de São Paulo e conseqüentemente do Brasil. / Luminescent materials, such as the rare earths complex, can be used as markers in cytology and immunology, being also used as luminescent biomarkers, once the development of these nanomaterials create new possibilities to many fields, particularly in diagnostic medicine. Besides, it establishes one kind of fluorescent probes, for which there are no equivalent organic molecules. Due to its potential in markets application, the objective of this work was to develop luminescent materials, allowing the use of these supermolecules of lanthanides as markers for the detection of Sickle Cell Disease (HbS). Six luminescent markers were developed and marked on rares earth base. The main methodology used for the detection of HbS was fluoroimunoassay, which is already used in investigation of enzymes, antibodies, cells, hormones, and so on. During this work, absorptions spectrum in the infrared by Fouriers Transform (FTIR) was also used to detect the HbS. The studied methods were applied for the diagnosis of this disease, which has genetic origin, very typical of the hemoglobin-pathology group and considered to be a public health problem in Brazil (ANVISA). When early diagnosed, Sickle Cell Disease (SCD) has a significant decrease in morbidity and mortality. Comparing the obtained results to the already known methodologies, it was possible to conclude that they are viable methods to detect HbS. Besides, when totally developed, these methods will contribute to the production of Sickle Cell Anemias diagnostic, and they will have impact in São Paulo states public measures, as well as in Brazils ones.

Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2012-06-05T20:42:15Z No. of bitstreams: 1 Bruno Antonio Veloso Cerqueira Inflamação, hemólise e ativação celular....pdf: 113176346 bytes, checksum: 334b7eba1166d09c726b10fc80dc284d (MD5) / Made available in DSpace on 2012-06-05T20:42:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Bruno Antonio Veloso Cerqueira Inflamação, hemólise e ativação celular....pdf: 113176346 bytes, checksum: 334b7eba1166d09c726b10fc80dc284d (MD5) Previous issue date: 2011 / Universidade Federal da Bahia. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, Bahia, Brasil / A anemia falciforme (AF) é uma desordem genética caracterizada por hemólise, estresse oxidativo, infecções recorrentes, estado inflamatório crônico e eventos de oclusão vascular, com ocorrência de crises de dor, danos teciduais e possibilidade de óbito precoce. Os eventos vasculares na AF envolvem a participação de hemácias, leucócitos, células endoteliais, plaquetas, fatores da coagulação e proteínas plasmáticas. Neste estudo, avaliou-se o papel de marcadores hematológicos, de hemólise, inflamação e de ativação celular na fisiopatologia da ativação endotelial na AF. Foi realizado um estudo de corte transversal, seguido por caso-controle. Quarenta e cinco (45) indivíduos com AF em estado estável, com idade média 20,5 anos participaram do estudo. O perfil de hemoglobinas foi confirmado por HPLC. Os marcadores bioquímicos foram investigados por kits específicos; a expressão de moléculas na superfície dos leucócitos por citometria de fluxo e a quantificação de citocinas e moléculas de adesão solúveis por ELISA. Níveis elevados de lactato desidrogenase (LDH) e bilirrubinas foram associados a eventos de Síndrome Torácica Aguda e úlcera de perna, respectivamente. A leucocitose foi observada em pacientes com histórico de hepatomegalia e úlcera de perna. Os pacientes com histórico de terapia transfusional apresentaram concentrações aumentadas da aspartato aminotransferase (AST) e contagem de reticulócitos. Os níveis diminuídos de HDL estiveram associados a eventos de sequestro esplênico e esplenomegalia. A expressão do CD11b em neutrófilos, linfócitos e monócitos foi maior nos pacientes que nos controles; entretanto, a expressão do CD62L nos neutrófilos foi menor nos pacientes do que nos controles antes e após o desafio com o lipopolissacarídeo bacteriano (LPS). A expressão do CD11b e CD32 em neutrófilos teve correlação positiva com plaquetas e com o LDL, respectivamente. A expressão do CD62L em neutrófilos apresentou correlação negativa com plaquetas. A expressão do CD11b e CD18 em linfócitos teve correlação positiva com o ácido úrico e com a molécula de adesão vascular solúvel 1 (VCAM-1s), respectivamente. A expressão do CD62L em linfócitos foi negativamente correlacionada com o número de plaquetas, molécula de adesão intercelular solúvel 1 (ICAM-1s) e TNF-alfa. A expressão do CD32 em monócitos foi menor nos pacientes que nos controles e apresentou correlação negativa com a AST e hemoglobina S. A expressão reduzida do CD32 em monócitos de pacientes foi associada ao aumento da LDH, enquanto que a expressão do CD62L nessas células apresentou correlação positiva com o HDL e com as concentrações de hemoglobina. Os níveis de IL-18 e do ácido úrico foram associados a marcadores de hemólise, de disfunção endotelial e citocinas e podem representar a participação do complexo inflammasome. Os resultados apresentados sugerem o papel importante de biomarcadores na avaliação do perfil clínico de pacientes com AF, além de sugerir a provável influência de moléculas expressas na superfície de leucócitos, da IL-18 e do ácido úrico no processo inflamatório crônico e na gravidade clínica da AF. Acreditamos que a interação desses biomarcadores envolve processos complexos relacionados à hemólise, inflamação e ativação celular com importância na avaliação da gravidade dos eventos vasculares presentes na AF. Em conjunto, todos esses marcadores podem ser considerados como alvos terapêuticos promissores em intervenções clínicas futuras na doença. / Sickle cell anemia (SCA) is a common, severe monogenetic disorder characterized by chronic hemolysis, oxidative stress, frequent infections, a chronic inflammatory state and recurrent occlusions of the microcirculation, resulting in painful crises, organ damage and premature death. Vaso-occlusive episodes in SCA involve interactions between sickle red blood cells, endothelial cells, leukocytes, platelets, coagulation factors and plasma proteins. Herein, we evaluated the role of oxidative stress, inflammation and the profile of cell activation on pathophysiology of vascular occlusion in SCA. We conducted a cross-sectional study, followed by case control study. Forty-five SCA patients without general symptoms, median age 20.5 years, were included in this study. Hemoglobin profile was confirmed by HPLC; biochemical markers by biochemical kits; surface molecule expressions on leukocytes were determined by flow cytometry and the concentration of cytokines and soluble adhesion molecules were measured by ELISA kits. The increase serum levels of lactate dehydrogenase (LDH) and bilirubins were associated with acute thoracic syndrome and leg ulcer respectively. The clinic aspects like hepatomegaly and leg ulcer were associated with increase number of leukocyte. The blood transfusion therapy was associated positively with aspartate aminotransferase (AST) levels and reticulocytes number. The decreased levels of HDL-C were associated with splenic sequestration and splenectomy. The surface CD11b expression of neutrophils, lymphocyte and monocytes in patients was higher than in controls; however, CD62L expression on neutrophils was lower in patients than in controls before and after lipopolysaccharide (LPS) challenge. CD11b and CD32 expression level on neutrophils were positively correlated with platelet counts and LDL-C levels respectively. CD62L expression on neutrophils was negatively correlated with platelet counts. CD11b and CD18 expression levels on lymphocytes were positively correlated with uric acid and soluble vascular adhesion molecule 1(sVCAM-1) levels respectively. CD62L expression on lymphocyte was negatively correlated with platelet count, soluble intercellular adhesion molecule 1 (sICAM-1) and TNF-alpha levels. CD32 expression on monocytes in patients was lower than in controls, further correlated negatively with AST and hemoglobin S. Decrease CD32 expression on monocytes was associated with high LDH levels and CD62L expression was positively correlated with HDL-C and hemoglobin concentration. The IL-18 and uric acid plasma concentrations were correlated closely with markers of hemolysis, endothelial dysfunction and cytokine levels, possibly representing the participation of inflammasome complex. We believe that the interaction of these biomarkers involve complex processes related to hemolysis, inflammation and cellular activation with importance in assessing severity of the vascular events on the SCA. So, together, all these biomarkers can be considered as promising therapeutic targets in future clinical interventions in SCA

Materiais luminescentes, como os complexos de Terras Raras trivalentes, atuam como marcadores em citologia e imunologia, podendo ser utilizados como biomarcadores luminescentes, uma vez que, o desenvolvimento destes nanomateriais abre novas possibilidades para diversos campos, particularmente na medicina diagnóstica, além de estabelecer uma classe de sondas fluorescentes, para a qual não existem moléculas orgânicas equivalentes. Devido ao potencial de aplicação no mercado o presente trabalho teve como objetivo desenvolver materiais luminescentes, viabilizando a utilização de supermoléculas de lantanídeos como marcadores para diagnóstico de Anemia Falciforme (HbS). Foram desenvolvidos e caracterizados seis marcadores luminescentes a base de Terras Raras. A principal técnica utilizada para detecção de HbS foi o fluoroimunoensaio que já é utilizado na investigação de enzimas, anticorpos, células e hormônios, entre outros. No decorrer do trabalho utilizou-se também a espectroscopia de absorção no infravermelho por Transformada de Fourier (FTIR), para detectar a HbS. Os métodos estudados foram aplicados para o diagnóstico desta doença, de origem gênica, extremamente comum do grupo das hemoglobinopatias e considerada uma questão de saúde pública no Brasil (ANVISA). A Anemia Falciforme quando diagnosticada precocemente reduz expressivamente a morbidade e mortalidade dos seus portadores. Comparando os resultados obtidos com as metodologias já existentes, concluiu-se que são métodos viáveis para detecção da HbS e quando totalmente desenvolvidas, estas técnicas contribuirão originalmente para produção do diagnóstico da Anemia Falciforme e terão impacto nas Políticas Públicas do Estado de São Paulo e conseqüentemente do Brasil. / Luminescent materials, such as the rare earths complex, can be used as markers in cytology and immunology, being also used as luminescent biomarkers, once the development of these nanomaterials create new possibilities to many fields, particularly in diagnostic medicine. Besides, it establishes one kind of fluorescent probes, for which there are no equivalent organic molecules. Due to its potential in markets application, the objective of this work was to develop luminescent materials, allowing the use of these supermolecules of lanthanides as markers for the detection of Sickle Cell Disease (HbS). Six luminescent markers were developed and marked on rares earth base. The main methodology used for the detection of HbS was fluoroimunoassay, which is already used in investigation of enzymes, antibodies, cells, hormones, and so on. During this work, absorptions spectrum in the infrared by Fouriers Transform (FTIR) was also used to detect the HbS. The studied methods were applied for the diagnosis of this disease, which has genetic origin, very typical of the hemoglobin-pathology group and considered to be a public health problem in Brazil (ANVISA). When early diagnosed, Sickle Cell Disease (SCD) has a significant decrease in morbidity and mortality. Comparing the obtained results to the already known methodologies, it was possible to conclude that they are viable methods to detect HbS. Besides, when totally developed, these methods will contribute to the production of Sickle Cell Anemias diagnostic, and they will have impact in São Paulo states public measures, as well as in Brazils ones.

Orientador: Antônio Carlos Guastaldi / Coorientador: Gildásio de Cerqueira Daltro / Banca: Ademario Galvão Spínola / Banca: Luis Schiper / Resumo: O termo Doença Falciforme (DF) é utilizado para definir hemoglobinopatias nas quais pelo menos uma hemoglobina (Hb) anormal é a hemoglobina S (HbS). Essa alteração provoca distorção dos eritrócitos, fazendo-os tomar a forma de "f c " ou " - ". No Brasil, cerca de 700 a 1.000 pessoas portadoras de DF nascem anualmente e na Bahia uma em cada 650 crianças nascidas vivas apresentam a patologia. A DF cursa com complicações ósteo-articular em 80% dos casos e uma das mais frequentes e graves é a osteonecrose. Os métodos de tratamento atualmente disponíveis não são capazes de garantir bons resultados clínicos para este grupo de pacientes. Além disso, a evolução natural da doença em pacientes não tratados é de piora progressiva. Diante disso, traçou-se como objetivo avaliar o resultado clínico e radiológico do tratamento com implante autólogo de células mononucleares da medula óssea em pacientes com osteonecrose da cabeça umeral secundária a Doença Falciforme. Foi realizado um estudo prospectivo, experimental, com avaliação antes e após o implante das células mononucleares na cabeça umeral; participaram deste estudo 6 pacientes adultos, portadores sintomáticos de necrose avascular. Os resultados do estudo demonstraram que os resultados do implante autólogo de células mononucleares foram excelentes, promovendo melhora da mobilidade, dor e função articular. A amplitude de todos os movimentos avaliados apresentou melhora em relação ao pré operatório com ganho estatisticamente significant... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The term sickle cell disease (SCD) is used to define hemoglobinopathies in which the at least one hemoglobin (Hb) is abnormal hemoglobin S (HbS). This relationship causes distortion of the erythrocytes, making it take a form of "sickle" or "half-moon". In Brazil, about 700 to 1,000 people with SCD are born annually and in Bahia one out of every 650 communities born alive have a pathology. SCD is complicated with osteoarticular disease in 80% of cases and one of the most frequent is osteonecrosis. The treatment available are not able to promote good clinical results for this group of patients. Moreover, the natural evolution of the disease is characterized by progressive worsening. Therefore, the objective is to evaluate the clinical and radiological results of the treatment with autologous bone marrow mononuclear cell implantation in patients with osteonecrosis of the humeral head secondary to Sickle Cell Disease. We developed a prospective, experimental study with evaluation and post-implantation of mononuclear cells in the humeral head; 6 adult patients, symptomatic carriers of avascular necrosis, participated in the study. The results of the study demonstrated that the results of autologous mononuclear cell implantation were excellent, promoting improved mobility, pain and functional function. The breadth of all efforts is improved in terms of performance with the statistically significant gain in terms of flexibility, stretch and external velocity. In addition, the Index ... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Anemia falciforme (AF) é considerada a doença monogênica mais prevalente no Brasil, e resulta de uma mutação pontual no gene da beta-globina que leva à produção de uma molécula de hemoglobina anormal (HbS). A HbS polimeriza quando submetida a baixas tensões de oxigênio, precipitando e causando a deformação dos eritrócitos pois torna rígida sua membrana plasmática que apresentará uma série de alterações e danos. Além disso, a falcemização dos eritrócitos ocasiona anemia severa, lesão de isquemia/reperfusão, superprodução de espécies reativas de oxigênio, inflamação e vaso-oclusão (VO). A VO manifesta-se clinicamente como crises de dor, ou crises vaso-oclusivas (CVOs) que pode levar ao bloqueio de vasos e capilares e ao comprometimento de órgãos. Estes pacientes possuem alta susceptibilidade a infecções, principalmente na infância. Os mecanismos envolvidos no desenvolvimento da VO, no entanto, não estão totalmente elucidados. Estudos acerca deste tema têm sugerido que a VO seria o resultado da interação entre eritrócitos falcêmicos, leucócitos, plaquetas, células endoteliais e substâncias presentes no plasma dos indivíduos afetados. Tais observações como que AF seria o resultado de uma resposta inflamatória exacerbada que estes indivíduos desenvolvem, levaram à formulação da hipótese de que a anemia falciforme se comporta como uma condição inflamatória crônica e sugerindo que uma modulação do sistema imune poderá ser útil para a regulação da sintomatologia clínica. Salientando a carência de dados na literatura referentes à correlação de polimorfismos descritos para genes do sistema imune e a patofisiologia da AF, nosso estudo tem como objetivo principal: Analisar a correlação para polimorfismos descritos para genes do sistema imune e correlacionar-lho com a patofisiologia da AF. Sabemos que o HLA-G é uma molécula HLA não-clássica, que mostrou ser expressa em sítios de inflamação e nas doenças inflamatórias. Na região promotora além de ser altamente polimórfica, encontramos a região UTR 3' que parece desempenhar um papel importante na regulação da expressão do HLA-G. Então, dentre dos polimorfismos avaliados específicamente temos os dos genes HLA-G (14pb) e MiRNA (+3142). Nossos resultados indicam que os polimorfismos do HLA-G de 14pb e +3142 em 93 pacientes com AF, 21 pacientes apresentaram uma infecção pelo VHC e 16 pacientes com AF (22,2%) eram homozigotos para o genótipo +3142C e nenhum deles era positivo para HCV. Nenhum dos resultados obtidos indicou qualquer tipo de imunodeficiência mas pelo contrário, sugerem a existência de uma tendência inflamatória crônica na clínica da AF. Assim fica evidente a importância do polimorfismo +3142 sobre a susceptibilidade a infecções entre os pacientes com SCD.

O avanço de novas tecnologias tem conduzido à geração de grandes volumes de dados biológicos, provenientes, por exemplo, de sequenciamento de genomas, expressão de genes e proteínas, estrutura de proteínas e RNAs, análise de imagens, formulários eletrônicos e exames médicos. Com o intuito de transformar esses volumosos conjuntos de dados brutos em informação e conhecimento que sejam compreensíveis e interpretáveis, técnicas de mineração de dados têm sido aplicadas no estudos de diversos processos biológicos, como a predição de genes, funções de genes, fenótipos, módulos regulatórios, estrutura de proteínas, função de proteínas e descoberta de interações moleculares. Cada conjunto de dados tem suas particularidades, demandando o emprego de distintas metodologias de análises e algoritmos de reconhecimento de padrões, como Florestas Aleatórias, Redes Neurais, Deep Learning, Modelo Oculto de Markov, Máquina de Vetores de Suporte, K-médias e Análise de Componentes Principais. A escolha do algoritmo a ser utilizado é influenciada por fatores como o tipo dos dados, a forma como são gerados, sua natureza, suas características e o objetivo do estudo. Assim, este trabalho teve como objetivo explorar técnicas de reconhecimento de padrões e estatística aplicadas a um conjunto de dados biológicos envolvendo pacientes com anemia falciforme, para extração de informação e conhecimento sobre os processos, fenômenos e sistemas biológicos envolvidos na doença. Foram realizadas análises de um conjunto de dados diverso, proveniente de registros clínicos, entrevistas com pacientes, exames clínicos e sequenciamento de polimorfismos de nucleotídeo único. Os dados demandam diferentes abordagens de análises, exploração e revelação da estrutura de dados intrínseca. Em uma análise inicial, foram aplicados algoritmos de reconhecimento de padrões a dados clínicos de pacientes com anemia falciforme, com o objetivo de obter grupos contendo pacientes similares. Os algoritmos PCAMix, PAM e TwoStep clustering foram capazes de gerar grupos homogêneos de pacientes, sendo que estes grupos apresentam distintas características clínicas e diferentes níveis de gravidade da doença quando comparados entre si. Os resultados indicam que características como idade, níveis de bilirrubina, histórico de transfusões, dor aguda da anemia falciforme, síndrome torácica aguda, acidente vascular cerebral, infarto cerebral silencioso, ataque isquêmico transitório, úlcera de pernas, moyamoya, ferritina, contagem de reti- culócitos, retinopatias, ataques epiléticos e hemossiderose transfusional são importantes para a definição de grupos homogêneos de pacientes, que apresentem distintos níveis de gravidade de anemia falciforme quando comparados entre si. Adicionalmente à análise de agrupamento, o conjunto de pacientes com histórico de priapismo, uma das complicações da anemia falciforme, foi estudado. O objetivo desta análise foi caracterizar clinicamente os pacientes com histórico de priapismo, e investigar fatores genéticos que alterassem o risco da doença. Observou-se que o priapismo ocorreu mais frequentemente em pacientes com genótipo HbSS, estando associado a idades mais avançadas e à ocorrência de hipertensão pulmonar e necrose avascular. Dois novos SNPs foram associados à ocorrência de priapismo, bem como houve indicativo de replicação da associação do gene TGFBR3 ao risco da doença. / Technology has been producing large biological datasets of genome sequences, gene and protein expression, RNA and protein structure, images, electronic questionnaires and laboratory test results. In order to extract information and knowledge from these large datasets, data mining techniques have been used in the investigation of a wide range of biological processes, with the goal of predicting gene, gene function, phenotype, regulatory modules, molecular interaction, protein function and protein structure. Each dataset has different characteristics and demands the application of different statistical methodologies and pattern recognition algorithms, such as Random Forests, Neural Networks, Deep Learning, Markov Hidden Model, Support Vector Machine, K-means and Principal Component Analysis. The choice of the algorithm depends on data type, data generation, data characteristics and goal of the study. Therefore, the goal of this work was to explore pattern recognition and statistical techniques in a biological dataset on sickle cell disease patients, in order to extract information and knowledge about the biological systems, processes and mechanisms associated with the disease. A diverse dataset was analyzed, containing data from medical records, patient interviews, laboratory tests and single nucleotide polymorphisms. The dataset requires a variety of analysis approaches, in order to explore and reveal the hidden data structure. In an initial investigation, pattern recognition algorithms were used in the analysis of clinical data from sickle cell patients, in order to obtain clusters containing similar patients. PCAMix, PAM and TwoStep clustering algorithms generated homogeneous clusters of patients that display different clinical characteristics and different levels of disease severity. The results show that age, bilirubin levels, transfusion history, vaso-occlusive pain episodes, acute chest syndrome, infarctive stroke, hemorrhagic stroke, ischemic attack, leg ulcers, moyamoya, ferritin, reticulocyte count, retinopathy, seizures and transfusional hemosiderosis are important to define homogeneous patient clusters, with distinct levels of sickle cell severity. Additionally, the patients with history of priapism, a sickle cell related complication, were studied. The goal of the study was to characterize patients with priapism history and investigate genetic factors that modify the risks of the disease. Priapism more frequently occurred among patients with HbSS genotype and was associated with older age and occurrence of pulmonary hypertension and avascular necrosis. Two novel SNPs were associated with priapism and there was evidence of replication of a previously reported association of TGFBR3 with priapism risk.