Orientador: Mario Mantovani / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-28T18:13:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Fontelles_MauroJose_D.pdf: 25233094 bytes, checksum: b41db7eb7cde50f040d0b4695f40c089 (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: o trauma é uma das principais causas de morte na população, ocupando o terceiro lugar se consideradas todas as idades e, o primeiro, na faixa etária até os 44 anos de vida. Dentre estas causas, o fígado constitui um dos principais órgãos atingidos no trauma abdominal e lesões hepáticas graves podem, pelo choque hemorrágico, evoluir para um estado de resposta inflamatória generalizada e resultar na insuficiência de múltiplos órgãos e sistemas. Nestes casos, o princípio do tratamento cirúrgico é sustar o sangramento pela oclusão temporária do ligamento hepatoduodenal, manobra descrita por Pringle em 1908 que, embora prática e eficaz, provoca isquemia total do fígado, podendo levar a alterações importantes na estrutura anatômica do órgão, piorando a fase de reperfusão pela liberação de substâncias desencadeantes da resposta inflamatória e migração de neutrófilos para os tecidos à distância. Assim, o objetivo deste trabalho experimental foi estudar os efeitos da isquemia e reperfusão hepática total, em condições de normalidade e sob estado de choque hemorrágico controlado, no acúmulo de neutrófilos no intestino do rato. Um total de 32 ratos machos, adultos, da linhagem Wistar, foram randomizados em 4 grupos de oito animais cada: 1) Grupo Sham (anestesia + laparotomia + observação por 60 min.); 2) Grupo Choque (anestesia + choque hemorrágico 20 min + reposição volêmica + reperfusão 60 min); Grupo Pringle (anestesia + isquemia hepática 15 mino + reperfusão 60 min.); Grupo Total (anestesia + choque hemorrágico 20 mino + reposição volêmica + isquemia hepática 15 mino + reperfusão60 min.). O estado de choque hemorrágico controlado foi obtido pela sangria, a intervalos regulares, de volumes equivalentes a 5% da volemia estimada até a obtenção da pressão arterial média igual a 40mmHg e, mantido por 20 minutos. A reposição volêmica foi efetuada com solução de Ringer lactato e sangue total (3: 1). A isquemia hepática total foi obtida pelo pinçamento do ligamento hepatoduodenal durante 15 minutos, seguida por reperfusão de 60 minutos. Das mostras sangüíneas, o lactato sérico e a reserva de base caracterizaram o estado de choque com baixa perfusão tecidual, sendo, então, os animais sacrificados por exsanguinação. Segmentos do íleo terminal e cólon sigmóide foram submetidos a estudo histopatológico para a contagem de neutrófilos. Análises estatísticas foram processadas para caracterização do nível de significância que foi estabelecido em 5%(p <; 0.005). Os resultados obtidos mostraram que a isquemia hepática total, seguida de reperfusão, não induziu a um afluxo de neutrófilos para o intestino nos animais do grupo Pringle e Total e que, o estado de choque hemorrágico, diferentemente da manobra de Pringle, foi o principal fator indutor do acúmulo de neutrófilos no íleo terminal e cólon sigmóide, pois, no grupo submetido unicamente a este tipo de agressão, grupo Choque, as contagens apresentaram valores mais elevados e diferiram significativamente dos demais grupos estudados. Durante o experimento morreram três animais (9,3%), dois no grupo Choque e um no grupo Pringle / Abstract: The trauma is one of the main causes of death on the population, ranking the third place if considered all ages and the first up to the age of 44. Among these causes, the liver represents the most frequently hit organ in abdominal trauma.This way, the patients victims of severe hepatic injuries, due to hemorrhagic shock, can evolve to a systemic inflammatory response syndrome resultingin multiple organs and systems insufficiency. In these cases,the surgical treatment principie is to stop the bleeding by temporary portal triad occlusion, maneuver described by Pringle in 1908. Although practical and effective, this procedure provokes total ischemia of the tiver and may lead to important alterations on the anatomic structure of the organ, worsening the reperfusion phase by releasing substances that trigger the inflammatory response and migration of neutrophils to the distant tissues. This way, the objective of this experimental work was to study the effects of total hepatic ischemia and reperfusion, under normal conditions and under controlled hemorrhagic shock state, on the accumulation of neutrophils in the gut of rat. A total of 32 adult male Wistar rats, were divided into four groups of eight animaiseach. 1) Shamgroup (anesthesia+ laparotomy+ observationf or 60 min.); 2) Shock group (anesthesia+ hemorrhagicshock for 20 min.+ volemic resuscitation + reperfusion for 60 min.); Pringle group (anesthesia + hepatic ischemia for 15 min.+ reperfusion for 60 min.); 4) Total group (anesthesia + hemorrhagic shock for 20 min.+ volemic resuscitation+ hepatic ischemia for 15 min.+ reperfusion for 60 min.). The controlled hemorrhagic shock state was obtained by bleeding, on regular intervals, to equivalent volumes of 5% of the estimated blood volume until a mean arterial pressure of 40 mmHg was obtained, and maintained for 20 minutes. The volemic resuscitation done with lactated Ringer's solution and total blood (3: 1). The total hepatic ischemia was obtained by portal triad clamping during 15 minutes followed by reperfusion for 60 minutes. Samples of blood were collected in ali of the phases and the dosages of serum Jactatelevels and base excess were used to characterize the state of shock with low tissue perfusion. The animais were sacrificed by bleeding to death. Segments of the distal ileum and sigmoid colon were submitted to histologic studies for neutrophils counting. Statistical analysis was performedwith analysis of variance (ANOVA), test of Student-Newman-Keulsand Chi-square. A value of p < 0.05 was considered to be significant. The results obtained show that the total hepatic ischemia for 15 minutes, followed by reperfusion for 60 minutes, did not prompt to a neutrophils influx to the gut on the animais of groups Pringle and Total. Also, it demonstrated that, the state of hemorrhagic shock, differently from the Pringle maneuver, was the main inductor factor of neutrophils accumulation on the distal ileum and sigmoid colon, for the group submitted, exclusively, to this type of aggression (Shock group), the counting showed higher values, and differed significantly from the other studied groups. During the experiment three animais died (9,3%), being two on the Shock group,and one on the Pringle grou / Doutorado / Cirurgia / Doutor em Cirurgia

Tese (livre-docencia) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-03T13:07:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Andrade_EduardoDiasde_LD.pdf: 1150030 bytes, checksum: 99238da26faa4f9ec76a1de36308bc8a (MD5) Previous issue date: 1991 / Resumo: Este trabalho leva por objetivo avaliar, comparativamente, os efeitos da betametasona e dipirona, administradas isoladamente e em associação, sobre a migração leucocitária em cavidade peritoneal de camundongos. Os resultados demonstraram que a betametasona, quando empregada na dose única de 0,1 mg/kg, diminuiu significantemente a emigração de leucócitos e, especificamente, de neutrófilos. Ao contrário, a dipirona proporcionou um aumento da emigração destas células sanguíneas, quando injetada na dose única de 13 mg/Kg. O tratamento com a associação betametasona e dipirona, nas doses únicas respectivas citada, não interferiu na cinética dps leucócitos, na mesma espécie animal. A partir destes resultados, pode-se sugerir que as ações antiálgica e antiedematosa da betametasona podem ser atribuídas, entre outros mecanismos, às propriedade deste medicamento em inibir a emigração e o acúmulo de leucócitos na região inflamada. Por outro lado, a ação analgésica da dipirona, deve estar relacionada a outros mecanismos, não relacionados com a leucodiapedese / Abstract: The purpase of this paper was to compare the betamethasone and dipyrone effects, administrated in an isolated maner and in association, upon the leukocytes migration, in mice peritoneal cavity. The results showed that betamethasone, when employed in single dose (0,1 mg/Kg), lead to a significant decrease of leuk ocytes migration, in special, of neutrophils PMNs. Contrarily. dipyrone increase the migration of this blood cells, when injected in single dose of 19 mg/Kg. The treatment with the betamethasone - dipyrone association, in the same doses described, doesn't have effects upon leukocytes kinetics. From these results, it was concluded that the antialgic and antioedematous actions of betamethasone can be explained, beyond other mechanisms, through the property of this drug to inhibit the leukocytes migration and accumulation in inflamed tissues. In the other hand, the analgesic action of dipyrone, probably, is not related with leukodiapedesis reduction / Tese (livre-docencia) - Univer / Farmacologia, Anestesiologia e Terapeutica / Livre docente em Odontologia

As endometrites bacterianas são uma das principais causas de infertilidade na égua. Entre os tratamentos utilizados nesta patologia, estão as infusões uterinas de plasma homólogo acrescido de leucócitos e a infusão de leucócitos heterólogos criopreservados. O presente trabalho teve por objetivo realizar testes in vivo e in vitro, que foram descritos em dois artigos. No primeiro artigo, objetivou-se avaliar in vitro a quimiotaxia dos leucócitos eqüinos em relação a diferentes quimioatraentes, bem como sua vitalidade e produção de radicais livres de oxigênio (ROS) pós-descongelamento. No experimento 1, testou-se dextrose em concentrações de 0, 1, 2 e 6%, acrescida ou não de interleucina-8 (IL-8), como quimioatraente para leucócitos eqüinos suspensos em salina fosfatada tamponada (PBS) ou em R3F; no experimento 2, testou-se plasma homólogo ou heterólogo, a 3% (com ou sem IL-8), 10, 30, 60 e 90%, como quimioatraente; no experimento 3, foi testada a quimiotaxia de leucócitos íntegros em relação a diferentes quantidades de leucócitos lisados. O experimento 4 avaliou a vitalidade e a geração de ROS pelos leucócitos após o descongelamento, comparando quatro graus de diluição em NaCl e PBS. Concluiu-se que a dextrose não apresenta bom efeito quimioatraente para leucócitos eqüinos. Dentre as concentrações de plasma utilizadas, concentrações de plasma homólogo entre 10% e 60% apresentam bom efeito quimiotático. Já o plasma heterólogo apresentou boa atração de leucócitos quando em concentrações de 10% e de 30% Na concentração de 10x106/mL, os leucócitos lisados foram capazes de atrair leucócitos em proporção semelhante à da IL-8. Com relação aos testes-pós-descongelamento, células ressuspendidas em PBS ou NaCl apresentam vitalidade e geração de radicais livres de oxigênio semelhantes, quando incubados por até 15 minutos. No segundo artigo, realizaram-se testes in vivo compararando cinco tratamentos em éguas, em estro, experimentalmente infectadas com Streptococcus equi subsp.zooepidemicus. Foram utilizadas 25 éguas, 20 consideradas resistentes, e 5 éguas susceptíveis à endometrite. Após 24 horas, os animais foram submetidos a exame clínico, bacteriológico e citológico. Com a presença de quadro clínico de endometrite, as éguas eram submetidas a um dos seguintes tratamentos: 1-Infusão de 120mL de plasma homológo com de leucócitos frescos; 2-– Infusão de 4 mL contendo 800 x 106 leucócitos íntegros, congelados; 3-Leucócitos lisados - Infusão de 4 mL contendo 800 x 106 leucócitos lisados; 4- IL-8- Infusão de 4 mL contendo 25 ng/mL de IL-8 congelada; 5-Controle – Infusão de 4 mL de meio R3F congelado. Os exames clínico, bacteriológico e citológico foram realizados diariamente até o sétimo dia pós-infecção, ou até a eliminação da bactéria, ou até a ausência de neutrófilos no esfregaço citológico. Após os exames, as éguas receberam o tratamento designado, sendo estes realizados diariamente até a ausência de crescimento bacteriano no exame microbiológico ou por, no máximo, quatro dias. No sétimo dia, todas as éguas foram tratadas com infusão intra-uterina de 5.000.000 UI de penicilina G potássica cristalina. Após o término de um tratamento, aguardava-se cerca de sete dias para a reinfecção, num outro ciclo, quando um outro tratamento era aplicados. Todas as éguas foram submetidas a todos os tratamentos, perfazendo um total de 125 infecções experimentais num delineamento experimental do tipo Quadrado Latino. Não se observaram diferenças significativas no tempo de eliminação bacteriana nas éguas resistentes. Entretanto, nas éguas susceptíveis, observou-se uma cura bacteriana mais rápida quando as éguas foram tratadas com leucócitos frescos, leucócitos congelados e leucócitos lisados, em relação às tratadas com IL-8 e as do grupo controle. Concluiu-se que o efeito bactericida dos leucócitos viáveis ou lisados, associados ou não à presença de fatores de opsonização do plasma, foi o responsável pela cura bacteriológica e que o efeito quimioatraente de neutrófilos, plasma, restos celulares e IL-8 não influiu no tempo de eliminação bacteriana.

As endometrites bacterianas são uma das principais causas de infertilidade na égua. Entre os tratamentos utilizados nesta patologia, estão as infusões uterinas de plasma homólogo acrescido de leucócitos e a infusão de leucócitos heterólogos criopreservados. O presente trabalho teve por objetivo realizar testes in vivo e in vitro, que foram descritos em dois artigos. No primeiro artigo, objetivou-se avaliar in vitro a quimiotaxia dos leucócitos eqüinos em relação a diferentes quimioatraentes, bem como sua vitalidade e produção de radicais livres de oxigênio (ROS) pós-descongelamento. No experimento 1, testou-se dextrose em concentrações de 0, 1, 2 e 6%, acrescida ou não de interleucina-8 (IL-8), como quimioatraente para leucócitos eqüinos suspensos em salina fosfatada tamponada (PBS) ou em R3F; no experimento 2, testou-se plasma homólogo ou heterólogo, a 3% (com ou sem IL-8), 10, 30, 60 e 90%, como quimioatraente; no experimento 3, foi testada a quimiotaxia de leucócitos íntegros em relação a diferentes quantidades de leucócitos lisados. O experimento 4 avaliou a vitalidade e a geração de ROS pelos leucócitos após o descongelamento, comparando quatro graus de diluição em NaCl e PBS. Concluiu-se que a dextrose não apresenta bom efeito quimioatraente para leucócitos eqüinos. Dentre as concentrações de plasma utilizadas, concentrações de plasma homólogo entre 10% e 60% apresentam bom efeito quimiotático. Já o plasma heterólogo apresentou boa atração de leucócitos quando em concentrações de 10% e de 30% Na concentração de 10x106/mL, os leucócitos lisados foram capazes de atrair leucócitos em proporção semelhante à da IL-8. Com relação aos testes-pós-descongelamento, células ressuspendidas em PBS ou NaCl apresentam vitalidade e geração de radicais livres de oxigênio semelhantes, quando incubados por até 15 minutos. No segundo artigo, realizaram-se testes in vivo compararando cinco tratamentos em éguas, em estro, experimentalmente infectadas com Streptococcus equi subsp.zooepidemicus. Foram utilizadas 25 éguas, 20 consideradas resistentes, e 5 éguas susceptíveis à endometrite. Após 24 horas, os animais foram submetidos a exame clínico, bacteriológico e citológico. Com a presença de quadro clínico de endometrite, as éguas eram submetidas a um dos seguintes tratamentos: 1-Infusão de 120mL de plasma homológo com de leucócitos frescos; 2-– Infusão de 4 mL contendo 800 x 106 leucócitos íntegros, congelados; 3-Leucócitos lisados - Infusão de 4 mL contendo 800 x 106 leucócitos lisados; 4- IL-8- Infusão de 4 mL contendo 25 ng/mL de IL-8 congelada; 5-Controle – Infusão de 4 mL de meio R3F congelado. Os exames clínico, bacteriológico e citológico foram realizados diariamente até o sétimo dia pós-infecção, ou até a eliminação da bactéria, ou até a ausência de neutrófilos no esfregaço citológico. Após os exames, as éguas receberam o tratamento designado, sendo estes realizados diariamente até a ausência de crescimento bacteriano no exame microbiológico ou por, no máximo, quatro dias. No sétimo dia, todas as éguas foram tratadas com infusão intra-uterina de 5.000.000 UI de penicilina G potássica cristalina. Após o término de um tratamento, aguardava-se cerca de sete dias para a reinfecção, num outro ciclo, quando um outro tratamento era aplicados. Todas as éguas foram submetidas a todos os tratamentos, perfazendo um total de 125 infecções experimentais num delineamento experimental do tipo Quadrado Latino. Não se observaram diferenças significativas no tempo de eliminação bacteriana nas éguas resistentes. Entretanto, nas éguas susceptíveis, observou-se uma cura bacteriana mais rápida quando as éguas foram tratadas com leucócitos frescos, leucócitos congelados e leucócitos lisados, em relação às tratadas com IL-8 e as do grupo controle. Concluiu-se que o efeito bactericida dos leucócitos viáveis ou lisados, associados ou não à presença de fatores de opsonização do plasma, foi o responsável pela cura bacteriológica e que o efeito quimioatraente de neutrófilos, plasma, restos celulares e IL-8 não influiu no tempo de eliminação bacteriana.

As endometrites bacterianas são uma das principais causas de infertilidade na égua. Entre os tratamentos utilizados nesta patologia, estão as infusões uterinas de plasma homólogo acrescido de leucócitos e a infusão de leucócitos heterólogos criopreservados. O presente trabalho teve por objetivo realizar testes in vivo e in vitro, que foram descritos em dois artigos. No primeiro artigo, objetivou-se avaliar in vitro a quimiotaxia dos leucócitos eqüinos em relação a diferentes quimioatraentes, bem como sua vitalidade e produção de radicais livres de oxigênio (ROS) pós-descongelamento. No experimento 1, testou-se dextrose em concentrações de 0, 1, 2 e 6%, acrescida ou não de interleucina-8 (IL-8), como quimioatraente para leucócitos eqüinos suspensos em salina fosfatada tamponada (PBS) ou em R3F; no experimento 2, testou-se plasma homólogo ou heterólogo, a 3% (com ou sem IL-8), 10, 30, 60 e 90%, como quimioatraente; no experimento 3, foi testada a quimiotaxia de leucócitos íntegros em relação a diferentes quantidades de leucócitos lisados. O experimento 4 avaliou a vitalidade e a geração de ROS pelos leucócitos após o descongelamento, comparando quatro graus de diluição em NaCl e PBS. Concluiu-se que a dextrose não apresenta bom efeito quimioatraente para leucócitos eqüinos. Dentre as concentrações de plasma utilizadas, concentrações de plasma homólogo entre 10% e 60% apresentam bom efeito quimiotático. Já o plasma heterólogo apresentou boa atração de leucócitos quando em concentrações de 10% e de 30% Na concentração de 10x106/mL, os leucócitos lisados foram capazes de atrair leucócitos em proporção semelhante à da IL-8. Com relação aos testes-pós-descongelamento, células ressuspendidas em PBS ou NaCl apresentam vitalidade e geração de radicais livres de oxigênio semelhantes, quando incubados por até 15 minutos. No segundo artigo, realizaram-se testes in vivo compararando cinco tratamentos em éguas, em estro, experimentalmente infectadas com Streptococcus equi subsp.zooepidemicus. Foram utilizadas 25 éguas, 20 consideradas resistentes, e 5 éguas susceptíveis à endometrite. Após 24 horas, os animais foram submetidos a exame clínico, bacteriológico e citológico. Com a presença de quadro clínico de endometrite, as éguas eram submetidas a um dos seguintes tratamentos: 1-Infusão de 120mL de plasma homológo com de leucócitos frescos; 2-– Infusão de 4 mL contendo 800 x 106 leucócitos íntegros, congelados; 3-Leucócitos lisados - Infusão de 4 mL contendo 800 x 106 leucócitos lisados; 4- IL-8- Infusão de 4 mL contendo 25 ng/mL de IL-8 congelada; 5-Controle – Infusão de 4 mL de meio R3F congelado. Os exames clínico, bacteriológico e citológico foram realizados diariamente até o sétimo dia pós-infecção, ou até a eliminação da bactéria, ou até a ausência de neutrófilos no esfregaço citológico. Após os exames, as éguas receberam o tratamento designado, sendo estes realizados diariamente até a ausência de crescimento bacteriano no exame microbiológico ou por, no máximo, quatro dias. No sétimo dia, todas as éguas foram tratadas com infusão intra-uterina de 5.000.000 UI de penicilina G potássica cristalina. Após o término de um tratamento, aguardava-se cerca de sete dias para a reinfecção, num outro ciclo, quando um outro tratamento era aplicados. Todas as éguas foram submetidas a todos os tratamentos, perfazendo um total de 125 infecções experimentais num delineamento experimental do tipo Quadrado Latino. Não se observaram diferenças significativas no tempo de eliminação bacteriana nas éguas resistentes. Entretanto, nas éguas susceptíveis, observou-se uma cura bacteriana mais rápida quando as éguas foram tratadas com leucócitos frescos, leucócitos congelados e leucócitos lisados, em relação às tratadas com IL-8 e as do grupo controle. Concluiu-se que o efeito bactericida dos leucócitos viáveis ou lisados, associados ou não à presença de fatores de opsonização do plasma, foi o responsável pela cura bacteriológica e que o efeito quimioatraente de neutrófilos, plasma, restos celulares e IL-8 não influiu no tempo de eliminação bacteriana.

Orientador: Samir Tufic Arbex / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-14T00:29:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Arruda_AnaMariaSoaresde_M.pdf: 1102908 bytes, checksum: faeef86015216616a6d02fd3fd0ffafa (MD5) Previous issue date: 1991 / Resumo: Os autores investigaram a influência do antiinflamatório enzimático vegetal papaina na migração celular. em inflamação agda causada por injeção intraperitoneal de ovalbumina em camundongos. O modelo experimental caracteriza-se pelo acúmulo precoce de células polimorfonucleadas (PMN) na cavidade peritoneal após; o estimulo (4 a 8 horas). Os resultados mostraram que em animaistratados com papaina ocorreu maior migração de PMN do que em animais não tratados. A papaina, portant, . talvez por um mecanismo que envolva metabólitos ativos do ácido aracdônico. estimulou a migração de células PMN em modelo de inflamação aguda. Esta estimulação pode ser devido à ativação do plasminogenio e inibição da antitrombina III, gerando um aumento nos níveis de PGE2 no local inflamado. Este estado dá condições de haver maior migração leucocitária ao local. Além disso os resultados confirmaram a absorção da papaina pelo trato gastrointestinal / Abstract: The authors investigated the influence of the enzymatic antiinf'lammatory papain on tje cellular diapedesis. In acute inflammation caused by intraperitoneal injection of egg albumin in mice. Thi s experimental model is characterized by the early approach of polimorphonuclear (PMN) cells in the peritoneal cavity after the challenge (4 to 8 hours). The results showed more PMN cells in peritoneal cavity of papain treated mice. Thererore, the enzyme. perhaps by a mechanism involving aracdonic acid active metabolits:, estimulated the PMN diapedesis in this experimental model. Papain inhibit antithrombin III activity and activate plasminogen, with consequent increase in the PGE2 levels of the inflammatory focus. This state supply conditions to i ncrease leucocitary diapedesis. After all the results also indicated the e papain absorption by the gastrointestinal tract / Mestrado / Farmacologia / Mestre em Ciências

Orientador: Oslei Paes de Almeida / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-14T20:36:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ferraz_Cid_M.pdf: 1312955 bytes, checksum: 11393b8d8fab3768b6f9c79ffa6c039a (MD5) Previous issue date: 1987 / Resumo: Leucócitos polimorfonucleares (PMN) da cavidade oral de quatro indivíduos foram quantificados durante as 24horas do dia, em intervalos de 30 minutos. Com os participantes acordados, o numero de PMN apresentou pequenas variações nos diferentes períodos do dia. Nas primeiras 3-4 horas, após oito horas de sono, a quantidade de células na boca foi menor do que nos diferentes períodos do dia. Durante o sono, o numero de leucócitos coletados da boca foi praticamente o dobro do que encontrado com os participantes acordados, e paradoxalmente a migração para a boca foi menor. Estes resultados indicam que a migração de leucócitos para a boca, através do epitélio juncional, é influenciada pelo sono / Abstract: Oral polymorphonuclear leukocytes (PMN) four healthy human subjects, with no evidenceof gengival inflammation, were quantified at intervals of 30 minutes 24 hours. When the subjects were awake, the number collected from the mouth showed small variations. During first 3-4 hours, following 8 hours of sleep, the number PMN was smaller than the other periods of the day. During sleep, the number of oral leukocytes was nearly twice the value compared to when the individual was awake, and paradoxically there was a decrease in the migration of PMN from induring of PMN the into the oral cavity. These results suggest that the migration of PMN into the mouth is influenced by slee / Mestrado / Biologia e Patologia Buco-Dental / Mestre em Odontologia

Orientador: Edson Antunes / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-07-23T23:47:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Castro_RogerioCardosode_M.pdf: 3886561 bytes, checksum: c35ba664a45d32de30c0463da101357e (MD5) Previous issue date: 1998 / Resumo: Bothropstoxina-I (BthTX-I) e Bothropstoxina-II (BthTX-II) são sPLAzs homólogas com atividade miotóxica isoladas do veneno de Bothrops jararacussu. A primeira é completamente destituída de atividade enzimática in vitro ao passo que a BthTX-II apresenta atividade fosfolipásica muito baixa. Piratoxina-I (prTX-I) é uma sPLAz homóloga com atividade miotóxica isolada do veneno de Bothrops pirajai. Esta sPLAz também é destituída de atividade enzimática. O objetivo deste estudo foi investigar a atividade edematogênica da PrTX-I em pata e pele de ratos. Também avaliamos a participação do sítio catalítico e do conteúdo de cargas catiônicas presentes nesta sPLAz sobre o aumento de permeabilidade vascular. Em uma segunda etapa, o objetivo foi investigar a capacidade da PrTX-I, BthTX-I e BthTX-II de induzir migração leucocitária comparado com a sPLAz do veneno de Naja naja (atividade enzimática alta) e sPLAz pancreática (atividade enzimática intermediária). O envolvimento de mastócitos na migração leucocitária induzida pelas sPLAz homólogas também foi investigado. O edema de pata foi induzido pela injeção subplantar da PrTX-I na pata posterior esquerda dos animais e o volume da pata foi determinado utilizando um hidropletismômetro. O edema de pele foi determinado pelo acúmulo local de albumina humana marcada com lZ51 administrada por via intravenosa em ratos anestesiados (Sagatal; 30 mglkg,ip.). A degranulação de mastócitos pleurais e peritoneais foi conduzida pela determinação da liberação de [14C]5-HT utilizando um contador. A migração leucocitária foi determinada através da injeção das sPLAzs na cavidade pleural de ratos anestesiados com éter. Os animais foram sacrificados nos intervalos de 6, 12 e 48 h e a cavidade pleural foi lavada com 5 ml de PBS heparinizado (10 UI/ml). A contagem total e diferencial de leucócitos foi avaliada no lavado pleural A PrTX-I promoveu aumento de permeabilidade vascular em pele e pata de rato levando à formação de edema. A atividade edematogênica nos dois locais foi praticamente abolida nos animais pré-tratados com ciproheptadina (2 mglkg, i.p. 0.5 h antes). O p-BPB reduziu acentuadamente o edema induzido pela PrTX-I em pata e pele de ratos. O poliânion heparina reduziu significativamente o edema de pata (50 UI/pata), como também o edema de pele (5 UI/sítio) induzidos pela PrTX-I. Além disso, a PrTX-I (100 Ilglml) causou degranulação de mastócitos pleurais e peritoneais in vitro. O p-BPB e a heparina (50 UI/ml) inibiram significativamente a liberação de [14C]5-HT induzida pela PrTX-I em mastócitos pleurais e peritoneais de rato. Nossos resultados indicam que a formação de edema induzido pela PrTX-I é devido à degranulação in vivo de mastócitos. Uma vez que a PrTX-I não é ativa enzimaticamente sugerimos que a atividade pró-inflamatória das sPLA2s não está, necessariamente, ligada à atividade enzimática destas enzimas. Assim, sugerimos que o efeito da PrTX-I deva ser decorrente de um possível sítio farmacológico que seria formado principalmente por cargas catiônicas distribuídas na molécula da PrTX-I. Além disso, nós sugerimos cautela quanto ao uso do brometo de p-bromofenacil como ferramenta para avaliar o papel da atividade enzimática nos efeitos farmacológicos induzidos pelas sPLA2s. A sPLA2 de Naja naja (10 J.1g/cavidade) e BthTX-II (30 J.1g/cavidade) induziram influxo leucocitário de forma dose e tempo-dependentes caracterizado pela infiltração de neutrófilos e células mononucleares em 6 h. Na pleurisia induzida pela sPLA2 de Naja naja esta migração foi acompanhada por uma migração de eosinófilos em 12 h. Na pleurisia induzida pela BthTX-I e PrTX I (30 J.1g/cavidade cada) o pico de infiltração celular foi em 12 h e formado, tanto por células mononucleares e neutrófilos, como também por eosinófilos. O brometo de p-bromofenacil (P-BPB), um inbidor enzimático das sPLA2s, aboliu a atividade enzimática da sPLA2 de Naja naja e BthTX-II mas não apresentou efeito na pleurisia induzida pela sPLA2 de Naja naja, BthTX-I e Bth'FX-U. Surpreendentemente, o p-BPB reduziu parcialmente a pleurisia induzida pela PrTX-I. O tratamento prévio dos ~mais com ciproheptadina (10 mg/Kg, i.p.) não modificou a pleurisia induzida pela sPLA2 de Naja naja e BthTX-II. A depleção dos estoques de histaminalS-HT por injeções repetidas do composto 48/80 também não alterou a pleurisiã induzida pelas BthTXs e PrTX-I. ossos resultados demonstram que a migração leucocitária induzida pela sPLA2 de Naja naja, Bt}},TX-I, BthTX-II e PrTX-I independe da degranulação de mastócitos pleurais. Além disso, a hidrólise de fosfolipídeos por estas sPLA2s não é essencial para a infiltração leucocitária para cavidade pleural / Abstract: Bothropstoxin I (BthTX-I) and Bothropstoxin 11 (BthTX-II) are sPLAzs homologues with myotoxic activity isolated ITom Bothrops jararacussu venom. The former is devoided of enzymatic activity in egg yolk lecithin whereas the latter has low phospholipase activity in this substrate. Piratoxin-I (PrTX-I) is a PLAz homologue with myotoxic activity isolated ITom Bothrops pirajai venom. This sPLAz is also devoided of enzymatic activity. The aim of this study was to investigate the ability of PrTX-I, BthTX-I and BthTX-II to induce leucocyte migration compared with Naja naja PLAz (known to contain high enzymatic activity) and bovine pancreatic PLAz (known to contain intermediate enzymatic activity). We have also investigate the role of mast cells in the leucocyte migration induced by PrTX-I, BthTX-I and BthTX-II. Leucocyte migration was determined through of the injection of sPLAzs into the pleural cavity of male Wistar rats under ether anaesthesia. The animals were killed at 6, 12 and 48 h later and the pleural cavity rinsed with 5 rnl of PBS containing heparin (20 IU/rnl). Total and differencial leucocyte counts were evaluated in the pleural exudate. Naja naja PLAz (10 ~g/cavity) and BthTX-II (30 ~g/cavity) induced a dose- and time dependent rat pleural leucocyte influx characterized by an early neutrophil and mononuclear cells infiltration (6 h). This migration was followed by a late eosinophil and mononuclear cells influx (12 h) in the Naja naja PLAz- induced pleurisy. BthTX-I and PrTX-I (30 ~g/cavity each) induced dose and time-dependent rat pleural leucocyte influx characterized by an infiltration of neutrophils, eosinophils and mononuclear cells at 12 h. p-Bromophenacyl bromide (P-BPB), a compound known to inhibit phospholipase Az activity, abolished the enzymatic activity of Naja naja PLAz and BthTX11 but it had no effect on the pleurisy induced by Naja naja PLAz, BthTX-I and BthTX-II. Interestingly, p-bromophenacyl partially reduced the PrTX=:I-fuduced pleurisy. Previous treatment of the animals with cyproheptadine (10 mg/kg, i.p.) did not affect the pleurisy induced by Naja naja PLAz and BthTX-II. The depletion ofhistamine and 5-HT stores by repeated injections of compound 48/80 also failed to modify the pleurisy induced by BthTXs and PrTX-1. Qur results demonstrate that pleurisy mediated by Naja naja PLAz, BthTX-I, BthTX-II and PrTX-I is not dependent on pleural mast cell degranulation. Furthermore, hydrolysis of phospholipids by these sPLAzs is not essencial for the pleuralleucocyte infiltration. In the second part of this study the aim was to investigate the ability of PrTX-I to induce local oedema formation in both rat paw and skin in vivo. The importance of their catalytic and cationic sites were evaluated using p-BPB and heparin, respectively. Male Wistar rats were used. Paw oedema was induced by a subplantar injection of PrTX-I into the left hind-paw of animals and paw volume was measured using a hydroplethysmometer. Skin oedema formation was measured as the local accumulation of i.v. injected C25I]-human serum albumin into the skin sites of anaesthetized rats (Sagatal; 30 mglkg, i.p.). In vitro pleural and peritoneal mast cells degranulation was carried out by measuring the released [14C]5-HT using a f3 counter. PrTX-I caused dose-dependent rat paw and skin oedema. These oedematogenic activity were largely reduced in animals pretreated with cyproheptadine (2 mg/Kg, Lp. 0.5 h before). Similarly, pBPB significantly inhibited rat paw and skin oedema induced by PrTX-I. The polyanion heparin significantly reduced the paw oedema (50 IU/paw) as well as the skin oedema (5 IU/site) induced by PrTX-I. In addition, PrTX-I (100 Jlglrnl) caused in vitro pleural and peritoneal mast cells degranulation. p-BPB and heparin (50 IU/rnl) significantly inhibited the C4C]5-HT release induced by PrTX-I in both pleural and peritoneal mast cells. Our results indicate that oedema formation induced by PrTX-I is mostly dependent on in vivo mast cell degranulation. Since heparin reduced the oedematogenic activity of this sPLA2 homologue, it is likely that the cationic charge of this substance plays a role in the mast cell activation. Our results also indicate that p-bromophenacyl bromide may not be a suitable pharmacological tool to investigate th~ correlation between enzymatic activity and the inflammatory effects of phospholipases A2 / Mestrado / Farmacologia / Mestre em Ciências

Orientador: Carlos Alberto Flores / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-07-20T16:02:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Miguel_AnaSilvia_M.pdf: 2857570 bytes, checksum: c8b1ec252d4cc389e686f44476e0f726 (MD5) Previous issue date: 1995 / Resumo: A depressão é conhecida por afetar o desenvolvimento de várias funções fisiológicas, incluindo a do sistema imune. Dos vários modelos experimentais avaliados para se estudar a depressão, o Modelo de Desamparo Aprendido tem sido extensivamente utilizado. o presente trabalho, avaliou-se a influência da depressão experimental e sua prevenção pelo tratamento com Cloreto de Lítio na resposta inflamatória, quantificando-se a migração de células mononucleares e de neutrófilos para a cavidade peritoneal de ratos tratados ou não com LiCI. Ratos Wistar fêmeas (pesando :t200 g) foram divididos em 3 grupos: Grupo 1: estressados (CE), os quais receberam 60 choques escapáveis de 1 mA, com duração determinada pela fuga do animal e intervalos randômicos entre os choques variando de 5 a 25 seg.; Grupo 2: deprimidos (CHI), que receberam choques inescapáveis de mesma intensidade e densidade do grupo 1; Grupo 3: controles (CFD) que não receberam choques. A migração de neutrófilos para a cavidade peritoneal foi avaliada 4 horas após a injeção de Carragenina (150J,1 g/cavidade) ou Lipopolissacarídeo de E. ro/í (100 ng/cavidade). A migração de células mononucleares foi avaliada 96h após a injeção intraperitoneal de Tioglicolato 3% (150 ou 300 mg/cavidade). Os ratos deprimidos tiveram uma significante inibição na migração de leucócitos. Esta inibição pôde ser prevenida pelo pré-tratamento (28 dias, na água de beber) dos ratos com Cloreto de Lítio, usando metodologia que fornece níveis séricos dentro da faixa profilática utilizada na clínica. Sugere-se que a depressão e sua profilaxia, por tratamento com Cloreto de Lítio, estão afetando a liberação de fatores quimiotáxicos, para neutrófilos e para células mononucleares, de células peritoneais residentes / Abstract: Depression is known to affect the development of various physiological functions, including the immune system. Of the various experimental models available for studying depression, the learned heplessness model has been extensively utilized. In the present work, we have examined the influence of experimental depression and its reversal by treatment with LiCI on the inflammatory response. The latter was assessed by quantifying the migration of monocytes and neutrophils into the peritoneal cavity of treated rats. Female Wistar rats (:1:200 9 in weight) were divided into three groups as follows: Group 1 : stressed rats which received 60 escapable 1 mA shocks at a frequency of one shock every 30 s; Group 2 : helpless rats wich had received inescapable shocks of the same intensity and frequency as the Group 1 animais; Group 3 : contrai animais which received no shocks. In ali groups, neutrophil migration into the peritoneal cavity was evaluated 4h afie r the injection of eitheir carrageenin (150 1l9/cavity) or LPS (100ng/cavity) while the migration of monocytes was assessed 96h afie r an i.p. fnjection of 5-10 ml of 3% solution ?f thioglycollate. Only in the helpless rats was there any significant inhibition of leukocyte migration. This inhibition could be prevented by pretreating (28 days) the rats with a 20 mM LiCI in the drinking water. We suggest that the depression and its prophylaxis by LiCI treatment are affecting the release of chemotactic factors for neutrophils and monocytes by peritoneal resident cells / Mestrado / Mestre em Farmacologia

Orientador: Eduardo Dias de Andrade / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-19T06:29:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Martins_DorisAparecidaAntoniodeSouza_D.pdf: 1141217 bytes, checksum: 4277fd9c9507d644a458eae620426674 (MD5) Previous issue date: 1994 / Resumo: Os corticosteróides, assim como os antiinflamatórios não esteróides, são largamente empregados em clínica médica e odontológica, no controle de doenças ou estados inflamatórios. Os mecanismos de ação antiinflamatória desses agentes são múltiplos e altamente complexos. Dentre estes, destacam-se aqueles relacionados à cinética e função dos leucócitos. Em função disto, objetivou-se neste trabalho avaliar os efeitos da betametasona, piroxicam e diclofenaco potássico, na leucodiapedese, induzida experimentalmente na cavidade peritoneal de camundongos. Para tanto, 40 camundongos foram divididos em 4 grupos e, tratados com betametasona (0,1 mg/Kg), piroxicam (0,5mg/Kg) e diclofenaco potássico (2mg/Kg), em dose única. Os animais controle receberam salina. Exatamente uma hora após os tratamentos descritos, a leucodiapedese foi induzi da através da injeção intraperitoneal de um agente quimiotático. Após 5 horas deste procedimento, o fluído peritoneal foi colhido e a contagem global de leucócitos e diferencial para neutrófilos foi efetuada. Os resultados falam a favor de uma redução significante (p<0,05) da migração de leucócitos, quando a betametasona foi empregada. Ao contrário, os AINEs estudados estimularam a leucodiapedese no mesmo modelo de estudo / Abstract: Corticosteroids, like non-steroidal anti-inflammatories are widely employed in medical and odontological practice in the control of inflammatory-conditions or diseases. The anti-inflammatory mechanisms of these agents are multiple and highly complex. Foremost among these are those related to leukoeytes function and kinetics. As a result, the objetive of this work has been to evaluate tha affects of betamethasone, piroxicam and diclofenae potassium in leukodiapedesis, experimentally induced in the peritoneal cavity of mice. For this purpose, 40 mice were divided into 4 groups and treated with betamethasone (0,1 mg/Kg), piroxicam (0,5mg/Kg) and diclofenae potassium (2mg/Kg) in a single dose. The control animais received saline. Exactly one hour after the treatment described, leukodiapedesis was induced through an intraperitoneal injection of a chemotactic agent. After 5 hours the peritoneal fluid was collected and global count of leukocytes and differential for neutrophils performed. . The results speak favourably for a significant reduction (p<O,05) in the migration of these cells when betamethasone was employed. On the other hand, the AINEs studied stimulated the leukoeytes migration in the same study model / Doutorado / Farmacologia / Mestre em Ciências