Orientador: Vera Lucia Gil da Silva Lopes / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-10T12:58:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Simioni_Milena_M.pdf: 1760732 bytes, checksum: daa025a27c5eb01a26a41f7ac8dc50ba (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: Os Defeitos de Linha Média Facial com Hipertelorismo (DLMFH) constituem um grupo de anomalias craniofaciais raras e heterogêneas caracterizado por hipertelorismo ocular e fenda nasal mediana e (ou) lateral. Esses defeitos podem ocorrer isoladamente ou associados a dismorfismos com ou sem padrão definido, motivo pelo qual sua incidência não foi estabelecida até o momento. Dentre os fatores que podem participar da sua gênese encontra-se a perda de controle de genes de desenvolvimento envolvidos no processo de formação facial. A microdeleção 22q11.2, região dos genes HIRA/TUPLE1 e TBX1, causa a Síndrome Velocardiofacial e a Seqüência de DiGeorge. Essa deleção também foi descrita em casos esporádicos de anomalias congênitas múltiplas e DLMFH. Esses fatos, corroborados por extensa revisão da literatura, sugerem que os DLMFH possam fazer parte do espectro dessas condições clínicas e estarem associados a alterações na região 22q11.2. Para estudar essa hipótese, 10 indivíduos com DLMFH foram analisados por meio da técnica de FISH, utilizando a sonda comercial 22q11.2 DiGeorge ¿ HIRA/TUPLE1 locus (VysisTM). Não foi encontrada perda de fragmento cromossômico nessa região em nenhum dos indivíduos analisados. Os genes HIRA/TUPLE1 e TBX1 foram estudados por meio de técnicas moleculares. Não foi possível realizar a padronização da amplificação dos exons do gene HIRA/TUPLE1. Alterações de seqüência no gene TBX1, descritas como polimorfismos de nucleotídeo único e uma alteração inédita no exon 9C, 1132G ? A, foram encontradas. Em vista do tamanho amostral e da heterogeneidade clínica e etiológica, o presente trabalho não pode relacionar o envolvimento da região 22q11.2 na patogenia dos DLMFH / Abstract: Midline Facial Defects with Hipertelorism (MFDH) is a rare and heterogeneous group of craniofacial disorders characterized by ocular hypertelorism and bifid nose. This group of craniofacial defects occurs isolated or as part of a syndrome. For these reasons, its prevalence is still unknown. Alterations in developmental genes involved in facial process could be implicated in the genesis of this condition. The 22q11.2 microdeletion, localization of the HIRA/TUPLE1 and TBX1 genes, causes Velocardiofacial Syndrome and DiGeorge Syndrome. This deletion was also described in few cases of multiple congenital anomalies and MFDH. These facts suggested that some cases of MFDH may be part of the spectrum of these conditions and associated to alterations in the 22q11.2 region. In order to verify this hypothesis, fluorescent in situ hybridization (FISH) for 22q11.2 region (DiGeorge ¿ HIRA/TUPLE1 locus probe, VysisTM) was performed on metaphase chromosomes and nuclei of 10 individuals with MFDH. The 22q11.2 deletion was not found in any patient. Molecular techniques were applied in the study of HIRA/TUPLE1 and TBX1 genes. The amplification of HIRA/TUPLE1 exons was not possible to be realized. Alterations in the sequence of TBX1 gene, classified as single nucleotide polymorphism and a new alteration in exon 9C, 1132G ? A, were found. In view of the size of the sample and the clinical-genetic heterogeneity, we could not associate the involvement of 22q11.2 region in the genesis of MFDH / Mestrado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Ciências Médicas

Objetivos: Investigar possíveis alterações citogenéticas, através da técnica de bandamento de alta resolução, em indivíduos com anomalias craniofaciais associadas ao atraso no desenvolvimento neuropsicomotor e sem diagnóstico clínico-genético definido, com cariótipo (com bandas) prévio normal e estabelecer possível correlação entre o fenótipo dos indivíduos e as regiões cromossômicas alteradas. Local de execução: Laboratório de Citogenética Humana e Serviço de Genética Clínica, HRAC-USP, Bauru-SP. Indivíduos estudados e Resultados: O cariótipo de alta resolução de 16 indivíduos com anomalias craniofaciais associadas ao atraso no desenvolvimento neuropsicomotor pertencentes ao HRAC-USP, Bauru permitiu detectar alterações citogenéticas estruturais em 4 (25%) dos 16 indivíduos. Em 3 indivíduos detectou-se deleções em regiões subteloméricas (cromossomos 4p, 9p e 18q) e, em 1 indivíduo detectou-se adição de segmento cromossômico de origem desconhecida na região telomérica do cromossomo 12p. Conclusões: A frequência alta (25%) de alterações cromossômicas estruturais em regiões cromossômicas terminais (teloméricas e subteloméricas) mostra que a técnica de alta resolução é útil na identificação de alterações nessas regiões, portanto, indivíduos com anomalias craniofaciais e atraso mental, sem diagnóstico genético-clínico definido, cujo cariótipo convencional foi normal, devem ser, submetidos à análise dos cromossomos por meio do cariótipo de alta resolução antes do procedimento de CGHarray. / Objective: To investigate possible cytogenetic abnormalities through high resolution banding technique in individuals with craniofacial anomalies presenting previous normal karyotype, associated to neuropsychological development delay, without clinic-genetic diagnoses, and establish possible correlation between phenotype and possible candidate chromosomal regions. Local: Human Cytogenetic Laboratory and Clinical Genetic Service, HRAC-USP, Bauru, SP. Individuals and Results: High resolution karyotype of 16 individuals with craniofacial anomalies associated to neuropsychological development delay in follow-up at the HRAC-USP, Bauru allowed the detection of structural chromosomal abnormalities in 4 (25%) of them. Three individuals presented deletion in the subtelomeric region (chromosomes 4p, 9p, and 18q), and one individual presented an addition of an unknown chromosomal fragment in the telomeric region of chromosome 12p. Conclusions: The high frequency (25%) of structural chromosomal abnormalities in terminal region (telomeric and subtelomeric) shows that the high resolution technique is useful for identification of structural anomalies in these regions. Therefore, individuals with craniofacial anomalies associated to neuropsychological development delay without a definitive clinic-genetic diagnoses presenting a normal conventional karyotype, should be submitted to chromosomal analysis through high resolution karyotype before CGH-array procedure.

Introdução: A imagem de toda pessoa constitui um direito fundamental resguardado na Constituição Federal, um direito da personalidade, o que possibilita formas específicas de proteger o paciente com anomalia craniofacial, bem como resguardar os direitos dos profissionais responsáveis pela sua reabilitação. Objetivo: O objetivo deste trabalho consiste em verificar o direito constitucional à imagem dos indivíduos com anomalias craniofaciais e sua extensão prática no HRAC/USP. Metodologia: Este estudo prospectivo foi desenvolvido no HRAC/USP após aprovação do Comitê de Ética em Pesquisa em Seres Humanos. Para tanto, foi analisada a legislação que aborda o direito à imagem; as portarias internas da Instituição, com o desiderato de verificar a proteção aos pacientes, bem como os documentos que o HRAC/USP disponibiliza ao paciente na ocasião da inscrição. Resultados e Conclusão: A análise das portarias e demais documentos está apresentada sob a forma descritiva. É possível melhorar o nível de proteção da imagem do paciente com anomalia craniofacial, bem como dos profissionais que lidam com essas imagens, tudo de acordo com o ordenamento jurídico pátrio e os vários Códigos de Ética Profissional. / Introduction: The image of every person is a fundamental right safeguarded by the Federal Constitution, a personality right, which allows specific ways to protect the patient with craniofacial anomalies, as well as protect the rights of the professional who deals with that person daily. Objective: The aim of this study was to check the image constitutional right of individuals with craniofacial anomalies and its practical extension at HRAC/USP. Methods: This prospective study was developed at HRAC/USP after the Ethics Committee in Human Research approval. Therefore legislation that comprises the image right; internal ordinances of the institution, with the desideratum to check the protection of patients as well as the documents that the HRAC/USP provide to the patient at the time of registration were analyzed. Results and Conclusion: The analysis of the ordinances and documents is demonstrated in a descriptive form. The level of the patient with craniofacial anomalies image protection can be improved, as well as of the professionals who deal with these images, all according to the national legal framework and the various Codes of professional Ethics.

Orientador: Hercílio Martelli Júnior / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-18T03:14:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Aquino_SibeleNascimentode_M.pdf: 1254396 bytes, checksum: 23d834d1395b6d0cfe104c6231785589 (MD5) Previous issue date: 2011 / Resumo: Fissuras do lábio e/ou palato (FL/P) representam uma das anomalias congênitas mais comuns em humanos. A etiologia das FL/PNS é complexa e envolve a participação de inúmeros genes e fatores ambientais. Diversos estudos têm investigado genes relacionados a síndromes, que apresentam FL/P em seu espectro clínico, e/ou que são expressos durante o desenvolvimento do lábio e/ou palato. O objetivo deste estudo foi verificar se novos polimorfismos contidos nos genes relacionados ao desenvolvimento do lábio e palato, incluindo TGF?3, MSX1, MYH9 e JAG2, podem contribuir para a etiologia das FL/PNS. Seis regiões polimórficas foram genotipadas por PCR-RFLP (reação em cadeia da polimerase associada à análise de polimorfismo de fragmentos de restrição enzimática) em amostras de DNA proveniente de 367 pacientes com FL/PNS (grupo caso) e de 413 indivíduos não afetados (grupo controle). No grupo caso, 54% foram do gênero masculino e 46% do feminino, com idade média de 19,1 ± 14,9 anos e prevalência de indivíduos feodermas (42,5%) e leucodermas (42%). As fissuras lábio-palatinas (FLP) foram predominantes (54%), seguidas pela fissura labial (FL) (24%) e fissura palatina (FP) (22%). Do total de seis polimorfismos analisados neste estudo, apenas um foi confirmado nessa população: rs1057744 do gene JAG2. Para este locus polimórfico, o alelo A e o genótipo GA foi mais comum, no grupo controle e caso, não sendo encontrada diferença estatística significante. Para esse polimorfismo, a análise em um modo dominante ou recessivo também não mostrou diferenças estatísticas significantes. Assim, demonstrou-se que os polimorfismos rs34019007 e rs4252315, do gene TGF?3, rs62636562, do gene MSX1, rs11549910 e rs11549909, do gene MYH9 não foram confirmados. O polimorfismo rs1057744 do gene JAG2, embora confirmado, não apresentou associação significante com FL/PNS na população avaliada / Abstract: Cleft lip and/or cleft palate (CL/P) is one of the most common congenital anomaly in humans. NSCL/P etiology is complex and involves the participation of numerous genes and environmental factors. Several studies have investigated genes related to syndromes that have CL/P in their clinical and/or which are expressed during the development of lip and palate. The aim of this study was to determine whether polymorphisms contained genes related to the development of lip and/or palate, including TGF?3, MSX1, MYH9 and JAG2 can contribute to the etiology of NSCL/P. Six polymorphic regions were genotyped by PCR-RFLP (restriction fragment length polymorphism-polymerase chain reaction) in DNA samples from 367 patients affected by NSCL/P (experimental group) and 413 clinically normal subjects (control group). In the affected group, 54% were male and 46% female, mean age 19.1 ± 14.9 years and the prevalence of mixed black individuals (42.5%) and Caucasian (42%). The clefts of the lip with or without cleft palate (CLP) were predominant (54%), followed by cleft lip (FL) (24%) and cleft palate FP (22%). Out of 6 probable polymorphisms, only one was confirmed in this population: rs1057744 gene JAG2. For this polymorphic locus, the A allele and the genotype was slightly more common in the contr ol and experimental, without statistically signific ant differences. For this polymorphism , the analysis in a dominant or recessive mode also showed no statistically significant difference s between the group. This study demonstrated that the polymorphisms rs34019007 and rs4252315, present in the gene TGF?3, rs62636562, in the MSX1 gene, rs11549910 and rs11549909, in the MYH9 gene we re not confirmed. The rs1057744 polymorphism in JAG2 gene was confirmed in this study but not significantly associated with NSCL/P in the Brazilian population / Mestrado / Patologia / Mestre em Estomatopatologia

Objetivos: Investigar possíveis alterações citogenéticas, através da técnica de bandamento de alta resolução, em indivíduos com anomalias craniofaciais associadas ao atraso no desenvolvimento neuropsicomotor e sem diagnóstico clínico-genético definido, com cariótipo (com bandas) prévio normal e estabelecer possível correlação entre o fenótipo dos indivíduos e as regiões cromossômicas alteradas. Local de execução: Laboratório de Citogenética Humana e Serviço de Genética Clínica, HRAC-USP, Bauru-SP. Indivíduos estudados e Resultados: O cariótipo de alta resolução de 16 indivíduos com anomalias craniofaciais associadas ao atraso no desenvolvimento neuropsicomotor pertencentes ao HRAC-USP, Bauru permitiu detectar alterações citogenéticas estruturais em 4 (25%) dos 16 indivíduos. Em 3 indivíduos detectou-se deleções em regiões subteloméricas (cromossomos 4p, 9p e 18q) e, em 1 indivíduo detectou-se adição de segmento cromossômico de origem desconhecida na região telomérica do cromossomo 12p. Conclusões: A frequência alta (25%) de alterações cromossômicas estruturais em regiões cromossômicas terminais (teloméricas e subteloméricas) mostra que a técnica de alta resolução é útil na identificação de alterações nessas regiões, portanto, indivíduos com anomalias craniofaciais e atraso mental, sem diagnóstico genético-clínico definido, cujo cariótipo convencional foi normal, devem ser, submetidos à análise dos cromossomos por meio do cariótipo de alta resolução antes do procedimento de CGHarray. / Objective: To investigate possible cytogenetic abnormalities through high resolution banding technique in individuals with craniofacial anomalies presenting previous normal karyotype, associated to neuropsychological development delay, without clinic-genetic diagnoses, and establish possible correlation between phenotype and possible candidate chromosomal regions. Local: Human Cytogenetic Laboratory and Clinical Genetic Service, HRAC-USP, Bauru, SP. Individuals and Results: High resolution karyotype of 16 individuals with craniofacial anomalies associated to neuropsychological development delay in follow-up at the HRAC-USP, Bauru allowed the detection of structural chromosomal abnormalities in 4 (25%) of them. Three individuals presented deletion in the subtelomeric region (chromosomes 4p, 9p, and 18q), and one individual presented an addition of an unknown chromosomal fragment in the telomeric region of chromosome 12p. Conclusions: The high frequency (25%) of structural chromosomal abnormalities in terminal region (telomeric and subtelomeric) shows that the high resolution technique is useful for identification of structural anomalies in these regions. Therefore, individuals with craniofacial anomalies associated to neuropsychological development delay without a definitive clinic-genetic diagnoses presenting a normal conventional karyotype, should be submitted to chromosomal analysis through high resolution karyotype before CGH-array procedure.

Introdução: A imagem de toda pessoa constitui um direito fundamental resguardado na Constituição Federal, um direito da personalidade, o que possibilita formas específicas de proteger o paciente com anomalia craniofacial, bem como resguardar os direitos dos profissionais responsáveis pela sua reabilitação. Objetivo: O objetivo deste trabalho consiste em verificar o direito constitucional à imagem dos indivíduos com anomalias craniofaciais e sua extensão prática no HRAC/USP. Metodologia: Este estudo prospectivo foi desenvolvido no HRAC/USP após aprovação do Comitê de Ética em Pesquisa em Seres Humanos. Para tanto, foi analisada a legislação que aborda o direito à imagem; as portarias internas da Instituição, com o desiderato de verificar a proteção aos pacientes, bem como os documentos que o HRAC/USP disponibiliza ao paciente na ocasião da inscrição. Resultados e Conclusão: A análise das portarias e demais documentos está apresentada sob a forma descritiva. É possível melhorar o nível de proteção da imagem do paciente com anomalia craniofacial, bem como dos profissionais que lidam com essas imagens, tudo de acordo com o ordenamento jurídico pátrio e os vários Códigos de Ética Profissional. / Introduction: The image of every person is a fundamental right safeguarded by the Federal Constitution, a personality right, which allows specific ways to protect the patient with craniofacial anomalies, as well as protect the rights of the professional who deals with that person daily. Objective: The aim of this study was to check the image constitutional right of individuals with craniofacial anomalies and its practical extension at HRAC/USP. Methods: This prospective study was developed at HRAC/USP after the Ethics Committee in Human Research approval. Therefore legislation that comprises the image right; internal ordinances of the institution, with the desideratum to check the protection of patients as well as the documents that the HRAC/USP provide to the patient at the time of registration were analyzed. Results and Conclusion: The analysis of the ordinances and documents is demonstrated in a descriptive form. The level of the patient with craniofacial anomalies image protection can be improved, as well as of the professionals who deal with these images, all according to the national legal framework and the various Codes of professional Ethics.

Introdução: A importância da Língua Inglesa para a ciência é indiscutível e a comunidade científica deve ter o aprendizado desta como base para sua internacionalização. Objetivos: O objetivo deste estudo foi elaborar e avaliar um curso a distância de suporte de escrita científica para a redação de abstracts na Língua Inglesa, na área de Anomalias Craniofaciais. Métodos: O curso foi desenvolvido em um Ambiente Virtual de Aprendizagem (AVA) disponibilizado pela Universidade de São Paulo, por meio do Sistema de gerenciamento de cursos Moodle versão 1.5.2+. O material didático do curso, assim como seus exercícios e textos de fundamentação foram elaborados pela pesquisadora, com base na linguagem técnica - cientifica na área em estudo, a partir de uma análise detalhada da linguagem científica utilizada em teses, dissertações e artigos internacionais, publicados nos principais periódicos internacionais e livros de redação científica na Língua Inglesa. Quarenta alunos e profissionais do Hospital de Reabilitação de Anomalias Craniofaciais participaram do estudo respondendo a um questionário intitulado Ficha de Pesquisa Motivacional (FPM), utilizado para avaliar a motivação dos alunos em realizar o curso antes de se matricularem. Resultados: O curso foi elaborado em quatro tópicos principais, divididos ao longo de quatro semanas. O conteúdo do curso englobava exercícios, textos e dicas sobre os princípios gerais de uma boa redação científica em Inglês, assim como, a aplicação destes princípios. Os resultados indicaram que os alunos ficaram satisfeitos com a forma de apresentação e elaboração do curso em EaD, classificando o mesmo como impressionante. Conclusão: O Curso a distância desenvolvido mostrou ser uma ferramenta motivadora para a realidade profissional da população avaliada. / Introduction: The importance of English for science is unquestionable. The scientific community should learn it as a basis for its internationalization. Aims: The aim of this study was to develop and evaluate a distance learning course in scientific writing support of abstracts on Craniofacial Anomalies. Methods: The course was developed in a Virtual Learning Environment (VLE) provided by the University of São Paulo through the course management system Moodle .5.2+. The teaching material of the course, as well as its exercises and theory were prepared by the researcher based on the technical-scientific area of the study, from a detailed analysis of the scientific language used in thesis, dissertations and international articles, published in major international journals and books on scientific writing in English. Fourty students and professionals of the Hospital for Rehabilitation of Craniofacial Anomalies participated in the study by answering a questionnaire named Ficha de Pesquisa Motivacional (FPM) used to assess students motivation in taking the course before enrolling. Results:The course was designed in four main topics divided into four weeks. The content consisted of exercises, texts and tips on the general principles of good scientific writing in English, as well as the application of these principles. Results indicated that students were satisfied with the presentation and development of the course classifying it as impressive. Conclusion: The distance learning course proved a motivational tool for the professional reality of the assessed population.

Orientador: Paulo Kharmandayan / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-24T15:54:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Basso_RafaeldeCamposFerreira_M.pdf: 2923257 bytes, checksum: a229be9baca0180070629eab5f5e76d1 (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: O tratamento de deformidades no corpo humano, principalmente deformidades ósseas craniofaciais, sejam elas causadas por trauma, infecções, deformidades congênitas ou pós exerese tumorais, continua sendo, nos dias atuais, um grande desafio ao cirurgião. Sabe-se que os enxertos de tecidos autólogos são o padrão ouro para essas reparações, porém, é notável a escassez de áreas doadoras. Nos últimos anos, com o avanço da engenharia de tecidos usando cultura de células semeadas em implantes, tem aumentado vertiginosamente a procura por polímeros biorreabsorvíveis que possam ser considerados ideais para fabricação de moldes, conhecidos cientificamente como scaffolds, carreadores de células capazes de recompor defeitos causados por perdas teciduais. O presente experimento objetiva estudar, experimentalmente, o uso de placas de Poli L Lactide (PLLA) e Poli L Lactide associada à Hidroxiapatita (PLLA + HA), obtidas por rotofiação (rotary jet spinning), como uma possibilidade de oferecer scaffolds de boa qualidade para colaborar com o avanço da engenharia tecidual. Para isso, utilizou-se 30 ratas da raça Wistar, distribuídas em 3 grupos,nas quais foram realizados defeitos críticos na calota craniana. Em seguida foram implantados scaffolds de PLLA e PLLA + HA e comparados com o grupo controle, que não recebeu implante. Os resultados mostraram que nos casos em que apenas foram realizados os defeitos nas calotas cranianas, não ocorreram a cicatrização óssea. Nos casos em que os scaffolds de PLLA e de PLLA + HA foram usados, notou-se rica neovascularização, acompanhada de reação do tipo corpo estranho e presença de osso reativo ao redor dos implantes / Abstract: The treatment of deformities in the human body, especially craniofacial bone deformities, whether caused by trauma, infection, congenital or due to resection tumors, remains, nowadays, a great challenge to the surgeon. It is known that autologous tissue grafts is the gold standard for these repairs, however, it is remarkable the scarcity of donor areas. During the last years, with the improvement of tissue engineering using cell culture growth in implants, has increased dramatically the search for an ideal polymer that can be used as a mold, known as scaffolds, for cell attachment and thus enabling the recomposition of defects caused by tissue loss. The present experiment aims to study experimentally the use of Poly L-Lactide(PLLA) plates and Poly L-Lactide(PLLA) associated with Hydroxyapatite (HA), obtained by Rotary Jet spinning, as a possibility to provide scaffolds with good quality and affordable costs to collaborate with the tissue engineering advancement. For this, were used 30 Wistar rats, distributed into 3 groups, in which critical defects were performed in the skull. Then scaffolds of PLLA and PLLA + HA (groups 2 and 3) were implanted and compared with the control group that didn¿t receive implant (group 1). The results have shown that in cases where only the defects in cranial caps were done, bone healing have not occurred. In cases where the scaffolds of PLLA and PLLA+ HA were used, rich neovascularization was noted, accompanied by foreign body type reaction and presence of reactive bone around the implants / Mestrado / Fisiopatologia Cirúrgica / Mestre em Ciências

Orientador: Vera Lucia Gil da Silva Lopes / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-20T00:02:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Simioni_Milena_D.pdf: 16919327 bytes, checksum: fa845dbc925978762cb44d70536f9ec7 (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: As fendas orofaciais típicas (FOT) são defeitos congênitos prevalentes que possuem múltiplas etiologias. Estudos populacionais apontaram diferentes genes relacionados às FOTs. Entretanto, em muitos casos, a etiologia permanece desconhecida. A investigação individualizada, utilizando em conjunto diferentes ferramentas laboratoriais, é uma abordagem mais complexa que pode contribuir na caracterização etiológica das FOTs. Assim, este estudo teve como objetivo investigar os fatores genéticos envolvidos na etiologia das FOTs em uma casuística composta por 23 indivíduos afetados, incluindo casos sindrômicos e não-sindrômicos, familiais e esporádicos. Participaram do grupo controle 20 indivíduos sem história familial de fenda em três gerações. Todos os indivíduos portadores de FOT foram previamente avaliados por um médico geneticista e por exame de cariótipo em linfócitos, sendo dois casos detectados com aberrações cromossômicas. A análise de alterações no número de cópias de segmentos de DNA (Copy Number Variation, CNVs) por hibridação genômica em arrays (aGH), baseada na comparação com grupo controle, apontou um novo gene de candidato para FOT, o gene TCEB3, e identificou uma duplicação no gene FGFR1. Em um paciente com fenda palatal submucosa e quadro sindrômico, a utilização da técnica de aGH, em conjunto à hibridação in situ fluorescente (FISH) e Multiplex Ligationdependent Probe Amplification (MLPA), possibilitou a caracterização da aberração cromossômica detectada pelo cariótipo. Em todos os portadores de FOT também foi realizado sequenciamento direto dos genes IRF6, FOXE1, GLI2, MSX2, SKI, SATB2, SPRY1, MSX1, FGF8, FGFR1; em um paciente específico, foi avaliado o gene P63. Alterações de sequencia inéditas foram encontradas nos genes FOXE1, MSX1, GLI2 e FGF8, assim como uma inserção no gene P63, cujos efeitos na proteína codificada deverão ser confirmados em estudos futuros. Os resultados deste trabalho exemplificam a diversidade de fatores genéticos envolvidos na etiologia das FOTs e o desenho de estudo utilizado mostrou a eficácia do uso concomitante de diferentes abordagens investigativas neste grupo de defeitos congênitos / Abstract: Typical oral cleft (TOC) is a prevalent and heterogeneous group of congenital defects with multiple etiologies, which remain unknown in several cases. Population studies detected several genes related to TOC. An individualized investigation, involving different laboratorial tools at same time, is an approach that can contribute on the etiological characterization of the TOC. The aim of this study was to investigate genetic factors involved on TOC in a sample composed by 23 individuals (syndromic and non-syndromic; familial and sporadic cases). The control group included 20 individuals without TOC in three generations. All patients were previously evaluated by clinical geneticists and performed karyotype test that showed chromosomal aberrations in two cases. Copy number variation (CNV) investigation by genomic hibridization in arrays (aGH), based in a comparative to control group data, detected a new candidate gene to TOC (TCEB3), and identified a duplication affecting FGFR1 gene. In one patient with syndromic form of submucous cleft palate, the use of aGH technique, together with Fluorescent in situ hibridization (FISH) and Multiplex ligation-dependent probe amplification (MLPA), characterized the chromosomal aberration previously detected by karyotype. Direct sequencing of IRF6, FOXE1, GLI2, MSX2, SKI, SATB2, SPRY1, MSX1, FGF8 and FGFR1 genes was performed in all individuals; in a specific case, P63 gene was investigated. New sequence alterations were found in FOXE1, MSX1, GLI2 e FGF8 genes, as well as an insertion in P63 gene, which effects will be verified in futures studies. In conclusion, results here described reflect the diversity of genetic factors involved in the etiology of TOC and the type of study show the efficiency of the use of different techniques in the etiological investigation of this congenital defect / Doutorado / Ciencias Biomedicas / Doutor em Ciências Médicas

Orientadores: Paulo Kharmandayan, Ivan Felizardo Contrera Toro / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-26T14:18:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Calderoni_DaviReis_D.pdf: 2411163 bytes, checksum: f124b9aeaf19c6f4e86c382fef12ffeb (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: Introdução: A reparação de um defeito craniano é um procedimento desafiador, que requer não somente o preenchimento da falha óssea mas também estabilidade a longo prazo do material empregado e restabelecimento do contorno e simetria. Diversos tipos de materiais com diferentes características bem como diferentes métodos de produção dos implantes vêm sendo testados, sem que ainda haja um substituto ósseo considerado ideal. No presente estudo foram investigadas as propriedades de osteointegração de implantes da liga Ti6Al4V construídos por prototipagem com poros tridimensionalmente conectados considerando a influência do recobrimento dos mesmos com uma camada delgada de ?-fosfato tricálcico nestas propriedades. Método: Trinta ratos foram submetidos à criação de defeitos ósseos bilaterais na calvária, que foram preenchidos com implantes, recobertos ou não com ?-fosfato tricálcico, de modo aleatório. Os animais foram distribuídos em grupos e sacrificados 15, 45 e 90 dias após o procedimento. A integração dos implantes foi inicialmente avaliada por ensaio de compressão. A interface osso-implante foi analisada por meio de microscopia eletrônica de varredura. Resultados: A força máxima para produzir o deslocamento inicial dos implantes foi aumentando durante o período estudado, alcançando valores da ordem de 100N para ambos os tipos de implante. Foi observada integração entre o osso e a superfície dos implantes, com crescimento ósseo progressivo no interior dos poros. Não foram observadas diferenças significativas entre implantes recobertos e não recobertos por ?-fosfato tricálcico. Conclusão: Foi alcançada uma adequada osteointegração nas reconstruções cranianas utilizando implantes prototipados da liga Ti6Al4V com as características de porosidade e superfície descritas, sem influência do recobrimento cerâmico adotado. Os resultados sugerem que as características de construção utilizadas podem ser incorporadas aos implantes para reconstrução craniana para melhorar os resultados cirúrgicos / Abstract: Background: The repair of a calvarial defect is a challenging procedure, requiring not only filling of the bone gap but long term stability of the employed material and satisfactory contour and symmetry. Several types of materials with different characteristics have been studied, as well as various methods of implant production. However, to date no ideal bone substitute has been found. The osseointegration properties of porous prototyped implants with tridimensionally interconnected pores made of the Ti6Al4V alloy and the influence of a thin layer of calcium phosphate coating were investigated. Methods: Bilateral critical size calvarial defects were produced in thirty rats and filled with coated and uncoated implants in a randomized fashion. The animals were distributed in groups and kept for 15, 45 and 90 days before sacrifice. Implant mechanical integration to bone was evaluated with a push-out test. Bone-implant interface was analyzed using scanning electron microscopy. Results: The maximum force to produce initial displacement of the implants increased during the study period, reaching values around 100N for both types of implants. Intimate contact between bone and implant surface was present, with progressive bone growth into the pores. No significant differences were seen between coated and uncoated implants. Conclusion: Adequate osseointegration can be achieved in calvarial reconstructions using prototyped Ti6Al4V scaffolds with the described physical characteristics of surface and porosity. The results suggest that the proposed implant design characteristics can be incorporated into calvarial implants to improve reconstructive results. / Doutorado / Fisiopatologia Cirúrgica / Doutor em Ciências