Submitted by Isaac Francisco de Souza Dias (isaac.souzadias@ufpe.br) on 2016-07-05T17:34:23Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) KATHARINA MARQUES DINIZ_PPGBI 2016.1.pdf: 1206691 bytes, checksum: d4698af7702f5f5f20193cef85026be8 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-05T17:34:23Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) KATHARINA MARQUES DINIZ_PPGBI 2016.1.pdf: 1206691 bytes, checksum: d4698af7702f5f5f20193cef85026be8 (MD5) Previous issue date: 2016-03-25 / CAPES / A Resistência bacteriana aos antibióticos é considerada um alarmante problema de saúde pública. Visando o controle dessa situação a Organização Mundial de Saúde preconiza o uso consciente e controlado dos antibióticos. Além disso, a fim de combater cepas bacterianas resistentes é preciso que novos agentes biocidas sejam pesquisados e avaliados quanto a sua atividade antibacteriana. O óleo essencial de Melaleuca alternitifolia ou tea trea oil (TTO) apresenta propriedades biológicas, como atividade antimicrobiana, anti-inflamatória e antiparasitária. O TTO é constituído por monoterpenos e alguns álcoois e cetonos, que podem desencadear reações irritantes. Dessa forma, estudos têm sido realizados a fim de incorporar o TTO a materiais que possam diminuir os efeitos adversos do óleo. Quitosana é um biopolímero atóxico, biodegradável, com atividade antimicrobiana de amplo espectro e que apresenta a capacidade de reduzir a toxicidade de certas substâncias quando associada às mesmas. Neste contexto, o presente estudo objetivou realizar a prospecção da atividade antimicrobiana e citotóxica do gel de quitosana associado ao TTO. As quitosana de alto e de baixo peso molar (QAB) adquiridas da Sigma® foram misturadas nas proporções de 1:1 e diluídas em ácido acético 1% para obtenção de uma solução a 10mg/mL do polímero. A quitosanas obtida foi caracterizada quanto suas características estruturais, grau de desacetilação e peso molar, respectivamente, pelas técnicas de espectrofotometria de infravermelho, ressonância magnetca nuclear de hidrogênio e viscosidade. A quitosana apresentou grupos funcionais característicos do polímero, grau de desacetilação de 80,66% e peso molar de 6,03 x 104g/mol. O TTO foi adquirido da Ferquima®, que disponibilizou sua composição química, tendo como compostos predominantes terpineno-4-Ol e gamma-terpineno. A atividade antimicrobiana da QAB, do TTO e da associação QAB+TTO foi determinada através da técnica de microdiluição, obtendo-se as Concentrações Inibitória Mínima (CIM) e Concentração Bactericia Mínima (CBM), frente as cepas de Staphylococcus aureus e Escherichia coli. Os valores encontrados para CIM e CBM para S.aureus foram, respectivamente, de 4mg/mL para QAB, 13,5mg/mL para TTO e 3mg/mL/13,5mg/mL e de 2mg/mL/9mg/mL para associação QAB+TTO. Em cepas E.coli os resultados de CIM e CBM foram, respectivamente, de 2mg/mL e 4 mg/mL para QAB, 22,5mg/mL e 9mg/mL para TTO e de 1,5mg/mL/6,75mg/mL e 3mg/mL/13,5mg/mL para associação QAB+TTO. A análise para presença de sinergismo entre TTO e QAB foi realizada por planejamento fatorial 22 usando concentrações sub-CIM de ambas as drogas. Verificou-se que a associação foi classificada como indiferente. O potencial irritante das susbtâncias testes foi determinado através do teste da Membrana Corioalontoide do ovo de galinha (HET-CAM) fecundado e incubado por um período de 9-10 dias. Para determinar o grau de irritabilidade pelo HET-CAM, foram observadas a presença de lise, coagulação e hemorragia, até 5 minutos após a exposição às substâncias testes. O TTO1% apresentou-se altamente irritante, enquanto a QAB e a associação TTO/QAB não foram irritantes. Com isso pode-se concluir que mesmo não apresentando sinergismo entre os compostos a quitosana apresentou um importante efeito sobre o TTO, reduzindo o índice de irritabilidade assim como a concentração de TTO necessária para apresentar atividade bactericida frente aos microorganismos testes. / Bacterial resistance to antibiotics is considered an alarming public health problem. For the control of situation the World Health Organization recommends the conscious and controlled use of antibiotics. However, in order to fight resistant bacterial strains is necessary that the new biocidal agents are researched and evaluated for their antibacterial activity. The essential oil of Melaleuca alternifolia or tea tree oil (TTO) has biological properties such as antimicrobial, anti-inflammatory and anti-parasitic. The TTO is composed of monoterpenes and some alcohols and cetonos, which can cause irritating reactions. Therefore, many studies are being performed to incorporate TTO to other materials to diminish its adverse effects. Chitosan is a polymer nontoxic, biodegradable, with a broad spectrum antimicrobial activity, which has the ability to reduce the toxicity of certain substances when associated therewith. The present work aimed to prospect the anti-microbial activity and cytotoxicity from the chitosan gel associtated with TTO. The chitosan high and low molecular weight (CHL), purchased from Sigma®, were mixed 1: 1 and diluted in 1% acetic acid to obtain a solution of 10mg / ml of polymer. The chitosan obtained was characterized about the structural characteristics, deacetylation degree and molecular weight, respectively, by techniques of IR spectrophotometry, nuclear magnetic resonance of hydrogen and viscosity. A quitosana apresentou grupos funcionais característicos do polímero, grau de desacetilação de 80,66% e peso molar de 6,03 x 104g/mol. Essential oil of Melaleuca alternifolia (TTO) was purchased from Ferquima®, which released its chemical composition, which had as terpinene-4-ol and gamma-terpinene as predominant compounds. The antimicrobial activity of the CHL, the TTO and CHL + TTO association was determined by the microdilution technique, obtaining the Minimum Inhibitory Concentrations (MIC) and Minimum Bactericia (MBC) against Staphylococcus aureus and Escherichia coli. The values for MIC and MBC for S. aureus were, respectively, 4mg/mL for CHL, 13,5mg/mL for TTO and 3mg/mL/13,5mg/mL and 2mg/mL/9mg/mL for association CHL+ TTO. In E.coli strains the MIC and MBC results were, respectively, 2mg/mL and 4mg/mL for CHL, 22,5mg/mL and 9 mg/mL for TTO and 1.5mg/mL/6,75mg/mL and 3mg/mL/13,5mg/mL for CHL + TTO association. The analysis to measure the synergy between TTO and QAB was performed by factorial analysis using the sub-MIC concentrations for either drug and the association of drugs was classified as indifferent. It was also examined the cytotoxicity of the drugs by Hen's Egg Test – Chorioallantoic Membrane (HET-CAM) fertilized and incubated for a period of 9-10 days. To determine the degree of irritability by the HET-CAM were observed the presence of lysis, coagulation and bleeding, up to 5 minutes after exposure to the test substances. TTO 1% showed the highest degree of irritation, while CHL and the association of the compounds were considered non-irritating. Thus, although no synergy was observed between the compounds, the chitosan showed an important effect over the TTO by reducing the irritability rate as well as the final concentration of TTO needed to induce anti-bacterial activity against the tested microorganisms.

Orientador: Antonia Teresinha Tresoldi / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-22T12:24:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pereira_RicardoMendes_M.pdf: 1520175 bytes, checksum: b72623f1efee2f0c6215da3dd73cbd69 (MD5) Previous issue date: 1996 / Resumo: A hemocultura é o melhor método para o diagnóstico de bacteremia ou fungemia. É conhecido que vários fatores podem interferir no resultado deste exame, desde o tipo de bacteremia, passando pela coleta do sangue até o processamento da amostra no laboratório. O objetivo deste trabalho é o de analisar fatores que podem interferir no resultado de hemocultura em uma população pediátrica, visto a existência de poucos relatos de padronização de hemocultura em Pediatria. Durante três meses 100 amostras de hemocultura foram analisadas em relação ao local e modo de coleta, idade dos pacientes, diagnóstico clínico, tipo de anti-séptico utilizado, uso prévio de antibiótico e volume de sangue coletado por amostra. A positividade das amostras teve relação com a idade dos pacientes. A taxa de contaminação em relação ao numero total de amostras e em relação ao número de amostras positivas foi de 5% e 19%, respectivamente. Todas as amostras falso-positivas foram colhidas em menores de um ano de idade. A hemocultura diagnosticou bacteremia por agentes multi-resistente mesmo nos pacientes que faziam uso de antibiótico. Devido a importância da hemocultura e o conhecimento de fatores que interferem no resultado, deve-se realizar uma análise crítica em relação a indicação e coleta do exame para evitar iatrogenias para os pacientes / Abstract: Blood culture is the best method for diagnosing bacteremia or fungemia. It is known that many factors can interfere with the results of this exam, fram the type of bacteremia, passing thraugh the blood collection, until pracessing the specimen at the laboratory. The goal of this work is to analyze factors that can interfere with the results of blood culture in a pediatric population, because there is few works done on systematization of blood culture procedures in Pediatrics. During three months, 100 blood specimens were analyzed for way and of collecting the samples, age of the subjects, clinical diagnosis, type of anti-septic substance used, the prior use of antibiotic and total volume collected for each sample. Samples positivity were related to the age of the subjects. The contamination rate related to the total number of the samples and to the number of positive samples was 5% and 19%, respectively. All false-positive specimens were collected fram children under 1 year of age. Blood culture diagnosed bacteremia caused by multi-resistant agents even in the patients that site were in use of antibiotic. Because the importance of the blood culture and the knowledge of factors that can interfere with its results, one should have a critica! analysis of its indications and of the manner ofthe blood collection in order to avoid iatragenies to the patients / Mestrado / Mestre em Pediatria

Orientador: Gun Birgitta Bergsten-Mendes / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-02T02:00:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Fonseca_MarciaReginaCamposCostada_D.pdf: 24742689 bytes, checksum: 2ec3365dc8ab47c78b858fd9ec8277bc (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: Este estudo consta de duas partes, sendo que a primeira refere-se a um estudo prospectivo com o objetivo de descrever o padrão e a adequação do uso de antibióticos e a segunda, a um estudo caso-controle (razão: 1:4), com o objetivo de analisar os fatores de risco para infecção hospitalar. Ambas foram desenvolvidas nas enfermarias do Hospital das Clínicas da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP) durante o ano de 2000. Durante o período de um mês, todos os pacientes das enfermarias incluídas no estudo foram acompanhados,desde sua internação até a saída. Foram coletados dados de: características demográficas, diagnósticos de internação, intervenções cirúrgicas, exames laboratoriais, exposição a antibióticos, incluindo indicação, dose, esquema, duração e exposições a fatores de risco para infecção hospitalar. Umtotal de 938 pacientes foi avaliado (385 de enfermarias clínicas e 553 de enfermarias cirúrgicas). Destes, 570 (60,8%) utilizaram 989 antibióticos, sendo encontrados 38 diferentes agentes antimicrobianos nas prescrições. A média de uso de antibióticos foi de 1,74, sendo que 7,5% utilizaram quatro ou mais (0-10). Profilaxia cirúrgica e doenças do aparelho respiratório foram as principais indicações para o uso de antibióticos, sendo a cefazolina (40,4%) o fármaco mais utilizado pelos pacientes do estudo. Nas enfermarias clínicas o uso de antibióticos foi considerado adequado em 67,2% dos casos e nas enfermarias cirúrgicas, somente em 38,8%. A principal inadequação encontrada nas enfermarias cirúrgicas foi a falta de indicação (24,8%) e a duração excessiva da antibiótico-profilaxia (31,6%). Durante o período do estudo foram registrados 48 pacientes com infecção hospitalar (casos incidentes). Cinqüenta e seis infecções hospitalares foram registradas nestes 48 pacientes, sendo os sítios mais freqüentes: infecção da corrente sanguínea (26,8%), do trato urinário (21,4%), do sítio cirúrgico (19,6%) e do trato respiratório (19,6%). Microorganismos foram isolados em 71,4% das infecções, sendo Staphylococcus aureus (31,1%) e Pseudomonas aeruginosa (15,6%) os mais freqüentes. Cateterização urinária (OR:5,95; IC95%: 2,27-15,60), transfusão sanguínea (OR:4,15; IC95%:1,20-14,31), cirurgia de urgência (OR:3,70; IC95%: 1,40-9,77), cateterização vascular periférica (OR: 3,11; IC95%: 1,30-7,47)e central (OR:2,86; IC95%: 1,19-6,87) foram os fatores de risco independentes para infecção hospitalar. Pesquisas identificando o perfil do uso de antimicrobianos, bem como os fatores de risco para infecção hospitalar são importantes na medida em que oferecem subsídios para programas de intervenção e educação continuada para profissionais de saúde, visando melhorar o prognóstico do paciente, bem como a qualidade da assistência prestada a esta população / Abstract: This study consisted of two parts. The first part was a prospective study aimed at describing the pattern and adequacy of antibiotic use. The second was a case-control study (ratio: 1:4), aimed at analyzing risk factors for nosocomial infections. Both these studies were carried out in the wards of the Clinical Hospital of the State University of Campinas (UNICAMP) in the year 2000. During one month, all patients from wards induded in the study were followed up from their time of admission to hospital discharge. Data collected were: demographic characteristics, diagnoses at time of hospital admission, surgical interventions, laboratory evaluation, exposure to antibiotics, including indication, dose, administration, duration and exposure to risk factors for hospital-acquired infections. A total of 938 patients were evaluated (385 from dinical and 553 from surgical wards). Of these, 570 (60.8%) were given 989 antibiotics and 38 ditferent antimicrobial drugs were found in these prescriptions. Mean antibiotic use was 1.74 and 7.5% of the patients used 4 or more antibiotics (0-10). Surgical prophylaxis and respiratory tract disorders were the main indications for antibiotic use, cefazolin (40.4%) being the bactericidal drug most used by patients in this study. In clínical wards, antibiotic use was considered adequate in 67.2% of the cases. In surgical wards, this occurred in only 38.8% of the cases. The main inadequacy found in surgical wards was lack of antibiotic indication (24.8%) and prolonged antibíoticprophylaxis (31.6%). Duríng the study period, 48 patients were registered with nosocomial infections (incident cases). Fifty-six (56) nosocomial infections were registered in these 48 patients, the most frequent anatomic sítes of infection being the bloodstream (26.8%), urinary tract (21.4%), surgical wounds (19.6%) and respiratory tract (19.6%). Microorganisms were isolated in 71.4% of the infections, Staphylococcus aureus (31.1%) and Pseudomonas aeruginosa (15.6%) being the most frequent organisms found. Indwelling urethral catheters (aR: 5.95; CI95%: 2.27-15.60), blood transfusions (aR: 4.15; CI95%: 1.20-14.31), emergency surgery (aR: 3.70; CI95%: 1.40-9.77), peripheral vascular catheter placements (aR: 3.11; CI95%: 1.30-7.47)and central vascular catheter placements (aR: 2.86; CI95%: 1.19-6.87) were the independent risk factors for nosocomial infections. Research identifying the profile of antimicrobial use and the risk factors for nosocomial infections is important in helping interventional programs and promoting continuing education for health professionals. Thus the aim would be to improve patient prognosis as well as the provision of health care to this population / Doutorado / Ciencias Biomedicas / Doutor em Ciências Médicas

Orientador : Brenda Paula Figueiredo de Almeida Gomes / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-02T20:00:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Jacinto_RogeriodeCastilho_M.pdf: 4731181 bytes, checksum: cbedbdceb1b92740d564848eca283e16 (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: O objetivo deste estudo foi analisar a microbiota de canais radiculares infectados e com lesão periapical de dentes sintomáticos e assintomáticos; correlacionar a presença de bactérias específicas com a sintomatologia endodôntica e investigar a suscetibilidade antimicrobiana de bactérias anaeróbias Gram-negativas isoladas dos canais de dentes sintomáticos com lesão periapical contra 8 antibióticos usando o E-test. Amostras microbiológicas foram coletadas de 48 canais radiculares com polpa necrosada, 29 com dor espontânea e 19 sem dor espontânea no momento da coleta, usando técnicas microbiológicas adequadas. Um total de 218 isolados clínicos foi encontrado, os quais pertenciam a 48 diferentes espécies e 19 diferentes gêneros. Canais radiculares de dentes sintomáticos apresentaram uma predominância de anaeróbios estritos e um número maior de espécies por canal radicular em relação aos dentes assintomáticos. Mais de 70% do total das bactérias isoladas eram anaeróbias estritas. Análise estatística foi feita através dos testes X2 de Person ou de Fisher. Associações foram encontradas entre grupos microbianos específicos, principalmente anaeróbios Gram-negativos e a presença de dor espontânea ou dor prévia, dor à percussão, dor à palpação e edema. Amoxicilina, amoxicilina + ácido c1avulânico e cefac1or foram efetivos contra todas as cepas testadas. A menor taxa de suscetibilidade foi apresentada por Prevotella intermedia/nigrescens contra penicilina G. Nossos resultados sugerem que bactérias específicas estão associadas aos sinais e sintomas endodônticos de dentes com canais contaminados e lesão periapical e que, a maioria das espécies Gram-negativas testadas foram sensíveis aos antibióticos estudados / Abstract: The aim of this study was to analyse the microflora isolated ITom infected root canals of symptomatic or asymptomatic teeth, to correlate the presence of specific bacteria with endodontic symptomatology and to investigate the antibiotic susceptibility of the anaerobic Gram-negative bacteria isolated ITom symptomatic teeth with periapicallesions against 8 antibiotics through the E-test. Microbial samples were taken ITom root canals of 48 teeth with necrotic dental pulp, 29 symptomatic and 19 asymptomatic, using adequate techniques. A total of 218 cultivable isolates were recovered ITom 48 different microbial species and 19 different genera. Root canals ITom symptomatic teeth harboured more obligate anaerobes and a bigger number of bacterial species than the asymptomatic teeth. More than 70% ofthe total bacterial isolates were strict anaerobes. Statistical analysis used a Pearson r test or a one-sided Fisher' s Exact test, as appropriate. Relationships were found between specific microorganisms, especially Gram-negative anaerobes and the presence of pain or histol)' ofpain, tendemess to percussion, pain to palpation and swelling. Amoxicillin, amoxicillin + clavulanate and cephaclor were efIective against all the strains tested. The lowest susceptibility rate was presented by Prevotella intermedia/nigrescens against penicillin G. Our results suggested that specific bacteria are associated with endodontic symptoms of infected teeth and the majority of the Gram-negative bacterial species tested were susceptible to all antibiotics studied. / Mestrado / Endodontia / Mestre em Clínica Odontológica

Está presente investigación tuvo como objetivo medir el nivel de conocimiento en cuanto a la prescripción de antibióticos por parte de los cirujanos dentistas docentes de la Universidad Católica Santo Toribio de Mogrovejo-Lambayeque-Perú, 2017. El diseño del estudio fue de tipo descriptivo, prospectivo y de corte transversal. La población de estudio estuvo constituida por todos los cirujanos dentistas docentes de la Universidad Católica Santo Toribio de Mogrovejo (USAT)-Lambayeque. El instrumento para la evaluación de las variables fue un cuestionario con la técnica de encuesta auto administrada, referido de un estudio similar previo realizado con una población distinta, El análisis de datos se realizó en el software estadístico SPSS versión 20. Se usó estadística descriptiva para la presentación de las variables y covariables por medio de gráficos y tablas. Los resultados respecto al nivel de conocimiento por parte de los cirujanos dentistas docentes de la Universidad Católica Santo Toribio de Mogrovejo fueron un 44.1% (15 cirujanos dentistas) con un BUEN nivel de conocimiento, y un 55.9% (19 cirujanos dentistas) con un REGULAR nivel de conocimiento. Concluyendo que el nivel de conocimiento, por parte de los individuos participantes, es insuficiente. / Tesis

Orientador: Gil Eduardo Serra / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-23T22:32:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Andrietta_MariadaGracaStupiello_D.pdf: 4521244 bytes, checksum: 4888bd9055f2da9976f68ec3bac3eafd (MD5) Previous issue date: 1998 / Resumo: Este trabalho teve como objetivo estudar um meio de cultivo industrial para produção de cefalosporina C, utilizando a linhagem C-1 O de Cephalosporium acremonium (A TCC 11550) em experimentos conduzidos em frascos agitados. Foram testadas diferentes fontes de proteína padronizadas, de uso indicado para fermentações industriais, fornecidas pela QUEST INTERNACIONAL - Divisão SHEFFIELD, constituídas à base de soja (Hy-Soy), lacto albumina (Edamin'S), caseína (N-Z Amine A e N-Z Amine As), milho (Hydrolyse Com Gluten ) e algodão (Hydrolyse Cottonseed). As fontes protéicas foram adicionadas a um meio basal, em quantidade equivalente a 4g/1 de nitrogênio total. O meio de cultivo que apresentou uma maior produção de cefalosporina C ( 0,63 gll) foi formulado à base de soja, sendo o meio à base de caseína (N-Z Amine A) o que apresentou uma menor produção do antibiótico. A partir disto foi feito um estudo de cinética da produção de cefalosporina C com esses dois meios de cultivo. Os resultados confirmaram a soja como melhor substrato para produção do antibiótico e mostraram também, ser esta a matéria prima mais produtiva, uma vez que com 144 horas de fermentação houve a produção de 0,93 gll de cefalosporina C. A caseína precisou de 192 horas de fermentação para produzir apenas 0,64 gll do antibiótico. Para os dois substratos testados foi verificada ainda a degradação do antibiótico após o pico de máxima produção. Em uma segunda etapa do trabalho foi avaliada a associação de fontes protéicas na formulação do meio de cultivo. Além de Hy-Soy e Edamin'S, que foram as que apresentaram os melhores resultados na primeira fase, foi introduzido um extrato protéico padronizado, à base de soja (Samprosoy), que é produzido no Brasil pela SANTISTA ALIMENTOS divisão SAMBRA. Neste experimento foram formulados sete diferentes meios de cultivo contendo 4 g/l de N total. Os resultados mostraram um sinergismo na associação de Samprosoy, Hy-Soy e Edamin'S, com uma maior produção do antibiótico (1,43 g/l em 144 horas). Esta composição foi utilizada como ponto central (36 g/l de saca rose, 27 gI1 de glicose e 4 g/l de N total) na primeira fase da otimização do meio de cultivo utilizando planejamento fatorial completo de dois níveis e três variáveis. As variáveis estudadas foram a concentração de sacarose, glicose e nitrogênio, e a variável resposta foi a concentração de cefalosporina C no caldo fermentado. Os resultados obtidos mostraram que maiores concentrações de glicose e nitrogênio levam a um aumento na produção do antibiótico, sendo a variação da concentração de sacarose não significativa na produção da cefalosporina C. Em uma segunda fase da otimização do meio de cultivo o ponto central foi deslocado de modo que esse meio apresentasse maiores concentrações de glicose e nitrogênio (37 g/l de glicose e 6 g/l de N total) e menor quantidade de sacarose (26 g/l). Confirmou-se que altas concentrações de glicose (acima de 45 g/l) e nitrogênio (acima de 6 g/l) direcionam a um aumento na produção, e que a concentração de sacarose não influencia no aumento da produção do antibiótico. Em uma última etapa foi conduzida uma fermentação simultânea em fermentador e em frascos agitados para o estudo do efeito da aeração na produção de cefalosporina C. Parte do meio preparado e inoculado no fermentador foi transferido para frascos Erlenmayer. Os resultados mostram que no fermentador a quantidade de cefalosporina C produzida foi 2,82 vezes maior que as obtidas em frascos agitados. A diferença certamente está associada ao nível constante da concentração de oxigênio no meio de fermentação, possível de se controlar no fermentador, mas não em frascos agitados. / Abstract: The purpose of this work was to study an industrial growing medium for cephalosporin C production in a shaker, using the C-1 O strain of Cephalosporuium acremonium (A TCC 11550). Different sources of standard protein have been tested, all of which recommended for industrial fermentation, and provided by QUEST INTERNACIONAL¬SHEFFIELD Division, soy-based (Hy Soy), Lactoalbumin (Edamin'S), casein (N-Z Amine and N_Z Anime A), com (Hidrolyse Com Gluten) and cotton (Hydrolyse Cottonseed). The protein sources were added to a basic medium amounting to 4 g/l of the total nitrogen. The growing medium that reached the highest cephalosporin C production (0.63 g/l) was soy-based, and the medium that had the lowest amount of the antibiotic was the casein-based (N-Z Amine A). These two growing mediums were then used for a kinetic study of cephalosporin C production. The results have confirmed soybean as the best substratum for the antibiotic production as well as the most productive raw material, since there was a 0.93 g/l cephalosporin C production within 144 hours of fermentation. The casein took 192 hours of fermentation to produce only 0.64 g/l of the antibiotic. It has been observed for both substrata that there was a degradation of the antibiotic after the maximum production peak was reached. In the second stage of the trial, the association of protein sources in the growing medium formulation was evaluated. In the addition to Hy-Soy and Edamin'S, proteins that presented the best results in the first stage, a standard soy-based proteinic extract (Samprosoy) produced in Brazil by SANTISTA ALIMENTOS - SAMBRA division was introduced. Seven different growing mediums containing 4 g/l of total N were formulated. The results have showed a synergism in the association among Samprosoy, Hy-Soyand Edamin'S, with a higher antibiotic production (1,43 g/l within 144 hours). This composition was used as a central point (36 g/l sucrose, 27 g/l glucose and 4 g/l of total N) at the first optimization stage of growing medium a complete two-Level and three-variable factorial design. The variable studied was the sucrose, glucose and nitrogen concentration, and the response variable was the cephalosporin C concentration in the fermented broth. The results have shown that higher glucose and nitrogen concentration have led to an increase in the antibiotic production, even though the variation in sucrose concentration was insignificant for cephalosporin C production. In the second stage of growing medium optimization the central point was dislocated in order to present higher glucose and nitrogen concentrations (37 g/l of glucose and 6 g/l of N total) and lower sucrose concentration (26 g/l). It has been confirmed that high glucose (over 45 g/l) and nitrogen (over 6 g/l) concentration result in an increase in the production, and that sucrose concentration has no effect in the increase of antibiotic production. In the last stage, a simultaneous fermentation in a fermenter and in a shaker was performed for the purpose of studying the aeration effect in cephalosporin C production. Part of the medium prepared and inoculated in the fermenter was transferred to Erlenmeyer flasks. The results have shown that in the fermenter, the amount of cephalosporin C produced was 2.82 times higher than in the shaker. The difference is surely associated with the constant oxygen concentration level in the fermentation medium, which was possible to the controlled in the fermenter but not in the shaker. / Doutorado / Doutor em Tecnologia de Alimentos

Submitted by Pedro Barros (pedro.silvabarros@ufpe.br) on 2018-09-21T21:52:38Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Camila Beatriz Atanásio Borba.pdf: 1215389 bytes, checksum: 2c42564d7f3a485a35ffa8fdd0d3d3c6 (MD5) / Approved for entry into archive by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-09-24T17:19:28Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Camila Beatriz Atanásio Borba.pdf: 1215389 bytes, checksum: 2c42564d7f3a485a35ffa8fdd0d3d3c6 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-09-24T17:19:28Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Camila Beatriz Atanásio Borba.pdf: 1215389 bytes, checksum: 2c42564d7f3a485a35ffa8fdd0d3d3c6 (MD5) Previous issue date: 2016-07-28 / O crescente número de infecções causadas por bactérias resistentes a antibióticos leva à busca para estudos de diferentes compostos bioativo. Neste contexto visando a busca de novos antimicrobianos, as actinobacterias vem sendo estudadas por sua capacidade de produzir metabólitos bioativos, antioxidantes, compostos terpenóides, enzimas e antimicrobianos. Dentro do filo o gênero streptomyces ganha destaque pois produzem 80% dos antibióticos conhecidos. Tendo em vista o potencial destes microrganismos para produção de compostos bioativos este trabalho tem objetivo produzir metabólito secundário de Streptomyces hygroscopicus avaliar sua atividade antimicrobiana, antioxidante e citotoxicicidade, bem como detectar as classes de compostos presentes, além de identificar morfológica e molecularmente a actinobactéria produtora. Inicialmente a atividade antimicrobiana foi realizada através de teste em difusão de poço, onde o extrato acetato de etila (EA) mostrou atividade frente a B. Subtillis (23,61mm) e S. aureus (21,61mm), o extrato metanólico (EM) e extrato hexânico (EH) frente as mesmas bactérias teste C. Kruzi (EM:11,92mm, AH: 8,86mm), B.subtillis (EM: 18,07mm, EH: 18,07mm), S. aureus (EM: 15,24mm, EH: 29,66mm), P. aeruginosa (EM: 20,95mm, EH:17,91), com excessão da E.coli (EM:12,87mm) em seguida foi executado CMI com 4 bactérias testes que apresentaram maior halo de inibição e Micobacterium tuberculosis ATCC. Grande parte dos extratos estudados mostraram atividade inibitória frente aos microrganismos testes quando em concentração de 10mg/mL, Já o extrato Acetato de etila (EA) frente a B.subtillis, e Metanólico frente a B.subtillis e P. aeruginosa obtiveram MIC > 10mg/mL, o extrato hexânico (EH) apresentou MIC de 1,25 mg/mL frente a B.subtillis. Os extratos apresentaram as seguintes valores de MIC, 5mg (EA), 2,5mg (EM) e 1,25mg (EH), frente a Micobacterium tuberculosis. Ao realizar a atividade antioxidante dos extrato através do método de DPPH, obtivemos os seguintes valores de IC50: 3,4916 mg/mL (EA), 2,0880 mg/mL (EM). Quando utilizado o método ABTS o extrato Acetato de etila (1,485 mg/mL) observou-se o pico de porcentagem de inibição do radical ABTS de 19,3548, e para o extrato metanólico (0,285 mg/mL), 19,7947. A detecção das classes de compostos foi realizada por Cromatografia em Camada Delgada (CCD), onde foram encontradas as seguintes classes: Protoantocianididas condensadas, leucoantocianidinas, cumarinas e saponinas no extrato metanólico, já no extrato acetato de etila foram encontrados derivados cinâmicos, triterpenos e esteroides. A citotoxicidade dos extratos estudados foi avaliada pela técnica de MTT, onde foi observado CC50 de 9,06 mg/mL para o extrato acetato de etila, 4,55 mg/ml para extrato hexânico e 1,81mg/mL para o extrato metanólico. Concluiu-se que à atividade antioxidante o extrato metanólico se mostrou mais promissor quando comparar ao extrato acetato, porém ao analisar suas toxicidades vê-se o contrário. Quanto a atividade antimicrobiana o extrato hexânico obteve melhores resultados, sendo efetivo frente a Micobacterium tuberculosis e B.subtillis, mostranto que extratos oriundos de Straptomyces hygrscopicus possue efetiva atividade antimicrobiana e antioxidante. / The increasing number of infections caused by bacteria resistant to antibiotics leads to a search for studies of different bioactive compounds. In this context aimed at the search for new antimicrobials, the actinomycetes have been studied for their ability to produce bioactive metabolites, antioxidants, terpenoids compounds, enzymes and antimicrobial. Within the phylum the Streptomyces genus is highlighted as they produce 80% of the known antibiotics. Given the potential of these microorganisms for the production of bioactive compounds this study aimed to produce secondary metabolite of Streptomyces hygroscopicus evaluate its antimicrobial activity, antioxidant and citotoxicicidade and detect classes of compounds and identify morphological and molecularly producer actinobacteria. Initially, the antimicrobial activity was performed by test well spread, where the ethyl acetate extract (EA) showed activity against B. subtilis (23,61mm) and S. aureus (21,61mm), the methanol extract (EM ) and hexane extract (EH) against the same test bacteria C. Kruzi (MS: 11,92mm, AH: 8,86mm), B.subtillis (MS: 18,07mm, EH: 18,07mm), S. aureus ( iN: 15,24mm, EH: 29,66mm), P. aeruginosa (MS: 20,95mm, EH: 17.91), with the exception of E. coli (MS: 12,87mm) was then run CMI 4 bacteria tests showed greater inhibition zone and Mycobacterium tuberculosis ATCC. Much of the extracts tested showed inhibitory activity against the test microorganisms when in a concentration of 10mg / mL, already the ethyl acetate extract (EA) against B.subtillis, and methanol against B.subtillis and P. aeruginosa obtained MIC> 10mg / ml, hexane extract (SH) showed MIC of 1.25 mg / mL against B.subtillis. When performing the antioxidant activity of the extract by DPPH method, we obtained the following IC50 values: 3.4916 mg / ml (EA), 2.0880 mg / ml (EM). When using the ABTS assay the ethyl acetate extract (1.485 mg / ml) observed peak percentage inhibition of ABTS radical 19.3548, and the methanol extract (0.285 mg / mL) 19.7947. The detection of classes of compounds was done by Thin Layer Chromatography (TLC) where the following classes were found: Protoantocianididas condensed, leucoanthocyanidins, coumarins and saponins in methanolic extract, as the ethyl acetate extract were found cinnamic derivatives, triterpenes and steroids . The cytotoxicity of the extracts tested was evaluated by MTT technique, which was observed CC50 9.06 mg / ml for the ethyl acetate extract, 4.55 mg / mL for the hexane extract and 1,81mg / ml to the methanolic extract. It was concluded that the methanol extract antioxidant activity was more promising when compared to acetate extract, but to analyze their toxicities sees otherwise. The antimicrobial activity hexane extract yielded better results, being effective against Mycobacterium tuberculosis and B.subtillis, mostranto that come from Straptomyces hygrscopicus extracts possesses effective antimicrobial and antioxidant.

Orientador : Yong Kun Park / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-16T11:58:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MarancenbaumAguilera_DemetrioEdgar_D.pdf: 3155672 bytes, checksum: 5cad8bef84f273ac33af1efa8132c733 (MD5) Previous issue date: 1978 / Resumo: De 695 microrganismos isolados do solo e de material clínico, foram encontrados quatro produtores da enzima penicilina amidase , sendo o maior produtor destenzima, uma linhagem de E.coli FEA 30. Verificou-se que esta enzima intracelular, e que o ácido fenil acético induz sua produção. Encontrou-se que o melhor meio de cultura, na produção da enzima penicilina amidase, por E.colí FEA 30 foi: l% de peptona, 0,5 % de extrato de levedura e 0,15% de áicido fenil acético, com pH de 7,0 antes de autoclavagem. A melhor temperatura de incubação, na produção da enzima foi de 23ºC. Um meio de cultura na produção da enzima penicilina amidase com possibilidades de ser usado, a nível industrial foi: 2% de farelo de soja desengordurado, 1% de extrato preparado pela autólise de Saccharomyces cerevisiae, da Fleischmanne, 0,15% de ácido fenil acético, com pH de 7,.0 antes da autoclavagem. Depois de colocar uma suspensão de E.coli FEA por 50 minutos em uma solução de N-metil-N¿-nitro-N-nitrosoguanidina (MNNG), foram isoladas 800 linhagens, das quais foi obtida uma mutante denotada como E.coli FEA 30 MQI. Esta mutante produz duas vezes mais penicilina amidase do que a linhagem selvagem, à temperatura de incubação de 25°C. Com esta linhagem mutante E.coli FEA 30 MQl, foi feita novamente indução de mutação e dentre 1.000 linhagens isoladas após a exposição de 50 minutos em MNNG, foi encontrada uma linhagem E.coli FEA 30 MQ2, que produz 120% a mais enzima que a selvagem. Tanto E.coli FEA 30 MQl como E.coli 30 de MQ2. quando inoculadas tem meio infimo de: 15g de KH2PO4' 10 g de glicose, Z g de sulfato de amonia, 0,2 g de sulfato de magnisio, com pH ajustado a 7 com hidróxido de sódio, não apresentaram divisão celular, cresccendo em forma filamentosa às temperaturas de incubaçio de 25°C a 37ºC. Com a indução de mutação com raios ultravioletas, não foi possível. encontrar mutante hiperprodutiva, ainda que nestas condições foram conseguidas mutantes auxotrofos e outras a ß galactosidase-negativas. A enzima penicilina amidase de E. coli apresentou atividade máxima a temperatura de 40ºC, sendo pH ótimo entre 8,0 e 8,5, seu valor da constante de Michaelis Km foi 37 mM e Vm foi l µmol/min/ml. Na produção de 6APA, por penicilina amidase e penicilina G, à temperatura de incubação de 40°C, usando-se uma concentração de 7% de penicilina G, contendo 0,83 unidades de enzima por mililitro, conseguiu-se uma conversão de 90% em 20 horas de incubação, obtendo-se posteriormente uma recuperação de 70% do 6APA produzido. / Abstract: Of 695 microorganisms isolated from soil and clinical material, four were proved to be producers of penicillin amidase, the principal producer of the above enzyme being a lineage of E.coli FEA 30. It was verified that the enzyme was intracellular and that its production is induced by phenylacetic acid. The best culture medium for the production of penicillin amidase by E.coli FEA 30 was found to be: 1% of peptone, 0,5% of yeast extract and 0,15% of phenylacetic acid, with pH 7,0 before autoclaving. The optimal temperature of incubation for the production of the enzyme was 23°C. For industrial purposes an appropiate culture medium would be: 2\ of defatted soybean meal, 1% of an extract prepared by autolysis of Saccharomyces cerevisae of Fleischmann and 0,15% of phenylacetic acid with pH 7,0 before autoclaving. After placing a suspension of E.coli FEA 30 for 50 minutes in a solution of N-methyl-N'-nitro-N-nitroguanidine (MNNG), there were isolated about 800 lineages from which there was obtained a mutant denoted as E.coli FEA 30 MQ1. This mutant produces twice as much penicillin amidase than does the wild lineage at an incubation temperature of 25°C. The mutant E.colí FEA 30 MQl, was subjected again to a mutation process and of the 1.000 lineages isolated after 50 minutes immersion in MNNG solution there was encountered amutant lineage denoted as E.coli FEA 30 MQ2 which produces 120% more of the enzyme than the wild one. Both E.coli FEA MQl and E.coli FEA MQ2 when inoculated in minimal medium of: l5g of KH2PO4, 10 g of glucose, 2 g of (NH4)2SO4 and 0,2 g af MgSO4, with pH adjusted to 7,0 with sodium hydroxide, did not show cellular division, but grew of in a filament form at an incubation temperature 25°C to 37°C. When inducing the mutation with ultraviolet rays it was not possible to obtain a penicillin amidase hyperproductive mutants even if under these conditions mutants such as auxotrophic and others with negative ß-galactosidase were encountered. The penicillin amidase of E.colí showed maxirnum activity 40°C, the optimal pH being between 8,0 and 8,5. The value at of its Michaelis constant Km was 37 mM and its Vm was l µmol/min/ml. When employing an incubation temperature of 40°C and a penicillin G concentration of 7% with 0.83 enzymes units per ml, a conversion of 90% of the penicil1in into 6APA in 20 hours of incubatian was achieved. Seventy % of the above yield was recuperated. / Doutorado / Doutor em Ciência de Alimentos

Orientadores: Ennes Macari de Abreu, Eduardo Dias de Andrade / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-18T04:45:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Groppo_FranciscoCarlos_M.pdf: 2179968 bytes, checksum: 3937c010e037c4495dbe2e55712c0878 (MD5) Previous issue date: 1993 / Resumo: Como a alveolite é uma complicação pós-operatória relativamente comum e que, apesar da extensa lista de possíveis terapêuticas propostas, ainda não se tem uma terapêutica definida, resolvemos testar a ação de um corticóide, aplicado tópicamente, no processo cicatricial desta patologia. Para tal foram utilizados 96 ratos, submetidos à extração do incisivo superior direito, induzindo-se posteriormente, um quadro de alveolite seca. Constatada a alveolite, injetou-se o acetonido de triancinolona COMCILON - A em Orabase), ALVEOSAN, ORABASE e num quarto grupo nenhum tratamento foi realizado. Os animais foram sacrificados em tempos experimentais e as peças processadas através de técnicas histológicas de rotina. Os resultados mostraram uma alta interferência no processo cicatricial, para os grupos do corticóide e do veículo até o último período de estudo. Pequena interferência foi verificada quando utilizou-se o ALVEOSAN, sendo que após 6 dias do tratamento, não foi possível verificar diferenças entre o grupo CONTROLE e tratado com ALVEOSAN. Em vista dos resultados histológicos obtidos, concluiu-se que ambas as pastas (OMCILON-A em Orabase e ORABASE), interferiram negativamente no reparo alveolar perturbado enquanto que o ALVEOSAN não causou retardo / Abstract: As the dry socket is a relatively common postoperative complication and there is no agreement in the literature related to the terapy, in spite of the extensive possible therapeutics, we decided to avaliated the action of one corticoid prescribed topicaly in healing process of this patology. Thus, it was used 96 rats, submits to extraction of upper right incisor tooth and induce to dry socket. When the dry socket was verified, it was injected triancinolon acetonide (OMCILON - A in Orabase), ALVEOSAN, ORABASE and in one group no treatment was done (CONTROL). The animaIs was sacrificed in many experimental times and the pieces were processed through of rotine histological tecnics. The results showed high negative interference on the healing process for corticoid and of vehicle therapy group, as far as the conclusion of this study. Little negative interference was verified when ALVEOSAN was used, however at 6 days of the begining of the treatment, it was not possible to verify any difference between the group CONTROL and ALVEOSAN treated. As the consequence of the resuIts, we concIuded that both pastes (OMCILON-A in Orabase and ORABASE), interfered negatively in the disturbed repair of the alveolus, but the ALVEOSAN not interfered with this / Mestrado / Farmacologia / Mestre em Ciências

Desde su descubrimiento, los antibióticos han marcado un hito importante en el tratamiento de enfermedades y han permitido la realización de intervenciones quirúrgicas antes consideradas como letales. Sin embargo, el uso excesivo de antibióticos puede alterar la microbiota, causando disbiosis y aumentando la predisposición al desarrollo de diversas patologías a largo plazo. Antibióticos de amplio espectro como la Oxitetraciclina (OTC) se utilizan de manera desmesurada en diversas industrias agroalimentarias. La relación entre el mecanismo de acción de OTC y alteraciones de la microbiota es aún desconocida. Actualmente, se conoce que OTC funciona como inhibidor de la síntesis de proteínas durante la fase de elongación. Dicho fase de la síntesis de proteínas es altamente conservada entre las bacterias y no explicaría el efecto diferenciado entre géneros bacterianos asociados a disbiosis. Al unirse a la subunidad menor 30S del ribosoma, existe la posibilidad de que OTC también actúe en otras fases de la síntesis proteica. Entre ellas destaca la iniciación de la traducción del ARNm al presentar al menos dos mecanismos alternativos, utilizados diversamente entre las bacterias. El primero utiliza los factores de iniciación IF1, IF2 e IF3, mientras que el segundo utiliza principalmente IF1 e IF2. En el presente estudio se evalúa a OTC como posible inhibidor de la iniciación de la síntesis de proteínas dependiente de los tres factores mediante métodos bioquímicos y análisis informático de modelamiento estructural. Los resultados indican que IF1 es susceptible a OTC, probablemente por su posicionamiento cercano al antibiótico en el ribosoma. Como consecuencia, OTC induce una mayor estabilización de IF1 en el ribosoma, que va en aumento a través de los complejos intermediarios de iniciación, alcanzando un incremento del 40%. La estabilización de IF1, reducción de su capacidad de disociación del ribosoma, conllevaría a una inhibición de la formación del complejo de iniciación 70S. Los resultados aquí expuestos sugieren un nuevo mecanismo de acción de OTC durante la iniciación de la síntesis de proteínas. El entendimiento del nuevo mecanismo de acción de OTC contribuye con una explicación novedosa y base para el entendimiento de disbiosis mediada por el fármaco. Además, los resultados proporcionan las bases de futuras investigaciones para el desarrollo de nuevos antibióticos que actúen en el mismo blanco molecular. / Antibiotics have stablished an important milestone since their discovery, allowing the treatment of infectious diseases and surgical procedures otherwise considered lethal. However, recent studies show that the use of antibiotics can alter the microbiota, causing dysbiosis and leading to the development of diverse pathologies. In particular, broad- spectrum antibiotics such as Oxytetracycline (OTC) are widely used in agricultural and food industries. The relationship between the molecular mechanism of OTC and microbiota modifications is still unknown. The current model suggests that OTC inhibits the elongation phase of protein synthesis inhibitor. This phase of protein synthesis is highly conserved among bacteria and cannot explain the differentiated effect of OTC among bacterial genus. OTC could act in other phases of protein synthesis since the drug binds to 30S small ribosomal subunit. Among these, mRNA translation initiation stands out since it is represented by at least two alternative mechanisms in bacteria. The first mechanism uses initiation factors IF1, IF2 and IF3, while the second uses mainly IF1 and IF2. In the present study, OTC has been evaluated as a potential protein synthesis inhibitor acting at initiation of translation. Particularly, the study focuses in the mechanism that uses all three initiation factors employing biochemical methods and computer analysis of structural modelling. The results indicate that IF1 is susceptible to OTC, probably due to the near positioning with respect to the antibiotic in the ribosome. Consequently, OTC increases the stabilization of IF1 in the ribosome up to 40% along all intermediate initiation complexes. IF1 stabilization would inhibit of 70S initiation complex formation, suggesting a new mechanism of action for OTC during translation initiation. This finding would explain how OTC causes dysbiosis and provides further basis for future research of new antibiotics with a similar molecular mechanism. / Tesis