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Efeito do resveratrol em astrócitos : uma abordagem sobre parâmetros gliais específicos em cultura e em fatias hipocampais

Almeida, Lúcia Maria Vieira de January 2007 (has links)
O resveratrol (3,5,4’-trihydroxy-trans-stilbene) é um polifenol encontrado nas uvas e no vinho tinto, que possui propriedades antioxidantes, antiinflamatórias, bem como cardioprotetoras. Recentemente, cada vez mais estudos sugerem que o resveratrol possa exercer um papel significativo; regulando funções importantes no SNC, especialmente sob condições patológicas. Assim, neste estudo nós investigamos o papel neuroprotetor do resveratrol através de um efeito modulatório sobre parâmetros gliais em cultura primária de astrócitos corticais e em um modelo de fatias hipocampais. Os astrócitos são as células mais abundantes constituintes do SNC e uma de suas funções consiste em exercer um papel protetor contra o estresse oxidativo. Nós observamos que o tratamento com resveratrol por 24 h foi capaz de aumentar a captação de glutamato, o conteúdo de glutationa e secreção de S100B em cultura de astrócitos corticais. Além disso, a pré-incubação com resveratrol confirmou seu potencial não só como antioxidante, mas também modulando as funções gliais mesmo após um insulto oxidativo com 0,1 mM de H2O2. Observamos que o resveratrol impediu o aumento das espécies reativas de oxigênio após uma injúria com H2O2 e evitou a diminuição da captação de glutamato e do conteúdo de glutationa. Enquanto que a secreção de S100B, 1 h após o dano com H2O2, apresentou um aumento transitório que foi revertido pela presença de resveratrol. O oposto ocorreu 24 h após o insulto, quando o H2O2 levou a uma diminuição na secreção de S100B, enquanto que na presença do resveratrol foi observado um aumento da proteína no meio extracelular. Um perfil semelhante foi encontrado em fatias hipocampais tratadas com resveratrol após um insulto com 0,1 e 1 mM de H2O2. Apesar do resveratrol não ter revertido a diminuição dos níveis extracelulares de lactato e a redução da viabilidade celular induzidos por 1 mM de H2O2, o polifenol preveniu o aumento da permeabilidade da membrana observada. O resveratrol também impediu a diminuição do conteúdo de glutationa após a exposição ao H2O2. Ainda, a ativação da ERK1/2 provocada por 1 mM de H2O2 foi completamente prevenida pelo resveratrol. Entretanto, o resveratrol evitou a diminuição na captação de glutamato apenas após o insulto com 0,1 mM de H2O2. Embora os mecanismos através dos quais o resveratrol exerce seus efeitos ainda não estejam completamente esclarecidos, podemos propor que o polifenol apresenta um papel protetor contra injúrias no SNC por modular funções gliais. / Resveratrol (3,5,4’-trihydroxy-trans-stilbene) is a polyphenol present in grapes and red wine, which has antioxidant, anti-inflammatory and cardioprotective properties. Recently, a great number of reports suggest that resveratrol might be involved in important functions of SNC, especially under pathological conditions. Therefore, in this study, we investigate the neuroprotective role of resveratrol through modulatory effect on glial parameters in primary cortical astrocytes and hippocampal slice preparations. Astrocytes are the most abundant cell type CNS and are involved in a protective role against oxidative stress. We observed that 24 h treatment with resveratrol lead to an increase in glutamate uptake, glutathione content and S100B secretion in astrocyte cultures. Moreover, pre-incubation with resveratrol has confirmed its potential not just as an antioxidant, but also by modulating glial functions even after an oxidative insult with 0,1 mM H2O2. Resveratrol avoided the increase of reactive species of oxygen after an insult with H2O2 and prevented the decrease in glutamate uptake and glutathione content. Moreover, 1 h after H2O2 injury, S100B secretion demonstrated a transitory increase that was reverted by resveratrol. In contrast, 24 h after the oxidative damage exposure it was observed a decrease in S100B caused by H2O2 while in the presence of resveratrol there was an increase of S100B in the extracellular. A similar profile was found in hippocampal slices treated with resveratrol after oxidative damage with 0,1 and 1 mM H2O2. Even though resveratrol did not changed the decrease in lactate levels and the reduction in cell viability induced by 1 mM H2O2, it was able to prevent the increase in cell permeability. Resveratrol also prevented the decrease of glutathione content after H2O2. There was also an activation of ERK1/2 by 1 mM H2O2 that resveratrol fully prevented. However, resveratrol only reverted the decrease in glutamate uptake induced by 0,1 mM H2O2. Although the mechanisms underlying resveratrol effects are not completely clear, we may propose that resveratrol could represent a protective strategy to avoid brain injury by modulating glial functions.
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Estudo das alterações comportamentais e neuroquímicas induzidas pela sepse em modelo animal : possível papel terapêutico de antioxidantes / Investigation of behavioural and neurochemical sequelae in rats submitted to sepsis : possible therapeutic role for antioxidant agents

Barichello, Tatiana January 2007 (has links)
Este trabalho apresenta a compilação de 5 experimentos carreados ao longo de 2004-2007. Na parte 1 apresenta sucintamente o marco teórico dos quatro trabalhos. Inicialmente são discutidos aspectos gerais da sepse. Após, são descritos alguns mecanismos conhecidos do envolvimento do sistema nervoso central com a sepse, como a permeabilidade diminuída da barreira sanguínea cerebral, alteração de alguns neurotransmissores, apoptose neuronal, ativação de algumas cascatas imunológicas, enfim, o processo inflamatório no sistema nervoso central. Os danos cognitivos ocasionados pela encefalopatia séptica também foram relatados, e por fim o estresse oxidativo e as defesas antioxidantes como um mecanismo que possa estar mediando os danos cognitivos observados em pacientes sobreviventes as sepse. Os experimentos (Parte II) comportamentais realizados 10 dias após a indução da sepse em ratos ocupam os Capítulos 1 e 2. No capítulo 1 é apresentado um corpo de resultados que permite observar os déficits cognitivos nos testes de Habituação ao Campo Aberto, Esquiva Inibitória e Esquiva Inibitória de Múltiplos Treinos em ratos sobreviventes a sepse após 10 dias da indução pelo modelo animal de CLP. Estes dados demonstram uma incapacidade cognitiva no aprendizado e na memória dos animais sépticos. O Capítulo 2 apresenta os resultados dos testes comportamentais de Reconhecimento de Objeto, Labirinto de Cruz Elevada e Teste de Natação Forçada, onde foi possível demonstrar que os ratos sépticos apresentaram uma incapacidade na memória e comportamento compatível com “depressão”, mas não com ansiedade. O Capítulo 3 estende os achados comportamentais observados no Capítulo 1, realizando os testes comportamentais de Habituação ao Campo Aberto, Esquiva Inibitória e Esquiva Inibitória de Múltiplos Treinos após 30 dias da indução de sepse em ratos pelo procedimento CLP. Os dados obtidos confirmam que a incapacidade de aprendizado e memória demonstrados no Capítulo 1 persiste após 30 dias da cirurgia de CLP. A mensuração do estresse oxidativo no hipocampo, cerebelo, estriado e córtex de ratos submetidos à sepse foram descrito no Capítulo 4. Neste experimento foi observado que nas horas iniciais após a indução de sepse em ratos, houve danos oxidativos, avaliados pelo TBARS e carbonil em diversas regiões do cérebro. Entretanto, a exceção do estriado, foi demonstrado um aumento na atividade de SOD sem um proporcional aumento na atividade de CAT, com aumento conseqüente na relação de SOD e CAT, também nos períodos iniciais após a indução de sepse nos ratos (6 horas). O Capítulo 6 aborda os resultados do experimento realizado com administração de antioxidantes NAC e DFX antes do Teste de Esquiva Inibitória, Esquiva Inibitória de Múltiplos Treinos após 10 e 30 dias da indução da sepse e Habituação ao Campo Aberto após 10 dias da cirurgia de CLP, onde foi demonstrando que, DFX e NAC associado, porém não isoladamente, revertem os danos cognitivos observados em ratos submetidos aos testes acima. A discussão geral (parte III) busca integrar esses achados descritos nos capítulos anteriores dentro de uma nova perspectiva para esclarecer os mecanismos neurobiológicos do dano cognitivo em sobreviventes a sepse. Além disso, abre discussões acerca de possíveis novas possibilidades de pesquisas. / This work presents the compilation of 5 experiments enters throughout 2004-2007. The part I presents lightly the theoretical landmark of the four works. Initially general aspects of sepsis are argued. After, some known mechanisms of the involvement of the central nervous system with sepsis are described, as the diminished permeability of the brain blood barrier, alteration of some neurotransmitters, neuronal apoptosis, activation of some inflammatory cascades, at last, the inflammatory process in the central nervous system. The cognitive damage caused by the septic encephalopathy had been also discussed, and finally it stress oxidative and the antioxidants defenses as a mechanism that can be causing the cognitive deficit in sepsis survivors patients. The main experiments (part II) carried through 10 days after the induction of sepsis in rats occupy chapters 1 and 2. In chapter 1 a body of results is presented that allows observing the cognitive incapacities to the tests of Habituation to the Open Field, Inhibitory Avoidance and Continuous Multiple Trials Step-down Inhibitory Avoidance in rats surviving sepsis after 10 days of the induction for the animal model of CLP. These data demonstrate a cognitive incapacity in the memory and the learning of the septic animals. chapter 2 presents the results of the complementary behavioural tests: Object Recognition, Elevated Plus-maze and Forced Swimming Test, where it was possible to demonstrate that the septic rats had presented incapacity in the memory and symptoms of depression, but not of anxiety. chapter 3 extends the observed findings in chapter 1, carrying through the tests of Habituation to the Open Field, Continuous Multiple Trials Step-down Inhibitory Avoidance after 30 days of the induction of sepsis in rats for procedure CLP. The gotten data confirm that the incapacity of demonstrated learning and memory in chapter 1 after persists 30 days of the surgery of CLP. The measure of it stress oxidative in hippocampus, cerebellum, striatum and cortex of rats submitted to sepsis was described in chapter 4. In this experiment it was observed that in the initial hours after the induction of sepsis in rats, had oxidative damages, evaluated for the TBARS and carbonyl in diverse regions of the brain. However, the exception of the striatum, was demonstrated an increase in the activity of SOD without a proportional increase in the activity of CAT, with consequent increase in the relation of SOD and CAT, also in the initials periods after induction of sepsis in the rats (6 hours). chapter 5 approaches the results of the experiment carried through with antioxidants substance administration NAC and DFX before the Test of Inhibitory Avoidance and Continuous Multiple Trials Step-down Inhibitory Avoidance after 10 and 30 days of the induction of sepsis and Habituation to the Open Field after 10 days of the surgery of CLP, where it was demonstrating that, DFX and NAC associated, but not separately, above revert the observed cognitive damages in rats submitted to the tests. The general quarrel (part III) searches to integrate these described findings in the previous chapters inside of a new perspective to clarify the neurobiological mechanisms underlying brain damage in sepsis survivors. Moreover, it opens possible quarrels concerning new possibilities of research.
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Croton cajucara Benth (SACACA) uma planta da Amazonia: avaliação de seu potencial antioxidante

Tieppo, Maurício January 2007 (has links)
O Croton cajucara BENTH (SACACA) é uma planta da região Amazônica utilizada no tratamento de várias doenças. Objetivamos verificar sua ação antioxidante por testes in vitro e in vivo. Como teste químico foi utilizado 1,1-difenil 2-picrilhidrazil (DPPH•), nos testes biológicos in vitro foram utilizadas células eucarióticas de levedura Saccharomyces cerevisiae e in vivo foram utilizados ratos machos Wistar divididos em quatro grupos: I-Controle (n=5); II-Controle+SACACA (n=10) (extrato de folhas 1g/20mL H2O fervida–15min na dose de 1,5mL i.g.); III-PQ (n=8) (50mg/kg i.p.); IVSACACA+ PQ (n=10). O estresse oxidativo foi induzido por PQ aplicado no quinto dia do uso de sacaca. Após 24 horas os animais foram mortos e realizadas provas de integridade hepática (PIH), avaliação da lipoperoxidação - LPO (Substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico – TBARS nmol/mgprot. e quimilumunescência – QL cps/mgprot.) e quantificação da enzima superóxido dismutase – SOD U/mg de prot.. A análise estatística ANOVA foi seguido de Newman-Keuls - p<0,05. Nos testes químicos o valor de DPPH• para o grupo sacaca foi 9,39%±1,20 comparado com a vitamina E 12,59%±0,54. In vitro o percentual de sobrevivência das células com sacaca foi 100% em quanto no grupo PQ (10mM) foi 51,53%±0,00. Quando tratadas previamente com sacaca+PQ a sobrevivência foi 81,24%±0,50 na concentração de 0,001% e 62,42%±0,51 a 0,01%. No modelo in vivo na LPO por TBARS observou-se que o grupo IV difere dos grupos I, III [(I) 0,416±0,09; (II) 0,209±0,016; (III) 1,56±0,08; (IV) 0,236±0,029*] e por QL denotou-se diferença do grupo III em relação aos grupos I e II [(I) 3657,57±395,0; (II) 3467,42+227,85; (III) 6336,40+208,9**; (IV) 4727,0±254,0]. A atividade da enzima SOD apresenta diferença do grupo III em relação aos demais [(I) 5,04+0,62; (II) 1,765±0,147; (III) 13,05+ 1,04***; (IV) 5,203+0,443]. Nas PIH não houve diferença entre os grupos. Os dados obtidos sugerem que o extrato da Sacaca apresenta efeito antioxidante nos diferentes testes estudados.
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Potencial antioxidante e scavenger da taurina em concentrações fisiológicas contra espécies reativas de oxigênio e nitrogênio

Oliveira, Max William Soares January 2008 (has links)
A taurina (ácido 2-aminoetanosulfônico) é um β-aminoácido não utilizado para a síntese protéica, encontrada livremente no liquido intracelular e um dos aminoácidos livres mais abundantes nos leucócitos, cérebro, músculo esquelético, retina e coração, tendo um papel essencial em diversos processos biológicos. As propriedades antioxidantes da taurina já foram estudadas e testadas, no entanto, a maior parte dos estudos feitos até hoje utilizou concentrações menores do que as fisiológicas. O objetivo deste estudo é investigar as propriedades antioxidantes e de scavenger das concentrações fisiológicas de taurina (i.e.: 1, 15, 30 e 60 mM) contra diversas espécies reativas de oxigênio e nitrogênio, utilizando diferentes técnicas in vitro. Nós achamos diferentes reatividades da taurina contra diferentes oxidantes testados. Nenhuma reatividade significativa entre taurina e peróxido de hidrogênio foi encontrada. Por outro lado, a taurina reagiu de forma significativa com óxido nítrico e superóxido. Da mesma forma, a taurina foi capaz de impedir a perda da atividade da superóxido dismutase (CuZnSOD) – um alvo descrito do ONOO- – causada por peroxinitrito in vitro. Além disso, a taurina pode agir como scavenger do radical peroxil e diminuir o dano ex vivo causado pelo tert-butilhidroperóxido em fatias de fígado de rato. Os dados deste trabalho demonstram que a taurina, em concentrações fisiológicas, pode ser um eficiente scavenger de diferentes espécies reativas de oxigênio e nitrogênio, sugerindo um possível papel nas funções celulares e mitocondrial. / Taurine antioxidant properties have already been studied and tested, however most part of the studies used lower concentrations than physiological. This study was undertaken to investigate the scavenging and antioxidant activities of physiological concentrations of taurine (i.e.: 1, 15, 30 and 60 mM) against several reactive oxygen and nitrogen species, using different in vitro assays. We found different reactivity of taurine against different oxidants. No significant reactivity between taurine and hydrogen peroxide was found. Instead, taurine exhibited a significant reactivity with nitric oxide and superoxide. Also, taurine was able to restore superoxide dismutase activity loss caused by peroxynitrite in vitro. In addition, taurine can scavenge peroxyl radical and decrease the ex vivo damage caused by tert-butilhydroperoxide in rat liver slices. The aforementioned experimental data showed that taurine, at physiological concentrations, efficiently scavenge different reactive oxygen species and reactive nitrogen species, suggesting that these properties could be pivotal for the maintenance of cellular and mitochondrial functions.
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Avaliação dos efeitos da desidratação por Spray dryer nos parâmetros de qualidade e propriedades antioxidantes do mel

Alves, Aline Rabelo Costa 05 March 2013 (has links)
100 f. / Submitted by Cynthia Nascimento (cyngabe@ufba.br) on 2013-03-05T14:18:56Z No. of bitstreams: 1 Aline Rabello Costa Alves.pdf: 1030784 bytes, checksum: e4531e7bdd5c2f49b8b35e1e83b19410 (MD5) / Approved for entry into archive by Alda Lima da Silva(sivalda@ufba.br) on 2013-03-05T20:58:00Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Aline Rabello Costa Alves.pdf: 1030784 bytes, checksum: e4531e7bdd5c2f49b8b35e1e83b19410 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-03-05T20:58:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Aline Rabello Costa Alves.pdf: 1030784 bytes, checksum: e4531e7bdd5c2f49b8b35e1e83b19410 (MD5) / O mel é um produto natural, complexo, reconhecido por apresentar na sua constituição compostos como ácidos fenólicos e flavonóides que lhe conferem propriedades antioxidantes que combatem o estresse oxidativo do organismo humano. Apesar dos excelentes atributos, o mel enfrenta problemas de utilização em escala industrial, como dificuldades de manuseio, armazenamento, perda por aderência em contentores e falta de padronização do produto final. Muitos estudos têm concentrado esforços para converter o mel líquido em um pó de fluxo livre, e apresentam a secagem por spray-dryer como um dos processos mais promissores para este fim. Quanto aos compostos antioxidantes, não foram encontrados estudos que reportem seu comportamento perante o tratamento térmico para obtenção do pó. Para outras matérias-primas os autores divergem, sendo reportado tanto degradações como aumento da atividade. Com intuito de eliminar esta lacuna, o presente trabalho tem como objetivo produzir o pó de mel por desidratação em spray dryer utilizando maltodextrina comercial 20 DE como carreador e avaliar o efeito do tratamento térmico no seu potencial antioxidante, através da análise de seqüestro do radical DPPH, da avaliação do teor de compostos fenólicos pelo método de Folin-Ciocalteau e dos flavonóides totais por espectrofotometria com AlCl3. Os resultados obtidos demonstram que os parâmetros físico-químicos do mel se apresentaram dentro do estabelecido pela legislação e o teor de compostos fenólicos ficou entre 34,89 e 39,49 mg de AGE.100-1g de mel, o teor de flavonóides entre 0,99 e 1,28 mg de QE.100-1g e a capacidade antioxidante medida através do CE50 entre 47,44 e 52,43 mg.mL-1. O pó foi obtido com um rendimento em torno de 37%, apresentou 75% das partículas entre 1400 e 600 micras e uma proporção de sólidos de mel de 50,30% (±0,26) do total de sólidos. A umidade encontrou-se em 1,78±0,20%, a densidade aparente em 0,45±0,01 g/mL, a Higroscopicidade em 19±3 g/100g, a Molhabilidade em 2±1s e a cor em 80,66±1,23 para L*, -0,42±0,04 para a* e 9,28±0,48 para b*. O teor de compostos fenólicos do pó de mel apresentou um intervalo de confiança entre 25,47 e 30,32 mg de AGE.100-1g (b.s.) e em comparação com a solução alimentação, também em base seca, percebeu-se que estatisticamente não houve diferença significativa; já o teor de flavonóides, que se encontrou entre 2,01 e 2,63 mg de QE.100-1g, apresentou um incremento significativo em relação a solução alimentação (b.s.). A atividade antioxidante do pó de mel, expresso em CE50, resultou em um intervalo de confiança entre 57,84 e 65,88mg.mL-1, apontando para um incremento médio de 15% em relação a solução alimentação (b.s.). Os incrementos se justificam pelo desencadeamento das reações de Maillard e demonstram a possibilidade de aproveitamento do pó de mel desidratado por spray-dryer como fonte de compostos antioxidantes. / Universidade Federal da Bahia. Faculdade de Farmácia. Salvador-Ba, 2011.
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Aplicação pré-colheita de ácido giberélico no metabolismo antioxidante em pedúnculos de clones de cajueiro-anão / Application gibberellic acid in pre-harvest antioxidant metabolism in peduncle dwarf cashew clones

Xavier, Cicera Vanuza Viana January 2017 (has links)
XAVIER, Cicera Vanuza Viana. Aplicação pré-colheita de ácido giberélico no metabolismo antioxidante em pedúnculos de clones de cajueiro-anão. 2015. 54. Dissertação (Mestrado em Agronomia)- Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2015. / Submitted by Weslayne Nunes de Sales (weslaynesales@ufc.br) on 2017-05-19T16:17:46Z No. of bitstreams: 1 2015_dis_cvxavier.pdf: 1137407 bytes, checksum: 45244c9611b2cd959dffb0d4ebe152b7 (MD5) / Approved for entry into archive by Jairo Viana (jairo@ufc.br) on 2017-05-19T20:10:16Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_dis_cvxavier.pdf: 1137407 bytes, checksum: 45244c9611b2cd959dffb0d4ebe152b7 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-19T20:10:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_dis_cvxavier.pdf: 1137407 bytes, checksum: 45244c9611b2cd959dffb0d4ebe152b7 (MD5) Previous issue date: 2017 / The cashew tree (Anacardium occidentale L.) stands out among the native fruit species in northeastern Brazil by both the enormous potential as table fruit, as in industrial processing. The Consumption in natura is growing considerably every season due to the high interest of the population in health promotion, linked to foods rich in antioxidant. Among the agricultural management practices, the use of plant growth regulators can be an alternative in promoting the improvement of the functional quality of cashew apples. This study aimed to evaluate the effects of GA3 pre-harvest application in different doses (0, 60, 120 and 180 mg L-1), on the postharvest quality of two clones of dwarf cashew (CCP 76 and BRS 189) specifically on the metabolism of bioactive compounds and antioxidant enzymes. The cashew apples, coming from Campus Pacajus-CE Experimental belonging to Embrapa were treated with GA3 two days before harvest at mature stage. The evaluations showed that pre-harvest application of GA3 significantly influenced the phenylalanine ammonia lyase (PAL ) activity and superoxide dismutase (SOD) in both clones, but it did not affect the activity of catalase (CAT), nor the content of phenolics and carotenoids, and total antioxidant activity. The GA3 reduced the activity of PAL enzyme in CCP 76 clone, but promoted an increase in the activity of this enzyme in BRS 189 clone. These cashew clones, total antioxidant activity was correlated to the content of carotenoids. The BRS 189 clone cashew introduced himself as best source of antioxidants due to higher content of trans-cinnamoyl and SOD activity. / O cajueiro (Anacardium occidentale L.) destaca-se entre as espécies frutíferas nativas do Nordeste brasileiro tanto pelo enorme potencial como fruto de mesa, quanto no processamento industrial. O consumo in natura vem crescendo consideravelmente a cada safra devido ao elevado interesse da população na promoção da saúde, atrelada a alimentos ricos em antioxidantes. Dentre as práticas de manejo agrícola, o uso de reguladores de crescimento vegetal pode ser uma alternativa na promoção da melhoria da qualidade funcional dos pedúnculos de cajueiro. Esse estudo objetivou avaliar os efeitos da aplicação pré-colheita de GA3, em diferentes doses (0, 60, 120 e 180 mg L-1), sobre a qualidade pós-colheita de dois clones de cajueiro-anão (CCP 76 e BRS 189), especificamente, sobre o metabolismo de compostos bioativos e enzimas antioxidantes. Os pedúnculos, oriundos do Campus Experimental de Pacajus-CE pertencente a Embrapa Agroindústria Tropical, foram tratados com GA3 dois dias antes do inicio da colheita no estádio maduro. As avaliações mostraram que a aplicação pré-colheita de GA3 influenciou de forma significativa a atividade da fenilalanina amônia liase (PAL) e da dismutase do superoxido (SOD) em ambos os clones, porém não afetou a atividade da catalase (CAT), tampouco o conteúdo de fenólicos e carotenoides, e a atividade antioxidante total. O GA3 reduziu a atividade da enzima PAL no clone CCP 76, contudo promoveu um acréscimo na atividade de tal enzima no clone BRS 189. Nos pedúnculos desses clones de cajueiro-anão, a atividade antioxidante total foi correlacionada ao conteúdo de carotenoides. Os pedúnculos do clone BRS 189 de cajueiro-anão apresentou-se como melhor fonte de antioxidantes devido ao maior conteúdo de trans-cinamoil e da atividade da SOD.
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Caracterização química e determinação da atividade antioxidante in vitro e in vivo de frações polissacarídicas extraídas a partir de subprodutos agroindustriais de frutas tropicais / Chemical characterization and in vitro and in vivo antioxidant activity of polysaccharides fractions extracted from agroindustrial by-products of tropical fruits

Sabino, Luiz Bruno de Sousa January 2015 (has links)
SABINO, Luiz Bruno de Sousa. Caracterização química e determinação da atividade antioxidante in vitro e in vivo de frações polissacarídicas extraídas a partir de subprodutos agroindustriais de frutas tropicais. 2015. 116 f. Dissertação (Mestrado em Ciência e Tecnologia de Alimentos) - Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2015. / Submitted by Jairo Viana (jairo@ufc.br) on 2017-09-04T23:16:24Z No. of bitstreams: 1 2015_dis_lbsousasabino.pdf: 2310765 bytes, checksum: 650e1934a046385145be8ee192f353fb (MD5) / Approved for entry into archive by Jairo Viana (jairo@ufc.br) on 2017-09-04T23:16:37Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_dis_lbsousasabino.pdf: 2310765 bytes, checksum: 650e1934a046385145be8ee192f353fb (MD5) / Made available in DSpace on 2017-09-04T23:16:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_dis_lbsousasabino.pdf: 2310765 bytes, checksum: 650e1934a046385145be8ee192f353fb (MD5) Previous issue date: 2015 / The aim of this work was to characterize the chemical structure and investigate the antioxidant activity in vitro and in vivo of polysaccharide fractions extracted from by-products of acerola, pineapple, cashew, mango and passion fruit processing. Using the exhaustive aqueous extraction, a greater mass yield was obtained for the polysaccharide fraction extracted of the mango by-product (20%) which was higher than that from the pineapple and acerola at 96 and 87%, respectively. The infrared spectra showed typical assignment of polysaccharides chemical groups such as OH (3000 - 3500 cm -1),CO (1034 cm-1), C-O-C (1150 cm-1) and H-C1 (1079, 929 and 858 cm-1). 13C-NMR signals at δ 170.6 and 100, present in all material, indicated the presence of uronic and galacturonic acid, respectively, showing the nature of such pectin. High molecular weight was assigned to the fraction obtained of mango by-product (1.54 x 10 6 g/mol) followed by passion fruit (3.69 x 10 5g / mol) and acerola, pineapple and cashew (~10 4g/ mol). The protein content ranged from 0.25 (pineapple) to 0.68% (cashew), agreeing with the evidenced by the infrared spectrum which is 1242 cm-1 for these molecules. Major total antioxidant activity and minor IC 50 were observed for the polysaccharide fraction of cashew (147 ± 4.1 μM Trolox/g and 0.03 mg/mL,respectively). The fractions obtained from acerola, pineapple, passion fruit (IC50 = 0,05 mg/mL) and mango (IC50= 0.33 mg/mL) also had low IC50, indicating the efficiency of these materials in the elimination of ABTS•+ radical in low concentrations. The MTT assay indicated that no toxicity of the polymeric fractions studied even when evaluated at concentrations of 100%. The total antioxidant activity in vivo showed that materials prevenient of acerola, pineapple and cashew were efficient (p <0.05) in maintaining the levels of GSH and MDA reduction in gastric tissue of rats stressed with ethanol 50%. The polysaccharides fractions of mango and passion fruit exhibited less satisfactory results in both antioxidants tests, which may be assigned to its high molecular weight and viscosity. Together, the results presented in this study, showed that the polysaccharide fractions extracted from byproducts studied had pectic nature in association with proteins, which highlighted, especially for those taken from the cherry, pineapple and cashew, effective antioxidant action in vitro and in vivo, suggesting their possible application as natural antioxidants. / O objetivo do presente trabalho foi caracterizar a estrutura química e investigar a atividade antioxidante in vitro e in vivo de frações polissacarídicas extraídas dos subprodutos do processamento da acerola, abacaxi, caju, manga e maracujá. Utilizando a extração aquosa exaustiva, um maior rendimento em massa foi obtido para a fração extraída do subproduto da manga (20%) que foi superior ao apresentado pela aquela proveniente do abacaxi e acerola em 96 e 87%, respectivamente. Os espectros de infravermelho apontaram atribuições de grupos químicos típicos de polissacarídeos, tais como OH (3000 - 3500 cm-1), CO (1034 cm-1), C-O-C (1150 cm-1) e C1-H (1079, 929 e 858 cm-1). Sinais de 13C-RMN em δ 100 e 170,6, presentes em todos os materiais, indicaram a presença de ácido galacturônico e urônico, respectivamente, evidenciando a natureza péctica dos mesmos. Maior massa molar foi atribuída para a fração obtida do subproduto da manga (1,54 x 10 6 g/mol) seguido do maracujá (3,69 x 10 5 g/mol), acerola, abacaxi e caju (~10 4 g/mol). O conteúdo de proteínas variou de 0,25 (abacaxi) a 0,68% (caju) concordando com o evidenciado pelo espectro de infravermelho que é 1242 cm-1 para estas moléculas. Maior atividade antioxidante total e menor IC50 foi verificada para a fração polissacarídica proveniente do caju (147 ± 4,1 μ Trolox/g e 0,03 mg/mL, respectivamente). As frações obtidas da acerola, abacaxi, maracujá (IC50 = 0,05 mg/mL) e manga (IC50 = 0,33 mg/mL) também apresentaram baixo IC50 indicando a eficiência desses materiais na eliminação dos radicais de ABTS•+ em baixas concentrações. O ensaio com o MTT indicou a não toxicidade das frações poliméricas estudadas mesmo quando avaliados em concentrações de 100%. A atividade antioxidante in vivo demonstrou que os materiais provenientes da acerola, abacaxi e caju foram eficientes (p < 0,05) na manutenção dos níveis de GSH e redução de MDA na mucosa gástrica de ratos estressados com etanol 50%. As frações polissacarídicas da manga e maracujá apresentaram os resultados menos satisfatórios nos dois testes antioxidantes, o que pode ser atribuído a sua elevada massa molar e viscosidade. Em conjunto, os resultados apresentados na presente pesquisa apontaram que as frações polissacarídicas extraídas dos subprodutos estudados apresentaram natureza péctica em associação com proteínas, sendo evidenciada principalmente para aquelas extraídas da acerola, abacaxi e caju, efetiva ação antioxidante in vitro e in vivo, sugerindo sua possível aplicação como antioxidantes naturais.
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Perfil redox-ativo in vitro de extratos de esponjas marinhas do litoral brasileiro

Hoff, Mariana Leivas Müller January 2008 (has links)
A bioquímica farmacológica dos organismos marinhos tem emergido como uma interessante área a ser pesquisada. O Brasil com 8.000 km de litoral rico em espécies de esponjas representa um grande potencial de investigação de metabólitos secundários ativos. O screening de extratos de esponjas e de outros organismos marinhos é uma prática comum para identificar compostos de importância biomédica e reflete o comportamento do conjunto de compostos presentes numa dada espécie. Portanto, o objetivo deste trabalho foi realizar um screening de propriedades redox-ativas em vinte extratos de esponjas marinhas coletadas no litoral dos estados de Santa Catarina, Pernambuco e Paraíba. Os extratos foram avaliados através dos ensaios: TRAP, degradação da 2-deoxirribose via radical •OH, produção de nitritos via •NO, auto-oxidação da adrenalina por O2 •-, redução do NBT via O2 •- e lipoperoxidação induzida por AAPH, Fe2+ e H2O2 pela técnica de TBARS. Este trabalho mostrou que extratos de esponjas marinhas possuem atividades de scavenger de •NO, H2O2 e ROO• e de proteção de peroxidação lipídica induzida por H2O2, ROO• e Fe2+. Dada a importância e o envolvimento destas espécies reativas em várias patologias, os mecanismos bem como as moléculas responsáveis pelas ações antioxidantes observadas nestes extratos de esponjas marinhas merecem ser melhor entendidos. Este trabalho apresentou uma metodologia plausível para determinar potenciais redox-ativos de importância fisiopatológica em extratos de esponjas marinhas e forneceu dados estimulantes para o prosseguimento da pesquisa por moléculas antioxidantes nestes organismos. Conforme já descrito para outras bioatividades, é possível que as características redox destes extratos sejam reflexo da biologia e ecologia das esponjas marinhas. / The biochemistry of marine organisms is emerging as a promising research area. Brazil has a 8,000 km coastline and presents diversity of sponge species, which indicates a great potential of investigation of pharmacologically active secondary metabolites. Screening of crude extracts from marine sponge and other organisms is a powerfull tool to search for biomedical relevant compounds and also reflects the behavior of the metabolites mixture presented in a species. Hence, the aim of this study was perform a redox-activity screening of twenty marine sponge extracts collected off Santa Catarina, Pernambuco, and Paraíba States. Extracts were evaluated by: TRAP, 2-deoxiribose oxidative degradation by •OH radical, •NO production of nitrites, SOD-like activity, NBT reduction via O2 •- and AAPH-, Fe2+- and H2O2-induced lipid peroxidation by TBARS. It was observed that marine sponge extracts possess scavenging activity of •NO, H2O2 and ROO•, and are able to prevent lipid peroxidation induced by H2O2, ROO• and Fe2+. In the knowledge of the involvement of reactive species in relevant dysfunctions, the mechanisms and the molecules related to the antioxidant potentials observed in these marine sponge extracts must be better studied. This work presented a feasible approach to evaluate redox-active properties against reactive nitrogen and oxygen species of physiological and pathological relevance in marine sponge extracts. Furthermore, the data obtained estimulate the research for novel antioxidant prototypes in sponge extracts. It is possible that the redox features here observed be related to the biology and ecology of marine sponges, such it is for other bioactivities.
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Avaliação de respostas bioquímicas, moleculares e da expressão proteômica em ostras Crassostrea gigas expostas ao esgoto sanitário

Nunes, Fabrício Flores January 2013 (has links)
Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Aquicultura, Florianópolis, 2013. / Made available in DSpace on 2014-08-06T17:48:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 323937.pdf: 1855969 bytes, checksum: 906b3e82e70687a66d3bdfdbab615d2b (MD5) Previous issue date: 2013 / O crescimento demográfico mundial em regiões costeiras tem causado uma série de ameaças à qualidade de vida de organismos estuarinos e marinhos, particularmente pelo lançamento de efluentes contendo esgoto sanitário. Este fato tem também posto em risco o desenvolvimento de atividades relacionadas à maricultura. A complexidade de estimar o impacto do esgoto sanitário em áreas costeiras está relacionada com a variabilidade de sua composição e volume. Análises de biomarcadores bioquímicos e moleculares em ostras têm sido propostas porque estes organismos-sentinela são sésseis, filtradores e bioacumuladores de contaminantes. Crassostrea gigas é o principal e mais estudado bivalve marinho cultivado no mundo. Análises de biomarcadores nos animais expostos auxiliam na avaliação dos efeitos tóxicos e riscos de exposição aos xenobióticos presentes no ambiente. Técnicas de qRT-PCR, proteômicas e de análises enzimáticas podem ser utilizadas para elucidação de respostas dos organismos frente à exposição aos contaminantes. O objetivo deste trabalho foi avaliar diferentes respostas moleculares e bioquímicas da ostra C. gigas frente à exposição ao esgoto sanitário e alquilbenzenos lineares (LABs), a fim de identificar e validar potenciais novos biomarcadores de exposição. Ostras expostas in situ em ambiente contaminado por esgoto sanitário bioacumularam principalmente HPAs e LABs. Os genes FABP e GST-O se apresentam como potenciais biomarcadores moleculares de exposição ao esgoto sanitário. Em nível proteômico, as respostas observadas sugerem que a exposição ao esgoto sanitário pode promover apoptose e interferências no sistema imune das ostras. Apesar da capacidade da ostra C. gigas em bioacumular LABs, esse poluente parece não ser o responsável pelas respostas transcricionais observadas em ostras expostas ao esgoto sanitário. As alterações observadas na atividade das enzimas dos animais expostos aos LABs sugerem uma adaptação das enzimas auxiliares do sistema antioxidante enzimático para compensar um possível estado pró-oxidante intracelular gerado pela exposição a esses compostos. A necessidade de informações sobre a influência dos contaminantes na ativação de vias metabólicas específicas em moluscos bivalves torna-se fundamental para a compreensão da modulação da transcrição gênica, das respostas observadas em biomarcadores moleculares/bioquímicos e interação entre as respostas observadas.<br> / Abstract : The world population growth in coastal regions has caused a number of threats to the quality of life of estuarine and marine organisms, particularly caused by the discharge of effluents containing wastewater. This fact has also jeopardized the development of activities related to mariculture. The complexity of estimating the impact of wastewater in coastal areas is related to the variability of its composition and volume. Analysis of biochemical and molecular biomarkers in oysters has been proposed because these sentinel organisms are sessile, filter feeding and bio-accumulators of contaminants. Crassostrea gigas is the principal and most studied marine bivalve cultivated worldwide. Analysis of biomarkers in animals exposed to wastewater effluents helps in the evaluation of toxic effects and risk of exposure to xenobiotics present in the environment. QRT-PCR techniques, proteomic analysis and enzyme assays can be used to elucidate responses of organisms following exposure to contaminants. The aim of this study was to evaluate different biochemical and molecular responses of the oyster C. gigas against exposure to sewage or linear alkylbenzenes (LABs) in order to identify and validate potential new biomarker of exposure. Oysters exposed in situ to an environment contaminated by sewage bio-accumulate primarily PAHs and LABs. The FABP genes and GST- are presented as potential molecular biomarkers of exposure to sewage. At proteomic level, the observed responses suggest that exposure to sewage can promote apoptosis and interference in the oysters immune system. Despite the ability of the oyster C. gigas bioaccumulate LABs, this pollutant does not seem to be responsible for the transcriptional responses observed in oysters exposed to sewage. The observed changes in the enzyme activities of animals exposed to LABs suggest an adaptation of the auxiliary enzymes from the antioxidant system to compensate for a possible intracellular pro-oxidant state generated by exposure to these compounds. The need for information on the influence of contaminants in the activation of specific metabolic pathways in bivalve mollusks is fundamental for understanding the modulation of gene transcription, the responses observed in biomarkers molecular / biochemical and interaction between observed responses.
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Investigação fitoquímica e biológica da espécie vegetal Salacia impressifolia

Ruani, Ana Paula January 2014 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Físicas e Matemáticas, Programa de Pós-Graduação em Química, Florianópolis, 2014. / Made available in DSpace on 2014-08-06T18:11:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 326538.pdf: 4538140 bytes, checksum: 51445ebd21d2b42d26bb8d9c29dd7053 (MD5) Previous issue date: 2014 / O objetivo deste trabalho foi efetuar uma investigação fitoquímica do caule da espécie Salacia impressifolia e avaliar a potencial atividade biológica do extrato bruto, frações e compostos isolados. O caule seco em pó foi extraído com etanol para obtenção do extrato bruto. Esse extrato foi submetido à extração sólido-líquido a fim de obter as frações clorofórmio e acetato de etila e o resíduo insolúvel. O extrato bruto e as frações foram submetidos à quantificação de fenólicos totais e flavonoides e avaliação da atividade antioxidante utilizando os ensaios de poder redutor e captura do radical DPPH. O extrato bruto e as frações mais polares apresentaram a maior atividade antioxidante. O ensaio in vitro demonstrou que o extrato bruto, a fração clorofórmio e a fração acetato de etila apresentaram atividade inibitória moderada frente à enzima acetilcolinesterase. O extrato bruto também apresentou atividade anti-hiperglicêmica nos testes de tolerância oral à glicose e atividade das dissacaridases. Uma mistura de compostos graxos, uma mistura de a e ß-amirina e um hidrocarboneto de cadeia longa foram obtidos a partir da fração clorofórmio. O fracionamento cromatográfico em coluna da fração acetato de etila rendeu o hidrocarboneto de cadeia longa, os triterpenos a-amirina, ß-amirina e ácido melaléucico e a (-)-epicatequina. Os compostos isolados foram caracterizados através de cromatografia em camada delgada, ponto de fusão, análises espectrométricas (massa, RMN de ¹H, RMN de ¹³C, DEPT, COSY, HMQC e HMBC) e espectrofotometria de infravermelho.<br> / Abstract : The objective of this study was to perform a phytochemical investigation of the stems of Salacia impressifolia and evaluate potential biological activity of the crude extract, fractions and isolated compounds. The dried and powdered stems were extracted with ethanol to yield the crude extract. This extract was subjected to solid-liquid extraction to obtain the chloroform and ethyl acetate fractions and the insoluble residue. The crude extract and the fractions were submitted to quantification of their total phenolic and flavonoids contents and evaluation of antioxidant activity using reducing power and DPPH radical scavenging assays. The crude extract and polar fractions showed the highest antioxidant activity. In vitro assay demonstrated that the crude extract, chloroform fraction and ethyl acetate fraction showed moderate inhibitory activity against acetylcholinesterase. The crude extract also showed antihyperglycemic activity in oral glucose tolerance test and disaccharidases activity. A mixture of fatty compounds, a mixture of a and ß-amyrin and a long chain hydrocarbon were obtained from the chloroform fraction. Column chromatographic fractionation of the ethyl acetate fraction yielded the long chain hydrocarbon, the triterpenes a-amyrin, ß-amyrin and melaleucic acid and (-)-epicatechin. The isolated compounds were characterized by thin layer chromatography, melting point, spectrometric analysis (mass, ¹H-NMR, ¹³C-NMR, DEPT, COSY, HMQC and HMBC) and infrared spectrophotometry.

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