Na Odontologia, existe uma grande preocupação com a formação de placa bacteriana ou biofilme devido ao seu potencial cariogênico. Essa atenção se estende à ortodontia, devido ao acúmulo de biofilme formado nos aparelhos ortodônticos, tanto nos aparelhos removíveis quanto nos aparelhos fixos. É muito comum a presença de lesões brancas após a remoção dos bráquetes, em torno de 50 a 75% dos pacientes, provocadas pela presença do biofilme. É necessário um controle químico e mecânico rigoroso, a fim de se evitar alterações irreversíveis nos dentes e periodonto. O controle mecânico se dá pela escovação adequada, pelo correto uso de fio dental e pela frequência desses hábitos, além, claro, de um acompanhamento profissional periódico. O controle químico pode ser viabilizado pelo uso de enxaguatórios bucais, nos quais residem alguns efeitos indesejáveis e contraindicações relacionadas ao uso e à idade dos pacientes. Este estudo tem como objetivo avaliar comparativamente dois enxaguatórios bucais, um de natureza comercial (Cepacol®), e outro não comercial, elaborado com extratos hidroalcoólicos das plantas Nasturtium officinale (agrião), Rosmarinus offinalis (alecrim), Tabebuia impetiginosa (ipê roxo), Achillea millefolium (mil folhas) e Plantago major (tanchagem), desenvolvido na Faculdade de Ciências Farmacêuticas/UNESP Araraquara. Foram selecionados 40 pacientes, jovens e adultos, entre 18 e 45 anos, usuários de aparelho ortodôntico corretivo (fixo), divididos em dois grupos, o grupo do Cepacol e o grupo do Enxaguatório base de plantas. Foram coletadas amostras nos períodos de 0, 7, 15 e 21 dias e analisadas observando-se as Unidades Formadoras de Colônia (UFC) de cada amostra. Houve uma queda significativa da quantidade de bactérias após o uso do Enxaguatório à base de plantas, revelando um produto de extrema utilidade no auxílio do controle do biofilme bacteriano nas superfícies dentárias. / In dentistry, there is a great concern with the formation of plaque or biofilm, due to its cariogenic potential. This attention extends to orthodontics due to the accumulation of biofilm on orthodontic appliances, removable appliances as much in the brackets. It is very common the presence of white spots after removal of the brackets, around 50 to 75% of patients, which are caused by biofilms. It takes a rigorous mechanical and chemical control in order to avoid irreversible changes in the teeth and periodontium. The mechanical control is by proper brushing, correct flossing and also the frequency of these habits, besides, of course, a periodical professional monitoring. Chemical control can be achieved by the use of mouthwashes, home to some undesirable effects and contraindications related to the use and age of patients. This study aimed to assess two mouthwashes, a commercial type (Cepacol ®) and other non-commercial, made with hydroalcoholic extracts of plants Nasturtium officinale (watercress), offinalis Rosmarinus (rosemary), Tabebuia impetiginosa ( purple ipe), Achillea millefolium (thousand leaves) and Plantago major (plantain), developed at the Faculty of Pharmaceutical Sciences / UNESP Araraquara. We selected 40 patients, young and adults between 18 and 45 years, users of orthodontic appliance (fixed), divided into two groups, the Cepacol group and the group of herbal mouthwash. Samples were collected during periods of 0, 7,15 and 21 days and analyzed by observing the Colony Forming Units (CFU) of each sample. There was a significant decrease in the amount of bacteria after using herbal mouthwash, revealing a product of the utmost use in aiding the control of bacterial biofilms on tooth surfaces.

O objetivo deste estudo foi avaliar a rugosidade superficial (µm) e microdureza Vickers (VH) de materiais restauradores temporários: cimento Biodentine™ (M1) e o cimento de ionômero de vidro - Fuji IX (M2) submetidos a diferentes enxaguatórios bucais. Foram confeccionados 54 corpos de prova (cps) por meio de uma matriz de teflon (6mm x 2mm), distribuídos aleatoriamente em 6 grupos de acordo com a solução utilizada: água destilada (S1), enxaguatório com álcool - Listerine Cool Mint (S2) e enxaguatório sem álcool - Colgate Plax (S3). Todos os cps foram mantidos em umidade relativa de 100%, em estufa 37±1°C durante todo o experimento, exceto nos períodos de imersão nos enxaguatórios estabelecidos. Os cps foram colocados individualmente em um frasco contendo 8mL do enxaguatório específico para cada grupo, durante 2 minutos, sob vibração, duas vezes ao dia, por um período de 21 dias. As leituras foram realizdas por meio do microdurômetro e rugosímetro nos tempos de 48 horas (T0), 7 dias (T1), 14 dias (T2) e 21 dias (T3). Os dados obtidos foram agrupados em tabelas e submetidos aos testes estatísticos de normalidade, Kolmogorov-Smirnov, Shapiro-Wilk, Anova e Teste de Tukey por meio do Programa Estatístico Assistat Versão 7.7 beta (2016). Resultados: Verificou-se que os fatores Tempo (T), Solução (S) e Material (M) isoladamente e a interação TxM e SxM tiveram efeito estatisticamente significante na rugosidade superficial. Isoladamente, T3 (0,92±0,02) e M1 (0,87±0,01) apresentaram maior média de rugosidade e S3 (0,72±0,02) a menor média de rugosidade. Nas interações MxT e SXM, respectivamente o M1T3 (1,10±0,03) e M1S1 (1,03±0,03) apresentaram maiores médias de rugosidade. Para a microdureza o fator Material isoladamente, e a interação TxS, TxM e SxM tiveram efeito estatisticamente significante. O M1 (61,2±0,87) apresentou maior microdureza, que M2 (54,4±0,87). Para a interação TxS, a condição S2T2 (54,09±2,61) apresentou menor média de microdureza. Para a interação TxM, o M1 comparado com M2 determinou maior microdureza nos tempos T0, T1 e T2. E para a interação SxM, M1S1 (61,59±1,51) e M1S2 (62,86±1,51) apresentaram maior microdureza que M2S1 (51,53±1,51) e M2S2 (54,34±1,51). De acordo com a metodologia pode-se concluir que: a) o M1 apresentou maior rugosidade superficial nos tempos T1, T2 e T3 e maior microdureza nos tempos T0, T1, e T2 do que o M2 b) O material M1 apresentou maior microdureza independente das soluções. / The aim of this study was to evaluate the surface roughness (µm) and Vickers microhardness of provisory restorative materials: BiodentineTM (M1) and Fuji IX - glass ionomer cement (M2) were submitted to different mouthwashes. Fifty-four specimens were prepared using a Teflon mold (6mm x 2mm), randomly distributed into 6 groups according to the solution used: distilled water (S1), mouthwash containing alcohol -Listerine Cool Mint (S2) and alcohol-free mouthwash - Colgate Plax (S3). During the experiment, all specimens were carried out at a relative humidity of 100% in an oven at 37±1°C, except in the soaking periods in the established mouthwashes. The samples were individually placed in a flask containing 8mL of the specific mouthwash for each group for 1 minute, under vibration twice a day for a period of 21 days. The readings of the variables were carried out at the time of 48 hours (T0), 7 days (T1), 14 days (T2) and 21 days (T3). The obtained data were grouped in tables and submitted to the Normality Tests for Statistical Analysis Kolmogorov-Smirnov, Shapiro-Wilk, Anova and Tukey\'s Test provided by the Statistical software Assistat Program Version 7.7 beta (2016). Results: It was found that there was a significant effect on surface roughness when considered alone Time (T), Solution (S), Material (M) and the interaction between TxM and SxM. On the other hand, T3 (0.92±0.02) and M1 (0.87±0.01) presented the higher roughness and S3 (0.72±0.02) the lowest average roughness. For the interactions MxT and SxM, M1T3 (1,10±0,03) and M1S1 (1,03±0,03) presented higher roughness averages. To microhardness analysis, the material as a alone factor and the interaction TxS, TxM and SxM had a statistically significant effect. M1 (61.2±0.87) presented a higher microhardness than the M2 (54.4±0.87). For the TxS interaction, S2T2 (54.09 ± 2.61) had a lower microhardness average. To TxM interaction, the M1 compared to M2 determined a higher microhardness at T0, T1 and T2. In interaction SxM, M1S1 (61.59±1.51) and M1S2 (62.8 ±1.51) had a higher microhardness than M2S1 (51.53±1.51) and M2S2 (54.3 ±1,51). According to the methodology, it can be concluded that: a) M1 presented greater surface roughnes at T1, T2 and T3 and higher microhardness at T0, T1, and T2 than M2 b) M1 presented a higher microhardness than M2 for S1 and S2.

O objetivo deste estudo foi avaliar a rugosidade superficial (µm) e microdureza Vickers (VH) de materiais restauradores temporários: cimento Biodentine™ (M1) e o cimento de ionômero de vidro - Fuji IX (M2) submetidos a diferentes enxaguatórios bucais. Foram confeccionados 54 corpos de prova (cps) por meio de uma matriz de teflon (6mm x 2mm), distribuídos aleatoriamente em 6 grupos de acordo com a solução utilizada: água destilada (S1), enxaguatório com álcool - Listerine Cool Mint (S2) e enxaguatório sem álcool - Colgate Plax (S3). Todos os cps foram mantidos em umidade relativa de 100%, em estufa 37±1°C durante todo o experimento, exceto nos períodos de imersão nos enxaguatórios estabelecidos. Os cps foram colocados individualmente em um frasco contendo 8mL do enxaguatório específico para cada grupo, durante 2 minutos, sob vibração, duas vezes ao dia, por um período de 21 dias. As leituras foram realizdas por meio do microdurômetro e rugosímetro nos tempos de 48 horas (T0), 7 dias (T1), 14 dias (T2) e 21 dias (T3). Os dados obtidos foram agrupados em tabelas e submetidos aos testes estatísticos de normalidade, Kolmogorov-Smirnov, Shapiro-Wilk, Anova e Teste de Tukey por meio do Programa Estatístico Assistat Versão 7.7 beta (2016). Resultados: Verificou-se que os fatores Tempo (T), Solução (S) e Material (M) isoladamente e a interação TxM e SxM tiveram efeito estatisticamente significante na rugosidade superficial. Isoladamente, T3 (0,92±0,02) e M1 (0,87±0,01) apresentaram maior média de rugosidade e S3 (0,72±0,02) a menor média de rugosidade. Nas interações MxT e SXM, respectivamente o M1T3 (1,10±0,03) e M1S1 (1,03±0,03) apresentaram maiores médias de rugosidade. Para a microdureza o fator Material isoladamente, e a interação TxS, TxM e SxM tiveram efeito estatisticamente significante. O M1 (61,2±0,87) apresentou maior microdureza, que M2 (54,4±0,87). Para a interação TxS, a condição S2T2 (54,09±2,61) apresentou menor média de microdureza. Para a interação TxM, o M1 comparado com M2 determinou maior microdureza nos tempos T0, T1 e T2. E para a interação SxM, M1S1 (61,59±1,51) e M1S2 (62,86±1,51) apresentaram maior microdureza que M2S1 (51,53±1,51) e M2S2 (54,34±1,51). De acordo com a metodologia pode-se concluir que: a) o M1 apresentou maior rugosidade superficial nos tempos T1, T2 e T3 e maior microdureza nos tempos T0, T1, e T2 do que o M2 b) O material M1 apresentou maior microdureza independente das soluções. / The aim of this study was to evaluate the surface roughness (µm) and Vickers microhardness of provisory restorative materials: BiodentineTM (M1) and Fuji IX - glass ionomer cement (M2) were submitted to different mouthwashes. Fifty-four specimens were prepared using a Teflon mold (6mm x 2mm), randomly distributed into 6 groups according to the solution used: distilled water (S1), mouthwash containing alcohol -Listerine Cool Mint (S2) and alcohol-free mouthwash - Colgate Plax (S3). During the experiment, all specimens were carried out at a relative humidity of 100% in an oven at 37±1°C, except in the soaking periods in the established mouthwashes. The samples were individually placed in a flask containing 8mL of the specific mouthwash for each group for 1 minute, under vibration twice a day for a period of 21 days. The readings of the variables were carried out at the time of 48 hours (T0), 7 days (T1), 14 days (T2) and 21 days (T3). The obtained data were grouped in tables and submitted to the Normality Tests for Statistical Analysis Kolmogorov-Smirnov, Shapiro-Wilk, Anova and Tukey\'s Test provided by the Statistical software Assistat Program Version 7.7 beta (2016). Results: It was found that there was a significant effect on surface roughness when considered alone Time (T), Solution (S), Material (M) and the interaction between TxM and SxM. On the other hand, T3 (0.92±0.02) and M1 (0.87±0.01) presented the higher roughness and S3 (0.72±0.02) the lowest average roughness. For the interactions MxT and SxM, M1T3 (1,10±0,03) and M1S1 (1,03±0,03) presented higher roughness averages. To microhardness analysis, the material as a alone factor and the interaction TxS, TxM and SxM had a statistically significant effect. M1 (61.2±0.87) presented a higher microhardness than the M2 (54.4±0.87). For the TxS interaction, S2T2 (54.09 ± 2.61) had a lower microhardness average. To TxM interaction, the M1 compared to M2 determined a higher microhardness at T0, T1 and T2. In interaction SxM, M1S1 (61.59±1.51) and M1S2 (62.8 ±1.51) had a higher microhardness than M2S1 (51.53±1.51) and M2S2 (54.3 ±1,51). According to the methodology, it can be concluded that: a) M1 presented greater surface roughnes at T1, T2 and T3 and higher microhardness at T0, T1, and T2 than M2 b) M1 presented a higher microhardness than M2 for S1 and S2.

Na Odontologia, existe uma grande preocupação com a formação de placa bacteriana ou biofilme devido ao seu potencial cariogênico. Essa atenção se estende à ortodontia, devido ao acúmulo de biofilme formado nos aparelhos ortodônticos, tanto nos aparelhos removíveis quanto nos aparelhos fixos. É muito comum a presença de lesões brancas após a remoção dos bráquetes, em torno de 50 a 75% dos pacientes, provocadas pela presença do biofilme. É necessário um controle químico e mecânico rigoroso, a fim de se evitar alterações irreversíveis nos dentes e periodonto. O controle mecânico se dá pela escovação adequada, pelo correto uso de fio dental e pela frequência desses hábitos, além, claro, de um acompanhamento profissional periódico. O controle químico pode ser viabilizado pelo uso de enxaguatórios bucais, nos quais residem alguns efeitos indesejáveis e contraindicações relacionadas ao uso e à idade dos pacientes. Este estudo tem como objetivo avaliar comparativamente dois enxaguatórios bucais, um de natureza comercial (Cepacol®), e outro não comercial, elaborado com extratos hidroalcoólicos das plantas Nasturtium officinale (agrião), Rosmarinus offinalis (alecrim), Tabebuia impetiginosa (ipê roxo), Achillea millefolium (mil folhas) e Plantago major (tanchagem), desenvolvido na Faculdade de Ciências Farmacêuticas/UNESP Araraquara. Foram selecionados 40 pacientes, jovens e adultos, entre 18 e 45 anos, usuários de aparelho ortodôntico corretivo (fixo), divididos em dois grupos, o grupo do Cepacol e o grupo do Enxaguatório base de plantas. Foram coletadas amostras nos períodos de 0, 7, 15 e 21 dias e analisadas observando-se as Unidades Formadoras de Colônia (UFC) de cada amostra. Houve uma queda significativa da quantidade de bactérias após o uso do Enxaguatório à base de plantas, revelando um produto de extrema utilidade no auxílio do controle do biofilme bacteriano nas superfícies dentárias. / In dentistry, there is a great concern with the formation of plaque or biofilm, due to its cariogenic potential. This attention extends to orthodontics due to the accumulation of biofilm on orthodontic appliances, removable appliances as much in the brackets. It is very common the presence of white spots after removal of the brackets, around 50 to 75% of patients, which are caused by biofilms. It takes a rigorous mechanical and chemical control in order to avoid irreversible changes in the teeth and periodontium. The mechanical control is by proper brushing, correct flossing and also the frequency of these habits, besides, of course, a periodical professional monitoring. Chemical control can be achieved by the use of mouthwashes, home to some undesirable effects and contraindications related to the use and age of patients. This study aimed to assess two mouthwashes, a commercial type (Cepacol ®) and other non-commercial, made with hydroalcoholic extracts of plants Nasturtium officinale (watercress), offinalis Rosmarinus (rosemary), Tabebuia impetiginosa ( purple ipe), Achillea millefolium (thousand leaves) and Plantago major (plantain), developed at the Faculty of Pharmaceutical Sciences / UNESP Araraquara. We selected 40 patients, young and adults between 18 and 45 years, users of orthodontic appliance (fixed), divided into two groups, the Cepacol group and the group of herbal mouthwash. Samples were collected during periods of 0, 7,15 and 21 days and analyzed by observing the Colony Forming Units (CFU) of each sample. There was a significant decrease in the amount of bacteria after using herbal mouthwash, revealing a product of the utmost use in aiding the control of bacterial biofilms on tooth surfaces.

Submitted by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2014-11-26T12:17:54Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Marcel da Silva Garrote - 2013.pdf: 886747 bytes, checksum: 720948391469857f66e38d70ed31bae0 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2014-11-26T12:28:10Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Marcel da Silva Garrote - 2013.pdf: 886747 bytes, checksum: 720948391469857f66e38d70ed31bae0 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-11-26T12:28:10Z (GMT). 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Thirty six paper discs with 9 mm diameter were immersed in experimental solutions (cetylpyridinium chloride 0.07%, cetylpyridinium chloride 0.075%, chlorhexidine gluconate 0.12% and benzalkonium chloride 1.30 mg)for 1 minute. Following, at each plate, 3 paper discs containing irrigant solutions were put on BHIA surface. The plates were kept for 1 hour at environmental temperature and incubated at 37°C for 48 hours. Inhibition zones were measured over the paper discs containing the solutions, using two perpendicular measurements and obtaining the mean value. For direct exposition test, 516 sterilized paper points #50 were immersed on microorganisms suspension for 5 minutes, put in Petri plates and covered with 10 mL of irrigant solution. At 1, 5, 10 and 30 minutes intervals, 3 paper points were removed from substances contact, transported individually and immersed in 7 mL Letheen Broth, and incubated at 37°C for 48 hours. Bacterial growth was evaluated by medium turbidity. An inoculum of 0.1 mL Letheen Broth was transferred to 7 mL BHI, and incubated at the same conditions previously described. Bacterial growth was again evaluated by medium turbidity. Results: Inhibition zones were greater than 10 mm for all substances and in microorganisms tested. Benzalkonium chloride presented antibacterial effect against the biological markers after 12 5 minutes in direct exposition, while cetylpyridinium chloride and chlorhexidine gluconate presented antibacterial effect against all the microorganisms after 10 minutes. Conclusion:Theantiseptic solutions presented antibacterial effect against S. mutans, E. faecalis e P. aeruginosa. / Objetivo: avaliar o efeito antibacteriano de antissépticos bucais sobre S. mutans, E. faecalis e P. aeruginosa, por meio de testes de difusão em ágar e teste por exposição direta.Metodologia:Cepas de S. mutans (ATCC 25175), E. faecalis (ATCC 29212)e P. aeruginosa (ATCC 27853) foram inoculadas em 7 mL de BHI e incubadas a 37°C por 24 horas. Para o teste de difusão em ágar, 13 placas de Petri com 20 mL de BHIA foram inoculadas com 0,1 mL das suspensões microbianas, com auxílio de swab esterilizados, de modo a se obter um crescimento confluente. Trinta e seis discos de papel com 9 mm de diâmetro foram imersos nas soluções experimentais de cloreto de cetilpiridínio 0,07%, cloreto de cetilpiridínio 0,075%, gluconato de clorexidina 0,12% e cloreto de benzalcônio 0,13% mg durante um minuto. A seguir, três discos de papel contendo uma das soluções antissépticas foram colocados sobre a superfície do BHIA. As placas foram mantidas por uma hora em temperatura ambiente e incubadas a 37°C por 48 horas. Os diâmetros dos halos de inibição microbiana foram medidos valendo-se de duas medidas de forma perpendicular entre si, sendo obtida a média de seus comprimentos. Para o teste de exposição direta, 576 cones de papel absorventes esterilizados n°50 foram imersos na suspensão de micro-organismos por 5 minutos, e a seguir foram colocados em placas de Petri e cobertos com 10 mL de uma das soluções testes. Em intervalos de 1,5, 10 e 30 minutos, 3 cones de papel absorventes foram retirados do contato com as substâncias, transportados individualmente e imersos em 7 mL de Letheen Broth, e incubados a 37°C por 48 horas. O crescimento microbiano foi avaliado pela turbidade do meio de cultura. Um inóculo de 0,1 mL obtido do Letheen Broth foi transferido para 7 mL de BHI, e incubado nas mesmas condições descritas. O 10 crescimento microbiano foi novamente avaliado pela turbidade do meio de cultura. Resultados: Os halos de inibição foram maiores que 10 mm para todas as substâncias e em todos os micro-organismos. A solução de cloreto de benzalcônio apresentou efeito antibacteriano contra os indicadores biológicos após 5 minutos em teste por exposição direta, enquanto que o cloreto de cetilpiridínio e o gluconato de clorexidina apresentaram efeito antibacteriano somente após 10 minutos. Conclusão: As soluções antissépticas estudadas apresentaram efeito antibacteriano por contato direto frente S. mutans, E. faecalis e P. aeruginosa.

As espécies de Candida são patógenos oportunistas e as infecções nas cavidades bucais causadas por este gênero são comuns em pacientes com fatores predisponentes, entre eles imussuprimidos, diabéticos e usuários de próteses dentais. No Brasil o índice de endentados é elevado sendo necessária a utilização de próteses bucais, que são locais favoráveis à colonização de microrganismos e o desenvolvimento de biofilme. A utilização de antissépticos como medida complementar na higiene oral é cada vez mais difundida. O objetivo deste trabalho foi detectar em amostras de C. albicans e C. não-albicans, isoladas da saliva de portadores de próteses bucais, os fatores de virulência, proteinase e biofilme e genes relacionados à proteinase (SAP1, SAP3) e à adesão (ALS1 e ALS3) e avaliar a atividade antifúngica in vitro de três formulações comerciais à base de clorexidina 0,12%, cetilpiridínio 0,07% e 0,075% frente aos isolados de Candida e biofilmes. Foram coletadas amostras de saliva de 70 pacientes usuários de próteses bucais. As leveduras foram isoladas em meio de CHROMagar® Candida e identificadas pela metodologia clássica e a confirmação de C. albicans por biologia molecular (PCR). Leveduras do gênero Candida foram isoladas de 32 (45,7%) amostras. Destas foram identificadas: C. albicans (29), C. krusei (5), C. glabrata (4), C. tropicalis (3) e C. parapsilosis (2), totalizando 43 leveduras entre monoculturas e culturas mistas. Os genes pesquisados foram detectados somente em amostras de C. albicans, os genes ALS2, ALS3 e SAP3 foram identificados em 86% dos isolados e o SAP1 em 93%. A atividade de proteinase entre os dos isolados de C. albicans foi de 72,4% e entre das espécies de C. não-albicans 35,7%. A de formação de biofilme sobre placas de 96 poços, e após coloração com XTT, demonstrou que a maioria dos isolados de Candida e todas as culturas mistas desenvolveram biofilmes em 24 horas. A atividade de três antissépticos frente as leveduras foi de <=1,25%, equivalente a uma diluição de 1:80 do antisséptico. Concluímos os três antissépticos também foram eficazes frente aos biofilmes de monoculturas e culturas mistas, as cepas de C. albicans continua sendo a espécie prevalente na cavidade bucal, os genes SAP1, SAP3, ALS2 e ALS3 estão presentes na maioria dos isolados de C. albicans, nestas amostras a maioria foram proteinase e biofilme positivos. A atividade de proteinase foi superior nas espécies de C. albicans em comparação com C. não-albicans. Os biofilmes das espécies de Candida quando formados em culturas mistas se desenvolvem mais em comparação com a formação de biofilme em monocultura. As três formulações de antissépticos foram eficazes contra todos isolados de leveduras em forma planctônica e na maioria dos biofilmes. / Candida species are opportunistic pathogens and infections in the oral cavity caused by these yeasts are common in patients with predisposing factors, such as diabetic or immunocompromised individuals with dental prosthesis. In Brazil, the number of toothless patients is high and the use of dental prosthesis is common, which represents a niche for colonization and formation of microbial biofilms in the oral cavity. The use of mouthwashes to aid in the oral hygiene has increased. The objective of this research was to isolate C. albicans and C. non-albicans from saliva of dental prosthesis users and to evaluate the isolates for the presence of virulence factors, proteinase production, biofilm formation and to search for genes encoding for proteinases (SAP1, SAP3) and adhesion factors (ALS1 and ALS3). Another objective was to evaluate in vitro the antifungal activity of three commercial mouthwashes containing 0.12% chlorhexidine and 0.07% or 0.075% cetylpyridinium, against planktonic Candida sp. cultures and in biofilms. Saliva samples of 70 patients with dental prosthesis were collected, the yeasts were isolated on CHOMagar® Candida and identified by classical biochemical tests combined with molecular test (PCR) for confirmation of C. albicans. Yeasts of Candida genus were isolated from 32 samples (45.7%) and were identified as C. albicans (29), C. krusei (5), C. glabrata (4), C. tropicalis (3) and C. parapsilosis (2), with a total of 43 yeasts, including mono and mixed cultures. The genes studied were detected only in C. albicans: ALS2, ALS3 and SAP3 genes were detected in 86% of the isolates and SAP1 in 93%. The proteinase activity among the isolates of C. albicans was 72.4% and among the species of C. non-albicans it was 35.7%. Assay done with cultivation in 96-wells microplates and staining with XTT, showed the majority of Candida isolates and all the mixed cultures were able to form biofilms within 24h. The activity of the three mouthwashes towards the yeasts was < 1.25%, equivalent to a dilution of 1:80 of the formulation. The three mouthwashes tested were also active against mono or multispecies biofilms. In conclusion, it was shown C. albicans is the most prevalent species. The genes SAP1, SAP3, ALS2 and ALS3 are present in the majority of C. albicans isolates, which were also positive for proteinase and biofilm formation. There was more proteinase activity in C. albicans in comparison with C. non-albicans. The biofilms of Candida species grew better in mixed cultures than in monoculture. The three commercial mouthwashes formulations were effective against all the yeast isolates in planktonic growth and they also inhibited the majority of yeasts in biofilm. Future work is needed to completely elucidate the role of Candida species in biofilms of oral cavity. It is also interesting to propose studies to standardize sensitivity tests for mono and multi-species biofilms.

As espécies de Candida são patógenos oportunistas e as infecções nas cavidades bucais causadas por este gênero são comuns em pacientes com fatores predisponentes, entre eles imussuprimidos, diabéticos e usuários de próteses dentais. No Brasil o índice de endentados é elevado sendo necessária a utilização de próteses bucais, que são locais favoráveis à colonização de microrganismos e o desenvolvimento de biofilme. A utilização de antissépticos como medida complementar na higiene oral é cada vez mais difundida. O objetivo deste trabalho foi detectar em amostras de C. albicans e C. não-albicans, isoladas da saliva de portadores de próteses bucais, os fatores de virulência, proteinase e biofilme e genes relacionados à proteinase (SAP1, SAP3) e à adesão (ALS1 e ALS3) e avaliar a atividade antifúngica in vitro de três formulações comerciais à base de clorexidina 0,12%, cetilpiridínio 0,07% e 0,075% frente aos isolados de Candida e biofilmes. Foram coletadas amostras de saliva de 70 pacientes usuários de próteses bucais. As leveduras foram isoladas em meio de CHROMagar® Candida e identificadas pela metodologia clássica e a confirmação de C. albicans por biologia molecular (PCR). Leveduras do gênero Candida foram isoladas de 32 (45,7%) amostras. Destas foram identificadas: C. albicans (29), C. krusei (5), C. glabrata (4), C. tropicalis (3) e C. parapsilosis (2), totalizando 43 leveduras entre monoculturas e culturas mistas. Os genes pesquisados foram detectados somente em amostras de C. albicans, os genes ALS2, ALS3 e SAP3 foram identificados em 86% dos isolados e o SAP1 em 93%. A atividade de proteinase entre os dos isolados de C. albicans foi de 72,4% e entre das espécies de C. não-albicans 35,7%. A de formação de biofilme sobre placas de 96 poços, e após coloração com XTT, demonstrou que a maioria dos isolados de Candida e todas as culturas mistas desenvolveram biofilmes em 24 horas. A atividade de três antissépticos frente as leveduras foi de <=1,25%, equivalente a uma diluição de 1:80 do antisséptico. Concluímos os três antissépticos também foram eficazes frente aos biofilmes de monoculturas e culturas mistas, as cepas de C. albicans continua sendo a espécie prevalente na cavidade bucal, os genes SAP1, SAP3, ALS2 e ALS3 estão presentes na maioria dos isolados de C. albicans, nestas amostras a maioria foram proteinase e biofilme positivos. A atividade de proteinase foi superior nas espécies de C. albicans em comparação com C. não-albicans. Os biofilmes das espécies de Candida quando formados em culturas mistas se desenvolvem mais em comparação com a formação de biofilme em monocultura. As três formulações de antissépticos foram eficazes contra todos isolados de leveduras em forma planctônica e na maioria dos biofilmes. / Candida species are opportunistic pathogens and infections in the oral cavity caused by these yeasts are common in patients with predisposing factors, such as diabetic or immunocompromised individuals with dental prosthesis. In Brazil, the number of toothless patients is high and the use of dental prosthesis is common, which represents a niche for colonization and formation of microbial biofilms in the oral cavity. The use of mouthwashes to aid in the oral hygiene has increased. The objective of this research was to isolate C. albicans and C. non-albicans from saliva of dental prosthesis users and to evaluate the isolates for the presence of virulence factors, proteinase production, biofilm formation and to search for genes encoding for proteinases (SAP1, SAP3) and adhesion factors (ALS1 and ALS3). Another objective was to evaluate in vitro the antifungal activity of three commercial mouthwashes containing 0.12% chlorhexidine and 0.07% or 0.075% cetylpyridinium, against planktonic Candida sp. cultures and in biofilms. Saliva samples of 70 patients with dental prosthesis were collected, the yeasts were isolated on CHOMagar® Candida and identified by classical biochemical tests combined with molecular test (PCR) for confirmation of C. albicans. Yeasts of Candida genus were isolated from 32 samples (45.7%) and were identified as C. albicans (29), C. krusei (5), C. glabrata (4), C. tropicalis (3) and C. parapsilosis (2), with a total of 43 yeasts, including mono and mixed cultures. The genes studied were detected only in C. albicans: ALS2, ALS3 and SAP3 genes were detected in 86% of the isolates and SAP1 in 93%. The proteinase activity among the isolates of C. albicans was 72.4% and among the species of C. non-albicans it was 35.7%. Assay done with cultivation in 96-wells microplates and staining with XTT, showed the majority of Candida isolates and all the mixed cultures were able to form biofilms within 24h. The activity of the three mouthwashes towards the yeasts was < 1.25%, equivalent to a dilution of 1:80 of the formulation. The three mouthwashes tested were also active against mono or multispecies biofilms. In conclusion, it was shown C. albicans is the most prevalent species. The genes SAP1, SAP3, ALS2 and ALS3 are present in the majority of C. albicans isolates, which were also positive for proteinase and biofilm formation. There was more proteinase activity in C. albicans in comparison with C. non-albicans. The biofilms of Candida species grew better in mixed cultures than in monoculture. The three commercial mouthwashes formulations were effective against all the yeast isolates in planktonic growth and they also inhibited the majority of yeasts in biofilm. Future work is needed to completely elucidate the role of Candida species in biofilms of oral cavity. It is also interesting to propose studies to standardize sensitivity tests for mono and multi-species biofilms.

Hipóteses do estudo: 1) A magnitude da ação antimicrobiana difere entre os princípios ativos cloreto de cetilpiridíneo (CPC), digluconato de clorexidina (CHX), e óleos essenciais (OE) quando utilizados em dose única no bochecho pré-operatório. 2) A redução bacteriana é mais evidente nos pacientes periodontalmente doentes. Objetivos: Avaliou-se a ação antimicrobiana de bochechos pré-operatórios em dose única em diferentes condições periodontais. Método: Sessenta indivíduos saudáveis, sessenta com gengivite e sessenta com periodontite foram randomizados nos grupos: CPC 0,07%, CHX 0,12%, OE (timol 0,064%, mentol 0,042%, eucaliptol 0,092% e salicilato de metila 0,06%) e solução controle negativo. Para o diagnóstico periodontal foram avaliados índice de placa (IP), índice sangramento gengival (ISG), profundidade de sondagem (PS) e nível de inserção clínica (NIC). A quantificação da contagem bacteriana total e das espécies Porphyromonas gingivalis, Tannerella forsythia,Treponema denticola e Streptococcus oralis foi realizada pela PCR em tempo real (qPCR) em amostras de saliva. Os dados foram analisados utilizando-se os testes t pareado e t Student (p<0,05). Resultados: CHX, OE e CPC acarretaram reduções das contagens totais bacterianas e das espécies bacterianas específicas superiores ao controle negativo. A magnitude do efeito variou entre os agentes testados e foi influenciada pela condição periodontal. Para as reduções das contagens totais bacterianas OE exibiram os melhores resultados já que foram eficazes na saúde, gengivite e periodontite. CHX mostrou esse mesmo padrão, exceto no grupo gengivite. CPC não foi eficaz estatisticamente no grupo periodontite para esse parâmetro. As maiores reduções das espécies Gram negativas agrupadas no complexo vermelho (Pg, Td e Tf simultaneamente) foram observadas após o uso de CHX, no grupo saúde e OE, nos grupos gengivite e periodontite. Quanto às reduções da espécie Gram positiva So, elas foram maiores no grupo saúde após o uso de OE, no grupo gengivite após o uso de CHX e no grupo periodontite após o uso em dose única de CPC. Conclusões: O bochecho pré-procedimento tem ação antimicrobiana que sofre influência da condição periodontal e difere entre os agentes testados. Para pacientes saudáveis o clínico pode optar por CHX, OE ou CPC, mas para pacientes com doença periodontal OE ou CHX devem ser a primeira escolha. / The propouse of this study: 1) The extent the dimension of the antimicrobial action differs among the active agents cetylpyridinium chloride (CPC), chlorhexidine digluconate (CHX), and essential oils (EO) when used as a single dose in the preoperative rinse. 2) The bacterial reduction after the use of a single dose mouthwash is more evident in patients with periodontal diseases. Goals: The present study evaluated by microbiological parameters the antimicrobial effectiveness of the preoperative rinses in differents periodontal conditions. Method: Sixty periodontal healthy individuals, sixty individual with gingivitis, sixty individual with periodontitis were randomized into the following groups: CPC(0,07%), CHX(0,12%), EO(timol 0,064%,menthol 0,042%,eucalyptol 0,092%,methyl salicylate 0,06%) and negative control solution. Plaque index (IP), gingival bleeding index (IG), probing depth (PS) and clinical attachment level (NIC) were evaluated clinically. The bacterial identification and the quantification (Porphyromonas gingivalis, Tannerella forsythia,Treponema denticola, Streptococcus oralis) were realized for PCR real time(qPCR) on salivary samples. The data were analysed by the paired t-test and Student t-test(p<0,05). Results: CHX, EO and CPC have resulted in reduction in bacterial total counts and specifc bacterial species, wich were higher than the negative control. The magnitude of the effect varied between the tested agents and it was influenced by periodontal condition. The reductions in bacterial total counts EO showed the best results since they were effective in healthy, gingivitis and periodontitis. CHX showed the same pattern, except in the gingivitis group. CPC was not statistically effective in periodontitis group for this parameter. The largest reductions of the species Gram negative grouped in the red complex (Pg, Tf and Td simultaneously) were observed after the use of CHX in health, and EO in the gingivitis and periodontitis groups. The reductions in Gram positive species So, were higher in the group health after using EO, in the gingivitis group after the use of CHX and in the periodontitis group after using CPC. Conclusions: The pre-procedure rinses has antimicrobial action suffering influence of periodontal condition and varies from agents tested. In healthy patients the clinician may choose CHX, EO or CPC but for patients with periodontal disease EO or CHX should be the first choice.

O uso de antissépticos complementa a higienização bucal reduzindo a microbiota e, consequentemente minimizando a colonização, a formação de biofilme e, assim promovendo a saúde bucal. Diante das opções de antissépticos bucais e produtos naturais, faz-se necessária a análise microbiológica da eficácia desses produtos e suas implicações no controle do biofilme. Neste sentido, têm-se como objetivos: determinar a diluição inibitória máxima (DIMax) de antissépticos bucais (Listerine®, Colgate Plax® Tea Fresh, Periogard®) e o óleo de melaleuca sobre as cepas de Candida albicans e Candida glabrata, clínicas e padrão; quantificar as unidades formadoras de colônias por tubo traqueal (UFC/TT) das leveduras em TTs revestidos com os respectivos produtos e, analisar a formação de biofilme em fragmentos de tubos revestidos ou não com antissépticos e óleo de melaleuca por C. glabrata. Trata-se de um estudo de natureza laboratorial, in vitro, realizado com cepas clinicas e padrão e subsidiado em métodos clássicos da microbiologia para o processamento das avaliações propostas. Para determinar a DIMax, realizou-se a diluição dupla seriada (1/4 a 1/4096) dos antissépticos e óleo de melaleuca respectivamente, sendo as placas incubadas a 37°C por 24 horas. Considerou-se DIMax a maior diluição capaz de inibir o crescimento de todas as cepas avaliadas. Na formação de biofilme foram empregadas duas técnicas: determinação das UFC/TT e microscopia eletrônica de varredura (MEV). Na aleatorização das cepas C. glabrata utilizou-se a análise estatística pelo modelo de regressão logístico multinomial. A partir da análise dos resultados observou-se que o Listerine® apresentou a menor ação inibitória na DIMax de 1/4, óleo de melaleuca (1/16), Colgate Plax® Tea Fresh (1/64) e o Periogard® (1/128). Em termos de formação de biofilme, o tubo revestido com Colgate Plax® Tea Fresh apresentou diferença no teste de comparações múltiplas (p=0,0031), com atividade antibiofilme em todas as cepas de C. glabrata, com exceção de um isolado clínico. As fotomicrografias revelaram reprodução por brotamento presente no TT revestido com óleo de melaleuca, lise celular na ação do Periogard® e, os TTs revestidos com Colgate Plax® Tea Fresh não apresentaram biofilme, exceto na cepa 33. A formação de biofilme por células leveduriformes foi significativa apresentando-se de forma diversificada nos diferentes tubos revestidos. Estudos adicionais sobre Candida spp. em tubos traqueais são recomendáveis em pacientes, com e sem pneumonia, submetidos à ventilação mecânica / Introduction: The use of oral antiseptics is increasingly common, as a complement to the regular oral hygiene by reducing the oral microbiota, biofilm formation and thereby promoting oral health. Facing of several oral antiseptics and natural products, it is necessary microbiological analysis of the effectiveness of these antiseptics and in its implications in the control of biofilm. Objective: The aims of the study were to determine the maximum inhibitory dilution (MID) oral antiseptics (Listerine®, Colgate® Plax, Fresh Tea and Periogard®) and tea tree oil of clinical and standard strains of Candida spp. and Candida glabrata; colony forming units assay (CFU/TT) of yeast in tracheostomy tubes (TT) coated with some products; and analyze the biofilm formed in fragments of tubes coated or not with oral antiseptics and tea tree oil for Candida glabrata. Methods: This is a laboratory investigation, in vitro study performed with clinical and standard strains and subsidized of classical microbiology methods for processing the proposals reviews. To determine the MID, serial dilution was carried out (1/4 a 1/2048) of oral antiseptics and tea tree oil respectively, and the plates were incubated at 37°C for 24h. The MID was considered the highest dilution capable of inhibiting the growth of all strains tested. In biofilm formation two techniques were employed: determination of colony forming units (CFU/TT) and scanning electron microscopy (SEM). The statistical analysis by multinomial logistic regression model was used to randomization strains of C. glabrata. Results: Listerine® showed the worst performance, MID (1/4), tea tree oil (1/16), Colgate Plax® Fresh Tea (1/64) and Periogard® (1/128). In terms of biofilm formation, the multiple comparisons test presented differences (p=0.0031) for tube coated Colgate Plax® Tea Fresh with antibiofilm activity in all strains of C. glabrata, except for one clinical isolate. The photomicrographs revealed reproduction by budding in the TT coated with tea tree oil, cell lysis in action of Periogard®, and the Colgate Plax® Fresh Tea coated tube produced no visible colony, except with strain 33. Conclusion: Biofilm formation by yeast was significant presenting diverse in different coated tubes. Additional studies of Candida spp. in tracheostomy tubes are recommended in patients with and without pneumonia, undergoing mechanical ventilation

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