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Deposição fotoquímica de nanopartículas de prata em argilas e avaliação da sua atividade antimicrobiana / Photochemical deposition of silver nanoparticles on clays and evaluation their antimicrobial activity

Carniatto, Patricia Coelho Lombardo 17 June 2016 (has links)
No presente trabalho nanopartículas de prata (NPsAg) foram preparadas via fotoquímica na presença de citrato de sódio ou argila (SWy-1, SYn-1 e Laponita B) como estabilizantes e, Irgacure 2959 ou Lucirin TPO como fotorredutores. As NPsAg foram caracterizadas por Espectroscopia de UV-Vis, Espalhamento de Luz Dinâmico (DLS), Difração de raios X (DRX) e Microscopia Eletrônica de Transmissão (MET). Durante a síntese fotoquímica, foi observado o aparecimento de uma banda de absorção plasmônica por volta de 400 nm, seguida pela alteração da coloração da solução, passando de incolor para amarela, indicando a formação das nanopartículas. As imagens de MET revelaram que durante a formação ocorre a rápida redução da prata, originando pequenas partículas esféricas, como também grandes aglomerações de prata. Durante a irradiação os aglomerados maiores desaparecem por fotofragmentação, as partículas menores coalescem até atingirem certa estabilidade e, no final da irradiação, apenas partículas de morfologia esférica estão em solução. O tipo de estrutura (intercalada ou esfoliada) obtida após a fotorredução da prata mostrou ser um fator determinante no tamanho e estabilidade das NPsAg. Os resultados de DRX mostraram que as amostras de NPsIrg/Lap B, NPsLuc/Lap B e NPsLuc/SWy-1 apresentaram alguma esfoliação da argila após a redução da prata. Nesse caso, as NPsAg obtidas foram mais uniformes e com menores diâmetros (~3 nm). A esfoliação da argila promove uma maior área de adsorção e estabilidade para as NPsAg. Por outro lado as amostras com estrutura intercalada (NPsIrg/SWy-1) e não intercalada (NPsIrg/SYn-1 e NPsLuc/SYn-1) revelaram partículas com diâmetros maiores (5-12 nm), não uniformes e agregação de algumas partículas. A atividade antimicrobiana das argilas puras, NPsLuc/Citrato e NPsLuc/Argila, foi investigada contra as bactérias Escherichia coli (E. coli) e Staphylococcus aureus (S. aureus). A amostra de NPsLuc/SWy-1 apresentou uma ótima atividade antimicrobiana contra ambas as bactérias testadas (~ 4% de índice de sobrevivência). Por outro lado, a argila Laponita B e NPsLuc/Lap B não demonstraram nenhuma atividade antimicrobiana. A presença de sítios ácidos na região interlamelar da argila SWy-1 contribui na liberação de íons Ag+ da superfície das NPsAg e, consequentemente, melhora a atividade antimicrobiana das NPsAg. Os resultados de fotocalorimetria (PCA) mostraram que os valores da porcentagem de conversão e da velocidade de polimerização (Rp) diminuem com a adição de NPsAg (5 e 10% v/v). A porcentagem de conversão mudou de 61%, na ausência de NPsAg/Citrato e NPsAg/Argila, para aproximadamente 53% na presença de de NPsAg/Citrato e NPsAg/Argila. A presença das nanopartículas pode ser responsável por uma menor penetração de luz ao sistema. Portanto, a fotólise do fotoiniciador pode ser menos eficiente. / In the present work was obtained by photochemical method silver nanoparticles (AgNPs) in the presence of citrate or clay (SWy-1, SYn-1, and Laponite B) as stabilizers and Irgacure 2959 or Lucirin TPO as photoreductors. AgNPs were characterized using UV-Vis pectroscopy, Dynamic Light Scattering (DLS), X ray Diffraction (XRD) and Transmission Electron Microscopy (TEM). During the photochemical synthesis was observed a plasmon absorption band around 400 nm, followed by a change of colour in the solution, from colorless to yellow, indicating the formation of nanoparticles. TEM images revealed that during the formation occurs a fast silver reduction, resulting in spherical particles and large silver clusters. During the irradiation, large aggregates desappeared for photofragmentation, smaller particles coalesce to achieve some stability and in the end of irradiation only spherical morphology particles were in solution. The typical structure (intercalated or exfoliated) obtained after silver photoreduction proved to be a determining factor in the size and stability of AgNPs. XRD results showed that NPsIrg/Lap B, NPsLuc/Lap B and NPsLuc/SWy-1 samples presented some clay exfoliation after the silver reduction. The XRD results of AgNPs samples stabilized with Laponite B (NPsIrg/Lap B e NPsLuc/Lap B) and NPsLuc/SWy-1 presented exfoliated and partially exfoliated structures, respectively. In this case, AgNPs obtained were more uniform and presented smaller diameters (~ 3 nm). The clay exfoliation promoted greater absorption area and stability for AgNPs. On the other hand, samples with intercalated (NPsIrg/SWy-1) and non intercalated (NPsIrg/SYn-1 e NPsLuc/SYn-1) structure, presented particles with larger diameters (5-12 nm), non uniform and some aggregation of these particles. The antimicrobial activities of pure clays, NPsLuc/Citrate and NPsLuc/Clay were investigated against Escherichia coli (E. coli) and Staphylococcus aureus (S. aureus). The NPsLuc/SWy-1 sample showed good antimicrobial activity against both tested species (~ 4% survival index). On the other hand, Laponite B and NPsLuc/Lap B samples did not demonstrate any antimicrobial activity. The presence of the acid sities in the interlayer region of the SWy-1 clay contributed to the Ag+ ions release from the AgNPs surface, and consequently improving the AgNPs antimicrobial activity. The results showed that the conversion degree and the polymerization rate (Rp) values decreased with the addition of AgNPs (5 and 10% v/v). The conversion degree changed from 61%, in the absence of AgNPs/Clay, to 53% in the presence of the AgNPs/Clay. The presence of silver nanoparticles can be responsible for less light penetration into system. Therefore, the photolysis of the photoinitiator can be less efficient.
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Ação antimicrobiana de ramnolipídeos sobre células sésseis e planctônicas de Staphylococcus aureus: efeito do pH / Antimicrobial action of rhamnolipids on sessile and planktonic Staphylococcus aureus cells: pH effect

Estevão Alan Vieira 21 September 2018 (has links)
Intoxicações alimentares são uma das causas mais significativas de mortalidade em países desenvolvidos e em desenvolvimento, sendo as contaminações bacterianas as responsáveis pela maioria dos casos. Dentre elas destacam-se as causadas por espécies de Staphylococcus, que são nocivas tanto pela infecção do organismo hospedeiro, quanto pela intoxicação por enterotoxinas termoestáveis presentes em alimentos contaminados e mal acondicionados. Além disso, a capacidade de S. aureus formarem biofilmes confere maior proteção contra agentes de controle. Neste contexto, torna-se importante desenvolver novos métodos visando inibir estes agentes patogênicos. Uma alternativa ao emprego de conservantes sintéticos é a utilização de biossurfatantes, como os ramnolipídeos (RL) que, além de apresentarem alta estabilidade a temperatura, pH e concentração salina, apresentam baixa toxicidade e são biodegradáveis. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito do pH na atividade antimicrobiana dos RL sobre células planctônicas e sésseis de Staphylococcus aureus (ATCC 8095) e comparar seu efeito ao do dodecil sulfato de sódio (SDS). Os resultados mostraram que o pH exerce grande influência na ação dos surfatantes, sendo mais efetiva em valores de pH menores. Em pH 5, os RL apresentaram ação bactericida (CBM=19,5 mg L-1) superior ao SDS (CBM=39,1 mg L-1), sendo capazes de inibir e remover 80% dos biofilmes em concentrações de 156,2 mg L-1 e reduzir em cerca de 40 % a hidrofobicidade da superfície celular de S. aureus. Em valores de pH maiores a ação dos RL não superou a do SDS, porém estes ainda mostraram resultados promissores, principalmente na remoção de biofilmes evidenciado pela microscopia confocal. A espectroscopia FTIR revelou que quando em pH 6, 7 e 8 S. aureus, possivelmente, induz alterações em sua membrana celular a fim de diminuir a sensibilidade aos surfatantes. As imagens de MEV mostraram que os RL promovem deformações nas células, podendo levá-las a ruptura. O aumento da força iônica, promovido pela adição de NaCl no meio, favoreceu a ação antimicrobiana dos RL, o que torna a aplicação dos RL em alimentos bastante promissora. / Food poisoning can be considered one of the most significant causes of mortality in developed and developing countries with bacterial contamination being responsible for the majority of cases. Among them are those caused by Staphylococcus species that can beharmful, both from the infection of the host organism as the intoxication by thermostable enterotoxins present in contaminated and poorly conditioned food. In addition, the ability to form biofilms gives S. aureus greater protection against control agents. Under this context, it becomes important to develop new methods to inhibit those pathogens. An alternative to the use of synthetic preservatives are biosurfactants such as rhamnolipids (RL), which shows high stability to temperature, pH and salt concentration along with the fact that they have low toxicity and are biodegradable. The aim of this study was to evaluate the effect of pH on the antimicrobial activity of RL on planktonic and sessile Staphylococcus aureus cells (ATCC 8095) and compare its effect to that of the sodium dodecyl sulfate (SDS). The results showed that pH exerts a great influence on the action of surfactants, with greater effectiveness at lower pH. At pH 5, RL presented higher bactericidal action (CBM = 19.5 mg L-1) than SDS (CBM = 39.1 mg L-1), also being able to inhibit and remove 80% of biofilms at concentrations of 156. 2 mg L- 1 and reduce the hydrophobicity of S. aureus cell surface by about 40%. At higher pH values, the action of RL did not exceed that of SDS, neverthelessthey showed promising results, mainly on the removal of biofilms evidenced by confocal microscopy. FTIR spectroscopy revealed that at pH 6, 7 and 8,S. aureus possibly induces changes in its cell membrane in order to decrease the sensitivity to surfactants. The MEV images showed that the RL cause deformations in the cells, which can lead to rupture. The increase in ionic strength, promoted by the addition of NaCl in the medium, favored the antimicrobial action of RL, which makes the application of RL in foods very promising.
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Relações quantitativas entre a estrutura química e a atividade antimicrobiana de análogos à nifuroxazida / QSAR on nifuroxazide analogs with antimicrobial activity

Leoberto Costa Tavares 10 May 1993 (has links)
Com o objetivo de estudar as relações quantitativas entre a estrutura química e a atividade antimicrobiana de análogos à nifuroxazida (5-nitro2-furfurilideno 4-hidroxi benzidrazida), prepararam-se quatorze 5-nitro-2-furfurilideno benzidrazidas X3,X4,X5-substituídas em que X3 e X5 = H e X4 = NO2, Br, Cl, H, CH3, OCH3, OH, NH2 COCH3, OC2H5, CF3, N(CH3)2, SO2NH2 e X3,X4,X5 = OCH3. Nove entre os quatorze compostos obtidos ainda não estão descritos na literatura. Os compostos obtidos foram identificados e/ou caracterizados por seus espectros de I.V., RMN1H e RMN13C, e seus graus de pureza determinados pelas respectivas análises elementares de C, H e N e pelos intervalos de fusão. Determinaram-se os valores de freqüência de absorção do grupo carbonila na região do I.V., em DMSO, como medida de sua polaridade. Este parâmetro foi utilizado como medida do efeito eletrônico dos grupos substituintes estudados. Determinou-se também o coeficiente de partição de cinco compostos através do método de Shake-flask, utilizando-se, para partição, o sistema l-octanol/tampão fosfato, obtendo-se excelentes correlações entre os valores experimentais e calculados. Determinou-se a concentração mínima inibitória, MIC, dos compostos obtidos frente a cepa ATCC 25923 de S.aureus, utilizando-se o Logl/Mol como medida da potência antimicrobiana. O estudo das relações quantitativas entre a estrutura química e a atividade antimicrobiana, QSAR, foi realizada através da aplicação do método stepwise aos valores de Logl/Mol em função de parâmetros estruturais, experimentais e de literatura, relacionados com os efeitos hidrofóbico, eletrônico e de polarizabilidade dos grupos substituintes. / Aiming the study of quantitative relationships between chemical structure and antimicrobial activity of nifuroxazide (5-nitro-2-furfurylidene 4-hydroxybenzidrazide) analogues, fourteen X3,X4,X5-substituted 5-nitro-2-furfurylidene benzidrazides were prepared, where X3 and X5 = H and X<SUB4 = NO2, Br, Cl, H, CH3, OCH3, OH, NH2 COCH3, OC2H5, CF3, N(CH3)2, SO2NH2 and X3,X4,X5 = OCH3. Nine of these compounds have not been described in the literature yet. The compounds obtained were identified ou characterized through their IR, lH NMR and 13C NMR spectra. Their purity was determined through C, H and N elemental analysis, and melting interval. Values of carbonyl absorption frequency in the IR region were determined in DMSO, and taken as measure of polarity. This parameter was used as measure of the electronic effect of the studied substituent groups. The partition coefficient of five compounds was determined using the Shake-fIask method and the l-octanol/phosphate buffer system. Excellent correlations between experimental and calculated values were obtained. The minimal inhibitory concentration, MIC, of the compounds was determined against S. aureus, ATCC 25923 strain. Logl/Mol was used as measure of antimicrobial potency. The study of the quantitative structure-activity relationships, QSAR, was carried using the stepwise regression of Logl/Mol values as function of experimental and theoretical parameters related to the hydrophobic, electronic and polarizability effect of substituents.
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Atividade antimicrobiana e citotoxicidade de emulsões de quitosana/gelatina/óleo de copaíba / Antimicrobial and cytotoxic activity of chitosan/gelatin/copaíba oil emulsion

Marangon, Crisiane Aparecida 11 September 2015 (has links)
A resistência bacteriana aos antibióticos tem se disseminado mais rapidamente do que a introdução de novos compostos, portanto, a investigação e desenvolvimento de novas moléculas para o controle microbiano é necessário. O presente estudo teve como objetivo avaliar a atividade antimicrobiana de diferentes óleos de copaíba OC(S), OC(C) e OC(E), do gel de quitosana/gelatina (QG) e de emulsões de quitosana/gelatina/óleo de copaíba (QGOC) frente às linhagens de Staphylococcus aureus ATCC 25923, Escherichia coli ATCC 25922 e Pseudomonas aeruginosa ATCC 27873. A quitosana foi obtida a partir de gládios de lula por desmineralização, desproteinização e desacetilação e uma solução a 2% foi preparada em ácido acético 1%. O gel de gelatina 2% foi obtido por dissolução de gelatina comercial (Sigma) em água, sendo gelatinizada a 60ºC por 30 min. O gel QG e as emulsões QGOC(S), QGOC(C) e QGOC(E) foram preparadas pela mistura dos géis de quitosana e gelatina na proporção 2:1 sob agitação constante. A concentração das emulsões QGOC foi ajustada de acordo com a concentração inibitória mínima (CIM) encontrada para o gel QG e para os óleos individualmente. Os ensaios de atividade antimicrobiana foram realizados utilizando-se a técnica de microdiluição em caldo para a determinação da CIM e da concentração bactericida mínima (CBM). O efeito citotóxico dos compostos também foi investigado sobre células VERO. Os valores de CIM e CBM para o gel QG sobre S. aureus, E. coli e P. aeruginosa foram de 31, 2; 62,5 e 31, 2 &#956g/mL, respectivamente, no entanto para P. aeruginosa observou-se que o gel mostrou atividade bacteriostática. Os óleos de copaíba apresentaram atividade apenas para S. aureus, com CIM e CBM de 2000 &#956g/mL para OC(S), 500 &#956g/mL para OC(C) e 62,5 &#956g/mL para OC(E), com caráter bactericida. A interação entre os antimicrobianos na forma da emulsão QGOC(E) sugere efeito sinérgico para S. aureus. As demais emulsões não apresentaram efeito sinérgico, entretanto, a atividade antimicrobiana e o efeito bactericida foram mantidos com a adição dos óleos no gel QG, com exceção da bactéria P. aeruginosa em que a adição dos óleos reduziu a eficácia do gel QG. Os óleos de copaíba apresentaram efeito citotóxico sobre as células VERO, enquanto o gel QG e a combinação na forma de emulsões não mostraram citotoxicidade. Os resultados desse estudo evidenciam que a combinação QGOC pode ser uma fonte em potencial para o desenvolvimento de um novo agente antimicrobiano seletivo no controle de infecções bacterianas. / Antibiotic resistance increases faster than the introduction of new compounds thus, the research and development of new drugs and antimicrobial systems is required. This study aimed to evaluate the antimicrobial activity of different copaiba oils CO(S), CO(C) and CO(E), chitosan/gelatin gel (CG) and chitosan/gelatin/copaiba oil (CGCO) emulsions against the strains of Staphylococcus aureus ATCC 25923, Escherichia coli ATCC 25922 and Pseudomonas aeruginosa ATCC 27873. Chitosan was obtained from squid pens by desmineralization, desproteinization and deacetylation and a 2% solution was prepared in 1% acetic acid. A 2% gelatin gel was obtained by dissolution of commercial gelatin (Sigma) in water and gelatinized at 60ºC for 30 min. CQ gel and CQCO emulsions were prepared by mixing chitosan and gelatin gels at 2:1 (w/w) ratio under constant stirring. The concentration of CGCO emulsions were adjusted according to the minimum inhibitory concentration (MIC) for CG gel and oils separately. MIC and minimum bactericidal concentrations (MBC) with oils, CG gel and CGCO emulsions were determined using the micro-broth dilution technique. The cytotoxicity effect of compounds on VERO cell line was also evaluated using the MTT assay. CG gel inhibited S. aureus, E. coli and P. aeruginosa growth showing a MIC and a MBC of 31.2; 62.5 and 31.2 &#956g/mL, respectively except for P. aeruginosa, that showed bacteriostatic effect. Copaiba oils inhibited only S. aureus with MIC and MBC of 2,000 &#956g/mL to CO(S), 500 &#956g/mL to CO(C) and 62.5 &#956g/mL to CO(E). The combined emulsion CGCO(E) suggesting synergistic effect to S. aureus. However, the other emulsions showed not synergistic effect, but showed the same MIC and MBC values as those obtained for the isolated compounds, except for P. aeruginosa where the addition of oils reduced the effectiveness of CQ gel. The copaiba oils showed toxicity to VERO cells, while the CG gel and the CGCO were not cytotoxic. The results of this study demonstrated that the combination of CGCO may be a potential source for the development of a new selective agent to control these important bacterial pathogens.
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Potencial antimicrobiano de extratos vegetais e frações químicas de Sideroxylon obtusifolium T.D. Penn sobre microrganismos bucais

Sampaio, Thaíse Pereira Dantas 28 May 2014 (has links)
Submitted by Jean Medeiros (jeanletras@uepb.edu.br) on 2016-04-26T13:32:51Z No. of bitstreams: 1 PDF - Thaíse Pereira Dantas Sampaio.pdf: 1018120 bytes, checksum: 4c51160c4e258fb5a00a596dc9c74100 (MD5) / Approved for entry into archive by Secta BC (secta.csu.bc@uepb.edu.br) on 2016-07-22T20:32:37Z (GMT) No. of bitstreams: 1 PDF - Thaíse Pereira Dantas Sampaio.pdf: 1018120 bytes, checksum: 4c51160c4e258fb5a00a596dc9c74100 (MD5) / Approved for entry into archive by Secta BC (secta.csu.bc@uepb.edu.br) on 2016-07-22T20:32:48Z (GMT) No. of bitstreams: 1 PDF - Thaíse Pereira Dantas Sampaio.pdf: 1018120 bytes, checksum: 4c51160c4e258fb5a00a596dc9c74100 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-22T20:32:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PDF - Thaíse Pereira Dantas Sampaio.pdf: 1018120 bytes, checksum: 4c51160c4e258fb5a00a596dc9c74100 (MD5) Previous issue date: 2014-05-28 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / This study aimed to evaluate the in vitro antimicrobial activity of plant extracts and chemical fractions from Sideroxylon obtusifolium T.D. Penn on Streptococcus mutans (ATCC 27175), Streptococcus oralis (ATCC 10557), Streptococcus salivarius (ATCC 7073), Streptococcus parasanguinis (ATCC 903) and Candida albicans (ATCC 10231), as well as to identify the bioactive chemical substances contained in the extracts with the best antimicrobial activity. Lyophilized extracts of leaf and bark (LL and LB) and ethanol extracts of leaf and bark (EL and EB) of S. obtusifolium T. D. Penn were tested for their antimicrobial potential by determining their Minimum Inhibitory Concentration (MIC), Minimum Bactericidal Concentration (MBC) and Minimum Fungicidal Concentration (MFC). Tests were performed in triplicate by the microdilution method in three independent experiments. Phytochemical characterization was performed by measuring the content of total polyphenols, total flavonoids and condensed tannins. The EB extract of S. obtusifolium T. D. Penn showed bacteriostatic and bactericidal activity against Streptococcus mutans (MIC = 1000 µg/ml, MBC = 1000 µg/ml); the other streptococci strains were found to be resistant to the extract concentrations tested; all extracts (ethanol and lyophilized, from leaf and bark) showed inhibitory activity on Candida albicans (MIC = 500 µg/ml); the dichloromethane and n-butanol fractions of LL extract showed higher antifungal potential than the crude LL extract (MIC = 250 µg/ml; CFM = 500 µg/ml). Phytochemical characterization revealed predominance of polyphenol compounds (EB = 29.23%, LB = 25.98%), followed by condensed tannins (LB = 38.84%, LB = 17.78%). According to the results, it is suggested that Sideroxylon obtusifolium T. D. Penn has antifungal activity on C. albicans and antibacterial activity on S. mutans, possibly due to the presence of total polyphenols and condensed tannins. / O objetivo deste estudo foi avaliar a atividade antimicrobiana in vitro de extratos vegetais e frações mutans químicas de Sideroxylon obtusifolium T.D. Penn sobre Streptococcus mutans (ATCC de 27175), Streptococcus oralis (ATCC 10557), Streptococcus salivarius (ATCC 7073), Streptococcus parasanguinis (ATCC 903) e Candida albicans (ATCC 10231), bem como, identificar as classes de substâncias químicas bioativas presentes nos extratos de melhor atividade. Extratos liofilizados da folha e casca (LF e LC) e extratos etanólicos da folha e casca (EF e EC) de S. obtusifolium T. D. Penn foram submetidos à avaliação do potencial antimicrobiano através da Concentração Inibitória Mínima (CIM), Concentração Bactericida Mínima (CBM) e Concentração Fungicida Mínima (CFM). Os ensaios foram realizados pelo método da microdiluição em triplicata, em três experimentos independentes. A caracterização fitoquímica foi realizada através da quantificação do teor de polifenóis totais, flavonoides totais e taninos condensados. O extrato EC de S. obtusifolium T. D. Penn apresentou atividade bacteriostática e bactericida sobre Streptococcus mutans (CIM= 1000 µg/mL; CBM= 1000 µg/mL); as demais cepas de estreptococos mostraram-se resistentes às concentrações dos extratos testados; todos os extratos, etanólicos e liofilizados, da folha e casca apresentaram atividade inibitória sobre o crescimento de Candida albicans (CIM= 500 µg/mL); as frações diclorometano e n- butanol do extrato LF apresentaram potencial antifúngico maior que o extrato bruto LF (CIM= 250 µg/mL; CFM= 500 µg/mL). A caracterização fitoquímica revelou predomínio dos compostos polifenóis totais (EC= 29,23%; LC= 25,98%), seguidos por taninos condensados (LC= 38,84%; LF= 17,78%). De acordo com os resultados sugere-se que Sideroxylon obtusifolium TD Penn apresenta potencial antifúngico sobre C. albicans e potencial antibacteriano sobre S. mutans, podendo sua ação estar relacionada com a presença de compostos fitoquímicos da classe dos polifenóis totais e taninos condensados.
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Estudo fitoquímico, caracterização físico-química e avaliação da atividade antimicrobiana de Harrisia adscendens (GÜRKE) Britton & Rose (CACTACEAE)

Santos, George Luís Dias dos 28 August 2015 (has links)
Submitted by Jean Medeiros (jeanletras@uepb.edu.br) on 2016-08-30T12:24:33Z No. of bitstreams: 1 PDF - George Luís Dias dos Santos.pdf: 3033295 bytes, checksum: 0d9c158b731efdbca3ccc115dc253f23 (MD5) / Approved for entry into archive by Secta BC (secta.csu.bc@uepb.edu.br) on 2016-08-31T18:12:17Z (GMT) No. of bitstreams: 1 PDF - George Luís Dias dos Santos.pdf: 3033295 bytes, checksum: 0d9c158b731efdbca3ccc115dc253f23 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-31T18:12:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PDF - George Luís Dias dos Santos.pdf: 3033295 bytes, checksum: 0d9c158b731efdbca3ccc115dc253f23 (MD5) Previous issue date: 2015-08-28 / Researches on medicinal plants have shown great importance to the development of new drugs. Numerous Brazilian plant species still remain without any chemical-biological study. Harrisia adscendens, Cactaceae family species found in the semi-arid northeast, is popularly known as “foxtail” and is used for treatment of "warmth", kidney problems and toothache. This study aimed to carry out phytochemical study, physicochemical characterization and biological activity of the roots of Harrisia adscendens. The plant roots were dried in an air circulating oven at a temperature of 40 ° C, and then pulverized in in a slicer. The physicochemical methods for evaluation were conducted according to the Brazilian Pharmacopoeia. The powder was submitted to the test pH, particle size, density, ash content, loss on drying and thermal analysis. Subsequently, the powder was thoroughly macerated and the filtrate concentrated on a rotary evaporator to yield the crude ethanolic extract (CEE). In phytochemical screening were made qualitative tests for identification of flavonoids, catechins, phenols / tannins, saponins and alkaloids. The antimicrobial activity was performed based minimum inhibitory concentration (MIC) against Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Candida albicans and Candida tropicalis by microdilution test plates. For isolation and identification of secondary metabolites have been used chromatographic and spectroscopic techniques such as TLCA, IR, MS, NMR 1H and 13 C 1D and 2D. In physical-chemical analysis 28.4% of the powder was held in mesh 180 µ m classifying it as semi-fine. The powder has a relatively acidic character pH of 5.68. A gross density of 0.322 g/mL, tapped density of 0.487 g/mL allowing the calculation of the Hausner factor of 1.51 was observed. The compressibility and the compressibility index were 10.5 mL and 33.8%, respectively. The percentage of residual moisture by loss on drying was 12.7% and the determination of total ash content showed 6.14% inorganic matter. In the thermal analysis, there was a loss of mass of 88% organic and 12% ash. In qualitative phytochemical screening results obtained were suggestive of the presence of alkaloids according to positive tests with Dragendorff, Bouchardat and Mayer reagent. Regarding the antimicrobial activity it was considered that all extracts fronts Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Candida albicans and Candida tropicalis showed no activity. After isolation and comparisons with the literature, they were identified the 2-methyl-9H-β-carboline-2-ium (β- carboline alkaloid) and 2',4'-methoxyacetophenone-6'-dihydroxy-2'-O-β-glucose (acetophenone) substances. The physicochemical data obtained from the study showed H. adscendens information relevant to the development of new phytotherapy/phytochemical. Regarding the antimicrobial activity there is no standardization of the reference values to evaluate the antimicrobial potential of natural products from the CIM. The secondary metabolites isolated in this study are unprecedented for both Harrisia gender and for the Cactaceae family. / Pesquisas com plantas medicinais têm apresentado grande importância para o desenvolvimento de novos medicamentos. Inúmeras espécies vegetais brasileiras ainda permanecem sem qualquer estudo químico-biológico. Harrisia adscendens, espécie da família Cactaceae encontrada no semiárido nordestino, é conhecida popularmente como “rabo de raposa”, sendo utilizada para tratamento de “quentura”, problemas renais e dentalgia. O presente trabalho teve como objetivo realizar estudo fitoquímico, caracterização físico- química e atividade biológica das raízes de Harrisia adscendens. As raízes da planta foram desidratadas em estufa de circulação de ar, a uma temperatura de 40 ºC, e em seguida, pulverizadas em moinho de facas. Os métodos para avaliação físico-química foram realizados de acordo com a Farmacopéia Brasileira. O pó foi submetido aos testes de pH, granulometria, densidade, teor de cinzas, perda por dessecação e análise térmica. Posteriormente, o pó foi macerado e o filtrado concentrado em evaporador rotativo para produção do extrato etanólico bruto (EEB). Na triagem fitoquímica foram feitos testes qualitativos para identificação de flavonoides, catequinas, fenóis/taninos, saponinas e alcaloides. A atividade antimicrobiana foi realizada a partir concentração inibitória mínima (CIM) frente a Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosas, Candida albicans e Candida tropicalis pelo teste de microdiluição em placas. Para isolamento e identificação dos metabólitos secundários foram utilizadas técnicas cromatográficas e espectroscópicas como IV, EM e RMN de H e C uni e bidimensionais. Na análise físico-química 28,4% do pó ficou retido na malha de 180 µ m classificando-o como semifino. A droga vegetal possui um caráter relativamente ácido com pH de 5,68. Foi verificada uma densidade bruta de 0,322 g/mL e densidade compacta de 0,487 e g/mL o permitindo o cálculo do fator de Hausner 1,51. A compressibilidade e o índice de compressibilidade foram de 10,5 de mL e 33,8%, respectivamente. O percentual de umidade residual pela perda por dessecação foi de 12,7% e a determinação do teor de cinzas totais revelou 6,14% de matéria inorgânica. Na análise térmica houve uma perda de 88% de massa orgânica e 12% de cinzas. Na triagem fitoquímica qualitativa foram obtidos resultados sugestivos da presença de alcaloides de acordo com os testes positivos com os reagentes de Dragendorff, Bouchardat e Mayer. Com relação a atividade antimicrobiana foi considerado que todos os extratos frentes a Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosas, Candida albicans e Candida tropicalis não apresentaram atividade. Após isolamento e comparações com dados da literatura, foram identificadas as substâncias 2-metil-9H-β-carbolina-2-íon (alcaloide β-carbolínico) e 2’,6’dihidroxi-4’-metoxiacetofenona-2’O-β-glicose (acetofenona). Os dados físico-químicos obtidos com o estudo de H. adscendens mostraram informações relevantes relacionadas ao desenvolvimento de novos fitoterápicos/fitofármacos. Com relação a atividade antimicrobiana não há uma padronização dos valores de referência para avaliar o potencial antimicrobiano de produtos naturais a partir da CIM. Os metabólitos secundários isolados neste estudo são inéditos tanto para o gênero Harrisia quanto para a família Cactaceae.
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"Avaliação da atividade antimicrobiana e citotóxica in vitro do vinagre a ácido acético: perspectiva na terapêutica de feridas" / In vitro evaluation of antimicrobial and cytotoxicity activities of vinegar and acetic acid: perspectives for wound therapeutics Ribeirão Preto.

Iwa Keiko Aida Utyama 29 September 2003 (has links)
O uso correto de produtos químicos com ação antimicrobiana na terapêutica de feridas tem sido uma das preocupações dos profissionais da saúde. A temática em questão representa uma séria problemática agravada, principalmente, pela diversidade de opções, o que traz a insegurança sobre qual é a mais indicada, bem como, pelo uso indiscriminado o que pode resultar na seleção de cepas resistentes. Diante do exposto, foi estabelecido como objetivos: avaliar in vitro a atividade antimicrobiana do ácido acético e do vinagre por meio da Técnica de Difusão de Poço sobre as cepas de Pseudomonas aeruginosa, E. coli e Staphylococcus aureus; determinar a Concentração Inibitória Mínima (CIM); e revelar a citotoxicidade dos referidos produtos sobre Artemia salina Leach. Para análise estatística foi usado o teste de variância ANOVA – ONEWAY seguida do teste de comparações múltiplas; com nível de significância &#61537; = 5%. Assim sendo, pelo método de difusão de poço o vinagre branco, tinto (30,0 e 25,0%) e o ácido acético a 1,0 são mais eficazes que o ácido acético a 0,7%, vinagre branco e tinto a 10,0% (p<0.05) sobre as cepas de Pseudomonas aeruginosa e Escherichia coli. Vale considerar que os produtos analisados não apresentaram ação antimicrobiana sobre Staphylococcus aureus. A Concentração Inibitória Mínima (CIM) do ácido acético nas cepas avaliadas foi a 0,25%, e do vinagre branco a 2,0% para Pseudomonas aeruginosa e Escherichia coli sendo que para Staphylococcus aureus a 3,0%. As cepas de P. aeruginosa e E. coli foram todas inibidas pelo vinagre tinto a 1,5%, e sobre as de Staphylococcus aureus a 3,0%. Ainda, com relação a CIM dos produtos químicos testados, não se verificou diferença entre cepas de Staphylococcus aureus hospitalar e comunidade. O ácido acético foi citotóxica em todas as concentrações estudadas. Já, o vinagre branco e tinto em 0,25% e 0,125% não apresentaram citotoxicidade. Ainda que, não tenha sido a preocupação nesse momento de buscar correlação entre os dados desse estudo com o uso in vivo é importante atentar que tais produtos têm sido amplamente utilizados como agente antimicrobiano no tratamento de feridas, e muitas vezes em concentrações elevadas que podem causar danos aos tecidos dificultando, assim, o processo de cicatrização. A nosso ver é premente despertar nos profissionais da saúde a consciência crítica-reflexiva em relação à utilização das evidências científicas de maneira que possam analisar e aplicar com critério os resultados das pesquisas em prol da qualidade da assistência à saúde. / One of the concerns of health professionals has been the correct use of chemical products with antimicrobial action on wound therapeutics. This issue represents a serious problem, which is made even worse due to the facts that there is a diversity of options of products, which builds insecurity in regards to which product is more appropriate, and there is an uncontrolled use that may result in the selection of resistant species. In this sense, we set the following goals for this study: perform an in vitro assessment of the antimicrobial activity of acetic acid and vinegar using the Technique of Diffusion of Well on strains of Pseudomonas aeruginosa, E. coli, and Staphylococcus aureus; determine the Minimal Inhibitory Concentration (MIC); and reveal the cytoxicity of the referred products over Artemia salina Leach. ANOVA – ONEWAY test was used for statistic analysis, followed by the multiple comparison test; with a significance level &#61537; = 5%. By the well diffusion technique, the white vinegar, red vinegar (30 and 25%), and the acetic acid at 1.0 % are more effective than the acetic acid at 0.7%, white and red vinegar at 10% (p<0,05) over the strains of Pseudomonas aeruginosa and Escherichia coli. The analyzed products did not present antimicrobial actions over Staphylococcus aureus. The Minimal Inhibitory Concentration for the acetic acid on the species was 0.25%. For white vinegar on Pseudomonas aeruginosa and Escherichia coli was 2.0%, and 3.0% on Staphylococcus aureus. All P. aeruginosa and E. coli were inhibited by red vinegar at 1.5%, and at 3.0% for Staphylococcus aureus. In regard to the MIC of the tested chemical products, no difference was found between the hospital and community Staphylococcus aureus. Acetic acid was cytotoxic in all studied concentrations, while white and red vinegar in 0.25% and 0.125% did not show any cytoxicity. Although this study was not concerned with finding a relation among the study’s data with the in vivo use, it is important to observe that such products have been largely used as antimicrobial agents for wound treatment, at concentrations often so high that human tissue might suffer damage; thus hindering the healing process. It is, therefore, essential to stimulate health professionals a critical-reflexive consciousness regarding the use of scientific evidence in a way to analyze and apply the research outcomes in favor of a quality health care.
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Potencial de extratos da Schinopsis brasiliensis Engl. para desenvolvimento de produtos odontológicos / Potential of extracts from Schinopsis brasiliensis Engl. to development of dental products

Souza, Pedro Henrique Sette de 25 May 2015 (has links)
Submitted by Jean Medeiros (jeanletras@uepb.edu.br) on 2016-03-01T17:30:48Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) PDF - Pedro Henrique Sette de Souza.pdf: 2241268 bytes, checksum: d87c15506247703a80894f65522a48b2 (MD5) / Approved for entry into archive by Secta BC (secta.csu.bc@uepb.edu.br) on 2016-04-12T17:26:27Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) PDF - Pedro Henrique Sette de Souza.pdf: 2241268 bytes, checksum: d87c15506247703a80894f65522a48b2 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-12T17:31:50Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) PDF - Pedro Henrique Sette de Souza.pdf: 2241268 bytes, checksum: d87c15506247703a80894f65522a48b2 (MD5) Previous issue date: 2015-05-25 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / BACKGROUND: The search for viable alternatives for the treatment of oral infections is important since resistance to antibiotics has become a big problem in medical science. OBJECTIVE: To evaluate the potential of extracts from bark’s Schinopsis brasiliensis Engl. to development of dental products. METHODS: The ethanol and hydroalcoholic extracts were produced by maceration and ultrasound. The liquid-liquid partition was performed with hexane, chloroform and ethyl acetate. The phytochemical screening was performed using the sample solution with standard reagents for quantification of secondary metabolites. The identification and quantification of chemical marker was performed by High Performance Liquid Chromatography (HPLC). Microparticles were produced in by spray dryer. The encapsulation efficiency was measured by absorbance difference of encapsulated extract content and the content found on the surface of the microparticles. Thermal degradation was observed by thermogravimetry (TG) and differential thermal analysis (DTA) in a nitrogen atmosphere. The cytotoxic potential was analyzed based on the potential Hemolyzing and the selectivity index (SI) of the samples. In addition, the antibacterial activity was evaluated based on minimum inhibitory concentration (MIC) against ATCC standard strains of Streptococcus mutans, Streptococcus mitis, Streptococcus oralis, Streptococcus salivarius, Staphylococcus aureus and Enterococcus faecalis, as well as a clinical isolate of E. faecalis and testing by bioautography. The sample with better outcome in these tests was subjected to characterization by Gas Chromatography / Mass Spectrometry (G/MS) as well as the process of separation by column chromatography. RESULTS: Gallic acid was identified as a major compound in the samples analyzed. All samples were able to inhibit the growth of the microorganisms, with the exception of E. faecalis clinical isolate, in a concentration of ≤ 1.0 mg/mL and showed no cytotoxicity up to 22 SI. The ethanol extract absorbs less heat than their fractions. All samples exhibit exothermic peak compatible with the degradation of gallic acid. The fraction that showed the best antimicrobial activity was the hexane fraction (MIC = 0.125 mg / mL), subsequently used to perform the chromatography column and bioautography, resulting in 12 new subfractions. The fraction G showed a MIC lower than hexane fraction against E. faecalis, 0.063 mg/mL. GC/MS revealed the presence of β-sitosterol in the hexane fraction. The microparticle produced with a flow rate of 0.4 mL/min showed the highest encapsulation efficiency (88%) and better MIC (0.250 mg/mL and 0.500 mg/mL) to both E. faecalis, even with the lowest concentration of phytocompounds. Only the hydroalcoholic extract used for making the microparticles showed flavonoids (10.16 mg). The microparticle 4 absorbs more heat than all other samples, degrading more than the others. CONCLUSION: All tested samples from S. brasiliensis Engl. showed potential to be used as a basis for the development of dental products for combating oral infections. / INTRODUÇÃO: A busca de alternativas viáveis para o tratamento das infecções bucais é de suma importância, uma vez que a resistência aos antibióticos se tornou um grande problema para a ciência médica. OBJETIVO: Avaliar o potencial de extratos da casca da S. brasiliensis Engl. para desenvolvimento de produtos odontológicos. MÉTODOS: Os extratos etanólico e hidroalcóolico foram produzidos por maceração e ultrassom. A partição líquido-líquido foi realizada com hexano, clorofórmio e acetato de etila. A triagem fitoquímica foi feita através da solução de amostras com reagentes padrões para quantificação de metabólitos secundários. A identificação e quantificação do marcador químico foi realizado através da Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (HPLC). As micropartículas foram produzidas em um aparelho de spray dryer. A eficiência de encapsulação foi aferida através da diferença de leitura em espectrofotômetro do teor do extrato encapsulado e do teor encontrado na superfície das micropartículas. A degradação térmica foi observada por termogravimetria (TG) e analise térmica diferencial (DTA), em uma atmosfera de nitrogênio. Já o potencial citotóxico foi analisado com base no potencial hemolisante e do índice de seletividade (IS) das amostras. Além disso, a ação antibacteriana foi avaliada com base na concentração inibitória mínima (CIM) frente a cepas padrões ATCC de Streptococcus mutans, Streptococcus mitis, Streptococcus oralis, Streptococcus salivarius, Staphylococcus aureus e Enterococcus faecalis, bem como um isolado clínico de E. faecalis e do ensaio por bioautografia. A amostra com melhor resultado nesses ensaios foi submetida a caracterização por Cromatografia Gasosa/Espectrometria de Massa (GC/MS) bem como ao processo de separação por Cromatografia em Coluna. RESULTADOS: O ácido gálico foi identificado como composto majoritário nas amostras analisadas. Todas as amostras foram capazes de inibir o crescimento dos microrganismos testados, com exceção do isolado clínico de E. faecalis, em uma concentração ≤ 1,0 mg/mL e não apresentaram citotoxicidade com IS superior a 22. O extrato etanólico absorve menos calor do que as suas frações. Todas as amostras apresentam pico exotérmico compatível com a degradação do ácido gálico. A fração que apresentou melhor atividade antimicrobiana foi a fração hexano (CIM = 0,125 mg/mL), posteriormente utilizada para realização da Cromatografia em Coluna e bioautografia, resultando em 12 novas subfrações. A fração G apresentou CIM inferior à da fração hexano frente aos E. faecalis, 0,063 mg/mL. A GC/MS revelou a presença βSitosterol na fração hexano. A micropartícula produzida com vazão de 0.4 mL/min apresentou a maior eficiência de encapsulação (88%) e melhor CIM (0,250 mg/mL e 0,500 mg/mL) frente aos E. faecalis, mesmo apresentando a menor concentração de fitocompostos. Apenas o extrato hidroalcóolico utilizado para confecção das micropartículas apresentou flavonoides (10,16 mg). A micropartícula 4 absorve mais calor do que todas as outras amostras, se degradando mais que as demais. CONCLUSÃO: Todas as amostras testadas provenientes de S. brasiliensis Engl. apresentam potencial para serem utilizados como base para o desenvolvimento de produtos odontológicos para combater as infecções bucais.
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Desenvolvimento de uma formulação de uso intracanal com atividade antimicrobiana obtida a partir de uma planta do semiárido brasileiro / Development of a formulation of use intra root with antimicrobial activity got from a plant of brazilian semi-arid

Brandão, Deysiane Oliveira 17 February 2014 (has links)
Submitted by Jean Medeiros (jeanletras@uepb.edu.br) on 2016-03-02T18:19:59Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) PDF - Deysiane Oliveira Brandão.pdf: 3147875 bytes, checksum: 4e032a8ddfe55546168a4cf23c724b4c (MD5) / Approved for entry into archive by Secta BC (secta.csu.bc@uepb.edu.br) on 2016-06-13T20:33:36Z (GMT) No. of bitstreams: 2 PDF - Deysiane Oliveira Brandão.pdf: 3147875 bytes, checksum: 4e032a8ddfe55546168a4cf23c724b4c (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-13T20:37:48Z (GMT). No. of bitstreams: 2 PDF - Deysiane Oliveira Brandão.pdf: 3147875 bytes, checksum: 4e032a8ddfe55546168a4cf23c724b4c (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2014-02-17 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Due to the absence of a fully effective intracanal formulation, the search for new drugs from medicinal plants is necessary.In this case the Ximenia americana L., stink plant widely used in traditional medicine as antibacterial, may be used develop new formulations intracanal. However, there is no standardization of their extract by the pharmaceutical industry, with regard to studies of pre-formulation and standardization of analytical techniques to determine its safety, efficacy and quality. In this context, this study aimed to develop from X. americana L. one intracanal paste , with antimicrobial activity, applying parameters validation process for testing and microbiological potency determination of major chemical component, toxicological studies and drug excipient compatibility. Two types of extracts were obtained from the bark of X. American L, hydroalcoholic which was subsequently sprayed in spray dryer and that ethanol extract was concentrated on a rotary evaporator. For determination of antimicrobial activity, used the hidroalcólicos extracts applying the technique of agar / cylinder diffusion. Toxicological tests consisted in acute toxicity and cytotoxicity. Phytochemical analysis was based on quantitative determination of total polyphenols, total flavonoids, tannins condensed and total saponins. The major chemical compound was identified as gallic acid by high performance liquid chromatography efficiency as well as its determination, which was validated according to the official compendia. The validation of microbiological assay was performed X. American compared to standard (gallic acid). The study drug / excipient compatibility was accomplished by applying analytical techniques and term spectroscopy in the infrared region. X. American, showed activity against Staphylococcus aureus, Enterococcus faecalis, Streptococcus oralis and Klebsiella pneumoniae. As biosecurity, this plant showed no toxicity in the assays analyzed. Phytochemical analysis showed good concentrations of secondary metabolites. The marker was identified and quantified in the concentration of 12μg/mL. Regarding the microbiological assay, this presented, linearity, accuracy, precision, limits of detection and quantification and robustness. As for the compatibility study excipients that were incompatible in thermoanalytical techniques, spectroscopy, these incompatibilities were not as intense, with respect to removal of functional groups of excipients and the dry extract. Thus studies that show the development of a herbal medicine, as well as the characterization and standardization of the extract of X. American L are important because lack of official methodology that proves the quality, safety and efficacy of these products. / Devido a ausência de uma formulação intracanal totalmente eficaz, é necessária a pesquisa de novas medicações a partir de plantas medicinais. Nesse caso a Ximenia americana L., planta da catinga, amplamente utilizada pela medicina tradicional como antibacteriano, pode ser indicada para desenvolvimento de formulações intracanais. Todavia, não existe uma padronização do seu extrato pela indústria farmacêutica, no que diz respeito a estudos de préformulação e padronização de técnicas analíticas para determinação de sua segurança, eficácia e qualidade. Nesse contexto, com esse estudo pretendeu desenvolver a partir de X. americana L. uma pasta intracanal, com atividade antimicrobiana, aplicando parâmetros de validação de processo para os ensaios de potencia microbiológica, doseamento do componente químico majoritário, estudos toxicológicos e de compatibilidade fármaco excipiente. Foram obtidos dois tipos de extratos a partir da casca de X. americana L, hidroalcóolicos que posteriormente foi selecionado nebulizado em spray dryer e extrato etánolico que foi concentrado em evaporador rotativo. Para determinação, da atividade antimicrobiana, utilizou os extratos hidroalcólicos aplicando a técnica de difusão ágar/cilindros. Os ensaios toxicológicos consistiram na determinação da toxicidade aguda e citotoxicidade. A análise fitoquímica foi baseada na determinação quantitativa de polifenóis totais, flavonoides totais, taninos condensados e saponinas totais. O composto químico majoritário foi identificado como ácido gálico através da cromatografia líquida de alta eficiência, assim como seu doseamento, o qual foi validado de acordo com os compêndios oficiais. Foi realizado o processo de validação do doseamento microbiológico da X. americana em relação ao padrão (ácido gálico). O estudo de compatibilidade fármaco/excipiente foi realizado aplicando técnicas termo analíticas e espectroscopia na região do infravermelho. X. americana L, apresentou atividade contra Staphilococcus aureus, Enterococcus faecalis, Streptococcus oralis e Klebsiella pneumoniae. Quanto a segurança biológica, essa planta não apresentou toxicidade nos ensaios analisados. A análise fitoquímica demonstrou níveis aceitáveis de concentrações de metábólitos secundários. O marcador foi identificado e quantificado na concentração de 12µg/mL. Quanto ao doseamento microbiológico, esse apresentou linearidade, precisão exatidão, limites de detecção e quantificação e robustez dentro das especificações. Quanto ao estudo de compatibilidade os excipientes que foram incompatíveis nas técnicas termoanalíticas, na espectroscopia essas incompatibilidades não foram tão intensas, no que respeito a supressão de grupos funcionais dos excipientes e do extrato seco. Assim estudos que mostrem o desenvolvimento de um medicamento fitoterápico, bem como a caracterização e padronização do extrato de X. americana L\ são importantes, devido falta de metodologia oficial que comprove a qualidade, segurança e eficácia de destes produtos.
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Estudo fitoquímico e bioatividade de extratos de casearia javitensis kunth.

Wyrepkowski, Claudia Dantas Comandolli 15 December 2010 (has links)
Made available in DSpace on 2015-04-11T13:38:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Claudia Comandolli.pdf: 4289017 bytes, checksum: 2bef35ae167e04ceccfedeedc54fbb31 (MD5) Previous issue date: 2010-12-15 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / The objective of the present study was to evaluate the antimicrobial, antioxidant and cytotoxicity potentials of extracts of leaves and branches of Casearia javitensis, and to purify and identify their secondary metabolites. Leaves and branches were collected in Reserva Adolpho Ducke, Manaus, AM. The plant material was dried, grinded and the extracts were prepared with DCM, MeOH and water using ultrasound for 20 minutes each. The extracts were concentrated and tested for antibacterial, cytotoxicity and antioxidant activity. Antibacterial activity assays were done using the agar diffusion method by well technique, against Aeromonas hydrophila, Staphylococcus aureus, Escherichia coli and Pseudomonas aeruginosa. Minimum inhibitory concentration (MIC) and the minimum bactericidal concentration (MBC) were measured for the most active extracts. The cytotoxicity assay employed brine shrimp Artemia salina and the evaluation of antioxidant activity used a method with DPPH and ascorbic acid. DCM branches extract was fractioned in chromatographic column (CC), and recrystallization. Gas Chromatography-Mass Spectrometry (GC-MS) and Nuclear Magnetic Resonance (NMR) analyses afforded steroids, as β-sitosterol. DCM extracts of leaves and branches were analyzed by GC-MS in appropriated conditions to steroids and triterpenes analyses, and triterpene friedelin was detected in branches extracts. Antimicrobial assay showed high activity for branches MeOH extract and leaves MeOH extract against A. hydrophila, MIC value < 2 mg/mL and showed no cytotoxicity in Artemia salina. These MeOH extracts were dissolved in water and partitioned between dichloromethane (DCM), ethyl acetate (AcOEt) and n-buthanol (n-BuOH), and these phases were tested for antibacterial activity. The AcOEt phases were the most active, and showed high antimicrobial activity. The DCM phase from branches MeOH extract was fractioned by CC and afforded β-friedelanol. The AcOEt fraction of branches MeOH extract was fractioned by CC and some fractions were purified by HPLC, and afforded five phenolic glycosides, which structures are not yet determined. 1D and 2D-NMR and mass spectrometry analyses are still on progress. The n BuOH phase from branches MeOH extract was fractioned by exclusion chromatography (Sephadex LH-20) and subjected to CC over a Poliamide-6 column, and NMR analyses of one fraction suggest the presence of a phenolic glycoside. / O presente trabalho teve por objetivo isolar e identificar os metabólitos secundários presentes nos extratos de Casearia javitensis, assim como avaliar o potencial antimicrobiano, citotóxico e antioxidante destes extratos. Para o trabalho, foram realizadas quatro coletas na Reserva Adolpho Ducke, Manaus-AM. Os materiais coletados foram secos, moídos e extraídos em ultrassom com diclorometano (DCM), metanol (MeOH) e H2O. Para os testes antimicrobianos, utilizou-se o método de difusão em ágar, pela técnica de poço, contra Aeromonas hydrophila, Staphylococcus aureus, Escherichia coli e Pseudomonas aeruginosa. A Concentração Inibitória Mínima (CIM) e Concentração Mínima Bactericida (CMB) foram determinadas para os extratos mais ativos. O ensaio citotóxico utilizou Artemia salina como organismo-teste e o ensaio de atividade antioxidante empregou o método quantitativo utilizando o radical DPPH e equivalência com o ácido ascórbico. O extrato DCM dos galhos foi fracionado por coluna cromatográfica (CC) e uma fração foi purificada através de recristalização. Frações analisadas por Cromatográfo à Gas acoplado à Espectrometria de Massas (CG-EM) e Ressonância Magnética Nuclear (RMN) mostraram presença de esteroides, possuindo o β-sitosterol como majoritário nas frações. Os demais extratos DCM foram analisados por CG-EM em uma condição para análise de esteroides e triterpenos, e o triterpeno friedelina foi detectado nos extratos dos galhos. O extrato metanólico dos galhos da primeira coleta e o extrato metanólico das folhas da terceira coleta apresentaram halos de inibição superiores a 10 mm no teste contra Aeromonas hydrophila, CIM abaixo de 2 mg/mL e ausência de atividade citotóxica em Artemia salina. Estes extratos foram submetido à partição com diclorometano (DCM), acetato de etila (AcOEt) e n-butanol (n-BuOH), e as fases obtidas foram avaliadas para atividade antimicrobiana. As fases AcOEt destes extratos mostraram-se como as mais ativas, concentrando a atividade antimicrobiana. A fase DCM do extrato MeOH dos galhos foi fracionada por sucessivas CCs e uma fração mostrou a presença de β-friedelanol por análise em CG-EM. A fase AcOEt foi fracionada por CC e algumas frações foram purificadas por CLAE, fornecendo cinco fenólicos glicosilados, os quais a determinação estrutural ainda não está concluída, pois espectros de RMN mono e bidimensionais são necessários para a conclusão desta etapa. A fase n -BuOH foi fracionada em CC utilizando Sephadex LH-20 e CC de Poliamida-6, e o espectro de RMN de uma fração semipurificada sugere a presença também de fenólicos glicosilados.

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