SILVA, C. R. Avaliação in vitro da atividade antifúngica da β-lapachona frente a cepas de Candida spp. resistentes a derivados azólicos na forma planctônica e em isolados formadores de biofilme. 2016. 106 f. Tese (Doutorado em Microbiologia Médica) - Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2016. / Submitted by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2017-01-18T14:18:45Z No. of bitstreams: 1 2016_tese_crsilva.pdf: 2139615 bytes, checksum: c01276373b5208634c9333640fffcd4c (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2017-01-18T14:18:54Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_tese_crsilva.pdf: 2139615 bytes, checksum: c01276373b5208634c9333640fffcd4c (MD5) / Made available in DSpace on 2017-01-18T14:18:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_tese_crsilva.pdf: 2139615 bytes, checksum: c01276373b5208634c9333640fffcd4c (MD5) Previous issue date: 2016-07-12 / At the present time, a significant increase of opportunistic fungal infections is observed, mainly in immunocompromised patients. Candidiasis has been the most documented and are often associated with the formation of biofilms. Commercially available antifungal agents are restricted to a small number of drugs when compared to antibacterial agents. These facts, associated with the increase in the resistance frequency of Candida species, demonstrate the need to search for new therapeutic strategies, where natural products stand out. Several works have already demonstrated different biological activities of β-lapachone (naphthoquinone), including antifungal. Thus, the aim of the present study was to evaluate the antifungal potential of β-lapachone on the growth of Candida spp. Resistant to azole derivatives, in planktonic forms and biofilm, as well as to elucidate their possible mechanisms of action. For this, the evaluation of the anti-fungal effect of β-lapachone was performed on 22 strains of Candida spp. Using microdilution in broth. Subsequently, parameters such as cell viability, generation of reactive oxygen species (EROS), mitochondrial damage and phosphatidylserine externalization were evaluated by means of flow cytometric analysis and DNA damage by comet test, contributing to elucidation of the probable mechanism of Β-lapachone action. In addition, a protein expression profile was obtained by proteomic analysis in a representative C. albicans strain after treatment with the compound. And, finally, the cell viability of the biofilms was determined by the tetrazolium salt reduction (MTT) assay. According to the results, β-lapachone presented antifungal activity against strains of Candida spp. Azole resistant, with minimal inhibitory concentration (MIC) ranging from 4 - 16 μg / mL. Β-lapachone altered the permeability of the mitochondrial membrane, increased the intracellular levels of EROS, decreased cell viability in a dose-dependent manner, caused DNA damage and, consequently, led to cell death by apoptosis. Among the proteins identified, some are related to the translation process, energy metabolism, genetic processing and defense against reactive oxygen species. In relation to the biofilm assays, β-lapachone presented an effect on biofilm formed (24 hours), with the C. albicans isolate presenting a 50% reduction in concentrations of 2x MIC, 10x MIC and 50x MIC, while C. tropicalis and C In the concentrations of 10x MIC and 50x MIC (p <0.05). The use of subinhibitory concentrations was able to significantly reduce (p <0.05) the biofilm formation of Candida spp. Therefore, we conclude that β-lapachone is able to inhibit the in vitro growth of Candida spp. Resistant in both planktonic and biofilm forms suggesting that this compound molecule has the potential to act as an antifungal agent with apoptotic activity. / Nos dias atuais, observa-se um aumento significativo das infecções fúngicas oportunistas, principalmente em pacientes imunocomprometidos. A candidíase tem sido a mais documentada e muitas vezes estão associadas à formação de biofilmes. Os agentes antifúngicos disponíveis no mercado são restritos a um pequeno número de fármacos quando comparados aos agentes antibacterianos. Esses fatos associados ao aumento da frequência de resistência de espécies de Candida, demonstram a necessidade de buscar por novas estratégias terapêuticas, onde os produtos naturais se destacam. Diversos trabalhos já demonstram diferentes atividades biológicas de β-lapachona (naftoquinona), incluindo antifúngica. Assim, o objetivo do presente trabalho foi avaliar o potencial antifúngico da β-lapachona sobre o crescimento de Candida spp. resistentes a derivados azólicos, nas formas planctônicas e biofilme, bem como elucidar os seus possíveis mecanismos de ação. Para isso, a avaliação do efeito antifúngico da β-lapachona foi realizada em 22 cepas de Candida spp. utilizando microdiluição em caldo. Posteriormente, parâmetros como viabilidade celular, geração de espécies reativas de oxigênio (EROS), danos na mitocôndria e externalização de fosfatidilserina foram avaliados por meio de análises de citometria de fluxo e os danos ao DNA pelo teste do cometa contribuindo para elucidação do provável mecanismo de ação da β-lapachona. Além disso, por meio da análise proteômica foi obtido um perfil de expressão de proteínas em uma cepa representativa de C. albicans após tratamento com o composto. E, por fim, a viabilidade celular dos biofilmes foi determinada por meio do ensaio de redução do sal de tetrazólio (MTT). De acordo com os resultados obtidos, β-lapachona apresentou atividade antifúngica frente a cepas de Candida spp. resistentes a azólicos, com concentração inibitória mínima (CIM) variando entre 4 - 16 μg/mL. β-lapachona alterou a permeabilidade da membrana mitocondrial, aumentou os níveis intracelulares de EROS, diminuiu a viabilidade celular de forma dose-dependente, causou danos ao DNA e, consequentemente, conduziu morte celular por apoptose. Dentre as proteínas identificadas, algumas estão relacionadas com o processo de tradução, metabolismo energético, processamento genético e de defesa contra espécies reativas de oxigênio. Em relação aos ensaios de biofilmes, β-lapachona apresentou efeito sobre biofilme formado (24 horas), com o isolado de C. albicans apresentando redução de 50% nas concentrações de 2x CIM, 10x CIM e 50x CIM, enquanto C. tropicalis e C. parapsilosis nas concentrações de 10x CIM e 50x CIM (p < 0,05). O uso de concentrações subinibitórias foi capaz de reduzir significativamente (p < 0,05) a formação dos biofilmes de Candida spp. Portanto, conclui-se que β-lapachona é capaz de inibir o crescimento in vitro de Candida spp. resistentes a azólicos tanto na forma planctônica como em biofilme sugerindo que esta molécula composto tem potencial para agir como agente antifúngico com atividade apoptótica.

SILVA, R. A. C. Atividade anti-Candida in vitro dos inibidores seletivos da recaptação da serotonina frente às cepas resistentes ao fluconazol e sua atividade em isolados formadores de biofilme. 2016. 65 f. Dissertação (Mestrado em Microbiologia Médica) - Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2016. / Submitted by Carolinda Oliveira (ppgmm@ufc.br) on 2017-06-22T15:00:57Z No. of bitstreams: 1 Dissertação Rose Anny Costa Silva.pdf: 1272023 bytes, checksum: 6dd7a8c84dfdf985159d2f2d3458ef59 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2017-06-22T15:43:10Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação Rose Anny Costa Silva.pdf: 1272023 bytes, checksum: 6dd7a8c84dfdf985159d2f2d3458ef59 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-22T15:43:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação Rose Anny Costa Silva.pdf: 1272023 bytes, checksum: 6dd7a8c84dfdf985159d2f2d3458ef59 (MD5) Previous issue date: 2016-01-14 / It is known that candidiasis has been the most documented disease in different groups of patients with immunodeficiency, among all the opportunistic fungal infections diseases. Oftentimes, these infections are related to a biofilm formation, that can be originated from implanted biomaterials or reveal on the host surface. However, antifungal drugs available on the market are restricted and limited to a low number compared to antibacterial drugs. Adding this fact to the increase resistance of the genre Candida regarding the main treatment today, fluconazole, the need for a research on new therapeutic strategies is evident, from the learning of other molecules to non-classic use of already available medicine. Recent researches have revealed a wide antifungal activity of selective serotonin reuptake inhibitor (SSRIs), classic antidepressants. Aware of this context, the main goal is to evaluate antifungal potential of fluoxetine, sertraline, and paroxetine facing Candida spp. planktonic cells resistant to fluconazole, as well as its action mechanism and the viability of biofilms treated with fluoxetine. The evaluation of the antifungal effect on the SSRIs on 13 strains of Candida spp. was determined using broth microdilution technique (M27-A3). A sensibility evaluation of Candida spp. fungal biofilm within 24h of fluoxetine was made the colorimetric assay with the tetrazolium salt (MTT) assay in 96-well plates, defining then, the viability of sessile cells after treatment. By means of flow cytometry and comet assay analysis, damages on membrane, mitochondria and DNA, that contributed to the elucidation of the probable action mechanism of SSRIs on C. albicans representative strains were studied. All strains of Candida spp. resistant to fluconazole showed, after 24h, Minimum Inhibitory Concentration (MIC), which varied between 20 – 160 μg/mL for fluoxetine, 10 – 20 μg/mL for sertraline, and 10 – 100,8 μg/mL for paroxetine, concluding then, that all of them present antifungal activity within the tested range. According the data found, the SSRIs cause fungal death after plasmatic membrane and mitochondrial damages, which activate apoptotic-signalling pathways, resulting loss of cellular viability on dose-dependent form in each one of the tested drugs. Regarding the isolated biofilm formers, Candida parapsilosis presented MIC of approximately 40 μg/mL, C. albicans with 80 μg/mL, C. tropicalis and C. glabrata with 160 μg/mL when exposed to fluoxetine, this reduction was considered statistically significant at the cellular activity of the biofilm (P < 0.05). Therefore, it is concluded that SSRIs are capable of inhibit the growth in vitro of Candida spp.., both in planktonic form, as biofilm, inducing cellular death by apoptosis, this set of data acknowledge the great importance of antidepressant options for patients that compose risk groups for fungal infections. / Dentre as infecções fúngicas oportunistas, a candidíase tem sido aquela mais documentada nos diferentes grupos de pacientes portadores de imunodeficiências. Muitas vezes essas infecções estão associadas à formação de biofilme, tanto em biomateriais implantados no paciente, como na própria superfície do hospedeiro. No entanto, as drogas antifúngicas disponíveis no mercado são restritas a um pequeno número quando comparadas às antibacterianas. Este fato unido ao aumento da frequência de resistência do gênero Candida ao principal tratamento da atualidade, fluconazol, desmonstram a necessidade da busca por novas estratégias terapêuticas, que vão desde a descoberta de novas moléculas, até o uso não clássico de medicamentos já disponíveis no mercado. Trabalhos recentes têm demonstrado uma ampla atividade antifúngica dos inibidores seletivos da recaptação da serotonina (ISRSs), antidepressivos clássicos. Dentro desse contexto, o objetivo foi avaliar o potencial antifúngico da fluoxetina, sertralina e paroxetina frente às células planctônicas de Candida spp. resistentes ao fluconazol, bem como seu o mecanismo de ação, e ainda a viabilidade de biofilmes tratados com fluoxetina. A avaliação do efeito antifúngico dos ISRSs em 13 cepas de Candida spp. foi determinada pelo método de microdiluição em caldo (M27-A3). Para a avaliação da sensibilidade do biofilme fúngico de Candida spp. 24h a fluoxetina, utilizou-se o ensaio colorimétrico com o sal de tetrazólio (MTT) em placas de 96 poços, determinando a viabilidade das células sésseis após o tratamento. Por meio de análises de citometria de fluxo e teste do cometa, foram avaliados danos na membrana, mitocôndria e DNA, que contribuíram para elucidação do provável mecanismo de ação dos ISRSs em cepa representativa de C. albicans. As cepas de Candida spp. resistentes ao fluconazol após 24h apresentaram a Concentração Inibitória Mínima (CIM) que variou de 20 – 160 μg/mL para fluoxetina, 10 – 20 μg/mL para sertralina e 10 – 100.8 μg/mL para paroxetina, demonstrando assim, possuírem atividade antifúngica dentro da faixa testada. De acordo com os dados encontrados, os ISRSs causam morte fúngica após danos na membrana plasmática e mitocondrial, que ativam vias de sinalização apoptótica, causando a perda de viabilidade celular de forma dose-dependente em cada uma das drogas testadas. Em relação aos isolados formadores de biofilme, Candida parapsilosis apresentou CIM de aproximadamente 40 μg/mL, C. albicans de 80 μg/mL, C. tropicalis e C. glabrata de 160 μg/mL ao serem expostos a fluoxetina, sendo a redução considerada estatisticamente significativa na atividade celular do biofilme (P < 0,05). Diante desses resultados, conclui-se que os ISRSs são capazes de inibir o crescimento in vitro de Candida spp., tanto na forma planctônica, quanto de biofilme, causando morte celular por apoptose, sendo dados de grande importância na escolha clínica de antidepressivos para pacientes que se enquadram nos grupos de risco para infecções fúngicas.

SILVA, M. L. Q. Efeito inibitório, in vitro, do iodeto de potássio e da miltefosina frente a cepas do complexo Sporothrix schenckii em biofilme nas formas filamentosa e leveduriforme. 2017. 101 f. Dissertação (Mestrado em Microbiologia Médica) - Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2017. / Submitted by Carolinda Oliveira (ppgmm@ufc.br) on 2017-07-25T13:00:39Z No. of bitstreams: 1 2017_dis_mlqsilva.pdf: 3395668 bytes, checksum: 9d859dba369e701a53a5f7efc26ee845 (MD5) / Rejected by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com), reason: O arquivo não contém a ficha catalográfica on 2017-07-25T14:07:14Z (GMT) / Submitted by Carolinda Oliveira (ppgmm@ufc.br) on 2017-07-25T14:26:30Z No. of bitstreams: 1 2017_dis_mlqsilva.pdf: 2729686 bytes, checksum: d1a30aeaf4deef4c304eae181976aaa2 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2017-07-25T15:37:17Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_dis_mlqsilva.pdf: 2729686 bytes, checksum: d1a30aeaf4deef4c304eae181976aaa2 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-25T15:37:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_dis_mlqsilva.pdf: 2729686 bytes, checksum: d1a30aeaf4deef4c304eae181976aaa2 (MD5) Previous issue date: 2017-07-13 / The most infections are caused by microorganisms associated with biofilms and it has been recently demonstrated that dimorphic fungus, belonging the etiological agent of Sporotrichosis Sporothrix schenkii complex, is also able to form biofilm. Microorganisms when associated in biofilms may develop resistance to antibiotic therapy. The objective of this study was to evaluate the ability of S. schenckii complex yeasts to form biofilm, in vitro, as well as characterize the growth kinetics and susceptibility of filamentous and yeast biofilms to potassium iodode (KI) and miltefosine (MIL). Eighteen strains of S. schenckii complex (10 S. brasiliensis, 4 S. mexicana, 2 S. globosa and 2 S. schenckii sensu stricto) were used. For the formation of yeast biofilms, inoculums at the concentration of approximately 1 x 106 CFU / mL were used in 0.9% saline solution and maturation was done in RPMI medium. For the growth kinetics and sensitivity of biofilms, the techniques of metabolic activity and biomass evaluation were performed. For the planktonic sensitivity, the broth dilution technique was used, according to the CLSI methodologies. And for the biofilm morphology were evaluated by optical microscopy, SEM and confoval.The maturation time of yeast biofilms was, in average, 96 h. Results showed that KI and MIL had an inhibitory effect against all strains, in planktonic form (filamentous and yeast phases). The MICvalues ranged from 62.5 to 250 mg/mL for KI and from 0.125 to 4 μg/mL for MIL. Afterward, drugs were tested against mature biofilms of Sporothrix spp., at following concentrations: MIC, 10 x MIC and 50 x MIC.The metabolic activity and biomass of filamentous biofilms was inhibited by KI (10 x MIC) with a meanof 75.4%and MIL (50xMIC) inhibited, on average, 55.1%. For biofilms in yeast phase, the mean inhibition for KI (10 x MIC) and MIL (50 x MIC) was 67.7% and 51.6%, respectively. This study demonstrated that strains of various species of S. schenckii complex in yeast phase are able to form biofilm in vitro, and that potassium iodide and miltefosine have an inhibitory effect against filamentous and yeast biofilms. / Sabe-se que a maior parte das infecções são ocasionadas por microrganismos associados em biofilme e estudos demonstram que o fungo dimórfico, pertencente ao complexo Sporothrix schenkii, agente etiológico da esporotricose, também é capaz de formar biofilme. Os micro-organismos quando associados em biofilme, podem desenvolver resistência aos antimicrobianos. O objetivo desde estudo foi avaliar a capacidade do complexo S. schenckiide formar biofilme na forma leveduriforme,in vitro, assim como caracterizar a cinética de crescimento e a sensibilidade dos biofilmes na forma filamentosa e leveduriforme ao iodeto de potássio (KI) e à miltefosina (MIL). Foram utilizadas 18 cepas do complexo S. schenckii (10 S. brasiliensis, 4 S. mexicana, 2 S. globosa e 2 S. schenckii stricto sensu). Para a formação dos biofilmes leveduriformes foram utilizados inóculos na concentração de aproximadamente 1 x 106 UFC/mL em solução salina 0,9% e a maturação foi feita em meio RPMI. Para a cinética de crescimento e a sensibilidade dos biofilmes foram realizadas as técnicas de atividade metabólica e avaliação da biomassa. Para a sensibilidade plânctônica foi utilizada a técnica de diluição em caldo, conforme metodologias do CLSI.E para a morfologia dos biofilmes foram avaliadas pela microscopia óptica, MEV e confoval. O tempo de maturação dos biofilmes leveduriformes, foram em média de 96 h. Os resultados mostraram que KI e MIL tiveram efeito inibitório frente a todas as cepas, na forma planctônica, nas formas filamentosa e leveduriforme. Os valores de CIM variaram de 62,5 a 250 mg/mL para KI e de 0,125 a 4 µg/mL para MIL. Em seguida testou-se as drogas frente aos biofilmes maduros de Sporothrix spp., nas concentrações de CIM, 10xCIM e 50xCIM. Aatividade metabólica e a biomassa dos biofilmes filamentosos, foi inibida pelo KI (10xCIM) com média de 75,4%e a MIL(50xCIM) inibiu em média,55,1%. Para os biofilmes na forma leveduriforme, a média de inibição para KI (10 x CIM)e MIL (50 x CIM) foi de 67,7% e 51,6%, respectivamente. Este estudo demostrou que as cepas das diversas espécies do complexo S.schenckii na forma leveduriforme são capazes de formar biofilme in vitro, e que o iodeto de potássio e a miltefosina possuem efeito inibitório frente aos biofilmes filamentosos e leveduriformes.

ALVES, A. M. C. V. Mecanismo da atividade antifúngica do fator de necrose tumoral (TNF) frente ao biofilme de Candida albicans. 2017. 109 f. Tese (Doutorado em Microbiologia Médica) - Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2017. / Submitted by Carolinda Oliveira (ppgmm@ufc.br) on 2017-08-08T12:00:12Z No. of bitstreams: 1 2017_tese_amcvalves.pdf: 19833367 bytes, checksum: 500dbfc823adc7ee044a02d49c562ea6 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2017-08-08T13:27:13Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_tese_amcvalves.pdf: 19833367 bytes, checksum: 500dbfc823adc7ee044a02d49c562ea6 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-08T13:27:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_tese_amcvalves.pdf: 19833367 bytes, checksum: 500dbfc823adc7ee044a02d49c562ea6 (MD5) Previous issue date: 2017-07-11 / Candida albicans is a polymorphic fungus and has as main virulence factor the biofilm formation,particularly, in prosthetic materials and host surfaces of immunosuppressed patients, causing life-threatening infections. Tumor necrosis factor (TNF) is a pleiotropic cytokine that has several functions in the defense mechanisms of the host, among which promote inflammation and, consequently, inhibit the growth of microorganisms. In protozoa, TNF can affect the growth of these through their lectin domains that are spatially distinct from TNF receptors. To our knowledge, a direct TNF effect on yeasts, which lack TNF receptors, has never been reported. Thus, the present study aims to demonstrate that TNF affects the in vitro growth of Candida albicans through a mechanism independent of the TNF receptor. For this, four strains biofilm producerCandida albicans(two strong producer and two weak producer) were cultured in the presence or absence of TNF solutions. Susceptibility to TNF was evaluated using the broth microdilution method. Biofilms were grown on 96-well microtitre plates and evaluated using XTT (2,3-Bis-(2-Methoxy-4-Nitro-5-Sulfophenyl)- 2H-Tetrazolium-5-Carboxanilide) assay, optical, confocal and scanning and transmission electron microscopy.Biochemical biofilm characteristics such as protein quantification and hydrophobicity index (HI) were also evaluated.Thus,it was observed thatTNF did not alter Candida albicans planktonic growth. However, TNF dose-dependently inhibited growing but not established biofilm development, virtually halting yeast filamentation. Preincubation with the TNF antibody adalimumab but not with the immunoglobulin G coupled TNF soluble receptor etanercept blocked TNF activity. Preincubation with the carbohydrate N,N’-diacetylchitobiose, a major component of the yeast cell wall, that binds to TNF lectin domain, abrogated TNF effect against Candida albicans growing biofilm. In conclusion, this is the first demonstration of a receptor independent TNF and no mammalian cells activity, on other words, direct effect against C. albicans biofilm growth. Blockade of TNF effect by N,N’-diacetylchitobiose suggests that it is mediated via the lectin domain of the cytokine. / A Candida albicans é um fungo polimórfico que exprime como principal fator de virulência a formação de biofilmes, especialmente, em implantes médicos na superfícies de pacientes imunossuprimidos, causando infecções potencialmente fatais. O fator de necrose tumoral (TNF) é uma citocina pleitrópicaque denota diversas funções nos mecanismos de defesa do hospedeiro, dentre os quais promover a inflamação e, consequentemente, inibir o crescimento de microrganismos. Em protozoários, o TNF pode afetar o crescimento destes por meio dos seus domínios semelhante à lectina, espacialmente distintos dos receptores de TNF. No conhecimento que se tem, não há relatos de um efeito TNF direto em leveduras, que não possuem receptores de TNF. Assim, este trabalho objetivou demonstrar que o TNF afeta o crescimento in vitro de Candida albicanspor meio de um mecanismo independente do receptor de TNF. Para tal, quatro cepas de Candida albicans produtoras de biofilme (duas fortes e duas fracas formadoras) foram cultivadas na presença ou ausência de soluções de TNF. A susceptibilidade ao TNF foi avaliada utilizando o método de microdiluição em caldo. Os biofilmes foram cultivados em placas de 96 poços e avaliados empregando ensaio de redução de sal de XTT (2,3-Bis- (2-Metoxi-4-Nitro-5-Sulfofenil) -2H-Tetrazolium-5-Carboxanilida), microscopia óptica de campo claro, microscopia confocal e microscopia eletrônica de varredura e de transmissão. Também foram avaliada características bioquímicas do biofilme, como quantificação de proteína e o índice de hidrofobicidade (IH). Assim, foi observado que o TNF não alterou o crescimento planctônico de Candida albicans. O TNF inibiu, contudo, de maneira dose-dependente, a formação de biofilme,por intermédio da modulação da transição de hifa-filamento. A pré-incubação com o anticorpo contra TNF, adalimumab, mas não com o receptor solúvel de TNF acoplado a imunoglobulina G, etanercept,causou um bloqueioda atividade do TNF. A pré-incubação com o carboidrato N, N'-Diacetilquitobiose, um dos principais componentes da parede celular da Candida albicans, que se liga ao domínio semelhante à lectina do TNF, bloqueou o efeito do TNF contra o crescimento de biofilme de Candida albicans.Em conclusão, esse é o primeiro trabalho que demosntra um efeito direto do TNFcontra a formação do biofilme de Candida albicans, ou seja, sem a participação de seus receptores clássicos ou células mamíferas. O bloqueio do efeito do TNF pela N, N'-diacetilquitobiose sugere que este efeito é mediado por meio de um domínio lectina da citocina.

MAIA, Débora Castelo Branco de Souza Collares. Resistência a azólicos em Candida spp. de origem veterinária : um fenômeno mediado por bombas de efluxo. 2011. 96 f. Tese (Doutorado em Microbiologia Médica) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2011. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2013-06-21T13:21:06Z No. of bitstreams: 1 2011_tese_dcbscmaia.pdf: 11337827 bytes, checksum: 71831af2ac35a7737a7aa959434484ef (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes(erikaleitefernandes@gmail.com) on 2013-06-24T12:44:20Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2011_tese_dcbscmaia.pdf: 11337827 bytes, checksum: 71831af2ac35a7737a7aa959434484ef (MD5) / Made available in DSpace on 2013-06-24T12:44:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011_tese_dcbscmaia.pdf: 11337827 bytes, checksum: 71831af2ac35a7737a7aa959434484ef (MD5) Previous issue date: 2011 / Monitoring of the antifungal susceptibility of Candida species from veterinary sources is a recent practice and the mechanisms involved in antifungal resistance have not been completely elucidated. Considering that the antifungal arsenal is limited and that antifungal resistance has become more frequent, the comprehension of this phenomenon and the pursuit for therapeutic alternatives are necessary. Thus, the present work aimed at monitoring the in vitro susceptibility of Candida spp. isolated from animals, with emphasis on efflux pump-mediated azole resistance and on the evaluation of the effect of the imidazole levamisole on the growth of these yeasts. For such, in a first approach, 126 Candida isolates (19 C. albicans, 17 C. famata, 5 C. guilliermondii, 8 C. krusei, 29 C. parapsilosis, 48 C. tropicalis), out of which 22 were recovered from raptors, 32 from cactus parakeets, 56 from Amazon parrots, 7 from blue-and-gold macaws and 3 from a Brazilian porcupine. All isolates were submitted to broth microdilution test against amphotericin B, itraconazole and fluconazole, according to the methodology recommended by the Clinical Laboratory Standards Institute (document M27-A3). The MICs ranged from 0.03125 to 2 µg/mL, 0.125 to 250 µg/mL and 0.03125 to 125 µg/mL for amphotericin B, fluconazole and itraconazole, respectively. Out of 126 evaluated isolates, 33 (26.2%) were resistant to azoles, with 7 (5.6%) isolates resistant to fluconazole, 1 (0.8%) isolate resistant to itraconazole and 24 (19%) resistant to both drugs. In a second approach, all these azole resistant isolates, plus 20 C. albicans and 3 C. tropicalis that were recovered from our collection of resistant yeasts from veterinary sources, were submitted to the efflux pump inhibition assay with promethazine, with a total of 56 azole resistant isolates. Thus, MICs for fluconazole and itraconazole significantly reduced from 2 to 250 times for fluconazole and from 16 to 4000 times for itraconazole. The antifungal activity of levamisole against 12 C. albicans, 12 C. krusei, 12 C. parapsilosis and 12 C. tropicalis, was also evaluated, and MICs and minimum fungicidal concentrations varying from 0.58 to 2.34 mg/mL and from 2.34 to 9.37 mg/mL were obtained, respectively. Parallelly, it was demonstrated that levamisole significantly inhibits biofilm formation and interferes with the maintenance of mature biofilms. These data show that azole resistance is partially mediated by efflux-pumps and demonstrate the antifungal potential of the imidazole levamisole and its capacity of inhibiting the biofilm of strains of Candida spp. from animals. / O monitoramento da sensibilidade antifúngica em espécies de Candida de origem veterinária é uma prática recente e os mecanismos envolvidos ainda não foram completamente elucidados. Considerando que o arsenal de drogas antifúngicas é limitado e que o fenômeno de resistência tem se tornado mais freqüente, a compreensão deste fenômeno e a busca por alternativas terapêuticas se fazem necessárias. Dessa forma, o presente trabalho teve como objetivo monitorar a sensibilidade in vitro de Candida spp. oriundas de animais, com ênfase na resistência aos azólicos mediada por bombas de efluxo e na avaliação da atividade do imidazólico levamisol sobre o crescimento destas leveduras. Para tanto, em um primeiro momento, foram avaliados 126 isolados de Candida, sendo 19 C. albicans, 17 C. famata, 5 C. guilliermondii, 8 C. krusei, 29 C. parapsilosis, 48 C. tropicalis, dos quais 22 foram isolados de rapinantes, 32 de periquitos do sertão, 56 de papagaios, 7 de araras canindé e 3 de um ouriço-cacheiro. Todas as cepas foram submetidas ao teste de microdiluição em caldo, ante a anfotericina B, itraconazol, fluconazol, segundo metodologia padronizada pelo Clinical Laboratory Standards Institute (documento M27-A3). As concentrações inibitórias mínimas (CIMs) variaram de 0,03125 a 2 µg/mL, 0,125 a 250 µg/mL e de 0,03125 a 125 µg/mL para anfotericina B, fluconazol e itraconazol, respectivamente. Dos 126 isolados avaliados por microdiluição, 33 (26,2%) foram resistentes aos azólicos, sendo 7 (5,6%) resistentes somente a fluconazol, 1 (0.8%) resistente somente ao itraconazol e 24 (19%) resistentes a ambas as drogas. Em um segundo momento, todas estas cepas resistentes aos derivados azólicos, mais 20 C. albicans e 3 C. tropicalis resgatadas da nossa coleção de leveduras resistentes de origem veterinária, foram submetidas ao teste de inibição de bomba de efluxo com prometazina, perfazendo um total de 56 cepas resistentes a azólicos. Dessa forma, as CIMs de fluconazol e itraconazol sofreram reduções significativas de 2 a 250 e de 16 a 4000 vezes, respectivamente. Investigou-se, ainda, a atividade antifúngica do levamisol contra 12 C. albicans, 12 C. krusei, 12 C. parapsilosis e 12 C. tropicalis, sendo obtidas CIMs e concentrações fungicidas mínimas que variaram de 0,58 a 2,34 mg/mL e de 2,34 a 9,37 mg/mL, respectivamente. Paralelamente, foi demonstrado que o levamisol inibe a formação do biofilme de C. albicans e C. tropicalis, bem como interfere na manutenção do biofilme maduro. Os dados apontam que a resistência aos derivados azólicos é, pelo menos em parte, mediada por bombas de efluxo, bem como demonstram o potencial antifúngico do imidazólico levamisol e sua capacidade de inibir o biofilme de cepas de Candida spp. oriundas de animais.

TEIXEIRA, Carlos Eduardo Cordeiro. Atividade da molécula tirosol, vancomicina e antibióticos beta-lactâmicos sobre o crescimento de candida spp. resistentes a derivados azólicos, na forma planctônica e biofilme. 2014. 89 f. Tese (Doutorado em Microbiologia Médica) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2014. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2014-10-30T13:42:32Z No. of bitstreams: 1 2014_tese_cecteixeira.pdf: 1553025 bytes, checksum: cad7f840141b7e35baf6ae48c8dcfc6e (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2014-10-30T13:43:10Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_tese_cecteixeira.pdf: 1553025 bytes, checksum: cad7f840141b7e35baf6ae48c8dcfc6e (MD5) / Made available in DSpace on 2014-10-30T13:43:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_tese_cecteixeira.pdf: 1553025 bytes, checksum: cad7f840141b7e35baf6ae48c8dcfc6e (MD5) Previous issue date: 2014 / Diversos são os relatos de resistência in vitro de cepas de Candida spp a fármacos antifúngicos, em especial a derivados azólicos A produção de biofilme é um importante fator de virulência e traz grandes repercussões clínica devido ao aumento da resistência à terapia antifúngica Deste modo a prospecção de novos compostos com propriedade antifúngica se faz necessária Alguns estudos têm evidenciado a atividade das moléculas de quorum-sensing farnesol e tirosol e de antibióticos beta-lactâmicos e glicopeptídeos contra espécies de Candida. Por conseguinte o objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da molécula quorum-sensing tirosol associados ou não a antifúngicos clássicos e dos antimicrobianos vancomicina meropenem cefepime e piperacilina-tazobactam sobre o crescimento de Candida spp resistentes a derivados azólicos nas formas planctônicas e em biofilme Para tanto foram utilizadas cepas de C albicans (n=10) e C tropicalis (n=10) A concentração inibitória mínima (CIM) foi determinada por meio da técnica de microdiluição preconizada pelo CLSI Adicionalmente foi investigada a ação do tirosol e dos antibacterianos sobre o biofilme em formação e maduro de Candida spp As CIM´s para tirosol variaram de 2,5 a 5 mM e para os antibióticos variaram de 500 a 2000 µg/mL para ambas as espécies Foi observado efeito sinérgico na associação entre itraconazol e tirosol (18/20 cepas) e entre o fluconazol e tirosol (18/20 cepas) enquanto a associação anfotericina B e tirosol apresentou sinergismo em 5 cepas de C tropicalis e 6 cepas de C albicans O tirosol isolado apresentou efeito sobre a formação de biofilme de ambas as espécies na concentração 50XMIC (P<0,0001) Em relação ao efeito do tirosol sobre biofilme formado observou-se um aumento na concentração 10XMIC e uma diminuição na concentração 50XMIC A combinação entre tirosol e drogas antifúngicas apresentou um aumento na atividade do biofilme maduro diretamente proporcional á concentração testada quando o tirosol foi associado a derivados azólicos e uma diminuição quando associado com anfotericina B Todos os antibacterianos apresentaram efeito estatisticamente significativo sobre o biofilme em de Candida spp em formação (P<0,0001) Em relação ao efeito dos antibióticos vancomicina meropenem piperacilina/tazobactam e cefepime sobre o biofilme formado de Candida spp foram observadas reduções estatisticamente significativa na atividade celular nas concentrações MIC/10 (P<0,0001) MIC (P<0,0001) 10XMIC (P<0,0001) e 50XMIC (P<0,0001) Este estudo apresenta uma possível ação do tirosol isolado ou combinado com drogas antifúngicas e de antibacterianos sobre Candida spp na forma planctônica e em biofilme

LIMA, Rita Amanda Chaves de. Estudos dos fungos dimórficos Coccidioides posadasii e Histoplasma capsulatum var. capsulatum : caracterização laboratorial com ênfase no perfil de sensibilidade ao sesquiterpeno farnesol, in vitro. 2013. 115 f. Tese (Doutorado em Microbiologia Médica) – Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2013. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2015-10-26T12:57:33Z No. of bitstreams: 1 2013_tese_raclima.pdf: 2195497 bytes, checksum: 24056eb6ed524c6317a8f30e993f565e (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2015-10-26T13:29:17Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_tese_raclima.pdf: 2195497 bytes, checksum: 24056eb6ed524c6317a8f30e993f565e (MD5) / Made available in DSpace on 2015-10-26T13:29:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_tese_raclima.pdf: 2195497 bytes, checksum: 24056eb6ed524c6317a8f30e993f565e (MD5) Previous issue date: 2013 / Dimorphic fungi Coccidioides spp. and Histoplasma capsulatum var. capsulatum are the causative agents of coccidioidomycosis and histoplasmosis, respectively, being able to affect humans and other animals. The population genetics of H. capsulatum var. capsulatum ha ve been characterized worldwide. However, there are few studies of g enetic variability for Coccidioides spp., especially in isolates from Brazil. In general, antifungal therapy is effective against these mycoses, although in chronic or disseminated cases , the treatment is often prolonged and difficult to tolerate. Moreover , recurrence and refractory cases have been reported. Recently, it was demonstrated that H. capsulatum is able t o form biofilm. Little is known about the role of this mechanism in the pathogenesis of histoplasmosis and no report on the antifungal susceptib ility of H. capsulatum in biofilm was described to date. In search for new compounds with antifungal activity, the sesquiterpene farnesol has gained prominence for their inhibitory effect on the growth of bacteria and fungi. Considering the above, this stu dy aimed to perform molecular characterization of Brazilian isolates of C. posadasii , as well as, to determine the in vitro effect of farnesol against dimorphic fungi C. posadasii and H . capsulatum var . capsulatum , assessing its effect on fungal growth, sensitivity to antifungal agents, cell permeability, production of ergosterol and in biofilm growth. Thus, strains of C. posadasii were evaluat ed using the techniques of RAPD, M13 - fingerprinting . M acrodilution method was used to determine the min imum inhibitory concentration ( MIC) of farnesol alone and in combination with antifungals . C. posadasii was also subjected to quantification of ergosterol after exposure to sub - inhibitory concentrations of farnesol. In addition , farnesol activity against C. posadasii was also evaluated in the presence of osmotic stress induced by the addition of NaCl to the culture medium during the susceptibility test. Finally, H. capsulatum strains were evaluated in filamentous and yeast phase by microdilution method with farnesol alone and in combination with antifungals. The antifungal susceptibility of these drugs was also evaluated against H. capsulatum in a biofilm. The results of RAPD and M13 - fingerprinting showed similar electrophoretic profiles, showing few polymorphism s among the isolates . F arnesol exhibited low MIC values , ranging from 0.0078 to 0.0616 μ M for C. posadasii and 0.0078 to 0.0312 μM for H. capsulatum . Combinati ons of farnesol with antifungal showed synergistic effects (FIC I ≤ 0.5) in both species Quantification of ergosterol showed that exposure to sub - inhibitory concentrations of farnesol decreased the amount of ergosterol extracted from fungal cells and MIC's lower been found to farnesol when the strains were subjected to osmotic stress, indicating that this compound acts on the membrane fungal . Combinations of farnesol with itraconazole and amphotericin B showed the highest reduction percentages of fungal growth in biofilm . In conclusion, farnesol drug showed promising r esults as antifungal agent against C. posadasii and H. capsulatum , presenting adjuvant action and increasing sensitivity to antifungal agents in vitro . Furthermore, this study contributes to the characterization of the sensitivity profile of the biofilm of H. capsulatum in vitro as well as for genetic characterization of isolates of C. posadasii from Brazil / Os fungos dimórficos Coccidioides spp. e Histoplasma capsulatum var. capsulatum, são os agentes causadores da coccidioidomicose e da histoplasmose, respectivamente, sendo capazes de acometer o homem e outros animais. A genética das populações H. capsulatum var. capsulatum têm sido caracterizadas mundialmente. Contudo, para Coccidioides spp. ainda há escassez de estudos de variabilidade genética, especialmente em isolados do Brasil. De modo geral, a terapia antifúngica contra essas micoses é efetiva, embora em quadros crônicos ou disseminados, o tratamento seja muitas vezes, prolongado e difícil de tolerar. Ademais, casos refratários e recidivos já foram descritos. Recentemente, foi demonstrada a capacidade de H. capsulatum de formar biofilme. Pouco se sabe sobre qual o papel desse mecanismo na patogênese da histoplasmose e nenhum relato sobre a sensibilidade à antifúngicos de H. capsulatum em biofilme, foi descrito até o momento. Na busca por novos compostos com atividade antifúngica, o sesquiterpeno farnesol tem se destacado por seu efeito inibitório sobre o crescimento de bactérias e fungos. Diante do exposto, este trabalho teve por objetivo realizar a caracterização molecular de isolados brasileiros de C. posadasii, bem como, determinar o efeito in vitro do farnesol ante aos fungos dimórficos C. posadasii e H. capsulatum var. capsulatum, avaliando sua atuação sobre o crescimento fúngico, sensibilidade aos antifúngicos, permeabilidade celular, produção de ergosterol e sobre o crescimento em biofilme. Para tanto, cepas de C. posadasii foram avaliadas por meio das técnicas de RAPD e M13-fingerprinting. O método de macrodiluição foi utilizado para determinar a concentração inibitória mínima (CIM) de farnesol isolado em combinações com antifúngicos. C. posadasii também foi submetido quantificação do ergosterol após a exposição concentrações sub-inibitórias de farnesol. Ademais, a atividade do farnesol ante C. posadasii também foi avaliada na presença de estresse osmótico, induzido por adição de NaCl ao meio de cultura, durante os ensaios de sensibilidade. Por fim, cepas de H. capsulatum foram avaliadas na fase filamentosa e na fase leveduriforme, pelo método de microdiluição com farnesol isolado e em combinação com antifúngicos. A sensibilidade antifúngica destas drogas também foi avaliada ante H. capsulatum sob a forma de biofilme. Os resultados de RAPD e M13-fingerprinting mostraram perfis eletroforéticos semelhantes, mostrando poucos polimorfismos entres os isolados. O farnesol exibiu valores de CIMs baixos, variando de 0,0078-0,0616 µM para C. posadasii e de 0,0078-0,0312 para H. capsulatum. As combinações de farnesol com antifúngicos mostraram efeitos sinérgicos (FICI ≤ 0,5) em ambas as espécies. A quantificação de ergosterol, mostrou que a exposição a concentrações sub-inibitórias de farnesol diminuiu a quantidade de ergosterol extraído das células fúngicas e CIM’s mais baixos foram encontrados para o farnesol quando as cepas foram submetidas a estresse osmótico, indicando que esse composto atua na membrana fúngica. As combinações de farnesol com itraconazol e com anfotericina B apresentaram as maiores porcentagens de redução do crescimento fúngico em biofilme. Em conclusão, o farnesol apresentou resultados promissores como agente antifúngico ante C. posadasii e H. capsulatum, apresentando também ação adjuvante aumentando a sensibilidade aos antifúngicos in vitro. Ademais, este estudo contribuiu para caracterização do perfil de sensibilidade do biofilme de H. capsulatum in vitro, bem como para caracterização genética dos isolados de C. posadasii do Brasil.

ARRUDA, Theodora Thays Prado. Perfil de sensibilidade de cepas planctônicas e biofilmes de enterococcus faecalis frente a desafios antimicrobianos. 2007. 141 f. Dissertação (Mestrado em Microbiologia Médica)- Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2007. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2012-01-05T16:48:36Z No. of bitstreams: 1 2007_dis_ttparruda.pdf: 3211660 bytes, checksum: 8202e4aa912c156153c5126023e376da (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2012-02-01T14:26:22Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2007_dis_ttparruda.pdf: 3211660 bytes, checksum: 8202e4aa912c156153c5126023e376da (MD5) / Made available in DSpace on 2012-02-01T14:26:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2007_dis_ttparruda.pdf: 3211660 bytes, checksum: 8202e4aa912c156153c5126023e376da (MD5) Previous issue date: 2007 / Enterococcus faecalis has been suggested to be an important etiological agent in endodontic failure. It has been found in the root canal system in a perceptual ranging from 22% to 77% and it has been associated to organisms structured in biofilms. The aim of the present study was to evaluate, in vitro, the effectiveness of endodontic sealers, 2.5% sodium hypochlorite, and 0.5% Lippia sidoides essential oil in eliminating E. faecalis biofilms. Clinical material was collected from 37 patients with root canal chronic infections and 14 Enterococcus faecalis strains were isolated (37.8%). Biofilms from a reference (ATCC) and a clinical multirresistant strain (isolate 12 ) were grown for 8 days. This period was selected based on a chronological study of the Enterococcus faecalis biofilm development through Atomic Force Microscopy. It was verified that there was a significant reduction of the bacteria number when the biofilms were exposed to the endodontic sealers related to the control for the two tested strains (p<0.001). Analyzing the ATCC strain, it was seen that the Epiphany® endodontic sealer presented similar action compared to Endofill® (p>0.05), similar result was found for Isolate 12. When the strains susceptibilities against the sealers was compared it was verified that the isolate 12 was less susceptible than the ATCC strain (p<0.001). It was verified that the 0.5% essential oil solution of Lippia siodides presented a similar action to 2.5% sodium hypochlorite when the biofilm of ATCC strain and isolate 12 were exposed for 10 minutes to this substances (p<0.001). Comparing the susceptibility of the two strains to the solutions tested, there was no difference between them (p>0.05) / Enterococcus faecalis foi sugerido como sendo um importante agente etiológico do insucesso endodôntico. Foi encontrado no sistema de canais radiculares em um percentual de 22% a 77% e foi associado com a formação de estruturas chamadas biofilmes. O objetivo do presente estudo foi avaliar, in vitro, a efetividade de cimentos endodônticos, hipoclorito de sódio a 2,5% e solução do óleo essencial da Lippia sidoides a 0,5% na eliminação de biofilmes de E. faecalis. Material clínico foi coletado de 37 pacientes com infecções crônicas do canal radicular e 14 cepas de Enterococcus faecalis foram isoladas (37,8%). Biofilmes de uma cepa de coleção de cultura (ATCC) e de uma cepa clínica multiresistente (Isolado 12) foram incubados por 8 dias. Esse período foi selecionado baseado em estudo cronológico do desenvolvimento de biofilmes de Enterococcus faecalis através de Microscopia de Força Atômica. Foi verificado que houve uma redução significativa no número de bactérias quando os biofilmes foram expostos aos cimentos endodônticos em relação ao controle para as duas cepas testadas (p<0.001). Analisando a cepa ATCC, foi verificado que o cimento endodôntico Epiphany® apresentou ação similar ao cimento Endofill® (p>0.05); resultado semelhante foi encontrado para o isolado 12. Quando a susceptibilidade das cepas frente aos cimentos endodônticos foi comparada verificou-se que o Isolado 12 foi menos susceptível comparado à cepa ATCC (p<0.001). Observou-se que a solução do óleo essencial de Lippia siodides a 0,5% apresentou ação similar ao hipoclorito de sódio a 2,5% quando os biofilmes das duas cepas foram expostos por 10 minutos a essas substâncias (p<0.001). Comparando a susceptibilidade das duas cepas às soluções testadas, não houve diferença entre elas (p>0.05)

MORAIS, Weslanny de Andrade. Propriedades físico-químicas e antibacterianas da incorporação de micropartículas poliméricas carregadas com clorexidina em cimento ionômero de vidro. 2015.59 f. Dissertação (Mestrado em Odontologia) - Faculdade de Farmácia, Odontologia e Enfermagem, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2015. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2016-03-01T13:31:32Z No. of bitstreams: 1 2015_dis_wamorais.pdf: 1337940 bytes, checksum: b2a283001e782904459a19acd130aabe (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2016-03-01T13:46:15Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_dis_wamorais.pdf: 1337940 bytes, checksum: b2a283001e782904459a19acd130aabe (MD5) / Made available in DSpace on 2016-03-01T13:46:15Z (GMT). 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The experimental groups were prepared with the addition of 1% CHX in their free or microencapsulated forms into GIC, and the control group had no CHX incorporation, constituting the following groups: GIC (control), DA, DG, MPDA and MPDG. Stability of CHX, Fourier transform infrared spectroscopy, CHX cumulative release (%) and scanning electron microscopy (SEM) analysis were performed, followed by physic testing of setting time, flowability and compressive strength. For antibacterial effect determination, S. mutans was inoculated in culture medium tryptone soy broth supplemented with yeast extract and 1% sucrose by forming biofilms over the specimens up to 5 days. After 24 h of initial adhesion and subsequent 1-day intervals, the number of colony forming units (CFU/ml) of the biofilm formed on freshly prepared samples (after 24 h of setting time- immediate group) and samples aged in water at 37 °C for 15 days (aged group) was determined. Statistical analysis for physicochemical tests and antibacterial effect were performed by analysis of variance (ANOVA) and Mann Whitney test, both followed by post-hoc tests at a pre-set 5% significant level. Results: DG in solution in GIC presence was more stable at room temperature and at 37 °C when compared to DA. FTIR analysis didn’t indicate chemical reaction between GIC and CHX in tested concentrations. Microencapsulated formulations have increased setting time, while DG decreased it (p<0.05). DG inclusion increased compressive strength (p<0.05) and flowability was reduced by CHX free forms inclusion (p<0.05). MPDA and MPDG showed a later and gradual releasing profile when compared to DA and DG groups. Incorporating CHX showed significant antibacterial effect when compared to pure GIC, but without statistically significant differences when comparing groups with free or microencapsulated forms, as well as immediate and aged GICs. Conclusion: The incorporation of CHX resulted in glass ionomer cements with antibacterial effect and appropriate physical properties for clinical use. / A clorexidina (CLX) é o agente antimicrobiano que mais tem sido investigado no controle do biofilme e sua incorporação em cimento de ionômero de vidro (CIV) tem sido proposta para reduzir o número de micro-organismos em pacientes com alta atividade de cárie. Dessa forma, o objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da adição de sais de CLX, em suas formas livres (diacetato - DA ou digluconato – DG) e incorporada em micropartículas poliméricas de Poli (ácido láctico-co-glicólico) (PLGA), nas propriedades físico-químicas e antibacterianas de um CIV ativado quimicamente. Materiais e métodos: Micropartículas de PLGA contendo diacetato (MPDA) ou digluconato de CLX (MPDG) foram obtidas através da técnica de secagem por pulverização. Os grupos experimentais foram preparados com a adição de 1% de CLX nas suas formas livres ou microencapsuladas em CIV, no grupo controle do experimento não houve incorporação de CLX, constituindo os seguintes grupos: CIV (controle), DA, DG, MPDA e MPDG. Realizaram-se análises qualitativas de estabilidade da CLX livre, espectroscopia no infravermelho por transformada de Fourier (FTIR), liberação cumulativa de CLX (%) e imagens em microscopia eletrônica de varredura (MEV), seguidas de testes de tempo de presa, escoamento e resistência à compressão. Para a análise do efeito antibacteriano, foi utilizado inóculo de S. mutans em meio de cultura triptona de soja (TSB) enriquecido com extrato de levedura e 1% de sacarose, submetendo os espécimes à formação de biofilme por até 5 dias. Após 24 h da adesão inicial e com intervalos subseqüentes de 1 dia, foi determinado o número de unidades formadoras de colônia (UFC/ml) do biofilme formado sobre espécimes recém preparados (após 24 h de tempo de presa - Grupo imediato) e espécimes envelhecidos em água em 37 ºC por 15 dias (Grupo envelhecido). A análise estatística para os testes físico-químicos e efeito antibacteriano foi realizada através da análise de variância (ANOVA) e Mann Whitney, ambos seguidos por testes de comparação de médias aos pares, com nível de significância pré-estabelecido em 5%. Resultados: O DG em solução na presença do CIV apresentou maior estabilidade em temperatura ambiente e a 37 ºC quando comparado ao DA. A análise de FTIR não mostrou indicativos de reação química entre o CIV e a CLX nas concentrações testadas. As formulações microencapsuladas aumentaram, enquanto que o DG diminuiu o tempo de presa (p<0,05). A inclusão de DG aumentou a resistência à compressão (p<0,05) e o escoamento foi diminuído pela inclusão das formas livres de CLX (p<0,05). Os grupos microencapsulados mostraram um perfil de liberação mais tardio e gradual quando comparado aos grupos com incorporação de CLX livre. A incorporação de CLX mostrou efeito antibacteriano significativo quando comparado ao CIV puro, porém sem diferença estatística significativa quando se compara os grupos com as formas livres ou microencapsuladas, bem como imediatos e envelhecidos. Conclusão: A incorporação de CLX resultou em cimentos ionoméricos com efeito antibacteriano e propriedades físico-químicas apropriadas para o uso clínico.

Resumo: A busca por embalagens que protejam os alimentos, da forma mais natural possível e sem prejuízo ao meio ambiente, ocorre em escala mundial. Uma das alternativas propostas é a substituição dos derivados de petróleo por novas matérias-primas, como o amido e a proteína, na forma dos denominados filmes e recobrimentos comestíveis. Os objetivos deste trabalho foram a caracterização da fécula de mandioca, a elaboração e a caracterização de filmes à base de fécula de mandioca, em função da espessura ou da concentração de glúten de trigo ou da concentração de plastificantes. No primeiro experimento, foram elaborados filmes de fécula de mandioca a partir de soluções filmogênicas (SF) de 1, 2, 3 e 4% (p/v) de amido, com espessuras variando de 0,017 a 0,156mm. No segundo experimento, os filmes de fécula foram elaborados com concentrações variáveis de glúten de trigo (0 - 100%). No terceiro experimento, os filmes de fécula de mandioca foram elaborados com diferentes plastificantes (glicerina, sorbitol, dietilenoglicol e propilenoglicol) com concentrações variando de 10 a 25%. Em todos os experimentos os filmes foram desidratados a 30ºC, em umidade relativa (UR) ambiente (55-65%), por 18-20 h. Antes das caracterizações, os filmes de fécula e fécula/glúten foram condicionados em ambiente a 22ºC e 75% UR, e os filmes com plastificantes em 58% UR, por 6 dias, quando foi medida a espessura. Os filmes foram analisados quanto a sua solubilidade em água, propriedades mecânicas, de barreira e óticas. Realizaram-se ainda, análises calorimétricas de varredura, análises por microscopia eletrônica de varredura, difração de raios X, FTIR e determinaram-se suas isotermas de sorção. De maneira geral, os filmes de fécula de mandioca sem aditivos... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo). / Abstract: There is a global concern in searching packaging materials which could both protect appropriately food products and has little impact upon the environment. Among the alternatives one can point out the substitution of petroleum derivatives with innovative raw materials, such as starch and protein, used for films and coatings production. The objective of this work was the elaboration and characterization of edible films based on cassava starch, in function of the thickness or the gluten or the plasticizer concentration. For the first experiment, the films were done using film forming solutions (FFS) containing 1, 2, 3, and 4% (w/v) of cassava starch with thickness varying from 0.017 to 0.156 mm. In a second experiment, the cassava starch films were made with variable concentrations of wheat gluten (0 - 100%). In a third experiment, the cassava starch films were prepared with glycerol, sorbitol, diethylene glycol and propylene glycol with concentrations ranging from 10 to 25%. For all the experiments the films were heated to 70ºC and dehydrated at 30ºC, at relative room humidity (55-65%) for 18 to 20 h. Before characterization the starch and starch/gluten films were conditioned at 22ºC and 75% relative humidity (RH), and the films with plasticizers were conditioned at 58% RH, for 6 days, afterwards the thickness was measured. The functional properties studied were: solubility in water, mechanical, barrier and optical properties. There were also realized scanning calorimetric essays, scanning electronic microscopy, X-ray diffraction, FTIR and water sorption isotherms. In general, the cassava starch films without additives were resistant and elastic, but fairly flexible, transparent and with high water vapor permeability, showing an homogeneous and compact structure and low higroscopicity... (Complete abstract, click electronic address below). / Orientador: Marney Pascoli Cereda / Coorientador: Paulo José do Amaral Sobral / Doutor