VASCONCELOS, D. C. Efeito da prometazina combinada aos antibióticos clássicos frente à forma planctônica e ao biofilme de Burkholderia pseudomallei. 2015. 84 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Médicas) - Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2015. / Submitted by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2017-01-20T14:13:27Z No. of bitstreams: 1 2015_dis_dcvasconcelos.pdf: 2600778 bytes, checksum: 517035433406fc9bf380fa7e591e303e (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2017-01-20T14:13:35Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_dis_dcvasconcelos.pdf: 2600778 bytes, checksum: 517035433406fc9bf380fa7e591e303e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-01-20T14:13:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_dis_dcvasconcelos.pdf: 2600778 bytes, checksum: 517035433406fc9bf380fa7e591e303e (MD5) Previous issue date: 2015-11-13 / Among the defense mechanisms employed by Burkholderia pseudomallei are the expression of efflux pumps such as BpeAB-OprB, AmrAB-OprA and BpeEF-OprC, which are responsible for resistance to aminoglycosides, macrolides, fluoroquinolones and sulfonamides. It is therefore necessary to find adjuvants able to minimize this resistance. In this context, the phenothiazines stand out for inhibiting those pumps. This study evaluated the in vitro inhibitory activity of promethazine alone or in combination with amoxicillin, amoxicillin/clavulanate, erythromycin, sulfamethoxazole/trimethoprim, ciprofloxacin or gentamicin against B. pseudomallei in planktonic and biofilm form. The structure of B. pseudomallei biofilm, with and without addition of promethazine, was also investigated. The sensitivity was evaluated by the broth microdilution test. The minimum inhibitory concentration (MIC) was 0.78 mg / mL and the minimum biofilm elimination concentration (MBEC) was 0.78 to 3.12 mg / mL for promethazine. Moreover, the association with promethazine significantly reduced the MIC values for erythromycin, trimethoprim / sulfamethoxazole, gentamicin and ciprofloxacin, whereas the MBEC values of all antibiotics tested significantly declined in combination with promethazine (p <0.05). Through electron and confocal microscopy, we found that promethazine was able to disrupt the biofilm matrix, possibly facilitating penetration of antibiotics. Therefore, this study demonstrates the inhibitory activity of promethazine against B. pseudomallei and its synergistic effect with traditional antibiotics against biofilms. / Dentre os mecanismos de resistência demonstrados por Burkholderia pseudomallei, há o destaque para expressão de bombas de efluxo do tipo BpeAB-OprB, AmrAB-OprA e BpeEFOprC, que são responsáveis pela resistência a aminoglicosídeos, macrolídeos, fluoroquinolonas e sulfonamidas. Torna-se assim necessária a busca por adjuvantes capazes de minimizar essa resistência. Neste contexto, destacam-se as fenotiazinas, que inibem tais bombas. O presente estudo visou avaliar a atividade inibitória in vitro da prometazina isolada e em combinação com amoxicilina, amoxicilina/clavulanato, eritromicina, sulfametoxazol/trimetoprim, ciprofloxacina e gentamicina frente à forma planctônica e ao biofilme de B. pseudomallei. Foi investigada ainda a estrutura do biofilme de B. pseudomallei, com e sem adição de prometazina. A concentração inibitória mínima (CIM) foi de 0,78 mg / mL e a concentração eliminatória mínima em biofilme (CEMB) foi de 0,78 a 3,12 mg/mL para prometazina. Ademais, a associação com prometazina reduziu significativamente os valores de CIM para eritromicina, sulfametoxazol/trimetoprim, gentamicina e ciprofloxacina, enquanto que os valores de CEMB para todos os antibióticos testados apresentaram diminuição significativa em combinação com prometazina (p<0.05). Por meio de técnicas de microscopia confocal e eletrônica, observou-se que a prometazina foi capaz de desestruturar a matriz do biofilme, possivelmente auxiliando a penetração dos antibióticos. Deste modo, o presente estudo mostrou a atividade inibitória da prometazina ante a B. pseudomallei e seu efeito sinérgico com antibióicos clássicos frente aos biofilmes.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Odontologia, Florianópolis, 2015. / Made available in DSpace on 2015-10-20T03:12:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 334850.pdf: 2079150 bytes, checksum: e9fd6f0704b5a86cef767b5a5d6611c9 (MD5) Previous issue date: 2015 / (Poli-éter-éter-cetona) PEEK representa atualmente uma alternativa para implantes ortopédicos devido à sua biocompatibilidade e baixo módulo de elasticidade quando comparado ao titânio. PEEK tem mostrado ser muito atraente para a incorporação de compostos, graças ao processo de sulfonação que promove um balanço entre as propriedades mecânicas e estabilidade termo-oxidativa com uma alta probalidade para geração de novos materiais com excelentes propriedades químico-mecânicas. O objetivo deste trabalho foi de funcionalizar o PEEK, a fim de incorporar novos compostos anti-biofilme derivados de lactamas. Grânulos de PEEK foram funcionalizadas por tratamento com ácido sulfúrico e, em seguida, dissolvidos em solução de dimetilsulfóxido. Após a funcionalização, antibiofilme à base de lactama foi adicionado à solução de poli(éter-éter-cetona) sulfonado (SPEEK). Uma técnica de revestimento por imersão foi utilizada para sintetizar um filme fino sobre um substrato à base de vidro. O grau de sulfonação (DS) e a incorporação de lactama no SPEEK foram determinados por espectroscopia de infravermelho com transformada de fourier (FTIR), ressonância magnética nuclear (RMN), análise termogravimétrica (TGA), e microscopia electrônica de varredura (SEM-EDS). Em seguida, foi avaliada a eficácia do tratamento do antibiofilme incorporado ao polímero através da medida de formação de biofilmes pela bacteria Streptococcus mutans sobre os materiais funcionalizados. Foi determinado grau de sulfonação (DS) de 65%, enquanto que as curvas TGA e FTIR confirmaram a presença de SO3H e lactamas na estrutura de SPEEK. A densidade do biofilme na superfície de SPEEK contendo lactamas foi menor do que no SPEEK livre de lactama, indicando que a atividade desses compostos antibiofilme foi mantida após incorporação no SPEEK.<br> / Abstract : PEEK is currently presented as an alternative for orthopedic implants due to its biocompatibility and low modulus compared to titanium. PEEK has been shown to be very attractive for incorporating compounds thanks to the sulphonation process, which promotes a balance between the mechanical properties and thermo-oxidative stability. The objective of this study was to functionalize the poly (ether-ether-ketone) (PEEK) in order to incorporate new anti-biofilm compounds, lactam derivatives. PEEK samples were functionalized by treatment with sulfuric acid and then dissolved in dimethylsulfoxide solution resulting in SPEEK. After functionalization, lactam-based antibiofilm compounds were added to the sulphonated poly (ether ether ketone) SPEEK to produce a thin film coating a glass-based substrate. The degree of sulphonation (DS) and the incorporation of anti-biofilm compounds (lactams) in SPEEK were determined by Infrared Fourier Transform Spectroscopy (FTIR), Nuclear Magnetic Resonance (NMR), Thermogravimetric Analysis (TGA) and Electron Microscopy Scanning (SEM-EDS). Then, the effectiveness of the treatment applied to antiobiofilm polymer was evaluated biofilm formation capacity of Streptococcus mutans on the SPEEK functionalized. The characterization indicated a high DS of 65%, while the TGA curves confirmed the presence of SO3H in SPEEK and lactam structure. The biofilm density on SPEEK containing lactam was lower than SPEEK without lactam, indicating that the activity of these compounds was maintained antibiofilm after incorporation into SPEEK.

MOURÃO, Charles Ielpo. Efeito dos inibidores de folato sobre o crescimento, sensibilidade a antifúngicos e fatores de virulência de cepas do complexo Cryptococcus neoformans. 2012. 93 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Médicas) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2012. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2015-02-13T11:47:04Z No. of bitstreams: 1 2012_dis_cimourão.pdf: 7472294 bytes, checksum: eedabf4f8c073e5ac7d27c9d5be25770 (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2015-02-13T11:48:46Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_dis_cimourão.pdf: 7472294 bytes, checksum: eedabf4f8c073e5ac7d27c9d5be25770 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-02-13T11:48:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_dis_cimourão.pdf: 7472294 bytes, checksum: eedabf4f8c073e5ac7d27c9d5be25770 (MD5) Previous issue date: 2012 / Cryptococcosis is an opportunistic systemic mycosis caused mainly by inhalation of fungal propagules of the species Cryptococcus gattii and C. neoformans in its two varieties, var. grubbiand var. neoformans, whose pathogenicity is based on the expression of virulence factors directly involved in the establishment and maintenance of infection, and is related to the production of capsule, melanin, lipases, proteases and urease, in addition to biofilm formation.The antifungal drugs available for the treatment of cryptococcosis is currently limited and restricted to a few classes of drugs, which generates the need to carry out research studies of new antifungal drugs and the discovery of new molecular targets in Cryptococcus. In recent years, several studies have shown the potential antifungal the drug inhibiting synthesis of folic acid in pathogenic fungi, and before that, we propose to investigate in vitro effects of folate inhibitors in C. gattii and C. neoformans, evaluating the action of these drugs on the sensitivity, antifungal resistance and production of virulence factors. To this end, we analyzed the antifungal susceptibility profile of strains of C. gattii (n=15) and C. neoformans (n=15) compared the combination of SMT-TMP and SDZ-PIR, and profile of resistance to antifungal drugs. Additionally, we investigated the effect of folate inhibitors on the production of virulence factors and biofilm formation in strains of C. gattii (n=7) and C. neoformans (n=7) studied. Was collected from in order to investigate possible environmental niches preferred strains of Cryptococcus in the city and metropolitan region of Fortaleza, Ceará. All strains tested were sensitive to the inhibitory action of the drugs tested, but showed no significant effects on the virulence factors, except for biofilm formation. Thus, we believe that the results of this study may contribute to greater understanding of the antifungal potential of folate inhibitors on species of Cryptococcu / A criptococose é uma micose sistêmica de caráter oportunista causada principalmente pela inalação de propágulos fúngicos das espécies Cryptococcus gattii e C. neoformans em suas duas variedades, var. grubbi e var. neoformans, cuja patogenicidade se baseia na expressão de fatores de virulência, diretamente envolvidos no estabelecimento e manutenção da infecção, estando relacionados à produção de cápsula, melanina, lipases, proteases e urease, além da formação de biofilme. O arsenal antifúngico disponível para o tratamento da criptococose atualmente é limitado e restrito a poucas classes de drogas, o que gera a necessidade da realização de estudos de prospecção de novas drogas antifúngicas e a descoberta de novos alvos moleculares em Cryptococcus. Nos últimos anos, diversos estudos têm mostrado o potencial antifúngico de drogas inibidoras da síntese do ácido fólico em fungos patogênicos, e diante disso, propomos investigar, in vitro, os efeitos de inibidores de folato em C. neoformans e C. gattii, avaliando a ação dessas drogas sobre a sensibilidade, sensibilidade antifúngica e produção de fatores de virulência. Para tanto, foi analisado o perfil de sensibilidade antifúngica de cepas de C. gattii (n=15) e C. neoformans (n=15) frente à combinações de Sulfametoxazol-Trimetoprim e Sulfadiazina-Pirimetamina, bem como seu perfil de resistência à drogas antifúngicas. Adicionalmente, investigamos o efeito dos inibidores de folato sobre a produção de fatores de virulência e formação de biofilme nas cepas de C. gattii (n=7) e C. neoformans (n=7) estudadas. Foram realizadas também coletas ambientais visando investigar possíveis nichos ecológicos preferenciais de cepas de Cryptococcus na cidade de Fortaleza e região metropolitana. Todas as cepas testadas foram sensíveis à ação inibitória das drogas testadas, porém não demonstraram efeitos significantes sobre os fatores de virulência, exceto a formação de biofilme. Assim, acreditamos que os resultados desse estudo podem contribuir para uma maior compreensão acerca do potencial antifúngico dos inibidores de folato sobre espécies de Cryptococcus.

SILVA, A. R. Avaliação in vitro da berberina frente às cepas de Candida spp. e Cryptococcus neoformans resistentes ao fluconazol e sua atividade em isolados formadores de biofilme. 2015. 67 f. Dissertação (Mestrado em Microbiologia Médica) - Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2015. / Submitted by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2016-04-25T12:16:21Z No. of bitstreams: 1 2015_dis_arsilva.pdf: 998105 bytes, checksum: ce9627da7fc2b87f008c03014538cf67 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2016-04-25T12:16:30Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_dis_arsilva.pdf: 998105 bytes, checksum: ce9627da7fc2b87f008c03014538cf67 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-25T12:16:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_dis_arsilva.pdf: 998105 bytes, checksum: ce9627da7fc2b87f008c03014538cf67 (MD5) Previous issue date: 2015-08-27 / Currently, the incidence of fungal infections has increased significantly, contributing to morbidity and mortality. It has as one of its main causes the increase of antibiotic resistance. Recently associated with biofilm production, which has a high level of antibiotic resistance, coupled with the limited antifungal pharmacological when compared to antibacterial, it leads to the need for the development of new therapeutic strategies. The berberine has shown to have broad antibacterial and antifungal activity. In this context, the objective was to evaluate the antifungal potential of berberine against strains of Candida spp. and Cryptococcus neoformans resistant to fluconazole and evaluate the effect of berberine against strains of Candida tropicalis in biofilm formation. The evaluation of the antifungal effect was determined by microdilution in broth (M27-A3) and by flow cytometry techniques, in which the likely mechanism of action of that compound was evaluated. For the assessment of the biofilm, a colorimetric assay (MTT) was used to determine the susceptibility of sessile cells. Strains of Candida spp. and Cryptococcus neoformans resistant to fluconazole after 24h and 72h showed the minimum inhibitory concentration (MIC) equal to 8 μg/mL and 16-24 μg/ml, respectively. It demonstrates a significant antifungal activity, which, in accordance with cytometry, after the cells were treated with berberine, promoted damage to DNA, changes in the integrity of the plasma and mitochondrial membrane, caused and probably led to cell death by apoptosis. Regarding isolated biofilm formers, when exposed to berberine, they showed a MIC of less than 37.5 mg/mL (MIC 50%), causing a statistically significant reduction in the cellular activity of the biofilm (P <0.001). Therefore, considering these activities, coupled with the lack of studies related to biotechnological development of a phytoproduct, berberine becomes a source of promising molecules with antifungal properties. / Atualmente, a incidência de infecções fúngicas tem aumentado significativamente, contribuindo assim para morbidade e mortalidade. Esse fato que tem como umas das principais causas o aumento da resistência antimicrobiana, estando associado à produção de biofilme que tem um elevado nível de resistência antimicrobiana juntamente com o arsenal farmacológico antifúngico limitado, quando comparado ao arsenal antibacteriano, leva a necessidade do desenvolvimento de novas estratégias terapêuticas. A berberina tem demonstrado ter ampla atividade antibacteriana e antifúngica. Dentro desse contexto, o objetivo foi avaliar o potencial antifúngico da berberina frente às cepas de Candida spp. e Cryptococcus neoformans resistentes ao fluconazol, bem como avaliar o efeito da berberina frente às cepas de Candida spp. em forma de bioflme. A avaliação do efeito antifúngico foi determinada pelo método de microdiluição em caldo (M27-A3) e por meio de técnicas de citometria de fluxo em que foram avaliados elementos que contribuam para elucidação do provável mecanismo de ação da berberina. Para a avaliação da atividade de células fúngicas do biofilme, utilizou-se o ensaio colorimétrico com o sal de tetrazólio (MTT), a fim de determinar a suscetibilidade das células sésseis. As cepas de Candida spp. e Cryptococcus neoformans resistentes ao fluconazol após 24h e 72h apresentaram a Concentração Inibitória Mínima (CIM) igual 8 µg/mL e 16 – 24 µg/mL, respectivamente, demonstrando assim, apresentar atividade antifúngica significativa, que sendo confirmada posteriormente por técnicas da citometria de fluxo, após a exposição das células ao composto sintético cloreto de berberina, foram observadas alterações concementes a ruptura da integridade da membrana plasmática e mitocondrial, danos ao DNA e provavelmente o desencadeamento de tais eventos conduziu a morte celular por apoptose. Em relação aos isolados formadores de biofilme, esses ao serem expostos a berberina apresentaram CIM inferior a 37,5 µg/mL (CIM50), sendo a redução considerada estatisticamente significativa na atividade celular do biofilme (P < 0,001). Sendo assim, as atividades, no presente estudo aliados a busca de mais elementos que contribuam para a melhor compreensão e o desenvolvimento biotecnológico de um fitoproduto, tomando como exemplo a molécula de estudo, a berberina, sendo aqui elencada como possível protótipo de moléculas promissoras com propriedades antifúngicas.

CORREIA, G. R. B. Efeito inibitório in vitro do composto farnesol frente ao biofilme de Burkholderia pseudomallei. 2015. 88 f. Dissertação (Mestrado em Microbiologia Médica) - Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2015. / Submitted by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2016-05-02T15:58:57Z No. of bitstreams: 1 2015_dis_grbcorreia.pdf: 1260823 bytes, checksum: 8ebde2fdd525176303b72981cc66cfa0 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2016-05-02T15:59:07Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_dis_grbcorreia.pdf: 1260823 bytes, checksum: 8ebde2fdd525176303b72981cc66cfa0 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-02T15:59:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_dis_grbcorreia.pdf: 1260823 bytes, checksum: 8ebde2fdd525176303b72981cc66cfa0 (MD5) Previous issue date: 2015-07-14 / The intrinsic antimicrobial resistance of Burkholderia pseudomallei is a serious challenge to the treatment of melioidosis. Many studies have searched for adjuvants that increase susceptibility bacteria to antimicrobials. In this context, the antimicrobial activity of farnesol against B. pseudomallei in planktonic growth has been reported. Thus, the aim of this study was to analyze the in vitro activity of farnesol alone against Burkholderia pseudomallei biofilms, as well as its combination with the antibacterials amoxicillin, doxycycline, ceftazidime and sulfamethoxazole-trimethoprim. Susceptibility was assessed by the broth microdilution test and cell viability was read with the oxidation-reduction indicator dye resazurin. The interaction between farnesol and antibacterial drugs against B. pseudomallei biofilms was evaluated through the calculation of the fractional inhibitory concentration index. The minimum biofilm erradication concentration (MBEC) for farnesol was 75 to 2400 mM. In addition, farnesol significantly reduced the MBEC values for ceftazidime,amoxicillin, doxycycline and sulfamethoxazole-trimethoprim by 256, 16, 4 and 4 times respectively (P<0.05). Optical, confocal and electronic microscopic analyses of farnesol treated B. pseudomallei biofilms demonstrated that this compound damages biofilm matrix,facilitating antimicrobial penetration in the biofilm structure. This study demonstrated the effectiveness of farnesol against B. pseudomallei biofilms and its potentiating effect on the activity of antibacterial drugs, in particular ceftazidime, amoxicillin, doxycycline and sulfamethoxazole-trimethoprim. / A intrínseca resistência apresentada pela bactéria Burkholderia pseudomallei é um grave empecilho para o tratamento da melioidose. Muitas pesquisas focam na busca de adjuvantes que aumentem a sensibilidade desta bactéria aos antimicrobianos. Nesse contexto, a ação inibitória do farnesol frente às cepas de B. pseudomallei, na forma planctônica, já foi relatada em estudo prévio. Diante disso, esse estudo objetivou analisar a atividade in vitro do farnesol contra cepas de B. pseudomallei na forma de biofilme. Aliado à análise da ação do farnesol isoladamente, foi investigada a combinação desse composto com os antimicrobianos amoxicilina, ceftazidima, doxiciclina, imipenem e sulfametoxazol/trimetoprim frente ao biofilme. A sensibilidade foi avaliada por meio do teste de microdiluição em caldo e a leitura da viabilidade celular feita com a resazurina. A concentração inibitória mínima em biofilme (CEMB) para o farnesol foi de 75 a 2400 mM. Ademais, o farnesol reduziu em até 256, 16, 4 e 4 vezes os valores de CEMB para ceftazidima, amoxicilina, doxiciclina e sulfametoxazol/trimetoprim, respectivamente (P<0.05). Por meio de técnicas de microscopia, tais como óptica, confocal e eletrônica, observou-se que o farnesol foi capaz de causar danos na matriz do biofilme, facilitando assim, a penetração dos antibióticos. Deste modo, o presente estudo mostrou a eficácia do farnesol contra biofilmes de B. pseudomallei e seu efeito potenciador, em especial com ceftazidima, amoxicilina, doxiciclina e sulfametoxazol/trimetoprim.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Odontologia, Florianópolis, 2017. / Made available in DSpace on 2017-12-05T03:11:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 349272.pdf: 1138092 bytes, checksum: 483e477518492983012798cf0cb57330 (MD5) Previous issue date: 2017 / Streptococcus mitis é um microrganismo frequentemente encontrado na cavidade oral, sendo um colonizador primário. Os óleos essenciais (OE) são substâncias de plantas aromáticas conhecidos por suas propriedades antimicrobianas. A busca por novas substâncias que sejam capazes de inibir a formação de biofilmes orais pode levar a importantes alternativas de tratamento. O OE de Cola nitida e a alcamida espilantol foram testados in vitro para verificar a capacidade de inibição de biofilme formado por S. mitis NCIMB 13770, sobre superfícies de discos de titânio. A clorexidina foi usada como controle positivo. Os biofilmes bacterianos foram quantificados mediante o uso de coloração cristal violeta e analisados por o espectrofotômetro a 570 nm. A análise estatística dos resultados foi realizada pelo teste de t-Student, considerando p<0,05 como significância estatística. A Concentração Mínima de Inibição (CMI) foi analisada testando concentrações de 5000 a 0,0001 µg/mL. A CMI foi estabelecida em 87,5 µg/mL para ambas as substâncias testadas. O espilantol demostrou inibição do biofilme O OE de Cola nitida não inibiu nem o crescimento planctônico nem o biofilme. Estes resultados não foram estatisticamente significativos. A Clorexidina demostrou uma inibição de 50,8% para o biofilme e 49,2% para o planctônico, sendo estatisticamente significativo. Estes achados sugerem que o espilantol demostrou atividade antibacteriana e anti-biofilme baixa e Cola nitida não mostrou atividade antibacteriana nem anti-biofilme. / Abstract : S. mitis is a frequent organism in the oral cavity and a primary colonizer. Essential oils (EO) are naturally occurring compounds in aromatic plants, they are known to possess antimicrobial properties. Exploring novel substances to inhibit biofilm formation can lead to important alternative treatment measures. One EO (Cola nitida) and Spilanthol were tested in vitro against S. mitis NCIMB 13770 biofilm using chlorhexidine as a control group on surface of titanium discs. The bacterial biofilms were quantified by crystal violet staining and analyzed with a Spectrophotometer at 570 nm. The statistical analysis of the results was accomplished using the t- Student test, considering p<0,05 statistically significant. Minimum Inhibitory Concentration (MIC) assay with concentrations ranging from 5000 to 0.0001 µg/mL. The MIC was estimated as 87.5 µg/mL for the substances tested. The results were not significantly different from the control for spilanthol. The EO of Cola nitida did not inhibit the growth of planktonic bacteria or biofilm. Chlorhexidine showed inhibition of 50,8% for biofilm and 49,2% for planktonic bacteria. These findings suggest that spilanthol displays a low antibacterial and antibiofilm activity and Cola nitida did not showed antibacterial or antibiofilm activity.

Orientador: Lourdes Aparecida Martins dos Santos-Pinto / Banca: Alessandra Nara Souza Rastelli / Banca: Osmir Batista de Oliveira Junior / Banca: Maria Aparecida de Andrade Moreira Machado / Banca: Simone Duarte / Resumo: O trabalho investigou o potencial antimicrobiano fotodinâmico (PACT) mediado por um fotossensibilizador (FS) natural, curcumina (C), exposto a uma fonte de luz LED azul (L) aplicado sobre biofilme maduro de Streptococcus mutans (SM) formado sobre discos de hidroxiapatita e comparou esse potencial com biofilmes submetidos a imersão única com solução de clorexidina a 0.12% (CHX). Adicionalmente, verificou-se a eficácia de uma fonte de luz de amplo espectro (luz branca) de alta intensidade de potência na presença de C e azul de toluidina (T) a baixas concentrações expostos a um tempo extra curto de iluminação. Material e Método: Biofilmes de SM foram submetidos a tratamento com soluções de C e iluminadas com um LED azul (L) a 48 J/cm2 e 72 J/cm2 e a imersão em CHX. Adicionalmente, uma fonte de luz branca (42 J/cm2; 3410 mW/cm2) foi utilizada na presença de baixas concentrações de C e T por um período extra curto de iluminação sobre suspensões de SM. A eficácia das tratamentos foi realizada por meio da contagem de unidades formadoras de colônia (UFC/mg de biofilme seco e UFC/ml de suspensão) e análise morfológica dos biofilmes foram realizadas por meio de microscopia confocal a laser e microscopia eletrônica de varredura ambiental. Resultados: PACT (C a 2.5 mM e L a 48 J/cm2) apresentou a maior redução bacteriana substancial quando comparada a CHX. A luz branca apresentou fotossensibilização letal nos parâmetros utilizados. Conclusão: A utilização da curcumina, um corante natural e a luz branca, capaz de ativar FS em curtos períodos de tempo, são avanços nesse campo antimicrobiano alternativo. / Abstract: This work investigated the antimicrobial photodynamic potential (PACT) mediated by a natural photosensitizer (PS), curcumin (C), exposure to an source of blue LED (L) applied over a Streptoccocus mutans (SM) mature biofilm formed on hidroxiapatite discs and compared this potential with biofilms submitted to single immersion of chlorhexidine at 0.12% (CHX). Additionally, it was verified the efficacy of a broad visible spectrum light source (white light) of high potency intensity in the presence of C and toluidine blue (T) at low concentrations and exposure to an extra short illumination time. Materials: SM biofilms were submitted to a treatment with C solutions and exposure to a 48 J/cm2 e 72 J/cm2 of L and immersion in CHX. Furthermore, a white light source (42 J/cm2; 3410 mW/cm2) was used in the presence of low concentrations of C and T for an extra short period over SM suspensions. The efficacy of the treatments were performed by colony forming units counting (CFU/mg of dry biofilm and CFU/ml of suspension) and the morphological analysis of biofilms were performed using confocal laser scanning microscopy images and environmental scanning electron microscopy. Results: PACT (C at 2.5 mM and L at 48 J/cm2) presented a bacterial substantial reduction when compared with CHX treatment. The white light showed lethal photossensibilization in the utilized parameters. Conclusion: The use of curcumin, a natural compound and the white light, able to activate FS at shorts periods, are advance on this antimicrobial alternative field. / Doutor

Resumo: Os objetivos deste trabalho foram produzir biofilmes de zeína adicionados de ácido oléico puro e óleos vegetais comestíveis com alto teor deste ácido graxo e determinar as propriedades estruturais e funcionais dos biomateriais produzidos. A análise da composição da zeína em pó utilizada indicou uma possível contaminação residual de lipídeos proveniente do glúten do milho. Os óleos comestíveis usados foram o óleo de buriti, que apresentou um menor teor de ácido oléico (35,1 %), comparado com os óleos de oliva e macadâmia (acima de 61 %). Para caracterizar a microestrutura dos biofilms, análises de Espectroscopia no Infravermelho por Transformada de Fourier (FTIR-ATR), Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV), Microscopia Óptica (MO) e difração de Raios-X (WAXS) foram realizadas. As propriedades funcionais avaliadas foram opacidade, Permeabilidade ao Vapor d'Água (PVA), solubilidade em água, molhabilidade, isotermas de sorção, propriedades térmicas, mecânicas e permeabilidade a gases. As análises de FTIRATR sugeriram que os diferentes plasticizantes não afetaram a estrutura química e molecular da matriz de zeína. A MEV e a MO mostraram que o biofilme controle (zeína-ácido oléico) foi o mais homogêneo, em que, aparentemente, os ácidos graxos foram capazes de formar uma matriz mais coesa e contínua. Os poros observados na MEV foram posteriormente identificados, pela MO, como glóbulos de lipídeos. As análises de Difração de Raios-X (WAXS) mostraram que a estrutura da -hélice da zeína não foi modificada com a adição dos diferentes plasticizantes. A opacidade dos filmes aumentou com o aumento da concentração do ácido oléico. Os biofilmes elaborados com ácido oléico puro apresentaram os menores valores para PVA, solubilidade e molhabilidade, sendo, portanto, mais hidrofóbicos que os demais. Entretanto, as isotermas de umidade... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The aim of this work was to produce biofilms of zein added with oleic acid and others edible vegetable oils containing high level of this fatty acid, and determine the structural and functional properties of the biomaterials produced. The composition analyses of zein powder indicated a possible residual contamination of lipids from the corn. Fatty acid composition of edible oils used show that buriti oil had the lowest content of oleic acid (35.1 %) while the others oils (olive and macadamia) had above 61 %. To characterize the microstructure of the biofilms, analyses of Infrared Spectroscopy (FTIR), Scanning Electron Microscopy (SEM), Optical Microscopy (MO) and X-ray diffraction (WAXS) were performed. The functional properties were also evaluated through opacity, Water Vapor Permeability (WVP), solubility in water, wettability, sorption isotherms, Differential Scanning Calorimetric (DSC), thermogravimetry (TGA), mechanical behavior and gas permeability. FTIR-ATR spectra suggested that different plasticizers did not affect the chemical and molecular structure of zein matrix. The SEM and OM images showed that control biofilm (zeinoleic acid) was the most homogeneous, where apparently the fatty acids were able to form a more continuous matrix. The pores first observed in SEM were later identified by optical microscopy as lipids. Analyses of WAXS showed that -helix structure of the zein was not modified by the addition of different plasticizers. The opacity increased according to oleic acid concentration. Biofilms with oleic fatty acid showed the lowest values for WVP, solubility and wettability and were more hydrophobic than the others. However, the equilibrium moisture contents showed by the isotherms were not different for all types of plasticizers, in the same water activity. The equilibrium moisture data obtained for 5, 15, 25, 35 and 45 °C were adjusted by different mat... (Complete abstract click electronic access below) / Orientador: José Francisco Lopes Filho / Coorientador: Antonio Carlos Guastaldi / Banca: Elisângela Corradini / Banca: Douglas de Brito / Banca: Vânia Regina Nicoletti Telis / Banca: Marinônio Lopes Cornélio / Doutor

Orientador: Juliane Maria Guerreiro Tanomaru / Banca: Evandro Watanabe / Banca: Paulo Henrique Weckwerth / Banca: Fábio Luiz Camargo Villela Berbert / Banca: Elisabeth Loshchagin Pizzolitto / Resumo: Objetivo: Este estudo avaliou: (experimento 1) a influência de diferentes substratos na formação de biofilmes de Enterococcus faecalis; e (experimento 2) a atividade antibacteriana contra E. faecalis, pH e solubilidade dos cimentos AH Plus, Sealer 26, Epiphany SE, Sealapex, Activ GP, MTA Fillapex e MTA Sealer. Metodologia: (1) Biofilmes de E. faecalis foram desenvolvidos sobre dentina bovina, guta-percha, hidroxiapatita e osso bovino por 14 ou 21 dias. Após os períodos de incubação, os espécimes (n=5 por substrato por período) foram marcados pela técnica Live/Dead e observados usando microscopia confocal de varredura a laser. Quatro imagens foram obtidas para cada amostra e analisadas pelo programa bioImage_L. Os parâmetros avaliados foram biovolume (μm3) da população total e verde (células vivas) e o percentual de cobertura do substrato. (2) Para o segundo experimento, discos de cada cimento endodôntico foram preparados e armazenados por 2 ou 7 dias. A atividade antibacteriana foi avaliada pelo teste de difusão em ágar (TDA) e pelo teste de contato direto sobre biofilme (TCDB, antibiofilme). No TCDB, biofilmes foram induzidos em blocos de dentina bovina por 14 dias. Os cimentos foram, então, colocados sobre os biofilmes e permaneceram em contato por 5, 10 ou 15 h. No grupo controle, nenhum cimento foi colocado sobre os biofilmes. Os blocos de dentina com o biofilme remanescente foram avaliados quantitativamente (número de unidades formadoras de colônia [UFC]). A solubilidade dos cimentos correspondeu à perda de massa (%) após 15 h de imersão em água destilada. Os valores de pH foram mensurados nos períodos de 5, 10 e 15 h. A análise estatística foi realizada por testes paramétricos e não paramétricos (p=0,05). Resultados: (1) Houve formação de biofilme em todos os grupos. Não houve diferença... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Objective: This study evaluated: (experiment 1) the influence of different substrates on the Enterococcus faecalis biofilm formation; and (experiment 2) the antibacterial activity against E. faecalis, pH and solubility of the sealers AH Plus, Sealer 26, Epiphany SE, Sealapex, Activ GP, MTA Fillapex and MTA Sealer. Methods: (1) E. faecalis biofilms were grown on bovine dentin, gutta-percha, hydroxyapatite and bovine bone for 14 or 21 days. After the incubation periods, the specimens (n=5 per substrate per period) were stained using the Live/Dead technique and observed using a confocal laser scanning microscope. Four confocal pictures were obtained from each sample and analyzed by the software bioImage_L. The parameters evaluated were biovolume (μm3) of total and green population (live cells) and the percentage of surface covered by microorganisms (covering grade). (2) For the second experiment, disks of each material were prepared and stored for 2 or 7 days. Antimicrobial activity was evaluated by the agar diffusion test (ADT) and the direct contact test on biofilm (DCTB, antibiofilm). For the DCTB, biofilms were grown on bovine dentin blocks for 14 days. Then, the sealers were placed on the biofilms and remained in contact for 5, 10 or 15 h. In the control group, no sealer was placed on the biofilms. The dentin blocks containing the remaining biofilms were assessed quantitatively (number of colonyforming units [CFU]). The solubility of the sealers corresponded to their mass loss (%) after 15 h immersion in distilled water. The pH values were measured at 5, 10 and 15 h. Statistical analysis was performed using parametric and non-parametric tests (p=0.05). Results: (1) There was biofilm formation in all groups. Considering the values of the covering grade there was not significant difference among the... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Ana Claúdia Pavarina / Banca: Juliana Campos Junqueira / Banca: Claúdia Helena Lovato da Silva / Banca: Ewerton Garcia de Oliveira Mima / Banca: Eunice Teresinha Giampaolo / Resumo: A capacidade de aderência dos micro-organismos a diferentes superfícies, a resistência a medicamentos, bem como a interação entre as espécies visam garantir a sobrevivência e a proliferação dos mesmos, resultando em menor susceptibilidade dos patógenos aos tratamentos e aos procedimentos de desinfecção. Este estudo teve como objetivo avaliar in vitro a eficácia da Terapia Fotodinâmica (PDT) mediada pelos fotossensibilizadores (FSs) Photodithazine® (PDZ) e Curcumina (Cur) sobre biofilmes multi-espécies compostos por Streptococcus mutans, Candida albicans e Candida glabrata. Para isso, o estudo foi divido em três partes: 1- avaliação do efeito fotodinâmico das diferentes concentrações de PDZ (100, 150, 175, 200 e 250mg/L) associada à luz LED (660nm/ 37,5J/cm2) na inativação de biofilme multi-espécies formado em fundo de placa de 96 orifícios; 2- avaliação do efeito fotodinâmico quando realizadas uma e três aplicações sucessivas de PDT, mediada por PDZ (175 e 200mg/L) e luz LED (660nm/ 37,5J/cm2) na inativação de biofilmes multi-espécies, formado sobre corpos-de-prova de resina acrílica. 3- avaliação do efeito fotodinâmico de diferentes concentrações do FS Cur (80, 100 e 120μM) associada à luz LED (455nm/ 37,5J/cm2) sobre biofilmes multi-espécies cultivados por diferentes períodos (24 e 48h) sobre corpos-de-prova de resina acrílica. Adicionalmente para cada condição avaliada foi verificado o efeito da aplicação isolada de cada concentração dos FSs PDZ e Cur em contato com o biofilme na ausência de luz (P+L-) e o efeito isolado da luz (P-L+). Além disso, foi realizado o grupo controle positivo, no qual o biofilme não esteve em contato com o FS e não foram iluminados com luz LED (P-L-). Após a aplicação dos tratamentos propostos, a viabilidade dos micro-organismos foi avaliada por meio da contagem de colônias (UFC/mL), teste do XTT, determinação da... / Abstract: The ability of adhesion of microrganisms to different surfaces, the drug resistance, as well as the interaction among the species help to ensure the survival and proliferation of these microrganisms and result in lower susceptibility of these pathogens to treatment and disinfection procedures. This study aimed to evaluate the in vitro efficacy of PDT mediated by photosensitizers (FSs) Photodithazine ® (PDZ) and Curcumin (Cur) against multispecies biofilms formed by Candida albicans, Candida glabrata and Streptococcus mutans. This study was divided into three parts: 1. evaluation of the effect of photodynamic therapy of different concentrations of PDZ (100, 150, 175, 200 and 250mg / L) associated with the LED light (660 nm / 37.5 J/cm2) in the inactivation of multspecies biofilms formed in 96-well microtiter plates; 2. evaluation of the photodynamic effect of one PDT applications only and three successive PDT applications mediated by PDZ (175 and 200 mg / L) and LED light (660 nm / 37.5 J/cm2) in the inactivation of multispecies biofilms, formed on acrylic resin samples; 3. evaluation of the photodynamic effect of different concentrations of Cur FS (80, 100, and 120μM) associated with LED light (455nm / 37.5 J/cm2) against multispecies biofilms grown during different periods (24 and 48h) on acrylic resin samples. Additional samples were treated either with FSs (PDZ or Cur) (P+L-) or LED light (P-L+) only. Positive control samples had neither light nor FSs (PDZ or Cur) (P-L-). After applying the proposed treatments, the viability of microrganisms was assessed by Colony Count (CFU / mL), the XTT assay, determination of the total biomass (CV) and confocal laser scanning microscopy (CLSM).The results were analyzed using ANOVA or Kruskal-Wallis test followed by Tukey or Dunn, respectively. For the biofilm formed in 96-well plate, the concentrations of 175 and 200mg/L showed greater reduction in cell... / Doutor