Submitted by isabela.moljf@hotmail.com (isabela.moljf@hotmail.com) on 2017-05-18T15:08:24Z No. of bitstreams: 1 sandrahelenacerratotibiriça.pdf: 1652171 bytes, checksum: 70c53fdf10ce2e1aabc9b49f47b6fd54 (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2017-05-18T15:43:13Z (GMT) No. of bitstreams: 1 sandrahelenacerratotibiriça.pdf: 1652171 bytes, checksum: 70c53fdf10ce2e1aabc9b49f47b6fd54 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-18T15:43:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 sandrahelenacerratotibiriça.pdf: 1652171 bytes, checksum: 70c53fdf10ce2e1aabc9b49f47b6fd54 (MD5) Previous issue date: 2008-09-26 / FAPEMIG - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais / A epidemiologia da esquistossomose apresentou transformações significativas nas últimas décadas no Brasil. No Estado de Minas Gerais, a redução da morbi-mortalidade e o desenvolvimento tecnológico dos meios diagnósticos e terapêuticos foram evidentes, mas não suficientes para impedir a expansão geográfica da endemia. Clinicamente, a esquistossomose pode se manifestar com as formas agudas e as crônicas hepatoesplênicas, estas mais freqüentes nas áreas de altas endemicidades. Outra forma incapacitante e subnotificada é a mielorradiculopatia esquistossomótica, que ocupa papel de destaque pela gravidade potencial e possibilidade de ocorrer também em áreas de baixas endemicidades, já que não depende da intensidade da infecção. Considerando a população residente, foi realizado um levantamento seccional objetivando determinar a prevalência, a intensidade da esquistossomose e a distribuição dos hospedeiros intermediários em três municípios da microrregião de Juiz de Fora. Utilizou-se estudo amostral baseado no cadastro das famílias no SIAB, com investigação de 850 famílias por meio de exames coproparasitológicos pelo método Kato-Katz e aplicação de questionário estruturado. Este estudo validou a utilização do cadastro das famílias no SIAB como base populacional para cálculo amostral na realização de pesquisas de campo. Foi pioneiro na verificação da prevalência média de 2,4% da esquistossomose mansoni nos municípios de Piau (2%), Goianá (2,1%) e Coronel Pacheco (3,1%). As características da transmissibilidade na região foram avaliadas e descritas. Os infectados predominaram na população adulta jovem, somente 10% dos escolares foram positivos e não constituíram indicadores dos domicílios com adultos doentes. Os resultados obtidos permitiram identificar o padrão de agregação, revelando os indivíduos com as maiores cargas parasitárias. As três espécies de moluscos de importância epidemiológica foram identificadas nas áreas estudadas: B. glabrata, B. straminea, e B. tenagophila. Constatou-se que, nas situações de baixa endemicidade, em municípios com população inferior a 5.000 habitantes e cobertos pela estratégia de saúde da família, a pesquisa da prevalência da esquistossomose v com base no estudo amostral a partir do cadastro das famílias no SIAB é apropriada para identificar os grupos de maior transmissão. Os indivíduos infectados foram espacialmente referenciados com os moluscos potenciais hospedeiros e indicaram os focos de maior transmissibilidade da esquistossomose nos municípios estudados. / The epidemiology of schistosomiasis has undergone significant transformation in recent decades in Brazil. In the state of Minas Gerais there has been a decline in morbi-mortality, along with advances in diagnosis and treatment, but these have not been sufficient to prevent the geographic spread of the endemic. Clinically, schistosomiasis can appear in acute and chronic hepatosplenic forms, the latter more frequent in areas of high endemicity. Another incapacitating and underreported form, schistosomotic myeloradiculopathy, deserves attention because of its potential severity and the fact it can also occur in areas with low endemicity, since it does not depend on the infection’s intensity. A cross-sectional study was carried out to determine the prevalence and intensity of schistosomiasis in the resident population and the distribution of intermediate hosts in three municipalities in the Juiz de Fora micro-region. The sample was drawn from families listed in the Basic Health Service Information System (SIAB), from which 850 families were investigated through coproparasitological tests by the Kato-Katz technique and the application of a structured questionnaire. This study was groundbreaking in verifying an average schistosomiasis mansoni prevalence of 2.4% in the municipalities of Piau (2%), Goianá (2.1%) and Coronel Pacheco (3.1%). The transmissibility characteristics in the region were evaluated and described. The infected individuals were predominantly young adults. Only 10% of the school-age subjects were positive and there were no indicators of households with sick adults. The results permitted identifying the pattern of aggregation, revealing the individuals with greater parasite loads. The three species of snail carriers were identified in the areas studied: B. glabrata, B. straminea, and B. tenagophila. Therefore, in situations of low endemicity, in regions with population under 5,000 people and covered by family preventive health programs, the study of the prevalence of schistosomiasis based on sample data from households listed in the SIAB is appropriate to identify the groups of greater transmission. The infected individuals were spatially referenced together with the host snails, indicating the probable foci of greatest transmission in the municipalities studied.

Submitted by isabela.moljf@hotmail.com (isabela.moljf@hotmail.com) on 2017-07-26T13:40:04Z No. of bitstreams: 1 sandrahelenacarratotibirica.pdf: 2260939 bytes, checksum: e1f49dcf7848afde81dd604c28763e2d (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2017-08-08T18:45:05Z (GMT) No. of bitstreams: 1 sandrahelenacarratotibirica.pdf: 2260939 bytes, checksum: e1f49dcf7848afde81dd604c28763e2d (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-08T18:45:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 sandrahelenacarratotibirica.pdf: 2260939 bytes, checksum: e1f49dcf7848afde81dd604c28763e2d (MD5) Previous issue date: 2006-04-10 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O objetivo desse estudo foi avaliar a prevalência, infectividade, biometria, abundância e distribuição geográfica de espécies de Biomphalaria no município de Juiz de Fora, Minas Gerais, no ano de 2004. As coletas foram realizadas para atender a dois propósitos. O primeiro propósito visou identificar e avaliar a infectividade, abundância, biometria e distribuição geográfica das espécies encontradas. Desta forma, ocorreram coletas em 31 localidades sendo seis represas, onze açudes, sete hortas contendo valas de irrigação, cinco lagos, uma lagoa e uma cachoeira. As 124 visitas ao campo foram distribuídas nos quatro ciclos estacionais (cada ponto foi visitado quatro vezes) e 1770 moluscos foram capturados, com padronização do tempo de coleta. O segundo propósito, de alargar a amostra para se avaliar a infectividade, ocorreu no início da estação chuvosa do ano de 2004, e 3494 exemplares de Biomphalaria foram coletados sem padronização do tempo de captura. Os 5.264 espécimes, oriundos de dez localidades, sendo três açudes e sete hortas, predominaram nas regiões leste e norte da mancha urbana. Todas as valas de irrigação investigadas estavam colonizadas por Biomphalaria. Através de técnicas de análise morfológica e molecular, identificaram-se três espécies: B. tenagophila, B. peregrina e B. straminea. Nas dez localidades em que se registrou a presença do molusco do gênero Biomphalaria a distribuição foi a seguinte: B. tenagophila foi prevalente em 60 % dos pontos, e B. peregrina em 20% dos pontos. Constatou-se, pela primeira vez no município, a espécie B. straminea que ocorreu em 20% dos pontos. Nenhum molusco foi encontrado infectado com Schistosoma mansoni, no entanto, exemplares de B. straminea capturados nas coordenadas 21º39’59’’S e 43°25’09’’W, quando submetidos ao teste de suscetibilidade ao S. mansoni apresentaram 25,4% de infectividade. Observou-se forte correlação inversa entre as variáveis abundância de Biomphalaria e pluviosidade local, em todas as espécies estudadas. A temperatura influenciou as populações de Biomphalaria estudadas na faixa das médias inferiores a 15,7°C. Estatisticamente, o estudo das variáveis tamanho e peso revelou que as menores médias biométricas ocorreram em B. peregrina, seguida de B. straminea, e as maiores dimensões corporais foram as de B. tenagophila. Verificou-se forte correlação positiva entre as variáveis peso (massa corpórea) e tamanho (diâmetro da concha), nos exemplares encontrados. Conclui-se que no município de Juiz de Fora ocorrem três espécies de Biomphalaria, sendo duas delas, B. straminea e B. tenagophila, de importância epidemiológica. A pluviosidade e a temperatura interferem na abundância dos espécimes locais. Todas as medidas de peso e tamanho das amostragens de Biomphalaria, em Juiz de Fora, estão abaixo das máximas dimensões referidas na literatura. / The objective of this study was to identify the species of Biomphalaria and evaluate their prevalence, infectivity, biometry, abundance and geographic distribution in the municipality of Juiz de Fora, Minas Gerais, Brazil, in 2004. The samples were collected for two purposes. The first was to identify the infectivity, abundance and geographic distribution of the species found. Therefore, samples were collected in 31 locations: 6 reservoirs, 11 rudimentary holding ponds, 7 irrigation ditches, 5 lakes, 1 ornamental pond and 1 waterfall. The 124 field visits were spaced throughout the four seasons (each point visited four times) and 1,770 snails were captured, with standardized collection intervals. The second purpose, to enlarge the sample to assess infectivity, occurred at the start of the wet season in 2004, and 3,494 exemplars of Biomphalaria were collected, without standardized collection intervals. These specimens were gathered from 10 locations – 3 rudimentary holding ponds and 7 irrigation ditches – predominantly in regions located to the east and north of the main urban sprawl. All told, then, 5,264 specimens were collected. All the irrigation ditches were colonized by Biomphalaria. Through morphological and molecular identification techniques, three species were identified: B. tenagophila, B. peregrina and B. straminea. B. tenagophila was prevalent in 60 % of the points and B. peregrina in 20% of them. This is the first report in the municipality of B. straminea, occurring in 20% of the points. No snails were found infected by Schistosoma mansoni, but snails of the species B. straminea captured at 21º39’59’’S and 43°25’09’’W, when submitted to the susceptibility test to S. mansoni, showed an infection rate of 25.4%. There was a strong inverse correlation between the abundance of Biomphalaria and the local rainfall, in all species studied. Temperature influenced the populations of Biomphalaria studied in the range below 15.7°C. Statistical study of the size and weight variables revealed that the smallest biometric averages occurred in B. peregrina, followed by B. straminea, and the largest body dimensions were those of B. tenagophlia. There was a strong positive correlation between weight (body mass) and size (shell diameter) in the exemplars found. The conclusion is that three species of Biomphalaria occur in the municipality of Juiz de Fora, two of them (B. straminea and B. tenagophila) of epidemiological importance. Rainfall and temperature interfered in the abundance of the local specimens. All the weight and size measures of the Biomphalaria specimens in Juiz de Fora are below the maximum figures referred to in the literature.

No description available.

Thesis (Ph. D.)--Illinois State University, 1977. / Title from title page screen, viewed Jan. 4, 2005. Dissertation Committee: Harry W. Huizinga, H. Hetzel, M. Nadakavukaren, A. Richardson, E. Willis. Includes bibliographical references (leaves 181-195) and abstract. Also available in print.

Submitted by Nuzia Santos (nuzia@cpqrr.fiocruz.br) on 2012-08-17T13:05:38Z No. of bitstreams: 1 Dissertacao_Cryslaine Aguiar Silva[1].pdf: 4463723 bytes, checksum: 12a5258b0c98c7c52fdd0066ba8b4910 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-08-17T13:05:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao_Cryslaine Aguiar Silva[1].pdf: 4463723 bytes, checksum: 12a5258b0c98c7c52fdd0066ba8b4910 (MD5) / As coleções biológicas constituem importante fonte de informações, propiciando conhecimento e desenvolvimento científico. A Coleção de Malacologia Médica (Fiocruz-CMM) do Centro de Pesquisas René Rachou, localizada no Laboratório de Helmintologia e Malacologia Médica (LHMM) conta atualmente com cerca de onze mil exemplares de moluscos de importância médica e veterinária, principalmente os do gênero Biomphalaria. Desde a década de 1990, o LHMM recebe moluscos de diversas regiões do Brasil e do exterior e utiliza caracteres morfológicos e/ou moleculares na identificação das espécies. Parte do acervo não foi identificada por técnicas moleculares e em 332 pontos de coleta os exemplares encontravam-se sem identificação. Assim, o objetivo do presente trabalho foi avaliar e retificar a identificação dos moluscos do gênero Biomphalaria presentes na Fiocruz- CMM. Para isso o acervo foi separado em dois grupos: grupo I: exemplares inseridos entre 1993 e 2002, com 620 pontos de coleta e 5.137 exemplares; grupo II: inseridos entre 2003 e 2009, com 464 pontos de coleta e 1.924 exemplares. A identificação específica dos exemplares do acervo foi realizada pela morfologia e/ou pela PCR-RFLP. Os resultados foram agrupados em seis categorias: 1) dados corretos; 2) equívocos (classificados como outra espécie); 3) adequações (espécie em sinonímia); 4) inconclusivos (mesma espécie com perfis moleculares diferentes), 5) material degradado e 6) exemplares identificados pela primeira vez (depositados sem identificação). No grupo I, 41,8% dos pontos de coleta os exemplares estavam com dados taxonômicos corretos; em 2,1% tinham equívocos; em 0,8% houve adequação; em 25,5% a identificação foi inconclusiva; em 1,9% estavam degradados impossibilitando a identificação e em 27,9% foram identificados pela primeira vez. No grupo II, 70,7% dos pontos de coleta os exemplares estavam com dados taxonômicos corretos; em 5,6% tinham equívocos; em 10,1% a identificação foi inconclusiva; em 5,4% os exemplares estavam degradados impossibilitando a identificação e em 8,2% foram identificados pela primeira vez. Os equívocos ocorreram entre: B. peregrina e B. tenagophila (35,8%), B.tenagophila e B. glabrata (20,5%), B. tenagophila e B. occidentalis (7,7%), B. peregrina e B.intermedia (5,2%), B. intermedia e B. straminea (5,2%), B. amazonica e B. cousini (5,1%), B.straminea e B. occidentalis (2,6%), B. straminea e B. oligoza (2,6%), B. prona e B. kuhniana (2,6%), B. tenagophila e B. t. guaibensis (2,6%), B. straminea e B. glabrata (2,6%), B. tenagophila e B. straminea (2,6%), B. peregrina e B. schrammi (2,6%), e B. peregrina e B. straminea (2,6%). A adequação foi em virtude de B. obstructa e B. temascalensis serem sinonímias de B. havanensis. Na categoria inconclusiva ficaram B. aff. straminea, B. tenagophila oriundas da Argentina e B. peregrina. Estes dados demonstram a importância da utilização de mais de uma técnica na identificação específica e da boa preservação dos exemplares do acervo. Estes dados foram utilizados para atualizar os livros de registro de recebimento de moluscos, livro de tombo e a base de dados do CRIA. Estudos taxonômicos serão realizados com as espécies da categoria inconclusivos. / The biological collections are an important source of information providing knowledge and scientific development. The Medical Malacology Collection (Fiocruz-CMM) of René Rachou Research Center located at the Laboratory of Medical Helminthology and Malacology (LHMM) has currently about eleven thousand specimens of molluscs of medical and veterinary importance, especially the genre Biomphalaria. Since 1990s, the LHMM receives molluscs from various regions of Brazil and abroad and utilizes morphological and/or molecular method for species’ identification. Part of the collection has not been identified by molecular techniques and 332 collection points were unidentified. Thus, o objective of this present study was assess and rectify the identification of the mollusks of genre Biomphalaria of the Fiocruz-CMM. For this the collection was separated into two groups: group I: specimens inserted between 1993 and 2002 with 620 collection points and 5.137 specimens; group II: inserted between 2003 and 2009, with 464 collection points and 1.924 specimens. The specific identification of specimens from the collection was performed by morphology and/or PCR-RFLP. The results were grouped into six categories: 1) correct data, 2) errors (classified as other species), 3) adjustments (species in synonymy), 4) inconclusive (same species with different molecular profiles) 5) degraded material and 6) sample identified to first time (deposited without identification). In group I, 41.8% of collection points were with correct taxonomic data, 2.1% had errors; 0.8% was adjustment; 25.5% the identification was inconclusive, 1.9% were degraded that was impossible to identify and 27.9% were first time identified. In group II, 70,7% of collection points the specimens were with correct taxonomic data; 5,6% had errors; 10.1% was inconclusive, 5.4% of specimens were degraded making it impossible to identification and 8.2% of specimens were first time identified. The errors has occurred between: B. peregrina and B. tenagophila (35,8%), B. tenagophila and B. glabrata (20.5%), B. tenagophila and B. occidentalis (7.7%), B. peregrina and B. intermedia (5.2%),B. intermedia and B. straminea (5.2%), B. amazonica and B. cousini (5.1%), B. straminea and B. occidentalis (2.6%), B. straminea and B. oligoza (2.6%), B. prona and B. kuhniana (2.6%), B. tenagophila and B. t. guaibensis (2.6%), B. straminea and B. glabrata (2.6%), B. tenagophila and B. straminea (2.6%), B. peregrina and B. schrammi (2.6%), and B. peregrina and B. straminea (2.6%). The adjustment was from B. obstructa and B. temascalensis are synonymy of B. havanensis. The inconclusive category was B. aff. straminea, B. tenagophila from Argentina and B. peregrina. These data demonstrate the importance of using more than one technique in taxonomic confirmation and the good preservation of specimens’ collection. These data was utilized to update the books receive mollusks and data of CRIA. The studies will continue in specimens of the inconclusive category.

Submitted by Nuzia Santos (nuzia@cpqrr.fiocruz.br) on 2012-09-11T16:58:58Z No. of bitstreams: 1 Dissertação FINAL 08 09 12.pdf: 2298162 bytes, checksum: 6e2f996852589f87fd2d6180f0571f3e (MD5) / Made available in DSpace on 2012-09-11T16:58:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação FINAL 08 09 12.pdf: 2298162 bytes, checksum: 6e2f996852589f87fd2d6180f0571f3e (MD5) / FIOCRUZ, FUNDEP, CNPq, CAPES / O córrego Herivelton Martins foi escolhido para dar continuidade aos estudos com a introdução da linhagem Biomphalaria tenagophila do Taim/RS, resistente ao Schistosoma mansoni, em coleções hídricas do Município de Bananal/SP, iniciados em 2008. Oitocentos exemplares B. tenagophila adultos da linhagem Taim/RS foram marcados e introduzidos. Pelo método de marcação da concha foi estimada a densidade populacional da linhagem introduzida em relação à local. Após 15 dias da introdução 37,5% dos caramujos coletados estavam marcados. Após 4, 11 e 14 meses da introdução, caramujos jovens (≤ 5 mm de diâmetro) foram coletados e submetidos a técnica de PCR_RFLP para identificação do marcador molecular de 350pb, típico da linhagem do Taim e com caráter dominante. A proporção do marcador molecular nestes caramujos foi 37,1%, 35,7 e 60% respectivamente. Foram realizados três testes de infecção com a cepa SJ de S. mansoni com os descendentes F1 de caramujos coletados nos diferentes períodos após a introdução. Os sobreviventes foram submetidos à técnica de PCR_RFLP para verificar se havia alguma correlação entre a resistência e a presença do marcador de 350pb. No primeiro desafio com o S. mansoni 38,6% dos exemplares provenientes dos caramujos locais, coletados antes da introdução, estavam positivos, bem como 14,9% dos descendentes coletados após 4 meses da introdução. A análise molecular realizada com os caramujos positivos para S. mansoni, oriundos de exemplares pós-introdução, demonstraram que apenas 10% apresentaram o marcador de 350 pb, sendo que este marcador estava presente em 60,8% dos caramujos negativos. No segundo desafio, os descendentes de caramujos coletados antes, após 4 e 11 meses da introdução apresentaram taxas de infecção de 25%, 4,1%, 17%, respectivamente. Os caramujos positivos para S. mansoni não apresentaram o marcador molecular. A percentagem do marcador molecular nos caramujos negativos, coletados após 4 e 11 meses da introdução, foi de 66,6% e 56,2%, respectivamente. No terceiro desafio, as taxas de infecção dos descendentes foram de 26,5% antes da introdução, 6,8% após 11 meses e 2,1% após 14 meses. A análise molecular dos descendentes neste desafio está em andamento. Os dados apontam para uma significativa diminuição da suscetibilidade dos caramujos coletados após a intervenção. O marcador molecular de 350pb típico da linhagem do Taim foi detectado em proporções muito maiores nos caramujos negativos. Os resultados parciais obtidos permitem a inferência que o patrimônio genético da linhagem resistente B. tenagophila do Taim está sendo transmitido com êxito aos descendentes após intervenção tendo como consequência uma maior resistência à infecção por S. mansoni. / The stream Herivelton Martins was chosen to continue the studies on introduction of Biomphalaria tenagophila from Taim/RS, resistant to Schistosoma mansoni, in hydric collections of Bananal/SP, initiated in 2008. Eight hundred adult specimens of B. tenagophila belonging to the lineage of Taim/RS were labeled and introduced. The populational density of the introduced lineage in relation to the local one was estimated using the labeling method of the shell. Fifteen days post-introduction, 37.5% of the collected snails were labeled. After 4, 11 and 14 months of the introduction, juvenile snails (≤ 5 mm diameter) were collected and submitted to PCR-RFLP technique for identification of the molecular marker 350 pb, typical of the Taim lineage and with dominant character. The proportions of the molecular marker in these snails were 37.1%, 35.7% and 60%, respectively. Three infection tests were carried out with the SJ strain of S. mansoni, using the descendants F1 of the snails collected on different periods after introduction. The surviving snails were submitted to the PCR-RFLP technique, in order to verify if there was any correlation between resistance and the presence of the marker 350 pb. In the first challenge with S. mansoni, 38.6% of the specimens belonging to the local population, and collected before introduction, were found to be positive, as well as 14.9% of the offsprings collected 4 months post-introduction. The molecular analysis performed with positive snails to S. mansoni, related to specimens after introduction, demonstrated that only 10% presented the molecular marker 350 pb, and this marker was present in 60.8% of the negative snails. In the second challenge, the offsprings of the snails collected before or 4 and 11 months post-introduction presented infection rates of 25%, 4.1% and 17%, respectively. The positive snails for S. mansoni did not present the molecular marker. The proportions of the molecular marker in the negative snails, collected 4 and 11 months after introduction, were 66.6% and 56.2%, respectively. In the third challenge, the infection rates of the descendants were 26.5% before introduction, 6.8% after 11 months and 2.1% after 14 months. The molecular analysis of the descendants related to this challenge is in progress. Data point out to a significant decrease in the susceptibility of the snails collected after intervention. The molecular marker 350 pb, typical of the Taim lineage, was detected in higher proportions in the negative snails. The partial results obtained allow to infer that the genetic heritage of the resistant B. tenagophila strain from Taim is being successfully transmitted to the descendants after intervention, showing as a result a higher resistance to S. mansoni infection.

Submitted by Nuzia Santos (nuzia@cpqrr.fiocruz.br) on 2013-01-07T16:25:50Z No. of bitstreams: 1 Dissertação Aristeu.pdf: 6273421 bytes, checksum: b5f821ad263486462653b244d6c6ecbb (MD5) / Made available in DSpace on 2013-01-07T16:25:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação Aristeu.pdf: 6273421 bytes, checksum: b5f821ad263486462653b244d6c6ecbb (MD5) / Schistosoma mansoni, agente etiológico causador da esquistossomose no Brasil, necessita de passagem obrigatória em moluscos do gênero Biomphalaria como hospedeiros intermedíarios, para fechamento do ciclo da doença. Os mecanismos envolvidos na relação parasito-hospedeiro ainda não foram completamente elucidados e culturas celulares tem-se mostrado úteis para responder questões específicas. Dessa forma, nosso estudo teve como objetivo o estabelecimento de culturas celulares de diferentes tecidos de Biomphalaria tenagophila Taim, linhagem completamente resistente ao S. mansoni. Todos os tecidos selecionados estão suposta ou comprovadamente envolvidos no sistema interno de defesa desses moluscos. As culturas foram mantidas em dois meios distintos e a viabilidade celular foi avaliada nos dois casos. As células cultivadas foram caracterizadas através de microscopia óptica invertida e microscopia eletrônica de transmissão e varredura. Foram obtidas, com sucesso, culturas celulares em dez dos doze tecidos dissecados a partir da B. tenagophila. Sob microscopia ótica, a maioria das células apresentou formato esférico, sem aderência, sem pseudópodes ou filapódios. Através da microscopia eletrônica de transmissão identificamos dez subtipos celulares na cultura do manto e quinze na cultura de porção sacular e tubular do túbulo renal. Nas culturas de glândula digestiva e piloro identificamos seis tipos celulares, além de cinco originadas de glândulas nidamental e prostática, quatro de ovotesti e papo, e três de glândula de albúmen. Em quatro dessas culturas (manto, ovotesti, porção renal e sacular) analisamos a complexidade celular e o perfil de açúcares de membrana através de citometria de fluxo com conjugados lectina-Alexa Fluor 488, em busca de marcadores específicos para tipos celulares. Com exceção de WGA (wheat germ agglutinin), que se ligou a todos os tipos celulares estudados, todas as outras lectinas podem ser consideradas potenciais marcadores de tipos celulares. Estudos mais detalhados estão em andamento visando a seleção das lectinas mais adequadas como marcadores de tipos celulares nesse modelo experimental de culturas celulares de Biomphalaria. / Schistosoma mansoni, the etiological agent for schistosomiasis in Brazil, has an obligatory passage through Biomphalaria snails as intermediate hosts to complete the disease cycle. The mechanisms involved in the interaction mollusk-parasite have not been totally clarified yet and cell culture models appear as potential tools to help clarify specific issues. With that in mind, we devoted our study to develop primary cell cultures from different tissues of Biomphalaria tenagophila belonging to Taim strain, which is completely resistant to S. mansoni infection. Those tissues were selected based on their known or putative importance to the internal defense system of the mollusk. The cultures were maintained at two different media and cell viability was evaluated for each condition. The cells in culture were characterized by optical inverted and transmission electronic microscopy. Primary cultures from ten out of twelve tissues of B. tenagophila were successfully obtained. Most of the cell subsets were round, mostly non-adherent, without pseudopodia or filapodia by optical microscopy. Under electronic microscopy we identified ten cell subsets in mantle culture and fifteen cell subsets in both saccular and tubular kidney sections. In digestive gland and pylorus six differents cell subsets could be identified against five cell subsets in nidamental and prostatic gland, four in ovotestis and crop and three in albumen gland. Cell complexity and membrane sugar patterns of four different tissue-derived cultures (mantle, ovotesti, saccular and tubular kidney) were also analyzed by flow cytometry using different Alexa Fluor 488-lectin conjugates looking for subset-specific markers. Besides WGA (wheat germ agglutinin), which was found to bind to all kinds of mollusk cells, all the other lectins tested could be considered potential subset markers. Further studies are in progress to select the most suitable lectin to be used as subset marker in those cell culture-based experimental model for Biomphalaria.

Submitted by Nuzia Santos (nuzia@cpqrr.fiocruz.br) on 2013-01-25T10:42:23Z No. of bitstreams: 1 MATTOS, Ana Carolina.pdf: 1283545 bytes, checksum: a4b542c6c88309cd3a7cec32cb5e787f (MD5) / Made available in DSpace on 2013-01-25T10:42:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MATTOS, Ana Carolina.pdf: 1283545 bytes, checksum: a4b542c6c88309cd3a7cec32cb5e787f (MD5) Previous issue date: 2011 / A fenoloxidase (PO) é uma enzima envolvida no processo de melanização. A melanização é um mecanismo de defesa contra patógenos, muito importante para diversos invertebrados, inclusive, alguns artigos já descreveram a existência dessa enzima em Biomphalaria glabrata. Utilizando B. tenagophila (linhagem resistente Taim e linhagem susceptível Cabo Frio), tentou-se esclarecer, por meio de experimentos “in vivo” e “in vitro”, a real importância desse sistema enzimático no processo de resistência da Biomphalaria ao S. mansoni. Verificou-se que, apesar do sistema fenoloxidase apresentar, em alguns experimentos, uma atividade significativamente maior, principalmente na linhagem Taim, na presença do S. mansoni, não foi possível afirmar que esse sistema tem importância no mecanismo de resistência da B. tenagophila Taim contra S. mansoni, pois a ativação enzimática ocorreu em todas as linhagens testadas. Quando os testes da atividade enzimática foram realizados, utilizando Echistosoma paraensei (trematódeo, digenea), que infecta a linhagem Taim, os resultados foram semelhantes. Outro aspecto estudado neste trabalho foi a resposta do sistema interno de defesa (SID - hemócitos, fração solúvel e hemolinfa total) da B. glabrata e B. tenagophila (Taim e Cabo Frio), frente aos esporocistos secundários, obtidos de caramujos B. glabrata infectadas. Já foi descrito na literatura o processo de mascaramento/mimetismo molecular como mecanismo de evasão do parasito. Assim, utilizando os esporocistos secundários, foi possível demonstrar que os esporocistos primários são mais afetados pelo SID da Biomphalaria (principalmente Taim) do que os esporocistos secundários. Os esporocistos primários apresentaram maior mortalidade e danos no tegumento do que os esporocistos secundários. No entanto, a inoculação dos esporocistos secundários, provenientes de B. glabrata, obteve sucesso apenas na espécie análoga, resultando na eliminação de cercárias, trinta dias após a inoculação. O mesmo não ocorreu nas linhagen de B. tenagophila Taim e Cabo Frio. Dessa forma, o mimetismo/mascaramento molecular é um mecanismo possível, porém experimentos utilizando esporocistos secundários provenientes da B. tenagophila são necessários para verificar a real importância desse processo como mecanismo de escape do parasito em relação a B. tenagophila Taim. / Phenoloxidase (PO) is an enzyme involved in the process of melanization, which is a defense mechanism against pathogens, being very important for different invertebrates. Several articles have described the presence of this enzyme in Biomphalaria glabrata. Using B. tenagophila (resistant Taim and susceptible Cabo Frio) lineages to Schistosoma mansoni), we carried out “in vivo” and “in vitro” experiments aimed at clarifying the real importance of this enzymatic system in the process of Biomphalaria resistance to S. mansoni. It was observed in some experiments that the phenoloxydase system presented a significantly higher activity, mainly in Taim lineage in the presence of S. mansoni, but it was not possible to confirm whether this system exerts some importance in the resistance mechanism of B. tenagophila Taim against S. mansoni, since the enzymatic activity has occurred in all the lineages tested. When the enzymatic activity was tested using Echistosoma paraensi (Trematode, Digenea), which infects the Taim lineage, the results obtained were very similar. Another aspect investigated in the present work was the response of the internal defense system (IDS – hemocytes, soluble fraction, and total hemolymph) of B. glabrata and B. tenagophila (Taim and Cabo Frio) in the presence of secondary sporocysts derived from infected B. glabrata snails. The process of molecular masking/mimetism as evasion mechanism of the parasite has been described in the literature. Thus, using secondary sporocysts, it was possible to demonstrate that primary sporocysts are more affected by IDS of Biomphalaria (mainly of Taim), presenting higher mortality rate and tegumental damages than the secondary ones. Nevertheless, inoculation of secondary sporocysts derived from B. glabrata was successful only in the analogue species, showing as a result elimination of cercariae thirty days post-inoculation. The same result did not occur with B. tenagophila Taim and Cabo Frio. In this way, the molecular masking/mimetism may be considered a possible mechanism, however, further experiments using secondary sporocysts derived from B. tenagophila are needed in order to verify the real importance of this process as the parasite´s scape mechanism in relation to B. tenagophila Taim.

Made available in DSpace on 2016-03-15T14:24:27Z (GMT). No. of bitstreams: 2 carlos_lima_ioc_dout_2013.pdf: 8345944 bytes, checksum: f6913af0e4b95c4ed9e6e5b2eefc25e9 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2016-01-13 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / A dinâmica de populações é centrada na observação da taxa de crescimento populacional. Essa análise, fundamentalmente, leva em conta a combinação de dois princípios básicos, taxa de reprodução e a taxa de mortalidade. Outros fatores extrínsecos, tais como migração, imigração, variações climáticas, competição por alimento ou nutrientes e doenças podem afetar a abundância de uma determinada espécie. Nessa tese, foram realizados quatro experimentos em laboratório e um estudo de campo de oito meses, no que se buscou analisar e comparar os parâmetros reprodutivos das três espécies hospedeiras de Schistosoma mansoni no território brasileiro, Biomphalaria glabrata, B. tenagophila e B. straminea. Os dois primeiros experimentos tiveram como objetivo analisar os parâmetros reprodutivos das três espécies, mais uma cepa de B. straminea refratária a infecção, quando expostas a infecção antes e após alcançarem a maturidade sexual, ou seja, quinze e quarenta e cinco dias após a eclosão dos moluscos. O terceiro experimento foi concebido para comparar o impacto provocado na capacidade reprodutiva das coortes estudadas frente à exposição ao parasito, quando realizada individualmente em cada molusco ou em massa. Nesse caso, a dependência da densidade do parasito dentro do hospedeiro poderia desempenhar papel crucial na dinâmica populacional No quarto experimento, teve como escopo amplificar o efeito da infecção, tal como proposto no experimento três, porém aumentando em ate quatro vezes o numero de miracídios por moluscos e a exposição foi realizada antes que os caramujos atingissem a maturidade sexual. O trabalho de campo foi conduzido em áreas onde ocorre a transmissão da esquistossomose, nos municípios de Barra Mansa e Sumidouro, estado do Rio de Janeiro. Os resultados obtidos em laboratório demonstraram que a cepa resistente de B. straminea apresentou sucesso reprodutivo significativamente superior em comparação as outras coortes estudadas. O efeito da infecção no sucesso reprodutivo foi menor em B. straminea do que nas outras duas espécies. A infecção imposta em indivíduos jovens de B. tenagophila e B. glabrata, ocasionou expressiva diminuição dos parâmetros reprodutivos em especial na ultima espécie. Quando a infecção foi imposta a caramujos sexualmente maduros que os valores observados para B. tenagophila foram significativamente superiores do que os verificados para B. glabrata As observações obtidas no estudo de campo foram semelhantes às 7 alcançadas nos experimentos realizados em laboratório. Os resultados deste estudo podem contribuir para melhor compreensão da abundancia e ampla distribuição geográfica de B. straminea e sua importância como hospedeiro intermediário / Population dynamics is mainly concerned in establishing factors that affect the population growth rate, and is essentially based on two major elements, the reproducti ve and mortality rate s, for analysis. Other extrinsic factors, such as migration, climatic variations, food and nutrient competition, and diseases may affect the abundance of specific species. The aim of this study was to analyze and compare reproductive parameters among three Brazilian host species for Schistosoma mansoni , namely Biomphalaria g labrata, B. tenagophila and B. straminea , which were explored through four laboratory experiments and one eight - month field work. The first two experiments aimed in analyzing the reproductive parameters among these three species along with a refractory spe cies, B. Straminea , for infection, when exposed before and after reaching sexual maturity, in other words, fifteen to forty five days after the molluscs hatch. A third experiment was carried out to compare the impact on the reproductive capacity by the stu died cohorts when exposed to the parasite individually for each mollusc or in bulk. In this case, the reliance of the parasites density within the hosts could play a crucial role in the population dynamics. The fourth experiment was focused on amplifying t he effect of the infection, as was proposed by the third experiment, however increasing to up to four times the number of miracidia per snails and was performed prior to the mollusc’s sexual maturity. The field work was conducted in areas where schistosomi asis transmission occurs, in the counties of Barra Mansa and Sumidouro, in Rio de Janeiro state. The laboratory results demonstrated successful reproduction in the resistant specie for B. straminea , which was significantly higher among the other species st udied. The effect of infection on successful reproduction was lower in the B. straminea when compared to the other two species. The imposed infection on young snails from the B. tenagophila and B. g labrat a caused an expressive decrease in the reproductive parameters, especially the later specie. When infection occurred in sexually mature snails, the values observed for where significantly higher than those observed for B. g labrata The findings in the field work where similar to those observed in the lab experiments. These findings throw some light in the much wider geographical distribution of B. straminea and its importance on the epidemiology and transmission control of schistosomiasis, Especially in the north - eastern Brazil, where it is much more important than the other two species as a host of schistosomiasis.

Submitted by Gilvan Almeida (gilvan.almeida@icict.fiocruz.br) on 2016-10-11T17:37:06Z No. of bitstreams: 2 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) 72047.pdf: 2371893 bytes, checksum: 77f3735b9ff714c38d542ea95b2fc9b8 (MD5) / Approved for entry into archive by Anderson Silva (avargas@icict.fiocruz.br) on 2016-10-17T13:57:42Z (GMT) No. of bitstreams: 2 72047.pdf: 2371893 bytes, checksum: 77f3735b9ff714c38d542ea95b2fc9b8 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-17T13:57:42Z (GMT). No. of bitstreams: 2 72047.pdf: 2371893 bytes, checksum: 77f3735b9ff714c38d542ea95b2fc9b8 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2016 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / A esquistossomose mansônica ainda constitui um grave problema de saúde pública no Brasil e, portanto, o conhecimento dos diversos aspectos da interação Schistosoma mansoni-Biomphalaria, são pertinentes e relevantes como subsídios à medidas de controle e prevenção desta parasitose. Estudos in vitro têm mostrado que a suscetibilidade dos hospedeiros intermediários de S. mansoni, Biomphalaria straminea e Biomphalaria glabrata está relacionado à presença de lectinas. Importante transmissor da Esquistossomose no Brasil, B. straminea apresenta baixos índices de infecção em condições experimentais. Apesar disto, existem poucos estudos a respeito das características morfológicas e do comportamento in vitro dos hemócitos deste molusco frente à infecção por S. mansoni. Com o objetivo de caracterizar a resposta hemocitária de B. straminea (cepa Souza-PB) expostas a miracídios de S. mansoni, os moluscos foram expostos em massa e expostos individualmente a cinco miracídios. Exemplares de B. glabrata foram utilizadas como controle positivo. A hemolinfa foi coletada, corada em Azul de Tripan e os hemócitos foram contados em câmara de Neubauer. Alguns hemócitos foram colocados em placa de cultura para observação da interação das células com os parasitos e outros foram submetidos à marcação por lectinas fluoresceinadas de Griffonia simplicifolia e Lens culinaris conjugadas a FITC. As imagens foram obtidas e gravadas através de microscópio AxioObserver e câmera McR5 Zeiss. Os moluscos expostos em massa foram sacrificados logo após a penetração inicial do parasito (0 minuto), 24, 48, 72 horas e 30 dias após exposição (dpe) Moluscos expostos a cinco miracídios foram mortos após 0, 15, 30 e 45 minutos de exposição. Os órgãos foram fixados em formalina Millonig de Carson, incluídos em parafina e corados em HE. Após a exposição em massa verificou-se um aumento de 496,37% de células na hemolinfa de B. straminea e de 230,29% na hemolinfa de B. glabrata logo após a penetração dos miracídios. Na exposição por cinco miracídios houve um aumento de 78,14% de células na hemolinfa de B. straminea e de 36,36% na hemolinfa de B. glabrata logo após a penetração dos miracídios. A maioria das células encontradas na hemolinfa eram células blásticas e seu diâmetro foi em torno de 6\03BCm para B. straminea e 7\03BCm para B. glabrata. Hemócitos de B. straminea exibiram marcação mais intensa para lectina de G. simplicifolia nos tempos iniciais após a exposição, enquanto que aos 30 dias dpe as células estavam mais positivas para L. culinaris. Na análise histológica dos tempos iniciais, não foram observadas reações celulares nem parasitos mortos nos tecidos de ambos os hospedeiros. Entretanto, B. glabrata apresentou esporocistos secundários na região da massa cefalopediosa aos 30 dias após a infecção. Concluímos que a resistência de B. straminea está associada a modulação de lectinas expressas nos hemócitos. Além do mais, verificamos que as células blásticas, as células precursoras de outros hemócitos, são as mais abundantes nos dois hospedeiros estudados / Schistosomiasis still remain as an important parasitic disease under the public health point of view. Thus, studies that involve the interaction between Schistosoma mansoni-Biomphalaria are pertinent and useful to the disease prevention and control. In vitro studies have shown that the susceptibility of Biomphalaria straminea and Biomphalaria glabrata, intermediate hosts of Schistosoma mansoni, is related to the presence of lectins. As an important carrier of schistosomiasis in Brazil, B. straminea presents low infection rates under laboratory conditions. Despite of that, there are few studies regarding the morphological features and in vitro behavior of this mollusc's haemocytes challenged by S. mansoni miracidia. For this purpose, we analyzed the haemocyte response of B. straminea (Sousa \2013 PB strain) challenged by the parasite, so the molluscs were put under mass exposure and individual exposure to five miracidia. B. glabrata molluscs were used as positive controls. The molluscs had their haemolymph drawn, the haemocytes were stained in Trypan Blue and counted in Neubauer chamber. Some haemocytes were put into cell culture plates in order to observe the interaction between the cells and the parasites and other cells were stained by FITC conjugated lectins from Griffonia simplicifolia and Lens culinaris. The images and films were made at the microscope AxioObserver with McR5 camera from Zeiss. The mass exposed molluscs were killed at 0 minutes (first penetration of the miracidia), 24, 48, 72 hours and 30 days after exposure (dae) and the five miracidia exposed molluscs were killed after 0, 15, 30 and 45 minutes The organs were fixed in Carsons's Millonig Formalin, embedded in paraffin and stained with Hematoxylin and Eosin. After mass exposure, an increase of 496,37% in the haemolymph cells from B. straminea and an increase of 230,29% in the haemolymph cells from B. glabrata right after the miracidia penetration was observed. Most cells observed were blast cells and their diameter was 6\03BCm for B. straminea and 7\03BCm for B. glabrata. In the histological analysis of the earlier times, there were no cell reactions nor dead parasites found as the result of the exposure in both hosts tissues. Whereas at 30 dae B. glabrata shown parasites in its cephalopedal region. B. straminea haemocytes showed an intense staining for G. simplicifolia at the initial times of the exposure whereas 30 dae the cells were positive for L. culinaris lectin. Our conclusion is that B. straminea resistance to S. mansoni is associated with lectin modulation expressed by haemocytes and the fast response to miracidial penetration. Furthermore, we have seen that blast cells, precursor cells that origin other types of haemocytes, are more plentiful among both hosts studied