Made available in DSpace on 2014-06-11T19:35:01Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-06-18Bitstream added on 2014-06-13T20:25:44Z : No. of bitstreams: 1 gwinner_fpc_dr_sjc.pdf: 429388 bytes, checksum: 8f66379f177aa22a57995cbad67ae92f (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Esse estudo in vitro avaliou o efeito da adição de diferentes concentrações e composições de bioactive glass (BAG) ao cimento de ionômero de vidro modificado por resina (CIVMR) (Fuji II LC) na liberação de íons Ca2+ e PO4 3- após a imersão em simulador de fluido corpóreo (SFC), comparando com o grupo controle, sem BAG. Foram utilizados 3 tipos de BAG: BAG65 (65mol% SiO2, 31mol% CaO, 4mol% P2O5), BAG75 (75mol% SiO2, 21mol% CaO, 4mol% P2O5), BAG85 (85mol% SiO2, 11mol% CaO, 4mol% P2O5), adicionados ao CIVMR nas proporções de 25%, 35% e 50%. O BAG foi misturado ao pó do CIVMR e misturado com o líquido resinoso do CIVMR. O material foi colocado numa matriz de PVC (5mm x 1mm) e polimerizado, entre laminas de vidro, durante 40s. As amostras foram armazenadas a 37°C, com 100% de umidade, durante 24h. Após esse período as amostras foram trituradas por meio de gral e pistilo e peneiradas para a obtenção de partículas menores que 90μm. A liberação dos íons Ca2+ e PO4 3- foi mensurada após 15min, 30min, 1h, 3h, 6h e 24h de imersão de 20mg de cada material em SFC, com 5 réplicas para cada condição experimental. Para a análise estatística, foi utilizada a área sob a curva (PPM x tempo). Os dados foram submetidos à ANOVA e testes de Dunnet e Tukey (!= 0,05). Os grupos contendo BAG65 liberaram significantemente mais Ca2+ não havendo diferença entre as diferentes concentrações de BAG adicionado. Os grupos contendo BAG75 e BAG85 apresentaram resultados semelhantes, sendo que aqueles com 25% de BAG foram os que apresentaram menores valores de liberação de Ca2+ após 24h de imersão. Com relação a liberação de íons PO4 3-, os grupos contendo BAG65 apresentaram maiores valores de área... / Bioactive restorative materials may stimulate the repair of tooth structure though the release of remineralization-aiding components including calcium and phosphate. The objective of this study was to measure the ion release from resin-modified bioactive glass ionomer cement (RMBGIC) containing various formulations of bioactive glass (BAG). Three types of BAG: BAG65 (65 mol% SiO2, 31 mol% CaO, 4 mol% P2O5), BAG75 (75 mol% SiO2, 21 mol% CaO, 4 mol% P2O5), BAG85 (85 mol% SiO2, 11 mol% CaO, 4 mol% P2O5) were prepared using sol-gel method, grounded, micronized, and mixed with GIC powder (Fuji II LC, GC) in the following proportions: 1:1, 1:2, 1:3. The mixed-ionomer powders were combined with standard RMGIC liquid (Fuji II LC, GC) and light cured (40 s; Ultra Lume LED, 1100 mW/cm2) in cylindrical disk molds (5 mm x 2 mm). The cured RMBGIC specimens were grounded and sieved to 100 !m and immersed (20 mg; n=5) in 3 ml of simulated body fluid (SBF), at 37°C for 1/4, 1/2, 1, 3, 6 and 24 hours with continuous agitation. Following centrifugation and decanting, the [Ca+2] and [HxPO4 3-x] in the SBF were measured using ion specific electrode and visible spectroscopy, respectively. The amount of ion release were statistically analyzed using ANOVA/Tukey ($= 0.05). The [PO4 3-] in SBF immediately increased for all RMBGICs. The ion release slowly decreased after 1 h, yet remained higher than the original SBF over the 24 h period. The [PO4 3-] in SBF for the control GIC continuously decreased. Overall, BAG65 > BAG75= BAG85 > GIC for [PO4 3-]. The [Ca2+] release increase initially for all RMBGICs, remaining with higher values than thecontrol GIC. Resin modified glass ionomer cement... (Complete abstract click electronic access below)

O presente estudo objetivou comparar histologicamente, nos períodos de 7, 30 e 60 dias, as reações ocorridas no tecido conjuntivo subcutâneo de ratos a três cimentos endodônticos. Foi realizada a implantação de tubos de polietileno contendo um cimento endodôntico de óxido de zinco e eugenol (EndoFill), um cimento à base de resina epóxica (AH Plus), um cimento à base de resina metacrilato (EndoRez) e tubos vazios (grupo controle). Observou-se as características do componente celular inflamatório - atentando para a presença de neutrófilos, linfócitos, plasmócitos, eosinófilos, macrófagos e células gigantes - da condensação fibrosa e da formação de abscesso. Foi realizada análise estatística entre os grupos realizada por meio do teste de Friedman, complementado pelo teste de Wilcoxon. Já as comparações entre os períodos de 7, 30 e 60 dias foram realizadas pelo teste de Kruskall Wallis complementado pelo teste U de Mann-Whitney.Os resultados apontaram para maior intensidade da reação inflamatória promovida pelos cimentos EndoFill e EndoRez, especialmente no que se refere às características do infiltrado linfoplasmocitário e à presença de macrófagos, os quais se apresentaram em número estatisticamente superior aos demais grupos. A condensação fibrosa foi menos intensa nas amostras do cimento EndoFill, e a indução de abscesso foi bastante reduzida nos quatro grupos de estudo, não sendo observadas diferenças significativas. O AH Plus apresentou uma tendência à redução das características da reação inflamatória, ainda que estatisticamente não tenham sido observadas diferenças entre os períodos avaliados (7,30 e 60 dias). Já os cimentos EndoFill e EndoRez apresentaram uma tendência à manutenção da reação inflamatória por períodos mais longos. Apenas no grupo controle houve redução significativa das características da reação inflamatória ao longo dos três períodos experimentais. Tais observações tornam evidente a ausência, entre os materiais testados, de um cimento com características ideais de biocompatibilidade. / The purpose of this study was to make a histological comparison, over 7- 30- and 60-day periods, of subcutaneous conjunctive tissue reactions to three endodontic sealers in rats. Polyethylene tubes containing a zinc-oxide and eugenol sealer (EndoFill), an epoxyresin- based sealer (AH Plus), a methacrylate-resin-based sealer (EndoRez), together with empty tubes (control group) were implanted. The characteristics of the inflammatory cell component were observed for the presence of neutrophils, lymphocytes, plasmocytes, eosinophils, macrophages and giant cells, together with fibrous condensation and formation of tissue abscesses. The results indicated a greater intensity of inflammatory reaction caused by the EndoFill and EndoRez sealers, particularly in relation to the characteristics of lymphoplasmocytic infiltration, and the presence of macrophages, which were statistically more evident than in the other groups. Fibrous condensation was less intense in the EndoFill samples, and abscess induction was considerably reduced in the four study groups, with no significant differences observed. AH Plus presented a tendency for reducing the characteristics of the inflammatory reaction, although no statistical differences were noticed between the periods assessed (7, 30 and 60 days). The EndoFill and EndoRez sealers display a tendency for maintaining the inflammatory reaction for longer periods. Only the control group displayed a significant reduction in the characteristics of the inflammatory reaction over the three experimental periods. These observations demonstrate the absence of a sealer with ideal biocompatibility characteristics among the materials tested.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:28:02Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2005-12-01Bitstream added on 2014-06-13T20:36:51Z : No. of bitstreams: 1 saito_ctmh_me_araca.pdf: 2585296 bytes, checksum: 906f8a2b41c7692531d4c62397618600 (MD5) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / Os materiais odontológicos estão presentes em todas as especialidades. Na periodontia, aliado a uma técnica cirúrgica criteriosa, os cimentos cirúrgicos são materiais que ocupam posição importante. A proposta deste estudo foi avaliar a intensidade da resposta inflamatória e a deposição óssea em alvéolos de ratos após o implante dos cimentos cirúrgicos Coe-pak®, Perio Bond® e Voco pac®. Seguindo a remoção dos incisivos superiores direitos de 84 ratos machos (Rattus norvegicus albinus, Wistar), implantou-se em cada alvéolo um tubo de polietileno dos quais 63 estavam preenchidos com os cimentos e os restantes 21 tubos estavam vazios, compondo o grupo controle. A avaliação histológica considerou o número de células inflamatórias, a neoformação angioblástica, a densidade de fibroblastos e a presença e localização da deposição de tecido ósseo nos períodos pós-operatórios de 7, 14 e 28 dias. A análise estatística dos dados obtidos foi realizada utilizando-se Análise de Variância e teste de Krukal-Wallis. No critério infiltrado inflamatório, aos 28 dias, houve diferença estática significativa (p<0,01) entre o cimento Voco pac® e o grupo controle. Quanto à presença e localização da deposição de tecido ósseo houve diferença no grupo controle, comparando os períodos de 7 e 28 dias (p<0,01). Na associação de todos os critérios avaliados, o cimento Perio Bond® apresentou resultado menos favorável, significativamente diferente (p<0,01) do grupo controle. Respeitadas as condições experimentais deste estudo, pode-se concluir que o cimento Voco pac® evidenciou aos 28 dias maior número de células inflamatórias; enquanto cimentos Coe-pak® e Perio Bond® demonstraram comportamentos semelhantes ao grupo controle e considerando-se a associação dos resultados de todos os critérios nos períodos analisados neste estudo, o cimento Perio Bond®... / The purpose of this investigation was to investigate the inflammatory tissue reaction and bone deposition in rat's dental sockets in the presence of three periodontal dressing (Coe-pak®, Perio Bond® e Voco pac®). After the exodontic removal of the right upper incisors of the eighty-four male rats, one polyethylene tube was implanted in each dental socket. Twenty one of these were empty and the other sixty-three tubes were fulfilled with periodontal dressings. The number of inflammatory cells, angioblastic neoformation, fibroblastic density and bone neoformation were evaluated after 7, 14 and 28 days. Significant differences (p<0.05) were observed in the number of inflammatory cells at 28 days, when Voco pac® was implanted. Considering bone neoformation, there was significant difference (p<0.01) between 7 and 28 days, in control group. When all events evaluated were associated, Perio Bond® showed the most severe response, which was staticcally different (p<0.01) from the control group. The following conclusions were obtained: after 28 days, Voco pac® presented at 28 days the greater number of inflammatory cells, while Coe-pak® and Perio Bond® periodontal dressings showed same number of the control group and when all events an periods of time were associated, Perio Bond® showed the most severe inflammatory response.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:41Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-12-19Bitstream added on 2014-06-13T19:09:44Z : No. of bitstreams: 1 guskuma_mh_me_araca.pdf: 1219994 bytes, checksum: 484d9c888788d9dd3dad64af3c3a8f74 (MD5) / A proposta deste estudo foi avaliar a expressão das proteínas que participam do processo de reparo ósseo, nas fases de revascularização (VEGF), osteoindução (BMP2 e CBFA1) e mineralização (OCN), quando da utilização de uma associação do vidro bioativo e osso autógeno em proporção de 1:1 em defeitos criados em calvária de ratos. MATERIAIS E MÉTODOS: Para o presente estudo foram utilizados 40 ratos adultos machos (Rattus norvegicus albinus, Wistar) que receberam dois defeitos ósseos de 5 mm cada, em calvária. Os defeitos ósseos constituiram quatro grupos experimentais (n=10): Grupo CONT (reparação apenas com o próprio coágulo); Grupo ENX (defeitos preenchidos com OA removido do defeito contralateral); Grupo ENX VB (defeitos preenchidos com uma associação de vidro bioativo e osso autógeno 1:1); e Grupo VB (defeitos ósseos preenchidos com vidro bioativo). Os animais foram submetidos a eutanásia nos períodos de 7 e 30 dias pós-operatórios. RESULTADOS: O VB não alterou de forma significativa as reações celulares do reparo ósseo, no entanto, a presença do osso autógeno no defeito causou uma redução importante da expressão das proteínas estudadas. O Grupo ENX foi o que obteve a maior AON e o Grupo VB a menor. CONCLUSÕES 1) Em defeitos de tamanho crítico em calotas, o osso autógeno em bloco continua sendo o tratamento padrão ouro; 2) Para o tratamento destes defeitos, pode-se indicar a utilização dos vidros bioativos sem a necessidade de associação ao osso autógeno. / AIMS: The aim of this study is to evaluate the expression of the proteins that participate in the bone repair process, during the revascularization step (VEGF), osteoinduction (BMP2 and CBFA1) and mineralization (OCN), after the use of an association of bioactive glass and autogenous bone in 1:1 rate, in rats calvária defects. METHODS: 40 male adult rats (Rattus novergicus albinus, Wistar) received two calvarial defects created with 5mm diameter. The bone defects constituted 4 experimental groups (n=10): Control group (the defects were filled with blood clot), Graft Group (the defects were filled with autogenous bone removed from the contralateral defect), Graft and Bioactive Glass Group (the defects were filled with an association of bioactive glass and autogenous bone in 1:1 rate); and Bioactive Glass Group ( the bone defects were filled with bioactive glass). The animals were sacrificed at 7 and 30 days post operative periods. RESULTS: The bioactive glass did not alter, in a significant way, the cellular responses of the bone repair, otherwise, the presence of autogenous bone in the defect caused an important reduction in the expression of the studied proteins. The graft group achieved the better bone neoformed area and the bioactive glass achieved the smaller. CONCLUSIONS: 1. In the calvaria critical-size defects, the block autogenous bone is still the gold standard treatment; 2) For this defects treatment, bioactive glasses may be indicated without the autogenous bone association.

Submitted by ELISA MATTIAS SARTORI null (elisamsartori@gmail.com) on 2016-06-23T20:05:53Z No. of bitstreams: 1 Elisa Mattias Sartori.pdf: 1436534 bytes, checksum: dd0f5ca15c561bf7bd3853e437fe11ee (MD5) / Approved for entry into archive by Juliano Benedito Ferreira (julianoferreira@reitoria.unesp.br) on 2016-06-27T18:58:23Z (GMT) No. of bitstreams: 1 sartori_em_dr_arafo.pdf: 1436534 bytes, checksum: dd0f5ca15c561bf7bd3853e437fe11ee (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-27T18:58:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 sartori_em_dr_arafo.pdf: 1436534 bytes, checksum: dd0f5ca15c561bf7bd3853e437fe11ee (MD5) Previous issue date: 2016-04-27 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Proposição: Este estudo teve como objetivo avaliar a modulação dos miRNAs que afetam o potencial osteogênico de CTMs em diferentes topografias de superfície de discos de vidro. Material e Métodos: Células tronco mesenquimais humanas foram plaqueadas nas diferentes superfícies e comparadas após 3, 7 e 14 dias para atividade de fosfatase alcalina, expressão de genes (Osteocalcina, Osteopontina, Sialo Proteína Óssea, Osterix, Runx2, BMP2 e ALP) e expressão de miRNAs. Microscopia eletrônica de varredura das superfícies com células foram obtidas para avaliação de adesão celular. Resultados: Atividade de fosfatase alcalina nas diferentes superfícies foi significantemente maior na superfície com nanotopografia. Do mesmo modo, a expressão de genes relacionados com osteoblastos foi mais elevada na superfície nano. Com 14 dias foi observado um aumento de 3.5 e 9 vezes para os genes Runx2 e Osterix, respectivamente. O gene da BMP2 e ALP também apresentou um aumento de 4 e 7 vezes comparado ao controle. Utilizando a tecnologia de sequenciamento de RNA (RNA-Seq) onde todos os RNAs existentes foram sequenciados, um total de 123 miRNAs com diferença de expressão foram encontrados comparando a superfície controle (dia 7) com a superfície nano (dia 14). 48 miRNAs apresentaram uma redução na expressão e 75 apresentaram um aumento de expressão. Alguns destes apresentaram marcadores para genes osteogênicos já identificados, tais como hsa-miR-135b-5p marcador para OCN, BSP, Runx2, CO15A1 e OSX, hsa-miR-122-5p marcador para OPN, hsa-miR-196a-5p marcador para BMP4, hsa-miR-26b-5p marcador para BMP2 e hsa-miR-148b-3p marcador para OPN. Conclusão: As superfícies com nanotopografia tem o potencial de melhorar a resposta de osseointegração de maneira a reduzir o tempo de osseointegração e também aumentar a produção de tecido ósseo ao redor dos implantes favorecendo assim áreas de qualidade óssea baixa. A utilização de miRNAs para alterar a resposta de diferenciação pode também ajudar a controlar o processo de osseointegração. / Purpose: This study aimed to evaluate the modulation of miRNAs that affect the osteogenic potential of MSCs in different surface topographies of glass disks. Material and Methods: Human mesenchymal stem cells (hMSCs) were plated on different surfaces of glass disks and compared at 3,7 and 14 days for alkaline phosphatase (ALP) activity, expression of genes (Osteocalcin, Osteopontin, Bone Sialo Protein, Osterix, Runx2, BMP2 and ALP) and expression of miRNAs. Scanning electron microscopy of surfaces with cells were obtained to analyse the attachment of cells. Results: ALP activity on different surfaces was significantly greater in the nanotopography surface. At day 14 there was a 3.5-fold and a 9-fold increase for Runx2 and Osterix gene, respectively. BMP2 and ALP also increased by 4- and 7-fold compared to control. Using RNA sequencing technology (RNA-Seq) a total of 123 miRNAs were found differently expressed comparing control (day 7) to nano surface (day 14). 48 miRNAs were downregulated and 75 were upregulated. Some of them regulated osteogenic genes such as hsa-miR-135b-5p that targets OCN, BSP, RUNX2, CO15A1 and OSX, hsa-miR-122-5p wich targets OPN, hsa-miR-196a-5p targets BMP4, hsa-miR-26b-5p that targets BMP2 and hsa-miR-148b-3p that targets OPN. Conclusion: Surfaces with nanotopography have the potential to improve osseointegration response in order to reduce the time of osseointegration and also increase the production of bone tissue around the implants improving low bone quality areas. The use of miRNAs to affect differentiation response may also help control the osseointegration process. / CAPES: BEX8187/14-2

Materiais poliméricos, como o poliestireno, são largamente usados como biomateriais, tanto na área biomédica como na indústria farmacêutica. Com a especialização do uso destes biomateriais, relata-se um aumento significativo de doenças relacionadas à presença de biofilmes bacterianos na superfície destes materiais. Neste trabalho, placas de microtitulação de poliestireno foram tratadas por imersão em plasma-RF, na mistura padrão N2/H2, a fim de avaliar as modificações superficiais geradas, e a eficiência deste processo na adesão e crescimento de biofilme, produzido pela Staphylococcus epidermidis. A identificação de espécies atômicas e grupos funcionais incorporados à superfície do polímero pelo processo de imersão em plasma, foi realizada pelas técnicas de espectroscopia de fotoelétrons excitados por raios X (XPS) e espectroscopia no infravermelho por refletância total atenuada (ATR-IR). Modificações na morfologia e rugosidade da superfície de PS foram avaliadas por microscopia eletrônica de varredura (SEM) e microscopia de força atômica (AFM). A hidrofílicidade da superfície foi analisada por medida de ângulo de contato com água (WCA). Para avaliar a eficiência do tratamento em plasma no crescimento/aderência de biofilme formado pela S. epidermidis foram realizados ensaios de antibiofilme bacteriano. Modificações físico-químicas foram observadas na superfície das amostras por XPS, onde foi constatado o aumento da porcentagem atômica relativa de N e a presença de novas ligações químicas com o aumento do tempo de tratamento. Pela técnica de ATR-IR foi possível identificar a presença de grupos amina e amida. As medidas de microscopia revelaram uma mudança na morfologia e uma redução da rugosidade superficial com o aumento do tempo, e também verificado um aumento do caráter hidrofílico na superfície por WCA. Além disso, a partir de 60 min de tratamento foi alcançada uma alta supressão de adesão de biofilme à superfície do polímero. / Submitted by Marcelo Teixeira (mvteixeira@ucs.br) on 2014-06-05T18:11:48Z No. of bitstreams: 1 Dissertacao Suzimara Rovani.pdf: 2304362 bytes, checksum: bd3491b4311506e651f251ccd00326df (MD5) / Made available in DSpace on 2014-06-05T18:11:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Suzimara Rovani.pdf: 2304362 bytes, checksum: bd3491b4311506e651f251ccd00326df (MD5) / Polymeric materials, such as polystyrene, are widely used as biomaterials, both in the pharmaceutical industry and biomedical areas. With the use of more specialized biomaterials, it is reported a significant increase of diseases related to the presence of bacterial biofilms formation on the surface of these materials. In this work, polystyrene microtiter plates were treated by RF plasma immersion, in a N2/H2 standard gas mixture, in order to evaluate the surface modifications and its effects on the adherence and growth of bacterial biofilms produced by Staphylococcus epidermidis. The identification of atomic species and functional groups incorporated into the polymer surface by plasma immersion process was carried out by the techniques of X-ray photoelectron spectroscopy (XPS), and attenuated total reflectance infrared spectroscopy (ATR-IR). The changes in morphology and surface roughness of PS were evaluated by scanning electron microscopy (SEM) and atomic force microscopy (AFM). The hydrophilicity of the surface was analyzed by measuring the water contact angle (WCA). Bacterial antibiofilm assays were carried out in order to evaluate the efficiency of plasma treatment on the growth/adherence of the biofilm formed by S. epidermidis. Physical-chemical modifications in the samples surface were found by XPS technique, where an increase in amount of relative atomic percentage of N and the presence of new chemical bonds was observed as a function of the treatment time. Through the ATR-IR spectroscopy was possible to identify the presence of amine and amide groups. The SEM and AFM measurements revealed changes in morphology and a reduction of the surface roughness with increasing time. It is also observed a reduction in the WCA after plasma treatment, indicating that PS surface becomes more hydrophilic. Antibacterial assays, shows that after 60 min of treatment time was achieved a high suppression of biofilm adhesion in the polymer surface.

Made available in DSpace on 2015-01-20T01:01:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000464699-Texto+Completo-0.pdf: 3304843 bytes, checksum: 1c2d736171549331a5af746072affda0 (MD5) Previous issue date: 2014 / Mesenchymal stem cells hold great promise for tissues repair and regeneration, including bone defects. The association of these cells to a scaffold which resembles bone tissue structure and physiology is a major challenge in bone tissue engineering. The lyophilized bovine bone has a structure, chemical composition and mechanical properties similar to human bone marrow and acts as an excellent osteoconductive material. This in vitro study aimed to evaluate the growth of bone marrow mononuclear cells (BMMC) on a lyophilized bovine bone scaffold (Orthogen® - Baumer S. A., BR) covered with fibronectin; to verify if different cell densities interfere with the adhesion and proliferation of these cells and to evaluate whether the combination of platelet-rich plasma (PRP) interferes with adhesion and proliferation of BMMC grown on the lyophilized bovine bone scaffold. For this purpose, bone marrow cells obtained from a Kyoto rat were grown on blocks of lyophilized bovine bone coated with fibronectin in DMEM culture medium supplemented with 10% inactivated fetal bovine serum. The Orthogen® samples were distributed into four experimental groups, in triplicate, in three 24 wells culture plates and evaluated in three periods: 72 h, 96 h and 192 h. Group 1: lyophilized bovine bone + BMMC (5 x 104 cells / well); Group 2: lyophilized bovine bone + BMMC + PRP; Group 3: lyophilized bovine bone + fibroblasts (3T3); Group 4: lyophilized bovine bone + BMMC (15 x 104 cells / well). Cultures were incubated with the intercalating agent 4',6-diamidino-2-phenylindole (DAPI) for nuclear staining in order to evaluate the cell population density, by detection with confocal microscopy, of the number of cells adhered to the lyophilized bovine bone scaffolds, after 72 h, 96 h and 192 h. The analysis of the lyophilized bovine bone surface and the morphological aspects of the cells adhered to it was performed on one sample from each group, by scanning electron microscopy (SEM). Analysis of variance (ANOVA) with two factors showed a significant interaction between the main effects evaluated: group and time, with p < 0. 001.Through the results of Bonferroni statistical test, significant difference was found in the average number of nuclei in the period of culture of 96 h in group 3, and the period of culture of 192 h in group 4, which was higher than the other groups. Through SEM analysis, mononuclear cells adhered to the lyophilized bovine bone scaffold were observed only in the groups 3 and 4, in the last, progressively, being already possible to observe cell morphology differentiation and to identify spherical and fusiform cells with cytoplasmic extensions. We concluded that BMMC cultured on a lyophilized bovine bone scaffold coated with fibronectin adhered and proliferated on the bone surface. BMMC cultured at a density of 15 x 104 cells / well, adhered and proliferated on the bone surface more evidently, when compared to the BMMC cultured at a density 5 x 104 cells / well, in the three culture periods evaluated. The association of PRP to BMMC culture on a lyophilized bovine bone scaffold increased, but not with statistical significance, the adhesion and proliferation on the bone surface. / As células-tronco mesenquimais detêm grande promessa para a reparação e regeneração de tecidos, inclusive de defeitos ósseos. A associação destas células a um arcabouço que se assemelhe à estrutura e à fisiologia do tecido ósseo é um dos grandes desafios da engenharia tecidual óssea. O osso bovino liofilizado, com estrutura e composição química similares ao osso humano medular, além de possuir propriedades mecânicas comparáveis às do osso humano, atua como excelente material osteocondutor. O presente estudo in vitro teve como objetivos avaliar o cultivo de células mononucleares de medula óssea (CMMO) sobre um arcabouço de osso bovino liofilizado (OrthoGen® - Baumer S. A., BR) recoberto com fibronectina; verificar se diferentes densidades celulares interferem na proliferação e na adesão destas células e avaliar se a associação de plasma rico em plaquetas (PRP) interfere na adesão e na proliferação das CMMO cultivadas sobre o arcabouço de osso bovino liofilizado. Para isso, células da medula óssea obtidas de um rato Kyoto foram cultivadas sobre blocos de osso bovino liofilizado, recobertos com fibronectina, em meio de cultura DMEM suplementado com 10% de soro fetal bovino inativado. As amostras do OrthoGen® foram distribuídas em quatro grupos experimentais, em triplicata, em três placas de cultura com 24 poços e avaliadas em três períodos: 72 h, 96 h e 192 h. Grupo 1: osso bovino liofilizado + CMMO (5 x 104 células/poço); Grupo 2: osso bovino liofilizado + CMMO + PRP; Grupo 3: osso bovino liofilizado + fibroblastos (3T3); Grupo 4: osso bovino liofilizado + CMMO (15 x 104 células/poço). As culturas foram incubadas com o agente intercalante 4',6-diamidino-2-phenylindole (DAPI) para coloração nuclear visando à avaliação de densidade populacional, por meio da detecção por microscopia confocal, do número de células aderidas aos arcabouços de osso bovino liofilizado, após 72 h, 96 h e 192 h. A análise da superfície do osso bovino liofilizado e das características morfológicas das células aderidas sobre ele o foram realizadas em uma amostra de cada grupo, com o auxílio do microscópio eletrônico de varredura. A análise de variância (ANOVA) com dois fatores mostrou interação significativa entre os efeitos principais avaliados: grupo e tempo, com valor de p < 0,001.Através dos resultados do teste estatístico de Bonferroni, verificou-se diferença significativa da média de núcleos no período de cultura de 96 h no grupo 3, e no período de cultura de 192 h no grupo 4, a qual foi maior do que as dos demais grupos. Através da análise por microscopia eletrônica de varredura foram observadas CMMO aderidas ao arcabouço de osso bovino liofilizado somente no grupo 3 e no grupo 4, neste aumentando de forma progressiva, já sendo possível evidenciar diferenciação na morfologia celular e identificar células esféricas e fusiformes com prolongamentos citoplasmáticos. Conclui-se que as CMMO cultivadas sobre um arcabouço de osso bovino liofilizado recoberto com fibronectina aderiram e proliferaram sobre a superfície óssea. As CMMO cultivadas numa densidade de 15 x 104 células / poço, aderiram e proliferaram sobre a superfície óssea de forma mais evidente, quando comparadas às CMMO cultivadas numa densidade 5 x 104 células / poço, nos três períodos de cultura avaliados. A associação de PRP à cultura de CMMO sobre um arcabouço de osso bovino liofilizado aumentou, mas não de forma estatisticamente significativa, a adesão e a proliferação celular sobre a superfície óssea.

Made available in DSpace on 2011-12-27T14:14:09Z (GMT). No. of bitstreams: 2 000427033-0.pdf: 1511979 bytes, checksum: 5e65b939e0aae98244311352791e72a9 (MD5) license.txt: 581 bytes, checksum: 44ea52f0b7567232681c6e3d72285adc (MD5) / The aim of this study was to evaluate the inflammatory reaction, more specifically the foreign body reaction and behavior of bone remodeling in sheep’s tibiae and ulnae after installation of copolymer discs consisting of 95% poly-L lactic acid and 5% acid poly-D Lactic (PLDLA). It was used two adult female sheep which was fixed, by screws, for circular discs of PLDLA in each tibia and ulna of the sheep. A total of 16 discs were fixed in each animal. The sheeps were randomly divided into two groups according to the time of death after surgery: 30 and 60 days. Subsequently the samples were processed, resulting in a slide for each sample. After that the slides were investigated in optical microscope with magnification of 40 x and 100 x. In the slices of periosteal were evaluated the inflammatory infiltrate in a descriptive way in an increase of 40 X and quantitatively, by counting inflammatory cells in five random fields per sample in an optical microscope in an increase of 100 X. The inflammatory density was quantified according to the following scale: grade 0 - absence of inflammatory infiltrate, grade 1 - less than 30 cells per field, grade 2 - 30 to 100 cells per field and grade 3 - greater than 100 cells per field. In bone tissue it was analyzed two random fields per sample and if some bone resorption area appeared in the area of contact with the discs, this was described. In the end of the study, histological sections of the both groups showed tissue composed of organized fibroblasts and the inflammatory infiltrate varied from absent to mild. Talking about bone resorption, it had association with compression of the discs to the bone tissue, without evidence of bone resorption caused by the discs. At the end of the study verified biocompatibility, abscense of osteolisys at macroscopic view, disc structure undefformed and appropriated fit between titanium screw and PLDLA disc. / O objetivo desse estudo foi avaliar a reação inflamatória, mais especificamente a reação de corpo estranho, e o comportamento de remodelação óssea em tíbias e ulnas de ovelhas, após instalação de discos de um copolímero constituído de 95% de ácido Poli-L Láctico e 5% de ácido Poli-D Láctico (PLDLA). Foram utilizadas duas ovelhas fêmeas adultas em que se fixaram, através de parafusos, quatro discos circulares de PLDLA em cada tíbia e ulna das ovelhas, totalizando 16 discos em cada animal. As ovelhas foram aleatoriamente divididas em dois grupos, de acordo com o período de morte após a cirurgia: 30 e 60 dias. Posteriormente as amostras foram processadas, obtendo-se uma lâmina por amostra, que foram investigadas ao microscópio óptico com aumentos de 40x e 100x. Nas lâminas de periósteo avaliou-se o infiltrado inflamatório de forma descritiva, em um aumento de 40 X, e de forma quantitativa, pela contagem de células inflamatórias em cinco campos aleatórios por amostra no microscópio óptico, em aumento de 100 X. A densidade inflamatória foi quantificada conforme a seguinte escala: grau 0 – ausência de infiltrado inflamatório, grau 1 – menor que 15 células por campo, grau 2 – 15 a 50 células por campo e grau 3 – maior que 50 células por campo. O tecido ósseo foi analisado macroscopicamente, e havendo área de reabsorção óssea na área de contato com os discos, esta foi descrita. Observou-se ao final do estudo que as secções histológicas dos grupos 30 de 60 dias apresentavam tecido conjuntivo composto por fibroblastos maduros, organizados e o infiltrado inflamatório variava de ausente a leve. Em relação à reabsorção óssea há associação com a compressão dos discos ao tecido ósseo, não havendo indícios de reabsorção óssea causadas pelos discos. No final do estudo verifica-se biocompatibilidade, ausência de osteólise a nível macroscópico, manutenção da estrutura do disco e adequada associação entre o parafuso de titânio e disco de PLDLA.

Made available in DSpace on 2011-12-27T14:14:20Z (GMT). No. of bitstreams: 2 000397726-0.pdf: 6415316 bytes, checksum: 94e18040fb876738a7854d94d6e2b15c (MD5) license.txt: 581 bytes, checksum: 44ea52f0b7567232681c6e3d72285adc (MD5) / Osseous defects can be the result of pathologies, traumas and surgeries. Depending on its extension, the bone repair does not occur spontaneously therefore, fillings are necessary. Biomaterials have been a viable alternative as bone substitutes. Among them, emphasis is given on bioceramics due to their biocompatibility, atoxicity and osteoconduction properties. This study has comparatively analyzed two types of bioceramics, α- tricalcium phosphate (α-TCP) and β-tricalcium phosphate-HA (β-TCP/HA) inserted in critical osseous defects performed on 50 rat calvariae (Rattus norvegicus albinus, Wistar) male, adults, with an average body weight of 300 to 400 g. The animals were divided in two groups with 25 animals each: α- group and β/HA group. On the calvaria of each animal, two cavities were made measuring 4 mm of diameter each. The left cavity was filled with the correspondent material of each group and the right one was filled with autogenous bloodclot corresponding to the control group. The animals were sacrificed 7, 21, 60, 90 and 120 days after surgery. The parietal bones containing the cavities were removed and the parts were submitted to a histological processing by the HE technique. By using software Image Pro Plus 6. 2, a histomorphometric analysis was performed which allowed the measurement of the defect neoformed bone area in different observation periods. The results expressed in mean percentage of the defect area filled by the neoformed bone, in the α- TCP group were: 1,6% (+ 2,37) on day 7, 5,24% (+ 5,58) on day 21, 24% (+ 14,5) on day 60, 30,21% (+ 6,84) on day 90 and 50,59% (+ 5,42) on day 120. In the β - TCP/HA group, the results were 1,94% (+ 3,10) on day 7, 2,53% (+ 1,19) on day 21, 12,47% (+ 3,87) on day 60, 26,84% (+ 2,80) on day 90 and 38,82% (+ 8,76) on day 120 post-surgery. In the control group, the mean results were 0,15% on day 7, 10,12% on day 21, 15,10% on day 60, 18,94% on day 90 and 48,50% on day 120. The study concluded that the cements α-TCP e β-TCP/HA promote osteoconduction; the cement α-TCP is more biosoluble and presents a higher percentage of bone neoformation area, and the β-TCP/HA is reabsorbed more slowly promoting volume maintenance of the implanted area. / Os defeitos ósseos podem decorrer de fatores como patologias, traumas e cirurgias. Dependendo de sua extensão, o reparo ósseo não acontece de forma espontânea, necessitando o uso de enxertos. Os biomateriais têm sido uma alternativa viável como substitutos ósseos. Dentre eles, destacam-se as biocerâmicas pela sua biocompatibilidade, atoxicidade e propriedades osteocondutoras. Este estudo analisou comparativamente dois tipos de biocerâmicas, cimento de α-fosfato tricálcico (α−TCP) e grânulos de β-fosfato tricálcico-HA (β-TCP/HA), inseridas em defeitos ósseos críticos confeccionados em calotas cranianas de 50 ratos (Rattus norvegicus albinus, Wistar), machos, adultos, com peso corporal médio de 300 a 400g. Os animais foram divididos em dois grupos com 25 animais: grupo-α e grupo-β/HA. Na calota craniana de cada animal, foram confeccionadas duas cavidades medindo 4 mm de diâmetro cada. A cavidade esquerda foi preenchida pelo material correspondente de cada grupo e a cavidade direita foi preenchida por coágulo sangüíneo autógeno, correspondendo ao grupo controle. Os animais foram mortos aos 7, 21, 60, 90 e 120 dias de pós-operatório. Os ossos parietais contendo as cavidades foram removidos e as peças operatórias submetidas a processamento histológico pela técnica de HE. Com auxílio do software Image Pro Plus 6. 2, foi realizada análise histomorfométrica que permitiu mensurar a área de osso neoformado dos defeitos nos diferentes períodos de observação. Os resultados, expressos em porcentagem média de área do defeito preenchido por osso neoformado, no grupo α−TCP foram: 1,6% (+ 2,37) aos 7 dias, 5,24% (+ 5,58) aos 21 dias, 24% (+ 14,5) aos 60 dias, 30,21% (+ 6,84) aos 90 dias e 50,59% (+ 5,42) aos 120 dias. No grupo β−TCP/HA, os resultados foram de 1,94% (+ 3,10) aos 7 dias, 2,53% (+ 1,19) aos 21 dias, 12,47% (+ 3,87) aos 60 dias, 26,84% (+ 2,80) aos 90 dias e 38,82% (+ 8,76) aos 120 dias de pós-operatório. No grupo controle, as médias dos resultados foram de 0,15% aos 7 dias, 10,12% aos 21 dias, 15,10% aos 60 dias, 18,94% aos 90 dias e 48,50% aos 120 dias. Conclui-se que o cimento α-TCP e os grânulos β−TCP/HA promovem osteocondução; o cimento α-TCP é mais solúvel e apresenta maior porcentagem de área de neoformação óssea. Os grânulos β−TCP/HA são reabsorvidos mais lentamente, o que parece promover manutenção do volume da região implantada.

Made available in DSpace on 2011-12-27T14:14:22Z (GMT). No. of bitstreams: 2 000422268-0.pdf: 14833302 bytes, checksum: 1b71642b280aa5b7984729b688fbd92e (MD5) license.txt: 581 bytes, checksum: 44ea52f0b7567232681c6e3d72285adc (MD5) / This study examines histologically the effect of cement Calcium Phosphate (CFC) reinforced with nylon fibers, polypropylene and carbon used as implant supra-cortical femur of rats. We used 20 male Wistar rats, approximately 300g each. Being prepared plates CFC with fibers, on the size of 2mm thick and 6 mm in diameter, which were tightened in the femur of animals. These were euthanized at 30, 60, 90 and 120 days after the implant. These pieces were removed and subjected to a routine process for preparing slides slides, stained with Hematoxilyn and Eosin. The biocompatibility, the degree material’s resorption anda its ability to osteoconduction were evaluated at the different times. At all diferents times studied, the histological sections showed formation of dense tissue, few cellularized, showing slightly vascularized and discrete mononuclear infiltration. In the area around the implant, there are discrete reabsorption areas, and hyalinization induction of collagen fibers peripheral. The tissue includes the material of the implant. After 120 days, may be observed a formation of osteoid material. The degree of bone reabsorption in the periphery of the implant was less, and without statistical significance. Can be concluded that: The CFC with fiber is biocompatible promotes bone conduction and bone neoformation rounding the cement. CFC with fibers in the form of prefabricated plates is suitable for use as implants and bone substitute, within the parameters of this experiment. / Este estudo analisa histologicamente o efeito do Cimento de Fosfato de Cálcio (CFC) reforçado com fibras de náilon, carbono e polipropileno utilizado como implante supra-cortical em fêmur de ratos. Foram utilizados 20 ratos Wistar, machos, com cerca de 300g cada. Sendo confeccionadas placas de CFC com fibras, no tamanho de 2 mm de espessura por 6 mm de diâmetro, os quais foram aparafusados no fêmur dos animais. E estes foram eutanasiados em 30, 60, 90 e 120 dias após o implante sendo as peças removidas e submetidas ao processo de rotina para confecção de lâminas, coradas com Hematoxilina e Eosina. Foram avaliados nos diferentes tempos a biocompatibilidade, o grau de reabsorção do material e a sua capacidade de osteocondução. Em todos os tempos estudados os cortes histológicos revelam formação de tecido conjuntivo denso, pouco celularizado, apresentando discretamente vascularizado e discreto infiltrado inflamatório mononuclear. No entorno do implante, observam-se discretas áreas de reabsorção, e indução de hialinização das fibras colágenas periféricas. O tecido apresenta inclusão do material do implante. Aos 120 dias chama a atenção a formação de material osteóide, O grau de reabsorção óssea na periferia do implante foi menor não apresentando significância estatística. Podendo-se concluir que: O CFC com fibras é biocompatível, promove a osteocondução e neoformação óssea contornando o cimento. O CFC com fibras, na forma de placas pré-fabricadas é adequado para ser utilizado como implante e substituto ósseo, dentro dos parâmetros deste experimento.