Made available in DSpace on 2016-02-05T18:29:55Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-08-28. Added 1 bitstream(s) on 2016-02-05T18:33:59Z : No. of bitstreams: 1 000854060_20160924.pdf: 173359 bytes, checksum: 751c8dda16bb9f3e364df6ed6ec0acfd (MD5) Bitstreams deleted on 2016-09-26T12:32:59Z: 000854060_20160924.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2016-09-26T12:33:34Z : No. of bitstreams: 1 000854060.pdf: 3213706 bytes, checksum: 918cc12ee2165eed29dfc4857e28e7a9 (MD5) / Histoplasma capsulatum variedade capsulatum é um fungo dimórfico causador da Histoplasmose, uma doença fúngica sistêmica que constitui um importante problema de saúde mundial. A infecção ocorre através da inalação de propágulos infectantes provenientes do meio ambiente. A capacidade de formação de biofilme por esse fungo foi caracterizada recentemente, porém ainda pouco se sabe sobre os mecanismos envolvidos na sua formação. Neste caso, estudos com abordagens proteômicas seriam de fundamental importância para o entendimento da diferença entre a forma planctônica e o biofilme. Os antifúngicos usados na terapia convencional contra biofilmes não são eficientes, além disso, doses elevadas para perfusão destes fármacos nesta forma seriam tóxicas para os pacientes. O presente trabalho teve como objetivo verificar a atividade anti-Histoplasma de 92 compostos derivados de chalcona e do ácido protocatecuico; caracterizar o biofilme do isolado clínico H. capsulatum 317 e pesquisar compostos anti-biofilme buscando um provável mecanismo de ação através da análise proteômica diferencial entre o biofilme tratado e não tratado. Os testes de susceptibilidade foram realizados conforme o documento M27-A3, proposto pelo CLSI (2008). Os biofilmes foram formados em caldo BHI suplementado e a atividade metabólica foi determinada através do ensaio de redução do XTT. Para a caracterização da formação do biofilme e da ação do composto, utilizou-se a microscopia eletrônica de varredura (MEV) e microscopia confocal, enquanto que a massa do biofilme e a matriz extracelular foram quantificadas pelo cristal violeta e safranina. E como etapa final foi realizada a análise do perfil proteico dos biofilmes com e sem tratamento. Os melhores valores de concentração inibitória mínima (CIM) foram obtidos por seis derivados de chalconas (T50, C3, E2A, F2A, T18A e T46A) e... / Histoplasma capsulatum var. capsulatum is a dimorphic fungi that causes Histoplasmosis, a systemical fungal disease that is a major health problem worldwide. Infection occurs by inhalation of infective propagules from the environment. The biofilm formation by this fungi was characterized recently, however little is known about the mechanisms involved in their formation. In this case, studies with proteomic approaches would be of fundamental importance for understanding the difference between the planktonic and biofilm forms. The antifungal agents used in conventional therapy are not effective against biofilms, in addition, high doses of these drugs can be toxic to patients. This study aimed to verify the anti-Histoplasma activity of 93 compounds derived from chalcones and protocatechuic acid; characterize the biofilm formation by the clinical isolate H. capsulatum 317 and discover new anti-biofilm compounds searching for a mechanism of action by differential proteomics analysis, comparing the treated and untreated biofilms. Susceptibility tests were performed according to the document M27- A3, proposed by the CLSI (2008). The biofilms were formed in BHI broth supplemented and metabolic activity was determined by the XTT reduction assay. For the characterization of biofilm formation and action of the compound, was used the scanning electron microscopy (SEM) and confocal microscopy, while the mass of the biofilm and the extracellular matrix were quantified by crystal violet and safranin. Lastly was performed the analysis of the protein profile of biofilms with and without treatment. The best minimum inhibitory concentration values (MIC) were obtained for six derivatives of chalcones (T50, C3, E2A, F2A, T18A and T46A) and nonyl protocatechuate (MIC = 3.9 mg/L). The clinical isolate H. capsulatum EH317 was able to form biofilms in vitro after 96 hours. After 96 hours, the biofilm ...

Made available in DSpace on 2016-04-01T17:54:53Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-12-10. Added 1 bitstream(s) on 2016-04-01T18:00:37Z : No. of bitstreams: 1 000860697.pdf: 1733916 bytes, checksum: 319f98dc74fda5996433b386d24f96c0 (MD5) / A alta incidência de candidoses causadas por Candida albicans e a capacidade de adaptação desta espécie, assim como resistência aos antifúngicos impulsionam o desenvolvimento de pesquisas com terapias alternativas para controle dessa infecção. O objetivo desse trabalho foi avaliar a influência de Lactobacillus rhamnosus e produtos do seu metabolismo contra C. albicans, avaliando-se a patogenicidade e a expressão de genes que regulam a formação do biofilme de C. albicans, in vitro e in vivo em modelo invertebrado de Galleria mellonella. Foram utilizadas cepas de C. albicans ATCC 18804 e L. rhamnosus ATCC 9595 (provenientes do Laboratório de Microbiologia do Instituto de Ciências e Tecnologia de São José dos Campos / UNESP). Para o estudo foram preparadas duas suspensões de L. rhamnosus, uma contendo a porção celular e a outra com o sobrenadante da cultura, livre de células. O estudo da patogenicidade in vitro de C. albicans foi avaliado pelos testes de formação de biofilme e quantificação de UFC/mL de C. albicans, análise da atividade metabólica pelo método do XTT e filamentação de C. albicans. A análise da curva de sobrevivência de Galleria mellonella foi utilizada para a avaliação in vivo da influência de L. rhamnosus na infecção causada por C. albicans. Os genes, BCR1, EFG1, CPH1, HWP1, ALS1 e ALS3 de C. albicans foram quantificados pela RT-PCR após a interação em modelo de biofilme. No estudo in vitro L. rhamnosus foi capaz de inibir a formação do biofilme, filamentação e reduzir a atividade metabólica de C. albicans. Esses efeitos também foram observados quando utilizado a suspensão do sobrenadante da cultura de L. rhamnosus, apontando possível produção de substâncias com efeito inibitório. Os resultados obtidos in vivo apontam que L. rhamnosus e seu sobrenadante protegeram G. mellonella da infecção por C. albicans, porém a suspensão do sobrenadante apresentou melhores resultados, visto.... / The high incidence of candidiasis caused by Candida albicans and the adaptability of this species, as well as resistance to antifungal drive the development of research on alternative therapies to control this infection. The aim of this study was to evaluate the influence of Lactobacillus rhamnosus and products of their metabolism against C. albicans, evaluating the pathogenicity and the expression of genes that regulate the formation of C. albicans biofilms in vitro and in vivo in invertebrate model Galleria mellonella. Strains of C. albicans ATCC 18804 and L. rhamnosus ATCC 9595 were used (from the Microbiology Laboratory of the Institute of Science and Technology of São José dos Campos / UNESP). For the study were prepared from L. rhamnosus two suspensions, one containing the serving cell and the other with the culture supernatant free cells. The study of in vitro pathogenicity of C. albicans was assessed by biofilm formation testing and quantitation of CFU / ml of C. albicans, analysis of metabolic activity by XTT method and C. albicans filamentation. The analysis of the Galleria mellonella survival curve was used to evaluate in vivo the influence of L. rhamnosus in infection caused by C. albicans. Genes, BCR1, EFG1, CPH1, HWP1, ALS1 and ALS3 of C. albicans were quantified by RT-PCR after interacting in biofilm model. In vitro evaluation L. rhamnosus was able to inhibit biofilm formation, filamentation and reduce the metabolic activity of C. albicans. These effects were also observed when using the suspension culture supernatant of L. rhamnosus, indicating the possible of production substances with inhibiting effect. The results obtained in vivo indicate that L. rhamnosus and its supernatant protected G. mellonella of C. albicans infection, but the suspension of the supernatant showed better results, as it increased the survival caterpillar G. mellonella. The results of gene expression have shown that ....

Made available in DSpace on 2016-04-01T17:54:58Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-02-03. Added 1 bitstream(s) on 2016-04-01T18:00:43Z : No. of bitstreams: 1 000860755.pdf: 588393 bytes, checksum: 39a4585958739f1195d05de4a9124846 (MD5) / A maioria das bactérias probióticas utilizadas em produtos comerciais são do gênero Lactobacillus. Entretanto, os efeitos das cepas probióticas de Lactobacillus na saúde bucal precisam ser mais investigados. Assim, o objetivo desse estudo foi avaliar os efeitos de cepas probióticas de Lactobacillus, sobre Streptococcus mutans. Foram testadas cepas de Lactobacillus acidophilus ATCC 4356, Lactobacillus rhamnosus ATCC 1465, Lactobacillus rhamnosus ATCC 7469 sobre o crescimento planctônico e biofilmes de Streptococcus mutans (UA159). Para estudo da atividade antibacteriana de Lactobacillus sobre o crescimento planctônico de S. mutans, suspensões padronizadas desses micro-organismos foram cultivadas em conjunto em caldo BHI por 24 h a 37 oC em 5% de CO2. Para estudo dos efeitos de Lactobacillus sobre biofilmes, suspensões padronizadas de cada cepa de Lactobacillus foram adicionadas aos biofilmes de S. mutans formados em fundo de placas de 96 poços. Os biofilmes foram incubados em Caldo BHI com 15% de sacarose a 37 oC por 48 h, e a seguir foram desagregados por homogeneização ultrassônica. Após a execução dos testes em crescimento planctônico e em biofilmes, foram realizadas diluições seriadas e semeaduras em meios de cultura seletivo para S. mutans (ágar Mitis Salivarius Bacitracina Sacarose) e para Lactobacillus (ágar Rogosa). A seguir, as unidades formadoras de colônias (UFC/mL) foram contadas e submetidas ao teste t de Student, considerando-se nível de significância de 5%. Os resultados demonstraram que as 3 cepas probioticas de Lactobacillus reduziram o crescimento planctônico de S. mutans, entretanto não foram observadas diferenças estatisticamente significantes entre os grupos Controle (S. mutans) e interação (S. mutans e cepa de Lactobacillus). Em relação aos biofilmes, apenas a cepa de Lactobacillus rhamnosus 1465 apresentou redução significativa no biofilme de s. mutans.... / Most probiotic bacteria used in commercial products belong to the genus Lactobacillus. However, the effects of Lactobacillus probiotic strains in the oral health need to be further investigated. The objective of this study is to evaluate the effects of probiotic Lactobacillus strains, on Streptococcus mutans. Lactobacillus strains acidophilus ATCC 4356, Lactobacillus rhamnosus ATCC 1465, Lactobacillus rhamnosus ATCC 7469 were tested on planktonic and biofilm growth of Streptococcus mutans (UA159). In order to study the antimicrobial activity of Lactobacillus on planktonic growth of S. mutans, standardized suspensions of these microorganisms were grown together in BHI for 24 hours at 37 °C in 5% CO2. In order to study the antimicrobial activity on biofilm growth, standardized suspensions of each strain of Lactobacillus were added to the S. mutans biofilm formed on the bottom of 96 well plates. Biofilms were incubated in BHI broth with 15% sucrose at 37 °C for 48 h and then were separated by ultrasonic homogenization. After the tests with planktonic and biofilm growth, serial dilutions and sowing in selective culture media were performed for S. mutans (Mitis Salivarius Bacitracin Sucrose agar) and Lactobacillus (Rogosa agar). Subsequently, colony forming units (CFU / mL) were counted and submitted to the Student t test, considering a level of 5% significance. The results show that the 3 Lactobacillus probiotic strains reduced the planktonic growth of S. mutans, however, no significant statistical differences were observed between the control (S. mutans) and interaction groups (S. mutans and Lactobacillus strain). Regarding biofilm growth, only the strain of Lactobacillus rhamnosus 1465 showed a significant reduction of S. mutans biofilm (p < 0.0001). It was concluded that the probiotic strains tested do not stimulate the growth nor biofilm formation of S. mutans. Moreover, the Lactobacillus rhamnosus 1465 strain has shown the potential ....

Made available in DSpace on 2016-04-01T17:55:12Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-12-01. Added 1 bitstream(s) on 2016-04-01T18:01:07Z : No. of bitstreams: 1 000860846.pdf: 837516 bytes, checksum: 02cdd507d97224a5f320a426addd6cc9 (MD5) / Hamamelis virginiana L. é uma planta nativa dos Estados Unidos da América que foi inserida no Brasil por conta de suas vastas atividades biológicas, como ação antimicrobiana e anti-inflamatória. As pesquisas com extratos desse vegetal são vastas, embora não haja estudos com extrato glicólico da mesma. O objetivo do presente trabalho foi avaliar a atividade antimicrobiana e anti-inflamatória do extrato glicólico de Hamamelis virginiana L. sobre cepas padrão de leveduras do gênero Candida (Candida albicans, C. dubliniensis, C. glabrata, C. guilliermondii, C. krusei e C. tropicalis), espécies de bactérias Gram-positivas (Enterococcus faecalis Staphylococcus aureus e Streptococcus mutans) e Gram-negativas (Acinetobacter baumanii, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae), nas fases planctônica e biofilme; além de avaliar a citotoxicidade e atividade anti-inflamatória. A atividade antimicrobiana foi realizada por teste de microdiluição em caldo para a determinação da Concentração Inibitória Mínima (CIM) e Concentração Microbicida Mínima (CMM), sendo os resultados utilizados como parâmetro para análise em biofilmes monotípicos. A atividade citotóxica foi analisada pelo teste MTT e quantificação da produção das citocinas interleucina-1β (IL-1β) e fator de necrose tumoral alfa (TNF-α) por ELISA, sendo a avaliação da atividade anti-inflamatória realizada por meio de exposição da cultura de macrófagos de camundongo (RAW 264.7) a lipopolissacarídeo (LPS) de E. coli seguido por tratamento com o extrato de H. virginiana L. Os resultados que apresentaram distribuição normal foram analisados por ANOVA e teste Tukey (p≤ 0,05); já os sem distribuição normal foram analisados por Kruskal-Wallis e pós teste Dunns. Os resultados obtidos revelam que o extrato glicólico de Hamamelis virginiana L. proporcionou atividade antimicrobiana sobre os micro-organismos testados no presente estudo e o teste de citoxicidade.... / Hamamelis virginiana L. is a North American plant that was insert in Brasil because their biological activities, like antimicrobial and anti-inflamatory activities. Large researchs are development with H. virginiana L. extracts, although there are no studies with glycolic extract from it. The objective of this work was to evaluate the antimicrobial and anti-inflammatory activity of glycolic extract of Hamamelis virginiana L. over standard strains of genus Candida yeast (C. albicans, C. dubliniensis, C. glabrata, C. guilliermondii, C. krusei e C. tropicalis), species of Gram-positive bacteria (Enterococcus faecalis, Staphylococcus aureus e Streptococcus mutans) and Gram-negative (Acinetobacter baumanii, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae), in plankton communities and biofilm; besides the cytotoxicity and anti-inflammatory. The antimicrobial activity was performed by microdiluition test in broth for determining the Minimum Inhibitory Concentration (MIC) e Minimum Microbicide Concentration (MMC), and the results used for antimicrobial analysis in biofilms monotypic. The cytotoxic activity was analyzed by the MTT test and quantification of production of the cytokines IL-β 1 and TNF-α by ELISA., being that the anti-inflamatory activity was performed with exposition of macrophages mouse culture to E. coli lipopolissacaride (LPS) and extract post-treatment. The results were analyzed by ANOVA and Tukey Test (p ≤ 0.05) if the results present normal distribuition; and Kruskal Wallis and post-test Dunn if the results don't presente normal distribuition (p ≤ 0.05). Results shows that the H. virginiana L. glycolic extract have antimicrobial activity about test micro-organisms and the cytotoxicity test shows high cellular viability or equal the control, except for the 100 mg/mL for 24 h contact time. Cytokines weren't produced by macrophages. Nitric oxide was produced by cells in a con...

Made available in DSpace on 2015-06-17T19:33:56Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-02-23. Added 1 bitstream(s) on 2015-06-18T12:47:49Z : No. of bitstreams: 1 000830347.pdf: 242986 bytes, checksum: 3957e431d5fb3368b3a93a697bd645dd (MD5) / Enterococcus faecalis é uma bactéria Gram-positiva que pode resistir ao tratamento endodôntico e manter a infecção presente no sistema de canais radiculares. Assim, o uso de cimentos endodônticos com atividade antimicrobiana pode ajudar a eliminar microrganismo residuais que sobreviveram após o tratamento endodôntico. Diante dessa realidade, o presente estudo teve por objetivo avaliar comparativamente a ação antimicrobiana dos cimentos endodônticos Acroseal, Sealapex e AH Plus em um modelo de biofilme in vitro. Para a realização do estudo foram confeccionados 144 espécimes de dentina bovina, sendo doze blocos para cada cimento em cada tempo experimental que permaneceram em placas contendo meio de cultura inoculado com E. faecalis (ATCC 51299) para permitir a formação de biofilme. Decorrido 14 dias, os espécimes foram transferidos para outra placa onde discos dos cimentos testados foram colocados sobre o biofilme formado. As placas de cultura foram deixadas em estufa a 37°C e 5% de CO2 por 2, 7 e 14 dias. Espécimes sem aplicação dos cimentos foram utilizados como controle para cada período. Após cada tempo experimental, as amostras foram agitados em sonicador. As suspensões foram agitadas em vortex e foi realizada uma diluição seriada decimal em solução salina, sendo estas diluições plaqueadas em triplicata em meio de cultura m-Enterococcus ágar. As unidades formadoras de colônia foram contadas e os dados analisados estatisticamente usando os teste ANOVA, Shapiro-Wilk e Kruskal-Wallis one-way (p<0,05) para determinação do potencial antimicrobiano. Resultados: O Sealapex apresentou diferença estatística em todos os tempos experimentais quando comparado com os demais grupos. O AH Plus e o Acroseal mostraram atividade antimicroabina apenas no 14o dia de experimento. Conclusão: Nenhum... / Enterococcus faecalis is a gram positive bacteria that can resist to the endodontic therapy and maintain the infection present in the root canal system. Therefore, the use of endodontic sealers with antimicrobial activity could help to eliminate residual microorganism that have survived after endodontic treatment. The present study aimed to compare the antimicrobial activity of the endodontic sealers Acroseal, Sealapex and AH Plus in vitro biofilm model. It were prepared 144 bovine dentin specimens, twelve blocks for each cement in each experimental time that remained in plates containing culture medium inoculated with E. faecalis (ATCC 51299) for biofilm formation. After 14 days, the samples were transferred to another plate with test sealers and were kept at 37oC and 5% CO2 for 2, 7 and 14 days. Specimens without sealers were used as a control for each period. After each experimental, the samples were agitated in sonicator. The suspensions were agitated in vortex and serially diluted in saline and triple plaqued in m-Enterococcus agar. Colony forming unit were counted and the data were statistically analyzed using ANOVA, Shapiro-Wilk and Kruskal-Wallis one-way test (p<0.05) for the antimicrobial potential determination. Results: Sealapex showed significant difference in all experimental times in comparison to all other groups. AH Plus and Acroseal showed antimicrobial activity just at 14th experimental day. Conclusion: Neither of sealers setting tested was able to remove biofilm . The Sealapex showed higher antimicrobial activity in all experimental periods. All sealers examined the antimicrobial effectiveness was higher with over time

Made available in DSpace on 2015-09-17T15:24:07Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-07-18. Added 1 bitstream(s) on 2015-09-17T15:48:24Z : No. of bitstreams: 1 000839097.pdf: 4137488 bytes, checksum: e361e28e2b4d90c452faabd674b87f64 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O processo de esterilização deve preservar as propriedades do esmalte utilizado nas pesquisas in vitro e in situ. O objetivo deste estudo foi avaliar a influência dos métodos de esterilização Irradiação por micro-ondas - IM, Irradiação gamma - IG, Óxido de etileno - OE e Autoclave - AU sobre as propriedades do esmalte. O estudo foi realizado em duas fases. Na fase 1, 50 espécimes de esmalte bovino foram divididos em cinco grupos (n=10): IM, IG, OE, AU e controle (não esterilizado). Foram realizadas avaliações quanto à morfologia (Microscopia Eletrônica de Varredura - MEV superficial e em secção transversal), composição química (Energia Dispersiva de raios-X - EDS e Espectroscopia Fotoeletrônica por raios-X - XPS) e estrutura (Raman e Ressonância Magnética Nuclear - RMN). Na fase 2, 360 espécimes de esmalte bovino foram divididos em quatro grupos (n=90): IM, IG, OE e AU. Biofilmes monoespécie (Actinomyces naeslundii e Streptococcus sanguis) e biofilmes mistos foram formados e avaliados, para cada grupo experimental, quanto ao número de unidades formadoras de colônias por mililitro (UFC/mL; n=10), atividade metabólica (redução do 2 metoxi 4 nitro 5 sulfofenil 5 fenilalanina carbonil 2H tetrazolium hidróxido - XTT; n=10) e biomassa total (cristal violeta; n=10). A análise estatística dos dados foi realizada para as avaliações Raman, XPS, UFC/mL, XTT e cristal violeta com ɑ=0,05. Os resultados indicaram que o método IG não promoveu alterações sobre a morfologia, composição química e estrutura do esmalte. Os grupos IM e EO promoveram pequenas alterações na morfologia superficial, composição química e estrutura. O grupo AU resultou em severas alterações na morfologia superficial e em secção transversal, com pequena 9 influência sobre a composição química e estrutura do esmalte. Os biofilmes de S. sanguis não apresentaram diferenças...(Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / The sterilization process should preserve the enamel properties of specimens used for in vitro and in situ studies. The aim of this study was to evaluate the influence of sterilization methods Microwaving - MI, Gamma irradiation - GI, Ethylene oxide - EO and Steam autoclave SA on the enamel properties. This study was conducted into 2 phases. For phase 1, 50 specimens of bovine enamel were assigned into 5 groups (n=10): MI, GI, EO, SA and control (no sterilization), evaluated regarding morphology (Scanning Electron Microscopy - SEM superficial and cross-section), chemical composition (X-ray energy dispersive spectroscopy - EDS and X-ray photoelectron spectroscopy - XPS) and structure (Raman and Nuclear Magnetic Resonance - RMN). For phase 2, 360 bovine enamel specimens were assigned into 4 groups (n=90): MI, GI, EO and SA. For each group, biofilms were grown as monospécies (Actinomyces naeslundii and Streptococcus sanguis) and multispecies, evaluated regarding counting forming units (CFU/mL), metabolic activity (reduction of 2,3-bis(2-methoxy-4-nitro-5-sulfophenyl)-5-[(phenylamino)carbonyl]-2H-tetrazolium hydroxide - XTT) and biomass (violet crystal assay). Statistical evaluation was performed for data from XPS, Raman, CFU/mL, XTT assay and violet crystal assay. The results indicated that GI group produced no alterations on the morphology, chemical composition and structure of the enamel. MI and EO groups promoted slightly alterations on morphology, chemical composition and structure. The SA group caused severe morphological changes on surface and in depth and small alterations on chemical composition and structure. There were no differences among groups for S. sanguis biofilms. A. naeslundii biofilms showed higher values of CFU/mL and biomass for SA group and higher metabolic activity in GI group. It can be concluded that enamel properties could be influenced ...(Complete abstract electronic access below) / FAPESP: 2011/09416-0

Made available in DSpace on 2015-09-17T15:24:51Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-12-17. Added 1 bitstream(s) on 2015-09-17T15:47:09Z : No. of bitstreams: 1 000843223.pdf: 1441368 bytes, checksum: c87084a3d4f9e2c1fd32be68729a4c4b (MD5) / Streptococcus sanguinis e Streptococcus mitis são colonizadores pioneiros do biofilme bucal e podem causar endocardite bacteriana. Candida albicans está presente na cavidade bucal de forma comensal, possui capacidade de formar biofilme e causar candidose bucal. O objetivo desse trabalho foi avaliar as interações entre C. albicans com S. sanguinis e S. mitis em biofilmes e suas influências in vivo em modelo experimental de invertebrado Galleria mellonella. Para o estudo da interação de C. albicans (ATCC 18804) com S. sanguinis (ATCC 7073) e S. mitis (ATCC 4945) foram formados biofilmes monoespécie e multiespécies de C. albicans com os micro-organismos (na concentração de 107 células/mL) em fundo de placa de 96 poços por 48 h, incubados em estufa a 37 °C com 5% CO2. Após crescimento, os biofilmes foram desprendidos e obtidas diluições decimais as quais foram semeadas em meios seletivos. Após incubação por 48 h/37 °C foi obtida a contagem de unidades formadoras de colônias por mililitro (UFC/mL). Em paralelo, foram realizados ensaios colorimétricos com o sal XTT, a fim de mensurar a atividade metabólica de C. albicans nos biofilmes isolados e associados, seguindo de leitura a 492 nm, e o resultado expresso em absorbância (Abs). No estudo in vivo, primeiro foram determinadas as concentrações subletais dos micro-organismos, e inoculadas em G. mellonella, e observado o efeito de C. albicans, S. mitis e S. sanguinis nas lagartas, avaliando se curva de sobrevivência. Avaliação morfológica dos biofilmes foi realizada por microscopia eletrônica de varredura (MEV). Os dados de contagem de UFC/mL e da atividade metabólica foram submetidos à análise de normalidade, e como foi observada distribuição normal, os resultados foram analisados estatisticamente pelos testes t de Student (para duas variáveis) e Tukey (para três ou mais variáveis), considerando-se diferença estatística quando p <0,05. Os dados obtidos na curva de.. / Streptococcus sanguinis and Streptococcus mitis are pioneering colonizers of oral biofilm and can cause bacterial endocarditis. Candida albicans is present in the oral cavity in a commensal manner and also has the ability to form biofilm and cause oral candidiasis. The aim of this study was to evaluate the interactions between C. albicans with S. sanguinis and S. mitis biofilms and their influences in vivo on an experimental invertebrate model of Galleria mellonella. To study the interaction of C. albicans (ATCC 18804) with S. sanguinis (ATCC 7073) and S. mitis (ATCC 4945) monospecies and multispecies biofilms were formed of C. albicans and with micro-organisms (a concentration of 107 cells/ml) in the bottom of a 96-well plate for 48 h, incubated at 37 °C with 5% CO₂. After growth, biofilms were detached, and decimal dilutions were plated on selective media. After incubation for 48 h/37 °C the count of colony forming units per milliliter (CFU/mL) was obtained. Alongside, XTT salt colorimetric assays were carried in order to measure the metabolic activity of isolated and associated C. albicans biofilms, following reading at 492 nm, and the result expressed in absorbance (Abs). In the in vivo study, first the sublethal concentrations of microorganisms were determined, and inoculated into G. mellonella, and the effect of C. albicans, S. mitis and S. sanguinis in caterpillars was observed, evaluating the survival curve. Morphological evaluation of the biofilms was performed by scanning electron microscopy (SEM). The count of CFU/mL and metabolic activity were submitted to normality analisis, and as a normal distribution was observed, the results were statistically analyzed by Student's t test (for two variables) and Tukey (for three or more variables) considering statistical difference at p < 0.05. The G. mellonella survival curves data were analyzed by log-rank method. Streptococci influenced the reduction of biofilms of C. albicans and ....

Made available in DSpace on 2015-09-17T15:25:31Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-03. Added 1 bitstream(s) on 2015-09-17T15:48:42Z : No. of bitstreams: 1 000846451.pdf: 1430012 bytes, checksum: b36ec304aba3d25dcd4c3440e3fd6a9e (MD5) / Dental materials act as substrates for the adhesion of microorganisms, and consequently, for biofilm development. Given that the surface characteristics of materials may interfere in the initial adhesion, changes in these characteristics may inhibit or reduce the adhesion of bacteria and fungi, thus preventing the development of diseases. Another aspect to consider is that, in the oral cavity, surfaces are covered with saliva, forming a thin film referred to as acquired salivary pellicle. In order to simulate oral conditions, in vitro studies have used preconditioning in human saliva before biofilm formation. Thus, the aim of this study was to evaluate the effect of plasma polymerized films on the surface characteristics of dental materials (acrylic resin, titanium and zirconia), as well as on the biofilm formation on these materials, with and without preconditioning in human saliva. For this purpose, the monomer hexamethyldisiloxane HMDSO was used as precursor in the PECVD (Plasma Enhanced Chemical Vapor Deposition) process. Deposition parameters were varied to produce a range of films with hydrophobic or hydrophilic characteristics. Specimens of each material without film deposition were used as controls. Characterization of the films was performed by Fourier Transformed infrared spectroscopy (FTIR), scanning electron microscopy (SEM), contact angle measurements and surface free energy, X-ray photoelectron spectroscopy (XPS), and profilometry. To evaluate biofilm formation, half of the test specimens (10 × 2 mm) of the experimental and control groups were stored in previously prepared 16 human saliva and afterwards incubated with 1 × 107 cells/mL of both Candida albicans (for acrylic resin) and Porphyromonas gingivalis (for titanium and zirconia). Samples without preconditioning in saliva were also incubated in the respective microorganisms... (Complete abstract electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-11-10T11:09:39Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-02-26Bitstream added on 2014-11-10T11:58:06Z : No. of bitstreams: 1 000783734_20160226.pdf: 349028 bytes, checksum: 6abc5bb1ce5dd6080f4e0a4d82b47b78 (MD5) Bitstreams deleted on 2016-02-26T14:03:46Z: 000783734_20160226.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2016-02-26T14:04:45Z : No. of bitstreams: 1 000783734.pdf: 302036 bytes, checksum: 895ef9f5475395e674ad28f06f70556b (MD5) Bitstreams deleted on 2016-08-12T12:00:48Z: 000783734_int.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2016-08-12T12:01:21Z : No. of bitstreams: 1 000783734.pdf: 1329260 bytes, checksum: e33025609c90ab9da8a389d79e472b4f (MD5) / Staphylococcus epidermidis e Staphylococcus haemolyticus são considerados patógenos oportunistas, cujas infecções estão principalmente associadas à produção de biofilme. As enterotoxinas, superantígenos relacionados a intoxicações alimentares, e as hemolisinas, moléculas capazes de causar lise de membranas celulares, parecem estar associadas à patogênese das infecções estafilocócicas, apesar de ainda ser questionado se elas constituem fatores de virulência importantes nesses organismos. O uso indiscriminado de antimicrobianos vem selecionando cepas resistentes à oxacilina com menor suscetibilidade à vancomicina. A resistência à oxacilina é codificada pelo gene mecA, contido em um elemento genético móvel, denominado SCCmec. Novos antimicrobianos, como a linezolida, tigeciclina, daptomicina e quinupristina/dalfopristina vêm sendo empregados no tratamento de infecções por estafilococos multirresistentes. Este estudo objetivou caracterizar S. epidermidis e S. haemolyticus isolados de hemoculturas quanto à presença de genes de hemolisinas, enterotoxinas, suscetibilidade aos antimicrobianos e perfil clonal. Cento e sessenta e nove isolados foram pesquisados quanto à presença do gene mecA por PCR em tempo real, estando presente em 100% dos S. haemolyticus e 92,9% dos S. epidermidis, cujos tipos de SCCmec mais frequentes, determinados por PCR Multiplex, foram, respectivamente, I e III. Os MICs (Concentração Inibitória Mínima) de linezolida, tigeciclina, daptomicina, quinupristina/dalfopristina e vancomicina foram obtidos por Etest® e revelaram 4,7% de isolados resistentes à tigeciclina, 1,2% resistentes ou com resistência intermediária à quinupristina/dalfopristina, sendo o MIC máximo de vancomicina igual a 3 μg/ml. A microdiluição em caldo para vancomicina mostrou MICs de 0,25 a 2 μg/ml, concordando em 88,2% com os resultados obtidos com Etest®. A tipagem por PFGE... / Staphylococcus epidermidis and Staphylococcus haemolyticus are opportunistic pathogens that cause infections which are mainly related to the formation of a biofilm. Enterotoxins, superantigens related to food poisoning and hemolysins, molecules able to lyse mammalian cells, seem to be involved in the pathogenesis of staphylococcal infections, although the question remains whether they represent important virulence factors in these organisms. The indiscriminate use of antimicrobial drugs has selected strains that are resistant to oxacillin, in addition to isolates with reduced vancomycin susceptibility. Oxacillin resistance is encoded by the mecA gene which is carried on a mobile genetic element, SCCmec. New antimicrobial drugs such as linezolid, tigecycline, daptomycin and quinupristin/dalfopristin are being used for the treatment of infections caused by multidrug-resistant staphylococci. The objective of this study was to characterize S. epidermidis and S. haemolyticus strains isolated from blood cultures regarding the presence of hemolysin and enterotoxin genes, antimicrobial susceptibility, and clonal profile. Investigation of the mecA gene by real-time PCR in 169 isolates revealed the presence of the gene in 100% of S. haemolyticus isolates and 92.9% of S. epidermidis. The most frequent SCCmec types determined by multiplex PCR were types I and III, respectively. The minimum inhibitory concentrations (MICs) of linezolid, tigecycline, daptomycin, quinupristin/dalfopristin and vancomycin determined by the Etest® showed that 4.7% of the isolates were resistant to tigecycline and 1.2% were resistant or intermediate resistant to quinupristin/dalfopristin. The maximum MIC for vancomycin was 3 μg/ml. Broth microdilution revealed vancomycin MICs of 0.25 to 2 μg/ml, showing 88.2% agreement with the Etest results. Pulsed-field gel electrophoresis (PFGE) typing revealed the presence of S. epidermidis ...

Made available in DSpace on 2014-11-10T11:09:54Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-04-03Bitstream added on 2014-11-10T11:57:44Z : No. of bitstreams: 1 000788531_20141231.pdf: 390330 bytes, checksum: af24401fb24e38526931a89f85f4de15 (MD5) Bitstreams deleted on 2015-01-05T11:00:53Z: 000788531_20141231.pdf,Bitstream added on 2015-01-05T11:01:49Z : No. of bitstreams: 1 000788531.pdf: 1071602 bytes, checksum: e7f64588712903e7e7cfea4f7076f1c5 (MD5) / Apesar dos recentes avanços tecnológicos na indústria de alimentos, ainda se observa a ocorrência de inúmeras enfermidades de origem alimentar, devido à ingestão de alimentos contaminados por micro-organismos patogênicos, dentre eles os do gênero Salmonella. Dentre os produtos envolvidos em processos de contaminação por este agente, as carnes são as mais importantes, sendo a de aves o veículo em numerosos casos de infecções humanas. Além dos problemas em saúde pública, o micro-organismo causa grandes problemas devido à formação de biofilmes na indústria, sendo que esta ocorre em virtude da adesão dos micro-organismos em uma superfície de contato, a qual se fixam, constituem uma matriz de exopolissacarídeos e iniciam seu crescimento. Estes representam uma preocupação à indústria de alimentos por seu efeito como fonte de contaminação crônica, que aumenta as chances de veiculação do patógeno ao consumidor. Inúmeros são os fatores que condicionam o desenvolvimento do biofilme, entres eles o tipo de superfície e suas propriedades físico-químicas, já que as mesmas exercem influência direta sobre a adesão dos micro-organismos. Diversas medidas de controle para resolver o problema são empregadas na indústria, como o uso de sanitizantes, em destaque os à base de ácido peracético, que embora tenham o seu efeito sob células sésseis comprovado, a sua ação sob biofilmes ainda necessita de maior comprovação científica. Nesse sentido, os dados obtidos por este trabalho ratificaram a importância de Salmonella spp. como formadora de biofilme em diferentes superfícies, o que pode induzir a uma maior permanência destes micro-organismos no ambiente de processamento na indústria e, consequentemente, a uma maior chance de contaminação dos alimentos, com riscos ao consumidor. Nossos resultados também confirmaram que as propriedades físico-químicas da superfície dos diferentes materiais influenciaram ... / Despite recent technological advances in the food industry, still observed the occurrence of numerous food borne illnesses due to ingestion of contaminated by pathogenic microorganisms, including members of the genus Salmonella spp. Among the products involved in processes of contamination by this agent, the steaks are the most important, being the vehicle of birds in numerous cases of human infections. In addition to problems in public health, the microorganism causes big problems due to the formation of biofilms in the industry, and this occurs because of the accession of microorganisms on a surface of contact, which are fixed, are an array of exopolysaccharides and begin their growth. These are a concern to the food industry for its effect as a source of chronic infection, which increases the chances of placement of the pathogen to the consumer. There are many factors that affect biofilm development, entres they the type of surface and its physicochemical properties, since they will directly influence the adhesion of microorganisms. Several control measures to solve the problem are employed in the industry, such as the use of sanitizers, featured in the peracetic acid, though they have proven their effect on sessile cells in biofilms its action still needs more scientific evidence. In this sense, the data obtained from this study confirm the importance of Salmonella spp. as forming biofilm on different surfaces, which can induce a greater permanence of these microorganisms in the processing environment in the industry and hence a greater chance of food contamination, with risks to the consumer. Our results also confirmed that the physicochemical surface properties of different materials directly influence the adhesion of microorganisms and, consequently, the development of the biofilm. In simple terms, the greater the hydrophobicity of the surface, the greater the ability to promote the development of the biofilm, in order that the ...