O controle químico de pragas, para muitas culturas agrícolas é uma das principais táticas em programas de manejo integrado de pragas (MIP), trazendo benefícios reais e diminuindo as perdas por insetos-praga, além do aumento na produção de alimentos e fibras, proteção de produtos armazenados e proteção de pragas e doenças de seres humanos. O controle de pragas em soja e milho tem sido realizado, em sua maioria, utilizando-se plantas Bt e produtos químicos, este último, além das diversas vantagens citadas, pode ter desvantagens, principalmente quando utilizado de maneira inadequada, com potencial de causar diversos problemas no agroecossistema, além de desequilíbrios ambientais. Devido a importância da cultura da soja e do milho para o Brasil e para o mundo, como base da alimentação animal e humana, reconhecendo o grande uso e papel dos inseticidas como uma das principais táticas usadas para o controle de insetos-praga destas culturas, se faz necessário estudos que tratem da melhor forma de uso dos inseticidas e estudos que avaliem possíveis efeitos adversos destas moléculas em insetos benéficos, para que estejam de acordo com as premissas do MIP. Para viabilizar esta importante tática de controle, realizou-se estudos com os seguintes objetivos: 1) Estudar a toxicidade residual dos inseticidas indoxacarb (Avatar®), chlorantraniliprole (Premio®), spinosad (Tracer®) e teflubenzuron (Nomolt 150®) para C. includens em soja, em ensaio com e sem simulação de chuva; 2) Estudar a toxicidade residual dos inseticidas indoxacarb (Avatar®), chlorantraniliprole (Premio®), spinosad (Tracer®) e teflubenzuron (Nomolt 150®) para S. frugiperda em milho, em ensaio com e sem simulação de chuva; 3) Avaliar efeito letal e subletal de inseticidas recomendados para soja e milho sobre o predador Doru luteipes. Para o primeiro objetivo, teflubenzuron (15 g i. a. ha-1); spinosad (36 g i. a. ha-1); chlorantraniliprole (5, 10 e 20 g i. a. ha-1); indoxacarb (30, 60 e 90 g i. a. ha-1) não tiveram a eficácia afetada quando submetidos à simulação de chuva em todos os tempos avaliados. Quanto a toxicidade residual ao longo do tempo, teflubenzuron, chlorantraniliprole e indoxacarb, nas duas condições, com e sem simulação de chuva, tiveram redução da eficácia após o 5° dia. Diferentemente, os inseticidas spinosad (36 g i. a. ha-1) e indoxacarb (90 g i. a. ha-1), nas duas condições, não tiveram redução da eficácia até 15 dias após aplicação, e em todos os tempos avaliados foram mais eficazes do que os demais inseticidas. Para o segundo objetivo, spinosad (36 g i. a. ha-1) e chlorantraniliprole (10, 20 e 30 g i. a. ha-1) mantiveram a eficácia até o 15º dia após pulverização. Quanto aos efeito da simulação da chuva, spinosad (36 g i. a. ha-1), chlorantraniliprole (10, 20 e 30 g i. a. ha-1) e indoxacarb (90 g i. a. ha-1) mantiveram a eficácia. O inseticida chlorantraniliprole na maior dose utilizada e recomenda para o controle da praga na cultura foi o mais efetivo dentre todos, quanto a toxicidade residual e sob ação da simulação de chuva. Quanto ao terceiro objetivo, ensaio de efeito letal, Tracer, Premio e Avatar foram classificados como nocivos (classe 4), e somente Nomolt foi inócuo (classe 1). No ensaio de efeito subletal apenas o inseticida Nomolt teve parâmetros avaliados. Apesar disso, causou efeitos adversos ao predador, como: aumento do período de pré-oviposição; aumento do período embrionário e diminuição da fecundidade; não sendo, portanto, recomendado para utilização em programas de MIP, pois, altera a capacidade de desenvolvimento e reprodutiva da tesourinha predadora. Os resultados obtidos nesses estudos proveram importantes informações para o refinamento do uso de moléculas inseticidas e classificação desses quanto a seletividade ao predador generalista D. luteipes, agregando informações práticas para o manejo de pragas na cultura da soja e milho. / Chemical pest control for many agricultural crops is one of the main tactics in integrated pest management (IPM) programs, bringing real benefits and decreasing losses by pest insects, as well as increased food and fiber production, protection of stored products and protection of pests and diseases of humans. Pest control in soybean and corn has been mostly carried out using Bt plants and chemical products, for the latter, in addition to the several advantages cited, may have some disadvantages, especially when used improperly, with the potential to cause several problems in the agroecosystem, as well as environmental impacts. Owing to the importance of soybean and corn cultivation to Brazil and to the world, as a basis of animal and human feeding, recognizing the great use and role of insecticides as one of the main tactics used to control insect pests of these crops, it is necessary to study the best use of insecticides and studies that evaluate the possible adverse effects of these chemical molecules on beneficial insects, so that they are in accordance with the IPM premises. To enable this important control tactic, studies were carried out with the following objectives: 1) To study the residual toxicity of insecticides indoxacarb (Avatar®), chlorantraniliprole (Premio®), spinosad (Tracer®) and teflubenzuron (Nomolt 150®) for C. includens in soybeans, with and without rainfastness; 2) To study the residual toxicity of insecticides indoxacarb (Avatar®), chlorantraniliprole (Premio®), spinosad (Tracer®) and teflubenzuron (Nomolt 150®) for S. frugiperda in maize, with and without rainfastness; 3) To evaluate the lethal and sublethal effect of insecticides recommended for soybean and corn on the earwing predator Doru luteipes. For the first objective, teflubenzuron (15 g a. i. ha-1); spinosad (36 g a. i. ha-1); chlorantraniliprole (5, 10 and 20 g a. i. ha-1); indoxacarb (30, 60 and 90 g a. i. ha-1) were not affected when submitted to rainfastness at all evaluated times. Concerning for residual toxicity over time, teflubenzuron, chlorantraniliprole e indoxacarb, under both conditions, with and without rainfastness, had a reduction in efficacy after 5 day. In contrast, the insecticides spinosad (36 g a. i. ha-1) and indoxacarb (90 g a. i. ha-1), in both conditions had no efficacy reduction until 15 days after application and at all times evaluated were more effective than the other insecticides. For the second objective, spinosad (36 g a. i. ha-1) e chlorantraniliprole (10, 20 and 30 g a. i. ha-1) maintained efficacy until the 15th day after spraying. As for the effects of rainfastness, spinosad (36 g a. i. ha-1), chlorantraniliprole (10, 20 and 30 g a. i. ha-1) and indoxacarb (90 g a. i. ha-1) remained effective. The insecticide chlorantraniliprole at the highest dose used and recommended for the control of the pest in the crop was the most effective of all, regarding residual toxicity and under the action of the rainfastness. About the third objective, lethal effect bioassay, Tracer, Premio e Avatar were classified as harmful (class 4), and only Nomolt was innocuous (class 1). In the test of sublethal effect, just the insecticide Nomolt had parameters evaluated. Nevertheless, it caused adverse effects to the predator, such as: increased pre-oviposition period; increase in the embryonic period and decrease in fecundity; therefore, it is not recommended for use in IPM programs, because it modify the developmental and reproductive capacity of predatory earwings. The results obtained in these studies provided important information for the refinement of the use of insecticidal molecules and the classification of these as the selectivity to the generalist predator D. luteipes, adding practical information for pest management in soybean and corn crops.

Este trabalho teve o objetivo de avaliar parâmetros biológicos de A. kuehniella em dietas artificiais com variações de composição, com vistas a otimizar sua criação massal, aumentando a quantidade e, consequentemente, a qualidade dos ovos produzidos para a criação de Trichogramma spp. A pesquisa foi dividida em duas fases. Na primeira fase, foram avaliados parâmetros biológicos de A. kuehniella criada em dietas artificiais compostas por farinha integral de trigo de 6 diferentes variedades (97%) e levedura (3%); as variedades testadas foram Coodetec 150 (testemunha), BRS Parrudo, BRS Guamirim, BRS 327, BRS 328 e BRS 374. Na segunda fase, foram avaliados os mesmos parâmetros sobre dietas compostas por farinhas de trigo integral e de milho amarelo isoladamente (100%), farinha de trigo integral (50%) e farinha de milho amarelo (50%), e diferentes proporções de levedura adicionadas à farinha de trigo (3%, 5% e 8%). Os parâmetros avaliados foram: duração (dias) e viabilidade (%) do período ovo-adulto, peso (mg) de adultos (machos e fêmeas), razão sexual, longevidade (dias) de fêmeas e machos, ritmo diário de oviposição das fêmeas e viabilidade dos ovos produzidos. Concluiu-se que a produção de ovos da traça A. kuehniella independe da variedade de trigo utilizada na sua criação; as melhores dietas artificiais para a criação massal de A. kuehniella foram aquelas compostas por 97% de farinha de trigo integral e 3% de levedura (dieta 1), 50% de farinha de trigo integral e 50% de farinha de milho amarelo (dieta 2) e 100% de farinha de trigo integral (dieta 3); a dieta artificial de menor custo, que proporcionou o melhor desenvolvimento para A. kuehniella, foi aquela composta por 100% de farinha de trigo integral. / The objective of this research was to evaluate biological parameters of A. kuehniella in artificial diets with composition variations, aiming to optimize its mass rearing, increasing the quantity and the quality of the produced eggs for Trichogramma spp. rearing. The research was divided into two phases. In the first one, biological parameters of A. kuehniella reared on artificial diets composed of whole wheat flour of 6 different varieties (97%) and yeast (3%) was evaluated; the tested varieties was Coodetec 150 (control), BRS Parrudo, BRS Guamirim, BRS 327, BRS 328 and BRS 374. In the second phase, the same parameters was evaluated on diets composed of wheat and yellow corn flour alone (100%), whole wheat flour (50%) and yellow corn flour (50%), and different proportions of yeast added to the wheat flour (3%, 5% and 8%). The evaluated biological parameters for both phases were: duration (days) and viability (%) of egg-adult period, adult male and female weights (mg), sex ratio, adult male and female longevity (days), daily rhythm of oviposition and viability of the produced eggs. It was concluded that the A. kuehniella eggs production is not correlated to the wheat variety used as component of the artificial diet for its rearing; the best artificial diets for the mass rearing of A. kuehniella are those composed by whole wheat flour (97%) and yeast (3%) (diet 1), whole wheat flour (50%) and yellow corn flour (50%) (diet 2) and whole wheat flour (100%) (diet 3); with regard to cost-benefit, the lowest cost artificial diet that provides the best development for A. kuehniella is that composed by whole wheat flour (100%).

Uma das principais espécies de ácaro praga é o ácaro rajado, Tetranychus urticae. Um dos inimigos naturais mais importantes deste ácaro é o patógeno Neozygites floridana. Para viabilizar o uso deste patógeno através de liberações inoculativas, ainda são necessárias informações básicas para subsidiar o desenvolvimento de uma metodologia de produção em escala e para liberações do fungo em campo. Para tanto, foi determinado em laboratório, a exigência de umidade e temperatura para a esporulação do fungo, colocando-se ácaros mumificados em folhas de feijão-de-porco. A 80 e 85% de umidade, em nenhuma das temperaturas (13, 17, 21 e 25°C) ocorreu esporulação. O fungo esporulou pouco a 90% UR em todas as temperaturas. As melhores condições para formação de capiloconídios foram a 95% e 100% UR a 21°C e 25°C. Ácaros mumificados foram colocados para esporular em feijão-de-porco em telados em diferentes épocas do ano e a temperatura e umidade monitorada. Notou-se que acima de 13°C o fungo conseguiu produzir um número considerável de conídios primários (>130) mesmo a 90% UR. Entretanto, nesta UR somente a 25°C a produção de capiloconídios foi significativa (>389). Determinou-se o efeito da exposição de duas intensidades luminosas (2.960 Lux e 15.392 Lux), três fotoperíodos (24h de luz, 12:12h(L:E) e 24h de escuro) e duas temperaturas (18°C e 23°C), na produção de conídios primários e de capiloconídios de isolados da Noruega e do Brasil. Ácaros mumificados foram expostos aos diferentes tratamentos em BOD. Não foram encontradas diferenças entre os dois isolados nas duas temperaturas testadas. Os resultados para o fotoperíodo de 12:12h(L:E) foram similares aos encontrados para 24h de escuro. A inibição da luz na formação de capiloconídios foi maior no isolado Norueguês. Baixa intensidade de luz por 24h teve efeito moderado na esporulação dos dois isolados, mas inibiu fortemente a formação de capiloconídios no isolado Norueguês. Foram realizados estudos para avaliar o efeito de agrotóxicos utilizados na produção de morango no Brasil e na Noruega sobre a esporulação e produção de capiloconídios de N. floridana em laboratório. Os resultados revelaram que Tebuconazol, Fenpropatrina na concentração recomendada e Abamectina na metade da concentração recomendada, foram os menos agressivos a N. floridana. Foram também realizadas tentativas de produção em escala deste fungo. Através de inoculações experimentais em telado foi possível induzir epizootias em populações de T. urticae em plantas de feijão de porco em vasos nos telados. Liberações de quatro ácaros mumificados por vaso foi a forma mais prática de inoculação. Maiores quantidades de ácaros mumificados foram produzidos quando as condições climáticas foram caracterizadas por alta UR e 20°C, sendo que durante o inverno a produção não foi eficiente. O uso de lâmpadas e ventiladores durante o período noturno ao final da epizootia, foi eficiente em inibir a esporulação e garantir a qualidade dos ácaros mumificados para o armazenamento. Embora tenha sido possível produzir um grande número de ácaros mumificados, vários estudos ainda são necessários para desenvolver uma metodologia de produção em escala para que seja economicamente viável a sua utilização em campo. / One of the main pest mite species is the Twospotted Spider Mite, Tetranychus urticae. The most important natural enemy of this mite is the pathogen Neozygites floridana. To enabling the use of this pathogen through inoculative releases, basic information is still needed to support the large scale methodology development for fungus production and release in the field. It was determined in the laboratory, the humidity and temperature requirements for fungus sporulation, by placing mummified mites on Jack-bean leaves. There was no sporulation at any of the temperatures tested (13, 17, 21 and 25°C) at 80% and 85% RH. The fungus had low sporulation at 90% RH at all temperatures. The best conditions for the capilloconidia development were 95% and 100%RH at 21°C and 25°C. Mummified mites were placed to sporulate in Jack-bean plants inside screenhouses at different times of year and temperature and humidity were monitored. It was noted that above 13°C the fungus can produce a considerable number of primary conidia (> 130) even at 90%RH. However, only at 90%RH and 25°C the capilloconidia production is significant (> 389). It was determined the effect of exposure of two light intensities (2.960 Lux and 15.392 Lux), three photoperiods (24h of light, 12:12h(L:D) and 24h of darkness) and two temperatures (18°C and 23°C), on the production of primary conidia and capilloconidia of N. floridana isolates from Norway and Brazil. Fungus-killed cadavers by each of the isolates were exposed to different treatments in BOD. No differences were found between the two isolates in the two temperatures tested. The results for the 12:12h(L:D) were similar to those found for 24h of darkness. Light inhibition of capilloconidia formation was greater on Norwegian isolate. Low light intensity for 24h had a mild effect on sporulation of the two isolates, but strongly inhibited the formation of capilloconidia of the Norwegian isolate. Studies were carried out to evaluate the effect of pesticides used in production of strawberries in both countries on sporulation and capilloconidia production of N. floridana in the laboratory. The results showed that Tebuconazole and Fenpropatrin in the recommended concentration and Abamectin in half of the recommended concentration were the less aggressive to N. floridana. Attempts to scale production of this fungus were also made. Through experimental inoculations it was possible to induce epizootics of the fungus in T. urticae populations on Jack-beans, planted in pots in screenhouses. The most convenient way for inoculation of the fungus was to release four mummified mites per pot. Larger quantities of mummified mites by N. floridana were produced when climatic conditions were characterized by high RH and 20°C, during the winter production was inefficient. The use of light and fans at night during the end of the epizootic phase, was effective in inhibiting the sporulation of the fungus and ensure the quality of mummified mites for storage. Although it was possible to produce a large number of mummified mites, several studies are still needed to develop an economically viable methodology for large scale production for field use.

O Brasil é o maior produtor mundial de citros, com aproximadamente 455 milhões de caixas por ano. No país os principais problemas da cultura estão relacionados a fitopatologias e ataques de fitófagos, que diminuem a produtividade e afetam os preços do produto no mercado. Nesse contexto, o controle desses insetos se faz necessário para que sejam evitadas perdas econômicas e produtivas. Assim, as aranhas surgem como potenciais agentes de controle, devido à estratégia trófica que adotam, sendo completamente dependentes da predação, auxiliando na regulação de espécies-praga em cultivos comerciais. O presente trabalho teve como finalidade lançar mão da análise dos isótopos estáveis 13C e 15N, para determinar as principais fontes de carbono e nível trófico das principais famílias e grupos de aranhas presentes em cultivos de citros no município de Gavião Peixoto - SP. Foram coletados 4.832 indivíduos, distribuídos em 17 famílias, das quais 12 eram comuns às duas áreas estudadas; as famílias foram classificas em sete guildas funcionais. Através análise dos isótopos 13C e 15N foi possível determinar o percentual de carbono dos citros presente na alimentação das principais famílias e grupos amostrados, além do nível trófico médio. Os resultados indicaram que as famílias diferem na dependência de teias alimentares baseadas nos citros. Além disso, os dados coletados sugerem que a estrutura do ambiente, a arquitetura vegetal, o estado fenológico dos citros, as práticas de manejo e variações sazonais do clima, podem ter sido os principais fatores de variação na abundância das famílias e dependência do carbono dos citros por parte das aranhas. Salticidae e Theridiidae foram as principais famílias amostradas, por apresentarem maior abundância relativa e estarem presentes ao longo de todo o período de coletas. / Brazil is the world largest citrus producer, with about 455 million boxes per year. In the country the main problems faced by the planters are related to phytopathologies and phytophagous attacks that reduce productivity and can affect the prices of the product in the market. In this scenario, the control of phytophagous is necessary to avoid economic and productivity losses. Thus, spiders populations emerge as a potential control agent, due to the trophic strategy, completely dependent upon predation, therefore assisting in the regulation of pest species in the field. This study aimed to determine, through the analysis of 13C and 15N isotopes, the main sources of carbon and the trophic level of the most abundant families of spiders collected in two citrus orchards in the municipality of Gavião Peixoto - SP. 4832 spiders distributed among 17 families were collected, of which 12 were common to the two studied areas. The families were assembled into 7 functional guilds. By analyzing the isotopes 13C and 15N it was possible to measure the percentage of carbon coming from the citrus, present in tissues of the main spider families and groups sampled, plus the average trophic level. The results indicated that families differ in dependence on food webs based on citrus. Furthermore, the data allow to hypothesize that the structure of the environment, architecture of the vegetation, phenological state of the plants, management practices and seasonal variations of the weather, may have been the main factors of variation in the abundance of families and dependence on citrus food webs by the spiders. Salticidae and Theridiidae were the main sampled families, due to their larger relative abundance and presence throughout the sampling period.

O tomateiro (Solanum esculentum Dunal) é mundialmente a maior cultura em volume industrializado e a segunda maior em área plantada. Essa cultura apresenta graves problemas fitossanitários ao longo de todo o seu ciclo. Dentre as principais pragas do tomateiro encontra-se Tetranychus urticae Koch, considerado uma das espécies mais importantes de ácaros-praga em todo o mundo, devido ao seu grande número de hospedeiros e elevado potencial biótico, o que torna seu controle extremamente difícil, e desse modo, a busca de métodos alternativos de controle, incluindo o uso de inimigos naturais, é altamente desejável. Ácaros predadores são frequentemente considerados inimigos naturais efetivos de ácaros-praga. O gênero Phytoseiulus, da família Phytoseiidae são predadoras específicas de espécies de Tetranychus. Uma população de Phytoseiulus longipes encontrada em Uruguaiana e Phytoseiulus fragariae são espécies estudadas consideradas promissoras para o controle de T. urticae em tomateiros, já que conseguem desenvolver-se bem nessa cultura. P. macropilis também tem sido avaliado para o controle de T. urticae, contudo não há estudos que comprovem a eficiência de P. macropilis nessa cultura. O objetivo do presente trabalho é realizar uma avaliação inicial do potencial de uma população de P. macropilis no controle biológico de T. urticae em tomateiros, tomando para comparação a população de P. longipes de Uruguaiana. Foram realizados dois experimentos em laboratório em condições controladas; o primeiro para verificar os efeitos dos tricomas presentes em folhas de tomateiro sobre P. macropilis e o segundo para estudar a biologia e a tabela de vida de fertilidade de P. macropilis, quando alimentado com T. urticae em folhas de tomateiro. Em todos os estudos realizados P. macropilis mostrou resultados muito semelhantes aos de P. longipes, podendo ser considerado um eficiente predador de T. urticae em tomateiros e uma espécie promissora para programas de controle biológico dessa praga nessa cultura. / Tomato (Solanum esculentum Dunal) is the most important industrialized vegetable crop in the world and the second in terms of cultivated area. This crop presents serious phytosanitary problems during its entire cycle and, among the main pests of the tomato plants, Tetranychus uticae Koch is considered one of the most important phytophagous mite in the whole world, due to its great number of host plants and high biological potential. The control of this mite is extremely difficult, and thereby, the search of alternative methods of control, including the use of natural enemies, is highly desirable. Predatory mites are often considered effective natural enemies of phytophagous mites. The Phytoseiulus genus, Phytoseiidae family, are predators of specific mites species such as Tetranychus. A population of Phytoseiulus longipes found in Uruguaiana, and Phytoseiulus fragariae are both well-known species considered promising for the control of T. urticae in tomato, since both can develop well in this crop. P. macropilis has also been evaluated for the control of T. urticae, however, there arent studies that can prove the efficiency of this predatory mite in this crop. The objective of this work is to realize an initial evaluation of P. macropilis performance in the biological control of T. urticae in tomato crop, taking basis for comparision, a population of P. longipes from Uruguaiana. Two studies were done in laboratory, under controlled conditions: the first was done to verify the effects of the trichomes, present in tomato leaves, over P. macropilis performance. The second, to study the biology and the fertility life table of P. macropilis, when fed with T. urticae reared in tomato leaves. In all realized studies, P. macropilis showed similar results to P. longipes, thus, being considered an efficient T. urticae predator in tomato crop and a promising specie in the biological control programs for this pest in this crop.

A criação de inimigos naturais em laboratório pode resultar em mudanças genéticas e fenotípicas drásticas devido às alterações ocasionadas principalmente pela deriva genética, endogamia e seleção natural. Estas alterações podem afetar o fitness das populações e reduzir a capacidade adaptativa às condições naturais. Além disto, a criação de inimigos naturais em hospedeiros alternativos pode comprometer a eficiência em campo. Poucos estudos tiveram como objetivo estudar estratégias para minimizar estes efeitos em condições de laboratório. Quantificar a variação genética em características biológicas pode auxiliar a estimar a resposta adaptativa às condições de criação, além de fornecer informações importantes para o melhoramento de agentes de controle biológico. A hibridização intraespecífica, ou seja, o cruzamento entre populações divergentes também pode ser um método relevante e eficaz para aumentar a aptidão biológica de agentes de controle, uma vez que permite a introdução de variação genética externa capaz de recuperar o fitness de populações mantidas em laboratório por muito tempo. Desta forma, este trabalho teve como objetivo estudar as mudanças genéticas e fenotípicas associadas à criação de Trichogramma galloi nos hospedeiros natural e alternativo, bem como investigar a herdabilidade de caracteres fundamentais para o desempenho do parasitoide e identificar os efeitos da hibridização intraespecífica em populações já estabelecidas em laboratório. Os resultados mostraram que a longevidade, a porcentagem de emergência e o número de parasitoides por ovo do hospedeiro apresentaram um aumento entre gerações para a população mantida no hospedeiro natural, indicando haver sinais de adaptação às condições de criação. No entanto, para a população mantida no hospedeiro alternativo foi observada uma redução na fecundidade e porcentagem de emergência quando oferecido o hospedeiro natural para o parasitismo, indicando haver um custo adaptativo associado à utilização de um novo hospedeiro. Foi possível verificar a existência de variação genética significativa na fecundidade. Em média, 46% da variância fenotípica observada foi determinada pela variância genética aditiva, sendo os demais 54% devido à variância ambiental e componentes genéticos dominantes. Nos cruzamentos intraespecíficos não foram observados casos de heterose, no entanto, foi observada a recuperação do fitness em híbridos obtidos a partir da população que apresentava desempenho inferior. Como conclusões deste trabalho, (i) foi possível detectar sinais de adaptação às condições de laboratório na população mantida no hospedeiro natural e uma menor eficiência sobre a praga alvo ao longo das gerações na população mantida no hospedeiro alternativo; (ii) verificou-se variação genética significativa na fecundidade da população estudada e; (iii) a hibridização intraespecífica se mostrou eficaz para amenizar os efeitos da depressão por endogamia em uma das populações de T. galloi estudada. / The rearing of natural enemies in laboratory conditions can result in drastic genetic and phenotypic changes due to natural selection, inbreeding, and genetic drift. These changes may affect population fitness and reduce the adaptive potential in natural conditions. Moreover, rearing on alternative hosts may compromise field efficiency. Few studies have focused in strategies to minimize these effects in laboratory conditions. Quantify the genetic variation in biological traits can help estimate the adaptive response to rearing conditions in addition to provide important information for the improvement of biological control agents. Intraspecific hybridization, that is, the crossing between different populations may also be an important and effective method to increase fitness, since it introduces genetic variation able to recover the fitness of populations under laboratory for a long time. Thus, the aims of this work were to: study the genetic and phenotypic changes in laboratory populations of Trichogramma galloi on the natural and alternative host, investigate the heritability of fundamental traits to parasitoid success and identify the effects of intraspecific hybridization in populations already established in the laboratory. The results showed that longevity, emergence rate and the number of parasitoids per host egg increased between generations for the population maintained on the natural host, which corresponds to adaptation signs to the rearing conditions. However, the population reared on the alternative host had a reduction in fecundity and emergence rate when exposed to the natural host, indicating that there is a fitness cost associated with the utilization of a new host. It was possible to verify the existence of significant genetic variance in fecundity. On average, 46% of the observed phenotypic variance was determined by the additive genetic variance, with the remaining 54% due to environmental variance and dominant genetic components. In the intraspecific crosses there were no cases of heterosis, however, the recovery of fitness was observed in hybrids obtained from the population with lower performance. In summary, (i) it was possible to detect signs of adaptation to the rearing conditions in the population maintained on the natural host and a reduction in the efficiency on the target pest over the generations in the population reared on the alternative host; (ii) there was significant genetic variation in fecundity of the population studied and (iii) intraspecific hybridization proved to be effective to mitigate the effects of inbreeding depression in one of the populations of T. galloi studied.

A cana-de-açúcar é uma das mais importantes culturas para o Brasil e vem recebendo significativa atenção devido à crescente substituição de combustíveis fósseis por fontes renováveis e menos poluentes de energia como o etanol. Consequentemente, os aspectos biotecnológicos oriundos da interação de bactérias e cana-de-açúcar devem ser mais bem avaliados, além disso, estudos de interação planta-microrganismo desenvolvidos em países tropicais são ainda incipientes. As bactérias interagindo com as plantas de interesse agronômico podem acarretar os mais diversos benefícios, com ênfase na promoção do crescimento vegetal e da fitossanidade. Dentre essas bactérias, diversas linhagens de Pantoea agglomerans têm sido isoladas intimamente associadas a várias espécies vegetais. As bactérias pertencentes ao gênero Pseudomonas também têm sido exploradas biotecnologicamente, pois produzem uma vasta gama de antimicrobianos que podem ser utilizados no controle de pragas e fitopatógenos. A partir desses fatos, uma linhagem de P. agglomerans, 33.1, previamente isolada endofiticamente de Eucalyptus grandis e promotora de crescimento dessa cultura, foi avaliada quanto aos aspectos biotecnológicos durante associação com cana-de-açúcar. A linhagem 33.1 foi capaz de promover o crescimento de cana-de-açúcar e também induziu a produção de proteínas de resistência pelas plantas inoculadas. Dentre os mecanismos avaliados na promoção de crescimento vegetal, a linhagem apresentou alta produção de fitormônio e fosfatases. Foi também confirmado que a interação planta-bactéria afetou o metabolismo da linhagem 33.1. Um plasmidio integrativo, pNKGFP, foi desenvolvido e inserido na linhagem 33.1. A linhagem bacteriana marcada foi monitorada durante interação com cana-de-açúcar. Por microscopia de fluorescência, re-isolamento e PCR quantitativo (qPCR) foi confirmada a capacidade de colonização cruzada de cana-deaçúcar pela linhagem 33.1:pNKGFP, abrindo assim precedentes para utilização dessa linhagem em outras culturas. Posteriormente, a linhagem 33.1 foi geneticamente modificada para produção da proteína Cry. Por meio de bioensaios em dieta artificial e colmos de cana-de-açucar foi provado o parcial controle de Diatraea saccharalis, uma importante praga de cana-de-açúcar, pela linhagem endofítica expressando heterologamente o gene cry1a7c. Vários antibióticos e sideróforos produzidos pela bactéria P. fluorescens, linhagem Pf-5, foram avaliados quanto ao controle de Fusarium spp., incluindo isolados de F. verticillioides causadores de Pokkah boeng em cana-deaçúcar. Por mutações sitio-dirigido em genes envolvidos na biossíntese de antimicrobianos foi provado que os compostos 2,4-diacetil-floroglucinol e rizoxina são os principais responsáveis no controle Fusarium spp. Por HPLC e RT-qPCR foi também provado que ácido fusárico afeta a produção de antibióticos pela Pf-5. / Sugarcane is one of the most important Brazilian crops. Its importance is increasing due to the gradual substitution of fossil fuel for renewable and cleaner energy sources, such as ethanol Consequently, the biotechnological aspects that mediate sugarcane-bacterium interactions must be evaluated; studies from tropical countries are incipiente Bacterium-plant interactions can often improve the growth and fitness of associated plants. One of these beneficial bacteria, Pantoea agglomerans, has been isolated from many vegetal species. The Pseudomonas genus also has a record of biotechnological exploration due to its wide range of antibiotic production. These compounds can be used on pest and plant-pathogen control. For these reasons, P. agglomerans, strain 33.1, previously isolated from Eucalyptus grandis and a known eucalyptus growth-promoter, was evaluated about regarding the biotechnological aspects of sugarcane-bacterial association. 33.1 strain was able to promote sugarcane growth and also to induce the production of resistance proteins for inoculated plants. The plant-hormone and phosphatase production by 33.1 were associated with sugarcane growth-promotion bacterial mechanisms. An integrative plasmid, pNKGFP, was constructed and used to transform 33.1. The marked strain was monitored during sugarcane association. The sugarcane cross-colonization by 33.1:pNKGFP was confirmed by fluorescence microscopy, re-isolation and quantitative PCR (qPCR), suggesting that 33.1 should be used in association with other crops. 33.1 was genetically modified to produce the Cry protein. The partial biocontrol of Diatraea saccharalis, the sugarcane borer, by the endophytic strain expressing heterologously the cry1a7c gene, was confirmed in bioassays using artificial diet and sugarcane stalks. Several antibiotics and siderophores produced by P. fluorescens Pf-5 were tested against Fusarium spp.; including isolates of F. verticillioides responsible for the sugarcane Pokkah boeng disease. By deriving site-directed mutants of Pf-5, with single and multiple mutations, in the bio-synthetic gene clusters of the antifungal compounds, it was proved that 2,4-diacetyl-phoroglucinol and rhizoxin are the major compounds responsible for the Fusarium spp. suppression. The fusaric acid effects on Pf-5 antibiotic production was proved by HPLC and RT-qPCR.

O arroz (Oryza sativa L.) está entre as culturas mais importantes do mundo, tanto em valores de produção quanto em contribuição para a alimentação humana. A mancha parda, causada pelo fungo Bipolaris oryzae, destaca-se entre as principais doenças que afetam o arroz por reduzir a produtividade das lavouras e a qualidade dos grãos colhidos, colocando em risco a segurança alimentar de mais da metade da população mundial. O biocontrole de doenças como a mancha parda apresenta-se como uma alternativa mais sustentável em comparação ao controle químico que, por sua vez, apresenta elevados custos financeiro e ambiental. Os objetivos desse trabalho foram isolar micro-organismos antagonistas de solo com potencial de utilização no biocontrole da mancha parda, elucidar alguns dos mecanismos de ação ocorrentes no antagonismo entre os micro-organismos isolados e B. oryzae, avaliar os efeitos dos filtrados de cultivos dos micro-organismos isolados sobre o desenvolvimento do fitopatógeno e avaliar a eficácia dos micro-organismos isolados no controle da mancha parda em folhas de arroz. Dois micro-organismos antagonistas foram selecionados pela capacidade de produzirem metabólitos que inibem o crescimento de outros micro-organismos. Os antagonistas foram identificados como Paecilomyces lilacinus e Bacillus amyloliquefaciens ou B. methylotrophicus (o fragmento sequenciado de gDNA apresentou nível idêntico de similaridade para ambas as espécies), micro-organismos já utilizados na formulação de produtos biológicos para o controle de doenças de plantas. Bacillus spp. e P. lilacinus inibiram o crescimento micelial de B. oryzae em 52,5% e 37,3%, respectivamente, em ensaio de pareamento de culturas. Ambos os micro-organismos isolados foram capazes de inibir, também, o crescimento de outros importantes fitopatógenos como Magnaporthe oryzae, Sclerotinia sclerotiorum e Phytophthora infestans. Além dos metabólitos dissolvidos no meio de cultivo, foi verificada a produção de compostos orgânicos voláteis (COVs) pelos antagonistas. Bacillus spp. e P. lilacinus produziram COVs que reduziram o crescimento de B. oryzae em 19,3% e 20,6% respectivamente. Os filtrados de cultivo de Bacillus spp. e P. lilacinus apresentaram efeito fungistático sobre o desenvolvimento de B. oryzae. O filtrado da bactéria inibiu o crecimento, a esporulação e a germinação daquele patógeno em 74,7%, 94,2% e 100% respectivamente. O filtrado do fungo, por sua vez, foi capaz apenas de reduzir o crecimento micelial do patógeno (39,4%). Os metabólitos produzidos por Bacillus spp. demonstraram ser foto e termoestáveis; enquanto que os produzidos por P. lilacinus perderam sua atividade inibitória na presença de luz ultravioleta de comprimento longo. O biocontrole da mancha parda foi avaliado em segmentos de folhas de arroz tratadas, separadamente, com suspensão de células e esporos de Bacillus spp. e P. lilacinus respectivamente, e em seguida inoculadas com esporos de B. oryzae. Não houve redução da incidência e da severidade da doença através do tratamento de segmentos de folhas de arroz com suspensões de células e esporos dos antagonistas. No presente estudo, os micro-organismos antagonistas isolados de solo foram capazes de inibir in vitro o crescimento de B. oryzae e outros 3 fitopatógenos; porém, nas condições experimentais avaliadas, não foram eficazes no controle in vivo da mancha parda. / Rice (Oryza sativa L.) is one of the most important crops in the world in terms of total production and contribution to human diet. Brown spot of rice, caused by the fungus Bipolaris oryzae, is among the diseases that most affect this crop, reducing both yield and grain quality, and threatening food security for millions of people across the world. Biological control is considered a more sustainable approach to control plant diseases since pesticides application presents higher economical and environmental costs. The objectives of this study were: isolating antagonistic microorganisms from soil which show potential for use in the biocontrol of brown spot; elucidating some of the antagonistic mechanisms of the interaction among the plant pathogen and the isolated microorganisms; assessing the effect of cell-free culture filtrates from the antagonists on the development of B. oryzae; and evaluating the efficacy of the antagonistic microorganisms on the biocontrol of brown spot in rice leaves. Two microorganisms were selected because of the production of metabolites wich showed inhibitory effects on other microorganisms. The selected antagonists were identified as Bacillus amyloliquefaciens or B. methylotrophicus (gDNA sequenced fragments presented high similarity to both species), and Paecilomyces lilacinus, which are already used as commercial biocontrol products. Bacillus spp. and P. lilacinus inhibited mycelial growth of B. oryzae in 52.5 and 37.3%, respectively, in dual plate assays. Both microorganisms also inhibited mycelial growth of other important plant pathogens such as Magnaporthe oryzae, Phytophthora infestans and Sclerotinia sclerotiorum. Besides the production of metabolites dissoveld in the culture medium, the antagonism among B. oryzae and the isolated microorganisms also involves volatile organic compounds (VOCs). Bacillus spp. and P. lilacinus produced VOCs which reduced mycelial growth of that pathogen in 19.3 and 20.6% respectively. The cell-free culture filtrate from both antagonists showed fungistatic effetcs on the development of B. oryzae. The filtrate obtained from Bacillus spp. inhibited mycelial growth (74.7%), spore formation (94.2%) and germination (100%) of the plant pathogen. On the other hand, the antagonistic fungus filtrate was only effective on the reduction of the mycelial growth of B. oryzae (39.4%). While the metabolites produced by Bacillus spp. remained stable after heat and light treatments, the ones produced by P. lilacinus lost their inhibitory activity under near-ultraviolet light exposure. Brown spot biocontrol was assessed in detached rice 5-cm leaf segments treated, simultaneously, with a spore suspension of B. oryzae and cell suspension of Bacillus spp. or spore suspension of P. lilacinus. No reduction in disease incidence and severity was observed in leaves treated with the antagonists in comparison to control (water). In the present study, the antagonistic microorganisms isolated from soil inhibited in vitro the mycelial growth of B. oryzae and other three plant pathogens; however, they were not able to control brown spot in rice leaves in the experimental conditions used.

A região espaçadora ITS rDNA tem sido utilizada como uma importante ferramenta molecular para a identificação de fungos. Neste estudo a região ITS1 - 5.8S - ITS2 foi analisada em diferentes espécies do fungo entomopatogênico Metarhizium incluindo M. anisopliae, M. album e M. flavoviride com o objetivo de se construir primers específicos para a detecção e identificação do fungo no interior de larvas infectadas de Diatraea saccharalis. A amplificação desta região produziu um fragmento único de aproximadamente 540 pb para as linhagens E9, B/Vi e C, e de 600 pb para a linhagem 14 de M. anisopliae var. anisopliae; de 650 bp para M. album e 600 pb para M. flavoviride. Os produtos de PCR obtidos foram digeridos com diferentes enzimas de restrição Afa I, Alu I, Dde I, Hae III, Hpa II e Sau 3A I; e os perfis de PCR-RFLP mostraram nítidas diferenças entre as espécies analisadas. O sequenciamento da região ITS1 - 5.8S - ITS2 permitiu o desenho de primers específicos para as linhagens de M.a. var. anisopliae do Brasil e da Austrália. A amplificação não ocorreu em linhagens de M. álbum, M. flavoviride e Beauveria bassiana. Os DNAs extraídos de larvas infectadas pelas linhagens E9, B/Vi e C do Brasil e linhagem 14, da Austrália, foram testados utilizando-se os primers desenvolvidos. Em todos os experimentos o fungo M.a. var. anisopliae foi detectado 48 horas após a inoculação. A técnica molecular empregada neste estudo permite a rápida e segura detecção e identificação de M.a. var. anisopliae em bioensaios de laboratório e de campo, programas de manejo de pragas e estudos de epizootiologia. / The ITS rDNA have been used as an important molecular tool for fungi identification. In this study the ITS1 - 5.8S - ITS2 rDNA regions were analyzed in different species of the entomopathogenic fungus Metarhizium including M. anisopliae, M. album and M. flavoviride, in order to construct specific primers for their detection and identification within infected Diatraea saccharalis larvae. The amplification of this region yielded a unique fragment of approximately 540 bp for E9, B/Vi and C, and 600 bp for strain 14 of M. anisopliae var. anisopliae; of 650 bp for M. album and 600 bp for M. flavoviride. The PCR products were digested with the different restriction endonucleases Afa I, Alu I, Dde I, Hae III, Hpa II and Sau 3A I; and the PCR-RFLP profiles showed clear differences amongst the species. The sequencing of the ITS-5.8S rDNA regions allowed for the design of specific primers for M. anisopliae var. anisopliae. The amplification was not observed with M. album, M flavoviride and Beauveria bassiana strains. DNAs extracted from infected larvae by E9 and C strains from Brazil and the strain 14 from Australia in individual bioassays were tested using previously designed specific primers. In all experiments, the fungus was detected after 48 hours of post-inoculation. This molecular technique allows a fast and secure detection and identification of the entomopathogen in bioassays, in pest management programs and epizootiology.

O tomateiro, Solanum lycopersicum L., assume mundialmente grande importância econômica na cadeia produtiva de olerícolas, contribuindo para a geração de empregos e renda. Este cultivo esta susceptível à incidência de pragas e doenças durante todo o seu ciclo. Insetos e ácaros pragas causam danos em todas as regiões em que o tomateiro é cultivado, exigindo cuidados constantes e muitos tratos culturais para evitar perdas da produtividade da cultura. Dentre os ácaros fitófagos, Aculops lycopercisi (Massee) (Eriophyidae), microácaro do tomateiro, assume grande importância econômica na cultura. Embora o uso de produtos químicos seja o principal método de combate às pragas deste cultivo, outros métodos menos explorados podem apresentar potencial adequado. Existe hoje interesse em se viabilizar o controle biológico de A. lycopersici com o uso de ácaros predadores. Dentre estes, Euseius concordis (Chant) (Phytoseiidae) parece apresentar grande potencial. Diante disso, existe a necessidade de se estabelecer métodos piloto de criação em larga escala deste predador, tornando possível seu uso em campo. O objetivo deste trabalho foi avaliar a possibilidade de se estabelecer um método piloto de criação em larga escala deste predador com o uso de pólen polvilhado sobre plantas de Canavalia ensiformis L. em condições de laboratório, e de avaliar seu potencial de predação sobre A. lycopersici em tomateiro, em telados. Os resultados mostraram que a provisão de pólen de Typha domingensis (Pers.) sobre plantas de C. ensiformis permite a produção de grandes números de E. concordis em condições controladas. Mostraram também que este predador pode causar redução considerável da densidade de A. lycopersici quando liberado à quantidade de 60 a 120 predadores de maneira preventiva em tomateiros, com a provisão paralela de pólen de T. domingensis. Estudos complementares que visem ao uso prático desse processo devem envolver a liberação de 60 a 120 predadores por planta e avaliação do efeito durante todo o ciclo fenológico da cultura. / Worldwide, Solanum lycopersicum L. is one of the main horticultural crops, contributing to the generation of jobs and income. This crop is susceptible to the incidence of pests and diseases throughout its cycle. Insects and pest mites cause damage in all regions where the tomato is grown, requiring constant care and numerous cultural treatments to avoid losses of crop yield. Among the phytophagous mites, Aculops lycopercisi (Massee), the tomato russet mite, is of great economic importance to this crop. Although the use of chemicals is the main method of pest control on this crop, other alternative methods may have adequate potential. There is great interest now on the use of biological methods including the use of predatory mites for the control of A. lycopersici. Among these predators, Euseius concordis (Chant) (Phytoseiidae) seems to present great potential. Given this, there is a need to establish methods of pilot large scale production of this predator, making possible its use in the field. The objective of this work was to evaluate the possibility of establishing a pilot large scale production method of this predator with the use of pollen provisioned on plants of Canavalia ensiformis L. under laboratory conditions and to evaluate its predation potential on A. lycopersici on tomato plants, in a screen-house. The results showed that the provision of pollen of Typha domingensis (Pers.) on C. ensiformis plants allows the production of large numbers of E. concordis under controlled conditions. They also showed that this predator can cause a considerable reduction of the density of A. lycopersici when released at the quantity of 60 to 120 predators per tomato plant with the parallel supply of pollen of T. domingensis. Complementary studies envisioning the practical use of this process should involve the releasing 60 to 120 predators per plant and evaluating the effect during the whole phenological cycle of the crop.