Resumo: A brucelose bovina é uma zoonose de ampla distribuição, responsável por consideráveis perdas econômicas, além de se constituir em um sério problema de saúde pública. Este trabalho teve por objetivo avaliar a prova do Teste do Anel (TAL) para diagnóstico da Brucelose bovina em amostras de leite, visando o diagnóstico individual e de rebanho. Foram avaliadas 464 amostras individuais de leite de fêmeas bovinas em diferentes períodos de lactação e 54 amostras de leite dos latões constituídos por leite dos respectivos animais. Os resultados obtidos foram avaliados frente aos resultados sorológicos das provas do Antígeno Tamponado Acidificado (ATA) e Soroaglutinação Lenta em Tubos (SAL)/2-Mercaptoetanol (2-ME). Das 464 amostras individuais de leite analisadas frente ao TAL, 123 (26,50%) apresentaram resultados positivos. Dentre estas, 31 (25,20%) resultaram positivas ao ATA, 28 (22,76%) ao ATA/SAL/2-ME e 18 (14,63%) à SAL. Das 341 amostras negativas ao TAL pertenciam a animais sorologicamente positivos ao 2-ME, caracterizando 77,23% das reações falso-positivas e 1,2% de reações falso-negativas no TAL individual. Das 54 amostras de leite de latões analisadas pelo TAL, 16 (29,63%) resultaram positivas ao TAL. Entretanto, possuíam leite de animais sorologicamente positivos pelo 2-ME; 1 (1,85%) resultou positivo ao TAL, entretanto, todos os animais que o compunham resultaram negativos ao 2-ME, caracterizando falso-positivo; 3 (5,56%) latões foram classificados como TAL negativos, porém, possuíam leite de animais positivos ao 2-ME caracterizando falso-negativos. O TAL individual demonstrou elevado percentual de resultados falso-positivos, enquanto que o TAL em latões detectou 84,2% dos latões contaminados e 75% das propriedades infectadas, demonstrando ser uma ferramenta útil na vigilância epidemiológica da Brucelose bovina. / Abstract: Bovine brucellosis is a zoonosis of wide distribution, responsible of great economical loses, even being a serious public health problem. The subject of this work is was to evaluate the Ring Test (RT) for bovine brucellosis in milk samples, looking for an individual and a herd diagnostic test. Individual samples of milk from 464 bovine females were evaluated as well 54 samples of bulk's milk with milk production of respective animals. The results were evaluated comparatively to individual serological results to Rose Bengal (RBT), Tube Agglutination (TAT) and 2-Mercaptoethanol (2-ME) tests. From the 464 individual samples the individual RT, shows 123 (26,50%) positive results, in that 31 (25,20%) resulted positive for the RBT and 28 (22,76%) for RBT/TAT/2-ME and 18 (14,63%) TAT. From 341 negative samples to RT were from TAT/2-ME positive serological animals showing 77,23% of positive false reaction and 1,2% of negative false reaction for the individual RT. From 54 samples of bulk's milk 16 (29,63%) RT positive results have milk from positive serological animals for TAT/2-ME, 1 (1,85%) positive to RT, although, all of the animals were serologically negative to TAT/2-ME, characterizing false positive reaction and 3 (5,56%) bulk's were classified as negative to RT, although have milk from positive animals to TAT/2-ME characterizing false negative result. The individual RT showed high percentage of false positive results, while RT in the bulk presented low percentage of false positive reactions, detecting 84,2% of contaminated bulk's and 75% of infected properties, demonstrating to be a important tool for bovine brucellosis epidemiological vigilance. / Orientador: Jane Megid / Coorientador: José Paes de Almeida Nogueira Pinto / Mestre

Orientador : Carlos Alberto Hussni / Resumo: A maioria das claudicações na espécie bovina é originária de doenças podais com opções de tratamento limitadas e constituem-se em um dos mais importantes problemas que acomete a espécie. A escolha do medicamento deve estar baseada na sua sensibilidade bacteriana e características farmacocinéticas, devendo recair sobre substância de amplo espectro de ação, capaz de atingir elevadas concentrações nos diferentes tecidos envolvidos na infecção podal. A antibiose intravenosa regional (AIVR), consiste na administração de antimicrobiano hidrossolúvel, após a aplicação de torniquete na extremidade do membro. O objetivo deste trabalho foi comparar as concentrações e farmacocinética do cloridrato de tetraciclina cristalina, no plasma, líqüido sinovial e leite de vacas acometidas de dermatite digital papilomatosa, administrado em dose única, pela via intravenosa jugular ou pela via intravenosa regional. Foram utilizadas 12 vacas em lactação acometidas de dermatite digital papilomatosa. Posteriormente os animais foram divididos aleatoriamente em dois grupos de seis, onde o Grupo 1 recebeu dose única de 10 mg/kg de cloridrato de tetraciclina cristalina intravenosa jugular e o Grupo 2 recebeu 1000 mg de cloridrato de tetraciclina cristalina intravenosa regional. As amostras de sangue da veia jugular, líqüido sinovial do tarso e leite de todos os animais foram colhidas imediatamente antes... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo). / Abstract:The majority of lameness in cattle originates in the foot. Currently, there are only limited treatment options available and source of significant economic loss also. The antimicrobial therapy should be based in bacterial sensitivity and pharmacokinetics features. The antimicrobial agent should have a broad antibacterial spectrum and achieve high concentrations in all tissues infected, particularly bone and synovial fluid. Intravenous regional antibiosis consists in place a rubber tourniquet around distal limb during up to 60 minutes and injects a water-soluble antibiotic into a digital vein. This method has been used to improve podal disease treatment. The purpose of this study was compare single-dose concentrations of crystalline tetracycline chloridrate, injected intravenous (IV) and intravenous regional (IVR) in bovine plasma, synovial fluid and milk from dairy cattle. Twelve milk production dairy cattle were used with various stages of digital dermatitis. Cows were randomly assign two groups of six animals. Group 1 will inject a single-dose of 10 mg/Kg crystalline tetracycline chloridrate IV and Group 2 with 1000 mg of crystalline tetracycline chloridrate IVR. Blood, synovial fluid and milk samples were take from jugular vein, left tarsal joint and mammary gland respectively at 0 (control), 22 minutes, 45 minutes, 1 hour and 22 minutes, 2, 3, 4, 6, 8, 12, 24, 48, 72, 96 e 120 hours late injections. Tetracycline concentrations in samples were determined by high-performance liquid chromatography (HPLC). Mean values tetracyclines plasma concentration in Group 1 were higher than Group 2. Synovial fluid and milk tetracycline concentration showed opposite comportment. Group 2 tetracycline concentration in synovial fluid was higher than Minimal Inhibitory Concentration (MIC) during 24 hours for the most frequent bacterias, which cause claw disease. Mean milk antibiotic concentration in Group 2 indicated that would be necessary withdraw up to 96 hours. / Doutor

Orientador : Eunice Oba / Mestre

Orientador: João Carlos Pinheiro Ferreira / Banca: Jackson Barros do Amaral / Banca: Stélio Pacca Loureiro Luna / Resumo: Com o objetivo de avaliar os efeitos da eletroejaculação (EEJ) sobre o estresse, 20 touros Nelore foram divididos em grupo Controle (n=10), deslocado semanalmente por nove semanas até o curral para avaliação em grupo dos indicadores comportamentais de bem-estar durante cinco minutos. Posteriormente, os animais foram contidos no tronco para avaliação dos indicadores fisiológicos de bem-estar (freqüências respiratória e cardíaca e temperatura retal) e colheita de sangue, permanecendo sob contenção por cinco minutos, seguidos de nova avaliação dos indicadores fisiológicos e colheita de sangue para mensuração do cortisol e da progesterona plasmáticos. Depois da contenção os animais foram liberados em outro curral para avaliação individual dos indicadores comportamentais por cinco minutos. O grupo Estresse (n=10) foi submetido aos mesmos procedimentos, exceto que foi submetido semanalmente a aplicação de estímulos elétricos transretais pela EEJ durante os cinco minutos em que os animais permaneceram contidos. O grupo Controle foi submetido à EEJ somente na nona semana do experimento. Durante a observação dos períodos pré e pós-contenção, os animais do grupo Estresse apresentaram maior freqüência de abaixamento de cabeça. Este grupo apresentou também maiores freqüências respiratória e cardíaca e maiores concentrações plasmáticas de cortisol e de progesterona na segunda avaliação do período de contenção. A estimulação elétrica transretal alterou os indicadores comportamentais dos períodos pós e de contenção. As freqüências respiratória e cardíaca e as concentrações plasmáticas de cortisol e de progesterona foram maiores na segunda avaliação do período de contenção no grupo Estresse, o que classifica a técnica da eletroejaculação como um agente desencadeador de estresse em touros Nelore (Bos taurus indicus). / Abstract: The objective this work was to evaluate the stress effects to eletroejaculation (EEJ) in Nelore bulls. Twenty Nelore bulls were divided in two groups. The Control (n=10) was displaced weekly for nine weeks to a stable for evaluation behavior indicators for five minutes. The animals were restrained in a trunk for evaluation of physiological indicators (respiratory and heart rates, and rectal temperature) and blood sample collection for measurement of cortisol and progesterone plasmatic. After that they remained restrained for five minutes, followed by another evaluation of the physilogical variables. They were released in a stable for five minutes for individual evaluation of the behavior indicators. The Stress group (n=10) was submitted to the same protocol except that the animals were submitted to a five minute session of transrectal eletric stimulation by EEJ device while they remained restrained. The animals of the Control group were also submitted to EEJ the nineth week of the study. Both before and after of the restrain period the animals of the Stress group showed greater frequence of lower head than those from Control group. The animals of the Stress group also had higher respiratory and heart rates and cortisol and progesterone plasma concetrations in the second evaluation of the restrain period than those from the Cotrol group. Eletric stimulation modified the welfare behavior indicators both after and during the restrain period. The respiratory and heart rates and cortisol and progesterone plasmatic concentrations of the second evaluation of the restrain period were higher in the Stress group. In conclusion, EEJ for five minutes should be considered as a stress procedure in Nelore bulls (Bos taurus indicus). / Mestre

Orientador: Roberto Sartori Filho / Banca: Pietro Sampaio Baruselli / Banca: Guilherme de Paula Nogueira / Banca: João Carlos Pinheiro Ferreira / Banca: Nereu Carlos Prestes / Resumo: A função ovariana e as concentrações circulantes dos hormônios reprodutivos e metabólicos foram comparadas em vacas Bos taurus e Bos indicus sob as mesmas condições climáticas e nutricionais. Vacas secas das raças Nelore (n=12) e Holandês Preto e Branco (HPB; n=12) foram mantidas em baias individuais, recebendo dieta de manutenção de acordo com o NRC (2000). O ECC e o PC se mantiveram em 3,1±0,1 e 2,8±0,2 (escala de 1 a 5) e 508±17 e 575±20 kg, para Nelore e HPB, respectivamente. Após 21 dias de adaptação, o estro foi sincronizado e os animais monitorados diariamente durante um intervalo ovulatório, através de ultrassonografia ovariana, usando um transdutor linear de 7,5 MHz. Durante a primeira onda folicular, os exames ultrassonográficos foram realizados duas vezes ao dia. Amostras de sangue foram colhidas uma vez ao dia para dosagens hormonais. Os resultados foram analisados pelo procedimento Mixed do SAS (P<0,05) e apresentados como média dos quadrados mínimos ± EP. Foi observado que 80% das vacas Nelore e 60% das vacas HPB apresentaram três ondas de crescimento folicular durante o ciclo estral. Todas as demais apresentaram duas ondas. O comprimento médio do ciclo estral foi similar entre Nelore e HPB (23 dias; variando de 21 a 26). Foram observadas diferenças substanciais quanto ao número de folículos antrais entre Nelore e HPB. À emergência da onda, o número de folículos de 2 a 5 mm presentes nos ovários foi de 42,7±5,9 para Nelore (variando de 25 a 100) e 19,7±3,2 para HPB (variando de 5 a 40). O desvio folicular ocorreu, em média, 2,3 dias após a ovulação, independente de raça, quando o maior folículo atingiu 7,0±0,2 e 8,9±0,4 mm de diâmetro em Nelore e HPB, respectivamente. O diâmetro máximo do folículo ovulatório (15,7±0,3 vs 13,4±0,3 mm), assim como o volume... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Not available / Doutor

Orientador: José Luiz Moraes Vasconcelos, / Banca: Mario Binelli / Banca: Ricarda Maria dos Santos / Resumo: Objetivou-se com este estudo avaliar a utilização de dois dispositivos intravaginais de P4 (CIDR®, Zoetis) em vacas Holandesas em lactação sem CL e com P4 ≤1,0 ng/mL no início de um protocolo de sincronização da ovulação à base de E2/P4 para IATF (exp 1) ou TETF (exp 2) no sucesso da prenhez. Estes experimentos foram realizados em 9 fazendas, sendo 4 destinadas a IATF (n = 341) e 5, a TETF (n = 356). O protocolo utilizado nos experimentos foi: d-10 2mg IM BE (2,0mL de Estrogin, Farmavet, SP, Brasil) + CIDR (1,9g de P4, CIDR®, Zoetis, SP, Brasil); d-3 25mg IM Dinoprost Trometamina (5,0mL de Lutalyse®, Zoetis, SP, Brasil); d-2 remoção do CIDR + 1mg IM de Cipionato de Estradiol (0,5mL ECP®, Zoetis, SP, Brasil); d 0 IATF (exp1) ou d 7 TETF (exp 2). No d-10, os animais sem corpo lúteo à ultrassonografia (US) foram distribuídos aleatoriamente para receberem 1 CIDR (1CIDR) ou 2 CIDR (2CIDR). O diâmetro do folículo ovulatório [d0 (exp 1)] e presença de CL [d7 (exp 1 e 2)] foram avaliados por US. Amostras de sangue foram colhidas para dosagem de P4 nos dias -10, -3 e 7. Foram consideradas sincronizadas vacas com CL 7 dias após a IA (d7) ou com CL no momento da TE, consistente com a ovulação do folículo ovulatório; no exp 2, apenas vacas com CL (d7) que receberam embrião foram utilizadas. Diagnósticos de gestação foram realizados por US aos 32 e 60 d. Para avaliar as variáveis binomiais, foi utilizado o PROC GLIMMIX, e as contínuas, o PROC MIXED. Efeitos foram considerados significantes quando P ≤0,05 e tendência quando P >0,05 e P ≤0,10. Não houve efeito do tratamento na taxa de sincronização [1CIDR = 74,1% (329/451) vs. 2CIDR = 71,1% (298/423)]. A concentração de P4 no d-10 não diferiu entre os tratamentos (1CIDR = 0,59 ± 0,12 ng/mL vs. 2CIDR = 0,68 ± 0,12 ng/mL)... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The aim of this study was to evaluate the use of two progesterone (P4) intravaginal devices (CIDR ®, Zoetis) in lactating Holstein cows without CL with P4 ≤ 1.0 ng / mL at the start of a E2/P4 ovulation synchronization protocol for TAI (exp 1) or TET (exp 2) on pregnancy success. These experiments were conduced in 9 farms, 4 destined to TAI (n = 341) and 5 TET (n = 356). The protocol used in the experiments was: d-10 2 mg IM EB (2.0 mL Estrogin, Farmavet, SP, Brazil) + CIDR (1.9 g of P4, CIDR ®, Zoetis, SP, Brazil); d-3 25 mg dinoprost tromethamine IM (5.0 mL Lutalyse ®, Zoetis, SP, Brazil), d-2 CIDR removal + 1 mg estradiol cypionate IM (0.5 mL, ECP ®, Zoetis, SP, Brazil); TAI d0 (exp 1) or TET d7(exp 2). On d-10, animals without a corpus luteum detected by ultrasonography (US) were randomly divided into groups to receive 1 CIDR (1CIDR) or 2 CIDR (2CIDR). The ovulatory follicle diameter [d0 (exp 1)] and presence of CL [d7 (exp 1 and 2)] were evaluated by US. Blood samples were collected for P4 measurement on days -10, -3 and 7. Were considered synchronized cows when they had CL 7 days after AI (d7) or CL at the time of ET, consistent with ovulation of detected ovulatory follicle; In exp 2 only cows CL (d7) receiving embryo were used. Pregnancy diagnosis were performed using US on days 32 and 60. Was used to evaluate binomial variables PROC GLIMMIX and PROC MIXED for continuous. Effects were considered significant when P ≤ 0.05 and tendency when P> 0.05 and P ≤ 0.10. There was no effect of treatment on synchronization rate [1CIDR = 74.1% (329/451) vs. 2CIDR = 71.1% (298/423). P4 concentration on d-10 did not differ between treatments (1CIDR = 0.59 ± 0.12 ng/mL vs. 2CIDR = 0.68 ± 0.12 ng/mL). P4 concentration was higher for 2CIDR treatment (2.14 ± 0.31 ng / mL) compared to 1CIDR (1.71 ± 0.28 ng / mL) at d-3 (PGF moment)... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Ciro Moraes Barros / Banca: José Buratini Junior / Banca: Marcelo Fabio Nogueira / Banca: Guilherme de Paula Nogueira / Banca: José Roberto Sartori / Resumo: Objetivou-se com o presente trabalho, avaliar a expressão das isoformas do LHR nas células da granulosa de novilhas da raça Nelore (Bos taurus indicus), antes, durante e após o desvio folicular. Para caracterizar o momento do desvio folicular (Experimento 1, primeira etapa), novilhas Nelore (n=20) foram submetidas ao seguinte protocolo de sincronização da ovulação: no D-10 receberam um dispositivo intravaginal liberador de progesterona (1,0 g, DIB®,), associado a aplicação de benzoato de estradiol (BE, 2,5 mg, Estrogin®, via IM). O dispositivo intravaginal foi removido no D-3 e os animais receberam uma aplicação de PGF2a (d-cloprostenol, 500 mg, Prolise®, IM). Vinte e quatro horas mais tarde administrou-se 1,0 mg de BE (via IM) e a partir deste momento, o crescimento do folículo dominante foi acompanhado através de exame ultrasonográfico (US, Aloka SSD 900; transdutor de 7,5 a 9,0 MHz, Japan), realizado a cada 12 horas até 144 horas após a ovulação. Na segunda etapa deste experimento avaliou-se a expressão das isoformas do LHR (M1, M2, M3 e M4) nas células da granulosa de folículos obtidos antes, durante e após o momento esperado para ocorrência do desvio folicular. As mesmas novilhas utilizadas anteriormente foram submetidas ao protocolo de sincronização da ovulação descrito acima e separadas em 3 grupos (segunda etapa): Grupo 2 (G2, 2 dias após a ovulação, n=7), Grupo 2,5 (G2,5, 2,5 dias após a ovulação, n=7) e Grupo 3 (G3, 3 dias após a ovulação, n =7). Os animais foram abatidos 2,0, 2,5 e 3 dias após a ovulação para remoção dos ovários e as células da granulosa, coletadas dos folículos ovarianos, foram separadas para a extração do RNA total com Trizol. A expressão gênica das isoformas de LHR foi mensurada por RT-PCR semi-quantitativo. No experimento 2, um outro lote de novilhas Nelore (n=21) foi submetidos aos procedimentos,...(Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The main objective of the present work was to evaluate the expression of LHR isoforms in granulosa cells from Nelore heifers, before, during and after follicule deviation. To characterize the time of follicle deviation (Experiment 1, phase 1), Nellore heifers (n=20) were submitted to the following synchronization protocol: at Day -10 (D -10) they received an intravaginal progesterone releasing device (1.0 g, DIB®) and estradiol benzoate (BE, 2.5 mg, Estrogin®, i.m.). Intravaginal device was removed on D -3 and animals received PGF2a (d-cloprostenol, 500 mg, Prolise®, i.m.). Twenty four hours afterwards 1.0 mg de BE (i.m.) was administered and follicular growth of the dominant follicle was registered by ultrasonography (US, Aloka SSD 900; 7.5 to 9.0 MHz probe) performed every 12 h until 144 h after ovulation. In the second phase of this experiment expression of isoforms of LH receptors (M1, M2, M3 and M4) from granullosa cells obtained from follicles before, during and after the expected time of follicle deviation, were evaluated. The same heifers used on phase 1 were submitted to the protocol described above to synchronize ovulation, and randomly allocated in three groups (phase 2): Group 2 (G2, 2 days after ovulation, i.e., before the expect time of deviation, n=7), Group 2.5 (G2.5, 2.5 days after ovulation, i.e., during deviation, n=7) and Group 3 (G3, 3 days after ovulation, i.e., after deviation). The animals were slaughtered 2.0, 2.5, and 3 days after ovulation to remove the ovaries, and granullosa cells from ovarian follicles were separated for total RNA extraction with Trizol. Gene expression of LHR isoforms were determined by RT-PCR. In experiment 2, another group of Nellore heifers (n=21) was exposed to the same procedures described in the second phase of experiment 1, to increase the number of samples from granullosa cells that expressed LHR isoforms. In experiment 1 (phase 1),...(Complete abstract, click electronic access below) / Doutor

Orientador: Roberto de Oliveira Roça / Banca: José Paes de Almeida Nogueira Pinto / Banca: Luciano dos Santos Bersot / Resumo: O objetivo do presente trabalho foi avaliar a influência das estações climáticas, do sistema de verificação dos programas de autocontrole e da implementação do ponto crítico de controle 1B (PCC 1B, revisão da contaminação de carcaças para conteúdo gastrointestinal) sobre a contaminação microbiana na superfície das carcaças bovinas. Foi realizado um trabalho de monitoramento microbiano da contaminação de carcaças, por um período de dois anos, de janeiro de 2005 a dezembro de 2006, obtendo-se 2250 amostras, permitindo um amplo conhecimento da prevalência da Escherichia coli. As amostras foram obtidas pela técnica de esfregaço de superfície de carcaças, após 24h de resfriamento das mesmas, utilizando-se swab em uma área total de 400cm2, divididos em quatro pontos da carcaça de 100cm2 cada um. A análise laboratorial seguiu as recomendações técnicas da AOAC. As contagens médias de E. coli expressas em Log UFCx100/cm2 foram, respectivamente, 1,15 e 0,27 para 2005 e 2006, representando diferença estatística (P<0,0001) entre os dois períodos avaliados. As contagens de E. coli nas estações de chuva e seca foram, respectivamente, de 0,68 e 0,71, estes valores médios apresentaram P < 0,0096 e apesar da diferença, houve pouca variação, adotamos como princípio a significância a partir de 0,0001 e assim consideramos que não houve diferença significativa. A comparação entre os grupos em função da implantação do sistema de verificação dos programas de autocontrole em junho de 2005 apresentou resultados médios de 1,42 para o grupo antes da implantação do sistema e 0,45 para o grupo posterior a implantação do sistema (P < 0,0001). A comparação entre os grupos em função da implementação do sistema de monitoramento e ações corretivas do HACCP, especialmente o PCC 1B com início em fevereiro de 2006 apresentou diferenças, com valores médios da contagem microbiana de 1,02 para o grupo anterior... / Abstract: This study aims to evaluate the influence of seasonal climatic variations, of the self-monitoring control programs and of monitoring implemented under critical control point 1B (CCP - 1B) about superficial microbial contamination on beef carcasses. Microbial contamination monitoring was done during two years, from January 2005 to December 2006 collecting about 2250 samples, allowing considerable data, showing prevalence in count numbers of Escherichia coli. The samples were obtained by standard technique of swabbing the carcasses surfaces after a 24h refrigeration period; swabs were taken from 400cm2 each on four different 100cm2 sample areas. Lab analysis followed AOAC recommendations. The average count of E.coli expressed as Log UFCx100/cm2 were 1,15 for 2005 and 0,27 for 2006, which representing a (P<0,0001) statistical difference between the mentioned periods. The counts of E. coli through the rain and dry seasons were 0,68 and 0,71 on average showing P<0,0096 and despite this difference, had little variation. We adopted as significant in principle values larger than 0,0001, an so considered the difference not significant. Comparison between groups according to the implementation of self-monitoring control programs as of June 2005 showed averages of 1,42 for before implementation and 0,45 for the group after implementation of the control system (P<0001). The comparison between groups before and after implementation of hazard analysis and critical control points (HACCP) corrective actions and monitoring system starting on February 2006 showed differences on the average microbial count: 1,02 for the group before the implementation and 0,26 for the group after it (P<0,0001). Considering the analysis of the E. coli count on the surfaces of bovine carcasses, it can be said that it is not affected by the rain and dry seasons in regard of microbial contamination, use of self-monitoring control programs had a positive effect on the reduction of... / Mestre

Orientador: José Buratini Júnior / Banca: Mayra Elena Ortiz D'Avila Assumpção / Banca: Guilherme de Paula Nogueira / Resumo: Fatores de crescimento fibroblástico têm sido descritos como importantes reguladores locais do desenvolvimento folicular. Recentemente, foi relatada a expressão do FGF-8 e seus receptores, FGFR-3c e -4, em folículos antrais bovinos. O FGF-17 e o FGF-18 pertencem à subfamília do FGF-8 e ativam eficientemente o FGFR-3c e FGFR-4. Objetivando identificar outros FGFs capazes de ativar estes receptores, investigou-se (a) os padrões de expressão do FGF-17 e FGF-18 em folículos antrais bovinos; (b) a regulação da expressão do RNAm do FGF-17 pelo FSH e IGF-1 em células da granulosa; (c) a expressão do RNAm do FGF-17 em oócitos imaturos e maturados in vivo e in vitro, e (d) a expressão das proteínas FGF-17 e FGF-18 em folículos antrais bovinos. Amostras de células da teca e células da granulosa foram obtidas de ovários de vacas de abatedouro e o RNA total destas células foi extraído. As concentrações de estradiol (E2) e progesterona (P4) no fluido folicular foram mensuradas por Radioimunoensaio (RIA) e os folículos agrupados de acordo com a razão E2:P4 intrafoliculares (atrésicos; <0,01, transicionais; 1-0,01 e saudáveis; >1). "Pools" contendo 20 oócitos foram obtidos pela remoção das células do cumulus de complexos cumulus-oócito (CCOs) e o RNA total extraído. A expressão do FGF-17 e do FGF-18 foi investigada por RT-PCR em tempo real e normalizada pela expressão dos controles endógenos GAPDH, CYC-A ou Histona (H2a). Células da granulosa de folículos de 4 a 8 mm foram cultivadas em meio livre de soro fetal e tratadas com FSH (0; 0,1; 1; 10 ou 100 ng/mL) ou IGF-1 (0; 5; 10; 50; 100 ng/mL) para avaliar os efeitos dos tratamentos na expressão do RNAm do FGF-17. A presença das respectivas proteínas foi investigada por imunohistoquímica. Os dados foram analisados por ANOVA ou testes não-paramétricos quando a distribuição não foi normal.A expressão do RNAm... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Fibroblast growth factors have been described as important local regulators of follicle development. FGF-8 and its receptors, FGFR-3c and FGFR-4, have already been reported in bovine antral follicle. Aiming to identify other FGFs capable to activate this receptors, we assessed (a) the spatial and temporal patterns of FGF-17 and FGF-18 gene expression in bovine antral follicles; (b) FGF-17 mRNA regulation by FSH and IGF-1 in cultured granulosa cells ; (c) FGF-17 mRNA expression in immature oocytes and in vivo and in vitro matured oocytes; and (d) FGF-17 and FGF-18 protein expression in bovine antral follicles. Theca and granulosa cells samples were obtained from abattoir ovaries for total RNA extraction. Estradiol (E2) and progesterone (P4) concentrations were measured by RIA in the follicular fluid. Follicles were grouped according to health status based on the E2:P4 ratio (atretic: <0.01; transitional: 0.01-1; healthy: >1). Pools containing 20 oocytes were obtained by removing cumulus cells of cumulus-oocyte complexes (COCs) and total RNA was extracted. FGF-17 and FGF-18 mRNA expression was examined by semiquantitative real time RT-PCR using GAPDH, CYC-A or histone H2a as controls. Granulosa cells from follicles (4-8 mm) were cultured in serum-free medium supplemented with FSH (0, 0.1, 1, 10, 100 ng/mL) or IGF-1 (0, 5, 10, 50, 100 ng/mL) to assess effects of treatments on FGF-17 mRNA expression. The presence of FGF-17 and FGF-18 proteins was investigated by immunohistochemistry. Data were analized by ANOVA or non-parametric analysis when not normally distributed. FGF-17 mRNA expression was detected predominantly in granulosa cells but also in theca cells, and was higher in atretic follicles. FGF-17 mRNA was also detected in immature oocytes, was reduced in in vivo matured oocytes and absent in in vitro matured oocytes. FSH and IGF-1 inhibited FGF-17 mRNA expression in cultured granulosa... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:11Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2003Bitstream added on 2014-06-13T21:00:28Z : No. of bitstreams: 1 silvajunior_ff_me_botfmvz.pdf: 516758 bytes, checksum: 28bab79cc201d2b692c1fc20feffa500 (MD5) / A brucelose bovina é uma zoonose de ampla distribuição, responsável por consideráveis perdas econômicas, além de se constituir em um sério problema de saúde pública. Este trabalho teve por objetivo avaliar a prova do Teste do Anel (TAL) para diagnóstico da Brucelose bovina em amostras de leite, visando o diagnóstico individual e de rebanho. Foram avaliadas 464 amostras individuais de leite de fêmeas bovinas em diferentes períodos de lactação e 54 amostras de leite dos latões constituídos por leite dos respectivos animais. Os resultados obtidos foram avaliados frente aos resultados sorológicos das provas do Antígeno Tamponado Acidificado (ATA) e Soroaglutinação Lenta em Tubos (SAL)/2-Mercaptoetanol (2-ME). Das 464 amostras individuais de leite analisadas frente ao TAL, 123 (26,50%) apresentaram resultados positivos. Dentre estas, 31 (25,20%) resultaram positivas ao ATA, 28 (22,76%) ao ATA/SAL/2-ME e 18 (14,63%) à SAL. Das 341 amostras negativas ao TAL pertenciam a animais sorologicamente positivos ao 2-ME, caracterizando 77,23% das reações falso-positivas e 1,2% de reações falso-negativas no TAL individual. Das 54 amostras de leite de latões analisadas pelo TAL, 16 (29,63%) resultaram positivas ao TAL. Entretanto, possuíam leite de animais sorologicamente positivos pelo 2-ME; 1 (1,85%) resultou positivo ao TAL, entretanto, todos os animais que o compunham resultaram negativos ao 2-ME, caracterizando falso-positivo; 3 (5,56%) latões foram classificados como TAL negativos, porém, possuíam leite de animais positivos ao 2-ME caracterizando falso-negativos. O TAL individual demonstrou elevado percentual de resultados falso-positivos, enquanto que o TAL em latões detectou 84,2% dos latões contaminados e 75% das propriedades infectadas, demonstrando ser uma ferramenta útil na vigilância epidemiológica da Brucelose bovina. / Bovine brucellosis is a zoonosis of wide distribution, responsible of great economical loses, even being a serious public health problem. The subject of this work is was to evaluate the Ring Test (RT) for bovine brucellosis in milk samples, looking for an individual and a herd diagnostic test. Individual samples of milk from 464 bovine females were evaluated as well 54 samples of bulk's milk with milk production of respective animals. The results were evaluated comparatively to individual serological results to Rose Bengal (RBT), Tube Agglutination (TAT) and 2-Mercaptoethanol (2-ME) tests. From the 464 individual samples the individual RT, shows 123 (26,50%) positive results, in that 31 (25,20%) resulted positive for the RBT and 28 (22,76%) for RBT/TAT/2-ME and 18 (14,63%) TAT. From 341 negative samples to RT were from TAT/2-ME positive serological animals showing 77,23% of positive false reaction and 1,2% of negative false reaction for the individual RT. From 54 samples of bulk's milk 16 (29,63%) RT positive results have milk from positive serological animals for TAT/2-ME, 1 (1,85%) positive to RT, although, all of the animals were serologically negative to TAT/2-ME, characterizing false positive reaction and 3 (5,56%) bulk's were classified as negative to RT, although have milk from positive animals to TAT/2-ME characterizing false negative result. The individual RT showed high percentage of false positive results, while RT in the bulk presented low percentage of false positive reactions, detecting 84,2% of contaminated bulk's and 75% of infected properties, demonstrating to be a important tool for bovine brucellosis epidemiological vigilance.