Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:22Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-06-30Bitstream added on 2014-06-13T20:23:37Z : No. of bitstreams: 1 lira_nsc_dr_botfmvz.pdf: 663060 bytes, checksum: d4b4cdd2de08f6997de5ce9a145dd3d8 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O trabalho teve como objetivo estudar a patogenia da Brucella ovis, em carneiros infectados experimentalmente com a cepa REO 198, tendo por base a presença do agente por meio da Reação em Cadeia pela Polimerase (PCR) e das alterações anatomopatológicas. Foram utilizados 31 carneiros idades variando de 1-2 anos, desafiados via conjuntival e intraprepucial com uma suspensão contendo 2x109 UFC/mL de B. ovis. Os animais foram eutanasiados em duplas, com intervalos de 15 dias até os quatro meses pósinoculação e mensalmente a partir de então até os doze meses. Em cada necropsia, foram coletados linfonodos (parotídeos, pré-escapulares, faríngeos, mediastinais, mesentéricos, inguinais), glândulas parótidas e mandibulares, pulmões, fígados, baços, rins, epidídimos (cabeça, corpo e cauda), testículos, vesículas seminais, glândulas bulbouretrais, ampolas do ducto, próstata e bexiga. Todas as amostras de órgãos foram submetidas a PCR e avaliadas histopatologicamente. A presença do agente foi detectada em praticamente todos os tecidos em pelo menos um dos momentos avaliados com predominância no tecido reprodutor. De forma similar as alterações histopatológicas, que embora visualizadas em todos os órgãos predominaram nos órgãos do sistema reprodutor. Hipoplasia de órgãos linfóides e persistência do agente no sistema reprodutivo e urinário foram observadas. / The aim of this study was the identification of Brucella ovis REO 198 strain pathogenic effect in rams experimentally infected. The bacterial detection by PCR and anatomopathological alteration were verified. A total of 31 rams with 1-2 years old were challenged by intraconjuntival and intrapreputial inoculation using a B. ovis suspension of 2x109 CFU/mL. Each 15 days until 4 months after inoculation two of the rams were submitted to euthanasia. After this time and until 12 months after inoculation the euthanasia were taken monthly. In all necropsies were collected the lymph nodes (parotid, prescapulares, pharyngeal, mediastinal, mesenterics, inguinals), parotids glands, mandibular glands, longs, livers, spleens, kidneys, epididymes (head, body and tail), testicles, seminal vesicles, bulbourethral glands, ampulla ducts, prostates and bladders. All samples were tested by PCR and histopathological techniques. The bacteria was detected in most of all tissues in at least one of the evaluated times of inoculation with the predominance of detection in reproductive tissues. The histo pathological alterations were also observed in all tissues and in the same way showed predominance on reproductive ones. Hypoplasia of the lymphoid system and bacterial presence in reproductive and urinary systems were also observed.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:24:00Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2003Bitstream added on 2014-06-13T19:10:02Z : No. of bitstreams: 1 jardim_gc_me_botfmvzdg.pdf: 660863 bytes, checksum: 781806b45c64e16af76389c093cf2e18 (MD5) / O presente trabalho avaliou o desempenho das técnicas de ELISA indireto, de antígeno acidificado tamponado (AAT) e de 2-mercaptoetanol (2-ME) com soroaglutinação lenta (SAL), comparando-as com a de fixação de complemento (FC), para o diagnóstico sorológico da brucelose em bovinos adultos de diferentes condições sanitárias: r1- rebanho não vacinado; r2- rebanho vacinado com dose padrão da vacina produzida com a amostra 19 de Brucella abortus; r3- rebanho vacinado com dose reduzida da mesma vacina. A prova que apresentou sensibilidade e especificidade mais próximas às da FC, considerada como padrão nesse estudo, foi a de AAT com especificidade relativa (ER) = 95,5% em r1 e ER = 98,9% em r2, seguida da 2-ME com SAL com ER = 94% em r1 e ER = 94,7% em r2, seguida do ELISA com ER = 81% em r1 e ER = 16,8% em r2. Todas as técnicas alcançaram sensibilidade relativa igual a 100% em r1 e r2; nenhuma, incluindo a FC, apresentou especificidade adequada para o diagnóstico em r3. A vacinação de bovinos adultos influenciou no diagnóstico sorológico. O ELISA indireto não apresentou nenhuma vantagens sobre o AAT para uso como teste de triagem. Seu uso como técnica de diagnóstico confirmatório requer mais estudos. / This study evaluated the performance of the indirect ELISA, the rose bengal (RB) and the mercaptoethanol (ME) with standard aglutination test (SAT) techniques, comparing them to the complement fixation (CF), for the brucellosis serological diagnosis in adult bovines with different sanitary terms: h1- not vaccinated herd; h2- herd vaccinated with standard dose of the vaccine produced with the strain 19 of Brucella abortus; h3- herd vaccinated with reduced dose of the same vaccine. The test which presented closer sensitivity and specificity to the ones of the CF, considered as standard in this research, was the RB with relative specificity (SR) = 95,5% in h1 and SR = 98,9% in h2, followed by ME with SAT with SR = 94% in h1 and SR = 94,7% in h2, followed by ELISA with SR = 81% in h1 and SR = 16,8% in h2. All techniques reached relative sensitivity equal to 100% in h1 and h2; none, including the CF, presented suitable specificity for diagnosis in h3. Adult animals vaccination influenced the serological diagnosis. The indirect ELISA didn’t show any advantage on RB for use as screening test. Its use as a final diagnosis technique requires more study.

Orientador : Márcio Rubens Graf Kuchembuck / Resumo: O presente trabalho avaliou o desempenho das técnicas de ELISA indireto, de antígeno acidificado tamponado (AAT) e de 2-mercaptoetanol (2-ME) com soroaglutinação lenta (SAL), comparando-as com a de fixação de complemento (FC), para o diagnóstico sorológico da brucelose em bovinos adultos de diferentes condições sanitárias: r1- rebanho não vacinado; r2- rebanho vacinado com dose padrão da vacina produzida com a amostra 19 de Brucella abortus; r3- rebanho vacinado com dose reduzida da mesma vacina. A prova que apresentou sensibilidade e especificidade mais próximas às da FC, considerada como padrão nesse estudo, foi a de AAT com especificidade relativa (ER) = 95,5% em r1 e ER = 98,9% em r2, seguida da 2-ME com SAL com ER = 94% em r1 e ER = 94,7% em r2, seguida do ELISA com ER = 81% em r1 e ER = 16,8% em r2. Todas as técnicas alcançaram sensibilidade relativa igual a 100% em r1 e r2; nenhuma, incluindo a FC, apresentou especificidade adequada para o diagnóstico em r3. A vacinação de bovinos adultos influenciou no diagnóstico sorológico. O ELISA indireto não apresentou nenhuma vantagens sobre o AAT para uso como teste de triagem. Seu uso como técnica de diagnóstico confirmatório requer mais estudos. / Abstract: This study evaluated the performance of the indirect ELISA, the rose bengal (RB) and the mercaptoethanol (ME) with standard aglutination test (SAT) techniques, comparing them to the complement fixation (CF), for the brucellosis serological diagnosis in adult bovines with different sanitary terms: h1- not vaccinated herd; h2- herd vaccinated with standard dose of the vaccine produced with the strain 19 of Brucella abortus; h3- herd vaccinated with reduced dose of the same vaccine. The test which presented closer sensitivity and specificity to the ones of the CF, considered as standard in this research, was the RB with relative specificity (SR) = 95,5% in h1 and SR = 98,9% in h2, followed by ME with SAT with SR = 94% in h1 and SR = 94,7% in h2, followed by ELISA with SR = 81% in h1 and SR = 16,8% in h2. All techniques reached relative sensitivity equal to 100% in h1 and h2; none, including the CF, presented suitable specificity for diagnosis in h3. Adult animals vaccination influenced the serological diagnosis. The indirect ELISA didn't show any advantage on RB for use as screening test. Its use as a final diagnosis technique requires more study. / Mestre

Resumo: O trabalho teve como objetivo estudar a patogenia da Brucella ovis, em carneiros infectados experimentalmente com a cepa REO 198, tendo por base a presença do agente por meio da Reação em Cadeia pela Polimerase (PCR) e das alterações anatomopatológicas. Foram utilizados 31 carneiros idades variando de 1-2 anos, desafiados via conjuntival e intraprepucial com uma suspensão contendo 2x109 UFC/mL de B. ovis. Os animais foram eutanasiados em duplas, com intervalos de 15 dias até os quatro meses pósinoculação e mensalmente a partir de então até os doze meses. Em cada necropsia, foram coletados linfonodos (parotídeos, pré-escapulares, faríngeos, mediastinais, mesentéricos, inguinais), glândulas parótidas e mandibulares, pulmões, fígados, baços, rins, epidídimos (cabeça, corpo e cauda), testículos, vesículas seminais, glândulas bulbouretrais, ampolas do ducto, próstata e bexiga. Todas as amostras de órgãos foram submetidas a PCR e avaliadas histopatologicamente. A presença do agente foi detectada em praticamente todos os tecidos em pelo menos um dos momentos avaliados com predominância no tecido reprodutor. De forma similar as alterações histopatológicas, que embora visualizadas em todos os órgãos predominaram nos órgãos do sistema reprodutor. Hipoplasia de órgãos linfóides e persistência do agente no sistema reprodutivo e urinário foram observadas. / Abstract: The aim of this study was the identification of Brucella ovis REO 198 strain pathogenic effect in rams experimentally infected. The bacterial detection by PCR and anatomopathological alteration were verified. A total of 31 rams with 1-2 years old were challenged by intraconjuntival and intrapreputial inoculation using a B. ovis suspension of 2x109 CFU/mL. Each 15 days until 4 months after inoculation two of the rams were submitted to euthanasia. After this time and until 12 months after inoculation the euthanasia were taken monthly. In all necropsies were collected the lymph nodes (parotid, prescapulares, pharyngeal, mediastinal, mesenterics, inguinals), parotids glands, mandibular glands, longs, livers, spleens, kidneys, epididymes (head, body and tail), testicles, seminal vesicles, bulbourethral glands, ampulla ducts, prostates and bladders. All samples were tested by PCR and histopathological techniques. The bacteria was detected in most of all tissues in at least one of the evaluated times of inoculation with the predominance of detection in reproductive tissues. The histo pathological alterations were also observed in all tissues and in the same way showed predominance on reproductive ones. Hypoplasia of the lymphoid system and bacterial presence in reproductive and urinary systems were also observed. / Orientador: Jane Megid / Coorientador: Renée Laufer Amorim / Banca: Leucio Camara Alves / Banca: Frederico Celso Lyra Maia / Banca: Júlio Lopes Sequeira / Banca: Sony Dimas Bicudo / Doutor

A Brucelose é uma zoonose de ampla distribuição que causa grandes perdas econômicas nas criações animais, bem como risco à saúde pública. Em bovinos leiteiros, as principais manifestações como abortos e baixa produção de leite, contribuem para uma queda na produção de alimentos, além da possibilidade de transmissão através do leite contaminado. Tendo em vista que o método mais preciso de diagnóstico da brucelose é a identificação do agente etiológico, o isolamento bacteriológico assume grande importância. Os objetivos do presente trabalho foram: identificar rebanhos leiteiros com brucelose no estado do Rio Grande do Sul utilizando técnicas imunológicas preconizadas pelo Programa Nacional de Controle e Erradicação da Brucelose e Tuberculose e isolar Brucella sp. dos rebanhos positivos nestes testes. Foram analisadas 476 amostras de soro bovino através do Teste do Antígeno Acidificado Tamponado, sendo detectadas 137 amostras reagentes. Estas foram submetidas à Prova do 2-Mercaptoetanol, na qual foram confirmadas 117 amostras. Foram analisadas 205 amostras de leite através do Teste do Anel em Leite e do isolamento bacteriológico onde foram detectadas 48 positivas e obteve-se 15 isolados de Brucella sp. Os 15 isolados foram caracterizados e confirmados através da Reação em Cadeia da Polimerase, utilizando oligonucleotídeos específicos para o gênero Brucella (gene BCSP31 e IS6501/711). A brucelose ainda faz parte do contexto sanitário de muitas propriedades do Rio Grande do Sul. Além das perdas sanitárias e econômicas, destaca-se a importância do leite na transmissão desta enfermidade para o homem. / Brucellosis is a zoonosis of large distribution that cause great economic losses in the animal farms, as well as risk to the public health. In dairy cattles, the main clinical signs such as abortions and low milk yield, contribute for a reduction in the food production, besides the possibility of transmission through contaminated milk. The most precise method for diagnostic of brucellosis is the identification of the etiologic agent so the bacteriological isolation assumes great importance. The aim of the present work was to identify the positive animals using serologic tests recommended by the National Program of Control and Eradication of Brucellosis and Tuberculosis and to isolate Brucella sp. from dairy cattle of different regions the state of the Rio Grande do Sul. Four hundred and seventy six samples of bovine serum were also analyzed by the Buffered Antigen Plate Agglutination Test and 2-Mercaptoetanol Test, with 137 reacting samples. Two hundred and five milk samples from dairy cattle were submitted to the Milk Ring Test and 48 were positive. The 205 milk samples were also analyzed by through bacteriological isolation and Brucella sp. was isolated in 15 samples. These isolates were characterized and confirmed by through the Polymerase Chain Reaction, using specific primers for the genus Brucella (gene BCSP31 and IS6501/711). Brucellosis still is part of the sanitary context in many farms of our state. Besides the sanitary and economic losses, importance of milk in the transmission of this disease to humans must be emphasized.

A Brucelose é uma zoonose de ampla distribuição que causa grandes perdas econômicas nas criações animais, bem como risco à saúde pública. Em bovinos leiteiros, as principais manifestações como abortos e baixa produção de leite, contribuem para uma queda na produção de alimentos, além da possibilidade de transmissão através do leite contaminado. Tendo em vista que o método mais preciso de diagnóstico da brucelose é a identificação do agente etiológico, o isolamento bacteriológico assume grande importância. Os objetivos do presente trabalho foram: identificar rebanhos leiteiros com brucelose no estado do Rio Grande do Sul utilizando técnicas imunológicas preconizadas pelo Programa Nacional de Controle e Erradicação da Brucelose e Tuberculose e isolar Brucella sp. dos rebanhos positivos nestes testes. Foram analisadas 476 amostras de soro bovino através do Teste do Antígeno Acidificado Tamponado, sendo detectadas 137 amostras reagentes. Estas foram submetidas à Prova do 2-Mercaptoetanol, na qual foram confirmadas 117 amostras. Foram analisadas 205 amostras de leite através do Teste do Anel em Leite e do isolamento bacteriológico onde foram detectadas 48 positivas e obteve-se 15 isolados de Brucella sp. Os 15 isolados foram caracterizados e confirmados através da Reação em Cadeia da Polimerase, utilizando oligonucleotídeos específicos para o gênero Brucella (gene BCSP31 e IS6501/711). A brucelose ainda faz parte do contexto sanitário de muitas propriedades do Rio Grande do Sul. Além das perdas sanitárias e econômicas, destaca-se a importância do leite na transmissão desta enfermidade para o homem. / Brucellosis is a zoonosis of large distribution that cause great economic losses in the animal farms, as well as risk to the public health. In dairy cattles, the main clinical signs such as abortions and low milk yield, contribute for a reduction in the food production, besides the possibility of transmission through contaminated milk. The most precise method for diagnostic of brucellosis is the identification of the etiologic agent so the bacteriological isolation assumes great importance. The aim of the present work was to identify the positive animals using serologic tests recommended by the National Program of Control and Eradication of Brucellosis and Tuberculosis and to isolate Brucella sp. from dairy cattle of different regions the state of the Rio Grande do Sul. Four hundred and seventy six samples of bovine serum were also analyzed by the Buffered Antigen Plate Agglutination Test and 2-Mercaptoetanol Test, with 137 reacting samples. Two hundred and five milk samples from dairy cattle were submitted to the Milk Ring Test and 48 were positive. The 205 milk samples were also analyzed by through bacteriological isolation and Brucella sp. was isolated in 15 samples. These isolates were characterized and confirmed by through the Polymerase Chain Reaction, using specific primers for the genus Brucella (gene BCSP31 and IS6501/711). Brucellosis still is part of the sanitary context in many farms of our state. Besides the sanitary and economic losses, importance of milk in the transmission of this disease to humans must be emphasized.

Tendo em vista a importância da bubalinocultura como fonte de proteína para o Brasil e também do Programa Nacional de Controle e Erradicação da Brucelose e da Tuberculose para a evolução das cadeias produtoras de bovinos e bubalinos e, devido à escassez de estudos sobre o sorodiagnóstico da brucelose na espécie bubalina, procedimento no qual se apóia o processo de certificação de rebanhos livres e monitorados, o presente estudo objetivou comparar o desempenho de diferentes testes para o sorodiagnóstico da brucelose nessa espécie. Soros de 696 fêmeas bubalinas adultas foram submetidos aos testes qualitativos BPA, AATE, AAT e quantitativos: SRP, SLT, ELISAI, ELISAC, PF e ME e FC. Foi empregada, gold standard, a combinação de dois testes, FC e ME, considerando dois critérios: a) animais positivos para os reagentes na FC (título &ge; 20UI) e no ME (critério para fêmea vacinada) e como negativos os animais não reagentes na FC (título < 20UI) e no ME; b) animais positivos os reagentes na FC (título &ge; =20UI) e no ME (critério para fêmea não vacinada) e negativos os não reagentes na FC (título < 20UI) e no ME. Esta consideração foi necessária em função dos animais não apresentarem histórico de vacinação confiável o que interfere na determinação do ponto de corte a ser utilizado no teste ME de animais vacinados e não vacinados. Desta forma, numa primeira análise todos os animais foram avaliados no ME como vacinados e em outra como não vacinados. Com base nesses resultados, foi construída a curva ROC para todos os testes quantitativos (SRP, SLT, ELISAC, ELISAI e PF). Com os resultados dessa análise estabeleceu-se pontos de corte que otimizam os valores de sensibilidade e especificidade relativas para cada teste. Esses valores foram utilizados para o cálculo do índice de concordância Kappa para cada teste, incluindo os qualitativos. Concluiu-se que: a) os resultados dos estudos com os testes de ELISAC e PF em bovinos podem ser inferidos para bubalinos com razoável segurança; b) devem ser estabelecidos pontos de corte específicos para búfalos para o SLT, o SRP e o ELISAI; c) as melhores combinações de sensibilidade e especificidade relativas foram alcançadas pelo ELISAC, o PF, o BPA e o AAT; d) os melhores resultados de Kappa foram verificados para o ELISAC (kappa), PF, BPA, AATE e AAT; e) o BPA, AAT e AATE são os melhores testes para o sorodiagnóstico de triagem em bubalinos e o ELISAC e o PF são os mais promissores testes confirmatórios nessa espécie, já que ganhos adicionais de especificidade podem ser alcançados pelo aumento do ponto de corte. / Considering the importance of the buffalo as a protein source in Brazil and the National Program of Brucelosis and Tuberculosis Control and Eradication for the evolution of the bovine and bubaline sector, and also due to the few number of studies on serological diagnosis of brucelosis in this specie, procedure that supports the process of certification of brucelosis free herds, the present study aimed to compare different serological tests for brucelosis diagnosis on buffaloes. Serum samples from 696 adult bubaline females had been analyzed to BPA, AATE, AAT (qualitatives), SRP, SLT, ELISAI, ELISAC, PF and ME and FC (quantitatives). The combination of two tests, FC and ME was used as reference, considering two criteria: a) positive animals: reactors for the FC (titer &ge; 20UI) and ME (vaccinated females), negative animals: no reactors for the FC (titer < 20UI) and ME (vaccinated females); b) positive animals: reactors for the FC (titer &ge; 20UI) and ME (not vaccinated females), negative animals: no reactors for the FC (titer < 20UI) and ME (not vaccinated females). It was necessary because was not possible to garantee the true vaccination status of the animals. The first step was performing the ROC analysis for all the quantitative tests (SRP, SLT, ELISAC, ELISAI and PF), and so the relative sensitivity and specificity and the Kappa were calculated for each test. Conclusions: a) the cut offs of ELISAC and PF tests proposed for bovines can be used for bubalines with reasonable security; b) specific cut offs for buffaloes to be used in SLT, SRP and ELISAI must be established; c) the best relative sensitivity and specificity had been reached by the ELISAC, PF, BPA and AAT; d) the best results of the Kappa had been reached by ELISAC (kappa), PF, BPA, AATE and AAT; e) BPA, AAT and AATE are the best screening diagnosis test for bubalines and ELISAC and PF are the most promising confirmatory tests for this species.

Não disponível / Not available

Tendo em vista a importância da bubalinocultura como fonte de proteína para o Brasil e também do Programa Nacional de Controle e Erradicação da Brucelose e da Tuberculose para a evolução das cadeias produtoras de bovinos e bubalinos e, devido à escassez de estudos sobre o sorodiagnóstico da brucelose na espécie bubalina, procedimento no qual se apóia o processo de certificação de rebanhos livres e monitorados, o presente estudo objetivou comparar o desempenho de diferentes testes para o sorodiagnóstico da brucelose nessa espécie. Soros de 696 fêmeas bubalinas adultas foram submetidos aos testes qualitativos BPA, AATE, AAT e quantitativos: SRP, SLT, ELISAI, ELISAC, PF e ME e FC. Foi empregada, gold standard, a combinação de dois testes, FC e ME, considerando dois critérios: a) animais positivos para os reagentes na FC (título &ge; 20UI) e no ME (critério para fêmea vacinada) e como negativos os animais não reagentes na FC (título < 20UI) e no ME; b) animais positivos os reagentes na FC (título &ge; =20UI) e no ME (critério para fêmea não vacinada) e negativos os não reagentes na FC (título < 20UI) e no ME. Esta consideração foi necessária em função dos animais não apresentarem histórico de vacinação confiável o que interfere na determinação do ponto de corte a ser utilizado no teste ME de animais vacinados e não vacinados. Desta forma, numa primeira análise todos os animais foram avaliados no ME como vacinados e em outra como não vacinados. Com base nesses resultados, foi construída a curva ROC para todos os testes quantitativos (SRP, SLT, ELISAC, ELISAI e PF). Com os resultados dessa análise estabeleceu-se pontos de corte que otimizam os valores de sensibilidade e especificidade relativas para cada teste. Esses valores foram utilizados para o cálculo do índice de concordância Kappa para cada teste, incluindo os qualitativos. Concluiu-se que: a) os resultados dos estudos com os testes de ELISAC e PF em bovinos podem ser inferidos para bubalinos com razoável segurança; b) devem ser estabelecidos pontos de corte específicos para búfalos para o SLT, o SRP e o ELISAI; c) as melhores combinações de sensibilidade e especificidade relativas foram alcançadas pelo ELISAC, o PF, o BPA e o AAT; d) os melhores resultados de Kappa foram verificados para o ELISAC (kappa), PF, BPA, AATE e AAT; e) o BPA, AAT e AATE são os melhores testes para o sorodiagnóstico de triagem em bubalinos e o ELISAC e o PF são os mais promissores testes confirmatórios nessa espécie, já que ganhos adicionais de especificidade podem ser alcançados pelo aumento do ponto de corte. / Considering the importance of the buffalo as a protein source in Brazil and the National Program of Brucelosis and Tuberculosis Control and Eradication for the evolution of the bovine and bubaline sector, and also due to the few number of studies on serological diagnosis of brucelosis in this specie, procedure that supports the process of certification of brucelosis free herds, the present study aimed to compare different serological tests for brucelosis diagnosis on buffaloes. Serum samples from 696 adult bubaline females had been analyzed to BPA, AATE, AAT (qualitatives), SRP, SLT, ELISAI, ELISAC, PF and ME and FC (quantitatives). The combination of two tests, FC and ME was used as reference, considering two criteria: a) positive animals: reactors for the FC (titer &ge; 20UI) and ME (vaccinated females), negative animals: no reactors for the FC (titer < 20UI) and ME (vaccinated females); b) positive animals: reactors for the FC (titer &ge; 20UI) and ME (not vaccinated females), negative animals: no reactors for the FC (titer < 20UI) and ME (not vaccinated females). It was necessary because was not possible to garantee the true vaccination status of the animals. The first step was performing the ROC analysis for all the quantitative tests (SRP, SLT, ELISAC, ELISAI and PF), and so the relative sensitivity and specificity and the Kappa were calculated for each test. Conclusions: a) the cut offs of ELISAC and PF tests proposed for bovines can be used for bubalines with reasonable security; b) specific cut offs for buffaloes to be used in SLT, SRP and ELISAI must be established; c) the best relative sensitivity and specificity had been reached by the ELISAC, PF, BPA and AAT; d) the best results of the Kappa had been reached by ELISAC (kappa), PF, BPA, AATE and AAT; e) BPA, AAT and AATE are the best screening diagnosis test for bubalines and ELISAC and PF are the most promising confirmatory tests for this species.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Ciência dos Alimentos, Florianópolis, 2013. / Made available in DSpace on 2014-08-06T17:13:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 325496.pdf: 993154 bytes, checksum: d9dddc1b5ec4f0dd931b5ff6feb2a78a (MD5) Previous issue date: 2013 / As doenças veiculadas pelo alimento constituem um grande problema de saúde pública, especialmente para os países pobres em decorrência dos altos custos econômicos e sociais que ocasionam. A contaminação do alimento pode se dar em qualquer etapa da produção, transporte, armazenamento ou comércio, sendo muitas vezes impossível determinar em qual etapa ocorreu a contaminação. Algumas zoonoses podem ser transmitidas ao homem através da ingestão de produtos de origem animal, fonte indispensável de proteína. Brucelose é uma enfermidade infecto contagiosa de caráter zoonótico, causada por bactérias do gênero Brucella que está amplamente distribuída em diversos países do mundo. No Brasil a doença apresenta-se de forma endêmica no rebanho bovino, causando prejuízos econômicos e representando um risco para a saúde publica. Santa Catarina tem a menor prevalência de brucelose bovina do país e busca a erradicação para tornar o Estado livre da doença. A enfermidade pode ser veiculada ao homem através da ingestão carne, leite e derivados que não passaram por processamento térmico, além do contato direto com animais doentes. Apesar do isolamento do agente ser considerado uma prova clássica possui baixa sensibilidade, é um processo trabalhoso, demorado e de alto risco biológico. O método analítico molecular de Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) em Tempo Real pode tornar-se uma ferramenta de grande valia, a fim de garantir um diagnóstico seguro, rápido e preciso para ser usado em amostras de alimentos. O objetivo desse trabalho foi averiguar a qualidade dos produtos lácteos em relação à presença da B.abortus utilizando a PCR em tempo real. Para tal, foram coletadas 100 amostras de derivados lácteos e 6 amostras de leite cru, produzidos exclusivamente em Santa Catarina, no período de abril a setembro de 2012. As análises revelaram a presença de material genético de B.abortus em 2 amostras de queijo e nas 6 amostras leite. A técnica mostrou-se sensível e específica e associada à rastreabilidade, possibilitou o monitoramento da cadeia produtiva e avaliação da qualidade do leite e derivados.<br> / Abstract : Foodborne diseases are a major public health problem, especially for poor countries due to the high economic and social costs caused by them. Food contamination can occur at any stage of production, transportation, storage, or trade. It is often impossible to determine where the contamination occurred. Some zoonoses may be transmitted to humans through the ingestion of animal products, which are indispensable sources of protein. Brucellosis is a zoonotic disease caused by bacteria of the genus Brucella which are widely distributed in many countries. In Brazil, the disease is endemic in cattle, causing economic losses and representing a risk to public health. Santa Catarina has the lowest prevalence of bovine brucellosis in the country and seeks the eradication in order to become the disease-free State. The disease can be conveyed to people through the ingestion of meat, milk and dairy products that have not undergone thermal processing, as well as the direct contact with sick animals. Despite the isolation of the agent being considered a classic test, it has low sensitivity. In addition, it is a laborious and time consuming process, which evolves high biohazardous. The molecular analytical method of Real-Time Polymerase Chain Reaction (PCR) may become a tool of great value in order to ensure an accurate, quick, and precise diagnosis to be used in food samples. The aim of this study was to verify the quality of milk and dairy products regarding the presence of B.abortus using real-time PCR. In order to do that, 106 samples of milk and dairy products produced exclusively in Santa Catarina were collected. The collection was performed in the market and industry during the period of April to September 2012. Analysis revealed the presence of genetic material from B.abortus in two samples of cheese and six of raw milk. The technique showed itself sensitive and specific. Furthermore, in association with traceability, it enabled the monitoring of the entire production chain and quality evaluation of milk and dairy products. The integration among the services of supervision, inspection, research, and animal defense are essential to monitor and ensure the quality of animal products.