Made available in DSpace on 2016-07-01T13:10:27Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-08-13. Added 1 bitstream(s) on 2016-07-01T13:13:45Z : No. of bitstreams: 1 000866002.pdf: 1774918 bytes, checksum: 7a85fafd4477aa0f0f75ad8c323e976f (MD5) / Os tumores mamários constituem a neoplasia mais comum das cadelas, sendo que mais da metade são consideradas malignas e com muitos animais apresentando morte associada à doença. Estes tumores geralmente são tratados cirurgicamente por meio de mastectomia, porém os resultados frequentemente não são satisfatórios. Visto que novas abordagens terapêuticas são necessárias nos tumores mamários caninos, especialmente no que diz respeito ao tratamento adjuvante e à terapia alvo, o conhecimento acerca de possíveis componentes relacionados com a resistência à fármacos e que funcionem como possíveis alvos moleculares para a terapia deve ser garantido. Em vista disso, o objetivo da pesquisa descrita nesta tese foi caracterizar o papel da família de receptores do fator de crescimento epidermal (EGFR) e da superfamília de transportadores ligadores de ATP (ABC) nos tumores mamários caninos como biomarcadores do câncer e sua relação com o desfecho da doença para caracterizar sua patobiologia. Neste estudo, os receptores tirosina cinase EGFR/HER1, HER2, HER3 e HER4, assim como as proteínas da família ABC glicoproteína-P/MDR1, MRP1 e MRP2 foram avaliadas por meio de imunoistoquímica, sendo os resultados relacionados com características clinicopatológicas em 43 tumores. A expressão simultânea de todos os membros da família e a coexpressão de EGFR/HER1, HER2 e HER4 se mostraram associadas com um desfecho desfavorável para a doença. A expressão de glicoproteína-P e MRP1 se apresentaram relacionadas com características clinicopatológicas nos tumores estudados, ao passo que a expressão de MRP1 foi caracterizada como um indicador prognóstico independente nestes tumores. Em síntese, esta tese fornece novas informações acerca da expressão da família EGFR nos tumores mamários caninos e associa os transportadores ABC com um desfecho desfavorável para a doença, consequentemente sugerindo que eles também podem estar... / Mammary tumors comprise the most common neoplasms in female dogs with more than half with malignat characteristics. Such tumors are usually treated using surgical mastecty, but results are frequently not satisfying. Since new therapeutical approaches are needed in canine mammary tumors, especially regarding adjuvant therapy and targeted therapy, an understanding regarding possible cellular components related to drug resistance and that work as possible targets for therapy is straightforward to achieve. Accordingly, the aim of the research described in this thesis was to study the possible role of epidermal growth factor receptor family (EGFR) and ATP-binding cassete (ABC) superfamily members in canine mammary tumors as cancer biomarkers and its relation with disease outcome in order to better characterize their pathobiology looking forward the future improve in canine mammary cancer treatment. In this study, tyrosine kinase receptors EGFR/HER1, HER2, HER3, and HER4, as well ABC transporters P-glycoprotein/MDR1, MRP1, and MRP2 were immunohistochemically evaluated and results were related with clinicopathologic characteristics and overall survival in 43 tumors. Expression of all family members and simultaneous expression of EGFR/HER1, HER2, and HER4 were related with a poor disease outcome. P-glycoprotein and MRP1 expression showed to be related with clinicopathologic features and MRP1 was characterized as a independent prognostic indicator in such tumors. In summary, this thesis provides new information about EGFR family expression in canine mammary tumors and associates ABC transporters with a poor disease outcome, consequently suggesting that they may also be related to prognosis in patients with mammary cancer

Orientador: Carlos Roberto Daleck / Banca: Andrigo Barboza De Nardi / Banca: João Corrêa da Costa Neto / Resumo: A glândula mamária é o sítio neoplásico primário mais frequente em cadelas. A apresentação clássica da doença é caracterizada por pacientes idosas não castradas ou castradas tardiamente e com múltiplas nodulações. O diagnóstico definitivo das lesões é dado pelo exame histopatológico. Nos dias atuais, especialmente em oncologia veterinária, a determinação precoce de um estado neoplásico pode alterar o curso da doença. Nesse âmbito, a citologia com agulha fina possui grande valia, pois permite a diferenciação entre processos inflamatórios, formações neoplásicas benignas e malignas de forma rápida, precisa e segura. Entretanto, a aplicação nos tumores mamários, em medicina veterinária, possui inúmeras controvérsias, em virtude da diversidade histológica. O presente estudo teve como objetivo comparar os exames citológicos e histopatológicos em cadelas e, assim, avaliar a acurácia da citologia por capilaridade com agulha de insulina nas lesões neoplásicas de mama. Para tanto, estudou-se 69 lesões mamárias obtidas de pacientes atendidas no Setor de Oncologia Veterinária da Unesp, Câmpus de Jaboticabal, e no Instituto Veterinário Dr. Daleck. A punção por capilaridade foi realizada em quatro áreas diferentes do tumor com agulhas de insulina. Os esfregaços citológicos foram corados com May Grünwald Giemsa. Já os fragmentos tumorais colhidos para o exame histopatológico foram fixados imediatamente em formol tamponado a 10% durante 48 horas e, após o processamento, foram corados com hematoxilina - eosina e classificados segundo Cassali et al., 2011. Os resultados obtidos revelaram 83,9% de sensibilidade, 100% de especificidade, 100% de valor preditivo positivo (VPP), 9,1 % de valor preditivo negativo (VPN) e 84,1% de acurácia da técnica citológica em detectar neoplasias mamárias malignas. A citologia por... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The mammary gland is the most common primary neoplasm site in female dogs. The classic presentation of the disease is characterized by elderly patients not spayed or later neutered with multiple nodules. Definitive diagnosis of lesions is given by histopathological examination. Nowadays, especially in veterinary oncology, the early detection of a neoplastic state can alter the course of disease. In this context, fine-needle cytology has great value because it allows differentiation between inflammatory processes, benign and malignant neoplastic formations quickly, accurately and safely. However, the application mammary tumors in veterinary medicine has several controversies, due to the diverse histology. The present study aimed to compare the cytological and histological bitches and thus evaluate the accuracy of cytology by capillarity with insulin needle in neoplastic lesions of the mammary glands. Therefore, we studied 69 breast lesions obtained from patients treated at the Service of Oncology Veterinary, Unesp Jaboticabal, and Veterinary Institute Dr. Daleck. The capillary puncture was performed in four different areas of the tumor with insulin needles. The cytology smears were stained with May Grünwald Giemsa. Already tumor fragments harvested for histologic examination were fixed immediately in 10% buffered formalin for 48 hours and, after processing, were stained with hematoxylin - eosin and classified according Cassali et al., 2011. The results showed 83.9% sensitivity, 100% specificity, 100% positive predictive value (PPV), 9.1% negative predictive value (NPV) of 84.1% and accuracy of cytological technique to detect cancers malignant breast. Cytology by capillarity with insulin needle, in this test, proved to be a superior technique to aspiration for diagnosis of malignant mammary gland tumors in female dogs because it allowed... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Áureo Evangelista Santana / Banca: Márcia Ferreira da Rosa Sobreira / Banca: Júlio Lopes Siqueira / Resumo: O linfoma é uma doença linfoproliferativa caracterizada pela multiplicação clonal de linfócitos malignos no seio dos órgãos linfóides, afetando principalmente os linfonodos, ou outros órgãos viscerais sólidos, com prognóstico dependente de vários fatores, incluindo invasão tecidual. Enzimas proteolíticas MMP-2 e MMP-9 estão sendo estudadas quanto à importância neste processo de progressão tumoral por propiciarem a penetração e infiltração celular. Considerando a importância atual destas enzimas e o papel ainda não fundamentado nas neoplasias hematopoiéticas, avaliou-se a expressão de MMP-2 e MMP-9 em cães acometidos por linfoma multicêntrico e cães hígidos, através de técnica imuno-histoquimica de linfonodo e eletroforese zimográfica de linfonodo e soro, estabelecendo a relação entre a expressão destas enzimas e os fatores prognósticos como estadiamento, imunofenotipo e grau histopatológico da neoplasia e resposta ao tratamento. Observou-se maior expressão tecidual de MMP-9 nos animais com linfoma, através de técnica imuno-histoquimica, sem correlação exata com prognóstico. Eletroforese zimográfica do linfonodo demonstrou correlação da MMP-9 com imunofenótipo T e animais em doença progressiva, inferindo possível prognóstico negativo quanto à sobrevida. Valores de MMP-2 não apresentaram relação clara com o processo tumoral, assim como os valores séricos das duas enzimas. Desta forma, a MMP-9 demonstrou participação no processo neoplásico, porém sem determinação prognóstica exata / Abstract: Lymphoma is a lymphoproliferative disease characterized by clonal proliferation of malignant lymphocytes within lymphoid organs, mainly affecting the lymph nodes, or other solid visceral organs, with prognosis depends on several factors, including tissue invasion. Proteolytic enzymes MMP-2 and MMP-9 have been studied as to the importance of tumor progression in this process by propitiate the penetration and cellular infiltration. Considering the current importance of these enzymes and the role not grounded in hematopoietic malignancies, we evaluated the expression of MMP-2 and MMP-9 in dogs affected by multicentric lymphoma and healthy dogs by immunohistochemistry technique of lymph node and zymography electrophoresis of lymph node and serum, establishing the relationship between the expression of these enzymes and prognostic factors such as tumor staging, immunophenotyping, histological grade and response to treatment. We observed increased expression of MMP-9 tissue in animals with lymphoma by immunohistochemistry technique, no exact correlation with prognosis. Zymography electrophoresis of lymph node demonstrated correlation of MMP-9 with T-cell phenotype and progressive disease, inferring possible negative prognosis regarding survival. Values of MMP-2 showed no clear relation with the tumoral process as well as serum levels of the two enzymes. Thus, MMP-9 demonstrated involvement in the neoplastic process, but without accurate prognostic determination / Mestre

Orientador: João Pessoa Araújo Júnior / Banca: Marcos Bryan Heinemann / Banca: Clarice Weis Arns / Banca: Maria Terezinha Serrão Peraçoli / Banca: José Paes de Oliveira Filho / Resumo: Devido às diversas formas de apresentação clínica e aos sinais clínicos comuns com outras afecções, o diagnóstico laboratorial do CDV (Canine distemper virus) se torna necessário. A RT-PCR seguida da NESTED com amostras de urina é atualmente a técnica mais recomendada para o diagnóstico do CDV. No Capítulo 2, foi desenvolvida a técnica de One-Step-RT-qPCR utilizando o sistema de detecção Syber Green I. Foram testados e comparados três kits comerciais (Sigma®, Promega® e Qiagen®). Foi determinada a sensibilidade analítica de dois sistemas de detecção (Sistema A e Sistema B) utilizando uma curva padrão de RNA sintético. Os três kits comerciais testados detectaram o vírus em 100% das urinas provenientes de animais sintomáticos e o kit da Qiagen® mostrou melhores resultados de reação. O Sistema A detectou aproximadamente 10 cópias de RNA por microlitro e no Sistema B detectou 100 cópias de RNA por microlitro na RT-qPCR e 10 cópias por microlitro quando seguida da NESTED-qPCR. No Capítulo 3 foram desenvolvidos três imunoconjugados de microesferas de poliestireno (MP) utilizando anticorpos policlonais hiperimunes anti-CDV (IgY, IgG e Proteína A+IgG) para o preparo de RNA e aplicação na RT-qPCR. A aplicação dos conjugados foi comparada ao método convencional de extração de RNA por kit comercial. Os conjugados foram padronizados e a sensibilidade analítica foi determinada através de curva padrão de RNA sintético. A sensibilidade diagnóstica foi determinada utilizando-se conjugado com IgY, MP sem anticorpos conjugados e urina adsorvida diretamente nos tubos de qPCR / Abstract: The diagnosis of canine distemper is usually based on clinical suspicion of the disease. However, due to the different clinical forms of the disease and other disorders common to clinical signs, the laboratory diagnosis is necessary. The RT-PCR followed by NESTED is currently the method used to diagnosis of CDV (Canine Distemper Virus). The Chapter 2 aimed to standardized the technique of One-Step RT-qPCR-using Syber Green I system. Three commercial kits (Sigma®, Promega® and Qiagen®) were tested and compared. Analytical sensitivity of two detection systems (System A and System B) was determined using a standard curve. The three commercial kits tested detected the virus in 100% of samples from symptomatic dogs and the kit of Qiagen® showed better results. The System A detected approximately 10 RNA copies/μL and System B detected approximately 100 RNA copies/ μL in RT-qPCR and 10 RNA copies/ μL when followed by NESTED-qPCR. In Chapter 3 three immunoconjugates were developed with polystyrene microspheres (PM) using polyclonal hyperimmune anti-CDV antibody (IgY, IgG and protein A+IgG) to prepare RNA to canine distemper molecular diagnosis and comparison with the conventional method of RNA extraction by commercial kit. Conjugates were standardized and the analytical sensitivity was determined by standard curve. The diagnostic sensitivity was determined using IgY-conjugated, PM without conjugated antibodies and urine adsorption directly qPCR in tubes / Doutor

Orientador: Rosemeri de Oliveira Vasconcelos / Coorientador: Mirela Tinucci Costa / Banca: Hélio Jose Montassier / Banca: Felipe Augusto Ruiz Sueiro / Resumo: O microambiente do tecido mamário é regido desde o seu desenvolvimento embrionário por uma complexa rede de citocinas, como o TNF-, o IFN-, a IL-4 e a IL-10, e de componentes celulares. O desequilíbrio entre a resposta destas citocinas e a presença de células inflamatórias como macrófagos e linfócitos T estão correlacionados com a malignidade dos tumores de mama em mulheres, auxiliando na progressão e metastatização dos carcinomas mamários. O objetivo deste estudo foi caracterizar a malignidade dos tumores de mama na espécie canina, por meio da expressão destas citocinas pela técnica quantitativa de RT-PCR em tempo real e da densidade de células inflamatórias pela técnica de imuno-histoquímica. A expressão das citocinas e a densidade do infiltrado inflamatório foram comparadas em cada um dos grupos experimentais, através de análise de variância, utilizando-se como teste de comparação de médias, contrastes ortogonais, com nível de significância de 5%. O coeficiente de correlação de Spearman foi empregado para a análise de correlação entre as variáveis das citocinas, leucócitos e outros dados secundários. As maiores expressões de TNF-, IL-4 e IL-10 e a presença de macrófagos e linfócitos T ocorreram nos carcinomas mamários, demonstrando que este conjunto de citocinas e células inflamatórias quando presentes no microambiente tumoral favorecem a progressão e malignização tumoral / Abstract: The microenvironment of the breast tissue is governed since his embrionary development by a complex cytokine network including TNF-, IFN-, IL-4 and IL-10, and cellular components. The imbalance between the response of these cytokines and inflammatory cells such as macrophages and lymphocytes had been correlated with the malignancy of breast tumors in women aiding in the progression and metastasis of breast carcinomas. The aim of this study was to characterize the malignancy of breast tumors in dogs through the expression of these cytokines by the technique of quantitative real time RT-PCR and the density of the inflammatory cells in canine mammary tissues by immunohistochemistry. The cytokine expression and density of inflammatory infiltrate were compared in each experimental groups, using analysis of variance, taking as tests of comparison of means, orthogonal contrasts, with a significance level of 5%. The Spearman rank correlation coefficient was used to analyze the correlation between the variables of cytokines, leukocyte, and others secondary data. The highest expression of TNF-, IL-4 and IL-10 and the presence of macrophages and T lymphocytes occurred in breast carcinomas, demonstrating that this set of cytokines and inflammatory cells present in the tumor microenvironment can promote tumor progression, and malignancy / Mestre

Orientador: Antônio Carlos Alessi / Banca: Rosemeri de Oliveira Vasconcelos / Banca: Andrigo Barboza De Nardi / Banca: Felipe Augusto Ruiz Sueiro / Banca: Maria Cecília Rui Luvizotto / Resumo: Os tumores mamários representam aproximadamente 52%, de todas as neoplasias observadas em cadelas. Lecitinas são proteínas naturais de origem não imune, que se ligam a carboidratos. Por existir um grande número de lecitinas com capacidade de ligação com diferentes carboidratos, esta versátil molécula tem sido utilizada em diversos segmentos da pesquisa biológica. O presente trabalho tem por objetivo investigar, em tecido mamário canino, receptores das lecitinas UEA - Ulex europaeus (carqueja), PNA - Arachis hypogaea (amendoim), HPA - Helix pomatia (caracol romano) e DBA - Dolichos biflorus (faveira) presentes em tecido mamário normal, em neoplasias mamárias e em metástases dessas neoplasias. Para tanto, foram utilizadas 125 amostras de mama, classificadas de acordo com Cassali et al., (2011). Para a quantificação da frequência da marcação foram aleatoriamente selecionados quatro campos por corte e estabelecido um valor para o percentual de células marcadas, utilizando-se objetiva de 40x. Os resultados foram submetidos às análises de variância e à comparação de médias pelo teste de Tukey (p<0,05). Para a lecitina UEA, não foi observada diferença significativa entre nenhum dos tipos histológicos. Para PNA, foi observada menor marcação no carcinoma sólido grau II, que diferiu significativamente dos demais tipos histológicos. Para HPA, observou-se menor marcação do grupo carcinossarcoma, que diferiu significativamente dos demais tipos histológicos. Para DBA, houve menor marcação do carcinoma papilar grau II com relação aos demais tipos histológicos. Na comparação das lecitinas utilizadas no presente estudo, por tipo histológico, não foi observado nenhum padrão. Quanto à formação de glicoconjugados em estruturas celulares (tipo celular e marcação de membrana, citoplasmática ou nuclear), as lecitinas... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Mammary tumors represent approximately 52% of all malignancies observed in dogs. Lectins are natural proteins of non-immune origin which bind to carbohydrates. Because there is a large number of lectins, with binding affinity for different carbohydrates, this versatile molecule has been used in several segments of biological research. The present study aims to investigate, in canine mammary tissue, lectins receptors UEA - Ulex europaeus (gorse), PNA - Arachis hypogaea (peanut), HPA - Helix pomatia (Roman snail) and DBA - Dolichos biflorus (horse gram) present in normal breast tissue, in breast neoplasms and metastases in these neoplasms. Thus, we used 125 samples of breast, classified according Cassali et al., (2011). To quantify the frequency of marking, four fields per section were randomly selected and a value for the percentage of labeled cells was set, using a 40x objective. The results were submitted to analysis of variance and comparison of means by Tukey test (p <0.05). For lectin UEA, there was no significant difference between any of histological types. For PNA, the lowest marking was observed in solid carcinoma grade II, which differed significantly from other histologic types. For HPA, a lower markup in carcinosarcoma group was observed, which differed significantly from other histological types. For DBA the smaller markup was for grade II papillary carcinoma in relation to other histologic types. Comparison the lectins used in this study for histological type showed no observable pattern. None of lectins had more or less marking in all groups, marking or different histological types between more and less aggressive. Lectins PNA and HPA have shown promise for the diagnostic evaluation of canine mammary neoplasms. The formation of glycoconjugates for PNA varied between different histological types and HPA was... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Antonio Carlos Paes / Coorientador: Pasqual Barretti / Coorientador: Priscylla Tatiana C. Guimarães / Banca: Alessandra Melchert / Banca: Júlio César Cambraia Veado / Resumo: Com o objetivo de avaliar a eficiência e segurança da hemodiálise (HD) em cães portadores de injúria renal aguda (IRA) associada à infecção, foram avaliadas 29 sessões de hemodiálise (HD) realizadas em cães atendidos no ambulatório de enfermidades infecciosas. No atendimento primário os animais possuíam uréia sérica acima de 100mg/dL, creatinina sérica acima de 5mg/dL e sintomas de IRA. Esses animais receberam reposição de volume com fluidoterapia até a normovolemia em seis horas. Após 24 horas, a HD diária foi indicada para os animais que apresentaram aumento da creatinina sérica. O tratamento foi suspenso quando o valor sérico da creatinina no momento pós-diálise e pré-diálise do dia subsequente permaneceram estáveis ou quando o animal apresentou instabilidade hemodinâmica. Foi realizada avaliação laboratorial diária, (creatinina, ureia, potássio, sódio, fósforo, cálcio, bicarbonato e pH séricos, pré e pós-diálise). Os resultados mostraram diminuição das concentrações séricas de creatinina, ureia, sódio, fósforo e potássio em todas as sessões de HD, aumento nos valores de pH e bicarbonato séricos e não foram observados diferenças significativas nos valores de cálcio sérico. A taxa de redução de ureia (URR) obtida nas sessões de hemodiálise variou de 0,13 a 0,54. Os valores de hemoglobina e contagem de plaquetas diminuíram em todas as sessões de HD. As diferenças nos valores de leucócitos pré e pós HD não mostraram diferença estatística. Complicações intradialíticas foram hipotensão (17,24%), alterações neurológicas com vocalização e agitação (3,44%), vomito (13,79%) e queda da SpO2(24,14%). A mortalidade observada no decorrer do tratamento ocorreram por complicações respiratórias e sepse. Não foi... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: With the objective of assessing the efficiency and safety of hemodialysis (HD) in dogs with acute renal injury (ARI) associated with the infection, were studied 29 hemodialysis performad in dogs treated in outpatient clinic of infectious diseases. At initial evaluation the animals had serum urea above 100mg/dL, serum creatinine greater than 5 mg/dL and symptoms of IRA. The animals received volume replacement with fluid until the normovolemia in six hours. After 24 hours, daily hemodialysis (HD) was indicated to animals that showed increase of serum creatinine. HD treatment was discontinued when the value of post dialysis serum creatinine and the next pre dialysis measurement remained stable or when the animal presented hemodynamic instability. The animals were monitored daily by laboratory examination (pre and post dialysis serum creatinine, urea, sodium, potassium, phosphorus, calcium, bicarbonate and pH). The results showed decrease of serum creatinine, urea, sodium, fosphorus and potassium in all the HD sessions; increase of pH values and no significant differences in the values of serum calcium. The urea reduction tae (URR) ranged from 0.13 to 0.54. The values of hemoglobin levels and the platelet count decreased in all sessions of HD. The values of leukocytes before and after HD showed no statistical difference. Intradialytic complications were hypotension (17.24 %), neurological changes with vocalization and agitation (3.44 %), vomiting (13.79 %) and decrease in SpO2 (24.14 %). Mortality was not experienced during HD session. The mortality observed was due to respiratory complications and sepsis. In conclusion, HD was effective in promoting metabolic control in patients with few clinical intradialytic complications which makes it a safe method in severely ill patients / Mestre

Resumo: Por ser a maior causa de morte entre as fêmeas caninas, o câncer de mama desperta o interesse da comunidade científica, pois sua apresentação e evolução clínica são muito semelhantes aos casos de câncer de mama na mulher. No intuito de permitir a continuação dos estudos comparativos entre os tumores de cadelas e os das mulheres é fundamental a padronização da classificação histopatológica e imunoistoquímica. Por meio da técnica de Tissue microarray foi possível concentrar um grande número de amostras e compará-las numa mesma lâmina, permitindo que uma casuística maior pudesse ser analisada, evitando desperdícios de materiais e reagentes. A partir dos resultados da imunoistoquímica foi possível a reclassificação dos tumores de mama da cadela em Luminal A (RE+ e HER-2-) (36,36%), Luminal B (RE+ e HER-2 +) (9,09%), Basal (RE-, HER-2 - e p63 e/ou CK5 +) (37,88%) e Super-expressão de HER-2 (RE- e HER-2 +) (12,12%) assim como classificados em Medicina Humana. Além disso, foi realizada a marcação para a Catepsina D e proteína S100A4, para demonstrar o potencial metastático desses tumores. Os resultados permitem concluir que é possível a reclassificação dos carcinomas de mama em cadela assim como os tumores de mama em mulheres, promovendo um melhor entendimento das características moleculares por meio das imunoexpressões de proteínas. A Catepsina D e a proteína S100A4 se mostraram importantes na caracterização do potencial metastático, contudo novos estudos devem ser realizados para confirmar o papel desses marcadores nos carcinomas de mama metastáticos de cadelas e das mulheres. / Abstract: For being the biggest cause of death between the canine females, breast cancer arises the interest of the scientific community, therefore its presentation and clinical outcome are very similar to the cases of breast cancer in the woman. In intention to allow the following of comparative studies between the tumors of dogs and of the women the standardization of the histopathogical and imunohistochemical classification is needed. By the technique of Tissue microArray it was possible to concentrate a great number of samples and to compare them in one same slide, allowing that a bigger casuistry could be analyzed, preventing the waste of materials and reagents. From the results of the imunohistochemistry the reclassification of the breast tumors of the dog was possible. They're reclassified in Luminal A (RE+ and HER-2-) 36.36%), Luminal B (RE+ and HER-2 +) (9.09%), Basal (RE-, HER-2 - and p63 and/or CK5 +) (37.88%) and HER-2 Super-expression (RE- and HER-2 +) (12.12%) as well as classification in Medicine Human. Moreover, it was carried through the marking for Cathepsin D and protein S100A4, to demonstrate the metastatic potential of these tumors. The results allow concluding that the reclassification of breast carcinomas in dog as well as the breast tumors in women is possible, promoting a better agreement of the molecular characteristics by means of the imunoexpression of proteins. Cathepsin D and protein S100A4 had shown important in the characterization of the metastatic potential. However more studies must be carried through to confirm the paper of these markers in the metastatic breast carcinomas of dogs and of women. / Orientador: Noeme Sousa Rocha / Coorientador: Fernando Schmitt / Banca: Alfredo Ribeiro da Silva / Banca: Maria Aparecida Custódio Domingues / Mestre

Orientador: Luíz Henrique de Araújo Machado / Banca: Viciany Erique Fabris / Banca: Marconi Rodrigues Faria / Resumo: A dermatite atópica canina é uma dermatopatia de origem genética, cujo principal sintoma é o prurido. Uma de suas principais características é o comprometimento da barreira epidérmica cutânea, causado por deficiência na quantidade de lipídios na epiderme destes cães. Não obstante, na literatura consultada não há uma padronização de técnica de coloração histoquímica para avaliação destes lipídios epidérmicos em cães. Este trabalho objetivou padronizar uma técnica digital de mensuração de lipídios da epiderme de cães normais utilizando-se colorações histoquímicas específicas e, por meio da coloração padronizada, mensurar a quantidade de lipídios epidérmicos de cães atópicos antes e após o tratamento com reposição tópica de lipídios, além de comparar a quantidade de lipídios da epiderme de cães atópicos com a de cães saudáveis. Para a padronização da técnica de coloração histoquímica foram utilizados vinte e cinco animais saudáveis, sendo as amostras submetidas a três colorações: hematoxilina & eosina, Sudan Red e Oil Red O. Em seguida, as amostras passaram por avaliação entre patologistas e pelo programa de análise de imagem digital, confrontando as duas técnicas. Após padronização, comparou-se a quantidade de lipídios da barreira epidérmica entre 15 cães atópicos e 30 cães saudáveis, comparando a quantidade de lipídios da epiderme da região cervical com a região axilar. Os resultados mostraram concordância entre a avaliação dos patologistas e o programa de análise digital, que ambas as colorações se prestam a este fim, mas que Sudan Red é a coloração que melhor permite a mensuração dos lipídios da barreira epidérmica e, quando comparada a camada lipídica da epiderme de cães saudáveis e cães atópicos, nota-se que estes possuem uma quantidade lipídica reduzida e, após o tratamento com reposição tópica de lipídios, os cães atópicos apresentam ... / Abstract: Canine atopic dermatitis is a multifactorial skin disease with genetic origin, that causes itching as the main symptom. One of the disease's main characteristics (and a major causative factor) is the impairment of the epidermal skin barrier. This is caused, primarily, by a deficiency in the quantity of lipids in the epidermis of atopic dogs. However, no standardized histochemical technique for the evaluation of epidermal lipids in dogs exists in the literature. The objectives of this study were firstly, to standardize the measurement of lipids of the epidermis of normal dogs using specific histochemical staining. Secondly, using this standardized staining technique, ascertain the amount of epidermal lipids in atopic patients before and after treatment with topical replacement of lipids and compare with measurements from healthy dogs. For standardization of staining, epidermal samples from 25 healthy animals were taken and subjected to hematoxylin and eosin, Sudan Red and Oil Red O staining. The samples were processed using visual semi-quantitative assessment and by the digital image analysis program. After standardization, we compared the quantity of lipids in the epidermal barrier of 15 atopic dogs and 30 healthy dogs. Samples were taken from neck and axillae in all participating animals to assess any differences in lipid content between body regions. The results showed that Sudan Red provides the most accurate measurement of skin barrier lipids when comparing the lipid layer of the epidermis of healthy dogs with atopic dogs. It was found that atopic dogs exhibit a reduced quantity of lipids in the epidermal barrier prior to treatment and show a significant increase after topical replacement of lipids. Comparisons between individuals within the atopic group of animals showed that lipids from the neck occurred in smaller quantities than the axillary region. These results show that topical replacement of lipids in dogs with ... / Mestre

Orientador: Francisco José Teixeira Neto / Banca: Carlos Alan Candido Dias Junior / Banca: Denise Aya Otsuki / Resumo: O reconhecimento e o tratamento precoce da hemorragia intraoperatória é primordial para prevenir a morbidade e a mortalidade associada à perda aguda de volume circulante. Por outro lado, dexmedetomidina é um fármaco adjuvante da anestesia que, devido a sua ação vasoconstritora, poderia agravar estados de hipoperfusão regional associados à perda volêmica aguda. Objetivou-se avaliar os efeitos da infusão intravenosa contínua de dexmedetomidina associada à atropina sobre os índices globais de perfusão e sobre outras variáveis hemodinâmicas em cães anestesiados com isoflurano submetidos à hemorragia guiada a volume seguida pela reposição volêmica com sangue autólogo. Oito cães hígidos (19,5-29,2 kg) foram anestesiados em duas ocasiões com concentrações equipotentes (1,3 concentração alveolar mínima) de isoflurano administrado isoladamente (tratamento ISO) ou em associação com a dexmedetomidina intravenosa (bolus de 1,6 μg/kg, seguido por 2 μg/kg/h) (tratamento ISO-DEX) em um delineamento aleatório cruzado, aguardando-se 2 semanas de intervalo entre os tratamentos. A atropina (0,03 mg/kg, IM e 0,01 mg/kg, IV) foi administrada 30 minutos antes da hemorragia no tratamento ISO-DEX. A anestesia foi mantida em ambos os tratamentos sob ventilação com volume controlado (volume corrente: 12 mL/kg, pressão positiva no final de expiração: 7 cm H2O, frequência respiratória: 16-20 mov/min) com bloqueio neuromuscular produzido pelo atracúrio. Após a obtenção dos parâmetros pré-hemorragia (basal), foram retirados 10, 20, e 30% do volume sanguíneo total estimado (80 mL/kg) de forma progressiva, seguido por reposição volêmica com sangue autólogo nas mesmas proporções. Comparativamente ao valor basal, a hemorragia reduziu significativamente (p < 0,05) o índice de transporte de O2 (IDO2) e a saturação venosa mista (SvO2) em ambos os tratamentos. Embora a taxa de extração de O2 (TeO2) tenha se elevado ... / Abstract: Early recognition and treatment of acute intraoperative hemorrhage is seminal for preventing the morbidity and mortality associated with circulating volume losses. On the other hand, dexmedetomidine is an adjuvant anesthetic drug that might aggravate global tissue hypoperfusion induced by acute hemorrage because of its vasopressor effects. This study aimed to evaluate the effects of a constant rate infusion of dexmedetomidine combined with atropine on global perfusion indexes and on other hemodynamic parameters in isoflurane anesthestized dogs that underwent a volume-guided hemorrhage model followed by volume replacement with autologous blood. Eight healthy dogs (19-30 kg) were anesthetized in two occasions with equipotent concentrations (1.3 minimum alveolar concentration) of isoflurne alone (treatment ISO) or isoflurane combined with dexmedetomidine (1.6 μg/kg bolus, followed by 2 μg/kg/h) (treatment ISO-DEX) in a randomized crossover design, allowing 2-week intervals between treatments. Atropine (0,03 mg/kg, IM and 0.01 mg/kg IV) was administered 30 minutes prior to hemorrhage in the dexmedetomidne treatment. Anesthesia was maintained in both treatments under neuromuscular blockade induced by atracurium and volume controlled ventilation (expired tidal volume: 12 mL/kg, positive end-expiratory pressure: 7 cm H2O, respiratory rate: 16-20 mov/min). After recording pre-hemorrhage data (baseline), stepwise withdrawal of 10, 20, and 30% of the estimated blood volume (80 mL/kg) was followed by volume replacement with autologous blood in the same proportion. When compared with baseline values, hemorrhage significantly (P < 0,05) reduced oxygen delivery índex (IDO2) and mixed-venous saturation (SvO2) in both treatments. Although the oxygen extraction ratio (O2ER) was increased (P < 0.05) from baseline during hemorrhage, the anaerobic threshold (point where the oxygen comsumption (IVO2) becomes dependent on the IDO2] was not reached in both ... / Mestre