Orientador: Luiz Henrique de Araújo Machado / Banca: Marconi Rodrigues de Farias / Banca: Priscylla Tatiana Chalfun Guimarães-Okamoto / Resumo: A dermatite atópica é uma doença de pele alérgica, inflamatória e pruriginosa que acomete cães geneticamente predispostos. A característica mais comum é o prurido que exerce impacto significativo na qualidade de vida do animal bem como do seu proprietário. A interleucina-31 (IL-31) é uma citocina envolvida com o grau de prurido nas alergopatias, enquanto a filagrina (FLG) é uma proteína relacionada com a adequada queratinização e hidratação do estrato córneo. O intuito desse estudo foi padronizar e quantificar a técnica de imunohistoquímica (IHQ) para IL-31 e filagrina e associa-las ao grau de prurido e restauração de barreira cutânea na dermatite atópica antes e após o tratamento tópico com repositor de lipídeos na epiderme. Todos os cães foram provenientes do atendimento clínico do Hospital Veterinário da FMVZ- Unesp Botucatu-SP. Sobre a IL-31 não houve diferença significativa entre sua expressão quando comparadas as regiões dorsal e axilar de cães normais. Quando comparamos a expressão da IL-31 entre cães com dermatite atópica e saudáveis foi possível notar maior expressão de IL-31 em cães com dermatite atópica. Quando comparamos os cães com dermatite atópica antes e após aplicação do repositor de lipídeos na epiderme a expressão da IL-31 diminuiu significativamente após a aplicação. Em se tratando da proteína filagrina não foi encontrada diferença significativa entre sua expressão quando comparadas a região axilar e cervical de cães saudáveis, o mesmo ocorreu entre essas regiões em cães com dermatite atópica antes do tratamento e após o tratamento, quando comparados de maneira isolada. Quando comparamos as regiões axilar e cervical dos cães com dermatite atópica antes e após o tratamento não houve o aumento da expressão da proteína filagrina como o esperado. Houve diferença significativa entre as regiões cervical e axilar de cães com dermatite atópica quando comparados... / Abstract: Atopic dermatitis is an allergic, inflammatory and pruritic skin disease affecting genetically predisposed dogs. The most common feature is cutaneous rash that significantly impacts the animals' and owners' quality of life. Interleukin-31 (IL-31) is a cytokine involved in the degree of itching in allergies, while filaggrin (FLG) is a protein associated with adequate hydration and keratinization of the stratum corneum. The purposes of this study were to standardize the technique of immunohistochemistry (IHC) for IL-31 and filaggrin and to quantify and associate them to the degree of itching and skin barrier recovery in dogs with atopic dermatitis before and after topical treatment for lipids restitution in the epidermis. All dogs came from the clinical care of the Veterinary Hospital of FMVZ- Unesp Botucatu. There was no significant difference on the expression of IL-31 between samples obtained either from the dorsal or axillary regions of healthy dogs. When atopic dermatitis and healthy animals were compared, expression of IL-31 was noticeable higher in atopic dermatitis animals. IL-31 quantification in the atopic dermatitis animals evidenced significantly lower expression after the use of skin lipids complex in the epidermis. In the case of filaggrin protein, there was no significant difference between its expression when the axillary and cervical sites were compared both in healthy dogs and atopic dermatitis dogs and also when atopic dermatitis dogs were compared before and after treatment. Nevertheless significant difference in fillagrin levels was observed between the cervical and axillary regions of atopic dermatitis dogs when compared to healthy dogs; filagrina levels in healthy animals were larger than in atopic dermatitis dogs. IL-31 results suggest that this cytokine is involved in the physiology of atopic pruritus and that restitution of the skin epidermal barrier is essential so that we can control the pruritus and immunological... / Mestre

Orientador: Renée Laufer Amorim / Coorientador: Mirela Tinucci Costa / Banca: Geovanni Dantas Cassali / Banca: Renata Afonso Sobral / Resumo: O tumor de mama é o principal tumor que acomete as cadelas e seu comportamento biológico se assemelha com o que ocorre nas mulheres; com isso as cadelas podem ser um excelente modelo comparativo para o estudo do processo carcinogênico desta neoplasia. A metástase é uma consequência comum e a principal causa de mortalidade por esta doença. A identificação de marcadores tumorais pode ser uma ferramenta útil para a determinação do prognóstico pelo câncer de mama. Assim, os objetivos deste estudo foram avaliar a expressão gênica e proteica do ATM, p53 e VEGF na glândula mamária de cadelas e tentar correlacioná-las com a evolução tumoral e possível envolvimento metastático. Com isso foram utilizadas 53 amostras de glândula mamária de cadelas divididas em quatro grupos: G1= mamas normais, G2 = lesões mamárias benignas, G3 = carcinomas mamários não metastáticos e G4 = carcinomas mamários metastáticos. A análise de expressão gênica foi realizada pelo método de RT-qPCR e de expressão proteica pelo método de imuno-histoquímica. Baixa regulação de transcritos do ATM foi observada entre as neoplasias e as mamas normais, além da diminuição de níveis proteicos, sendo esta diminuição maior no grupo 4 quando comparado com o grupo 1. Os transcritos de TP53 e VEGF não apresentaram diferença estatística entre os grupos analisados. Entretanto, verificou-se diminuição proteica da p53 e aumento da proteína VEGF nos carcinomas mamários metastáticos em comparação com a mama normal. As expressões gênica e proteica do ATM apresentaram comportamento semelhante ao observado em mulheres, assim, o processo de desenvolvimento de metástase do carcinoma mamário pode ser semelhante em ambas as espécies. O aumento da expressão proteica do VEGF e a diminuição do ATM estavam principalmente relacionados com... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Canine mammary tumor is the major tumor that affects bitches and their biological behavior is similar to what occurs in women, so bitches can be an excellent comparative model for the study of the carcinogenic process in this type of neoplasm. Metastasis is a common consequence and the major cause of death by the tumor. Identification of tumor markers can be a useful tool for determining the prognosis of mammary gland cancer. So, the objectives of this study were to evaluate ATM, p53, and VEGF gene and protein expression in canine mammary tissues and try to correlate them with tumor development and metastatic involvement potential. Therefore 53 bitches mammary gland tissue samples were used divided in four groups: G1 = normal mammary glands, G2: benign mammary lesions, G3 = non-metastatic mammary gland carcinomas and G4 = metastatic mammary gland carcinomas. Gene expression analysis was performed by RT-qPCR and protein expression by immunohistochemistry. Down-regulation of ATM transcripts was observed between tumor tissue and normal mammary gland and protein levels were also reduced, it was mainly observed in group 4 when compared to group 1. TP53 and VEGF markers did not show statistical difference in gene expression among the groups. However, it was observed lower level of p53 protein in malignant tumors and higher level of VEGF protein in tumor tissues. ATM showed similar behavior when compared to women, so tumorigenesis process of breast cancer may be similar in both species. The increase in VEGF protein expression and ATM decrease were mainly related in poor prognosis tumors... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Noeme Sousa Rocha / Banca: Rosany Mucha Dufloth / Banca: Luiz Gonzaga Porto Pinheiro / Resumo: A avaliação microscópica dos linfonodos em cadelas portadoras de carcinoma de mama pode desempenhar um papel fundamental no direcionamento terapêutico, já que a drenagem linfática representa a via mais comum de metástases. Nos últimos anos tem-se desenvolvido técnicas que oferecem excelente acurácia na remoção dos linfonodos, como a Técnica do Linfonodo Sentinela (TLS), que se baseia no princípio de progressão escalonada na drenagem linfática de neoplasias e que atualmente é o principal fator prognóstico e diagnóstico em mulheres portadoras de carcinomas de mama. O objetivo da pesquisa foi avaliar de forma inédita a acurácia da biópsia do linfonodo sentinela em cadelas portadoras de carcinoma de mama. Foram utilizadas 41 cadelas com diagnóstico citológico do tumor. Após injeção do corante azul patente V, procedeu-se a mastectomia, juntamente com a linfadenectomia (sentinelas e não sentinelas). O material foi submetido a cortes seriados e avaliado microscopicamente pela coloração rotineira de H&E e imuno-histoquímica com os marcadores para pan-citoqueratina AE1/AE3 e células mioepiteliais CK14, que revelou que 46,3% (19/41) dos animais apresentavam metástase nodal. Os valores de sensibilidade e especificidade encontrados para a TLS foram de 89,5% e 100%, respectivamente, com índice kappa igual a 0,90 e p<0,0001. Portanto, a TLS oferece alta sensibilidade no diagnóstico precoce de micrometástases, permitindo maior precisão no estadiamento do paciente oncológico e consequentemente, maiores chances de sobrevida / Abstract: Microscopic evaluation of lymph nodes in bitches with mammary carcinomas may have fundamental importance in guidance the therapy since lymphatic drainage constitutes the most common route for metastasis. In recent years, several techniques have been used to detect and remove Sentinel Lymph Nades (SLN) based on the principIe of stepwise progression of cancer and lymphatic drainage. In human medicine, SLN biopsy and analysis constitutes the main prognostic factor in women with mammary , carcinomas. This study was designed to evaluate, in an unprecedented manner, the accuracy of sentinel lymph no de biopsy in bitches with mammary carcinomas. Forthyone dogs with no predilection for breed or age, with previous cytological diagnosis of mammary carcinoma were submitted to inoculation of patent blue V dye in peritumoral skin, followed by radical mastectomy and radicallymphadenectomy. Lymphanedectomy included sentinel and non- sentinel lymph nades in order to detect lymph nade metastasis. Both groups were compared in order to determine the accuracy of SLN technique in the detection of node metastasis. The lymph nades were subject to a standard serial sectioning method, stained by routine H&E or submitted to immunohistochemistry using pan-cytokeratins AEl/AE3 and the myoepitelial marker CK14. Nineteen animaIs (46.3%) had nodal metastasis. Sensibility and specificity for SLN technique were 89.5 % and 100 %, respectively, with a kappa value of 0.90 (p<O.OOOl). Therefore, SLN biopsy offers high sensitivity in the early diagnosis of lymph no de metastasis allowing a more accurate clinical staging. These results probably impacts on greater chances of patient survival / Mestre

Orientador: Aparecido Antonio Camacho / Banca: Marlos Gonçalves Sousa / Banca: Rosângela de Oliveira Alves Carvalho / Resumo: A cardiomiopatia diabética é uma doença do músculo cardíaco causado pela diabetes mellitus e não relacionada às enfermidades vascular, valvular ou à hipertensão arterial sistêmica. Observações experimentais e clínicas têm demonstrado a presença de hipertrofia, necrose, apoptose e aumento do tecido intersticial miocárdico. Acredita-se que a cardiomiopatia diabética seja decorrente de anormalidades metabólicas como hiperlipidemia, hiperinsulinemia e hiperglicemia, e de alterações do metabolismo cardíaco, ao promover modificações morfológicas que comprometem a função cardíaca. Portanto, acreditando nas semelhanças das fisiopatogenias da diabetes mellitus de cães e seres humanos, esse estudo foi concebido para avaliar à presença das alterações cardíacas em cães diabéticos por meio de análises clínicas, laboratoriais e do uso de técnicas ecodopplercardiográficas e de mensuração da pressão arterial sistêmica. Os cães foram selecionados em quatro grupos, com o Gc composto por dez animais saudáveis, GDST formado por quatro cães diabéticos sem tratamento, GDCT composto por dez cães diabéticos com tratamento e GDCE formado por dez cães diabéticos com tratamento que apresentava doença valvular concomitante. O estudo ecocardiográfico evidenciou alterações morfológicas nos corações dos animais com diabetes mellitus, quando comparados ao grupo controle. Valendo-se do recurso doppler tecidual, foram constatadas diferenças significativas nas variáveis A' sep; A' lat; A' dir e S dir, quando comparados os grupos de diabéticos com o grupo controle. A análise da eletrocardiografia não demonstrou distúrbio no ritmo cardíaco. Por sua vez, os resultados da pressão arterial sistêmica mensurados pelo doppler vascular, demonstraram diferenças estatísticas entre os grupos de diabéticos tratados quando comparados ao grupo controle. Os resultados encontrados permitiram evidenciar em cães ... / Abstract: Diabetic cardiomyopathy is a cardiac muscle disease caused by diabetes mellitus unrelated to vascular or valvular pathologies, or to systemic arterial hypertension. Experimental and clinical studies have shown the presence of hypertrophy, necrosis, apoptosis and myocardial interstitial tissue increase. It is believed that the diabetic cardiomyopathy is caused by metabolic abnormalities such as hyperlipidemia, hyperinsulinemia, and hyperglycemia, metabolic cardiac disorders to promote morphological changes that compromise cardiac function. Therefore, believing in similarities between the physiopathology of diabetes mellitus in dogs and humans, this study was designed to assess the presence of cardiac abnormalities by analysis of physical examinations and laboratory techniques and the use of Doppler echocardiography and measurement of blood pressure. The dogs were divided into 4 groups, with Gc composed of 10 healthy animals, GDST formed by four untreated diabetic dogs, GDCT composed of 10 treated diabetic dogs and GDCE formed by 10 diabetic dogs under treatment that showed concomitant valvular disease. The echocardiographic study showed morphological changes in the heart of diabetic animals when compared to control group. Regarding the resource tissue Doppler, differences in the variables A 'septum, A' lateral, A ' right and S right were significant when diabetic groups were compared to control group. The analysis of electrocardiogram revealed no cardiac rhythm disturbance. Yet, the results of systemic arterial pressure measured by vascular doppler showed statistical difference between diabetic groups treated and control group. Results demonstrated cardiac morphological and hemodynamic changes in diabetic dogs, resulting in diastolic dysfunction despite preserved systolic function / Mestre

Orientador: Cíntia Lúcia Maniscalco / Banca: Júlio Carlos Canola / Banca: Jorge Luiz Oliveira Costa / Resumo: Com o presente estudo relata-se a freqüência, localização e tipo de alterações encontradas em 77 cães com suspeita de lesão óssea na mandíbula, em imagens radiográficas, do arquivo do Setor de Radiologia do Hospital Veterinário "Governador Laudo Natel" (HV), da Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias, da Universidade Estadual Paulista (FCAV/UNESP), Câmpus de Jaboticabal, SP, no período de janeiro de 2001 a janeiro de 2006, correlacionando sexo, idade e raça dos animais. A pesquisa revelou 37 (48,05%) cães com lesões mandibulares. Dentre os cães acometidos 44,16% eram de raça indefinida e 14,29% da raça Poodle. Do total 33,77% eram machos e a idade mais afetada estava entre seis e nove anos (23,38%). A fratura (38,96%) foi à alteração mais encontrada e o local de maior ocorrência foi à região de premolares (24,38%) e molares (10,39%) do corpo da mandíbula. / Abstract: The present study reported the frequency, placement and kind of changes in 77 dogs supposed to have lesions at jawbone in radiographic images from the Radiological Sector archive, at the Veterinary Hospital Governador Laudo Natel (HV), of the Veterinary Faculty from São Paulo State University (FCAV/UNESP), Jaboticabal, SP, between January 2001 to January 2006, correlating sex, age and the breed of the animals. The study revealed 37 (48, 5%) of dogs with jawbone lesions. Among the dogs that were taken ill, 44,16% had no defined breed and 14,29% were Poodle. They were 33,7% male and the most affected age range was between six and nine (23,38%). The fracture (38,96%) was the most common change and it occurred most frequently in the premolar region (10,39%) and molar region (10,39%) of the mandible body. / Mestre

Orientador: Francisco José Teixeira Neto / Banca: Carlos Augusto Araújo Valadão / Banca: Renata Navarro Cassu / Resumo: Em humanos a dipirona apresenta efeito inibitório sobre a enzima COX-1, podendo inibir a agregação plaquetária por até 6 horas (1). Devido parte da sua ação analgésica estar associada ao sistema nervoso central (2), este fármaco vem sendo associado a outros anti-inflamatórios não esteroidais (AINEs), como o meloxicam, para o tratamento da dor crônica em cães (3). Apesar do uso da dipirona isolada ou associada ao meloxicam ser teoricamente justificável, os benefícios analgésicos desta associação e os potenciais efeitos adversos sobre a hemostasia devem ser investigados para que seu emprego clínico seja validado. Com isso o presente trabalho envolveu 2 fases. Na primeira fase (CAPÍTULO 1) objetivou-se comparar os efeitos da dose única de dipirona, meloxicam e da associação de dipirona com meloxicam sobre a hemostasia em cães. Nesta etapa empregaram-se seis cães adultos, em um estudo prospectivo, aleatório, cruzado e controlado por placebo. Os animais receberam 4 tratamentos pela via intravenosa com intervalo de 15 dias entre si: controle (0,1 mL/kg de solução fisiológica), meloxicam (0,2 mg/kg), dipirona (25 mg/kg) e dipirona-meloxicam (25 e 0,2 mg/kg, respectivamente). As amostras de sangue foram coletadas antes e após 1, 2, 3, 5, e 8 horas da administração dos tratamentos para a avaliação da agregação plaquetária em sangue total e tromboelastometria. O tempo de sangramento de mucosa oral foi avaliado antes e após 1, 3 e 5 horas da administração dos tratamentos. Na segunda fase (CAPITULO 2), objetivou-se avaliar o controle da dor pós-operatória de dose única de dipirona, meloxicam e da associação dipirona-meloxicam em cadelas submetidas a ovariosalpingohisterectomia em um estudo prospectivo, aleatório, duplo cego e controlado por placebo. Quarenta cadelas foram divididas aleatoriamente em 4 grupos (10 animais por grupo) e receberam os mesmos tratamentos descritos na fase anterior. A dor ... / Abstract: In humans, dipyrone acts as a non-selective COX inhibitor and can inhibit platelet aggregation for up to 6 hours (1). Because dipyrone-induced analgesia may be attributable not only to its anti-inflammatory action, but also to its central nervous system mediated effects (2), this drug has been combined with other non steroid antinflammatories (NSAIDs), such as meloxicam, for the control of chronic pain in canine patients (3). Although the use of dipyrone alone or combined with meloxicam is theoretically justifiable, the analgesic benefits of this association and the potential adverse effects on hemostasis should be investigated before its clinical use is validated. In order to investigate the effects of dipyrone, meloxicam, and of the combination of these two drugs, the present study was carried out in 2 phases. During phase 1, presented in Chapter 1, the effects of a single dose administration of dipyrone, meloxicam, and of the combination of these two NSAIDs were evaluated on the hemostasis of conscious dogs. Six adult dogs were used in a prospective, randomized, crossover study. The animals received 4 treatments intravenously with 15-day washout intervals: control (0.1 mL/kg saline), meloxicam (0.2 mg/kg) dipyrone (25 mg/kg) and dipyrone combined with meloxicam (25 and 0.2 mg/kg respectively). Blood samples were collected for assessment of platelet aggregation in whole blood and thromboelastometry before, and 1, 2, 3, 5, and 8 hours after treatment administration. Buccal mucosal bleeding time was evaluated before and at 1, 3, and 5 hours of treatment administration. During phase 2 (Chapter 2), the postoperative analgesic effects promoted by a single dose of dipyrone, meloxicam, and of the drug combination were evaluated in bitches undergoing ovariohysterectomy in a prospective, randomized , double-blinded, placebo controlled study design. Forty healthy bitches selected for ovariohysterectomy were ... / Mestre

Orientador: Antonio Carlos Paes / Banca: Marcio Garcia Ribeiro / Banca: Hélio Langoni / Banca: Christian Hirsch / Banca: Osimar de Carvalho Sanches / Resumo: O estudo objetivou identificar efeitos do tratamento com ribavirina, prednisona e DMSO na cinomose; identificar a presença viral no sangue, medula óssea e líquor antes e após o tratamento, os efeitos colaterais dos fármacos experimentais e associações. Foram utilizados 60 cães apresentando sinais neurológicos da cinomose com evolução de dez dias. Animais foram internados para tratamento de suporte; avaliados diariamente e submetidos ao hemograma e dosagens bioquímicas. Os grupos 1 e 2 foram tratados com ribavirina associada ao DMSO; os grupos 3 e 4 foram tratados com DMSO e prednisona e os grupos 5 e 6 foram tratados com ribavirina e prednisona, ribavirina, prednisona e DMSO. Os animais foram anestesiados e colhidos líquor, medula óssea e sangue, antes e após o tratamento e realizada a RTPCR das amostras; as negativas foram analisadas pela técnica de hn-PCR. O vírus foi encontrado em 95% das amostras de sangue, 90% de medula óssea e 53,3% de líquor pré-tratamento. O efeito adverso da ribavirina quando associada com a prednisona foi anemia. A prednisona na dose imunossupressora causou aumento da dosagem de proteína e diminuição da celularidade liquórica, leucocitose. Já a dose antinflamatória causou diminuição de proteína no líquor. Baseado nos índices de sobrevida e melhora clínica, o tratamento mais efetivo foi o G2 (80%); seguido do G1, G5 e G3 (70%); o G6 (60%); o G4 com o pior índice (30%). Pós-tratamento, a frequência viral foi 97,7% no sangue, 86,4% na medula óssea e 27,3% no líquor / Abstract: The present study aims at the identification of ribavirin, prednisone and DMSO's treatment effects in dogs with canine distemper, at the identification of the viral presence in the blood, bone marrow and cerebrospinal fluid (CSF) before and after the treatment and also at the identification of side effects of the experimental drugs and its combinations. Sixty dogs presenting canine distemper with neurological signs about ten days evolution were observed. The animals were hospitalized for the support treatment, assessed on daily basis and subjected to blood cells count and biochemical analysis. Groups 1 and 2 were treated with ribavirin and its combination with DMSO; Groups 3 and 4 treated with prednisone and DMSO, Group 5 treated with ribavirin and prednisone, while Group 6 with ribavirin, prednisone and DMSO. The animals were anesthetized for the cerebrospinal fluid, bone marrow and blood samples collection before and after the treatment, then the RT-PCR of the samples was proceeded. The negative were analysed according to the hn-PCR technique. The canine distemper virus were found in 95% of blood samples, 90% of bone marrow and 53,3% of CSF before the treatment. The adverse effect of ribavirin and its association with prednisone was anemia. Prednisone, at its immunosuppressive dose, led to the increase of protein and decrease of cellularity in CSF, and increase of leukocytes blood count. The antiinflammatory dose led to the CSF protein concentration's decrease. Considering the survival and clinical improvement rates, the most successful treatment was the one applied to the G2 (80%); followed by G1 (70%); G5 (70%) and G3 (70%); G6 (60%); and the lowest rate G4 (30%). After the treatment, the virus frequency was 97,7% in the blood, 86,4% in the bone marrow and 27,3% in the CSF / Doutor

Orientador: Antonio Carlos Paes / Banca: Marcio Garcia Ribeiro / Banca: Osimar de Carvalho Sanches / Resumo: A cinomose é uma doença infecto-contagiosa viral, sistêmica e letal causada pelo Morbilivírus que acomete cães de todas as idades e apresenta sinais clínicos respiratórios, gastrintestinais, dermatológicos, oftálmicos e neurológicos, que podem ocorrer sequencialmente ou isoladamente. Este estudo teve como objetivo comparar lesões encefálicas utilizando a histopatologia e avaliar a quantidade de vírus pela imunoistoquímica em cães tratados com Ribavirina na dose de 30mg/Kg por via oral uma vez ao dia por 15 dias e animais não tratados com esse fármaco, e que devido a evolução desfavorável da doença foram eutanasiados. Os animais foram atendidos e tratados durante a rotina do Setor de Enfermidades Infecciosas dos Animais Domésticos- FMVZ- UNESP/ Botucatu, SP. A análise histopatológica constituiu na avaliação de córtex cerebral, cerebelo, tálamo, tronco encefálico, hipocampo e visualização de manguitos perivasculares em meninges. A partir dessas regiões foi possível identificar e classificar lesões como: desmielinização; presença de manguitos perivasculares, edema, necrose neuronal, alterações vasculares (congestão, hemorragia e trombose) e alterações inflamatórias (meningite, meningoencefalite e meningoencefalomielite). Foi observado que a desmielinização se manteve altamente presente nos dois grupos, e que quando comparados estatisticamente não existe diferença significante entre os grupos, assim como na formação de manguitos perivasculares. Houve diminuição considerável do edema em todas as estruturas avaliadas, e a ribavirina® se mostrou eficaz na redução da inflamação encefálica, assim como a necrose neuronal foi menor em quase todas as estruturas avaliadas no grupo tratado, com exceção do tálamo. A análise estatística comparativa da marcação viral entre os grupos se mostrou significante somente para o cerebelo, tálamo e tronco encefálico / Abstract: Distemper is a viral infectious disease, caused by systemic and lethal morbillivirus that affects dogs of all ages and clinical signs respiratory, gastrointestinal, dermatological, ophthalmic and neurological disorders, which may occur sequentially or separately. This study aimed to compare brain lesions using histopathology and assess the amount of virus by immunohistochemistry in dogs treated with Ribavirin at a dose of 30mg/Kg orally once daily for 15 days and animals not treated with this drug, and that due to the unfavorable development of the disease were euthanized. The animals were treated and handled during routine Division of Infectious Diseases of Domestic Animals-FMVZ-UNESP / Botucatu, SP. Histopathologic analysis was to evaluate the cerebral cortex, cerebellum, thalamus, brainstem, hippocampus and viewing perivascular cuffs in the meninges. From these regions it was possible to identify and classify lesions such as demyelination, the presence of perivascular cuffing, edema, neuronal necrosis, vascular changes (congestion, hemorrhage and thrombosis) and inflammatory changes (meningitis, meningoencephalitis and meningo-encephalomyelitis). It was observed that the demyelination remained strongly present in both groups, and compared statistically no significant difference between groups, as well as the formation of perivascular cuffs. There was a considerable decrease of the edema measured in all structures, and ribavirin ® was effective in reducing brain inflammation, and neuronal necrosis was lower in almost all structures evaluated in the group treated with the exception of the thalamus. The comparative statistical analysis of the viral marking between groups was significant only for the cerebellum, thalamus and brainstem / Mestre

Orientador: Maria Jaqueline Mamprim / Coorientador: Carlos Roberto Teixeira / Banca: Raquel Sartor Marcelino / Banca: Alessandra Melchert / Resumo: O atendimento de cães com sobrepeso e obesos na rotina clínica de animais de companhia tem sido cada vez mais frequente. O objetivo do presente estudo foi avaliar as alterações hepáticas parenquimatosas e hemodinâmicas, por meio da ultrassonografia bidimensional e Doppler, em três grupos de cães com diferentes escores de condição corporal - G1 (peso ideal/controle), G2 (sobrepeso) e G3 (obesos) -, sem doenças hepáticas por outras causas de base. Houve correlação positiva entre o G3 e os seguintes fatores: aumento da ecogenicidade do parênquima hepático, aumento das dimensões hepáticas, hiperlipidemia, e morfologia anormal da onda da veia hepática (VH). Diferença significativa na velocidade média do fluxo portal (Vméd.VP) foi observada entre G1 (17,23 ± 3,7cm/s) e G3 (13,66 ± 2,56cm/s), no volume do fluxo portal (VFVP) entre G1 (32,69 ± 11,86mL/min/kg) e G2 (19,58 ± 7,68mL/min/kg) e entre G1 e G3 (15,22 ± 8mL/min/kg), no índice hepatorrenal entre G2 (1,1 ± 0,29) e G3 (1,28 ± 0,22), nos níveis séricos de fosfatase alcalina (FA) entre G1 e G3, de gama glutamiltransferase (GGT) entre G1 e G2 e de colesterol entre G1 e os demais grupos. Não houve diferença significativa no índice de congestão portal (ICP), no índice de resistividade da artéria hepática (IRAH), no diâmetro e área da veia porta e nos níveis séricos de alanina aminotransferase (ALT) e triglicérides, entre os grupos. Concluiu-se que a obesidade pode levar ao desenvolvimento de alterações parenquimatosas e hemodinâmicas no fígado de cães / Abstract: Veterinary care of overweight and obese dogs in small animal clinical sciences has become increasingly common. The aim of the present study was to investigate, using two dimensional and Doppler sonography, parenchymal and hemodynamic changes in three groups of dogs, according to body score condition (G1, ideal body weight/control; G2, overweight; G3, obese), without hepatic diseases due to other causes. A positive correlation was found between G3 and the characteristics described below: increased liver echogenicity, hepatomegaly, hiperlipidemia and abnormal hepatic vein Doppler waveform pattern. There was statistical difference in the mean portal blood flow velocity between G1 (17,23 ± 3,7cm/s) and G3 (13,66 ± 2,56cm/s), in the portal blood flow between G1 (32,69 ± 11,86mL/min/kg) and G2 (19,58 ± 7,68mL/min/kg) and between G1 and G3 (15,22 ± 8mL/min/kg), in the hepatorenal index between G2 (1,1 ± 0,29) and G3 (1,28 ± 0,22), in serum levels of alkaline phosphatase (ALP) between G1 and G3, in levels of gamma glutamyltranspeptidase (GGT) between G1 and G2 and in levels of cholesterol between G1 and the other groups. There was no statistical difference in the portal vein congestion index, hepatic artery resistance index, portal vein diameter and area and on serum levels of alanine aminotransferase (ALT) and triglycerides between the groups. It was concluded that obesity may be responsible for the development of parenchymal and hemodynamic changes in dog's liver / Mestre

Resumo: A parvovirose canina, uma das principais doenças infecto-contagiosas que acomete cães, é causada pelo Parvovírus canino-2 (CPV-2). Desde sua '" escrição importantes mutações ocorreram originando três tipos: CPV-2a e 2b, comumente detectados no Brasil, e o CPV-2c. Essas alterações antígênicas caracterizam o CPV como um dos principais modelos de evolução viral, sendo etectáveis com painéis de anticorpos monoclonais em técnicas simples como hemaglutinação e neutralização in vitro. A tecnologia de apresentação de :J oteínas em bacteriófagos (Phage display) tem diversas aplicações, dentre elas a apresentação de fragmentos recombinantes de anticorpos funcionais scFv), que podem ser produzidos em grande quantidade. Este trabalho utilizou Phage Display para expressar fragmentos scFv contra o CPV-2 , com uma etodologia descrita (Krebber, 1997). Após o cultivo e purificação do vírus, camundongos da linhagem High seleção IV A foram imunizados com o CPV-2 , sendo em seguida extraído RNA total do baço. A amplificação das cadeias leve e pesada, e sua ligação por SOE-PCR, permitiu a clonagem do scFv no fagomídeo pAK 100. Após a transformação da E.coli XL-1 blue, bacteriófagos 13 foram expressos apresentando o fragmento scFv. Três processos de seleção foram realizados, e após '0 Phage-ELlSA, um grupo de fagos foi selecionado. A partir deste um screening foi realizado por PCR sendo dois lones detectados. Após nova expressão de ambos uma nova reação de Phage-ELlSA foi realizada e demonstrou a especificidade destes clones com o CPV-2. Até o presente momento esta é a primeira descrição da técnica de Phage display apresentando fragmentos de anticorpo anti-CPV-2. / Abstract: Canine parvoviral disease, one of the most common infectious disorders of dogs, is caused by canine parvovirus (CPV-2). Several mutations have accurred since it was described in the late 1970s, originating three antigenic pes: CPV-2a and 2b, most commonly found in Brazil, and the CPV-2c. These tigenic differences characterize CPV-2 as an important model of virus evolution, and could be detected by monoclonal antibody panel in hemmaglutination and in vitro neutralization. Phage display has many a plications and have been used displaying functional antibodies fragments scFv) , which can be produced in large amount. The technology described here :: the expression of antibody recombinant fragments - scFv - against CPV-2, the methodology previously described (Krebber, 1997). After cultivation and purification of virus, High IV A mice were immunized with CPV-2, total RNA s extracted from spleen cells. Light and heavy chains were amplified, and en linked by SOE-PC R; and the product was cloned into a phagemid (pAK ). After the transformation on E. coli XL-1 blue, M13 bacteriophages were - ressed presenting the scFv fragment. Series of 3 rounds of panning was ied out, and after a Phage-ELlSA a group of phage was selected. A PCR - eening was conducted and two clones detected. After new expression a age-ELlSA was performed and demonstrated the specificity of these clones against the CPV-2. Until the moment this is the first description of the use of the :J age display, producing antibody fragments against CPV-2. - / Orientador: João Pessoa Araújo Junior / Coorientador: Paulo Eduardo Martins Ribolla / Banca: Ramon Kaneno / Banca: Alice A. F. Alfieri / Banca: Hélio José Montassier / Banca: Alexandre S. Borges / Doutor